Tipos de Tincin:

Tincin Simple: utiliza un solo colorante.

Tincin de Gram: Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m, lavado con alcohol, Safranina 30 seg) Tincin de Gram:

Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de los gram (+) la muestra fue sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura determina la presencia de la misma puesto que fij en su estructura el cristal violeta. Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color rojo.

En la muestra de la prctica anterior 3 eran gran positivo por su coloracin morada.

Tincin de gram A pesar de que fue desarrollada en el siglo XIX la tincin de gram es la ms utilizada en el diagnstico microbiolgico. De hecho la informacin que ofrece relativa a la composicin de la pared bacteriana es la base de todas las taxonomas en este reino. Se trata de una tincin diferencial que distingue entre bacterias con pared gruesa (gram positivas) y bacterias con pared fina y membrana externa (gram negativas). La mayora de las bacterias presentan una de estas dos morfologas generales.

La tincin de gram utiliza violeta de genciana como colorante primario. Tras su aplicacin todos los microorganismos se tien de violeta. Despus el lugol acta como mordiente, acentuando la penetracin del colorante primario. El tercer paso consiste en la aplicacin del decolorante, una mezcla de alcohol y acetona que elimina el violeta excepto en las bacterias con pared gruesa. Por ltimo el colorante secundario o de contraste, la safranina, tie de rojo las bacterias decoloradas, es decir las de pared fina. En resumen las bacterias gram positivas quedan teidas de violeta y las gram negativas de rojo. Tincin de Ziehl-Neelsen Tambin es una tincin diferencial. Se denomina tincin cido-alcohol resistente y es especfica para una serie de bacterias con estructura de pared particular, las micobacterias. La pared de las micobacterias no est basada en peptidoglicano como las bacterias gram positivas y gram negativas, sino en cidos miclicos. Esta particularidad las hace resistentes a la decoloracin con cido y alcohol que no se produce en casi ningn otro tipo bacteriano.

La tincin de Ziehl-Neelsen utiliza tres reactivos. El colorante primario es la fucsina que tie toda la preparacin de rojo brillante. Como mordiente se utiliza flameado de la preparacin con el colorante. La solucin decolorante elimina el colorante primario excepto el los bacilos cido alcohol resistentes. (BAAR). Por ltimo el azul de metileno tie de azul el resto de la preparacin. Esta tincin es til en la deteccin de bacterias del gnero Micobacterium en muestras de esputo. La presencia de bacilos rojos sobre fondo azul constituye un diagnstico casi definitivo de tuberculosis. Microscopio de campo oscuro Mediante un condensador especial prcticamente opaco consigue que los microorganismos se observen brillantes sobre fondo oscuro. Es el nico tipo de microscopia ptica que permite ver flagelos en preparaciones sin teir. Microscopio de fluorescencia

Es un microscopio adaptado para la emisin de luz en longitudes de onda fuera del espectro visible (ultravioleta y luz roja). Las tinciones fluorescentes utilizan compuestos que reflejan luz visible cuando son irradiados con luz ultravioleta. Son los denominados fluorocromos. Cuando se depositan sobre los microorganismos y se aplica sobre ellos luz ultravioleta estos se observan brillantes en el microscopio de fluorescencia. Las tinciones fluorescentes son muy tiles en microbiologa clnica. Tambin se utilizan en muchos otros campos de la ciencia mdica como la inmunologa o la gentica. Las tinciones ms utilizadas son las siguientes:

MICROSCOPIA OPTICA Adems del microscopio de campo claro existen otros microscopios pticos como son el de campo oscuro, fluorescencia y contraste de fases. Microscopio de campo claro: usa como fuente de luz directa bien una bombilla bien la luz solar. Ya que los microorganismos son transparentes es difcil distinguirlos con este tipo de microscopa y es por lo que se suelen teir. Microscopio de campo oscuro: usa un microscopio ptico equipado con un condensador y objetivo especial que iluminan los microorganismos en la muestra frente a un fondo oscuro. Este mtodo se utiliza para visualizar microorganismos vivos sin teir. Microscopio de fluorescencia: la muestra se tie con una sustancia fluorescente que absorbe la energa de las ondas cortas de la luz (azul) y emite la luz de longitudes de ondas ms largas (verde). Se utiliza en inmunofluorescencia, tcnica en la cual una sustancia fluorescente se une a un anticuerpo especfico de ciertos microorganismos. Si el anticuerpo fluorescente se une al microorganismo, este microorganismo emite fluorescencia y se puede identificar. Esta tcnica se usa en clnica. Microscopio de contraste de fases: es un microscopio ptico modificado que permite contrastar sustancias de diferente grosor o densidad. Mediante un condensador y un objetivo especial se controla la iluminacin de tal manera que vaya en diferentes rutas a travs de las distintas partes de una clula. El resultado es una imagen con diferentes grados de brillo y oscuridad. Con este mtodo, el material denso aparece brillante, mientras que las partes de la clula que tienen una densidad cercana al H2O (citoplasma) aparecen oscuras. Se utiliza para visualizar estructuras celulares sin necesidad de usar colorantes o matar microorganismos. pH en el cuerpo humano y la salud | 2 | Jugo gstrico || | 5,5 - 6,5 | Orina | | 6,5 - 7,4 | Saliva humana | | 7,35 - 7,45 | Sangre |