Curso: Processos Industriais Docente: Discente:

Mdulo: I Turno:

Carga Horria: Turma:

Sumrio
1. Qumica Instrumental: introduo e conceitos 2. A metodologia. 3. Reviso de eletroqumica 4. Condutometria 5. Titulao Condutomtrica 6. Polarometria 7. Potenciometria 8. Titulao Potenciomtrica 9. Cromatografia 10. Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massas 11. Cromatografia Lquida Acoplada a Espectrometria de Massas 12. Colorimetria 13. Fotometria de chama 14. Espectrometria de Absoro Atmica 15. Espectrometria de Emisso Atmica 16. Espectrometria de Absoro Molecular no UV-Visvel 17. Anlise por injeo em fluxo 18. Amperometria 19. Turbidimetria 20. Referncias consultadas 4 5 6 8 10 11 13 25 28 38 40 44 48 53 56 60 64 66 68 69

1. Qumica Instrumental
O estudo dos contedos apresentados neste mdulo visa oferecer o conhecimento adequado sobre as principais tcnicas de anlise instrumental. Algumas tcnicas abaixo apresentadas esto organizadas por ordem de importncia, ou seja, por prioridade com relao s necessidades imediatas, alm de abranger uma gama maior de possveis meios de soluo de problemas. Cromatografia gasosa (CG) - Tcnica simples e bastante usada para separao e possvel identificao de substncias. Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC) - Tcnica mais precisa que a Cromatografia Gasosa, sendo bastante requisitada com a vantagem de evitar a decomposio das amostras. Espectroscopia de Massa (MS) - Tcnica bastante precisa e muito utilizada para quantificao de amostra. Espectroscopia de Absoro Atmica (AAS) - Tcnica muito usada para quantificao de amostra. Potenciometria - Tcnica importante e muito usada para controle de sistemas (Ex: medida de pH). Espectroscopia de Infravermelho - Tcnica muito usada para identificao de compostos alm de controle de sistemas. Muitos processos industriais proporcionam poluentes, que podem constituir problema sanitrio e/ou ambiental. A anlise quantitativa do ar, da gua e, em alguns casos, de amostras do solo devem ser efetivadas, a fim de determinar o nvel de poluio e tambm estabelecerem os limites seguros de contaminantes/poluentes.

Qumica Analtica
Envolve mtodos voltados para a determinao da composio da matria. Os mtodos qualitativos geram informaes sobre a identidade das espcies atmicas ou moleculares ou mesmo grupos funcionais na amostra. J os mtodos quantitativos proporcionam resultados numricos relacionados quantidade dos componentes na amostra. Os mtodos analticos podem ser classificados em: Clssicos ou Instrumentais.

Mtodos Clssicos
No incio do desenvolvimento da Qumica, a maioria das anlises empregava a separao dos componentes de interesse (os analitos) por tcnicas como precipitao, extrao ou destilao. Para anlises qualitativas, os componentes separados eram ento tratados com reagentes, que em contato com o analito produziam compostos identificados pela sua cor, solubilidade, pontos de fuso e ebulio etc. Assim as espcies qumicas eram identificadas. A quantificao dos analitos pode ser feita atravs de tcnicas simples, mas muito precisas e que esto em pleno uso como a volumetria (titulaes) e a gravimetria (medidas de massa). Esses mtodos clssicos de separao e determinao de analitos ainda so muito utilizados, devido relativa simplicidade de equipamentos necessrios e confiabilidade de resultados obtidos.

Mtodos Instrumentais
No incio do sculo 20, os qumicos passaram a explorar outros fenmenos distintos daqueles observados nos mtodos clssicos para resolver problemas analticos. Com isso, medidas de propriedades fsicas dos analitos tais como a condutividade eltrica, absoro e/ou emisso de luz, entre outras, passaram a ser utilizadas na anlise quantitativa de uma grande variedade de analitos inorgnicos, orgnicos e biolgicos. Com isso, novas tcnicas, a exemplo da cromatografia lquida de alta eficincia, espectroscopia e tcnicas eletroanalticas, passaram a ser utilizadas para a realizao de anlises cada vez mais sofisticadas. 5

Esses novos mtodos de separao e determinao de espcies qumicas passaram a ser conhecidos como mtodos instrumentais de anlise. Seu crescimento foi favorecido pelo avano tecnolgico dos dispositivos eletrnicos e dos computadores. A maioria dos equipamentos analticos modernos possui ou esto conectados a um ou mais dispositivos eletrnicos sofisticados capazes de detectar e registrar dados relativos aos analitos. Esses dispositivos podem ser amplificadores, circuitos integrados, microprocessadores ou mesmo computadores. De fato existem mquinas que apresentam uma imensa complexidade, enquanto outras so mais simples. O cientista deve definir o problema e ento decidir o mtodo mais apropriado para solucion-lo de acordo com suas condies. A Qumica Analtica Instrumental, devido ao nvel de desenvolvimento alcanado conseqente complexidade adquirida, divide-se de acordo com os mtodos de anlise utilizados na identificao e quantificao do analito. Os mtodos Espectromtricos, por exemplo, utilizam conhecimentos relacionados com a interao entre a luz e a matria. Entre eles destacam-se a Espectrometria de Absoro Atmica, Espectrometria de Absoro Molecular, Espectrometria de Emisso Atmica, entre outras tcnicas. Diversas outras caractersticas especficas das espcies qumicas so exploradas na Qumica Analtica. Os mtodos eletroanalticos so capazes de determinar analitos a partir de seus potenciais padro de reduo. Esses mtodos envolvem tcnicas como a Potenciometria, Coulometria e os diversos tipos de Voltametria.

2.

A metodologia

Amostragem (coleta e preservao de amostras); Pr-tratamento; Escolha da tcnica; Anlise dos dados. Na realizao de uma anlise, vrias decises devem ser tomadas. Definio do problema este o primeiro estgio numa anlise. Que informaes analticas so requeridas? Escolha do mtodo - como ser possvel obter essas informaes de forma segura e confivel. Amostragem processo de separao e remoo de uma pequena parte representativa de material da qual ser efetuada a anlise. Alm disso, deve preservar a amostra at a sua chegada ao laboratrio. Preparao da amostra de laboratrio amostras slidas so pulverizadas para assegurar a homogeneidade. Definir amostras replicatas a maioria das anlises so feitas em amostras replicatas, principalmente, em caso de pesquisa. A anlise em replicatas assegura a qualidade dos resultados. Preparao da amostra os mtodos analticos, em geral, so aplicados com o analito em soluo. Eliminao de interferentes as espcies, que podem alterar a medida final do analito, so chamadas de interferentes. Calibrao e medida Clculo dos resultados

Mtodos de referncia
So necessrios para validar os resultados analticos no meio cientfico, por exemplo, os parmetros de qualidade de guas naturais, de abastecimento e residurias so monitorados pelas anlises de: pH, condutividade, turbidez, alcalinidade, slidos, DQO, DBO, Nitrognio, Fsforo, Metais pesados, leos e Graxas e outros.

Os mtodos analticos podem ser classificados de acordo com a natureza da medida. Mtodos gravimtricos a massa do analito determinada a partir de uma pesagem numa balana analtica. Mtodos volumtricos o volume de uma soluo contendo uma espcie qumica, que reagir completamente com o analito. Diante desse consumo da soluo se encontra estequiometricamente a massa ou concentrao do analito. Mtodos eletroanalticos envolvem a medida de propriedades eltricas como potencial, corrente, resistncia e quantidade de eletricidade. Mtodos espectroscpicos so baseados na interao entre a radiao eletromagntica e tomos ou molculas do analito, ou ento, a emisso de tais radiaes pelo analito.

3. Reviso Eletroqumica
Pilhas voltaicas (galvnicas) e eletrolticas: Uma pilha consiste em dois eletrodos e uma ou mais solues no recipiente adequado. Se uma pilha pode fornecer energia para um sistema externo chamado de pilha voltaica. A energia qumica convertida mais ou menos completamente em energia eltrica, mas parte daquela energia pode ser dissipada em forma de calor. Se a energia for suprida da parte externa da pilha para a qual ela flui, a pilha chamada de pilha eletroltica e as leis de Faraday permitem o clculo da transformao de matria que ocorre nos eletrodos. Durante uma operao eletrogravimtrica, constri-se uma pilha galvnica na medida em que os produtos se formam nos eletrodos. Se a corrente for interrompida, os produtores tendero a produzir uma corrente na direo oposta direo em que passou a corrente de eletrlise. TIPOS DE CLULA Em qualquer dos casos: Os eletrodos onde ocorra oxidao sero sempre chamados nodos. Os eletrodos onde ocorra reduo sero sempre chamados ctodos.

Clula eletroltica - a energia eltrica produzida usada para forar uma reao qumica no espontnea.

Outro exemplo de clula eletroltica o sistema Fe+2/Fe+3//Ce+4/Ce+3

Que representa a transferncia de um eltron do tomo de ferro para o tomo de crio em uma clula eletroltica: ou seja, a reao: Fe+2 Fe+3 + elogo seguida por Ce+4 + e- Ce+3 Clula galvnica (voltaica) - a reao qumica ocorre espontaneamente para produzir energia eltrica

Equao de Nernst
Considerando a semi-reao genrica Mn+ + ne- M O potencial do eletrodo dado pela equao E = Eo+ RT ln aMn+ nF onde: R = constante dos gases = 8,3144 J abs./Kmol T = temperatura absoluta (25oC) em graus kelvin = 298,16 K n = nmero de eltrons envolvidos F= constante de Faraday = 96.485,3 J abs./V abs.eq-g ln= 2,303 log (logaritmo neperiano transformado para log da base 10) Substituindo os valores das constantes e temperatura na de E E= Eo+ 8,3144 x 298,16 x 2,303 log aMn+ n x 96.485,3 E= Eo+ 0,0592 x log aMn+ n Equao de Nernst

Potencial de Eletrodo (Eo) - tendncia dos ons de doar ou receber eltrons Um voltmetro pode ser colocado entre dois eletrodos para medir a diferena de potencial A alta diferena de potencial mostra a grande tendncia do Fe (II) e do Ce (IV) de transferir eltrons Meia reao (reduo) Ce4+ + e- Ce3+ E1o = +1,44 Fe3+ + e- Fe2+ E2o= +0,77 O potencial depende da concentrao e o potencial padro de referncia foi calculado levando em considerao que a atividade para todas as espcies igual unidade. Quanto mais positivo o Eo, maior a tendncia da forma oxidada ser reduzida (forte agente oxidante). Quanto mais negativo o Eo, maior a tendncia da forma reduzida ser oxidada (forte agente redutor).

4. Condutometria: Introduo e aplicaes

A condutometria baseia-se na medida da condutncia eltrica das solues inicas. A condutncia, que uma medida da corrente resultante da aplicao de uma dada fora eltrica, diretamente proporcional ao nmero de ons presentes na soluo. A condutometria direta encontra aplicao limitada na anlise quantitativa em virtude do carter no-seletivo da condutncia. Entretanto, a titulao condutomtrica, em que a medida da condutncia serve para detectar o ponto final, tem um amplo campo de aplicao.

4.1 Mecanismo da conduo da corrente atravs das solues inicas

A passagem da corrente atravs de um condutor do tipo metlico consiste na transferncia de eltrons de um ponto com potencial mais alto para outro com potencial mais baixo. O fluxo de eltrons atravs do condutor forado pela aplicao de uma f.e.m. (fora eletromotriz) entre os extremos do condutor; os tomos ou ons do condutor permanecem estacionrios. (A direo em que os eltrons se movimentam oposta convencionalmente considerada como direo da corrente positiva.) Quando se aplica, entretanto, uma f.e.m. entre dois eltrodos imersos em uma soluo inica, a conduo da corrente envolve a migrao de ons atravs da soluo, mas o mecanismo da conduo da corrente difere conforme se trate de corrente direta ou alternada. A conduo da corrente direta atravs de uma soluo inica acha-se associada migrao de ons positivos na direo do ctodo e de ons negativos na direo do nodo e ocorrncia de uma oxidao superfcie do nodo e de uma reduo superfcie do ctodo. A corrente conduzida atravs da soluo pela migrao dos ons e os eltrons livrados na oxidao andica fluem atravs do circuito externo em direo ao ctodo onde provocam a respectiva reduo eletrdica. Diz-se que a conduo da corrente ocorre atravs de um processo faradaico, isto , acompanhada de reaes eletrdicas.

4.2 Condutometria direta

A condutometria direta baseia-se em condutncia especfica. O campo de aplicao da condutometria direta na anlise quantitativa limitado em virtude da carncia de seletividade da condutncia; todos os ons presentes contribuem para a condutncia total de uma soluo. As principais aplicaes da condutometria direta se relacionam com a anlise de misturas binrias formadas por gua e um eletrlito e a determinao da concentrao total de eletrlitos. As medidas de condutncia podem servir para determinar a concentrao de solues contendo um nico eletrlito forte; a anlise requer a prvia construo de curvas de referncia. A condutometria direta encontra aplicao na determinao da salinidade da gua do mar em trabalhos oceanogrficos, A medida da condutncia especfica usada tambm para avaliar a pureza de uma gua destilada ou desmineralizada. Os medidores de impurezas construdos para este fim so calibrados em termos de concentrao equivalente de cloreto de sdio (p.p.m.) e micromhos por cm. As clulas usadas para medir condutncias especficas devem possuir caractersticas apropriadas. A Fig. abaixo representa uma clula condutomtrica do tipo de imerso; na verdade trata-se de um dispositivo contendo apenas os eletrodos em posies fixas, que deve ser mergulhado na soluo contida em um recipiente por exemplo, um copo at uma profundidade suficiente para cobrir as lminas de platina.

A calibrao das clulas condutomtricas feita, comumente, com solues de cloreto de potssio com concentraes conhecidas, cujas condutncias especficas foram determinadas em clulas com geometria perfeitamente definida. Existem valores das condutncias especficas de solues de cloreto de potssio para diferentes temperaturas.

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5. Titulao Condutomtrica Fundamentos

A tcnica da titulao condutomtiica consiste em acompanhar a variao da condutncia no curso da titulao. O ponto final assinalado por uma descontinuidade na curva de condutncia-volume. Seja a titulao condutomtrica de um eletrlito forte AB com uma soluo de um outro eletrlito forte CD, em que o caton A+se combina com o anon D- formando uma espcie pouco ionizada ou fracamente solvel AD: A+ + B+ C+ + D AD + B- + C+ soluo em soluo do estudo reagente At o ponto de equivalncia, a titulao acompanhada de uma gradual substituio dos ons A+ da soluo original por ons C+ da soluo titulante adicionada. A substituio ocorre em quantidades equivalentes e se completa no ponto de equivalncia. Os ons B- permanecem inalterados durante a titulao. Suponhamos, para facilitar o raciocnio, que a titulao se processa sem variao substancial do volume. A maneira como varia a condutncia, at o ponto de equivalncia, depende das condutncias equivalentes relativas das espcies inicas A+ (removida pela formao de AD) e C+ (introduzida com a soluo titulante). A titulao condutomtrica requer uma clula apropriada para a conduo da titulao e a medida da condutncia. Como a titulao no requer medidas absolutas da condutncia, a clula no precisa ser calibrada, bastando que os eltrodos sejam mantidos em posies fixas durante a titulao. A Fig. abaixo inclui uma clula tpica para titulaes condutomtricas. Trata-se simplesmente de um bquer contendo a soluo a titular e dois eltrodos de platina imersos na soluo; o bquer colocado sobre um agitador magntico. Os eltrodos so duas lminas de platina com reas de aproximadamente 1 cm2. A distncia entre os eltrodos fixada de acordo com a condutncia da soluo; menor para as solues de baixa condutncia e maior para as de condutncia elevada.

As lminas metlicas so dispostas em posio vertical para evitar a deposio sobre elas de precipitados que, eventualmente, se formem durante a titulao. Na titulao condutomtrica, a soluo padro adicionada de uma microbureta em sucessivos incrementos. Aps a adio de cada incremento, medida a condutncia da soluo. A adio da soluo padro ocasiona um certo aumento de volume e, portanto, um certo efeito de diluio que afeta a medida da condutncia. O efeito de diluio pode ser grandemente diminudo com o uso de uma soluo padro 10 a 20 vezes, pelo menos, mais concentrada do que a soluo em estudo com respeito a espcie interessada. Nas titulaes condutomtricas, so obtidos resultados satisfatrios sem colocar a clula em um banho termosttico desde que no se verifiquem variaes apreciveis de temperatura. Nos trabalhos mais acurados, pode-se fazer uso de um termostato para maior segurana. 11

Os dados de condutncia obtidos em uma titulao so representados graficamente em funo do volume da soluo padro para efeito de localizao do ponto final. A curva de titulao resultante consiste de dois ramos distintos: o primeiro, ramo de reao, d a variao da condutncia at o ponto de equivalncia; e o segundo, ramo do reagente, d a variao da condutncia aps o ponto de equivalncia. A interseo dos dois ramos localiza o ponto final. A localizao grfica do ponto final requer um nmero de medidas suficiente para definir a curva de titulao. Quando a reao envolve eletrlitos fortes, os ramos de reao e do reagente so duas linhas retas. Ento, basta achar trs ou quatro pontos antes e depois do ponto de equivalncia. Quando a reao envolve eletrlitos fracos, o ramo de reao curvilneo e, ento, torna-se necessrio um nmero maior de medidas para defini-lo. As principais aplicaes da titulao condutomtrica se referem s reaes de neutralizao, de precipitao e de formao de complexos.

6. Polarometria: Introduo e aplicaes

A polarografia um mtodo analtico que se baseia na interpretao das curvas de corrente-voltagem obtidas quando se aplica uma f .e.m. regularmente crescente entre um eltrodo com potencial constante e um microeltrodo polarizvel imersos em uma soluo contendo uma espcie eletroativa. Em 1922, Heyrovsky e Kucera verificaram que tais curvas de corrente-voltagem podem fornecer informaes a respeito da identidade e da concentrao da espcie eletroativa. Logo depois, Heyrovsky e Shikata construram o primeiro aparelho para o registro automtico das curvas de corrente-voltagem. Estavam, assim, criadas as premissas para o rpido desenvolvimento de um novo mtodo analtico. A Fig. abaixo representa um arranjo bsico para a obteno de curvas de corrente-voltagem. O arranjo consiste de uma clula eletroltica A, com a soluo em estudo, um eltrodo gotejante de mercrio B e um depsito de mercrio C, que atua como segundo eltrodo. O eltrodo gotejante de mercrio formado por um capilar ligado a um reservatrio de mercrio D; o capilar dimensionado de modo a livrar uma corrente contnua de gotculas idnticas, com dimetro mximo de O 5 a l mm, a uma razo de uma gota a cada 2 a 6 segundos. A clula, eletroltica ligada em srie com um galvanmetro calibrado G, uma bateria E e um divisor de voltagem F. O divisor de voltagem permite aplicar clula uma f.e.m. desde zero at o mximo permitido pela f.e.m. da bateria. Na maioria das aplicaes da anlise polarogrfica, o eltrodo gotejante funciona como ctodo e o segundo eltrodo como nodo. As curvas de corrente-voltagem so obtidas mediante elevao gradual da f.e.m. aplicada clula e leitura da corrente no galvanmetro. Ordinariamente, a corrente muito fraca, em geral no excedendo 50 A.

Fig - Arranjo bsico para a obteno de curvas de corrente-voltagem 12

Na clula polarogrfica acima referida, o eltrodo auxiliar tem a forma de um depsito de mercrio com uma grande superfcie; como a corrente que flui atravs da clula muito fraca, pode considerar-se como no ocorrendo sobre o eltrodo auxiliar nenhuma polarizao. Por conseguinte, o potencial do eltrodo auxiliar permanece constante, independentemente da f.e.m. aplicada clula. Por sua vez, o eltrodo gotejante de mercrio, devido s suas pequenas dimenses, um microeltrodo com condies favorveis para uma polarizao extrema. Portanto, o eltrodo gotejante de mercrio funciona como eltrodo indicador da corrente. O eltrodo gotejante de mercrio permite obter, sob condies apropriadas, curvas de corrente-voltagem perfeitamente reprodutveis. As referidas curvas so denominadas polarogramas. A Fig. abaixo representa os polarogramas de uma soluo IO-3 M em Cd2+ e 1 M em KCI (curva I) e de uma soluo 1 M cm KCI, ambas previamente livradas do oxignio dissolvido; o oxignio, por ser facilmente redutvel no eltrodo gotejante de mercrio, deve ser removido para no interferir na curva de corrente-voltagem. O desenvolvimento da curva I mostra que apenas uma corrente muito fraca, chamada corrente residual, passa atravs da clula antes de ser atingido o potencial de decomposio da soluo. Uma vez sobrepassado o potencial de decomposio, a f.e.m. aplicada provoca a eletrlise contnua da soluo, com a descarga de on zinco no eltrodo gotejante de mercrio (ctodo) e formao de amlgama de zinco extremamente diludo: Cd2+ + 2e- + Hg --> Cd (Hg) Simultaneamente, ocorre a oxidao de mercrio com formao de cloreto de mercrio I no eletrodo estacionrio (nodo):

Fig- Polarograma de uma soluo 1O-3 M em Cd2+ e 1 M em KCI (curva I) e de uma soluo 1 M em KCI(curva II)

Aplicaes da Anlise Polarogrfica

A anlise polarogrfica apresenta um amplo campo de aplicaes. A anlise polarogrfica se presta para trabalhar com solues muito diludas e pequenos volumes de soluo. comumente usada para determinar concentraes na faixa de 10-4 a IO-2 M; s vezes, o limite inferior pode baixar at 10-5 M ou mesmo 10-6 M. Ordinariamente, so usados volumes de 5 a 20 mL; porm, relativamente simples reduzir o volume da soluo a apenas 1 a 2 mL. Assim, a anlise polarogrfica muito apropriada para operar na faixa do miligrama ao micrograma. Os erros relativos na anlise polarogrfica se situam em torno de 2%. A escolha de eletrlitos suportes apropriados e a complexao de interferentes potenciais tornam desnecessrias, freqentemente, quaisquer separaes preliminares na anlise polarogrfica. Uma particularidade interessante na anlise polarogrfica que as solues permanecem praticamente inalteradas. 13

Um grande nmero de substncias capaz de sofrer reduo ou oxidao no eltrodo gotejante de mercrio formando ondas polarogrficas bem definidas. Conforme o caso, as ondas so catdicas ou andicas.

7. Potenciometria: Introduo e aplicaes

Quando um metal imerso numa soluo que contm os seus prprios ons estabelece-se um potencial de eletrodo. E pode ser medido combinando-se este eletrodo com um eletrodo de referncia (comumente um eletrodo de calomelano saturado) e medindo a fora eletromotriz da pilha resultante. Sabendo o potencial do eletrodo de referncia, podemos deduzir o valor do potencial de eletrodo, e desde que se conhea o valor do potencial de eletrodo padro do metal podemos calcular a atividade do on metlico na soluo. Para uma soluo diluda, a atividade inica medida ser virtualmente a mesma que a concentrao inica, e, para solues mais concentradas, dado o valor do coeficiente de atividade, possvel converter a atividade inica medida na concentrao correspondente. Este processo de se utilizar uma nica medida do potencial de eletrodo para determinar a concentrao de uma espcie inica em soluo designa-se como potenciometria direta. O eletrodo cujo potencial dependente da concentrao do on a ser determinado chamado de eletrodo indicador, e quando, o on a ser determinado diretamente envolvido na reao de eletrodo, diz-se que estamos tratando de um eletrodo de primeira espcie. Tambm possvel em determinados casos medir-se por potenciometria direta a concentrao de um on que no esteja diretamente envolvido na reao de eletrodo. Isto envolve o uso de um eletrodo de segunda espcie. Para evitar os problemas a respeito da potenciometria direta, a ateno tem sido voltada para a titulao potenciomtrica como mtodo analtico. Conforme o nome indica, trata-se de um processo de titulao, no qual as medidas potenciomtricas so conduzidas, a fim de se determinar o ponto final. Neste processo so envolvidas mudanas de potencial do eletrodo, em vez de valores exatos do potencial de eletrodo com uma dada soluo. O objetivo de uma medio potenciomtrica obter informaes sobre a composio de uma soluo mediante ao potencial que aparece entre dois eletrodos. A medio do potencial se determina mediante condies reversveis, de forma termodinmica, e isto implica que deve deixar o tempo suficiente para alcanar o equilbrio, extraindo a mnima quantidade de intensidade, para no influenciar sobre o equilbrio que se estabelece entre a membrana e a soluo da amostra. Para obter medies analticas vlidas em potenciometria, um dos eletrodos dever ser de potencial constante e no pode haver mudanas entre um e outro experimento. O eletrodo que satisfaz esta condio o eletrodo de referncia. Em razo da estabilidade do eletrodo de referncia, qualquer mudana no potencial do sistema ser ocasionada pela contribuio do outro eletrodo, chamado eletrodo indicador ou de trabalho. O potencial registrado na realidade a soma de todos os potenciais individuais, com seu sinal correspondente, produzido pelos eletrodos indicador e referncia.

Eletrodo Indicador
Eletrodo sensvel espcie a ser determinada, isto , o seu potencial ser funo da concentrao dessa espcie. Para que um eletrodo seja empregado como eletrodo indicador deve apresentar as seguintes caractersticas: Grande sensibilidade espcie a ser determinada; Alto grau de reprodutibilidade; Resposta rpida variao de concentrao da espcie em determinao.

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Tipos de Eletrodos Indicadores

Metlico Primeira Classe - consiste de um metal imerso em uma soluo contendo ons da mesma espcie do metal. Utilizado para a medida da atividade do on metlico em soluo. Praticamente, apenas prata e mercrio formam eletrodos de primeira classe. Segunda Classe - consiste de um metal recoberto por um sal pouco solvel ou um complexo deste metal imerso em uma soluo contendo on que forma o sal ou o complexo. Utilizado para a medida da atividade do nion ou do ligante. Terceira Classe Redox - metais tais como platina, ouro e paldio, podem ser utilizados como eletrodos para sistemas xido/reduo. Utilizado para a medida do potencial redox. Membrana - Eletrodos de membranas apresentam alta seletividade sendo muitas vezes denominados Eletrodos on-Seletivo. Este tipo de eletrodo gera um potencial do tipo potencial de juno na interface eletrodo-soluo. Propriedades da Membrana: baixa solubilidade, condutividade eltrica e reaes seletivas com o Analito. Cristalina - Monocristalina LaF3 (F-) - Policristalina Ag2S (Ag+ e S2+) No Cristalina - Vidro - Lquida - Lquido imobilizado SiO44+ (H+) Lquido Trocador de on (Ca2+ ) Cloreto de polivinila (NO3-)

Eletrodo de Referncia
Eletrodo com potencial constante, isto , o seu potencial funo de uma espcie cuja concentrao permanece inalterada durante toda a determinao. Para que um eletrodo seja empregado como eletrodo de referncia deve apresentar as seguintes caractersticas: Invariabilidade do potencial durante o processo; Deve ser de fcil preparao; Rpido ajustamento a um determinado e exato potencial; Interesse trmico desprezvel, isto , o potencial do eletrodo deve responder prontamente a uma variao de temperatura, mas assim que a temperatura inicial restabelecida, o seu potencial deve voltar ao valor inicial; Baixa polarizabilidade, isto , mesmo havendo passagem de pequenas correntes pelo eletrodo, no deve haver mudana considervel no seu potencial. A necessidade de contar com o eletrodo de referncia, alm do eletrodo indicador, deve-se impossibilidade de medir diretamente o potencial do eletrodo indicador. O eletrodo indicador, imerso na soluo em estudo, associado, atravs de uma ponte salina, ao eletrodo de referncia, para que ento, se tenha condies de medir a fora eletromotriz (f.e.m.) da clula. A f.e.m. da clula a diferena algbrica dos potenciais dos dois eletrodos, o de referncia e o indicador, tomada em qualquer direo e dada em valor absoluto. Ecel = Eref - Eind ou Ecel = Eind - Eref 15

A rigor, preciso incluir ainda, na f.e.m. da clula, o potencial de juno lquida. Ecel = Eref - Eind + Ej ou Ecel = Eind - Eref + Ej O potencial de juno se manifesta entre a soluo do sistema do eletrodo de referncia e a soluo em estudo. Comumente, o potencial de juno minimizado mediante o uso de uma ponte salina. Para que possam ser obtidos resultados interpretveis, essencial, em muitos casos, que Eref e Ej sejam conhecidos ou permaneam constantes durante as medidas. Nestas condies, Eref e Ej podem ser incorporados em uma nica constante. Ecel = constante - Eind Ecel = Eind - constante O potencial Eind uma funo da atividade do on ativo, isto , do on para o qual o eletrodo indicador sensvel. Conhecida esta funo, a medida da f.e.m. da clula, Ecel, permite achar a concentrao da espcie em estudo. O Eletrodo de referncia em medidas potenciomtricas sempre tratado como um nodo. O Eletrodo de Referncia Ideal apresenta reao reversvel, obedece a equao de Nernst, tem potencial constante com o tempo, exibe pouca histerese variao de temperatura e retorna o potencial aps ser sujeito a pequenos valores de corrente. O eletrodo indicador de uma clula aquele que depende da atividade (e, portanto, da concentrao) de uma dada espcie inica cuja concentrao bem determinada. Na potenciometria direta ou na titulao potenciomtrica de um on metlico, um eletrodo indicador simples consiste usualmente num fio ou basto de um metal apropriado, cuidadosamente limpo; de importncia vital que a superfcie do metal esteja imersa numa soluo livre de pelculas de xido ou de quaisquer produtos da corroso. Em alguns casos, pode-se obter um eletrodo mais satisfatrio usando um fio de platina recoberto por uma pelcula fina do metal apropriado, por deposio eletroltica. Quando os ons hidrognio so envolvidos, pode-se, obviamente, utilizar como eletrodo indicador um eletrodo de hidrognio, mas a sua funo pode igualmente ser desempenhada por outros eletrodos, o melhor dos quais o eletrodo de vidro. Este um exemplo de um eletrodo de membrana no qual o potencial desenvolvido entre a superfcie de uma membrana de vidro e uma soluo uma funo linear do pH da soluo, de modo que pode ser utilizado para a medida da concentrao de on hidrognio da soluo. Como a membrana de vidro contm ons de metais alcalinos, tambm possvel desenvolverem-se eletrodos de vidro que podem ser utilizados para a determinao da concentrao destes ons na soluo, e, deste desenvolvimento (que baseado num mecanismo de troca inica), apareceu uma srie de eletrodos de membranas baseados em materiais de troca inica tanto de estado slido como de membrana lquida; estes eletrodos constituem a srie importante de eletrodos on seletivos, que, presentemente, se conhecem para diversos ons. O eletrodo indicador empregado numa titulao potenciomtrica depende, claro, do tipo de reao que est sendo investigada. Assim, numa titulao cido-base, o eletrodo indicador poder ser um eletrodo de hidrognio ou algum outro on que responda a ons hidrognio; para uma titulao de precipitao (haleto com nitrato de prata, ou prata com cloreto) usar-se- um eletrodo de prata, e para uma titulao redox um simples fio de platina como eletrodo redox. O eletrodo de hidrognio. Adicionalmente sua funo como um eletrodo padro, o eletrodo de hidrognio pode ser utilizado para a medida da concentrao de on hidrognio ou de pH de solues e igualmente em titulaes potenciomtricas cido-base. Deve ser notado que o eletrodo de hidrognio no pde ser usado em solues que contenham agentes oxidantes, e.g., ons permanganato, nitrato, crio (IV) e ferro (III), ou outras substncias capazes de reduo, como compostos orgnicos no-saturados, bem como na presena de sulfetos, compostos de arsnio etc. (venenos catalticos) que destroem a propriedade cataltica do negro-de-platina. Tambm no satisfatrio na presena de sais de metais nobres, como o cobre, a prata e o ouro, bem como em solues que contenham sais de chumbo, cdmio e tlio. Existem muitos outros eletrodos que so mais convenientes para o uso no intervalo em que so aplicveis. 16

O eletrodo de antimnio. O chamado eletrodo de antimnio na realidade, um eletrodo de antimnio-trixido de antimnio. O eletrodo de antimnio no pode ser utilizado: (a) na presena de agentes oxidantes fortes ou de reagentes complexantes (como tartaratos e cidos hidroxlicos orgnicos); (b) em solues de pH inferior a 3, nas quais o xido se torna demasiadamente solvel; (c) na presena de metais mais nobres do que o antimnio. O eletrodo no facilmente envenenado, de uso simples (nenhum reagente , usualmente, requerido), e forte; tem sido, ento, aplicado para o registro continuo e controle de pH nas condies em que utilizvel. O eletrodo de vidro. O eletrodo de vidro o mais amplamente utilizado dos eletrodos que respondem ao on hidrognio; o seu uso o depende da seguinte condio: quando uma membrana de vidro imersa numa soluo desenvolve-se um potencial que uma funo linear da concentrao de hidrognio da soluo. A natureza do vidro usado para a construo do eletrodo de vidro muito importante. Vidros duros do tipo Pyrex no so adequados, e durante muitos anos foi universalmente usado para a manufatura dos eletrodos de vidro um vidro de cal sodada. Estes eletrodos so muito satisfatrios num intervalo de pH de 1-9, mas em solues de alcalinidade mais elevada esto sujeito ao chamado erro alcalino" e tendem a dar valores mais baixos do que os reais de pH. O de vidro pode ser utilizado na presena de oxidantes e redutores fortes, em meios viscosos e na presena de protenas e substncias similares, que interferem fortemente com outros eletrodos. Tambm pode ser adaptado para medidas com pequenos volumes de solues. Pode dar resultados errneos quando usado com solues mal tamponadas que estejam quase neutras. O eletrodo de vidro deve ser muito bem lavado com gua destilada aps cada medida e, antes de se fazer uma outra medida, lavado com varias pores da prxima soluo a ser analisada. No se deve deixar o eletrodo de vidro ficar seco, exceto durante longos perodos de armazenagem ele retornara a sua condio de responder atividade inica quando for imerso, novamente, em gua destilada durante pelo menos 12 horas, antes da utilizao.

Eletrodos on-seletivos (ISE)

Um eletrodo on-seletivo (ISE) produz um potencial que relacionado concentrao de um analito As medidas com um ISE so uma forma de potenciometria. O ISE mais comum o eletrodo de pH que contm uma fina membrana de vidro que responde concentrao de H+ em uma soluo. ISEs para outros ons tem uma membrana apropriada que sensvel ao on de interesse, mas no sensvel a ons interferentes. Por exemplo, um cristal de LaF3 pode funcionar como uma membrana de eletrodo para ons de fluoreto. Muitos eletrodos de ISEs comercial usam uma membrana de polmero para embutir espcies de on-sensvel que so sensveis a Ca2+, NO3-, NH4+, ou outros ons comuns. Eletrodos de vidro que respondem a ons de metais alcalinos. Um eletrodo de vidro usado para medidas de pH, se for construdo com vidro de cal sodada, ser sujeito a um ''erro alcalino'' que provm do equilbrio de troca inica entre os ons hidrognio em soluo e os ons sdio da camada de vidro hidratado. Se a composio do vidro for alterada, assim tambm o ser a posio do equilbrio; se o sdio do vidro for substitudo por ltio, virtualmente desaparecer o "erro alcalino". Se a preferncia pela troca de on hidrognio mostrada pelos vidros de cal sodada puder ser diminuda, outros ctions sero envolvidos no processo da troca inica, e poderemos ter uma possibilidade de um eletrodo que responda a ons metlicos como o sdio e o potssio. O efeito requerido pode ser conseguido pela introduo de alumnio. Outros eletrodos de membrana slida. A membrana de vidro dos eletrodos pode ser substituda por outros materiais, como um cristal nico ou um material slido de troca inica; pode ser vantajoso incorporar-se o material da troca inica num suporte inerte como a cera de parafina ou um polmero adequado. Eletrodos de membrana lquida. Um outro tipo de eletrodo on seletivo baseado no uso de materiais de troca inica lquida; usualmente consistem num material de troca inica dissolvido num solvente orgnico no miscvel com a gua em grande proporo; evita-se, assim, a mistura indevida de material do eletrodo com a soluo a ser analisada. 17

So utilizados dois tipos de eletrodos: (A) aqueles nos quais o trocador lquido contm o on ao qual o eletrodo responde, e (B) aqueles em que o trocador liquido eletricamente neutro e no contm quaisquer ons. Eletrodos de membrana lquida, a soluo do material que faz a troca inica colocada num tubo fechado por um diafragma poroso na extremidade inferior, e o eletrodo interno de prata-cloreto de prata numa soluo o de cloreto de potssio (ou sdio) instalado num tubo estreito que fica montado dentro do outro mais largo. A diferena de potencial de uma membrana on-sensvel : E = K + (2.303RT/nF)log (a) K uma constante que responde a outros potenciais R a constante geral dos gases T temperatura n a carga do on (incluindo o sinal) F a constante de Faraday a a atividade do on analito. Um grfico da medida do potencial contra o log da atividade (a) dar uma linha direta. ISEs so suscetveis a vrias interferncias. Amostras e padres so diludos (1:1) com um ajustador de fora inico e tampo (TISAB). O TISAB consiste numa soluo de NaCl 1M para ajustar a fora inica, um tampo cido actico/acetato para controlar o pH, e um agente complexante do metal.

Instrumentao
Os ISEs consistem de uma membrana on-seletivo, um eletrodo de referncia interno, um eletrodo de referncia externo, e um voltmetro. Um potencimetro tpico mostrado na figura abaixo.

Desenho esquemtico de um medidor de ISE ISEs comerciais combinam freqentemente os dois eletrodos em uma unidade que anexada ento a um pHmetro.

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Foto de um ISE comercial de fluoreto

Eletrodo padro de hidrognio

O eletrodo de hidrognio. Todos os potenciais de eletrodo so referidos ao eletrodo de hidrognio padro e este deve, portanto, ser considerado como o eletrodo de referncia primrio. O eletrodo de platina envolvido por um tubo externo, no qual o hidrognio penetra por uma entrada lateral, escapando no fundo atravs da soluo-teste. Existem diversos pequenos furos prximos ao fundo do sino; quando a velocidade de passagem do gs est adequadamente ajustada, o hidrognio escapa apenas por estas pequenas aberturas. Em virtude da peridica formao de bolhas, o nvel no interior do tubo flutua, sendo a parte da folha metlica alternativamente exposta soluo e ao hidrognio. A parte de baixo da folha metlica fica permanentemente imersa na soluo, para evitar a interrupo da corrente eltrica.

Embora o eletrodo de hidrognio seja o eletrodo de referncia primrio, na prtica so preferidos, para a maioria das finalidades, eletrodos de referncia subsidirios que podem ficar montados permanentemente, ficando, assim, disponveis para o uso imediato; estes evitam, desta forma, cuidados na montagem (incluindo a purificao do gs) que requerida para se estabelecer um eletrodo de hidrognio satisfatrio. Quando usado como eletrodo padro o eletrodo de hidrognio opera numa soluo que contm ons hidrognio numa atividade constante (unitria) baseada, usualmente, no cido clordrico, e o gs deve estar a uma atmosfera de presso. Este no prtico em trabalhos de rotina, pois requer uma corrente de hidrognio puro a uma presso determinada e, torna-se inativo por efeito de envenenamento da camada cataltica com traos de certas substncias. Alm disso, o eletrodo no pode ser usado na presena de agentes oxidantes ou redutores.

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Eletrodo de Calomelano (Mercrio/Cloreto Mercuroso)

o eletrodo de referncia mais usado em virtude da facilidade de preparao e da constncia do seu potencial. constitudo por um fio de platina em contato com calomelano (cloreto de mercrio I) e uma soluo de cloreto de potssio de concentrao definida; esta concentrao pode ser 0,1 mol/L, 1 mol/L ou a da soluo saturada. Os eletrodos so conhecidos como o eletrodo de calomelano decimolar, o eletrodo de calomelano molar e o eletrodo de calomelano saturado. O eletrodo de calomelano saturado o mais usado, em grande parte pelo efeito supressor dos potenciais de juno lquida proporcionado pela soluo de cloreto de potssio saturada. No entanto, este eletrodo tem a desvantagem de o seu potencial variar rapidamente com a alterao da temperatura, em virtude das modificaes da solubilidade do cloreto de potssio e de ser lenta a restaurao de um potencial estvel diante das perturbaes do equilbrio entre o calomelano e o cloreto de potssio. Os potenciais dos eletrodos decimolar e molar so menos afetados pela modificao de temperatura, e estes dois eletrodos so os preferidos nos casos em que se precisa de valores exatos dos potenciais eletrdicos. A reao no eletrodo : Hg2Cl2(s) + 2e2 Hg(lq) + 2 ClE o potencial do eletrodo governado pela concentrao do on cloreto na soluo. Existem eletrodos de calomelano compactos, prontos para o uso, que tm ampla aplicao, especialmente se acoplados a medidores de pH e a medidores seletivos de ons.

Eletrodo de Prata/Cloreto de Prata

O eletrodo de prata-cloreto de prata. Este , talvez, o eletrodo de referncia mais importante em seguida ao eletrodo de calomelano. constitudo por um fio de prata, ou por um fio de platina prateada, com um revestimento eletroltico de uma delgada camada de cloreto de prata; o fio mergulhado em uma soluo de cloreto de potssio, com concentrao conhecida, saturada por cloreto de prata.

Eletrodo de Dupla Juno

Utilizado nos casos onde on Ag (eletrodo Ag/AgCl), on Hg (eletrodo de calomelano) e ons cloreto possam reagir ou complexar com o analito.

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Eletrodos mais usados Eletrodos de pH

O eletrodo de pH pertence ao grupo de eletrodos de membrana slida, sendo o melhor dos eletrodos seletivos e sensvel aos ons hidrognio. A composio dos eletrodos de vidro usados para medir o pH corresponde a silicatos com modificadores inicos. A natureza do vidro usado para a construo dos eletrodos um fator muito importante. Existem dois grandes tipos: Membrana T: Na2O - CaO - SiO2 (22:6: 72)% Membrana U: Li2O - Cs2O2 - BaO - La2O3 - SiO2 (28:2: 4:3: 63)% Os modificadores inicos retardam a hidrlise do silicato. Quando se afunda o eletrodo em gua, na capa superficial existe um processo de intercmbio inico entre o H+ da dissoluo externa e o Na+ ou Li+ da membrana. A atividade da gua na dissoluo tem um papel muito importante na resposta do pH na membrana de vidro. Por isso, todos os eletrodos de vidro devem ser acondicionados durante um tempo na gua, tampo diludo ou KCl, formando-se um gel sobre a membrana. Com esta capa sobre a membrana diminuem os erros quando medimos o pH em dissolues de fora inica muito alta, ou quando esto presentes dissolventes no aquosos. O eletrodo de pH tem um eletrodo de referncia interna (Ag/AgCl) submerso num tampo com sais de Cl (pH=7), com uma membrana de vidro.

Nos eletrodos de vidro sensveis H+, a estabilidade qumica e a resistncia eltrica esto sempre ligadas. A resistncia eltrica dos eletrodos de pH, em funo da composio da membrana, tamanho e forma, pode variar entre 5 e 500 MW. Assim, os eletrodos com boa estabilidade qumica em elevadas temperaturas, possuem uma resistncia eltrica excessiva para baixas temperaturas. Contrariamente, eletrodos com boa resposta a baixas temperaturas degeneram rapidamente a altas temperaturas. Devido a esta contraposio, os eletrodos so desenhados de forma especfica para certos tipos de temperatura e pH.

Eletrodo de Vidro
Sem duvida o mais importante eletrodo sensvel ao pH o eletrodo de vidro. Esse dispositivo se baseia no fato de membranas delgadas de certas variedades de vidro serem suscetveis aos ons-hidrognio. Se duas solues estiverem separadas por essa membrana, aparecer uma diferena de potencial entre suas duas superfcies, que , no caso, proporcional ao logaritmo da razo das atividades do on-hidrognio das duas solues: Eg = ln = (0,0591) (pH2 pH1) (a 25C) 21

Uma forma tpica de eletrodo de vidro a forma de um tubo de ensaio terminando em bulbo de vidro de paredes delgadas sensvel ao pH. Internamente contem uma soluo tampo de cloreto de um eletrodo de referncia, geralmente prata-cloreto de prata ou calomelano. O tubo est permanentemente fechado no alto. No uso, mergulha-se esse conjunto de eletrodos na soluo da amostra junto com a ponte salina do eletrodo de calomelano ou de outro eletrodo de referencia. O eletrodo de vidro em relao a qualquer eletrodo de referncia conveniente fornece um potencial que relaciona ao pH por uma expresso do tipo pH = (Ecela EG) / 0,0591 (a 25C) O termo Eg inclui o potencial dos eletrodos de referencia, interno e externo e, em adio, pequenos potenciais espuricos chamados potenciais de assimetria, provavelmente resultantes de diferenas de tenso do vidro. Eg um constante para uma determinada associao de eletrodos, mas no podem ser calculados teoricamente. Por essa razo, habito padronizar a associao de eletrodos medindo-se o potencial produzido quando se mergulham os eletrodos em um tampo-padro. Considerando agora a situao que se origina quando um eletrodo de vidro, com um ECS interno em ma soluo de pH 7 junto com um ECS externo. Resulta um sistema essencialmente simtrico:

Dessa simetria evidente que teoricamente no se origina voltagem sob essas condies. Segue ento da equao anterior Eg = Ecela 0,0591 pH que Eg = 0 (0,0591) (7) = -0,4137 e o pH da soluo-teste dado por

pH = = +7 pode-se repetir esse tratamento para um eletrodo de vidro com qualquer valor de pH interno, digamos 5, caso em que a expresso resultante ser pH = +5

Assim, qualquer combinao de eletrodos de vidros e de eletrodos de referncia se caracteriza p um pH de potencial zero definido. Deve-se notar que um coeficiente de temperatura de um par de eletrodos de vidro referencia inclui no apenas o coeficiente Nernst, mas tambm a variao da solubilidade com a temperatura dos sais pouco solveis envolvidos. O coeficiente total seguira a inclinao de Nernst apenas se os eletrodos de referncia, interno e externo, forem idnticos. Isto , ambos ECS ou ambos os eletrodos de prata-cloreto de prata saturados com KCl. O eletrodo de vidro tornou-se extremamente importante na moderna prtica analtica e industrial e por isso substitui praticamente outros sistemas sensveis ao pH. Todavia apresenta limitaes definidas. Pode dar leituras que so altas demais por uma unidade de pH, quando a soluo apresentar pH 10 ou maior na presena de altas concentraes de ons-sdio. So disponveis eletrodos especiais que apresentam baixos erros em sdio. A superfcie do vidro pode absorver seletivamente alguns ons especficos, o que pode causar erros de medida. Geralmente, uma cuidadosa lavagem evita dificuldades. O eletrodo de vidro apresenta srios erros em solues de fluoreto mais acidas que pH 6. Vrios fabricantes fornecem combinaes de eletrodos de vidro e eletrodos de referencia. Em vrios projetos, o eletrodo de referencia mantm contato com a soluo da ponte salina (KCl ou outra) que esta em um recipiente anelar ao redor do eletrodo de vidro. 22

A soluo salina age como uma blindagem eletrosttica para o eletrodo de vidro de alta resistncia. O eletrodo combinado tornou-se muito comum devido sua grande convenincia. O custo menor que o eletrodo de vidro e referncia separados, mas maior que o de um eletrodo de vidro sozinho.

Dissolues Tampo
As dissolues tampo so dissolues aquosas de misturas de cidos fortes e bases fracas ou de bases fortes com cidos fracos, dando valores fixos de pH. As dissolues tampo podem ser utilizadas quando o pH est entre 1 e 12. pH a 25 C 4,00 7,00 9,00 10,00 10,00 Composio para volume final de 100 mL 50 mL KH Ftalato (0,1 M) + 0,1 mL HCl (0,1 M) 50 mL KH2PO4 (0,1 M) + 29,1 mL NaOH (0,1 M) 50 mL Brax (0,025 M) + 4,6 mL HCl (0,1 M) 50 mL Brax (0,025 M) + 18,3 mL NaOH (0,1 M) 50 mL NaHCO3 (0,05 M) + 10,7 mL NaOH (0,1 M)

Calibrao
Antes de realizar medies, se utilizam padres amortizadores, tampes, para validar a escala pH do instrumento: Ajustar o potencial de assimetria, colocando o eletrodo em tampo pH = 7. Coloca-se o eletrodo em um tampo diferente de pH 7, segundo a regio onde se fazem as medies de pH. Nos pH-metros controlados por microprocessador no interessa a ordem em que se introduzem os tampes. Nos pH-metros, com comandos de ajuste, sim. Para medidas precisas de pH, a temperatura da amostra ser a temperatura na qual estaro tambm os dois tampes de calibrao. Se a amostra est a diferente temperatura que os tampes ou h mudanas importantes de temperatura entre as amostras, devemos considerar e para isso resulta muito prtico utilizar uma sonda Pt100 de compensao automtica de temperatura. Nos novos pH-metros podemos calibrar os dois tampes na mesma temperatura, e as amostras a outra distinta, j que diferencia a temperatura de calibrao e a temperatura de medida. possvel ainda que no se disponha da sonda de temperatura Pt100.

Cuidados com eletrodos de pH

Armazenamento Os eletrodos de pH sempre devem ser guardados num meio aquoso, nunca em seco. Eletrodos de pH combinados: no eletrlito de referncia. Eletrodos de pH separado: em gua destilada.

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Limpeza do Diafragma Contaminantes Orgnicos: Coloca-se o eletrodo em mistura crmica a 80C durante 5 minutos e depois se lava com gua destilada. Depois de feitas medies em dissolues que contm enxofre, o diafragma costuma ter uma cor preta, devida ao precipitado de Ag2S. Para limp-lo, colocamos o eletrodo durante vrias horas em uma dissoluo ligeiramente cida de 7% de tiourea, e lava-se muito com gua. Depois de feitas medies em dissolues com baixa concentrao de Cl-, o diafragma costuma ter uma cor marrom devido ao AgCl precipitado. Para limp-lo, introduzimos o eletrodo por cima do diafragma em NH3 concentrado e o deixamos toda uma noite; ao dia seguinte enxgua-se bem com gua destilada, renova-se o eletrlito de referncia e recoloca-se durante uma hora no tampo de pH = 4. Se com as recomendaes anteriores, no ficar limpo o diafragma, pode-se retirar a capa externa do diafragma com uma lixa muito delgada, com muito cuidado para no desgrudar o diafragma do corpo do eletrodo. Cuidado da Membrana de Vidro Depois de medies em dissolues no aquosas, colocar o eletrodo em gua destilada entre medidas. Depois de medies em meios que contm protenas, colocar o eletrodo vrias horas em uma dissoluo de pepsina (5% de pepsina em HCl 0,1 M) e lavar com H2O. Regenerao da Membrana de Vidro Colocar a membrana de vidro durante um minuto em uma dissoluo de NH4HF2 a 10% ou alguns segundos em HF a 40%. Depois enxaguar durante 10 segundos em uma dissoluo de HCl: H2O (1:1). Lavar com gua destilada e manter o eletrodo durante 24 horas em KCl 3 M. Eletrodos Redox O potencial redox uma medida da fora de oxidao ou reduo de um sistema redox, (e no uma medida da atividade dos ons), sendo um fator importante para estimar o sentido do equilbrio redox no transcurso de uma reao. O potencial redox medido geralmente com condutores eletrnicos, em forma de metais nobres (Pt, Au), ou eletrodos de carvo. Estes eletrodos no so totalmente independentes das influncias de outros ons, portanto o eletrodo de Au d uma resposta frente aos ciano e cloro, complexos formados com o Au +. A equao de Peters relaciona o potencial no eletrodo redox EWE e as atividades inicas aox e ared. EWE = E + (RT / nF). ln (aox / ared ) Se no equilbrio redox tambm tomam parte os prtons H+ : Ox + n e Podemos expressar a equao de Peters como: EWE = E + (RT / nF). ln (aox . H m / ared) EWE = E + ( 0,1984/n) . (273,16 + T) . (log aox _ log ared _ m pH) Assim para o sistema: Cr2 O7 2- + 6e- + 14 H+ < - - - - - - -> 2Cr+3 + 7H2 O EWE = E + (0,1984575 / 6). T. (log Cr2 O7 2- _ 2. log Cr+3 _ 14 pH). O potencial redox deste sistema est fortemente influenciado pelo valor de pH. Inclusive para sistemas redoxes nos que no aparecem de forma direta a influncia dos prtons H+, o potencial redox tambm pode variar em funo do pH por mudanas de espcie, formao de hidrxidos, ao de complexantes ou precipitantes. 24 + mH+ + Red

Controle dos eletrodos redox

Quando o eletrodo responde corretamente, no necessria a calibragem. Porm, os eletrodos de metais nobres podem dar indicaes de potenciais falsos, que so dependentes de sua histria, e tambm pode acontecer que o potencial do eletrodo de referncia se for combinado esteja equivocado. Por isso, conveniente checar os potenciais que medem o eletrodo redox, para o qual se necessitam dissolues com um valor de potencial redox definido. Existem dois mtodos de checar os eletrodos redox: a. - Com uma dissoluo redox standard preparada para seu uso frente a um eletrodo de referncia de Ag / AgCl, KCl (3M): 1 g/L K2Cr2O7 em uma dissoluo de pH = 7,00 (25 C)
T C E (mV) 5 mV pH 10 + 265 7,06 20 + 250 7,02 25 + 243 7,00 30 + 236 6,99 40 + 221 6,98 50 + 207 6,97 60 + 183 6,97

b. - Com uma dissoluo de quinidrona (QH) em um meio tamponado cido ou neutro (no alcalino), a qual tem um potencial redox bem definido.

Calibragem de Eletrodos Redox:

Tomam-se duas dissolues tampo de pH 4 e 7 e agrega-se quinidrona (p.a), com agitao at a saturao. Deve observar-se um excesso de quinidrona, aproximadamente 0,5 gramas de quinidrona em 50 mL de tampo. O par de eletrodos a checar se coloca nas dissolues tampo com a quinidrona. Os potenciais dos eletrodos de Platina e Ouro em perfeitas condies seriam as seguintes:
EWE = EQH _ 0,1984575. (273,16 + T). pH

T (C) 5 10 15 20 25 30

EQH (mV) + 714,3 + 710,7 + 707,0 + 703,4 + 699,7 + 696,0

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Os potenciais do par de eletrodos (eletrodo metal precioso / eletrodo de referncia) so a 20 C: pH E = E WE _ E ER ESCE (20C) 3,99 7,02 223,1 47,3 E Ag /AgCl (20C) 259,3 83,5 pH 3,99 7,02 EWE (mV) 20 C + 470,8 + 295,0

Os valores medidos podem variar s vezes em uns poucos milivolts devido a mudanas no potencial de difuso do eletrodo de referncia e quantidade de quinidrona utilizada.

Cuidados com os Eletrodos Redox

Se o eletrodo de referncia est em perfeitas condies e obtemos potenciais errados, significa que o eletrodo de metal est contaminado ou passivado (formao de xidos sobre a superfcie metlica) e devemos proceder a sua limpeza segundo as instrues do prprio eletrodo. Existem trs solues: a - Colocar o eletrodo na dissoluo de pH 4 saturada com quinidrona (+ 470,8 mV) durante umas horas e lavar com gua. b - Outra soluo consiste em conectar o eletrodo ao plo negativo de uma fonte de corrente eltrica (bateria). O plo positivo a um contra-eletrodo inerte, e se realiza uma eletrlise durante 3 minutos em cido sulfrico diludo, aplicando uma corrente de 10 mA. c - Se a superfcie do metal est suja pode-se limpar com p abrasivo e depois com H2O. Inclusive, se o eletrodo de barra e se pode separar do corpo do eletrodo, se poder esquentar no fogo at o vermelho vivo.

Seleo do tipo de Eletrodo Redox

Os eletrodos de Pt so os mais utilizados. Os eletrodos de Au podem ser uma melhor escolha frente a Pt em medidas ou valorizaes redox que aconteam em pH alcalino. A forma do eletrodo tambm muito importante. Se a amostra muito heterognea (precipitados) ou se a superfcie do eletrodo pode estar sujeita a uma passivao forte durante a anlise, so melhores os eletrodos em forma de dedal frente aos de fio. Os eletrodos de barra slida tm muita durabilidade. Podem ser limpos no fogo. So selecionados para medir em dissolues corrosivas ou altamente contaminadas.

8. Titulaes Potenciomtricas
Na titulao potenciomtrica, tambm chamada de potenciometria relativa, mede-se a f.e.m. da clula no curso da titulao. As titulaes, como sabemos, so acompanhadas de variaes bruscas de concentrao nas imediaes do ponto de equivalncia, o que provoca uma variao brusca no potencial do eletrodo indicador e, portanto, tambm na f.e.m. da clula. A titulao potenciomtrica uma tcnica de localizao do ponto final na anlise volumtrica, aplicvel sempre que se dispuser de um eletrodo indicador para a espcie desejada. So feitas sucessivas medies da f.e.m. da clula, sendo cada uma delas aps a adio de um certo volume de soluo titulante adequada. A seguir relacionam-se esses potenciais com o volume de soluo titulante consumida. 26

As medies feitas no decorrer da titulao potenciomtrica so relativas e informaram sobre as variaes ocorridas no potencial da clula. Atravs delas, pode-se estabelecer com preciso o ponto de equivalncia que determinar a concentrao da espcie sob anlise. A titulao potenciomtrica mais trabalhosa do que a tcnica volumtrica com indicadores visuais e requer equipamento especial, mas ela apresenta uma srie de vantagens sobre a tcnica convencional: Maior sensibilidade e pode ser aplicada a solues bem diludas; Pode ser empregada para solues coloridas ou turvas, pois dispensa o uso de indicadores visuais; Pode ser aplicada para certas reaes que no disponham de indicadores visuais adequados; Pode-se determinar sucessivamente vrios componentes; Pode ser aplicada em meio no aquoso; Pode ser adaptada a instrumentos automticos.

Em 1955, surgiram as primeiras buretas de pisto motorizadas, permitindo a automatizao das titulaes, acima de tudo com maior preciso na dosagem. As titulaes potenciomtricas, hoje em dia, podem ser executadas manual ou automaticamente, com ou sem registro da curva. Titulao potenciomtrica diferencial. medida que o ponto final de uma titulao aproximado a f.e.m. do sistema, muda mais rapidamente. possvel medir-se diretamente processo este que chamado de titulao potenciomtrica diferencial. O resultado desejado conseguido colocando-se dois eletrodos indicadores idnticos (e.g., fios de platina) na soluo a ser titulada, mas um destes (o eletrodo isolado) est numa pequena poro do liquido que esta separada do corpo principal da soluo, portanto, isolado da reao imediata com o titulante. A principal vantagem do mtodo diferencial que no requer um eletrodo de referncia; e mais lento e menos pratico do que a tcnica da titulao at o potencial do ponto de equivalncia. Os mtodos diferenciais no so adequados para titulaes em que os eletrodos atingem o equilbrio muito rapidamente na soluo. Na titulao manual, trabalha-se com um pH-metro e um grupo de titulao, que compreende uma bureta de pisto, montada junto com um agitador sobre uma base compacta. Esse tipo de titulao potenciomtrica requer o controle constante das diversas etapas, anotando o volume de reagente dosado e o respectivo potencial, dados que posteriormente so utilizados para construir a curva de titulao, de onde calculado o volume de reagente gasto at o ponto de equivalncia e a concentrao da espcie analisada. Titulaes automticas dispensam todas as operaes manuais e representam um grande avano sobre as automatizadas, que dependem de operaes manuais e so comumente encontradas nos laboratrios de controle de qualidade de matrias-primas ou de produtos finais, enquanto que as titulaes automticas so empregadas na rea industrial. Ligando-se um registrador a um potencimetro operado na rede, possvel produzir-se diretamente uma curva de titulao relacionada com uma titulao potenciomtrica que esteja em curso. Se a liberao do titulante da bureta for ligada ao movimento do papel do registrador, o processo se tornara automtico. Muitas firmas colocaram no mercado, unidades de titulao que realizam esta funo. Um exemplo tpico o "Potencigrafo" inclui a unidade de controle rolo de papel de registro ligado a um pisto de bureta movido a motor, e ao conjunto de eletrodos do vaso de titulao; a alimentao do papel do registrador e emparelhada com a transmisso do motor do pisto da bureta e a pena do registrador acompanha a mudana na f.e.m. do conjunto de eletrodos. A automao tambm tem sido estendida interrupo do titulante quando o potencial do eletrodo indicador atinge o valor correspondente ao ponto de equivalncia da titulao que se esta considerando; esta particularidade e nitidamente de grande valor quando se trata de fazer um certo nmero de titulaes repetitivas. E necessrio fazer um experimento preliminar para se determinar o potencial do ponto de equivalncia do eletrodo indicador (ou, mais precisa-mente, a f.e.m. do) ponto de equivalncia para a combinao de eletrodo indicador-eletrodo de equivalncia que esta em uso e prevenir que se ultrapasse o ponto final provendo condies para reduzir a velocidade de adio do titulante medida que se aproxima o ponto final. 27

Tipos de titulao
Dentro do mtodo de indicao potenciomtrica, podemos executar normalmente as titulaes que envolvem as reaes de neutralizao, de precipitao (ou complexao) e de xido-reduo.

Aparelhos Potenciomtricos

736 GP Titrino Metrohm Possui carto de memria e uma memria interna grande para mtodos bem organizados e dados de amostras. Futura-tecnologia de prova em um espao mnimo. Transferncia de mtodo rpido e sem defeito de um instrumento at outros, atravs de bordas e continentes.

Potenciometria com Eletrodos Seletivos

Mediante esta tcnica se mede o potencial desenvolvido entre um eletrodo e a dissoluo de medio ou amostra, dependendo do potencial da concentrao de um on em particular. Esta tcnica se utiliza principalmente para as anlises de nions, tais como: F-, Cl-, Br-, CN-, NO3- , etc PHmetros (Medidores de bolso, portteis e de laboratrios) A forma rpida e precisa para medio de pH. Faixa de leitura 0,00 a 14,00pH com a resoluo de 0,001pH

28

9. Cromatografia
A Cromatografia Gasosa (CG) uma tcnica para separao e anlise de misturas de substncias volteis. A amostra vaporizada e introduzida em um fluxo de um gs adequado denominado de fase mvel ( FM) ou gs de arraste. M. TSWEET (1903): Separao de misturas de pigmentos vegetais em colunas recheadas com adsorventes slidos e solventes variados. ter de petrleo Mistura de pigmentos

CaCO3

pigmentos separados

Cromatografia = kroma [cor] + graph [escrever](grego) Princpio Bsico: Separao de misturas por interao diferencial dos seus componentes entre uma FASE ESTACIONRIA (lquido ou slido) e uma FASE MVEL (lquido ou gs).

Modalidades e Classificao
Fase Mvel = Gs Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Lquida (CL)

Fase Mvel = Lquido Cromatografia Gasosa (CG)

uma tcnica para separao e anlise de misturas de substncias volteis. A amostra vaporizada e introduzida em um fluxo de um gs adequado denominado de fase mvel (FM) ou gs de arraste. Slida Em CG a Fase Estacionria pode ser: Lquida Cromatografia Gs-Lquido (CGL) 29 Cromatografia Gs-Slido (CGS)

Aplicabilidade
Quais misturas podem ser separadas por CG ? Para uma substncia qualquer poder ser arrastada por um fluxo de um gs ela deve ser dissolver - pelo menos parcialmente nesse gs. Misturas cujos constituintes sejam VOLTEIS (=evaporveis)

De Forma Geral
CG aplicvel para separao e anlise de misturas cujos constituintes tenham PONTOS DE EBULIO de at 300oC e que termicamente estveis.

O Cromatgrafo a Gs 2

1 - Reservatrio de Gs e Controles de Vazo / Presso. 2 - Injetor (Vaporizador) de Amostra. 3 - Coluna Cromatogrfica e Forno da Coluna. 4 - Detector. 5 - Eletrnica de Tratamento (Amplificao) de Sinal. 6 - Registro de Sinal (Registrador ou Computador). Observao: 2, 3 e 4 com temperatura controlada

5 3

Este fluxo de gs com a amostra vaporizada passa por um tubo contendo a fase estacionria FE (coluna cromatogrfica), onde ocorre a separao da mistura. A FE pode ser um slido adsorvente (Cromatografia Gs-Slido) ou, mais comumente, um filme de um lquido pouco voltil, suportado sobre um slido inerte (Cromatografia Gs-Lquido com Coluna Empacotada ou Recheada) ou sobre a prpria parede do tubo (Cromatografia Gasosa de Alta Resoluo). Na cromatografia gs-lquido (CGL), os dois fatores que governam a separao dos constituintes de uma amostra so: - a solubilidade na FE: quanto maior a solubilidade de um constituinte na FE, mais lentamente ele caminha pela coluna. - a volatilidade: quanto mais voltil a substncia (ou, em outros termos, quanto maior a presso de vapor), maior a sua tendncia de permanecer vaporizada e mais rapidamente caminha pelo sistema. As substncias separadas saem da coluna dissolvidas no gs de arraste e passam por um detector; dispositivo que gera um sinal eltrico proporcional quantidade de material eluido. 30

O registro deste sinal em funo do tempo o cromatograma, sendo que as substncias aparecem nele como picos com rea proporcional sua massa, o que possibilita a anlise quantitativa.

Instrumentao Bsica
Os constituintes bsicos de um sistema cromatogrfico so: 1- Reservatrio de Gs de Arraste. O gs de arraste fica contido em cilindros sob presso. Assim, a escolha do gs de arraste independe da amostra a ser separada. O parmetro mais importante a sua compatibilidade com o detector (alguns detectores trabalham melhor quando se usam determinados gases). Os gases mais empregados so H2, He e N2 e a vazo do gs de arraste, que deve ser controlada, constante durante a anlise. Fase Mvel em CG: NO interage com a amostra, apenas a carrega atravs da coluna. Assim usualmente referida como GS DE ARRASTE

Requisitos do gs de arraste
- INERTE No deve reagir com a amostra, fase estacionria ou superfcies do instrumento. - PURO Deve ser isento de impurezas que possam degradar a fase estacionria. - CUSTO Gases de altssima pureza podem ser muito caros. - COMPATVEL COM DETECTOR Cada detector demanda um gs de arraste especfico para melhor funcionamento. (Seleo de Gases de Arraste em Funo do Detector). Alimentao de Gs de Arraste controladores de vazo / presso de gs. dispositivos para purificao de gs (traps) c d

b a

e a - Cilindro de Gs b - Regulador de Presso Primrio c - Traps para eliminar impurezas do gs d - Regulador de Presso Secundrio e - Regulador de Vazo (Controlador Diferencial de Fluxo) f - Medidor de Vazo (Rotmetro) 2 - Sistema de Introduo de Amostra. Na CG, a seo do cromatgrafo gasoso onde feita a introduo da amostra o injetor (ou vaporizador). Na verso mais simples, trata-se de um bloco de metal conectado coluna cromatogrfica e alimentao de gs de arraste. 31

Este bloco contm um orifcio com um septo, geralmente de borracha de silicone, pelo qual amostras lquidas ou gasosas podem ser injetadas com microseringas hipodrmicas. Amostras slidas podem ser dissolvidas em um solvente adequado. O injetor deve estar aquecido a uma temperatura acima do ponto de ebulio dos componentes da amostra, para que a amostra se volatilize completa e instantaneamente e seja carregada para a coluna. Se a temperatura for excessivamente alta, pode ocorrer decomposio da amostra. A amostra deve entrar na coluna na forma de um segmento estreito, para evitar alargamento dos picos. A quantidade de amostra injetada depende da coluna e do detector empregado. Para colunas empacotadas, volumes de 0,1 l a 3,0 l de amostra lquida so tpicos. Volumes altos prejudicam a qualidade de injeo (alargamento dos picos) ou saturam a coluna cromatogrfica. Para a cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR), os volumes de injeo deveriam ser da ordem de nanolitros. Entretanto, no existe meio simples de se medir um volume to pequeno com a preciso necessria. Assim, os injetores para CGAR so dotados de "diviso de amostra", de modo que apenas uma frao do volume injetado (tipicamente entre 1/10 e 1/300) chega coluna, sendo o restante descartado. Os dispositivos para injeo (INJETORES ou VAPORIZADORES) devem prover meios de introduo INSTANTNEA da amostra na coluna cromatogrfica.

Parmetros de Injeo
-TEMPERATURA DO INJETOR Deve ser suficientemente elevada para que a amostra vaporize-se imediatamente, mas sem decomposio Regra Geral: Tinj = 50oC acima da temperatura de ebulio do componente menos voltil -VOLUME INJETADO Depende do tipo de coluna e do estado fsico da amostra COLUNA Amostras Lquidas Amostras Gasosas

empacotada = 3,2 mm (1/4)

0,2 L ... 20

0,1 ml ... 50

L
capilar = 0,25 mm 0,01 L ... 3

mL
0,001 ml ... 0,1

Injetor on-column Convencional

2

L
1

mL

3 4

1 - Septo (silicone) 2 - Alimentao de gs de arraste) 3 - Bloco metlico aquecido 4 - Ponta da coluna cromatogrfica

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Microsseringas para Injeo (10 L) mbolo

Agulha (inox 316)

Corpo (pirex)

Injeo on-column de lquidos

1 - Ponta da agulha da microseringa introduzida no incio da coluna. 2 - Amostra injetada e vaporizada instantneamente no incio da coluna. 3 - Plug de vapor de amostra forado pelo gs de arraste a fluir pela coluna.

3- Coluna Cromatogrfica e Controle de Temperatura da Coluna. Aps injetada e vaporizada, a amostra introduzida na coluna cromatogrfica, onde efetuada a separao. Na CG a "afinidade" de um soluto pela FM determinada pela volatilidade do soluto, sua presso de vapor, que funo da estrutura do composto e da temperatura. Alterando-se a temperatura, altera-se tambm a presso de vapor e, por conseguinte, a "afinidade" de uma substncia pela FM. Se a temperatura da coluna for excessivamente baixa, todos os constituintes da amostra tero presses de vapor muito baixas e ficaro quase que todo o tempo dissolvidos na FE, fazendo com que a sua migrao pela coluna ser muito lenta. O resultado pode ser um tempo excessivo de anlise e picos muito largos e baixos (quanto mais tempo a substncia passa na coluna, mais ela se espalha). Eventualmente, o composto pode nem sair da coluna. Por outro lado, uma temperatura muito alta implica presses de vapor tambm muito grandes e os compostos quase no passam tempo nenhum dissolvido na FE, saindo muito rapidamente da coluna sem serem separados. Assim, a temperatura da coluna uma condio que deve ser ajustada para se obter uma determinada separao. Alm de consideraes sobre a separao, a temperatura empregada deve ser compatvel com a FE empregada, pois as FE lquidas se volatilizam ou se degradam com temperaturas excessivas. A temperatura da coluna deve ser rigorosamente controlada, para assegurar a reprodutibilidade das anlises. No caso de amostras contendo constituintes com presses de vapor muito diferentes, se a temperatura for ajustada para separao adequada dos compostos menos volteis (temperaturas altas), os volteis sero muito pouco retidos e no sero separados. 33

Por outro lado, se o acerto for feito para separar os volteis (temperaturas baixas), os constituintes pesados se apresentaro sob a forma de picos excessivamente largos e baixos ou ficaro retidos na coluna. Este problema pode ser contornado usando a programao linear de temperatura (PLT), atravs da qual a temperatura da coluna vai sendo aumentada gradualmente durante a anlise. A PLT permite separaes de amostras muito complexas (petrleo, leos essenciais, etc.), no analisveis com temperatura de coluna constante (CG Isotrmica).

Colunas: Definies Bsicas

A coluna cromatogrfica o local onde ocorre a interao entre a amostra e a FE. Existem duas geometrias bsicas de colunas para CG: as colunas empacotadas (ou recheadas), e as colunas tubulares abertas (ou capilares). Nas colunas empacotadas, a FE lquida depositada sob a forma de um filme fino e uniforme sobre partculas de um suporte adequado. O suporte deve ser um slido poroso com grande rea superficial, inerte e de boa resistncia mecnica. O tamanho das partculas e dos poros deve ser o mais uniforme possvel. O material mais empregado como suporte a diatomite, esqueletos fsseis de algas microscpicas (diatomceas), compostos principalmente de SiO2 amorfa e traos de xidos metlicos. Muitas vezes, o material submetido a tratamentos qumicos para diminuir a sua atividade superficial, e torn-lo mais inerte. A diatomite preparada para suporte de CG comercializada com o nome de "Chromosorb", dentre outros.

Forno da Coluna
EMPACOTADA = 3 a 6 mm L = 0,5 m a 5 m Recheada com slido pulverizado (FE slida ou FE lquida depositada sobre as partculas do recheio) CAPILAR = 0,1 a 0,5 mm L = 5 m a 100 m Paredes internas recobertas com um filme fino (frao de m) de FE lquida ou slida

Nas colunas tubulares abertas (genericamente denominadas de "colunas capilares"), a FE depositada na forma de um filme sobre a superfcie interna de um tubo fino. A sua grande vantagem sobre as colunas empacotadas que, pelo fato de serem tubos abertos, podem ser feitas colunas capilares de grandes comprimentos. Como, quanto maior o comprimento, mais pratos tericos contm a coluna (e maior a sua eficincia), colunas capilares so muito mais eficientes que as empacotadas. Normalmente, encontram-se colunas de 5 m at 100 m, embora j tenha sido fabricada uma coluna com 2175 m. Podem-se empregar tubos metlicos, de vidro ou de slica fundida, sendo os ltimos atualmente os preferidos pela sua flexibilidade e inrcia qumica. Nas colunas empacotadas, o desempenho afetado pelo dimetro e uniformidade das partculas do recheio e pela carga de FE. Nas colunas capilares, so importantes o dimetro interno da coluna e a espessura do filme de FE. Quanto mais fina for a coluna, mais eficiente ela ser. Entretanto, colunas muito estreitas suportam pouca FE, o que diminui a sua seletividade. Tipicamente, usam-se colunas com dimetros internos entre 0,1 mm e 0,5 mm. A espessura do filme de FE equivale percentagem de FE das colunas empacotadas, de modo que quanto mais espesso for o filme, maior a reteno e a seletividade. 34

Filmes excessivamente espessos causam alargamento dos picos e grandes tempos de anlise. Normalmente, empregam-se filmes de 0,1 m a 3,0 m. As FE so as mesmas usadas para colunas empacotadas. Muitas vezes, para minimizar as perdas de fase por volatilizao durante o uso, a FE fixada s paredes do tubo por algum meio. Pode-se polimerizar parcialmente a fase aps a deposio (fases imobilizadas) ou ento lig-la quimicamente s paredes (fase ligada). A capacidade de processamento de amostra das colunas capilares menor que aquela das empacotadas. Dependendo da coluna, ela pode ser saturada com quantidades to pequenas quanto 0,001 l de amostra. Como a injeo direta de volumes de amostra desta ordem de grandeza invivel, deve-se recorrer ao artifcio da diviso de amostra na injeo. Porm, o uso de diviso de amostra apresenta alguns inconvenientes. difcil ajustar reprodutivelmente a razo de diviso (frao da amostra injetada que entra na coluna), o que pode acarretar erros na anlise quantitativa. Alm disso, amostras contendo constituintes com volatilidades muito diferentes podem ser alteradas pela diviso: a frao da amostra que realmente vai para a coluna fica enriquecida com os componentes menos volteis. Dada a grande eficincia das colunas capilares, podem ser realizadas separaes de misturas extremamente complexas: fraes de petrleo, essncias, amostras biolgicas, etc. No caso especfico de anlises de interesse ambiental (poluentes em guas e ar, por exemplo), quase que obrigatrio o seu uso. A tendncia atual que a maioria das anlises seja feita com o uso de colunas capilares. Isto no significa que as colunas empacotadas esto sendo abandonadas, porm o seu uso deve ficar restrito aplicaes especficas. 4. Detector. O ltimo bloco de um CG o detector. O detector um dispositivo que indica e quantifica os componentes separados pela coluna, geram um sinal eltrico proporcional quantidade eluida de um analito. Grfico Sinal x Tempo = CROMATOGRAMA. Idealmente: cada substncia separada aparece como um PICO no cromatograma. Um grande nmero de detectores tem sido descritos e usados em CG. Existem, entretanto, algumas caractersticas bsicas comuns para descrever seu desempenho: - Seletividade. Alguns detectores apresentam resposta para qualquer substncia diferente do gs de arraste que passe por ele. Estes so os chamados detectores universais. Por outro lado, existem detectores que respondem somente a compostos que contenham um determinado elemento qumico em sua estrutura, que so os detectores especficos. Entre estes dois extremos, alguns detectores respondem a certas classes de compostos (detectores seletivos). - Rudo. So os desvios e oscilaes na linha de base (sinal do detector quando s passa o gs de arraste). Pode ser causado por problemas eletrnicos, impurezas e sujeiras nos gases e no detector, etc. Por melhor que seja o funcionamento do sistema, sempre existe rudo. - Tipo de Resposta. Alguns detectores apresentam um sinal que proporcional concentrao do soluto no gs de arraste; em outros, o sinal proporcional taxa de entrada de massa do soluto no detector. Isto depende do mecanismo de funcionamento de cada detector. - Quantidade Mnima Detectvel (QMD). a quantidade de amostra mnima para gerar um sinal duas vezes mais intenso que o rudo. uma caracterstica intrnseca do detector. Quanto menor a QMD, mais sensvel o detector. QMD a Massa de um analito que gera um pico com altura igual a trs vezes o nvel de rudo.; S =3 S I N A L (S) N

RUDO (N)

RUDO: Qualquer componente do sinal gerado pelo detector que no se origina da amostra 35

- Faixa Linear Dinmica. a razo entre a menor e a maior massa entre as quais o fator de resposta de um detector para um soluto constante, isto , onde a curva de calibrao linear. Os dois detectores mais significativos em CG so o Detector por Condutividade Trmica (DCT) e o Detector por Ionizao em Chama (DIC).

A partir de certo ponto o sinal no aumenta mais linearmente

R E

MASSA

- Limite de Deteo: Quantidade de analito que gera um pico com S/N = 3 e wb = 1 unidade de tempo. Mesmo detector, nvel de rudo e massa de analito MAS diferentes larguras de base:

wb

Definindo limite de deteco como: LD= QMD/Wb

- Fator de Resposta. a intensidade de sinal gerado por uma determinada massa de soluto, que depende do detector e do composto estudado. Pode ser visualizado como a inclinao da reta que correlaciona o sinal com a massa de um soluto (curva de calibrao). Quanto maior o fator de resposta, mais confivel a anlise quantitativa.

R E A

Fator de Resposta, S: inclinao da reta rea do pico x Massa do

MASSA

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Detector por condutividade trmica (DCT ou TCD)

O funcionamento do DCT baseado no fato de que a velocidade de perda de calor de um corpo quente para um corpo mais frio proporcional, dentre outros fatores, condutividade trmica do gs que separa estes corpos. Um filamento metlico muito fino (de W, Au ou liga W-Re) aquecido pela passagem de uma corrente eltrica constante. Este filamento fica montado dentro de um orifcio em um bloco metlico (cela), aquecido uma temperatura mais baixa que aquela do filamento, por onde o gs de arraste proveniente da coluna passa continuamente.

Enquanto passar gs de arraste puro pela cela, a taxa de perda de calor do filamento para o bloco constante e a temperatura do filamento no varia. Quando um componente eluido da coluna, ele sai misturado com o gs de arraste e passa pelo detector. Se a condutividade desta mistura for diferente daquela do gs de arraste puro, o filamento passa a perder calor para o bloco numa taxa diferente daquela do equilbrio. Por exemplo, se a taxa de perda de calor diminuir, o filamento se aquece quando a amostra eluida. O aquecimento do filamento causa uma variao na sua resistncia eltrica e a resistividade de um metal aumenta com a temperatura. O filamento montado em um circuito de ponte de Wheatstone, que converte a variao na resistncia eltrica do filamento numa variao de voltagem, que coletada em um registrador gerando o cromatograma. O DCT um detector universal, sensvel concentrao do soluto no gs de arraste. Geralmente, quando se usa DCT, o gs de arraste He ou H2. Pelo fato destes gases terem condutividades trmicas altssimas, as misturas gs de arraste mais o soluto sempre tero condutividades trmicas menores que a do gs de arraste puro, o que impede sinais negativos, alm de se obter maiores fatores de resposta. Entretanto, ele considerado um detector pouco sensvel. A QMD de um modelo moderno, para propano, de 400 pg/ml de gs de arraste, com faixa linear de 106. Apesar disso, o fato de ser universal, barato e de operao simples, o faz extremamente til para anlises que no necessitem de alta sensibilidade.

Detector por ionizao de chama (DIC ou FID)

Durante a queima de um composto orgnico, so formados diversos ons e como conseqncia, a chama resultante torna-se condutora de eletricidade. O funcionamento do DIC baseia-se neste fenmeno. O gs de arraste saindo da coluna cromatogrfica misturado com H2 e queimado com ar ou O2. A chama resultante fica contida entre dois eletrodos, polarizados por uma voltagem constante.

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Como a chama de H2 forma poucos ons, ela um mau condutor eltrico e quase nenhuma corrente passa entre os eletrodos. Ao eluir um composto orgnico, ele queimado e so formados ons na chama, que passa a conduzir corrente eltrica. A corrente eltrica resultante, da ordem de pA, amplificada e constitui o sinal cromatogrfico. Quase todos compostos orgnicos podem ser detectados pelo DIC. Apenas substncias no inflamveis (CCl4, H2O) ou algumas poucas que no formam ons na chama (HCOOH) no do sinal. Assim, ele um detector praticamente universal. De um modo geral, quanto ligaes C-H tiver o composto, maior a sua resposta (maior sensibilidade). Ele muito mais sensvel que o DCT, pois dependendo do composto, podem ser detectados entre 10 pg e 400 pg, com faixa linear dinmica de 107. Provavelmente o detector mais usado em CG.

Detector por Captura de Eltrons (DCE)

PRINCPIO: Supresso de um fluxo de eletrons lentos (termais) causada pela sua absoro por espcies eletroflicas. O DCE O DETECTOR PREFERENCIAL PARA ANLISES DE TRAOS DE ORGANOALOGENADOS E SIMILARES. Na passagem de uma substncia eletroflica alguns eletrons so absorvidos, resultando uma supresso de corrente eltrica. Gerao de eltrons lentos pela interao entre a radiao , molculas do gs de arraste G e molculas de bloqueador (quencher) Q b - + G G + + e - + e* energia b - + G G* + Q G + e - + Q energia Eletrons lentos so capturados pela espcie eletroflica AB AB + e - AB - + energia. O decrscimo na corrente eltrica fluindo pela cela de deteco proporcional concentrao a da espcie absorvente no gs de arraste.

Fases estacionrias (FE)

Na CG existe um grande nmero de fases estacionrias lquidas e slidas disponveis comercialmente, de modo que a natureza da FE a varivel mais importante na otimizao da seletividade. As FE lquidas so as mais empregadas em CG. FE slidas (carvo ativo, slica, peneiras moleculares e polmeros porosos) so aplicadas para separao de gases e compostos de baixa massa molar. Em princpio, para um lquido ser usado como FE em CG ele deve ser pouco voltil (presso de vapor at 0,1 mmHg ou 13,332 Pa na temperatura de trabalho) e termicamente estvel. Para esta fase ser empregada em uma separao em particular, ela precisa: - ser um bom solvente para os componentes da amostra, caso contrrio o efeito ser o mesmo de temperaturas de coluna excessivamente altas (os compostos ficaro quase que o tempo todo no gs de arraste, sendo eluidos muito rapidamente e sem separao); - ser um bom solvente diferencial, isto , alm de dissolver bem todos os constituintes da amostra, faz-lo com solubilidades suficientemente diferentes para que eles possam ser separados; e - ser quimicamente inerte em relao amostra. Via de regra, FE com estruturas similares da amostra dissolvero melhor seus constituintes, provendo melhores seletividades e separaes. FE polares dissolvem melhor compostos polares, etc. Por exemplo: hidrocarbonetos podem ser separados eficientemente usando esqualano (um alcano de massa molar elevada). 38

As FE mais populares so os silicones. Silicones so polmeros extremamente estveis e inertes, o que os torna especialmente adequados CG. Nesta classe, as polidimetilsiloxanas so os menos polares. A substituio dos grupos metila na cadeia por outros grupos (fenil, ciano, trifluoropropil, etc.) fornece FE com polaridades crescentes. Deste modo, eles podem ser empregados na separao de misturas das mais diversas polaridades. Comercialmente, so disponveis sob diversas denominaes, muitas delas praticamente equivalentes. SE-30, OV-1 e DC-200 so nomes comerciais para polidimetilsiloxano de fabricantes diferentes. Outra classe de FE importante a dos poliglicis. So polmeros de etilenoglicol e epxido, preparados com diferentes tamanhos de cadeia polimrica. So FE moderadamente polares, adequadas para separao de lcoois, aldedos, teres, etc. A denominao comercial "Carbowax" designa a srie de poliglicis mais conhecida (p.ex., Carbowax 20M polietilenoglicol com massa molar mdia de 20.000.000 g/mol). Um terceiro grupo importante de FE o dos polisteres. So obtidos por condensao de dicidos com glicis. So fases altamente polares. As fases mais comuns desta categoria so o succinato de dietilenoglicol (DEGS) e o adipato de dietilenoglicol (DEGA).

10. Cromatografia Gasosa Acoplada a Espectrometria de Massas

Espectrometria de Massa
Na espectrometria de massa, a amostra bombardeada com um feixe de eltrons, resultando ons moleculares e fragmentos inicos das espcies originais. Os ons positivos resultantes podem ser separados segundo suas relaes de massa/carga (m/e). A resoluo das vrias espcies baseia-se nas diferenas dos percursos inicos em um campo magntico, um campo eltrico ou ambos; a resoluo tambm possvel com base nas diferenas das velocidades inicas em um espao livre de campo. As quantidades relativas dos diferentes ons formados em um espectrmetro de massa, sob condies especficas, podem ser representadas em funo da relao m/e. A representao constitui o espectro de massa, que mostra a distribuio das espcies inicas e suas abundncias relativas.

Componentes Bsicos
Os espectrmetros de massa, embora relativamente simples o princpio em que se baseiam, so instrumentos complexos e dispendiosos. Existem vrios tipos, mas a todos so comuns alguns componentes bsicos, a saber: 1) dispositivo para a introduo da amostra; 2) cmara de ionizao e sistema de acelerao; 3) separador de ons; 4) coletor de ons e sistema de amplificao e registro da corrente inica.

39

A amostra e volatilizada e introduzida lentamente na cmara de ionizao, mantida a uma prego de cerca de KT* mm de mercrio. As molculas da amostra so bombardeadas por um feixe de eltrons que fluem do filamento aquecido em direo a um nodo. Em conseqncia do impacto, formam-se tanto ons positivos como ons negativos: porem, predominam os ons positivos cm que se baseiam as aplicaes analticas. Os ons positivos so separados dos ons negativos mediante um pequeno potencial negativo na fenda A: depois, eles so acelerados no campo eltrico entre A e B (potencial de centenas a milhares de volts). Os ons que passam pela lenda B atravessam o separador de ons C que um tubo mantido a uma presso mm de mercrio submetido a um intenso campo magntico.

Injetor (tipo Split ou Split/Splitless)

O injetor composto basicamente por um tubo de ao inox com um septo de Silicone por onde entra a agulha da micro-seringa. Geralmente opera em temperaturas entre 200C e 350C. Internamente, geralmente revestido por um tubo de Vidro que pode ter dimetro varivel e at recheio em alguns casos. Neste tubo (Liner ou Insert) onde ocorre a evaporao da amostra.

Coluna Capilar
As colunas capilares so tubos capilares de Slica Fundida revestidos externamente com um polmero (geralmente poliestireno) e internamente pela fase estacionria, que geralmente um poli-siloxano lquido, muito viscoso e de ponto de ebulio bastante alto, na maioria das vezes acima de 350C. Dados mais comuns: > > > > Comprimento: 5 a 60m; Temperatura mxima. 200 a 360C; Dimetro Externo: 0,22 a 0,53mm; Espessura do Filme: 0,10 a 2,0um. t.

Seleo de Colunas
As colunas mais adequadas para o trabalho com GC/MS so as pouco polares Metil-Silicone (HP-1, RTX-1, DB-1, etc.) ou 5% Fenil-Metil-Silicone (HP-5, DB-5, RTX-5, etc.). Elas tm temperaturas mximas que variam de 300 a 360C e baixa "sangria" (perda de fase estacionria, que suja o Detetor). Isto garante tambm menor rudo de fundo. Existe a opo de se usar colunas com fase estacionria melhorada do tipo "Crosslinked", que tm um polmero mais estvel temperatura e menor sangria em consequncia. Estes dois tipos de colunas tm separao muito semelhante. A coluna 5% Fenil-Metil-Silicone, sendo um pouco mais polar consegue separar alguns compostos que a Metil-Silicone no separa, como m- e p- Xilenos. Por outro lado a 5% Fenil-Metil-Silicone no separa Benzeno de Ciclohexano, que so separados pela Coluna de Metil-Silicone. As colunas mais polares como a Carbowax e os Glicis geralmente tm temperaturas mximas de menos de 250C e a "sangria" (perda de fase estacionria para o Detetor) tende a sujar o Espectrmetro muito rapidamente, alm de gerar um sinal de fundo muito alto. Em poucas aplicaes elas so indispensveis (exemplos: anlises de Metanol, Formol, etc.). Comprimento: as colunas de 0,22mm e 0,32mm mostram uma separao boa com um comprimento entre 20 e 60m. Um comprimento de 30m, em nossa opinio garante uma separao satisfatria e anlises feitas em um menor tempo. Colunas muito compridas geram anlises mais demoradas. Dimetro: Se o objetivo anlise de traos, no recomendamos as colunas de 0,22mm, que saturam-se facilmente e podem exigir maiores vazes de Split. As colunas de 0,32mm apresentam um desempenho timo de separao e suportam um bom volume de amostra, por isto as consideramos as melhores. 40

As colunas de 0,53mm (Megabore) suportam um bom volume de amostra, garantindo bons limites de deteco, mas em compensao, geralmente tm uma separao (resoluo) no muito boa. Espessura de filme: Se o objetivo analisar compostos volteis (Solventes, Benzeno, Tolueno, Xilenos, etc.) um filme espesso deve garantir uma separao melhor. Para uma coluna de 0,32mm geralmente um filme em torno de 1,0um deve garantir uma boa separao. Se o objetivo analisar compostos Semi-Volteis (Pesticidas, Ftalatos, compostos com PE acima de 20OC, etc.) para uma coluna de 0,32mm um filme em torno de 0,25um deve permitir que estes compostos eluam em uma temperatura mais baixa da coluna, o que evita degradao trmica, alargamento de picos, etc.

Transfer Line
apenas um tubo aquecido externamente a temperatura constante por onde a coluna capilar segue para o Espectrmetro de Massas

11. Cromatografia Lquida Acoplada a Espectrometria de Massas

O escopo da HPLC
Esta tecnologia exigiu equipamentos sofisticados operando a tas presses, que contrastavam acentuadamente com as colunas simples de vidro da clssica cromatografia lquida de fluxo por gravidade. O nome cromatografia lquida de alta efcincia - HPLC (em ingls, high performance liquid chomatography) empregado para distinguir esses procedimentos mais novos dos mtodos bsicos, ainda usados para finalidades preparativas. Cromatografia lquida de alta eficincia a mais usada de das tcnicas analticas de separao, com as vendas anuais de equipamentos de HPLC se aproximando da marca de um bilho de dlares. As razes para a popularidade do mtodo a sua sensibilidade, a fcil adaptao para deter-inaes quantitativas acuradas, sua adequao separao de espcies no-volteis ou termicamente frgeis e, acima de tudo, sua ampla aplicabilidade a substncias de grande interesse para a indstria, para muitos campos da cincia para o pblico. Exemplos desses materiais incluem: aminocidos, protenas, cidos nuclicos, hidrocarbonetos, carboidratos, drogas, terpenides, pesticidas, antibiticos, esterides, espcies organo-metlicas e muitas substncias inorgnicas.

Equipamentos para Cromatografia Lquida

Para obter vazes do eluente com fases estacionrias com tamanhos de partculas de 2 a 10 um, comuns na cromatografia lquida moderna, so requeridas presses de bombeamento de at vrios milhares de libras por polegada quadrada (psi). Como conseqncia dessas altas presses, o equipamento necessrio para HPLC tende a ser mais sofisticado ro do que os encontrados para outros tipos de cromatografia. A Figura abaixo mostra um esquema dos componentes importantes de um equipamento de cromatografia lquida alta eficincia.

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Detectores de Espectrometria de Massa

Um problema fundamental no acoplamento de cromatografia lquida com espectrometria de massa o enorme descompasso entre os volumes relativamente grandes de solvente da primeira e os requisitos de vcuo da segunda. Vrias interfaces foram desenvolvidas para resolver esse problema. Em uma, disponvel no mercado, o eluente da coluna dividido, e apenas uma pequena frao introduzida diretamente no espectrmetro de massa. Sistemas de introduo direta de lquido parecem promissores quando usados em conjuno com colunas de microdimentro, que tipicamente atrapalham com vazes de 10 a 50 uL/min. Em um segundo tipo de interface, que tambm vendida comercialmente, o efluente depositado sobre uma correia contnua ou sobre um fio que se move e transporta o solvente e o analito para uma cmara aquecida para remoo do primeiro por volatilizao. Aps a evaporao do solvente, os resduos do analito sobre a correia ou sobre o fio passam pela rea da fonte de ons, na qual ocorre a desoro-ionizao. Uma interface nova e promissora, atualmente no mercado, a chamada termospray- ou seja, um termonebulizador que atua como uma interface, permitindo a introduo direta do efluente total da coluna em vazes to altas como 2 mL/ min. Com essa interface, o lquido vaporizado medida que ele passa atravs de um tubo capilar aquecido, de ao inoxidvel, para formar um jato de aerossol de molculas do solvente e do analito. Na nuvem formada, o analito ionizado atravs de um mecanismo de troca de carga com um sal, como acetato de amnio, que incorporado ao eluente. Assim, o termonebulizador no apenas uma interface mas tambm uma fonte de ionizao. Os espectros resultantes so geralmente simples e fornecem dados de peso molecular porm eles no apresentam os detalhes que fazem os espectros por impacto de eltron to teis para fins de identificao. E ainda mais, o termonebulizador aplicvel somente a molculas polares de analito e a fases mveis polares que dissolvem um sal como acetato de amnio. Com essas limitaes, o termonebulizador fornece espectros para um amplo intervalo de compostos termicamente estveis e no-volteis como peptdeos e nucleotdeos. Foram relatados limites de deteco baixos como 1a 10 picogramas. Controle por computador e armazenamento de dados so geralmente usados com detectores de espectrometria de massa. Pode-se obter tanto os cromatogramas em tempo real ou reconstrudos por computador e os espectros dos picos eluidos. Atualmente, os equipamentos para HPLC/MS ainda no esto 42

completamente desenvolvidos como os equipamentos para GC/MS. No entanto, essa situao deve mudar nos prximos anos.

Espectrometros de Massa
So aparelhos de alta resoluo, bem mais caros, no tratados neste trabalho, tm capacidade de resolver nmeros fracionrios de massas o que permite, por exemplo, com base na % de Istopos definir a idade de objetos. Os tipos mais comuns encontrados no mercado atualmente so: a) Quadrupolo; b) Qudruplo lon-Trap; c) Alta Resoluo (HRMS). Conectado ao Espectrmetro de massas geralmente h um reservatrio para o Gs de Calibrao (um composto lquido, cujos vapores podem ser inseridos na cmara de Vcuo do Espectrmetro sob controle de uma vlvula) e um reservatrio para o Gs de Ionizao Qumica (este pode ser um gs, como o Metano, ou um lquido, como a Acetonitrila). Ambos os reservatrios so isolados do sistema por vlvulas que so abertas somente no momento do uso destes compostos.

Computador e Software
Todo o trabalho do Cromatgrafo e do Espectrmetro so comandados por um computador comum com um software adequado instalado. Os principais recursos disponibilizados so: > > > > > > Preparo de listas de amostras a injetar e injeo automatizada; Aquisio dos dados (sinal total e Espectros) e arquivamento; Comparao de espectros automtica (Biblioteca de Espectros); Mostra cromatogramas de Total de ons ou para ions especificados; Quantificao (preparo de curvas de calibraco com espectros dos padres, etc.); Relatrios de resultados

Funcionamentos dos Espectrometros mais Comuns

Na tcnica de impacto de eltrons (El), mais usada, um espectrmetro de massas bombardeia molculas na fase vapor com um feixe de eltrons de alta energia e registra o resultado do impacto dos eltrons como um espectro de ons separados com base em razo massa/carga (m/z). A grande maioria dos ons formados tm carga unitria, podendo-se considerar como sendo a prpria massa a maioria dos fragmentos detectados. Dentro do prprio espectrmetro existe o multiplicador de Eltrons que produz um sinal proporcional ao nmero de ons detectados. Estes aparelhos mais cromatgrafo geralmente usa como gs de arraste o Gs Hlio, inerte e de baixo peso molecular. Nos sistemas GC/MS a amostra gasosa que sai da coluna capilar entra diretamente no Espectrmetro de Massas. No caminho entre o Cromatgrafo e o Espectrmetro a coluna passa por dentro de uma linha aquecida em temperatura controlada, chamada geralmente de "Transferline". A "Transferline" tem como objetivo nico evitar o esfriamento da coluna antes que chegue no Espectrmetro (Detetor). Toda a cmara do Espectrmetro mantida sob alto-vcuo (da ordem de 10"5 a 10"7 atm): geralmente uma bomba de vcuo Turbo-Molecular fica conectada diretamente cmara do Espectrmetro e em srie com esta bomba funciona uma bomba de vcuo mecnica. Na tcnica de Ionizao Qumica (Cl), a cmaro do Espectrmetro recebe tambm uma pequena vazo de gs Metano ou outro composto leve como Acetonitrila, etc. 43

Com esta pequena vazo, diz-se que a cmara est "pressurizada", embora a presso seja ainda muito baixa. O fato de se ter um sistema sob alto vcuo traz o problema dos riscos de vazamentos. Entradas de ar (acompanhadas de umidade) se ocorrem desestabilizam por completo o detetor. Uma forma de procurar pequenos vazamentos lanar jatos de Argnio nos locais suspeitos e acompanhar o sinal de ions gerados, procurando pela massa do Argnio.

Aplicaes Qualitativas
O espectro de massa de um composto puro pode fornecer informaes valiosas para fins de identificao. A identificao facilitada quando, alm do espectro de massa, se dispe de outros dados espectrais (infravermelho, ressonncia magntica nuclear) e constantes fsicas (pontos de fuso e ebulio). A espectrometria de masSa tambm usada na identificao de componentes de misturas simples, particularmente gasosas. A mais importante informao isolada para identificar um composto o conhecimento de seu peso molecular, que a espectrometria de massa d muito exatamente. O trabalho requer a identificao do pico do on molecular. Na faixa dos potenciais de 9 a 14 V, pode-se admitir que no haja formao de ons mais pesados do que o on molecular; ento, a massa do on mais pesado, salvo as contribuies dos istopos mais pesados, d o peso molecular nominal (nmero inteiro). Ocasionalmente, o pico do on molecular pode estar ausente ou ser to pequeno a ponto de ser confundido com o pico de alguma impureza. Outra possibilidade as colises originarem um pico M + 1 mais pronunciado do que o on molecular. No caso molecular um composto puro, em geral, no difcil determinar o peso molecular nominal mediante identificao do pico do on molecular. Com um instrumento de alta resoluo, consegue-se determinar o peso molecular com considervel exatido. Muitas vezes, a massa exata do on molecular permite derivar a frmula molecular de um composto. Esta aplicao requer um instrumento capaz de detectar diferenas de massa de alguns milsimos de unidade de massa. Seja, por exemplo, um composto desconhecido para o qual se achou o peso molecular 150,0681; existem centenas de molculas com valor nominal igual a 150, mas o valor acima somente corresponde frmula C,H10O2. As tabelas elaboradas por Beynon oferecem extensas listas de combinao de C, H, N e O por peso molecular, at a terceira decimal. Uma aproximao frmula molecular de um composto pode ser obtida com base nas abundncias relativas dos istopos naturais. As molculas que contm istopos pesados devem exibir picos para valores de m/e uma ou mais unidades acima do normal, isto , pequenos picos para M + l ou M + 2. Posto que os istopos pesados ocorrem em propores definidas, possvel calcular a probabilidade de se encontrar um ou mais deles em uma certa molcula; assim sendo, pode-se prever a altura, por exemplo, do pico M + l em relao do pico do on molecular. Seja o caso de um composto desconhecido, cuja frmula pode ser C5H14N2O2 (M = I34)ou CIOH14(M = 134). Calculem-se, pois,as alturas relativas dos picos M + l para aquelas duas espcies moleculares. Como a molcula C5H14N2O2 possui cinco tomos de carbono, segue-se que deve haver 5 x 1,08 = 5,40 molculas do composto possuindo um tomo de I3C para cada 100 molculas sem nenhum tomo do istopo pesado. Portanto, considerando apenas este efeito isotpico, a altura do pico M + l em relao do pico M deve ser 5,40%. Ora, os istopos pesados dos demais elementos tambm entram com suas contribuies.

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Tcnica Quantitativa
Como em qualquer anlise cromatogrfica o software permite fazer curvas de calibrao para cada composto que identificado no s pelo tempo de reteno, como tambm pelo seu espectro, que capturado da mistura de calibrao. Os principais dados a serem definidos para cada composto so: Tempo de reteno; ons a utilizar na quantificao (quando h coeluentes pode-se definir ons diferentes para cada um, permitindo a quantificao individual, desde que no tenham os mesmos ons principais como os ismeros por exemplo); "Semelhana" aceita entre o espectro do pico na amostra e o espectro do pico no padro (geralmente "purity" que varia de O a 1000); Concentraes de cada nvel; Tanto a calibrao como a quantificao so feitas automaticamente e o usurio pode rever e modificar os dados quando aplicvel; Cada composto tem a sua curva de calibrao individual.

12. Colorimetria: Introduo e aplicaes

12.1. Introduo
Radiao Eletromagntica e sua Interao com a Matria Natureza da Radiao Eletromagntica Um certo nmero de importantes mtodos analticos, comumente denominados mtodos pticos, baseiam-se em medidas de radiao eletromagntica. , pois, til preceder o estudo de tais mtodos com uma reviso das propriedades fundamentais da radiao eletromagntica e da interao desta com o meio material. A radiao eletromagntica uma forma de energia que se propaga no espao a uma enorme velocidade normalmente em linha reta. A radiao eletromagntica, manifesta, ao mesmo tempo, propriedades ondulatrias e corpusculares. Um grande nmero de fenmenos pticos refrao, reflexo, interferncia, difrao, polarizao e disperso satisfatoriamente descrito considerando a radiao eletromagntica como um movimento ondulatrio; porm, ao contrrio de outros fenmenos ondulatrios a exemplo do som, a radiao eletromagntica no requer suporte material para a sua propagao e, como tal, transmitida no vcuo. Por outro lado, a interpretao do fenmeno foto-eltrico e de muitas interaes da radiao eletromagntica com o meio material somente tornou-se possvel admitindo que a radiao consiste de partculas discretas de energia, chamadas ftons. As propriedades ondulatrias e corpusculares no so mutuamente excludentes; pelo contrrio, a dualidade onda-partcula necessria para a descrio quantitativa do comportamento, no apenas da radiao eletromagntica, mas tambm dos eltrons e outras partculas elementares. Propriedades ondulatrias. A radiao eletromagntica um campo eltrico alternado no espao, ao qual se acha associado um campo de fora magntico. A onda eletromagntica comporta, pois, um componente eltrico e um componente magntico; os dois componentes oscilam em planos perpendiculares ao outro e perpendiculares direo de propagao da radiao eletromagntica. Nas interaes da radiao eletromagntica com o meio material, apenas o componente eltrico ativo e, portanto, o estudo do comportamento ondulatrio pode cingir-se ao componente eltrico.

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O comprimento de onda i a distncia entre dois mximos de onda sucessivas e tem unidades mais usadas so a angstrm (=108 cm), nanmetro (nm=10 = 10-7 cm ) e o micrmetro (m=104 = 10-4 cm). A freqncia (nmeros de ciclos) tem unidade em ciclos por segundo (s-1) ou hertz (Hz).

Fig 01. Onda eletromagntica Espectro eletromagntico. Quando um feixe de radiao eletromagntica envolve um nico comprimento de onda, diz-se que a radiao monocromtica; quando ele comporta toda uma variedade de comprimentos de onda, a radiao chamada policromtica ou heterocromtica. O espectro eletromagntico total abrange uma imensa faixa de comprimento de onda ou freqncias. A fig. 02 uma representao diagramtica do espectro eletromagntico em escala logartmica. O espectro eletromagntico se estende desde os raios gama, altamente energticos, at as ondas de rdio, fracamente energticas. A regio visvel do espectro apenas uma pequena faixa de comprimentos de onda dos quais o olho humano sensvel, que vai aproximadamente de 380 a 780 nm. Abaixo e acima da regio visvel do espectro, na escala dos comprimentos de onda, tm-se o ultravioleta e o infravermelho. O ultravioleta prximo estende-se at 185 nm; as radiaes de comprimentos de onda imediatamente menores formam o ultravioleta remoto. A radiao complexa que compreende os diferentes comprimentos de onda, dentro da regio visvel do espectro eletromagntico, conhecida como luz branca. A Tab. 01. d as faixas dos comprimentos de onda correspondentes s diferentes cores. A percepo da cor resulta da absoro seletiva de certos comprimentos de onda da luz incidente plos objetos materiais. Os demais comprimentos de onda so transmitidos ou refletidos e percebidos como cor do objeto. Quando a luz branca atravessa um meio, por exemplo, um vidro, transparente a certos comprimentos de onda, mas capaz de absorver outros comprimentos, o meio aparece corado ao observador. Chama-se cor complementar a cor que seria percebida se os comprimentos de onda absorvidos pudessem ser observados; a complementaridade significa que a luz transmitida e a luz absorvida seriam capazes de recompor a luz branca. Semelhantemente, um objeto opaco corado absorve certos comprimentos de onda e reflete outros quando iluminados com luz branca. Finalmente, quando um objeto aparece como branco, porque ele reflete todos os comprimentos de onda; o objeto preto quando absorve todos os comprimentos de onda.

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Fig 02. Espectro eletromagntico Tabela 01. FAIXAS DOS COMPRIMENTOS DE ONDA DAS DIFERENTES CORES

Colorimetria Visual ou Comum

A colorimetria comum baseia-se na comparao visual da colorao da soluo problema com as coloraes de solues padres semelhantemente desenvolvidas. Geralmente, empregada luz branca, natural ou artificial. A comparao visual levada a efeito com equipamento muito simples, mas est sujeita s limitaes do olho humano dificuldade em distinguir pequenas diferenas de intensidade de colorao e reduzida sensibilidade abaixo de 450 nm e acima de 675 nm. Outra limitao da colorimetria visual a decorrente do emprego de luz branca; a soluo em estudo no pode conter outra espcie absorvente Alm do componente interessado. O erro relativo na colorimetria de 3-5% ou, eventualmente, maior. As aplicaes da colorimetria se limitam determinao de constituintes menores, na faixa de 10-5 a 1%. As duas tcnicas de comparao mais usadas na colorimetria visual so o mtodo da escala de padres e o mtodo da variao da espessura. 47

Mtodo da escala de padres. A soluo problema (concentrao desconhecida), depois de convenientemente tratada para o desenvolvimento do sistema corado, comparada com uma escala de solues padres obtidas semelhantemente. A soluo problema e as solues da escala de padres, so levadas ao mesmo volume em tubos especiais com forma apropriada para a comparao colorimtrica. A comparao colorimtrica segundo o mtodo da escala de padres feita com o auxlio dos chamados tubos de Nessler. So tubos de vidro claro, de fundo chato, uniformemente calibrados. Eles so construdos em formas alta e baixa, com capacidades de 50 e 100 mL e, eventualmente, com tampa esmerilhada. Os tubos so dispostos em uma estante de madeira, que se acha munida na base com uma placa de vidro branco opalino em ngulo de 90, para refletir a luz natural de baixo para cima atravs dos tubos (Fig. 3). As solues padres so colocadas em ordem crescente de concentrao da substncia a determinar. A escala preparada de modo que a soluo problema possa ficar situada entre as solues padres dos dois tubos extremos. A comparao colorimtrica feita por observao vertical das camadas lquidas. A concentrao da soluo problema ser igual da soluo da escala com igual intensidade de colorao. Na prtica, a soluo problema fica situada quase sempre entre dois tubos adjacentes da escala. Quando a diferena de concentrao de um para outro dos tubos adjacentes suficientemente pequena, ento atribuise soluo problema uma concentrao intermediria. No sendo assim, pode-se preparar uma segunda escala de padres, com solues extremas contendo concentraes iguais s dos dois tubos adjacentes da primeira escala entre as quais ficou situada a soluo problema.

Fig. 03. Tubos de Nessler. Na prtica, a diferena de concentrao das solues padres adjacentes da escala no levada alm de certo limite, que depende da capacidade do olho humano em distinguir intensidades de colorao. Em regra, no h razo para que as concentraes das solues vizinhas de uma escala difiram em menos de 10 a 15%; quase sempre perfeitamente satisfatria uma diferena de 20%. Neste ltimo caso, o observador pode ainda alcanar uma exatido ao nvel de 5%. Suponhamos, por exemplo, que a soluo problema contenha 9,2 g do constituinte e que as solues da escala, entre as quais se situa aquela, 8 e 10 g, respectivamente. quase certo que o observador ter dificuldade em decidir se a soluo problema est mais prxima de uma ou de outra das solues padres; aceitando o valor intermedirio, 9 g, o erro ser menor do que 5%. Se a quantidade do constituinte for 9,6 g, o observador provavelmente identificar a soluo problema com a da escala contendo 10g e o erro ser mais uma vez menor do que 5%. O equipamento requerido para a prtica do mtodo da escala de padres muito simples. O sistema corado envolvido no precisa obedecer a lei de Beer (vista posteriormente), pois qualquer desvio compensado com a tcnica de comparao. Os tubos de Nessler trabalham com espessuras relativamente grandes e, assim, se prestam para a comparao de coloraes, como o amarelo, para as quais o olho tem fraca sensibilidade. Mtodo da variao de espessura: Consiste em comparar a soluo problema com uma nica soluo padro variando a relao das espessuras das duas camadas lquidas sob a observao at que seja alcanado o estado da equicolorao. Supondo que duas solues de mesmo sistema corado, contenha a substncia em diferentes concentraes C1 e C2, sejam colocadas em tubos atravs das quais se faz passar luz de igual intensidade. As espessuras das duas solues (b1 e b2) podem ser de tal modo ajustadas que as intensidades da luz por ambas transmitidas se tornem iguais., ou seja b1C1=b2C2. 48

A concentrao de uma das amostras pode ser achada desde que se conhea a concentrao da segunda e se determinem as espessuras das solues para a condio de equicolorao. Fig. 04. Colormetro Dubosq. A comparao colorimtrica segundo o mtodo da variao da espessura feita, comumente, com auxlio do colormetro de Dubosq. A Fig. 04 representa o diagrama ptico de um colormetro de Dubosq com iluminao natural. As clulas A e, A' possuem iguais dimenses e servem para receber as solues problema e padro. So construdas em duas peas soldadas entre si: os discos do fundo, planos e transparentes, e os cilindros enegrecidos para evitar a interferncia de luz estranha. As clulas so colocadas sobre suportes, que podem ser movimentados verticalmente por meio de um mecanismo de cremalheira. Os prismas de vidro B e B' possuem extremidades planas e se acham fixados estrutura do instrumento em posies correspondentes aos eixos que passam plos centros das respectivas clulas. Para variar as espessuras das camadas lquidas sob comparao, as clulas so movimentadas verticalmente para baixo ou para cima. Cada clula possui uma escala e um vernier, que permitem medir a distncia entre o fundo da clula e a face inferior do prisma com uma aproximao de 0,1 mm. A luz refletida por um espelho C, atravessando as solues contidas nas clulas,- parcialmente absorvida; a absoro em cada clula depende da concentrao da soluo e da altura da camada lquida respectivas. Os feixes de luz transmitidos pelas duas solues atravessam os respectivos prismas fixos e, por meio de um sistema de prismas de reflexo total. D c D', e da lente F, so conduzidos para a ocular G. O campo da ocular dividido ao meio, sendo um dos semicrculos iluminado pelo feixe transmitido pela soluo problema e outro, pelo feixe transmitido pela soluo padro. A comparao colorimtrica consiste em ajustar as espessuras das duas camadas lquidas de modo que os dois semicrculos se tornem igualmente corados. Para assegurar uma mais perfeita iluminao, os colormetros de Dubosq trabalham com luz artificial obtida com uma lmpada de bulbo opalino em combinao com uma lmina de vidro fosco. As clulas possuem capacidades de 5 a 25 mL. Tambm so variveis as alturas das clulas; clulas de maior altura prestam para a comparao de solues fracamente coradas. Quando se tem de usar um colormetro, preciso ajustar convenientemente a iluminao.

13. Espectrometria de chama: Introduo e aplicaes

Caractersticas da Chama Introduo

A espectroscopia de chama uma tcnica de emisso em que a amostra introduzida na chama como aerossol. As funes exercidas pela chama so: a) converso dos constituintes da amostra em estado de vapor; b) decomposio dos constituintes em tomos ou molculas simples; c) excitao eletrnica de uma frao dos tomos ou molculas resultantes. A chama deve alcanar uma temperatura suficiente para cumprir as funes enumeradas e, por outro lado, seu prprio espectro de emisso no deve interferir comprometedoramente com a observao da radiao interessada. Uma chama ordinria de ar-gs obtida com um combustor de Bunsen, por sua temperatura relativamente baixa (1 700C), excita apenas cerca de uma dzia de elementos, principalmente os alcalinos e alcalino-terrosos. 49

Porm, as chamas base de hidrognio ou acetileno so muito mais quentes e tm capacidade de excitao muito maior. A chama uma fonte de excitao mais fraca do que o arco ou a centelha. Os espectros produzidos so muito simples; as chamas excitam umas poucas raias de cada elemento. Por outro lado, em contraste com os espectros de arco ou centelha essencialmente formados de raias, os de chama freqentemente acusam bandas originadas por xidos e hidrxidos de metais. A espectroscopia de chama utiliza, principalmente, espectros de raias, mas, s vezes, tambm espectros de bandas. A maior simplicidade dos espectros de chama facilita a construo dos instrumentos para a espectroscopia de chama. tambm mais fcil fixar condies reprodutveis na excitao com a chama do que com s outras fontes energticas mencionadas. De qualquer maneira, o aspecto crtico da espectroscopia de chama o controle da fonte energtica.

Instrumental
Os instrumentos para a espectroscopia de chama isolam as raias ou bandas de emisso com filtros pticos ou monocromadores. Conforme o caso, so chamados fotmetros ou espectrofotmetros de chama.

Componentes Bsicos
Os instrumentos para a espectroscopia de chama consistem nas seguintes partes essenciais: 1) reguladores de presso e fluxmetros para os gases de alimentao da chama; 2) nebulizador (ou atomizador) para introduzir a amostra na chama em forma de aerossol; 3) combustor para produzir a chama; 4) sistema ptico base de filtro ou monocromador para isolar a radiao desejada; 5) detector associado a algum tipo de medidor ou amplificador eletrnico. A Fig. abaixo mostra, esquematicamente, os componentes bsicos de um espectrofotmetro de chama.

Fig-Diagrama esquemtico de um espectrofotmetro de chama. Reguladores de presso e fluxmetros. Para assegurar uma emisso^ constante, a chama deve ser estvel. A chama alimentada com ar (ou oxignio) e combustvel a presses constantes. A regulao da corrente do gs usado para a aspirao da soluo particularmente importante, pois uma variao da presso afeta tanto a prpria chama como a velocidade com que a soluo nebulizada. Os gases combustveis e oxidantes, para a produo de chamas, so supridos em cilindros de ao com o gs sob presso; quando o oxidante o ar, este pode ser suprido por um compressor atravs de um reservatrio mantido a uma certa presso. Manmetros apropriados indicam a presso durante a operao e permitem os ajustamentos necessrios, quando o instrumento usado. Reguladores automticos de presso, de um ou dois estgios, so usados para reduzir a presso a um valor seguro. Um regulador de um estgio acusa uma leve queda na presso de controle medida que a presso cai no cilindro. Um regulador de dois estgios mantm constante a presso de controle, a despeito de alguma queda na presso do cilindro. Os reguladores de dois estgios so mais recomendados e devem ser seguidos de algum controle adicional de fluxo, por exemplo, uma vlvula de agulha. 50

Embora as presses dos gases possam ser ajustadas mesma leitura do manmetro, cada vez que o instrumento vai ser usado, til inserir um fluxmetro na linha do cilindro ao nebulizador. O conhecimento das razes de fluxo do combustvel e do oxignio permite escolher melhor as propores dos dois componentes. Nebulizadores e combustores. O nebulizador deve introduzir a soluo da amostra na chama a uma razo uniforme e reprodutvel. Alm disso, deve ser resistente a solues corrosivas, forte e fcil de limpar. H duas categorias de nebulizadores: 1) os que introduzem o lquido pulverizado em uma cmara de condensao para reter as gotculas maiores; 2) e os que introduzem o lquido pulverizado diretamente na chama. Neste ltimo tipo, o nebulizador e o combustor formam, freqentemente, uma unidade. Quanto aos combustores, o principal requisito que produzam uma chama uniforme quando alimentados com os gases combustvel e oxidante a presses constantes. Sistema ptico. Sua funo recolher a luz emitida pela chama, isolar a parte interessada e focar esta ltima sobre o detector. Um espelho cncavo colocado atrs do combustor, com seu centro de curvatura na chama, ,, freqentemente, usado para aumentar a intensidade da luz que penetra no instrumento. Os filtros pticos no se prestam para lidar com sistemas espectrais complexos. Os instrumentos com filtros se restringem, geralmente, determinao de ltio, sdio, potssio e clcio. Um melhor desempenho conseguido com os instrumentos que incorporam um monocromador base de prisma ou rede de difrao. A combinao de uma fenda ajustvel um apropriado controle de ganho do amplificador do circuito de deteco e um seletor de comprimentos de onda permitem escolher a relao mais favorvel entre a radiao de fundo e a radiao analtica, e isolar mais eficientemente a radiao do elemento interessado. Detectores fotossensveis.. Devem responder satisfatoriamente na parte do espectro interessada e possuir sensibilidade consentnea com o nvel de iluminao prprio do instrumento. As clulas fotovoltaicas, cuja resposta de difcil amplificao, tm seu uso restrito aos sistemas capazes de emitir uma grande quantidade de energia radiante e aos instrumentos com sistema ptico que faz chegar ao detector uma faixa de energia radiante relativamente larga. Um galvanmetro com sensibilidade de microampermetro completa o circuito de medida. Os espectrofotmetros de chama, na mesma medida em que restringem a largura da faixa espectral que alcana o detector, so obrigados a empregar fototubos e unidades de amplificao do sinal. A corrente de um fototubo pode ser suficiente para permitir o emprego de um galvanmetro de alta sensibilidade como dispositivo de medida, mas comumente a corrente amplificada.

Tipos de Instrumentos
Os instrumentos so fotmetros ou espectrofotmetros de chama, conforme o uso de filtros pticos ou monocromadores para isolar a energia espectral. Os fotmetros de chama, consentaneamente com as limitaes dos filtros pticos na anlise de espectros complexos, usam chama de baixa temperatura como fonte de excitao. Os fotmetros de chama so instrumentos relativamente simples, construdos para a determinao de sdio e potssio e, s vezes, ainda clcio e magnsio. Nos fotmetros de feixe simples, a corrente gerada na clula fotovoltaica lida diretamente em um galvanmetro. possvel incorporar um circuito supressor de zero para compensar a radiao de fundo da chama. Os fotmetros de feixe duplo permitem aplicar o mtodo do padro interno. A energia radiante emitida pela chama dividida em dois feixes: um passa atravs de um filtro que transmite a radiao do elemento interessado; o outro passa por um segundo filtro que transmite a radiao do padro interno. Cada um dos feixes focado sobre uma clula fotovoltaica. As fotocorrentes produzidas so, ento, comparadas em um circuito de ponte. Os espectrofotmetros operam com chama de alta temperatura. A disperso e a resoluo dos instrumentos base de monocromadores, associadas ao uso de uma fonte mais intensa, estendem a espectroscopia de chama determinao de cerca de sessenta elementos. O baixo nvel de iluminao com que operam os espectrofotmetros de chama torna necessrio o emprego de tubos fotomultiplicadores associados a um amplificador. Os espectrofotmetros so de feixe simples ou duplo.

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 possvel construir instrumentos com canais mltiplos, que possuem, no plano focal do monocromador, uma srie de fendas para dar passagem a vrias raias espectrais ao mesmo tempo, uma de cada elemento a determinar; as diversas raias so conduzidas a circuitos de medida individuais para leituras simultneas. Em geral, um canal reservado ao padro interno.

Interferncias
As dificuldades que podem afetar a emisso na espectroscopia de chama incluem interferncias espectroscpicas e outras relacionadas com variaes das propriedades fsicas da soluo em estudo.

Interferncias Espectroscpicas
Abrangem a interferncia espectral direta, a emisso de fundo da chama, a auto-absoro, a ionizao e a influncia de nions.

Propriedades das Solues

Vrias propriedades das solues afetam a intensidade da emisso, principalmente no caso dos nebulizadores com cmara de condensao. Os nebulizadores de consumo total so pouco afetados por variaes de propriedades das solues, a menos que provoquem variaes considerveis na velocidade de fluxo da soluo para a chama. A presso de vapor e a tenso superficial influem no tamanho com que se formam as gotculas na nebulizao. presena de cidos e sais dificulta a evaporao do solvente. Gotculas maiores fazem com que uma quantidade menor do aerossol alcance o combustor, pois quanto maiores elas forem, maior ser a frao da soluo retida na cmara de condensao. A inibio devida a esta causa aumenta mais rapidamente para baixas concentraes de sais ou cidos estranhos. A principal interferncia relacionasse com o efeito da presso de vapor; por isso, a adio de cidos ou sais em alta concentrao, na amostra e nos padres, usada para minimizar o efeito dos outros. freqente a adio de cloreto de ltio com esta finalidade.

Anlise Quantitativa com Espectroscopia de Chama

A espectroscopia de chama apresenta vantagens e limitaes quando comparada com a espectroscopia de emisso baseada na excitao com arco e centelha. Trabalha com solues, o que representa ou no uma particularidade favorvel, conforme a natureza da amostra. , por outro lado, menos verstil em virtude da emisso de fundo e outros tipos de interferncia. A chama excita um nmero menor de elementos do que o arco e a centelha. Em compensao, a espectroscopia de chama opera com equipamento muito mais simples. A espectroscopia de chama tem preciso maior do que a espectroscopia de emisso com registro fotogrfico. A preciso da primeira se situa ao nvel de 2%; quando a amostra precedida e seguida por padres com composies muito semelhantes da amostra, a preciso pode chegar a 1%. A sensibilidade da espectroscopia de chama varia grandemente, conforme o elemento e a temperatura da chama. Esta tcnica de espectroscopia permite determinar cerca de 40 elementos ao nvel de 1g.mL-1 ou menos; muitos elementos adicionais podem ser determinados em nveis de concentrao mais altos. Cerca de um tero dos elementos determinvel base de bandas espectrais; o grupo inclu, predominantemente, os metais alcalino-terrosos e das terras-raras. A espectroscopia de chama encontra um amplo campo de aplicao na anlise de uma grande variedade de materiais, que incluem fluidos biolgicos, materiais de origem vegetal, alimentos, vidros, guas naturais etc. O mtodo de largo uso na determinao de metais alcalinos.

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Mtodos de Avaliao
Os mtodos de avaliao usam solues padres preparadas a partir de sais espectroscopicamente puros. Geralmente, prepara 1000 g mL-1. Com esta so obtidas, mediante diluio, as solues padres com as concentraes desejadas. recomendvel conservar as solues em frascos de polietileno ou vidro quimicamente resistente. Vrios so os mtodos de avaliao usados. Intensidade da emisso versus concentrao. Na ausncia de interferncias, a construo da curva de calibrao simples. Inicialmente, preparada uma srie de padres com diferentes concentraes do elemento interessado. Ento, com o instrumento munido do filtro apropriado ou fixado no comprimento de onda indicado, introduz-se gua deionizada no nebulizador e l-se a emisso de fundo da chama; ou, se o instrumento permitir, ajustam-se os controles de supresso de zero. Em seguimento, introduz-se o padro mais concentrado e ajusta-se a sensibilidade do instrumento para alcanar a leitura mxima da escala ou, ento, uma leitura qualquer prefixada. As operaes so repetidas at obter-se uma duplicao das leituras com a aproximao de uma sobre 100 divises da escala. Finalmente, so introduzidos os vrios padres com concentraes mar baixas e anotadas as leituras correspondentes. A curva de calibrao traada com as leituras do instrumento lanadas sobre a ordenada e as concentraes sobre a abscissa. As leituras dos padres devem ser conferidas antes e depois de cada srie de anlises. As curvas de calibrao so lineares, dentro de regies limitadas. Quando no essencialmente linear, a curva de calibrao tem de ser preparada com um nmero maior de padres. Se necessrio, so preparados padres adicionais que enquadrem estreitamente a amostra. Mtodo da adio. Comea-se preparando uma curva de calibrao. O mtodo da adio envolve leituras de emisso obtidas com duas solues: uma soluo A contendo uma alquota da soluo desconhecida, e uma soluo B contendo a mesma quantidade da soluo desconhecida acrescida de uma quantidade medida de uma soluo padro do elemento interessado. As quantidades do elemento interessado contidas nas duas solues so, ento, determinadas atravs de medidas das intensidades de emisso, com auxlio da curva de calibrao. A curva de calibrao dever ser essencialmente linear. Subtraindo-se a quantidade do elemento achada para a soluo A daquela achada para a soluo B, deve-se obter uma quantidade do elemento igual quela adicionada, sempre que no ocorram depresso ou exaltao. Entretanto, quando ocorre um desses efeitos, a quantidade do elemento achada por subtrao ser maior ou menor do que a quantidade adicionada. Ento, o verdadeiro teor do elemento na soluo A achado multiplicando-se o teor observado por um fator que corrija a interferncia. Este fator de correo obtido dividindo-se a quantidade do elemento adicionada soluo B pela quantidade do elemento achada subtraindo-se o teor do elemento observado na soluo B do teor observado na soluo A. A modalidade do mtodo da adio baseado em uma srie de padres d resultados ainda melhores. A iguais volumes da soluo-problema so adicionadas solues contendo diferentes quantidades conhecidas do elemento interessado; as solues so diludas ao mesmo volume final. As imensidades de emisso (corrigidas com respeito emisso de fundo) so, ento, representadas contra a concentrao dos incrementos das solues padres adicionados soluo desconhecida. A linha extrapolada leitura de emisso zero d a quantidade do elemento na amostra original pela interseo sobre o eixo da concentrao.

Concentrao do elemento adicionado,g.mL-1 Fig. Ilustrao do mtodo de adio. 53

Mtodo do padro interno. O padro interno um elemento adicionado amostra em concentrao conhecida. A relao das intensidades de uma raia do elemento interessado e de uma raia do padro interno serve como ndice da concentrao do primeiro. A relao das intensidades para uma srie de padres lanada contra a concentrao do elemento interessado d a curva de calibrao. A intensidade de cada raia corrigida com respeito radiao de fundo no ponto em que a raia se situa. Na espectroscopia de chama, usa-se freqentemente, ltio como padro interno. O ltio apresenta caractersticas fsicas e qumicas bastante assemelhadas s de sdio e potssio; por outro lado, as energias de excitao das raias de ressonncia de sdio, potssio e ltio so tambm semelhantes. Entretanto, o ltio um padro pouco satisfatrio para metais alcalino-terrosos, pois as respectivas caractersticas fsicas e qumicas so muito dessemelhantes.

14. Espectrometria de Absoro Atmica

Princpios da Absoro Atmica
Os princpios da espectrofotometria de absoro atmica foram expostos, pela primeira vez, por Walsh. O mtodo baseia-se na absoro da energia radiante pelas espcies atmicas neutras, no-excitadas, em estado gasoso. Cada espcie atmica possui um espectro de absoro formado de uma srie de estreitas raias caractersticas devidas a transies eletrnicas envolvendo os eltrons externos. A maioria dessas transies corresponde a comprimentos de onda nas regies ultravioleta e visvel. Uma certa espcie atmica, neutra e no estado fundamental, capaz de absorver radiaes de comprimentos de onda iguais aos das radiaes que ela, quando excitada, capaz de emitir. Os princpios da espectrofotometria de absoro atmica so essencialmente os mesmos da absorciometria baseada no uso de solues moleculares. Na absoro atmica, o elemento a determinar levado condio de uma disperso atmica gasosa atravs da qual se faz passar, ento, o feixe de radiao de uma fonte apropriada. O processo usual consiste em introduzir a soluo da amostra, na forma de um aerossol, em uma chama apropriada. A chama cumpre, assim, a funo da clula na absorciometria convencional. A extenso da absoro, que se processa custa de transies eletrnicas do estado fundamental a um estado energtico mais alto, uma medida da populao de tomos do elemento responsvel presentes na chama e, portanto, da concentrao do elemento na amostra. Entre as potncias radiantes do feixe antes e depois da interao com os tomos absorventes existe uma relao anloga lei de Beer. Os problemas referentes chama e aos espectros de chama e, tambm, os processos que ocorrem quando um aerossol livrado em uma chama j foram estudados anteriormente para o caso da espectroscopia de chama. temperatura ambiente os tomos isolados se encontram em seu estado fundamental; por exemplo, o eltron externo do tomo de sdio ocupa a orbital 3s. A espectrofotometria de absoro atmica e a espectroscopia de chama so mtodos que tm de comum o fato de ambos introduzirem a amostra na chama em forma de um aerossol. Porm, os dois mtodos diferem fundamentalmente entre si. Na espectroscopia de chama mede-se a intensidade da radiao emitida plos tomos excitados; e, na absoro atmica, o objeto da medida a radiao absorvida plos tomos neutros no estado fundamental. A espectrofotometria de absoro atmica oferece uma srie de vantagens sobre a espectroscopia de chama. Uma delas relaciona-se com o fato de o nmero de tomos no estado fundamental ser vrias ordens de grandeza maior do que o nmero de tomos excitados; da resulta uma sensibilidade muito maior para a tcnica da absoro atmica. J foi mencionado que as estreitas raias de absoro asseguram um alto grau de seletividade para a absoro atmica. Finalmente, h a considerar os efeitos das variaes de temperatura sobre as populaes dos tomos no excitados e excitados na chama. A frao dos tomos excitados, que relativamente pequena, acha-se relacionada exponencialmente com a temperatura. Em vista disso, as variaes de temperatura afetam notavelmente o nmero de tomos excitados, mas elas tm um efeito praticamente negligencivel quanto ao nmero de tomos no-excitados. O resultado que o processo da absoro no diretamente influenciado pela temperatura da chama; em contraste, o processo da emisso grandemente afetado pelas variaes de temperatura. 54

O processo de absoro apenas indiretamente influenciado pelas flutuaes de temperatura; a principal razo que o nmero total de tomos produzidos na chama a partir da amostra ordinariamente aumenta com a temperatura. De qualquer maneira, o efeito indireto torna necessrio um controle razovel da temperatura nas medidas de absoro atmica.

Espectrofotmetros de Absoro Atmica

Os componentes fundamentais de um espectrofotmetro de absoro atmica compreendem uma fonte, que fornece as raias de emisso da espcie atmica interessada, um nebulizador-combustor, para introduzir a amostra em forma de um aerossol na chama, um monocromador para isolar o comprimento de onda desejado e um sistema apropriado para medir a potncia do sinal que -alcana o detector fotossensvel.

Fig. Componentes fundamentais de um espectrofotmetro de absoro atmica Fontes de radiao. As fontes usadas na espectrofotometria de absoro atmica so as lmpadas de descarga e as lmpadas de ctodo oco. Ordinariamente, cada elemento a determinar requer uma lmpada prpria. As lmpadas de descarga produzem um espectro de raias por meio da passagem de uma corrente eltrica atravs de vapor do metal. As fontes deste tipo so particularmente teis na espectrofotometria de absoro atmica para produzir espectros dos metais alcalinos e do mercrio. As lmpadas de ctodo oco so o tipo de fonte de uso mais amplo. A lmpada de ctodo oco consiste de um tubo de vidro com grossas paredes, contendo nenio ou argnio a baixa presso (1 a 2 mm), provido de um ctodo feito do elemento interessado, comumente fechado em uma das extremidades (10 a 20 mm de dimetro), e um nodo em forma de um fio de tungstnio.

Fig. Lmpada de alta intensidade Nebulizadores-combustores. Um componente importante na construo de um espectrofotmetro de absoro atmica o dispositivo que serve para dispersar a amostra em forma de partculas atmicas neutras no caminho ptico do instrumento. Vrios tipos de sistemas tm sido investigados para este fim: a) fornos, em que a amostra levada rapidamente a uma alta temperatura; b) arcos ou centelhas; c) dispositivos de projeo, em que a .amostra, colocada sobre um ctodo, bombardeada por ons positivos de um gs; d) nebulizadores--combustores, em que a amostra introduzida como um aerossol em uma chama produzida pela queima de um gs combustvel. At o presente, o sistema do nebulizador-combustor o que se mostrou mais eficiente e o nico empregado nos instrumentos comerciais. 55

A introduo da amostra a uma velocidade constante na chama crtica. A amostra introduzida em forma de soluo com o auxlio de um nebulizador, da mesma forma que na espectroscopia de chama. Monocromadores. Os espectrofotmetros de absoro atmica so construdos com monocromadores capazes de isolar a raia analtica e de bloquear as raias ou bandas vizinhas, bem como a radiao de fundo da chama tanto quanto possvel. Em geral, requerida uma fenda ajustvel para dar passagem a uma faixa espectral com uma amplitude de 0,5 . No que se refere preciso e exatido fotomtricas, o dispositivo monocromador deve deixar passar a maior quantidade de luz possvel; em outras palavras, a abertura da fenda deve ser to larga quanto for tolervel. H elementos, como ferro, nquel e cobalto, cujas raias de ressonncia se acham muito estreitamente rodeadas por outras; ento, preciso que o monocromador seja capaz de isolar faixas com amplitudes de aproximadamente 2 . Para a maioria dos elementos, entretanto, opera-se com faixas de 7 a 20 . Por outro lado, o monocromador deve cobrir a faixa de comprimentos de onda de 1 950 a 8 500 . Os espectrofotmetros de absoro atmica so ordinariamente construdos com redes de difrao. Detectores e indicadores. Os componentes do sistema detector-indicador de um espectrofotmetro de absoro atmica so, no essencial, idnticos aos de um espectrofotmetro tpico para operar com solues nas regies ultravioleta e visvel. Em geral, os instrumentos empregam tubos fotomultiplicadores para converter a energia radiante em sinal eltrico. O sistema eletrnico do detector-indicador deve ser capaz de responder a um sinal modulado da fonte sem interferncia da chama na qual introduzida a amostra. A modulao do sinal da fonte necessria para eliminar esta interferncia. A chama emite um espectro contnuo resultante da excitao das molculas do combustvel; alm disso, a chama emite um espectro de raias oriundas da excitao dos tomos dos metais presentes na amostra. s temperaturas das chamas, a f rao dos tomos que sofre excitao trmica pequena; de qualquer maneira, os poucos tomos do elemento interessado que chegam a ser excitados emitem radiao correspondente raia de absoro escolhida para a anlise e, portanto, constituem uma sria fonte de erro. A maior parte da radiao da fonte removida mediante colocao do monocromador entre a chama e o detector; entretanto, o monocromador transmite a raia de emisso correspondente ao comprimento de onda do pico de absoro. Ento, a potncia radiante observada P no ser P = P0 P0 em que Pa a potncia da radiao absorvida; de fato, ser P = P0 Pa + Pe, em que Pe a potncia da raia emitida pela chama mais a potncia da correspondente radiao de fundo.

Tipos de instrumentos
Os espectrofotmetros de absoro atmica podem ser de feixe simples ou de feixe duplo. A Fig. abaixo representa um sistema de feixe simples, em que a radiao da fonte modulada com um interruptor rotatrio. O sistema de feixe simples est sujeito aos efeitos da variabilidade na emisso da fonte e na sensibilidade do detector.

Fig. Diagrama de um espectrofotmetro de absoro atmica com feixe simples No sistema de feixe duplo representado na Fig. abaixo, o feixe de radiao provindo da fonte dividido em duas partes por meio de um espelho rotatrio com setores refletores e transmissores alternados separados por pores opacas. Um dos feixes resultantes (feixe da amostra) atravessa a chama, ao passo que o outro (feixe de referncia) a contorna. Os dois feixes, aps recombinao por meio de um espelho semitransparente, passam por um monocromador reticular e alcanam o detector. O sinal do circuito eletrnico aparece como a relao dos feixes da amostra e de referncia. Assim, os efeitos das variaes da fonte e da sensibilidade do detector so eliminados. 56

Fig. Diagrama de um espectrofotmetro de absoro atmica de feixe duplo.

Anlise Quantitativa por Absoro Atmica

A espectrofotometria de absoro atmica permite determinar em torno de 65 elementos na faixa de 1 a 10 p.p.m., com uma preciso de 1% ou mesmo melhor. A relao dos elementos determinveis inclui todos os metais e semi-metais e exclui os elementos, como enxofre, fsforo, halognios e outros, cujas raias de ressonncia se situam na regio de absoro atmosfrica. A raia de ressonncia do arsnio (1 937 ) o mais baixo limite em que o mtodo pode ser praticado. O csio o elemento com raia de ressonncia de comprimento de onda mais alto (8521 ). A espectrofotometria de absoro atmica apresenta bons limites de deteco. A detectabilidade de um dado elemento depende, de uma parte, de sua prpria estrutura atmica e, de outra, do equipamento usado. preciso distinguir a sensibilidade e o limite de deteco. A sensibilidade a concentrao do elemento, em soluo aquosa, que produz uma absoro de 1% da energia radiante incidente; comumente expressa em g/mL (com gua como solvente). A principal utilidade do parmetro a de permitir a escolha das concentraes dos padres a serem usadas; em geral, a faixa de concentrao tima de 15 a 100 vezes o valor da sensibilidade. O limite de deteco a concentrao mnima do elemento em soluo aquosa capaz de ser detectada. O limite de deteco, em absoro atmica, definido como a concentrao que produz uma absoro equivalente a duas vezes a magnitude da flutuao do fundo (absoro zero). Nas medidas de absoro atmica, a melhor preciso alcanada quando a absorbncia se situa na faixa do 0,15 a 1,00 (cerca de 70 a 10% de transmitncia). Para isso, as concentraes devem ser consentaneamente ajustadas. Quando se faz uso de padro interno com instrumento de dois canais, a faixa de absorbncia pode ser ampliada com razovel preciso. No caso em que a concentrao do elemento interessado exceda os valores para a absorbncia tima, cabe o recurso de girar o combustor, se do tipo de fenda, em torno de um ,eixo perpendicular sua cabea, de modo a diminuir o percurso ptico atravs da chama; uma outra possibilidade o uso de uma raia menos sensvel do elemento. O fato de cada elemento possuir um espectro de absoro tpico confere espectrofotometria de absoro atmica o carter de um mtodo especfico. Verdadeiras interferncias espectrais so raras, pois as raias emitidas pelas fontes usuais so muito estreitas (0,01 a 005 ). As medidas de absoro atmica so influenciadas por certas variveis analticas, tais como as velocidades de fluxo dos gases combustvel e oxidante e a velocidade de introduo da amostra na chama; todos estes parmetros devem ser convenientemente controlados.

15. Espectrometria de Emisso

O fundamento da espectroscopia de emisso a propriedade que tm os tomos e os ons monoatmicos em estado gasoso, quando trmica ou eletricamente excitados, de emitir radiaes caractersticas nas regies ultravioleta e visvel. O conjunto das radiaes caractersticas emitidas por uma espcie atmica ou inica constitui o seu espectro de emisso. A caracterizao do comprimento de onda de uma radiao permite identificar o elemento emissor. Por outro lado, a medida da intensidade da radiao pode servir para a determinao da concentrao do elemento emissor. A espectroscopia de emisso requer o uso de fontes energticas relativamente intensas. A fonte energtica exerce duas funes. Em primeiro lugar, ela deve ser capaz de fornecer a energia suficiente para volatilizar a amostra e converter os componentes individuais em tomos ou ons monoatmicos. 57

Em segundo lugar, a fonte deve suprir energia suficiente para promover a excitao eletrnica das espcies atmicas ou inicas. As fontes energticas mais usadas na espectroscopia de emisso so a chama, o arco e a centelha. Existem trs distintos tipos de espectros de emisso, que podem ser classificados segundo sua origem e forma: o espectro contnuo, o espectro de raias e o espectro de bandas. O espectro contnuo produzido plos sistemas condensados. Quando a energia radiante emitida por um slido incandescente dispersa com o auxlio de um monocromador, resulta um espectro formado de radiaes com todos comprimentos de onda dentro de uma ampla faixa espectral. A distribuio dos comprimentos de onda depende da temperatura e assemelha-se do corpo negro. Em contrapartida, os espectros produzidos por gases incandescentes so descontnuos, isto , compostos de radiaes com comprimentos de onda discretos. Todavia, preciso distinguir, entre os espectros descontnuos, os espectros de raias formados por tomos ou ons monoatmicos isolados e os espectros de bandas produzidos por molculas isoladas. Somente os tomos ou os ons monoatmicos emitem, quando convenientemente excitados, radiaes com comprimentos de onda definidos, que so caractersticos da espcie emissora. As espcies atmicas ou inicas so excitadas a nveis energticos mais altos, atravs de transies eletrnicas quantizadas. Quando as espcies excitadas retornam ao estado fundamental ou a nveis energticos mais baixos, h emisso de radiaes caractersticas. O conjunto das radiaes emitidas por uma espcie atmica neutra formam o espectro atmico ou normal do elemento; o espectro emitido por uma espcie inica chamado espectro inico. Quando uma espcie molecular levada a uma fonte energtica suficientemente forte para decompor as molculas em seus tomos componentes, o espectro emitido um espectro de raias. Entretanto, existem espcies moleculares, incluindo espcies transitrias como os radicais CN e OH, que se mantm ntegras e produzem espectros moleculares. Os espectros moleculares consistem de um nmero extraordiariamente elevado de raias muito prximas, que formam agrupamentos chamados bandas. Os espectros de banda so tambm o resultado de transies entre estados energticos. Apenas os nveis energticos das molculas so muito mais numerosos e prximos do que os das espcies atmicas neutras ou ionizadas, comportando trs fatores que so as energias eletrnica, vibracional e rotacional, todas quantizadas. A complexidade do espectro molecular devido sobreposio de variaes vibracionais e rotacionais s transies eletrnicas. A espectroscopia de emisso faz uso dos espectros de raias, atmicos ou tnicos. A distribuio dos comprimentos de onda nos espectros de raias caracterstica do elemento emissor. Porm, tambm importante considerar a natureza da fonte, pois o tipo de espectro emitido atmico ou inico depende da energia da fonte de excitao. 5 interessante lembrar ainda que a energia radiante emitida por um arco ou centelha revela a presena dos trs tipos de espectros sobrepostos. H uma radiao de fundo contnua emitida plos eltrodos aquecidos, mais ou menos fracos. O uso de eltrodos de carvo em presena de ar atmosfrico produz bandas de cianognio devidas presena de radicais CN, tambm mais ou menos fracas. Sobre os espectros de fundo e de bandas ressalta, entretanto, o espectro de raias emitido pelas espcies atmicas componentes da amostra. Origem dos espectros de raias. Ainda nos primrdios da espectroscopia de emisso foi observado que os espectros de muitos elementos comportavam o agrupamento das raias espectrais em um certo nmero de sries. Assim, para os metais alcalinos foram indicadas quatro sries, que receberam em ingls as designaes "principal", "sharp", "diffuse" e "fundamental", como uma tentativa para descrever a aparncia fsica das raias. A nomenclatura da moderna espectroscopia de emisso conserva o uso das letras S, P, D e F para caracterizar as diferentes espcies de nveis energticos dos tomos. O modelo atmico de Bohr-Sommerfeld d uma descrio satisfatria dos espectros de emisso atmicos e inicos. Cada rbita pode ser considerada como correspondendo a um nvel energtico. Quando um tomo se encontra em condies normais, cada eltron ocupa uma rbita correspondente ao seu mais baixo nvel energtico; ento, o tomo se encontra no estado fundamental. Se o tomo sofrer uma violenta coliso com uma partcula (tomo, on, eltron ou molcula) dotada de grande velocidade, os seus eltrons externos ou de valncia, mais frouxamente ligados ao sistema, se transferem para nveis energticos mais altos (rbitas mais afastadas no ncleo). A espcie excitada resultante sempre instvel e quando no se desativa por coliso, retorna ao estado fundamental perdendo a energia da excitao na forma de radiao eletromagntica. 58

Um eltron excitado pode retornar rbita original atravs de uma transio direta ou, eventualmente, atravs de uma srie de transies passando por nveis energticos intermedirios.

Espectrgrafos
A anlise dos espectros de emisso requer um arranjo ptico capaz de separar convenientemente as diferentes freqncias. No sentido mais amplo, chama-se espectroscpio qualquer instrumento usado para produzir e observar os espectros de emisso; em sentido restrito, o termo empregado para designar os instrumentos com observao visual. O espectrgrafo um espectroscpio munido de uma cmara fotogrfica para registrar o espectro; o registro fotogrfico do espectro denominado espectrograma. Por extenso, o termo espectrgrafo tambm serve para designar os instrumentos com deteco fotoeltrica.

Fig. Diagrama de um espectroscpio prismtico simples. O sistema ptico de um espectroscpio , essencialmente, um monocromador com um prisma ou uma rede de difrao como elemento de disperso. A Fig. acima mostra o diagrama de um espectroscpio simples e serve para ilustrar a funo de cada componente fundamental do sistema. A lente L1 recolhe a radiao heterognea provinda da fonte focando-a sobre a fenda, que tem a forma de um estreito retngulo. Os raios que penetram no monocromador atravs da fenda so tornados paralelos pela lente colimadora L2 antes de alcanar o elemento de disperso. O prima separa, ento, as diferentes freqncias que compem a radiao heterognea. Finalmente, a lente L3 foca a luz dispersa sobre o dispositivo de deteco, por exemplo, uma pelcula fotogrfica estendida ao longo da curva focal do instrumento. Aps a exposio e a revelao da emulso, as vrias freqncias presentes aparecem registradas como raias pretas, cada uma das quais uma imagem aproximadamente monocromtica da fenda de entrada, A posio da raia determinada pela freqncia da radiao; por sua vez, o grau de enegrecimento da raia funo da intensidade da radiao. A utilidade e a eficincia de um espectroscpio dependem das caractersticas de construo do instrumento no que concerne faixa de operao, a extenso da disperso, o tipo de disperso e o poder de resoluo. A faixa de comprimentos de onda, ao longo na qual o instrumento capaz de operar, depende, de uma parte, dos limites de transparncia do material usado na construo dos componentes do sistema ptico. A transparncia do vidro se estende de 3 500 a 30 000 e a do quartzo, de 1 800 a 35 000 . A faixa operacional depende, de outra parte, do tipo de detector usado. O registro fotogrfico, por exemplo, estendese, de um lado, at o ultravioleta remoto (abaixo de 2000 ) e, do outro, at o infravermelho prximo (12000 ). Ora, a regio espectral de maior importncia na espectroscopia de emisso se situa entre 2 500 e 4 000 A. Isso significa que os componentes pticos atravs dos quais a radiao transmitida devem ser de quartzo ou slica fundida e que o detector deve ser sensvel no ultravioleta. Para operar abaixo de 2 000 , a espectroscopia requeriria um instrumento evacuado em virtude da absoro das radiaes pelo ar.

Anlise Espectrogrfica Qualitativa

A anlise espectrogrfica permite a fcil identificao de cerca de 70 elementos, que compreendem os metais e alguns no-metais (por exemplo, As, B, P e Si). Com o auxlio de tcnicas especiais, possvel obter o espectro de qualquer elemento e, portanto, identificar a generalidade dos elementos. Cada elemento emite radiaes com comprimentos de onda caractersticos; alm disso, a distribuio das respectivas raias no espectrograma nica para cada elemento. 59

A identificao de uma nica raia com grande exatido ou de trs ou mais raias com exatido aproximada suficiente para configurar a presena de um elemento. Ainda importante que um operador experimentado, avaliando subjetivamente o grau de enegreeimento de uma raia, pode fazer rapidamente uma estimativa da concentrao do elemento na amostra com a aproximao de uma ordem de grandeza. A tcnica da anlise espectrogrfica qualitativa consiste em excitar a amostra, registrar o espectrograma e identificar as raias. Em geral, faz-se uso de um arco de corrente direta. Uma amostra de 2 a 50 mg do material em estudo acondicionada na cavidade de um eltrodo de grafita; ou, ento, a soluo evaporada sobre a cavidade. Um segundo eltrodo, tambm de grafita, completa o arco. A corrente e o tempo de exposio so ajustados para garantir a completa volatilizao da amostra; so usuais correntes de 5 a 30 A para 20 a 100 segundos. O eltrodo contendo a amostra geralmente tomado como ctodo por ser sua temperatura mais alta. A sensibilidade da anlise espectrogrfica qualitativa depende do elemento, da natureza e da quantidade da amostra, do tipo de excitao e do instrumento usado. A identificao dos elementos feita base da localizao das raias mais persistentes ou raias ltimas, que so as raias mais sensveis dos elementos, isto , as ltimas a desaparecer com a .gradual diminuio da concentrao do elemento respectivo. A maior parte das raias ltimas se encontra no ultravioleta. Em geral, elas resultam de transies s-p. Ordinariamente, as raias so identificadas mediante comparao direta com espectrogramas de materiais de referncia. O espectro da amostra e o espectro de referncia so registrados um abaixo do outro sobre a mesma chapa ou pelcula, a fim de facilitar a comparao. Por ocasio do registro contguo dos espectros, preciso evitar deslocamentos laterais da chapa ou pelcula fotogrfica. No caso dos espectrgrafos livres de astigmatismo, usa-se o diafragma de Hartmann, que uma lmina de ao com vrias aberturas retangulares, cada uma das quais podendo ser justaposta fenda mediante deslocamento horizontal do diafragma. O dispositivo permite registrar sucessivamente vrios espectros ao longo do eixo vertical da chapa ou pelcula sem necessidade de mover a mesma.

Vantagens e Limitaes da Anlise Espectrogrfica

A espectrografia um notvel instrumento da anlise qumica. Embora a totalidade dos elementos possa ser induzida a emitir radiaes na regio ultravioleta e visvel, as dificuldades prticas relacionadas com a excitao da maioria dos elementos no-metlicos limitam o uso da espectrografia anlise de cerca de 70 elementos, a maioria dos metais e alguns no-metais (por exemplo, P, Si, As e B). Duas caractersticas fazem da espectrografia um mtodo analtico particularmente importante. A primeira a especificidade do mtodo, que resulta do carter nico do espectro de emisso de cada elemento. A segunda a sua elevada sensibilidade, determinada pela grande eficincia das fontes de excitao e dos dispositivos de deteco utilizados. A aplicao da espectrografia na anlise qualitativa oferece vantagens sem paralelo. A tcnica relativamente simples. A amostra, via de regra, exige um mnimo ou mesmo nenhum tratamento preliminar. O mtodo rigorosamente especfico e permite identificar a maioria dos elementos. Ele se presta especialmente para ser usado quando apenas se dispe de pequenas amostras do material a analisar. Em alguns casos, basta 0,1 mg do material para realizar uma anlise qualitativa completa; porm, o melhor dispor-se de uma amostra de 10 mg ou mais. Os limites de deteco variam de elemento a elemento, mas eles se situam na faixa de partes por milho a partes por bilho. A anlise espectrogrfica d um registro permanente dos resultados. Ela particularmente til no caso de materiais de difcil tratamento com os mtodos por via mida, a exemplo de vidros, escrias e silicatos naturais. A anlise espectrogrfica quantitativa se aplica determinao de elementos quando no interessa conhecer a forma de combinao em que os mesmos se encontram e, geralmente, quando representam menos de 5% na amostra. As principais vantagens da anlise espectrogrfica quantitativa so a pequena quantidade de amostra requerida, a rapidez na execuo do trabalho, a simplicidade das operaes analticas e a grande sensibilidade do mtodo. Amostras de 10 mg podem ser suficientes para a determinao de mais de 10 elementos. 60

A espectrografia convencional, depois de convenientemente preparados os padres e a curva de calibrao, permite determinar freqentemente 5 ou mais elementos, sem maiores tratamentos da amostra, em cerca de 30 minutos. Os espectrgrafos de leitura direta chegam a determinar uma dezena de elementos ou mesmo mais em 1 a 2 minutos. A preciso na anlise espectrogrfica depende do equipamento e dos mtodos utilizados. Na espectrografia com deteco fotogrfica base do mtodo do padro interno, os erros relativos podem ser reduzidos a 2 a 5%. Ora, na anlise de traos este nvel de preciso quase sempre tolervel e no significativamente menos favorvel do que o de outros mtodos. Em relao determinao dos constituintes maiores, a preciso da espectrografia convencional evidentemente deixa a desejar.

16. Espectrometria de Absoro Molecular nas Regies Ultravioleta e Visvel

Introduo
A absoro molecular nas regies ultravioleta e visvel tem um valor incomum para a Qumica Analtica. Os espectros de absoro de espcies inicas e moleculares em soluo nestas regies consistem, em comum, em bandas relativamente largas, em virtude da sobreposio de variaes da energia vibracional (e, s vezes, tambm da energia rotaciortal) s transies eletrnicas,. A cada transio eletrnica se associa uma srie de raias muito prximas a ponto de originar um espectro aparentemente contnuo. H, tambm, um alargamento das raias devido ao de foras moleculares, que atuam em extenso considervel entre os ons ou molculas muito prximos uns dos outros no meio condensado. Quando um feixe de radiao monocromtica atravessa uma soluo que contenha uma espcie absorvente, uma parte da energia radiante absorvida, enquanto a outra transmitida pelo meio."Chama-se potncia radiante de um feixe de radiao colimado quantidade de energia transportada pelo feixe por segundo. A razo da potncia radiante do feixe transmitido P para a potncia radiante do feixe incidente P i a transmitncia T para o comprimento de onda da radiao (e a espessura da camada lquida). Isto : T=P/P0 A distribuio espectral da energia radiante absorvida por uma espcie molecular pode ser descrita mediante lanamento dos valores da transmitncia em funo do comprimento da onda da radiao. A frao absorvida da radiao no mensurvel diretamente, mas a atenuao sofrida pelo feixe de radiao (ou seja, a transmitncia) pode ser relacionada concentrao e ao comprimento do percurso ptico atravs da lei de Beer. Lei de Beer A lei fundamental da absorciometria a lei de Beer. ela que permite estabelecer a necessria relao entre a transmitncia e a concentrao da espcie absorvente. Vejamos o que se passa quando um feixe colimado de radiao monocromtica atravessa uma clula de absoro retangular. Seja dP a atenuao da potncia radiante em uma camada infinitamente pequena db, ou seja, a quantidade de radiao absorvida nesta camada. A absoro envolve uma interao entre ftons e centros (tomos ou molculas) absorventes. O nmero de possveis colises entre ftons e centros absorventes dentro da camada proporcional ao nmero de centros absorventes existentes na mesma e ao nmero de ftons que a atravessam. Se o nmero de centros absorventes duplica, outro tanto ocorre com o nmero de colises; a duplicao do nmero de ftons tambm duplica o nmero de colises. Portanto, a atenuao da potncia radiante, dP, diretamente proporcional a N, o nmero de centros absorventes, e P, o nmero de ftons por unidade de rea da seo transversal por segundo. O termo log P o/P definido como absorbncia e representado pelo smbolo A. Ento, log P o/P = - log T = A = ebc O valor da absortividade molar e caracterstico da espcie absorvente em um solvente particular e a um comprimento de onda particular. O valor de independente da concentrao e do comprimento do percurso da radiao. Quando a concentrao da espcie absorvente dada em gramas por litro, e deve ser substitudo por o, constante chamada simplesmente absortividade. 61

A Eq. acima uma das formulaes matemticas da lei de Beer. V-se que a absorbncia (isto , o logaritmo da .transmitncia tomado com sinal negativo) o produto da absortividade, do comprimento do percurso ptico e da concentrao da espcie absorvente. A absorbncia de uma soluo diretamente proporcional concentrao da espcie absorvente quando se fixa o comprimento do percurso; e diretamente proporcional ao comprimento do percurso quando se fixa a concentrao. A transmitncia e a absorbncia so duas quantidades importantes na absorciometria.

Componentes bsicos dos absorcimetros Absorcimetros: Fotmetros e Espectrofotmetros

Os instrumentos apropriados para a medida da transmitncia (e absorbncia) podem ser genericamente denominados absorcimetros. Eles se dividem em duas categorias, conforme o tipo de dispositivo usado para isolar as faixas espectrais limitadas em que medida a transmitncia: os fotmetros e os espectrofotmetros. Os fotmetros selecionam a faixa espectral com o auxlio de filtros de absoro ou de interferncia e operam, via de regra, apenas na regio visvel. Os fotmetros contam com um nmero relativamente limitado de filtros e as faixas por estes isoladas so bastante largas e de baixa pureza espectral. Os espectrofotmetros fazem uso de monocromadores de prisma ou rede de di-frao para isolar as faixas espectrais desejadas. Os espectrofotmetros podem ser construdos com caractersticas muito variadas para operar nas regies ultravioleta e visvel. Quando eles devem operar tanto no ultravioleta como no visvel, so necessrios componentes pticos de quartzo e um ou mais detectores sensveis para cobrir o extenso campo espectral em que o instrumento pode operar. Os instrumentos que cobrem apenas a regio visvel possuem componentes pticos de vidro. Os espectrofotmetros de qualidade superior isolam feixes espectrais com larguras efetivas de apenas dcimos de nm; porm, os aparelhos mais simples isolam faixas de 10 a 20 nm. Uma das vantagens dos espectrofotmetros que eles permitem variar continuamente os comprimentos de onda isolados ao longo da regio espectral abrangida pelo instrumento. Fotmetros tpicos. Os fotmetros so classificados em duas categorias: de feixe simples e de feixe duplo. Nos fotmetros de feixe simples, o indicador ajustado em 100% T (A 0) em relao ao solvente e, ento, a transmitncia (ou a absorbncia) lida diretamente na escala do indicador. A Fig. Acima representa o diagrama de um fotmetro de feixe simples. A energia radiante, procedente da lmpada de tungstnio, delimitada no percurso ptico, com o auxlio da abertura varivel. O filtro seleciona a faixa espectral escolhida. Aps atravessar a clula de absoro, a luz transmitida alcana a clula fotovoltaica.

Fig. Fotmetro de feixe simples A corrente gerada medida pela deflexo da agulha do microampermetro sobre uma escala de O a 100. Inicialmente, com a clula fotovoltaica escurecida, o indicador ajustado mecanicamente para transmitncia zero (A oo). Em seguida, o instrumento deve ser ajustado para 100% T com relao ao solvente; coloca-se o solvente na clula de absoro e regula-se a abertura varivel de modo que a quantidade de energia radiante incidindo sobre a clula fotovoltaica cause uma deflexo de 100 unidades da agulha sobre a escala do indicador. Finalmente, substitui-se a clula contendo o solvente por outra contendo a soluo em estudo e l-se a transmitncia (ou absorbncia) na escala do indicador. Geralmente, a escala de O a 100% T do indicador acompanhada de uma escala logartmica que permite ler diretamente a absorbncia.

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O fotmetro de feixe simples um instrumento de leitura direta, que requer iluminao estvel durante as medidas; a corrente que alimenta a fonte estabilizada com um transformador de voltagem constante. Em condies timas, pode ser alcanada uma preciso de 2% na medida da transmitncia.

Fig. Fotmetro de duplo feixe. Nos fotmetros de feixe duplo, o feixe incidente dividido em duas partes: uma parte atravessa a clula de absoro contendo o solvente ou a soluo em estudo e chega at uma clula fotossensvel, a clula indicadora ou de trabalho; a outra parte desviada em direo a uma segunda clula fotossensvel, a clula de referncia. A corrente da clula indicadora , ento, comparada com a da clula de referncia com auxlio de um circuito adequado. O sistema de duplo feixe serve para atenuar os efeitos da instabilidade da fonte e da no-linearidade da resposta da clula fotossensvel; ambos os feixes so igualmente afetados e os efeitos se compensam. Os fotmetros de duplo feixe permitem alcanar uma preciso de 0.5% na medida da transmitncia. A Fig. 28.27 o diagrama de um fotmetro de .duplo feixe. O feixe incidente dividido em duas partes com o auxlio de um espelho, que desvia uma das partes em direo clula de referncia. As correntes das duas clulas fotovoltaicas passam atravs de resistores variveis, um dos quais calibrado em unidades lineares de O a 100 formando a escala de % T. Um galvanmetro sensvel, ligado entre os dois resistores, serve de indicador de zero. Espectrofotmetros tpicos. Os espectrofotmetros podem ser construdos em arranjos de feixe simples ou de feixe duplo. A construo de instrumentos de feixe simples requer componentes estveis de alta qualidade no tocante fonte, o detector e o amplificador para que possam ser feitas medidas com boa preciso. Os espectrofotmetros de leitura direta operam com preciso moderada, em torno de 1% em transmitncia; so instrumentos relativamente baratos, de operao simples e rpida e de fcil manuteno. Os espectrofotmetros de feixe simples para poderem operar com maior preciso precisam incorporar um circuito de zero para a medida da transmitncia. O circuito de zero simplesmente um potencimetro ou um circuito de ponte, em que o sinal eltrico do amplificador equilibrado com um sinal eltrico conhecido. Os instrumentos com circuito de zero podem alcanar uma preciso de 0,2% na medida da transmitncia, mas so muito mais caros, de operao mais demorada e maior custo de manuteno.

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A Fig. acima representa o diagrama de um espectrofotmetro de feixe simples e leitura direta (Speetronic 20, Bausch & Lomb), que concilia uma preciso moderada com simplicidade de operao. A faixa de trabalho vai de 350 a 650 nm, mas pode ser estendida at 900 nm mediante uso de um fototubo sensvel ao vermelho e um filtro suplementar para reduzir a radiao estranha. A radiao de uma lmpada de tungstnio dispersa por uma rede de difrao; o monocromador isola uma faixa com largura constante de 20 nm ao longo de toda a regio espectral. A desejada faixa de radiao selecionada girando convenientemente a rede. A corrente do fototubo, depois de amplificada, aciona o ponteiro de um medidor calibrado em transmitncia e absorbncia. Inicialmente, ajusta-se o boto de controle do amplificador para 0% T na ausncia de radiao incidente sobre o fototubo (compensao da corrente escura); depois, ajusta-se o controle de luz para 100% T com o solvente na clula; finalmente, l-se diretamente a transmitncia da soluo em estudo. Um instrumento de feixe simples com circuito de zero, tpico, o espectro-fotmetro Beckman DU-2. O elemento de disperso um prisma (de quartzo) de Littrow. O instrumento opera na regio de 200 a l 000 nm, dispondo para isso de uma lmpada de hidrognio para a regio ultravioleta e de uma lmpada de tungstnio para a regio visvel e superior. Um tubo foto-multiplicador opera abaixo de 600 nm e um fototubo, acima de 600 nm. As fendas so ajustveis e permitem isolar faixas com larguras de 0,5 nm a 700 nm e 0,01 nm a 200 nm. A Fig. Abaixo representa o diagrama ptico do espectrofotmetro Beckman DU-2. A energia radiante da fonte A, por meio do espelho cncavo B e do espelho plano C, refletida atravs da fenda de entrada D para dentro do compartimento do monocromador. O feixe refletido pelo espelho colimador E disperso pelo prisma de quartzo F. A radiao sofre uma primeira disperso ao penetrar no prisma, refletida pela face metalizada e retorna sofrendo nova disperso; mediante ajustamento da posio do prisma, a radiao de comprimento de onda desejado focada na fenda de sada. O arranjo ptico tal que as fendas de entrada e de sada se acham dispostas uma sobre a outra no mesmo eixo vertical. O feixe de sada passa acima do espelho C e entra no compartimento da clula G. Aps atravessar a clula contendo o solvente ou a soluo em estudo, a radiao penetra no compartimento do fototubo H. A corrente do fototubo medida como queda de potencial atravs de um resisto^ fixo com um circuito potenciomtrico; a corrente muito fraca e, por isso, preciso amplificar o estado de desequilbrio no circuito potenciomtrico. O potencimetro calibrado em transmitncia e absorbncia. Controles especiais permitem ajustar a corrente escura em zero e a transmitncia em 100%.

Fig. Espectrofotmetro Beckman DU-2. Os espectrofotmetros de feixe duplo partem a radiao original no espao (por meio de um espelho) ou no tempo (por meio de um espelho setorial rotatrio). Um dos feixes atravessa a clula contendo o solvente e o outro, a clula contendo a soluo em estudo. Os dois feixes so, ento, convenientemente comparados. 64

17. Anlise por Injeo em Fluxo - FIA

Os mtodos de anlise por injeo em fluxo (em ingls, flow injection analysis - FIA), em sua forma atual, foram descritos pela primeira vez por Ruzicka e Hansen na Dinamarca e por Stewart e colaboradores nos Estados Unidos na metade dos anos 1970.2 Os mtodos de injeo em fluxo so uma conseqncia dos procedimentos de fluxo segmentado, que eram muito usados em laboratrios clnicos nos anos de 1960 e 1970 para determinao automtica de rotina de uma variedade de espcies em amostras de sangue e de urina para propsitos de diagnstico mdico. Nos sistemas em fluxo segmentado, que foram fabricados por uma nica companhia nos Estados Unidos, as amostras eram levadas atravs do sistema a um detector por uma soluo aquosa fluindo que continha bolhas de ar espaadas proximamente. O propsito dessas bolhas era o de prevenir a disperso excessiva da amostra, para promover a mistura de amostras e reagentes por turbulncia e para lavar as paredes do tubo condutor, prevenindo, assim, a intercontaminao entre amostras sucessivas. Entretanto, os descobridores da analise por injeo em fluxo observaram que os problemas de disperso e de contaminao poderiam ser quase que completamente evitados em um sistema adequadamente projetado, sem bolhas de ar, e que a mistura de amostras e reagente poderia ser facilmente conseguida. A ausncia de bolhas de ar trouxe importar vantagens para as medidas por injeo em fluxo, incluindo: (1) velocidades mais altas de anlise (tipicamente 100 a 300 amostras/hora), (2) melhora do tempo de resposta (geralmente menos de l minuto entre a injeo da amostra e a resposta do detector), (3) tempos muito menores para iniciar e desligar o sistema (menos que 5 minutos para cada etapa), e (4) exceto pelo sistema de injeo, o equipamento simples e flexvel. As duas ltimas vantagens so particular importncia pois tornaram mais fcil e econmico utilizar sistemas automatizados para relativamente poucas amostras fora de uma rotina. Isto , os mtodos de fluxo contnuo no esto mais restritos a situaes nas quais o nmero de amostras grande e o mtodo analtico altamente rotineiro. Conseqentemente, os sistemas de fluxo segmentado tm sido substitudos plos mtodos de injeo em fluxo (e tambm por sistemas discretos baseados em| robtica).

Instrumentao
A Figura abaixo mostra um diagrama de um dos mais simples sistemas de injeo em fluxo. Uma bomba peristtica faz com que um reagente colorimtrico para ons cloreto mova-se diretamente a uma vlvula que permite a injeo de amostras no fluxo. A amostra e o reagente passam ento atravs de um reator helicoidal de 50 cm, no qual o reagente se difunde na amostra e produz um produto colorido pela seqncia de reaes Hg(SCN)2(aq) + 2 Cl- HgCl2(aq) + 2SCN - Fe3++SCN- F(SCN)2+ vermelho Do reator helicoidal, a soluo passa por um fotmetro equipado com um filtro de interferncia a 480 nm. O registro da sada desse sistema para uma srie de padres contendo de 5 a 75 ppm de cloreto est mostrado no lado esquerdo da Figura abaixo. Observe que foram feitas quatro injees de cada padro para demonstrar reprodutibilidade do sistema. As duas curvas direita na figura so varreduras feitas em alta velocidade de uma das amostras contendo 30 (R30) e outra contendo 75 (R75) ppm de cloreto. Essas curvas mostram que a contaminao mnima em uma corrente no-segmentada. Ento, menos de 1% do primeiro analito est presente na clula de fluxo aps 28 s, o tempo para a prxima injeo (S2). Esse sistema tem sido usado com sucesso para a determinao de rotina de ons cloretp em guas salobras e em guas efluentes, bem como em amostras de soro sanguneo.

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Fig. Determinao de cloreto por injeo em fluxo: (a) diagrama de fluxo, (b) registro de sada para injees quadruplicadas s contendo de 5 at 75 ppm de on cloreto

Sistema de Transporte de Amostra e Reagente

Comumente, a soluo em uma anlise por injeo em fluxo move-se atravs do sistema mediante uma bomba peristltica, um dispositivo em que um fluido (lquido ou gs) impelido atravs de um tubo plstico por cilindros. A Figura abaixo ilustra o princpio de operao da bomba peristltica. Um suporte, ou banda, comprime por fora de uma mola o tubo contra dois ou mais cilindros a todo instante, forando ento um fluxo contnuo de fluido atravs da tubulao. As bombas modernas geralmente tm de 8 a 10 cilindros, em configurao circular, de forma que metade deles estar comprimindo a tubulao em qualquer instante. Esse desenho leva a um fluxo que relativamente livre de pulsos. A vazo e controlada pela velocidade do motor, que deve ser maior que 30 rpm, e pelo dimetro interno do tubo. Uma variedade de tamanhos de tubos (d.i. = 0,25 a 4 mm) est disponvel comercialmente e permite fluxos to pequenos como 0,0005 mL/min e to grandes quanto 40 mL/min. Os cilindros das bombas peristlticas comerciais so longos o suficiente para permitir que possam ser usados vrios tubos simultaneamente. Como mostrado na Figura acima a, os sistemas de injeo em fluxo normalmente contm uma seo enrolada de tubo (os dimetros tpicos das bobinas de mistura so de cerca de l cm ou menos) cuja finalidade a de aumentar a disperso axial e a mistura radial da amostra e do reagente, o que resulta em picos mais simtricos.

Diagrama mostrando um canal de uma bomba peristltica.

Injetores de Amostra e Detectores

Os injetores e detectores empregados na anlise por injeo em fluxo so similares quanto ao tipo e s necessidades de desempenho aos usados em HPLC. Os tamanhos da amostra em procedimentos de injeo em fluxo variam entre 5 a 200 uL, sendo os mais usados, na a maior parte das aplicaes, de 10 a 30 uL. 66

Para que uma anlise seja bem-sucedida vital que a soluo de amostra seja injetada rapidamente como um pulso ou um volume discreto de lquido; alm disso, as injees no devem perturbar o fluxo de corrente transportadora. Com a vlvula de amostragem colocada na posio indicada, o fluxo de reagentes continua atravs da passagem secundria (bypass, em ingls) enquanto a amostra flui atravs da vlvula. Posicionando a vlvula a 90 graus, a amostra entra no fluxo como uma zona nica e bem-definida. Para finalidades prticas, o fluxo atravs da passagem secundria cessa com a vlvula nesta posio porque o dimetro da ala da amostra (sample loop, em ingls) significativamente maior que o da tubulao da passagem secundria. Embora a injeo com seringa seja usada algumas vezes, a maneira mais satisfatria para a introduo de amostras est baseada em alas de amostragem similares s encontradas em cromatografia. A deteco em procedimentos de injeo em fluxo tm sido efetuada por absoro e emisso atmica, fluormetros, sistemas eletroqumicos, refratmetros, espectrofotmetros e fotmetros. A ltima forma talvez seja a mais comum.

Separaes por F I A
Separaes por dilise, por extrao lquido/lquido e por difuso gasosa so facilmente realizadas automaticamente com sistemas de injeo em fluxo. Dilise e Difuso Gasosa. A dilise usada, normalmente, em mtodos de fluxo contnuo para separar ons inorgnicos como cloreto ou sdio, ou pequenas molculas orgnicas, como glicose, de espcies de alto peso molecular, como protenas. Pequenos ons e molculas se difundem com relativa rapidez atravs de membranas hidroflicas finas de nitrato ou acetato de celulose, ao passo que molculas grandes no o fazem. A dilise usualmente precede a determinao de ons e pequenas molculas no sangue ou no soro sanguneo. Extrao. Outra tcnica comum de separao facilmente adaptada aos mtodos de fluxo contnuo a extrao.

Princpios da Anlise por Injeo em Fluxo

Imediatamente aps a injeo com uma vlvula de amostragem, a zona de amostra em um dispositivo de injeo em fluxo tem um perfil de concentrao retangular, conforme mostrado na Figura 33-5a. Conforme esta se move atravs da tubulao, a banda se alarga ou ocorre disperso. A forma da zona resultante determinada por dois fenmenos. O primeiro conveco que se origina do fluxo laminar no qual o centro do fluido se move mais rapidamente que o lquido adjacente s paredes, criando assim uma frente com forma parablica e o perfil de zona assimtrico. O alargamento ocorre tambm em consequncia da difuso. Dois tipos de difuso podem, em princpio, ocorrer: radial ou perpendicular direo do fluxo e longitudinal, ou paralelo ao fluxo. Em uma tubulao estreita, tem sido mostrado que o ltimo no significativo, enquanto que a difuso radial sempre importante nestas circunstncias. De fato, em fluxos baixos, pode ser a fonte principal de disperso. Quando tais condies existem, possvel obter uma distribuio simtrica.

Outros mtodos 18. Amperometria: Introduo e aplicaes

A amperometria refere-se medio da corrente em condies de voltagem aplicada constante; nestas circunstncias, a grandeza da corrente eltrica determinada pela concentrao da substncia analisada. Estas medies podem ser usadas para o acompanhamento da variao da concentrao de um dado on durante a titulao e para a fixao do ponto final; este procedimento a titulao amperomtrica.

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Na clula polarogrfica, em virtude das reas superficiais relativas dos dois eletrodos, a densidade de corrente pequena no eletrodo auxiliar, ou contra-eletrodo, por ser grande a rea do eletrodo: no eletrodo de trabalho, muito menor, a densidade de corrente pode ser elevada. Por isso, o contra-eletrodo no facilmente polarizado; quando uma pequena corrente eltrica flui atravs da clula, a concentrao dos ons na camada superficial do eletrodo (isto , na camada da soluo imediatamente vizinha ao eletrodo) permanece praticamente igual concentrao dos ons no seio da soluo, e o potencial do eletrodo se mantm num valor constante. Em contraste com isso, no eletrodo gotejante, a camada superficial do eletrodo tende a ficar com poucos ons da espcie que se descarrega no eletrodo; se a soluo no for agitada, o fator importante que determina a grandeza da corrente que passa pelo eletrodo a difuso dos ons atravs do gradiente de concentrao que se estabelece. A corrente total que passa pelo eletrodo igual corrente provocada pelos ons que sofrem a migrao eletroltica normal mais a corrente devida difuso dos ons: onde I a corrente total, Id a corrente de difuso e Im a corrente de migrao. H, contudo, um efeito complicador: numa soluo diluda, o esvaziamento da camada superficial do eletrodo provoca um aumento da resistncia eltrica da soluo e uma variao na queda de potencial da lei de ohm (IxR) na clula; por isso, o potencial exato vigente no eletrodo fica sujeito a dvidas. Para superar esta dificuldade usual adicionar ao sistema um excesso de eletrlito indiferente (p. ex., KC1 0,1 M); nestas condies, a resistncia eltrica da soluo mantm-se num valor baixo e constante, e a corrente de migrao da espcie inica investigada praticamente desaparece, ou seja, I= Id.

I= Id + Im

Titulao Amperomtrica
A titulao amperomtrica com um microeltrodo polarizado baseia-se na aplicao da tcnica da polarografia, em que a corrente controlada pela difuso, localizao do ponto final de titulaes que envolvam a participao de espcies eletroativas. A titulao amperomtrica (com um eltrodo polarizado) foi introduzida por Heyrovsky e Berezicky. Na titulao amperomtrica, a corrente medida aps sucessivas adies do reagente titulante, com o microeltrodo mantido a um potencial fixo durante toda a titulao. O microeltrodo mais comumente usado o eltrodo gotejante de mercrio; a introduo do microeltrodo rotatrio de platina permitiu estender a titulao amperomtrica a reaes com participantes eletroativos no lado dos potenciais positivos at 1,1 vs. E.C.S. O potencial aplicado fixado sobre o plat da corrente limite em que a corrente proporcional concentrao. Os valores da corrente observados no curso da titulao so representados graficamente em funo do volume da soluo titulante. Os dados de cada lado do ponto de equivalncia formam duas linhas retas com diferentes inclinaes e o ponto final assinalado pela interseo das duas retas extrapoladas. A titulao amperomtrica apresenta algumas vantagens sobre a anlise polarogrfica. A substncia a determinar no precisa ela prpria ser eletroativa; igualmente satisfatrio que o seja o reagente titulante. A titulao amperomtrica praticada com aparelhagem muito simples. O mtodo menos dependente das caractersticas do capilar e do eletrlito suporte. Ele no requer um controle muito rigoroso da temperatura, bastando que esta no varie apreciavelmente durante uma titulao. As medidas da corrente so feitas em pontos da titulao afastados, antes e depois, do ponto de equivalncia, de sorte que, tal como na titulao condutomtrica, possvel empregar reaes relativamente incompletas. A titulao amperomtrica inerentemente mais exata do que a anlise polarogrfica, pois cada ramo da curva de titulao baseia-se na determinao de uma srie de pontos. A forma das curvas de corrente-volume encontradas nas titulaes amperomtricas varia conforme a substncia a titular e/ou o reagente titulante sejam espcies capazes de originar correntes de difuso, catdicas ou andicas, para o potencial fixo aplicado ao microeletrodo durante a titulao. O mtodo amperomtrico tem um campo de aplicao bastante amplo. Ele aplicvel determinao de substncias capazes de produzir correntes de difuso, mas tambm de substncias que, embora no sendo eletroativas, podem ser tituladas com reagentes capazes de produzir correntes de difuso. 68

A maior parte das aplicaes da titulao amperomtrica se referem a reaes com formao de precipitados muito pouco solveis. Alguns mtodos se baseiam no emprego de reagentes orgnicos redutveis no eltrodo gotejante de mercrio. A titulao amperomtrica encontra algumas aplicaes no campo das reaes de oxidao-reduo; so exemplos as titulaes que envolvem o uso de iodo ou bromo (na forma de bromato).

19. Turbidimetria: Introduo e aplicaes

Espalhamento.
O espalhamento um tipo de interao da radiao eletromagntica com partculas suspensas em um meio material atravs da qual a radiao transmitida. A transmisso da radiao eletromagntica, conforme vimos antes, pode ser considerada como uma reteno momentnea da energia radiante plos tomos, ons ou molculas do meio, seguida da reemisso da energia com o retorno das partculas polarizadas a seu estado original. O espalhamento somente se verifica quando as partculas tm dimenses de ordem da magnitude do comprimento de onda da radiao ou menores e se acham distribudas ao acaso em um meio com ndice de refrao diferente de seu prprio. O espalhamento pelas partculas suspensas conhecido como efeito Tyndall. As partculas maiores espalham uma maior quantidade de energia radiante, mas relativamente menor nas direes de retorno. A intensidade do espalhamento aumenta notavelmente medida que diminui o comprimento de onda, isto , medida que este se aproxima do tamanho da partcula. Assim, a luz violeta de 400 nm espalhada cerca de 3,8 vezes mais do que a luz verde de 550 nm. A colorao azul do firmamento devida ao espalhamento mais eficiente das radiaes de menor comprimento da luz solar pelas partculas de poeira de pequenas dimenses, molculas de gua etc. A colorao vermelha do sol no ocaso confirma que as radiaes de maior comprimento so menos efetivamente espalhadas e, portanto, mais completamente transmitidas. Generalidades A nefelometria e a turbidimetria so mtodos analticos baseados no fenmeno do espalhamento da radiao por partculas em suspenso. Ao passar atravs de um meio transparente contendo partculas na forma de uma segunda fase a luz sofre espalhamento em todas as direes. O espalhamento tem lugar quando a dimenso maior das partculas inferior a 1-1,5 vezes o comprimento de onda da radiao; as partculas maiores refletem a radiao. Para as radiaes ultravioleta e visvel, o espalhamento produzido por partculas de tamanho coloidal, isto , com a dimenso maior de 1 nm a 1m. Quando se faz passar um feixe de radiao atravs de uma suspenso no-absorvente, uma parte da energia radiante espalhada em todas as direes; ao mesmo tempo, o feixe sofrer uma atenuao em sua potncia ao atravessar a suspenso. Tanto a potncia da radiao espalhada como a atenuao da potncia do feixe ocasionada pelo espalhamento podem ser relacionadas concentrao das partculas suspensas. Resultam assim duas opes para a utilizao do fenmeno do espalhamento na anlise quantitativa. A nefelometria mede a potncia da radiao espalhada em ngulo reto ao feixe incidente. A turbidimetria mede a atenuao na potncia do feixe incidente. A quantidade chamada coeficiente de turbidez ou, simplesmente turbidez. Experimentalmente, observouse que o coeficiente de turbidez varia com o comprimento de onda segundo em que s uma constante para um sistema dado, freqentemente, o valor de se relaciona linearmente com a concentrao das partculas responsveis pelo espalhamento.

=s-1

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Referncias Consultadas
1. Ohlweiler, Otto Alcides Qumica Analtica Quantitativa ( vol 3) ; 2 edio; Rio de Janeiro; Livros tcnicos e cintficos;1976. 2. Vogel, Arthur; Anlise Qumica Quantitativa; 5 edio; Editora Guanabara Koogan; Rio de Janeiro;1992 3. Ohlweiler, Otto Alcides Fundamentos da Anlise Instrumental ; Rio de Janeiro; Livros tcnicos e cintficos;1981. 4. Skoog, Douglas A.; Holler, F. James; Nieman, Timothy A. - Princpios de Anlise Instrumental- 5 edio- Editora Artmed; Porto Alegre: Bookman, 2002. 5. Oliveira, Fernando Motta Apostila Cromatografia a gs com espectrometria de massa. setembro de 2000 6. Sites de pesquisa: www.ufpa.br/ccen/quimica/

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