Curs 7 PROTEINE

la investigarea proteinelor trebiue luate precauii deosebite acestea pot fi uor denaturate de : schimbrile de pH, radiaii UV, cldur sau solveni proteinele simple sunt hidrolizate la aminoacizi proteinele conjugate conin i poriuni ce nu sunt alctuite din aminoacizi, numite grupri prostetice nucleoproteinele (de la nucleele celulelor), sunt combinaii de proteine cu acizi nucleici mucoproteinele conin polizaharide complexe unele grupri prostetice sunt simple n flavoproteine (enzime oxido-reductoare) apar derivai ai riboflavinei - o vitamin

ACIZII NUCLEICI sunt trei categorii de biopolimeri cu importan vital : polizaharide , proteine acizi nucleici acizii nucleici un grup de substane organice coninute de cromozomii celulelor vii i de virui joac un rol central n stocarea i replicarea caracterelor ereditare

 acizi deoxiribonucleici (ADN) constituie materialul genetic al celulelor, cel care transport informaia ereditar din generaie n generaie acizi ribonucleici (ARN) sunt cei care elibereaz instruciunile codate zonelor care fabric proteine au mase moleculare foarte mari unele ADN-uri au mase moleculare de pn la 2 800 de milioane la hidroliz, ambele tipuri de acizi nucleici conduc la :acid fosforic, un zahr i un amestec de baze purinice i pirimidinice

degradarea blnd a acizilor nucleici conduce la un amestec de acizi cunoscui sub numele de nucleotide fiecare nucleotid conine elmentele unei baze purinice sau pirimidinice, o unitate fosfat i o unitate de pentoz fiecare unitate fosfat poate apoi fi nlturat printr-o hidroliz atent, transformnd nucleotida n nucleozid o pentoz legat de o baz purinic sau pirimidinic

adenozin(nucleozid)

acidul deoxiribonucleic (ADN) are dou funcii : se reproduce, constituind materialul de referin (cartea de intruciuni) care arat cum este construit o plant sau un animal acioneaz ca o matri n producerea ARN -ului

Diferena constitutiv ntre ADN i ARN const n nlocuirea deoxiribozei cu riboza,i a timinei cu uracilul nucleotidele i nucleozidele mai joac i alte roluri eseniale - fac parte ca buci din catalizatorii biochimici care sunt coenzimele numeroase enzime necesit, pentru a-i ndeplini funciile catalitice, prezena unei uniti neproteice mici, legat mai mult sau mai puin strns de protein coenzima nicotinamida adenin-dinucleotidul (NAD) adenozintrifosfatul (ATP)

coenzima A (CoA - SH)

METODE DE SINTEZ-pentru peptide sau proteine

se pornete ntotdeauna de la un aminoacid avnd una din grupele funcionale blocate A. Blocarea gruprii NH2

se poate realiza cu cloroformiat de benzil

1. blocarea grupei NH2 cu un agent de acilare (cloroformiat de benzil)

2. activarea grupei COOH prin transformare n clorur acid sau prin tratare cu DCCI ( carbonildiimidazol )

3. condensarea aminoacidului (blocat la grupa NH2 i activat la grupa COOH) cu un alt aminoacid cu grupa NH2 neblocat

4. repetarea reaciilor pn la adugarea, n ordine, a tuturor aminoacizilor 5. deblocarea peptidei de agentul de blocare (n cazul nostru, Cbz) B Blocarea grupei COOHse realizeaz de obicei prin esterificare

este urmat de condensarea aminoacidului C - blocat cu un aminoacid N - blocat, n prezena DCCI

urmeaz deblocarea grupei NH2 dup metodele artate anterior

apoi condensarea cu un nou aminoacid N - blocat i repetarea reaciei de deblocare a gruprii aminice pn se ataeaz toi aminoacizii peptidei n ordinea stabilit i se termin cu deblocarea final a grupelor NH2 i COOH o aplicaie a acestui principiu sintetic este sinteza n faz solid ( R.B.Merrifield, 1963) care utilizeaz ca agent de blocare pentru gruprile COOH polistirenul clorometilat prin aceast tehnic se pot sintetiza polipeptide cu activitate fiziologic( insulina, 51 aminoacizi,(1966) sauribonucleaza, din pancreas, 124 de aminoacizi ) rina Merrifield se sintetizeaz prin agitarea polistirenului cu clorometileter n prezen de SnCl4 drept catalizator unul dintre reactivii de blocare a gruparilor aminice este di t butil - dicarbonatul

di t butil - dicarbonat

BOC