INFORME N2 ESTUDIO DE LAS PROPIEDADES Y REACCIONES DE LOS CARBOHIDRATOS

SANTIAGO GONZLEZ BENJUMEA 1088315994 YEIDY VIVIANA ARIAS ANDRADE 1088300045

UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE PEREIRA FACULTAD DE TECNOLOGA ESCUELA DE QUMICA QUMICA ORGNICA 2012

OBJETIVOS

Verificar algunas de las reacciones de caracterizacin de los mono, di y polisacridos. Preparar derivados slidos de mono y disacridos. Deducir las caractersticas fsicas y qumicas de un carbohidrato problema.

INTRODUCCION Los carbohidratos son compuestos que contienen cantidades grandes de grupos hidroxilo. Los carbohidratos ms simples contienen una molcula de aldehdo (a estos se los llama polihidroxialdehidos) o una cetona (polihidroxicetonas). Todos los carbohidratos pueden clasificarse como monosacridos, oligosacridos o polisacridos. Un oligosacrido est hecho por 2 a 10 unidades de monosacridos unidos por uniones glucosdicas. Los polisacridos son mucho ms grandes y contienen cientos de unidades de monosacridos. La presencia de los grupos hidroxilo permite a los carbohidratos interactuar con el medio acuoso y participar en la formacin de uniones de hidrogeno, tanto dentro de sus cadenas como entre cadenas de polisacridos. Derivados de carbohidratos pueden tener compuestos nitrogenados, fosfatos, y de azufre. Los carbohidratos pueden combinarse con los lpidos para formar glucolpidos o con las protenas para formar glicoprotenas.

PROCEDIMIENTO

Prueba de Molisch o del -naftol para carbohidratos 2mL de cada azucar 5mL del reactivo de Molisch.

Reaccin de seliwanoff. (Para distinguir entre Aldosas y Cetosas) Se toman 2 mL de Seliwanoff en tubos de ensayo respectivamente para cada azucar,

1 mL de acido sulurico concentrado lentamentepor las paredes del tubo .

Agregar 5 gotas de los azucares a ensayar

Observar la tonalidad, luego agitar las mezclas en un bao de hielo. Prueba de Bial para pentosas 2 ml de las soluciones de los azucares

Posteriormente calentar los tubos de ensayo en bao de agua hirviendo observar tiempo de aparicion de coloracin. Prueba de Benedict Calentar 3mL de reactivo de Benedict

3 mL del reactivo de Bial, calentar hasta ebullicin Agregar 5 gotas de los azucares a ensayar

Si no hay cambio de color agregar 5 mL de agua y 1 mL de pentanol.

Calentar en un bao de agua hirviendo.

Reaccin de Barfoed para distinguir monosas o monosacridos de diosas o disacridos. Agregar 2 mL del reactivo de Barfoed

Comportamiento del Almidn. Mezclar 1 g de almidon con 15 mL de agua fria, disolver en 135 mL de agua hirviendo dejar unos cuantos minutos despues de ebullicin hasta adicionar todo el almidn.

Verificar que no se reduce a s mismo calentando previa y suavemente el tubo. Prueba de Iodo. Aadir 7 gotas del azucar a estudiar

Calentarlos a bao mara por 10 minutos

Adicionar 1 mL de solucin de almidon, 9 mL de agua, agregar 10 mL de agua a la cual se han adicionado 2 gotas de iodo. Hidrolisis cida

Formacin de Osazonas 0.1 g de Glucosa, fructosa, maltosa y muestra desconocida

Hidrolisis cida

50 mL de la solucin de almidn adicionar 5 gotas de HCl concentrado , calentar a bao mara por 35 minutos, enfriar y neutralizar con NaOH al 10%.

Adicionar 1 mL de agua

Aadir 5 mL de Fenilhidrazina

Calentarlos a bao mara, anotar el tiempo de formacin de cristales.

RESULTADOS

PRUEBA DE MOLISH
Compuesto Sacarosa Galactosa Maltosas Glucosa Fructosa Muestra desconocida Coloracin final Purpura oscuro Purpura claro Purpura claro Purpura claro Purpura claro Purpura claro

PRUEBA DE BIAL
Compuesto Sacarosa Galactosa Maltosa Glucosa Fructosa Muestra desconocida Coloracin final Marrn oscuro Marrn claro Marrn claro Marrn claro Marrn oscuro Marrn oscuro

PRUEBA DE SELIWANOFF
Compuesto Sacarosa Galactosa Maltosa Glucosa Fructosa Muestra problema Coloracin final Roja No hay cambio de coloracin No hay cambio de coloracin No hay cambio de coloracin Naranja-rojo No hay cambio de coloracin

PRUEBA DE BENEDICT

Compuesto Sacarosa Galactosa Maltosa Glucosa Fructosa Muestra desconocida

Coloracin final No hubo cambio de coloracin Precipitado rojo Precipitado rojo Precipitado rojo Precipitado rojo Precipitado rojo

PRUEBA DE BARFOED
Compuesto Sacarosa Galactosa Maltosa Glucosa Fructosa Muestra problema Cambio experimentado No hubo formacin de precipitado Formacin de precipitado rojo Formacin escaza de precipitado rojo Formacin de precipitado rojo Formacin de precipitado rojo Formacin de precipitado rojo

FORMACIN DE OSAZONAS
Compuesto Maltosa Glucosa Fructosa Muestra desconocida Tiempo de formacin de cristales (minutos) Ausencia de cristales 14 4 14

COMPORTAMIENTO DEL ALMIDN

HIDRLISIS DE LA SACAROSA

Prueba con yodo Prueba de Benedict

Se registro un cambio inmediato de translucido a negro oscuro. No hubo formacin de precipitado.

Prueba con iodo Prueba de Benedict

No hubo cambio de coloracin Formacin de precipitado

Prueba de Hubo cambio de coloracin inmediatamente iodo Prueba de Benedict

ANLISIS DE RESULTADOS

PRUEBA DE MOLISH Al aplicar esta prueba cualitativa, todos los carbohidratos o glcidos producen un complejo color morado; por consiguiente los anteriores compuestos son carbohidratos.

PRUEBA DE BIAL
Dadas las coloraciones obtenidas en este ensayo, se descarta la presencia de pentosas, pues esta prueba es positiva cuando se presenta una coloracin verde azul, y en este caso las coloraciones obtenidas pasaron de rojo pardo a caf oscuro o claro, esto se debe a que las hexosas se deshidratan en el medio acido concentrado dando 5hidroximetilfurfural, que reacciona con Orcinol y FeCl3 dando productos de condensacin, que se diferencian por la coloracin. A partir de pentosas se obtienen colores de tonalidad azul-verde, mientras que las hexosas originando una coloracin verde, caf o caf rojiza.

PRUEBA DE SELIWANOFF
Las cetohexosas y aldohexosas se deshidratan en medio cido dando lugar, en cualquiera de los casos, a 5-hidroximetilfurfural, el cual se condensa con resorcinol para dar lugar a un producto rojo oscuro. Pero reacciona con ms rapidez con las cetohexosas Los disacridos que contienen fructosa; como la sacarosa, dan positiva esta prueba si se deja correr la reaccin durante un tiempo prudencial para permitir la hidrlisis cida.

PRUEBA DE BENEDICT
La formacin de precipitado color rojo en todos los tubos de ensayo, con excepcin del que contena sacarosa, es prueba de que se cuenta que con azucares reductores. El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de cobre, y citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solucin un pH alcalino necesario para que la reaccin pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al ion Cu2+ en solucin ya que tiene la propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con algunos de los metales pesados. Con el cobre produce un complejo de color azul. Si se le agrega al reactivo una solucin de azcar reductor y se calienta hasta llevar la mezcla a ebullicin, el azcar en solucin alcalina a elevadas temperaturas se convertir en D-gluconato y su ene-diol, rompindose luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus electrones expuestos, reaccionarn con el Cu+2. Se obtiene entonces un azcar oxidado y dos iones Cu+. Posteriormente el Cu+ producido reacciona con los iones OH- presentes en la solucin para formar el hidrxido de cobre:

CuSO4 +2 NaOH Cu(OH)2+ R-COH

Cu(OH)2 + Na2SO4 Cu2O + R-COOH + H2O

(rojo ladrillo)

PRUEBA DE BARFOED
Lo que sucede con el reactivo de Barfoed es que el ion cprico se encuentra en una disolucin dbilmente cida y la velocidad de reaccin de la reduccin en caliente da lugar a iones cuprosos que precipitan en forma de xido cuproso. En condiciones cidas, los disacridos reaccionan ms lentamente que los monosacridos. La prueba resulta positiva si hay formacin de un precipitado color rojo, para los monosacridos.

RCOH + 2Cu+2 + 2H2O

RCOOH + Cu2O + 4H+

FORMACIN DE OSAZONAS
Las Osazonas se forman cuando los azcares reaccionan con fenilhidrazina. La reaccin involucra la formacin de fenilhidrazona. La reaccin puede ser usada para identificar monosacridos. Involucra dos reacciones. Primero, la glucosa con la fenilhidrazina produce glucosafenilhidrazona por eliminacin de una molcula de agua del grupo funcional. El siguiente paso involucra la reaccin de un mol de glucosafenilhidrazona con dos moldes de fenilhidrazina (exceso). El carbono alfa es atacado aqu porque es ms reactivo que los otros. Son compuestos altamente coloreados y cristalinos, y pueden ser detectados fcilmente. Los epmeros dan la misma osazona.

COMPORTAMIENTO DEL ALMIDN

el almidn forma con el yodo un color negro oscuro. Este color es debido a la absorcin de yodo dentro de los espacios abiertos de las hlices de la amilosa que constituyen 20% del almidn. No hubo formacin de precipitado con la prueba de Benedict debido que los carbonos anomrico no estn libre y el almidn es un polmero polidisperso que se presenta como polmero lineal en el caso de la amilosa y como polmero de alta ramificacin en el caso de la amilodextrina. Las dextrinas son los fragmentos de polisacridos resultantes en la hidrlisis enzimtica (por amilasas) de las cadenas laterales del almidn.

La amilosa y la amilopectina son los dos polisacridos del almidn estas se pueden separar tratando al almidn con agua caliente, donde la amilosa se difunde disolvindose y quedando la amilopectina en forma de residuo insoluble. Las dos por hidrlisis total, nicamente D-glucosa solo se diferencian en la forma en que las unidades individuales de la glucosa estn combinadas en los polmeros. Sin embargo la prueba con yodo termino dando el cambio de coloracin. Y la de Benedict tampoco formo precipitado.

Cadena de Almidn que forma un complejo de transferencia de carga de color azul con el yodo molecular.

HIDRLISIS DE LA SACAROSA
La sacarosa por hidrlisis cida da una mezcla equimolecular de los dos monosacridos que la componen: la D-glucosa y la D-fructosa. La prueba con yodo resulta en el no cambio de coloracin debido a que los azcares resultantes de esta hidrlisis no forman estructuras complejas quienes reaccionan con el yodo. Hubo formacin de precipitado con el reactivo de Benedict debido a que la separacin de los dos monosacridos de la sacarosa dejan libres sus carbonos anomricos, obteniendo as azucares reductores.

CONCLUSIONES

Los carbohidratos tienen una estructura definida pueden ser monosacridos, disacridos, oligosacridos y polisacridos, y se les puede identificar mediante pruebas de anlisis cualitativo como las realizadas. Los monosacridos reaccionan de acuerdo a los grupos hidroxilo y carbonilo que poseen. Los disacridos y los polisacridos se pueden hidrolizar para producir monosacridos. Los azucares que dan resultados positivos con la prueba de Benedict se conocen como azucares reductores, la prueba de Bial identifica pentosas, la prueba de Seliwanoff identifica cetohexosas o aldohexosas segn tiempos de reaccin, la prueba de Barfoed identifica monosacridos y la formacin de Osazonas permite identificar azucares reductoras y azcares cuya estereoqumica difera por slo un carbono quiral. Se comprendi en mayor medida los conocimientos adquiridos en clases tericas, pues se visualizo el poder reductor de los azucares, su hidrlisis y la formacin de complejos yodo-almidn entre otras pruebas. Por medio de la consulta generada se logro dimensionar en primera medida, la hasta ahora casi desconocida influencia de los carbohidratos en el metabolismo humano, y la relacin contextual y biolgica que tenemos con estos. Los carbohidratos se utilizan para fabricar tejidos, pelculas fotogrficas, plsticos y otros productos. La celulosa se puede convertir en rayn de viscosa y productos de papel. El nitrato de celulosa (nitrocelulosa) se utiliza en pelculas de cine, cemento, plvora de algodn, celuloide y tipos similares de plsticos. El almidn y la pectina, un agente cuajante, se usan en la preparacin de alimentos para el hombre y el ganado. La goma arbiga se usa en medicamentos demulcentes. El agar, un componente de algunos laxantes, se utiliza como agente espesante en los alimentos y como medio para el cultivo bacteriano; tambin en la preparacin de materiales adhesivos, de encolado y emulsiones. La hemicelulosa se emplea para modificar el papel durante su fabricacin. Los dextranos son polisacridos utilizados en medicina como expansores de volumen del plasma sanguneo para contrarrestar las conmociones agudas. Otro hidrato de carbono, el sulfato de heparina, es un anticoagulante de la sangre. Los carbohidratos son la materia prima de grandes empresas de alimentos, las cuales sustentan una de los mercados ms poderosos del mundo, grandes transnacionales como General Mills, Kraft Foods Inc., Ferrero, Nestl, Margrig entre otras, obtienen ganancias de ms de 134 mil millones de dlares cada ao.

PREGUNTAS

1- Cmo explica que la glucosa, la fructosa y la manosa den la misma osazona? En la reaccin de azcares con fenilhidrazina solo participan el grupo carbonilo y su grupo alcohlico vecino, por lo que monosacridos que tengan idntica configuracin en el resto de la molcula darn la misma osazona. Este es el caso de la glucosa, manosa y fructosa.
CHO NNHPh NNHPh
2 PhNHNH2
* anilina, amoniaco

H H

OH OH
CH 2OH

y agua

CH 2OH

fenilhidrazona de D(+)-glucosa D(+)-glucosa

CH 2OH
NNHPh

fenilosazona de la D(+)-glucosa
HC NNHPh
NNHPh

CH 2OH

OH H H

H OH OH
CH 2OH

H H

* anilina, amoniaco y agua

CH 2OH

fenilhidrazona de D(-)-fructosa D(-)-fructosa

fenilosazona de la D(-)-fructosa

OH

OH

O H OH OH

PhNHNH2

2 PhNHNH2

OH

OH

H OH H H

OH H OH OH

H
PhNHNH2

OH H

H H H

NNHPh

H OH OH
CH 2OH

H OH OH
CH 2OH

H H

2- Cmo reaccionan los siguientes azucares: manosa, ribosa, maltosa, rafinosa, alosa y sorbosa con los reactivos de Barfoed, Molisch. Bial, Seliwanoff?

Azucares Manosa Ribosa Maltosa Rafinosa Alosa Sorbosa

Reactivo Barfoed Positivo Positivo Negativo Negativo Positivo Positivo

Reactivo Molisch Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Negativo

Reactivo de Bial Negativo Positivo Negativo Negativo Negativo Negativo

Reactivo de Seliwanoff Negativo Negativo Positivo Positivo Negativo Positivo

3- Por qu a la hidrlisis de la sacarosa se le llama algunas veces como inversin de la sacarosa? En la sacarosa, los monosacridos glucosa y fructosa se unen (en 1-2) por sus hidroxilos anmeros y es, al mismo tiempo, -glucsido y -fructsido, de modo que se hidroliza por -glicosidasas. Por esta razn no es reductora. Cuando se hidroliza aparece el poder reductor de la glucosa y de la fructosa libres, simultneamente, el poder rotatorio dextrgiro de la sacarosa pasa a ser levgiro en la mezcla equimolar de glucosa y fructosa. La glucosa es dextrgira pero la fructosa es fuertemente levgira.

4- Buscar la frmula estructural de los siguientes carbohidratos y decidir si ellos son azucares reductores o no reductores: Sorbosa, manosa, Rafinosa, celobiosa.

SORBOSA

Azcar reductor

RAFINOSA Azcar no reductor

CH2OH

O OH HO OH
CH2OH

MANOSA Azcar reductor

CELOBIOSA Azcar reductor

5- Escribir las ecuaciones para mostrar la formacin de la osazona de la glucosa.

6- Qu es y donde se encuentra el glucgeno? Cul es su importancia a nivel de mamferos? El glucgeno representa la principal forma de almacenamiento de carbohidratos tanto en animales como en las plantas. Est formado por varias cadenas que contienen de 12 a 18 unidades de -glucosas formadas por enlaces glucosdicos 1,4; uno de los extremos de esta cadena se une a la siguiente cadena mediante un enlace -1,6-glucosdico.Una sola molcula de glucgeno puede contener ms de 120.000 molculas de glucosa. Cuando existe una disminucin significativa de glucosa en sangre, el glucgeno es degradado por medio de una serie de enzimas para cubrir las necesidades energticas de nuestro organismo, se almacena en el hgado (10% de la masa heptica) y en los msculos (1% de la masa muscular) de los vertebrados. Adems, pueden encontrarse pequeas cantidades de glucgeno en ciertas clulas gliales del cerebro.

La funcin del glucgeno muscular es actuar como una fuente de fcil disponibilidad de unidades de hexosa para la gluclisis dentro del propio msculo. El glucgeno heptico sirve en gran parte para exportar unidades de hexosa para la conservacin de la glucosa sangunea, en particular entre comidas.

7- Qu es y donde se encuentra el agar? Dnde se usa? Es un polisacrido que se obtiene de algas del gnero Gelidium, algas que se han utilizado en la cocina tradicional japonesa, por sus propiedades gelificantes, desde hace muchos siglos. Tambin se obtiene de otras algas, entre ellas especies de los gneros Gracillaria , de las que procede actualmente la mayora del agar, y de Gelidiella y Pterocladia, que aportan pequeas cantidades. La cadena de polisacrido est formada por unidades alternas de galactosa y de anhidrogalactosa, ambas en forma piranosa, unidas por enlaces a-1-4- y b-1-6-, tambin alternos. La longitud de la cadena es muy variable, y en el agar comercial predomina los tamaos entre 35.000 y 150.000 de peso molecular. Su uso principal es como medio de cultivo en microbiologa, otros usos son como laxante, espesante para sopas, gelatinas vegetales, helados y algunos postres y como agente aclarador de la cerveza.

8- Qu azucares estn en la solucin despus de la hidrlisis de la sacarosa? Formarn los azucares osazonas con la fenilhidracina? Despus de la hidrlisis de la sacarosa estn presentes cantidades iguales de D(+)-glucosa y D-(-)-fructosa, estos azcares pueden reaccionar con la fenilhidrazina y formar derivados cristalinos llamados osazona
HC CHO OH HO OH OH CH 2OH (+)-Glucosa 3C 6H5NHNH 2 Fenilhidracina OH OH CH 2OH Osazona C NNHC 6H5 NNHC 6H5 OH 3C 6H5NHNH 2 Fenilhidracina OH OH CH 2OH (-)-Fructosa HO HO CH 2OH

9- Que otros agentes diferentes a los cidos promueven la hidrlisis de carbohidratos complejos. Enzimas hidrolticas: son aquellas que rompen los enlaces covalentes por hidrlisis, es decir por el agregado de una molcula de agua (H2O). Principalmente encontrada en el metabolismo de mamferos, aunque muchas de estas enzimas ya se encuentran aisladas y son producidas artificialmente, para desarrollo de investigacin en laboratorios, o medicamentos para la digestin de determinados compuestos. 10- Cual tipo de azcar es la muestra desconocida y el Rf de la misma? El tipo de azcar desconocida es la glucosa, pues segn los resultados obtenidos, esta muestra desconocida es un carbohidrato, una hexosa dado la coloracin marrn de la prueba de Bial, un azcar reductor, por la formacin de precipitado rojo al reaccionar con reactivo de Benedict, un monosacrido por la formacin de precipitado rojo con reactivo de Barfoed, en la formacin de osazonas el tiempo que se demora la muestra desconocida en formar cristales es igual a el tiempo de formacin de cristales de la muestra de glucosa, y el Rf(factor de retardo) obtenido por medio de cromatografa de capa fina, es de 0.47, segn la bibliografa consultada el Rf de la glucosa es 0.41, y el valor obtenido dadas las condiciones solo es cercano a este.

Rf(factor de retardo)
=

Dnde Dm y FS son las distancias recorridas por la muestra y el eluente respectivamente.

1.9 4

=0.475

BIBLIOGRAFIA
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