Cederj - Genética Básica - Módulo 1

Gentica Bsica
SUMRIO
Aula 1 As origens das idias sobre hereditariedade
Blanche Christine Bitner-Math
Volume 1 - Mdulo 1 7 21 35 53 75
Aula 2 Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Patrick Goltsman Moreno
Aula 3 Diviso celular II Meiose

Aula 4 Mendelismo: o nascimento da Gentica

Aula 5 O Trabalho de Mendel: desvendando a Segunda Lei

Aula 6 A teoria cromossmica da herana e a descoberta

dos cromossomos sexuais
93 117 137
Aula 7 Cromossomos, genes, DNA:
uma viso atual dos fatores mendelianos
Aula 8 Do gene ao fentipo

Aula 9 Introduo Gentica Humana:

anlise de caractersticas monognicas
161 179 187 213
Aula 10 Atividade prtica

Gabarito Referncias
As origens das idias sobre hereditariedade
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Conhecer algumas das idias pr-mendelianas para explicar a hereditariedade. Compreender que a Gentica uma cincia essencialmente experimental que deve seu rpido avano utilizao de procedimentos cientficos.
AULA
Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade A frase Nada em Biologia faz sentido a no ser sob a luz da evoluo de Th. Dobzansky j sua conhecida. Sobre ela, Moore, em 1986, comentou: Mas existe algo mais fundamental de onde derivam todos os principais conceitos da Biologia, a Gentica.
INTRODUO
Esta a nossa primeira aula de Gentica. Voc j ouviu falar vrias vezes deste tema nas disciplinas Grandes Temas em Biologia e Diversidade dos Seres Vivos. Deve tambm ouvir muito na mdia da importncia dos avanos da Gentica para nossa sociedade. mesmo de esperar que se fale muito em Gentica; como Moore chamou a ateno, esta cincia est na base do entendimento de diversas reas da Biologia. Mas ser que voc realmente entende o objeto de estudo da Gentica? Neste curso, vamos fazer uma viagem ao passado e acompanhar os passos que levaram construo do nosso conhecimento sobre a natureza e transmisso da herana biolgica. Essa estratgia est baseada no artigo Science as a way of knowing Genetics, publicado por Moore em 1986 no peridico American Zoologist (Volume 26: 573-747). Embora em termos histricos o objetivo desta disciplina no inclua a descoberta da natureza do gene, ou seja, que o DNA o material gentico, procuraremos, quando conveniente, complementar o entendimento das anlises genticas clssicas luz dos fundamentos da Biologia Molecular. Chamamos de Gentica a cincia que estuda a natureza do gene e os mecanismos de herana biolgica. A Gentica um dos campos do conhecimento que mais se desenvolveu no ltimo sculo. incrvel imaginar que at o sculo XX muito pouco se sabia sobre a natureza da hereditariedade e que neste incio do sculo XXI estamos cercados dos avanos dessa cincia. Embora a curiosidade pelo entendimento dos processos que resultam na transmisso da herana biolgica remontem a cerca de 400 a.C., pode-se dizer que a cincia da Gentica comeou em 1865, com o trabalho de Gregor Mendel, um monge austraco que formulou as leis fundamentais da herana. No entanto, seu trabalho s foi descoberto pela comunidade cientfica em 1900, e a partir da o esforo e a criatividade de muitos pesquisadores, associados a um modelo de metodologia cientfica, permitiram grandes avanos na compreenso dos eventos pelos quais os fatores de Mendel, que hoje chamamos de genes, expressam sua informao. Passamos das obscuras unidades que Mendel chamava de fatores para a identificao do DNA como a base qumica da herana.
8 CEDERJ
Esse conhecimento gerou tecnologia que vem permitindo manipular o material gentico, ampliando nossa viso de como os genes funcionam, como podem ser detectados, modificados ou corrigidos. Veja no quadro a seguir alguns exemplos da aplicao dos avanos conquistados pela Gentica nas ltimas trs dcadas do sculo XX. No preciso ser um geneticista para j ter ouvido falar deles, pois esto no nosso dia-a-dia, sendo relevantes para muitos aspectos da vida humana e da sociedade, incluindo sade, produo de alimentos e questes jurdicas.
1976 - Criada a primeira companhia de Engenharia gentica, a Genetch, que produziu a primeira protena humana em uma bactria geneticamente modificada e, em 1982, comercializa a primeira droga produzida pela Engenharia Gentica, a insulina humana.
1983 mapeado nos EUA o primeiro gene relacionado a uma doena, um marcador para a doena de Huntington encontrado no cromossomo 4. O estudo permitiu o desenvolvimento de um teste diagnstico.
1985 O britnico Alec Jeffrey publica artigo que descreve a tcnica de identificao que ficou conhecida como impresso digital por DNA, que permitiu a elucidao mais precisa de crimes e testes de paternidade.
1986 Plantas de tabaco geneticamente modificadas para se tornarem resistentes a herbicidas so testadas em campo pela primeira vez, nos EUA e Frana.
1990 A terapia gentica utilizada pela primeira vez, com sucesso, em uma menina de quatro anos com um tipo de deficincia no sistema imunolgico chamado ADA.
1994 Liberao do tomate Favr Savr, o primeiro alimento geneticamente modificado cuja venda aprovada pela FDA (agncia de frmacos e alimentos dos EUA).
1996 Nascimento da ovelha Dolly, primeiro mamfero clonado a partir de uma clula de um animal adulto pelo Instituto Roslin (Esccia) e pela empresa PPL Therapeutics. Dolly morreu de envelhecimento precoce em fevereiro de 2003.
2000 Pesquisadores do consrcio pblico Projeto Genoma Humano e da empresa privada norte-americana Celera anunciam o rascunho do genoma humano, que seria publicado em fevereiro de 2001. No Brasil, pesquisadores anunciam o seqenciamento do genoma da bactria Xylella fastidiosa, a causadora da doena do amarelinho em ctricos.
Fonte: Folha de S. Paulo, especial 1953 DNA 2003 A hlice do milnio, pginas 4 e 5. Artigo produzido por Luisa Massarani (jornalista) e Fbio Gouveia (bilogo), do Museu da Vida/Casa Oswaldo Cruz/Fiocruz e Ildeu de Castro Moreira, professor de Fsica e Histria da Cincia da UFRJ.
CEDERJ 9
AULA
MDULO 1
Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade
ENTO, VAMOS VOLTAR NO TEMPO?

A curiosidade pela forma como as caractersticas so transmitidas geraes aps geraes muito antiga. J na Grcia, cerca de 400 a.C., o filsofo Hipcrates, considerado o Pai da Medicina, props a hiptese da pangnese para explicar a transmisso de caractersticas entre as geraes. Hipcrates admitia que a hereditariedade baseava-se na produo de partculas por todas as partes do corpo e na transmisso dessas partculas para a descendncia no momento da concepo. Note que nessa hiptese est embutido o conceito de hereditariedade de caracteres adquiridos, o que foi retomado por Lamarck muito tempo depois.
!
Em muitos campos da cincia necessrio conhecer a embriologia das idias: nossa viso moderna s pode ser completamente compreendida e julgada se ns entendermos as razes que nos fizeram pensar como ns pensamos. J. R. Baker
Aristteles (384-322 a.C.), em seu livro Gerao dos Animais, que trata de problemas de hereditariedade e de desenvolvimento, discutiu a hiptese da pangnese proposta por Hipcrates e no considerou que essa fosse uma boa explicao para a transmisso da herana. Entre os argumentos para rejeitar a hiptese da pangnese, Aristteles inclui: 1. Pode-se observar semelhanas entre pais e filhos que no se restringem estrutura corporal, como a voz ou o jeito de andar. Como caractersticas no estruturais poderiam produzir as tais partculas para sua transmisso? 2. Certas crianas pareciam herdar caractersticas de ancestrais remotos; 3. Indivduos mutilados podiam produzir descendncia perfeita; 4. Se o pai e a me produzem partculas precursoras de todo o corpo, os descendentes no deveriam ter duas cabeas, duas pernas etc.?
10 C E D E R J
Segundo Aristteles, deveria haver uma base fsica para a hereditariedade no smen produzido pelos pais. Ele questiona: Por que no admitir diretamente que o smen... origina o sangue e a carne, ao invs de afirmar que o smen ele prprio tanto sangue quanto carne? Embora no parea, a contribuio de Hipcrates e Aristteles foi um grande comeo. Hipcrates foi capaz de identificar um problema cientfico: como se d a transmisso de caractersticas entre as geraes? Este , possivelmente, o passo mais difcil de todos para o avano do conhecimento. Ele ainda props uma hiptese explicativa e a escreveu de maneira compreensvel. Aristteles tambm props uma hiptese para explicar a hereditariedade que, embora vaga, foi fundamental para todo trabalho posterior na rea. Essa idia permitiu que se deixasse de atribuir hereditariedade uma base sobrenatural ou emocional e se passasse a pens-la como resultado da transmisso de algum tipo de substncia pelos pais. Durante a Idade Mdia o interesse pelas questes cientficas praticamente cessou no mundo ocidental. Foi o perodo em que a Igreja exerceu hegemonia sobre o pensamento humano. Com a RENASCENA, o interesse volta, a observao e a experimentao passam a ser aplicadas de forma sistemtica na tentativa de compreender a natureza. Para compreendermos os avanos da Gentica a partir dessa retomada da investigao cientfica, precisaremos ter uma noo de como evoluiu a nossa maneira de fazer e pensar a cincia. RENASCENA
Movimento literrio, artstico e cientfico que se verificou nos sculos XV e XVI e que se baseou, em grande parte, na imitao da Antigidade.
AS ORIGENS DA CINCIA
Voc j foi introduzido Filosofia da Cincia na aula sobre o Desenvolvimento Histrico do Evolucionismo em Grandes Temas da Biologia. Mas como este um assunto importante para que voc acompanhe a construo do conhecimento no campo da Gentica, vamos rever essa histria. Segundo estudiosos de Filosofia da Cincia, F RANCIS B ACON foi um dos principais responsveis pela revoluo cientfica e pela organizao do mtodo cientfico. Entre 1606 e 1626, Bacon publicou uma srie de livros onde defendia a cincia emprica como o nico caminho adequado para testar hipteses e criticava severamente o hbito clssico de comear uma investigao com um ponto de vista aceito como verdade e deduzir, a partir da, as conseqncias.
FRANCIS BACON (1561-1626)
Lorde Chanceler da Inglaterra, escreveu o livro Instauratio Magna em 1620, onde descreveu suas idias de como fazer cincia.
!
Provas empricas so informaes obtidas a partir da observao direta ou indireta da natureza ou de experimentos.
C E D E R J 11
AULA
MDULO 1
Sua sugesto era que devia se partir dos fatos conhecidos relacionados com algum fenmeno natural e tentar formular princpios gerais que explicassem esses fatos. Esse mtodo lgico de raciocnio de comear pelo particular e seguir para o geral conhecido como induo. Nos sculos que se seguiram a Bacon, muitos outros filsofos da cincia contriburam para a nossa viso atual de cincia. O procedimento preconizado por Bacon evoluiu para o chamado mtodo hipotticoDAVID HUME (1711-1776)
Filsofo e historiador.
dedutivo. Nessa concepo, um estudo cientfico comea pela observao ou experimentao de algum fenmeno natural. Hipteses provisrias so formuladas visando a explicar tal fenmeno e, a partir dessas hipteses, so feitas dedues que permitem test-las. A viso de que explicaes cientficas so generalizaes derivadas de uma srie de observaes denominada positivismo. Esta viso sofreu diversos questionamentos desde o sculo XVII, mas foi s em meados do sculo XVIII que o filsofo escocs DAVID HUME apontou um srio problema na induo de generalizaes. Segundo ele, a nica garantia que se tem para o sucesso do mtodo indutivo o seu sucesso passado; uma prxima observao pode derrubar a generalizao. A tentativa mais conhecida de resolver esse paradoxo foi a do filsofo austraco KARL POPPER. Segundo sua viso, os cientistas realmente fazem hipteses sobre a natureza do mundo, s vezes por
KARL RAIMUND POPPER (1902-1994)

Filsofo da cincia.
meio de generalizaes indutivas, e, ento, submetem as hipteses a testes rigorosos. Esses testes, no entanto, no so tentativas de provar uma idia particular, mas sim tentativas de neg-las. Aquele exemplo clssico: aps observar milhares de cisnes, pode-se generalizar que todos os cisnes so brancos, mas uma generalizao s ser realmente vlida se pudermos observar todos os cisnes que existem, existiram e existiro. O aparecimento de um cisne preto derrubaria a generalizao. Isto , embora no se possa verificar se todos os cisnes so brancos, ao achar um cisne que no seja branco pode-se refutar esta proposta.
!
Hume e Popper esto entre os mais importantes filsofos da cincia.
12 C E D E R J
O fragmento abaixo foi extrado do texto Reflexes sobre Cincia e seu Ensino, do prof. Jos Mariano Amabis, do Departamento de Biologia da USP. Ele resume a viso atual de como se processa a pesquisa cientfica:
...Uma vez identificado o problema, o pesquisador usa toda sua capacidade criativa para propor uma explicao provisria para ele. Essa explicao nada mais do que um palpite sobre o porqu da contradio entre o conhecimento vigente e o fato. Esse palpite a hiptese. Uma hiptese cientfica, no entanto, no uma criao a partir do nada. Em sua elaborao, o pesquisador lana mo das teorias vigentes relacionadas ao problema em questo, reunindo, analisando e interpretando toda informao disponvel sobre o assunto. Pode-se dizer que durante a elaborao de uma hiptese h um processo de induo. A hiptese ou hipteses provisrias so, ento, submetidas a testes que oferecem as mais severas condies para crtica. Mas os nicos testes possveis so aqueles que, eventualmente, podem mostrar que a hiptese falsa. No existe maneira em cincia de se mostrar que uma hiptese correta, ou verdadeira. Assim, as hipteses cientficas se credenciam por testes de falseabilidade. Nesse tipo de teste, so feitas dedues a partir da hiptese, ou seja, imaginadas situaes em que, se a hiptese for verdadeira (embora no se possa provar que ela o seja), haver uma ou mais conseqncias especficas. As situaes imaginadas devem oferecer todas as condies para que, se a hiptese no for correta, a previso no se confirme e, assim, a hiptese seja refutada. E se a hiptese no for refutada? Rigorosamente devemos dizer que a hiptese no foi rejeitada, ou refutada, e nunca que ela foi confirmada, pois, como vimos, no possvel validar uma hiptese positivamente, por mais rigor e controle que tenham sido usados em seu teste. Isso quer dizer que em cincia, podemos ter certeza quando estamos errados, mas nunca poderemos ter certeza de estarmos certos. Assim, o conhecimento cientfico e os resultados em cincia no devem ser aceitos como definitivos e inquestionveis; uma explicao em cincia aceita enquanto no tivermos motivos para duvidarmos dela, ou seja, enquanto for verdadeira acima de qualquer suspeita. ...Essas mudanas na perspectiva de como os cientistas realmente trabalham levam-nos a uma importante reinterpretao das relaes entre teorias e dados. Somos obrigados a fazer uma separao bem definida entre o mundo terico e o mundo dos dados empricos. Isto cria uma concepo de cincia circular, em vez de linear.
!
Para conhecer um pouco mais sobre o procedimento cientfico de forma bemhumorada, leia, de Rubem Alves, Filosofia da Cincia: introduo ao jogo e suas regras. 18a. ed., So Paulo: Brasiliense, 1993.
C E D E R J 13
AULA
MDULO 1
Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade Ela envolve dois mundos distintos mas paralelos (o mundo terico no qual residem as teorias e o mundo emprico das observaes), ligados por um processo de retroalimentao de testes de hipteses. Teorias so idias ou modelos de como o mundo funciona. Ns trabalhamos dentro de um mundo estritamente terico, deduzindo que conseqncias devem acontecer a partir das suposies e premissas do modelo; ns ento testamos a validade do modelo comparando as previses contra o mundo real. Uma vez que o modelo fornece previses que coincidem com o que realmente observamos, ns continuamos a desenvolver o modelo. Mas quando o modelo falha ao prever corretamente a realidade, ns alteramos o modelo ou procuramos elaborar um melhor. Cincia, em outras palavras, um processo de retroalimentao: ela aprende a partir de seus prprios erros. Seu comportamento darwiniano, no sentido de que apenas as teorias bem-sucedidas sobrevivem.
A TENTATIVA DE DARWIN PARA EXPLICAR A HERANA BIOLGICA

Na aula Evoluo: uma teoria criada h 150 anos ainda atual, da CHARLES ROBERT DARWIN (1809-1882)
Naturalista ingls, publicou seu mais famoso livro, On the origin of species, em 1859.
disciplina Grandes Temas em Biologia, voc teve um primeiro contato com as idias de DARWIN sobre evoluo biolgica. Agora veremos que foi ele tambm que nos forneceu um dos primeiros exemplos do uso da induo na formulao de uma hiptese visando compreender a hereditariedade. Compreender as leis da transmisso da herana biolgica e do surgimento de novas variantes era um passo fundamental para a teoria de Darwin da evoluo por meio da seleo natural. Na poca, a maioria das pessoas no ocidente acreditava que cada organismo havia sido criado separadamente pelo Deus judaico-cristo e que as variaes entre indivduos da mesma espcie seriam aleatrias e causadas principalmente por diferenas ambientais. Darwin, no entanto, estava convencido de que a hereditariedade era um fenmeno geral, bastante preciso e importante. Sua tentativa de entender a hereditariedade resultou no mais longo de seus trabalhos The variation of animals and plants under domestication (1868), onde ele reuniu uma grande quantidade de informaes, buscando entender a possvel origem de animais e plantas domesticados a partir de ancestrais selvagens.
14 C E D E R J
Darwin admitia que os mesmos fatores envolvidos na seleo artificial sobre variaes hereditrias, que levavam ao rpido desenvolvimento de espcies domsticas com caractersticas consideradas favorveis, deveriam explicar a lenta seleo natural responsvel pela origem das espcies. Para a elaborao de seu livro, Darwin se baseou em experimentos que ele mesmo realizou com plantas e animais, principalmente pombos, e no levantamento sobre os resultados de outros pesquisadores.
Figura 1.1: A partir de uma linhagem de pombos selvagens, uma grande variedade de pombos com morfologias distintas foi obtida por seleo em poucas geraes. Nos tempos de Darwin, o processo de cruzamento e seleo era realizado sem o conhecimento dos princpios da herana mendeliana.
C E D E R J 15
AULA
MDULO 1
Aps um sistemtico e extenso trabalho de levantamento de informaes sobre a hereditariedade, Darwin foi capaz de extrair algumas observaes fundamentais, entre elas: 1. Uma vez que caractersticas morfolgicas e fisiolgicas so herdadas, deve existir uma base fsica para a hereditariedade; 2. Todos os fatores hereditrios devem estar contidos nos gametas, uma vez que estes so a nica ligao entre as geraes; 3. Os gametas no podem ser a nica sede dos fatores hereditrios, pois alguns organismos podem se reproduzir de forma assexuada e h organismos capazes de regenerar partes perdidas; 4. Os fatores hereditrios podem estar presentes e no se expressarem em curto ou longo prazo. O que sugere que os fatores hereditrios so relativamente estveis e perenes mesmo quando latentes; 5. Os fatores hereditrios podem mudar ou fatores totalmente novos podem ser formados, como no caso do aparecimento de novas variaes; 6. Uma vez que os fatores hereditrios esto presentes gerao aps gerao, eles devem se replicar; 7. Na poca, autoridades idneas relataram casos onde mutilaes pareciam ter sido herdadas e casos onde os fatores hereditrios pareciam atuar como agentes infecciosos. Darwin considerou esses relatos para a formulao de sua hiptese, mas nos dias de hoje haveria grande dvida com relao veracidade dessas informaes. Ao tentar explicar todas as informaes disponveis sobre a hereditariedade, Darwin lanou mo, com algum aprimoramento, da hiptese da pangnese formulada por Hipcrates cerca de 2 mil anos antes. Segundo Darwin, toda parte de um organismo produziria gmulas, minsculas unidades de reproduo, de tipos especficos. Estas gmulas seriam capazes de se mover atravs do corpo, de modo que todas as partes corporais, inclusive vulos e espermatozides, conteriam gmulas de todos os tipos. Durante o desenvolvimento, as gmulas se uniriam umas s outras para produzir novas clulas dos tipos que as tinham produzido; novas gmulas seriam produzidas continuamente; as gmulas seriam em geral ativas na descendncia, mas poderiam ficar dormentes por vrias geraes.
16 C E D E R J
Embora a hiptese de Darwin estivesse baseada nas gmulas, ele no tinha nenhuma evidncia de sua existncia. As gmulas seriam uma base fsica inventada para explicar o fenmeno observvel da hereditariedade. Inventar uma explicao para um fenmeno um procedimento cientfico legtimo. Como vimos, isso que os cientistas fazem quando formulam uma hiptese. A fragilidade da hiptese da pangnese estava no fato de ela no simplificar a hereditariedade aps apresentar exemplos do modo de ao da hereditariedade, ele sugere que a herana acontece dessa forma porque as gmulas atuam assim; isto o mesmo que dizer que hereditariedade sinnimo de gmula. E mais, na impossibilidade de se elaborar um teste decisivo para a hiptese. Darwin comeou tentando explicar um grande problema e acabou explicando muito pouco. Contudo, na poca no se conhecia nenhuma outra hiptese melhor capaz de explicar todas as informaes existentes sobre a hereditariedade. A grande contribuio de Darwin foi catalogar e organizar uma srie de informaes que uma teoria abrangente sobre hereditariedade deveria explicar, e atribuir uma base fsica hereditariedade, fornecendo a outros cientistas um lugar onde comear. A Cincia Gentica, por sua caracterstica essencialmente experimental, avanou muito e rapidamente a partir da utilizao do mtodo cientfico como procedimento padro para investigao. A partir de 1900, os estudos sobre a hereditariedade fizeram enormes progressos, tentando primeiramente explicar os casos mais simples e, s ento, medida que eram desenvolvidas hipteses testveis, passou-se a estudar casos mais complexos, explicando-os e incorporando-os teoria gentica.
C E D E R J 17
AULA
MDULO 1
INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA

Na prxima aula veremos que, em paralelo com os estudos que buscavam leis gerais para a transmisso da herana biolgica, outros pesquisadores avanavam em um outro paradigma, o desenvolvimento da teoria celular. Um pouco mais frente, veremos tambm que foi a integrao entre essas duas formas de ver a natureza que permitiu o grande salto para o entendimento da hereditariedade.
THOMAS KUHN (1923-1996)

Fsico e historiador da cincia, escreveu The Structure of Scientific Revolutions, publicado em 1962. Segundo Kuhn, paradigma uma maneira de ver a natureza. Uma realizao cientfica universalmente reconhecida que, durante algum tempo, fornece problemas e solues modelares para uma comunidade de praticantes de uma cincia.
No final deste sculo XX, preciso que fique claro para todos que nenhum sistema explicar o mundo em todos os seus aspectos e detalhes. Ter ajudado na destruio da idia de uma verdade intangvel talvez seja uma das mais valiosas contribuies da metodologia cientfica.
Franois Jacob (em La logique du vivant. Une histoire de lhrdit, 1970).
18 C E D E R J
EXERCCIOS
1. Identifique no texto abaixo o que podemos considerar como: fato, hiptese, dedues e como a hiptese proposta pode ser testada por falseabilidade. Em meados do sculo VII, as pessoas acreditavam que o aparecimento de seres vermiformes fosse proveniente da transformao espontnea da matria de cadveres em decomposio. Francesco Redi, ao ver moscas voando em torno de cadveres de diversos animais, sups que os seres vermiformes poderiam ser larvas que surgiam de ovos dessas moscas. Redi, ento realizou o seguinte experimento: colocou cadveres de diversos animais em frascos e tapou alguns deles com uma fina gaze enquanto deixou outros abertos. Nestes, onde as moscas entraram, logo apareceram as larvas. J nos frascos tapados, nenhum ser vermiforme apareceu. Acompanhando o desenvolvimento das larvas, Redi observou o aparecimento de moscas idnticas s que sobrevoavam os cadveres. Este experimento derrubou a explicao de que os seres vermiformes surgiam da transformao espontnea da carne em decomposio. 2. Darwin pde supor que existiam fatores hereditrios e que eles estavam presentes em pelo menos um grande nmero de clulas; eles podiam ser transmitidos atravs dos gametas, podiam se expressar ou permanecer dormentes em uma dada gerao, podiam persistir imutveis por geraes, podiam se alterar sob certas condies desconhecidas e eram capazes de aumentar em nmero. Com os conceitos que voc tem atualmente sobre a transmisso da herana biolgica, voc seria capaz de identificar os processos genticos que explicam os fenmenos listados por Darwin. Isto : a. Qual a natureza molecular dos fatores hereditrios? b. Nas clulas, onde esto localizados exatamente os fatores hereditrios? c. Como esses fatores so transmitidos para a prxima gerao? d. Por que uma caracterstica presente em um dos pais nem sempre se expressa em sua descendncia? e. O que permite que os fatores hereditrios aumentem de nmero, mantendo-se gerao aps gerao? f. O que causa eventuais alteraes nos fatores hereditrios, resultando no aparecimento repentino de novas variaes?
C E D E R J 19
AULA
MDULO 1
Tente responder a estas questes. No se preocupe se no conseguir responder a alguma delas. Guarde suas respostas, pois elas sero utilizadas no futuro para avaliarmos a evoluo do seu entendimento sobre os fundamentos da Gentica. 3. Faa uma reflexo sobre o texto desta primeira aula respondendo s questes abaixo: a. O texto acrescentou alguma informao para voc? Qual? b. Que pontos voc considerou mais interessantes? c. Que pontos voc considerou irrelevantes? d. H algum ponto que no ficou claro? e. H algum ponto que voc gostaria de aprofundar? f. Alguma outra observao? g. Diante da sua avaliao sobre esta primeira aula, voc pretende tomar alguma atitude que melhore o seu aprendizado sobre as questes levantadas? Qual?
Essas so questes que voc deve se fazer ao final de todas as aulas do curso.
20 C E D E R J
Diviso celular I Mitose e o ciclo celular
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Compreender os eventos histricos que levaram descoberta da diviso celular. Identificar os estgios da mitose e relacion-los com a transmisso das caractersticas hereditrias. Reconhecer as etapas do ciclo celular.
AULA
Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular
Com certeza, voc j estudou na disciplina Grandes Temas em Biologia, os trabalhos de Robert Hooke (1635-1703), Antony van Leeuwenhoek (1632-1723) e Theodor Schwann (1810-1882), dentre outros, e percebeu que eles tiveram grande influncia na formulao da Teoria Celular. Segundo uma viso simplificada desta teoria, as clulas podem ser consideradas como as unidades bsicas de estrutura e funo, ou seja, so as menores unidades capazes de ter vida independente. Desta forma, so capazes de usar substncias obtidas do meio para manter e produzir o estado vivo. Agora, veremos que, apesar de a teoria celular ter sido formulada na primeira metade do sculo XIX, eram necessrias outras duas informaes antes que as clulas pudessem ser consideradas importantes para a transmisso das caractersticas hereditrias: (1) a descoberta de que os espermatozides e vulos so clulas e (2) o reconhecimento de que clulas s se originam de clulas preexistentes. A NATUREZA CITOLGICA DO ESPERMATOZIDE Quando, no incio do sculo XIX, Schwann e outros propuseram que o corpo dos organismos seria composto por clulas e que as clulas se caracterizariam por possuir uma matriz envolvida por membrana, contendo no seu interior um ncleo, foi fcil reconhecer que o vulo seria uma clula. Mas, no caso dos espermatozides, essa associao no era to clara. Embora alguns pesquisadores tenham proposto a importncia dos espermatozides para a fecundao, muitos outros estavam convencidos de que os espermatozides eram parasitas. Da o termo que significa animais do esperma. Imagine que, entre 1766 e 1768, Linnaeus tentou classificar os animais do esperma. Foi Leeuwenhoek, em 1667, quem primeiro comunicou a descoberta de que o lquido seminal possua criaturas microscpicas e props a primeira hiptese de que os espermatozides entrariam no vulo causa0ndo sua fertilizao (Figura 2.1). Mas, como vimos, essa hiptese LAZZARO SPALLANZANI (1729-1799)
Bilogo italiano, realizou importantes pesquisas em reproduo animal, o que contribuiu definitivamente para a derrocada da teoria da gerao espontnea de Aristteles.
no foi considerada por muito tempo Mais de um sculo depois, em 1784, LAZZARO SPALLANZANI realizou uma srie de experimentos para verifi car a funo do smen na reproduo e corroborou a hiptese de Leeuwenhoek. Ele observou que, ao fi ltrar o smen de rs machos, retirando os espermatozides ali presentes, o lquido perdia seu poder fecundante.
22 C E D E R J
Figura 2.1: Ilustraes dos animais do esperma feitas por Leeuwenhoek.
No entanto, s em 1841, a idia de que os espermatozides eram clulas foi realmente aceita pela comunidade cientfi ca, quando ALBERT KLLIKER, estudando a histologia dos testculos, verifi cou que as clulas ali presentes davam origem aos espermatozides. Por outro lado, a evidncia principal de que o espermatozide entra no vulo durante a fertilizao s foi dada em 1854, por George Newport. Assim, fi cou estabelecido que os espermatozides eram clulas que se fundiam com os vulos durante a reproduo sexuada e reconheceu-se que os vulos e espermatozides deveriam conter a informao hereditria ser passada para a prxima gerao.
C E D E R J 23
RUDOLPH ALBERT VON KLLIKER (1817-1905)

Anatomista e fisiologista, contribuiu com importantes estudos na rea da histologia.
AULA
MDULO 1
O prximo passo foi o reconhecimento de que toda clula vem de uma clula preexistente. Aps estudos realizados com muitos organismos, R U D O L P H V I R C H O W , em 1855, props: omnis cellula e cellula (toda clula provm de uma clula), frase que ficou famosa! claro que, como sempre acontece durante o desenvolvimento de novas teorias, essa idia no foi imediatamente aceita por todos. Muitos continuavam a acreditar que os organismos podiam surgir espontaneRUDOLPH LUDWIG CARL V IRCHOW (18211902)
Mdico e sanitarista alemo, dedicou-se ao estudo da patologia celular. Hoje conhecido como o pai da patologia moderna.
amente. Mas o prosseguimento das pesquisas nessa rea levou ao reconhecimento de que a transmisso da herana biolgica est relacionada continuidade celular. Mas como seria o processo de origem de uma clula a partir de outra? Seria possvel identifi car regularidade nesse processo? Foi Anton Schneider quem fez a primeira descrio das alteraes nucleares durante o processo de diviso celular, em 1873. Observe, na Figura 2.2, as ilustraes das imagens que Schneider viu ao analisar as etapas iniciais do desenvolvimento embrionrio de um platelminto (Mesostoma sp.). Note, no primeiro desenho, o ovo rodeado pelas clulas foliculares e por estruturas espirais, os espermatozides. Nos outros desenhos, j possvel identifi car o processo de diviso celular. Schneider observou o aparecimento de estruturas em forma de basto, que mais tarde foram denominadas cromossomos (cromo = coloridos e somos = corpos) devido sua afi nidade pelos corantes. Ao fi nal da diviso, essas estruturas seriam distribudas entre as duas novas clulas. Novamente, permanecia uma dvida: seriam as estruturas em basto artefatos das tcnicas utilizadas para fi xao e colorao das clulas? Ou ser que essas estruturas eram realmente componentes de clulas vivas?
Figura 2.2: Ilustraes de Schneider (1873) das alteraes nucleares durante a clivagem do ovo de Mesostoma sp.
24 C E D E R J
WALTHER FLEMMING foi quem respondeu a essa pergunta quando, em 1882, publicou suas observaes sobre a diviso celular em clulas vivas de larvas de salamandras no livro Zellsubstanz, Kern und Zelltheilumg. Estava comprovado que as estruturas em forma de basto no eram um artefato das tcnicas citolgicas, pois l estavam, nas clulas vivas. Flemming tambm foi capaz de propor a seqncia de eventos relacionados diviso celular e descrever cada um deles com tamanha preciso que apenas detalhes da mitose foram adicionados a sua descrio. Veja na Figura 2.3 as ilustraes feitas por Flemming. Os desenhos mostram sua tentativa de ordenar os eventos desde o incio da diviso, quando os cromossomos comeam a se tornar visveis, at a formao de duas clulas. Alm da seqncia de eventos, ele tambm chama a ateno, no desenho maior apresentado na segunda linha, para o fato dos cromossomos estarem duplicados no incio da diviso. WA L T H E R FLEMMING (1843-1905)
Anatomista alemo, um dos primeiros estudiosos da citogentica.
Figura 2.3: Ilustraes de Flemming (1882) mostrando os eventos nucleares que ocorrem durante a mitose em clulas vivas de larva de salamandra.
C E D E R J 25
AULA
MDULO 1
Foi Flemming quem cunhou os termos cromatina, mitose, prfase, metfase e anfase, que usamos at hoje. Ele tambm fez as primeiras observaes de cromossomos mitticos em clulas humanas, mas as tcnicas disponveis na poca no permitiram a identificao do nmero de cromossomos na nossa espcie. Em 1923, Painter, aps analisar as clulas de testculos humanos, props que a nossa espcie possuiria 24 pares de cromossomos. O nmero correto de cromossomos da espcie humana (23 pares) s foi estabelecido por H. J. Tijo e A. Levan, no artigo The chomossome numbers of man, publicado no volume 42 do peridico Hereditas, em 1956.
DESVENDANDO A DIVISO CELULAR

A mitose um tipo de diviso celular assexual que ocorre em eucariotos. Nesse tipo de diviso, a partir de uma clula so formadas duas clulas-filhas que apresentam o mesmo nmero de cromossomos da clula-me. Nos organismos multicelulares, a mitose responsvel por transformar o zigoto em duas clulas, depois quatro, oito at que um organismo composto por mltiplas clulas seja formado. A mitose tambm responsvel pela multiplicao de organismos unicelulares, como os protozorios e alguns fungos. O CICLO DE DIVISO CELULAR O ciclo de diviso celular composto por quatro estgios: S (fase
CENTROSSOMO
Estrutura localizada prxima ao ncleo das clulas animais e vegetais, sendo o centro primrio de organizao dos microtbulos. Em animais, composto por um par de centrolos, embebido em uma matriz protica.
de sntese do DNA), M (fase de diviso celular Mitose), G1 e G2 (gap, ou fases intermedirias), sendo um processo contnuo que leva cerca de 10-20 h, dependendo do tipo de clula e estgio de desenvolvimento do organismo. Juntas as fases G1, S e G2 constituem a Interfase, intervalo entre mitoses. Esta , em geral, a fase mais longa, ocupando cerca de 90% do ciclo. A fase G1 inicia aps a mitose e termina antes da replicao do DNA. A fase G2 inicia aps a replicao do DNA e antecede a diviso celular (Figura 2.4). Durante as fases G1 e G2 a clula sintetiza protenas e organelas e monitora os ambientes interno e externo a fim de garantir que as condies sejam propcias replicao e diviso celular. A fase G1 especialmente importante neste contexto. Seu perodo pode sofrer grande variao, dependendo das condies externas e da sinalizao proveniente de outras clulas. Se as condies extracelulares forem desfavorveis, a clula pode interromper a fase G1 e entrar em um estado de repouso conhecido como G0. Neste estado, a clula pode permanecer dias, semanas ou at mesmo anos at que as condies sejam favorveis e ela possa continuar sua proliferao.
26 C E D E R J
Figura 2.4: Ciclo da diviso celular.
Na fase G1, cada cromossomo no ncleo celular possui uma cromtide. Durante a fase S, o DNA de cada cromossomo se replica. Como resultado desse processo, cada cromossomo fica com duas cromtides idnticas (cromtides-irms). A duplicao do DNA fundamental para que, ao final da diviso mittica, as duas clulas-filhas possuam o mesmo nmero de cromossomos da clula-me. tambm na fase S que se inicia a duplicao dos centrolos no centrossomo. S no final da fase G2, a duplicao dos centrolos est completa, mas os dois pares ainda se mantm em um nico centrossomo. Durante a Intrfase, os cromossomos no podem ser vistos individualmente, isso porque esto pouco compactados e, em conjunto, assumem um aspecto enovelado. Em geral, a visualizao de cada um dos cromossomos s possvel durante a diviso celular (Figura 2.5).
Figura 2.5: A estrutura de um cromossomo duplicado ao final da prfase. Cada cromtide-irm formada por uma nica molcula de DNA condensada.
C E D E R J 27
AULA
MDULO 1
A DIVISO CELULAR FASES DA MITOSE Embora a mitose seja um processo contnuo, ela dividida em fases pelos citologistas com o intuito de facilitar sua descrio. As fases da mitose so chamadas de: prfase, metfase, anfase e telfase. A seqncia de eventos em cada uma dessas fases pode ser vista na Figura 2.6. Ao incio da prfase, os cromossomos duplicados, que se encontram distendidos, se contraem numa srie de helicoidizaes, formando uma estrutura altamente compacta. Esta compactao facilita sua movimentao pela clula e permite que eles sejam facilmente visualizados pelos citologistas. Neste estgio, a membrana nuclear, denominada carioteca, comea a se dissociar. O centrossomo se divide e cada par de centrolos migra para um dos plos da clula. O nuclolo j no mais visvel. Ao final da prfase, os cromossomos j esto totalmente condensados, permitindo a visualizao das cromtides-irms unidas pela regio denominada centrmero ou constrio primria. A carioteca, praticamente, no existe mais, e cada par de centrolos j atingiu um plo da clula. A partir desses centrolos, um conjunto de fibras, formadas por polmeros de uma protena chamada tubulina, se projeta em direes opostas, formando os fusos acromticos. Os cinetcoros se formam pela associao de protenas ao centrmero e funcionam como stios aos quais se ligam os microtbulos do fuso acromtico, cuja funo guiar a movimentao dos cromossomos.
28 C E D E R J
Figura 2.6: Esquema geral da mitose em clulas animais.
C E D E R J 29
AULA
MDULO 1
A etapa que se caracteriza pelo alinhamento dos cromossomos na placa equatorial da clula denominada metfase. Em clulas corada, podemos ver nitidamente os cromossomos presos aos fusos acromticos. A Figura 2.7 apresenta um diagrama esquemtico de uma clula em metfase, mostrando os trs conjuntos de microtbulos que formam as fibras do aparato mittico. Todos os microtbulos tm uma de suas extremidades ligada a um dos centrossomos nos plos da clula. Os microtbulos do ster projetam-se em direo ao crtex da membrana plasmtica e ficam ligados a ele. Os microtbulos cromossmicos ficam conectados aos cinetcoros na regio centromrica dos cromossomos. Os microtbulos polares se projetam na direo do centro da clula, sobrepondo suas extremidades distais (regio de interao).
Figura 2.7: Os trs conjuntos de microtbulos que formam as fibras do fuso em uma clula em metfase da mitose.
As cromtides metafsicas so altamente helicoidizadas e distintas, facilitando assim a visualizao dos cromossomos. O diagnstico dos distrbios causados por alteraes cromossmicas estruturais normalmente feito nesse estgio. Durante a anfase, as cromtides-irms dos cromossomos se separam, formando dois grupos que se movem orientados pelo fuso para os plos opostos da clula. Este movimento resultado do encurtamento dos microtbulos cromossmicos. Cada cromtide agora considerada um cromossomo independente. Na telfase, os cromossomos atingem as extremidades do fuso em cada plo da clula. A carioteca e o nuclolo se refazem. Os cromossomos vo se tornando cada vez menos condensados, at atingirem seu estado de compactao inicial. A clula, ento, se divide em duas atravs de
30 C E D E R J
uma diviso citoplasmtica, denominada citocinese. Assim, so formadas duas clulas-filhas e o processo de diviso celular se completa. Cada clula-filha herda uma cromtide de cada par de cromtides-irms. Dessa forma, esse tipo de diviso produz duas clulas geneticamente idnticas a partir de uma nica clula genitora. SER QUE A MITOSE O NICO PROCESSODE DIVISO CELULAR? Como sabemos, a mitose produz clulas-filhas com o mesmo nmero de cromossomos da clula-me; os gametas, ponte entre as geraes, se unem durante a fecundao e o nmero de cromossomos nos indivduos de uma espcie constante entre geraes. Logo, a mitose no pode ser o nico tipo de diviso celular, pois nesse caso, o nmero de cromossomos deveria dobrar a cada gerao. Na prxima aula, veremos como mantida a constncia no nmero de cromossomos entre as geraes, conhecendo as etapas de um outro tipo de diviso celular, a meiose, e a sua importncia no ciclo de vida de organismos eucariotos.
RESUMO
A diviso celular apenas uma etapa do ciclo celular, que compreende mais trs fases: G1 em que ocorre a duplicao das organelas e antecede a replicao do material gentico; S, em que ocorre a sntese do material gentico e incio da duplicao dos centrolos; e G2, quando a clula se prepara para a diviso. A mitose um tipo de diviso celular assexual que ocorre em eucariotos. Nesse tipo de diviso, a partir de uma clula so formadas duas clulas-filhas que apresentam o mesmo nmero de cromossomos da clula-me. O processo se inicia com a condensao dos cromossomos duplicados que, dessa forma, apresentam duas cromtides-irms. Esse estgio denominado Prfase. O prximo estgio, chamado Metfase, caracterizado pelo alinhamento dos cromossomos na placa equatorial da clula. Durante a Anfase, as cromtides-irms se separam e cada uma migra para um plo da clula. No ltimo estgio, denominado Telfase, os cromossomos atingem as extremidades do fuso em cada plo. A clula, ento, se divide em duas clulas-filhas atravs de uma diviso citoplasmtica, denominada citocinese.
C E D E R J 31
AULA
MDULO 1
EXERCCIOS
1. Preencha os espaos em branco nas frases de 1 a 8 usando o termo abaixo mais apropriado. (a) anfase (d) mitose b) metfase (e) telfase (c) prfase (f) intrfase
1.1 ( ) um tipo de diviso nuclear em que os ncleos-filhos conservam o mesmo nmero de cromossomos do ncleo original. 1.2 A migrao dos cromossomos para os plos ocorre na ( ). 1.3 Cromossomos alinhados na regio equatorial da clula caracterizam a fase da diviso chamada ( ). 1.4 ( ) a primeira fase da diviso celular, na qual ocorre a condensao dos cromossomos, que se tornam evidentes. 1.5 ( ) a fase final da diviso celular, em que os ncleos se reorganizam. 1.6 A replicao do DNA, isto , a duplicao dos cromossomos, ocorre na ( ). 1.7 No final da ( ), os microtbulos do fuso acromtico encontram-se unidos aos cinetcoros. 1.8 ( ) a fase na qual ocorre a separao das cromtides-irms de cada cromossomo. 2. Qual a estrutura responsvel pela correta distribuio dos cromossomos durante a diviso celular? Como ela organizada? 3. O ncleo interfsico est em repouso, como acreditavam os antigos citologistas? Relacione cada etapa da intrfase (G1, S e G2) aos eventos que ocorrem no ncleo celular. 4. Por que a mitose no pode ser o nico mecanismo de diviso celular? 5. Identifique nas ilustraes de Flemming (Figura 2.3) os esquemas que melhor caracterizam cada etapa da mitose. Justifique sua resposta.
32 C E D E R J
6. Voc j ouviu falar em mapa de conceitos? Um mapa conceitual uma forma esquemtica de representar o conhecimento sobre um dado assunto ou rea. Os conceitos so indicados em caixas e unidos por palavras de ligao, atravs da utilizao de setas, de modo a formar uma expresso com signifi cado, isto , que reflita um conhecimento vlido na rea. Ento, complete o mapa abaixo, utilizando os termos disponveis, de modo que todos os conceitos sejam interligados atravs de palavras de ligao (que podem ser utilizadas mais de uma vez):
Palavras de Ligao: se condensam formando, durante a, produz, corresponde(m) a, se separam na. Conceitos: prfase, um cromossomo duplicado, uma molcula de DNA, replicao.
!
Voc pode utilizar este tipo de exerccio para testar se voc compreendeu como os conceitos apresentados em cada aula esto relacionados entre si.
7. Esquematize todas as fases da mitose de uma clula que possui 3 pares de cromossomos homlogos (2n = 6 cromossomos), utilizando a clula abaixo como modelo. Leve em considerao o tamanho dos cromossomos e o posicionamento dos centrmeros, para que cada cromossomo possa ser identifi cado ao longo do processo de diviso celular. Represente apenas os cromossomos e as fi bras do fuso, no se preocupe com as outras estruturas celulares.
C E D E R J 33
AULA
MDULO 1
Diviso celular II Meiose
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Compreender os eventos histricos que levaram descoberta da meiose. Identificar os estgios da meiose. Analisar os principais ciclos de vida em eucariontes.
AULA
Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose
Vamos, agora, relembrar o conhecimento de que a comunidade cientfica dispunha, at o final do sculo XIX, a respeito da transmisso da informao hereditria: O vulo e o espermatozide eram reconhecidos como sendo clulas germinativas, ou seja, gametas. Todas as clulas somticas deveriam conter a informao hereditria necessria para o desenvolvimento do organismo, sendo as clulas germinativas responsveis pela transmisso desta informao para a gerao seguinte. Os gametas, sendo o nico elo entre geraes, deveriam conter toda a informao hereditria. Toda a informao hereditria deveria estar contida no apenas nas clulas germinativas, mas tambm nas clulas a partir das quais elas se formam. Alm disso, atravs da anlise de caritipos, os cientistas da poca estavam convencidos de que o nmero de cromossomos de uma espcie deveria ser o mesmo em todos os indivduos e em todas as geraes. Mas, se considerassem a mitose como o nico mecanismo de diviso celular, deveriam concluir que, quando os ncleos do vulo e do espermatozide se fundissem durante a fecundao, o nmero de cromossomos deveria dobrar a cada gerao. Uma questo surgiu naturalmente: como explicar que a quantidade de material hereditrio permanece constante atravs das geraes? Tentando encontrar uma resposta para essa pergunta, algumas hipteses foram levantadas: Quando os ncleos do vulo e do espermatozide se fundissem, por ocasio da formao do zigoto, os cromossomos tambm se fundiriam uns com os outros, evitando o aumento no nmero de cromossomos. Metade dos cromossomos seria destruda aps a formao do zigoto, mantendo o nmero de cromossomos constante. Existiria um mecanismo que reduziria o nmero de cromossomos metade durante a formao dos espermatozides e dos vulos nas gnadas e, quando ocorresse a fecundao, o nmero de cromossomos do zigoto seria o mesmo da gerao anterior. E ento, como essa questo foi resolvida? Com base em suas prprias observaes, e analisando os ex-perimentos de outros citologistas, August Weismann levantou uma hiptese que parecia resolver o problema da constncia da quantidade de material
36 C E D E R J
hereditrio atravs das geraes. Ele acreditava que deveria existir um mecanismo que reduzisse a quantidade de material hereditrio metade, durante a formao dos gametas:
... a fertilizao consiste no fato de que um nmero igual de alas (cromossomos) de cada progenitor ser colocado lado a lado, e que o ncleo do zigoto composto dessa maneira. No tem importncia, no que diz respeito a esta questo, se as alas (cromossomos) dos dois progenitores se fundem mais cedo ou mais tarde ou se permanecem separadas. A nica concluso essencial necessria nossa hiptese que deve haver uma igualdade completa ou aproximada entre as quantidades de substncia hereditria fornecida por cada um dos progenitores. Se for assim, as clulas germinativas dos descendentes contero os germoplasmas de ambos os pais unidos, e isso implica que tais clulas s podem conter metade do germoplasma paterno, como estava contido nas clulas germinativas do pai, e metade do germoplasma materno, como estava contido nas clulas germinativas da me. (WEISMANN, AUGUST, 1889. Essays upon heredity and kindrd biological problems. Clarendon Press, Oxford).
EDOUARD BENEDEN (1846-1910)

VAN
AUGUST WEISM A N N (18341914)

Bilogo alemo, defendeu a hiptese da existncia de clulas germinativas.
Embriologista citologista belga.
No final do sculo XIX, trs importantes pesquisadores, EDOUARD

VAN
BENEDEN, THEODOR BOVERI e WIHELM AUGUST OSKAR HERTWIG , encon-
traram evidncias citolgicas do mecanismo proposto por Weismann. Analisando a gametognese em clulas de fmeas e machos de Ascaris, um parasita do intestino de porcos e humanos, esses citologistas observaram a ocorrncia de duas divises celulares diferentes durante o processo da gametognese, resultando na reduo do nmero de cromossomos metade. Esse processo de diviso celular que forma os gametas conhecido, hoje em dia, como meiose, palavra de origem grega que significa diminuio. O processo de diviso meitica passou a despertar grande interesse na comunidade cientfica. Atualmente, ele pode ser detalhado com um alto nvel de preciso (Figura 3.3), como voc ver no decorrer desta aula. Aproveite para comparar a meiose com o processo de diviso celular que voc conheceu na aula passada, a mitose: verifique quantas clulas so formadas ao final de cada processo, como os cromossomos se organizam espacialmente na clula em diviso, qual a relao entre a duplicao dos cromossomos e o nmero de divises celulares, e qual o nmero de cromossomos encontrados em cada clula-filha.
THEODOR BOVERI (1862-1915)

Citologista alemo.
WIHELM AUGUST OSKAR HERTWIG (1849-1922)

Citologista e embriologista alemo.
C E D E R J 37
AULA
MDULO 1
!
Entenda a meiose: Para melhor compreender as etapas da meiose, leia o texto atentamente acompanhando na Figura 3.4 os processos que ocorrem durante cada etapa da diviso meitica em uma clula animal diplide (2n = 4 cromossomos).
O MECANISMO DA MEIOSE
A meiose um tipo de diviso celular sexual, pois est associada reproduo em fungos, animais e plantas. De forma geral, a clula que vai sofrer meiose chamada de meicito. Em animais, por exemplo, os meicitos so clulas especiais presentes nos testculos e ovrios que daro origem aos gametas. Na maioria dos organismos, os meicitos so clulas diplides, isso , cada um de seus cromossomos est representado em dose dupla (cromossomos homlogos). Em cada par de homlogos, um dos cromossomos de origem paterna e o outro de origem materna. Ao final da meiose, sero formadas quatro clulas-filhas com apenas um dos cromossomos de cada par de homlogos da clula-me, sendo portanto, haplide. A meiose um processo complexo, no qual o material cromossmico se duplica uma vez e a clula se divide duas vezes, reduzindo assim o nmero de cromossomos metade. A duplicao do material cromossmico, que corresponde replicao do DNA, ocorre durante o perodo S da interfase. Aps a replicao, cada cromossomo duplicado passa a possuir duas cromtides-irms, como voc j viu na Aula 2 onde foi descrito o ciclo de diviso celular. A primeira diviso meitica (Meiose I ou diviso reducional) produz duas clulas-filhas com o nmero de cromossomos reduzido metade, embora cada cromossomo ainda contenha as cromtides-irms. A segunda diviso meitica (Meiose II ou diviso equacional) semelhante a uma mitose, havendo a separao das cromtides-irms de cada cromossomo. Vamos ver esse processo com mais detalhes. A prfase I o primeiro estgio da Meiose I, sendo constituda de cinco subestgios seqenciais: leptteno, zigteno, paquteno, diplteno e diacinese. Durante o primeiro subestgio (leptteno) os cromossomos se tornam visveis ao microscpio ptico. A condensao comea em regies especficas, chamadas crommeros, que apresentam aspecto granuloso e, progressivamente, o cromossomo vai se tornando mais curto e grosso. As regies terminais dos cromossomos, denominadas telmeros, esto ligadas membrana nuclear e essa ligao parece ter um papel importante no emparelhamento preciso dos cromossomos homlogos.
38 C E D E R J
Durante o estgio seguinte, chamado zigteno, os cromossomos homlogos se emparelham, processo chamado de sinapse (Figura 3.1). Como os cromossomos j se replicaram, cada cromossomo possui duas cromtides e o emparelhamento dos homlogos resulta num complexo chamado ttrade (Figura 3.2).
O complexo sinptico
Voc sabe como os cromossomos homlogos se encontram para iniciar o processo de emparelhamento? A hiptese mais aceita a de que os telmeros dos cromossomos homlogos estejam ligados a stios adjacentes na membrana nuclear e que a sinapse comece nessas regies telomricas. Para que a sinapse ocorra necessria a formao de uma estrutura que ligar cada par de homlogos, chamada complexo sinptico (Figura 3.1). Essa complexa estrutura, composta de DNA e protenas, participa tanto da sinapse quanto do processo de troca de material gentico chamado permutao ou crossing over.
Figura 3.1: Complexo sinptico. A estrutura do complexo sinptico se forma entre os cromossomos homlogos durante a meiose. Os ndulos de recombinao contm as enzimas necessrias para a recombinao gentica. Note que a representao das fibras cromossmicas inclui as duas cromtides-irms de cada homlogo.
C E D E R J 39
AULA
MDULO 1
(a) (b)
cromtides-irms do homlogo 1
cromtides-irms do homlogo 2
(c)
Homlogo 1 Homlogo 2
(d)
Homlogo 1 Homlogo 2
Figura 3.2: (a) Esquema simplificado do emparelhamento de um par de cromossomos homlogos duplicados, formando o complexo denominado ttrade. Cada cromossomo homlogo possui duas cromtides-irms, fruto da replicao da molcula de DNA durante a intrfase, unidas pela regio dos centrmeros. (b) Representao tridimensional que reflete de forma mais precisa o posicionamento dos cromossomos homlogos durante o emparelhamento. (c) Outra maneira de representar o mesmo processo. Neste caso, os cromossomos apresentam colorao distinta para evidenciar o fato de que um dos homlogos tem origem materna enquanto o outro tem origem paterna. Note, no entanto, que as cromtides-irms de um mesmo homlogo apresentam a mesma colorao por serem idnticas. (d) Representao mais simples para ser utilizada nos exerccios.
40 C E D E R J
No terceiro subestgio da prfase I paquteno j podemos observar, no microscpio ptico, os cromossomos duplicados, que continuam a encurtar e a se condensar. A permutao, provavelmente, ocorre durante o paquteno, mas os resultados deste processo de troca s se tornam visveis na etapa seguinte, o diplteno. Durante a permutao, as cromtides no-irms de cada par de homlogos trocam segmentos de material gentico entre si, orientadas pelo complexo sinptico, que se desfaz ao final dessa fase. O elemento central deste complexo contm alas de DNA, que parecem ser os provveis pontos de recombinao. Esta troca de material gentico importante, pois manter o emparelhamento dos cromossomos homlogos at que eles se liguem s fibras do fuso e fiquem posicionados corretamente na placa metafsica. A permuta tambm fonte de variabilidade gentica nas populaes. No diplteno, os cromossomos homlogos parecem repelir-se uns aos outros formando estruturas em forma de X, chamadas quiasmas. Os quiasmas so os pontos de contato entre os cromossomos homlogos, onde ocorre a troca de material gentico. Eles ainda mantm os cromossomos homlogos juntos e do uma evidncia visual de que a permutao ocorreu (Figura 3.3). Ao final do diplteno os quiasmas, aparentemente, se movem para as pontas dos cromossomos.
Figura 3.3: Esquema de quiasmas formados entre as cromtides no-irms dos cromossosmos homlogos emparelhados, durante a prfase da primeira diviso meitica.
!
Em muitos animais o estgio de diplteno muito longo. Nas fmeas humanas, por exemplo, esse estgio iniciado no ovrio durante a vida fetal. Cerca de 400.000 ovcitos imaturos atingem esse estgio e, nesse momento, a meiose I pra. Os ovcitos permanecem nesse estgio at o incio da puberdade. Durante o ciclo menstrual, um ovcito por ms retoma a meiose na trompa de Falpio. Alguns ovcitos podem permanecer no estgio suspenso de diplteno por vrias dcadas. Isto pode ter profundas conseqncias genticas. medida que o ovcito envelhece, aumenta a dificuldade para completar uma meiose normal. O resultado ovcitos com nmeros anormais de cromossomos, uma das principais causas do aumento na incidncia de anomalias genticas na prole de mulheres com gestao tardia.
Durante o ltimo estgio da prfase I, a diacinese, o nuclolo e a membrana nuclear desaparecem e os microtbulos que partem dos centrossomos iro se ligar aos cinetcoros nas regies centromricas dos cromossos. Dessa forma, a prfase I se completa. Na metfase I os cromossomos esto altamete condensados e emparelhados na placa equatorial da clula. O fuso acromtico est completo.
C E D E R J 41
AULA
MDULO 1
Na anfase I, os cromossomos homlogos segregam, migrando para os plos da clula. Diferentemente da mitose, as cromtides-irms ainda no se separaram; portanto, cada cromossomo permanece com duas cromtides. Nesta etapa, a clula comea a se dividir em duas. A telfase I corresponde ao final da primeira diviso meitica, a diviso reducional. Cada um dos cromossomos homlogos, ainda duplicado, completa a migrao para os plos, formando duas novas clulas haplides, uma vez que cada clula formada contm um nico conjunto de cromossomos. Em geral, nesse estgio a membrana nuclear se refaz, e ocorre, em seguida, a citocinese. Na maioria dos organismos, entre o final da meiose I e o incio da meiose II, pode-se identificar um estgio intermedirio, quando a clula se prepara para a segunda diviso. Os centrolos se duplicam e, normalmente, os cromossomos se desespiralizam. Em alguns organismos, entretanto, as clulas pulam essa etapa e passam diretamente para a segunda diviso meitica. A segunda diviso da meiose, a diviso equacional, se assemelha a uma mitose, exceto o fato de que h apenas um membro de cada par cromossmico por ncleo. Durante a prfase II, os cromossomos voltam a atingir seu grau mximo de condensao e se movem para a placa equatorial. Note que cada cromossomo ainda formado por duas cromtides-irms. Na metfase II, os cromossomos se posicionam na placa equatorial e a separao dos centrmeros marca o fim dessa fase. Durante a anfase II, cada cromtide-irm vai em direo a um dos plos da clula. A telfase II marca o final da meiose, quando a membrana nuclear e o nuclolo voltam a se reconstituir. Cada ncleo contm uma nica cromtide de cada cromossomo. Segue-se a citocinese, diviso do citoplasma (veja o esquema das etapas da meiose na Figura 3.4). Uma diferena fundamental entre a mitose e a meiose que na mitose h uma duplicao de cada cromossomo para cada diviso celular; na meiose h somente uma duplicao de cada cromossomo para duas divises sucessivas. Conclumos, ento, que a mitose um mecanismo que mantm a constncia do nmero cromossmico nas divises celulares, enquanto a meiose reduz esse nmero metade.
42 C E D E R J
PRFASE I Leptteno
Cromossomos duplicados tornam-se visveis.
Fibras do ster
METFASE I Montagem do fuso est completa. Cada par de cromossomos homlogos duplicados e emparelhados se dispe na placa metafsica do fuso.
Fibras polares
Fibras cromossmicas
ANFASE I Cada par de cromossomos homlogos duplicados se separa (segrega), migrando para um dos plos.
TElFASE I Os cromossomos completam a migrao para os plos. Cada clula-filha formada contm apenas um dos homlogos, embora estejam duplicados.
Figura 3.4.a: Esquema geral da meiose em uma clula animal diplide (2n = 4 cromossomos). Note que, no final da primeira diviso meitica, a diviso reducional, cada clula formada possui a metade dos cromossomos da clula inicial (n = 2 cromossomos), embora estes estejam duplicados.
C E D E R J 43
AULA
Cromossomos homlogos emparelhados.
Cromossomos homlogos totalmente emparelhados. Ocorre a permutao
Cromossomos homlogos comeam a se repelir . Cromtides tornam-se visveis evidenciando as quiasmas.
Cromossomos continuam a se condensar. Nuclolo e carioteca desaparecem. Microtbulos se ligam aos cinetcoros nos centrmeros.
Zigteno
Paquteno
Diplteno
Diacinese
MDULO 1

PRFASE II Cromossomos duplicados se condensam e membrana nuclear se desfaz.
METFASE II Centrmeros ligados aos microtbulos do fuso atravs dos cinetcoros. Cromossomos se alinham na placa metafsica.
ANFASE II Cromtides-irms de cada cromossomo se separam (segregam) e se movem para os plos.
TELFASE II A membrana nuclear se refaz ao redor dos cromossomos e eles comeam a descondensar. Recontitui-se o nuclolo.
Aps a citocinese, so formadas quatro clulas haplides, contendo apenas um dos homlogos de cada par.
Figura 3.4.b: Esquema geral da meiose em uma clula animal diplide (2n = 4 cromossomos). Note que, desde o incio da segunda diviso meitica, a diviso equacional, cada clula possui apenas um cromossomo de cada par existente no organismo (n = 2 cromossomos). 44 C E D E R J
Estava claro, pelos trabalhos de van Beneden, Boveri e outros, que cada progenitor transmite o mesmo nmero de cromossomos ao zigoto. Alm disso, os cromossomos no ncleo materno e paterno pareciam ser idnticos, isto , cada progenitor contribui com um dos cromossomos do par de homlogos. Essas duas observaes podiam ajudar a explicar o que j se acreditava h algum tempo: que a contribuio hereditria de cada progenitor , aproximadamente, a mesma. Entretanto, no estava claro como as caractersticas eram herdadas de gerao em gerao e como se comportavam durante a formao dos gametas. Nem mesmo estava claro se os cromossomos tinham algo a ver com a transferncia da herana biolgica. A ligao entre os cromossomos e a hereditariedade s foi proposta nos primeiros anos do sculo XX, por Sutton, depois da redescoberta dos trabalhos de Mendel. CICLOS DE VIDA DE EUCARIONTES Agora que voc j conhece os principais estgios da meiose, vamos estudar o ciclo de vida de alguns organismos eucariontes. O ciclo de vida de um organismo a seqncia de eventos que ocorre desde sua origem como zigoto at a sua morte. Nos eucariontes, a meiose gera clulas haplides nas quais o material gentico parental foi recombinado por segregao cromossmica e permutao. A fuso de clulas haplides produz uma variedade quase infinita de novas combinaes genticas, sobre as quais os processos evolutivos podem agir. Assim, os ciclos de vida dos organismos apresentam oportunidades de recomposio do material gentico para produzir novas combinaes genticas. Existem trs tipos bsicos de ciclo de vida: haplobionte haplonte, haplobionte diplonte e diplobionte. Essa classificao baseada na ploidia dos indivduos adultos. Os termos haplobionte e diplonte referem-se ao nmero de tipos de organismos quanto ploidia; um tipo no caso dos haplobiontes (haplide ou diplide) e dois tipos no caso dos diplobiontes (haplide e diplide).
Ciclo haplobionte diplonte

A Figura 3.5 resume o ciclo haplobionte diplonte, o ciclo da maioria dos animais, inclusive o do homem. O corpo adulto composto de clulas diplides e a meiose ocorre em clulas diplides especializadas, os meicitos, levando formao dos gametas haplides (meiose gamtica). A fuso de gametas haplides forma um zigoto diplide, que, por mitose, produz um organismo pluricelular.
C E D E R J 45
AULA
MDULO 1
MEIOSE GAMTICA
Figura 3.5: Ciclo de vida haplobionte diplonte.
Ciclo haplobionte haplonte

Observe na Figura 3.6 o ciclo haplobionte haplonte, encontrado em muitos fungos e algas. Ao observar a figura, voc deve estar se perguntando: como pode ocorrer a meiose em um organismo haplide? Afinal, como vimos, a meiose requer o emparelhamento de dois conjuntos de cromossomos homlogos. A resposta que todos os organismos haplides que sofrem meiose passam por um estgio diplide temporrio, em que sero formados os meicitos. Em alguns casos, como ocorre com as leveduras, os indivduos unicelulares haplides se fundem para formar um meicito diplide, o qual ento sofre meiose. Em outros casos, as clulas especializadas de progenitores diferentes se fundem para formar os meicitos.
MEIOSE ZiGTICA
Figura 3.6: Ciclo de vida haplobionte haplonte.
46 C E D E R J
A meiose ocorre a partir do zigoto e produz clulas haplides que so chamadas esporos sexuais (meiose zigtica). Esses esporos sexuais, em algumas espcies, tornam-se adultos unicelulares. Em outras espcies, cada esporo sexual se desenvolve por mitose em um indivduo haplide multicelular. Dessa forma, voc pode concluir que, enquanto num cruzamento entre dois organismos diplides ocorre uma meiose para cada organismo, no cruzamento entre dois organismos haplides ocorre uma nica meiose em todo o ciclo.
Ciclo diplobionte
Em um organismo com alternncia de geraes, o ciclo vital compreende dois estgios adultos: um diplide e outro haplide. Um estgio geralmente mais proeminente que outro. o ciclo de vida observado em plantas. Observe, na Figura 3.7 que o indivduo diplide chamado , esporfito produz, por meiose, esporos sexuais (meiose esprica). Estes, atravs de sucessivas mitoses, originam um indivduo haplide, chamado gametfito. Esse indivduo produzir gametas que, por fecundao, originam um zigoto diplide. O zigoto se multiplicar, atravs de muitas mitoses, para formar um novo esporfito.
Esporfito 2n adulto
Esporfito 2n adulto
Meiose
Meiose
n n n n
n n n n
Esporos sexuais
MEIOSE ESPRICA
Esporos sexuais
mitoses
mitoses
Gametfito n adulto
Mitoses mitose
Gametfito n adulto
Mitoses mitose
Gametas n Zigotos 2n
Gametas n Zigotos 2n
Figura 3.7: Ciclo de vida diplobionte.
C E D E R J 47
AULA
MDULO 1

Na prxima aula, ento, vamos estudar como os trabalhos de Mendel influenciaram na compreenso do mecanismo de transmisso da herana biolgica.
RESUMO
A meiose um tipo de diviso celular sexual, pois est associada reproduo em fungos, animais e plantas. Na meiose ocorrem duas divises nucleares sucessivas. Na primeira delas, a diviso reducional, os cromos-somos homlogos duplicados se emparelham e ocorre a permutao. Em seguida, cada homlogo duplicado vai em direo a um plo da clula, que, ento, se divide em duas. Cada clula formada possui um nico conjunto de cromossomos, sendo, portanto, haplide. Na segunda diviso, a diviso equacional, as cromtides-irms, que formam o cromossomo duplicado, se separam. Cada cromtide, ento, vai para um plo da clula que tambm se divide em duas. Dessa forma, ao final do processo, ocorre a formao de quatro clulas haplides. Nem sempre a meiose est relacionada formao dos gametas (meiose gamtica), como o caso dos organismos que possuem ciclo haplobionte diplonte. Nos organismos com ciclo haplobionte haplonte, a meiose ocorre aps a formao do zigoto (meiose zigtica), e naqueles com ciclo diplobionte a meiose est relacionada formao de esporos (meiose esprica).
48 C E D E R J
EXERCCIOS
1. O que Weismann imaginou ser necessrio para manter a constncia do nmero de cromossomos atravs das geraes? 2. Por que a prfase I da meiose considerada um estgio altamente complexo? Como os eventos que ocorrem nesse estgio podem influenciar a transmisso dos caracteres hereditrios? 3. Complete os esquemas das duas etapas da meiose (I e II) de uma clula de um organismo diplide com 2 pares de cromossomos (2n = 4 cromossomos), sem esquecer de enumerar as principais caractersticas de cada fase. Note que os cromossomos apresentam colorao distinta para evidenciar o fato de que um dos homlogos tem origem materna enquanto o outro tem origem paterna (como na Figura 3.2).
MEIOSE I
!
INTRFASE (G1) Evite olhar a resposta no gabarito. Veja os exerccios 3 e 4 como um desafio para testar os seus conhecimentos. Se necessrio, pea ajuda ao tutor e discuta com seus colegas.
PRFASE I
METFASE I Cromossomos homlogos duplicados e emparelhados se organizam na placa equatorial.
ANFASE I
TELFASE I So formadas 2 clulas-filhas contendo apenas um dos homlogos de cada par, embora estejam duplicados.
C E D E R J 49
AULA
MDULO 1
MEIOSE II
PRFASE II
Cromossomos duplicados se condensam.
METFASE II
ANFASE II
TElFASE II
1/2 dos gametas
1/2 dos gametas
4. Ao final da meiose no exerccio anterior, apenas dois tipos de gametas foram formados. No entanto, na meiose de uma outra clula desse mesmo indivduo outros dois tipos de gametas podem ser formados. Represente, de maneira simplificada, a meiose dessa clula, evidenciando qual a fase da meiose que determina que tipos de gametas sero formados. Dica: o fato de que um dos homlogos de cada par tem origem materna enquanto o outro tem origem paterna no implica que os gametas formados necessariamente recebam os dois cromossomos provenientes do mesmo progenitor. 5. Agora identifique as principais diferenas entre mitose e meiose.
50 C E D E R J
6. Considerando uma clula humana, com 46 cromossomos, determine, justificando suas respostas, o nmero de cromtides presentes (em cada clula) durante as seguintes etapas da diviso meitica: a) Prfase I b) Prfase II c) Telfase I d) Telfase II
7. Reveja o ciclo de vida de organismos haplides que sofrem meiose (Figura 3.6). No esquema abaixo, as elipses representam clulas de um fungo haplide que possui dois cromossomos (n = 2) em cada etapa de seu ciclo vital. Agora, complete este esquema, colocando em cada clula o nmero correto de cromossomos.
Ciclo de vida de um fungo haplide (n = 2)
Adulto (n) Mitose Clulas (n) representativas Mitose
Adulto (n)
Clulas (n) representativas
Meicito diplide Transitrio (2n)
mitose
mitose
Meiose
C E D E R J 51
AULA
MDULO 1
Mendelismo: o nascimento da Gentica
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Reconhecer o contexto histrico em que se deu a descoberta e a redescoberta das leis fundamentais da hereditariedade. Compreender os experimentos que levaram Gregor Mendel a formular a Lei da Segregao dos Fatores ou Primeira Lei de Mendel. Compreender os princpios bsicos de transmisso da herana, relacionando os princpios de dominncia, segregao dos fatores hereditrios e combinao ao acaso dos gametas com as propores obtidas nos cruzamentos genticos envolvendo um gene.
AULA
Gentica Bsica | Mendelismo: o nascimento da Gentica
Como voc deve estar percebendo, o sculo XIX marcou a Biologia por grandes avanos do conhecimento nas reas de Citologia e Evoluo. Em aulas anteriores, voc j teve a oportunidade de verificar que, no sculo XIX, importantes estudos resultaram no estabelecimento da Teoria Celular e que a publicao de On the origin of species, de Charles Darwin, em 1859, revolucionou o pensamento acerca da origem da diversidade dos organismos viventes. Nesta poca havia tambm um grande nmero de pesquisadores que se dedicavam aos cruzamentos de plantas ou animais, normalmente chamados de hibridao, visando entender a hereditariedade e as bases da evoluo biolgica. Contudo, no se tinha conhecimento de nenhuma lei geral que pudesse explicar os resultados obtidos. Basta lembrarmos do insucesso de Darwin ao tentar explicar as informaes disponveis sobre a hereditariedade atravs da pangnese (The Variation of Aninal and Plants under domestication, 1868). A rea de estudos atravs de cruzamentos passou por um perodo longo e no-excitante at que, em 1900, um modesto, subestimado e esquecido trabalho de um monge agostiniano, j falecido, tornou-se conhecido pela comunidade cientfica em geral. Estava para acontecer uma mudana de paradigma. Surgia uma nova Cincia, a Gentica, que em pouco tempo se tornaria uma ferramenta rigorosa com ampla capacidade de explicar fatos e fazer previses. Voc j deve saber quem esse monge agostiniano de cujo trabalho estamos falando.
A HISTRIA DE MENDEL
Gregor Mendel nasceu em 22 de julho de 1822 na Moravia, ento uma parte do imprio Habsburg, na Europa Central. Seus pais eram fazendeiros e a vida rural o ensinou a cuidar de plantas e animais e incentivou sua curiosidade acerca da natureza. Aos 21 anos, Mendel entrou para o Monastrio agostiniano de St. Thomas, na cidade de Brnn (hoje, Brno, na Repblica Tcheca) onde
Monastrio agostiniano de St. Thomas, Brnn.
pde complementar seus estudos.
54 C E D E R J
Aps alguns anos, foi enviado Universidade de Viena, onde freqentou cursos de Fsica e se submeteu aos exames necessrios obteno do ttulo de professor. Embora no tenha sido bem-sucedido nos exames, acreditase que ali, Mendel tenha se inteirado das discusses sobre evoluo biolgica, tema que desde o incio da dcada de 1850 j despertava discusses entre os bilogos. Mesmo sem o crdito de professor, de volta ao monastrio, Mendel se dedicou a lecionar e ao desenvolvimento de suas pesquisas com cruzamentos de animais e plantas. Mendel conhecia bem o trabalho de Darwin e entusiasmou-se com a questo da evoluo. Ele percebeu que, para compreender este fenmeno, seria necessrio conhecer os fundamentos da transmisso da herana. Mendel iniciou seus estudos realizando cruzamentos com animais (abelhas e camundongos), mas este tipo de experimento era considerado imoral por seus superiores, por considerarem que Mendel estaria brincando com sexo. Mendel, ento, mudou o enfoque de seus estudos para o cruzamento de plantas. Seus superiores no percebiam que as plantas tabm tinham sexo. Mendel fez experimentos com vrias espcies de jardim, mas foi com as ervilhas que teve o maior sucesso. Os experimentos propriamente ditos comearam em 1856 e terminaram oito anos depois, aps uma anlise de cerca de 10.000 plantas. Os resultados da pesquisa foram apresentados em duas palestras proferidas em 8 de fevereiro e 8 de maro de 1865 na Brnn Society for the Study of Natural Science e publicadas nos Proceedings dessa sociedade no ano seguinte com o ttulo: Versuche ber Pflanzen-Hybriden (Experimentos em hibridao de plantas).
Membros do Monastrio agostiniano na antiga Brnn entre 1861 a 1864.
!
Voc encontra o trabalho original de Mendel traduzido para o ingls no endereo: http://www.esp.org/foundations/genetics/classical/gm-65.pdf.
C E D E R J 55
AULA
MDULO 1
Na poca, a importncia do trabalho de Mendel no foi compreendida. O campo relativo aos cruzamentos com plantas estava cheio de dados que no permitiam concluses gerais e os resultados obtidos com as ervilhas pareciam ser apenas mais um exemplo da enorme variao nos resultados obtidos com hibridao. Quando Mendel escreveu para CARL NGELI, um grande estudioso na rea, contando seus resultados, ele sugeriu que Mendel repetisse seus estudos com chicria (Hieracium sp). Mendel falhou em CARL WILHELM VON NGELI (1817-1891)
Foi considerado um dois mais importantes botnicos em meados do sculo XIX.
encontrar as regras consistentes para a herana nessa espcie e ele prprio passou a acreditar que seus primeiros resultados poderiam ter aplicao restrita. Ocorre que, com Hieracium, Mendel no estava realizando os cruzamentos que pensava estar. Muito tempo depois da sua morte, descobriuse que nenhuma proporo uniforme era de se esperar nessa espcie, pois nela ocorre um tipo de desenvolvimento partenogentico.
Figura 4.1: Em espcies do gnero Hieracium, a planta me pode desenvolver sementes sem ser polinizada. As sementes se desenvolvem diretamente de clulas do saco embrionrio ou dos tecidos adjacentes, no h meiose (agamospermia). Em certas espcies, parte das sementes se desenvolve por agamospermia e outra parte de vulos polinizados. Isso leva a padres de transmisso confusos, onde no se aplicam os pressupostos sobre os quais as leis de Mendel so fundamentadas.
O modelo de Mendel foi ignorado por cerca de 35 anos. Nas ltimas trs dcadas do sculo XIX os principais estudiosos da hereditariedade se concentraram, principalmente, no comportamento dos cromossomos durante as divises celulares e fertilizao. Eles acreditavam estar construindo uma base fsica para a herana, no que estavam certos.
56 C E D E R J
Em 1900, HUGO
DE
VRIES, na Holanda, Carl Correns na Alema-
nha, e Erich Von Tschermak, na ustria tiveram a oportunidade de conhecer o trabalho de Mendel. Em busca de dados que apoiassem suas prprias teorias sobre hereditariedade, cada um deles descobriu que a anlise detalhada que haviam feito e as concluses essenciais a que haviam chegado j tinham sido apresentadas muito antes por Mendel, cujo trabalho tinha sido esquecido e seu significado no compreendido. A partir da, as idias de Mendel foram sendo cada vez mais divulgadas na comunidade cientfica, que passou a utiliz-las na formulao de hipteses, desenvolvendo, como veremos ao longo deste curso, as bases da Cincia que hoje conhecemos como Gentica. HUGO DE VRIES (1848-1935)
Botnico alemo conhecido por seus estudos sobre mutaes. Foi um dos trs cientistas que, independentemente, redescobriram e confirmaram as leis da hereditariedade apresentadas por Mendel.
!
A traduo para o ingls das cartas de Mendel para Karl Ngeli e os textos de Hugo de Vries, Carl Correns e Erich Von Tschermak reconhecendo o valor cientfico do trabalho de Mendel para o desenvolvimento das teorias sobre a hereditariedade podem ser encontradas no endereo: http://www.esp.org/ foundations/genetics/classical/holdings/b/birth.pdf.
OS EXPERIMENTOS DE MENDEL
Na metade do sculo XIX, o grande interesse pela seleo e hibridao em plantas disponibilizou um grande nmero de espcies que apresentavam diversidade intra-especfica. Entre estas, estava a ervilha (Pisum sativum), espcie que Mendel escolheu para realizar seus experimentos. No que Mendel estivesse interessado nas ervilhas em particular, mas elas pareciam ser um bom modelo experimental, apresentando caractersticas favorveis para o estudo da transmisso de caracteres hereditrios. Entre essas caractersticas podemos listar: 1. A grande variedade de formas disponveis; 2. A facilidade de cultivar; 3. O tempo curto de gerao; 4. A facilidade de realizar cruzamentos controlados.
Canteiro onde Mendel realizou seus experimentos.
C E D E R J 57
AULA
MDULO 1
A flor da ervilha
Nas flores das ervilhas (Figura 4.2), os estames e pistilo ficam encobertos pelas ptalas e, se as flores forem encobertas para evitar a ao dos insetos, elas se autofecundam. Autofecundao um tipo de reproduo sexuada na qual um mesmo indivduo fornece ambos os gametas, o masculino e o feminino, que se unem para formar a gerao seguinte.
Figura 4.2: Flor da ervilha.
Tambm possvel a realizao de fecundao cruzada, retirando-se as anteras de uma flor antes de sua maturao e mais tarde colocando-se o plen de outra planta sobre o seu estigma. Assim, conforme planejasse, Mendel podia deixar que cada linhagem se autofecundasse ou realizar fecundao cruzada entre as linhagens.
Figura 4.3: Fecundao cruzada.
58 C E D E R J
Em princpio Mendel obteve 34 variedades de Pisum sativum que apresentavam certas caractersticas morfolgicas diferentes e as testou durante dois anos quanto constncia dessas caractersticas atravs das geraes. Mendel queria estar certo de que as variedades poderiam ser consideradas linhagens puras para cada uma das caractersticas. O que Mendel considerou como sendo uma linhagem pura? Linhagens puras seriam aquelas que por autofecundaco apresentariam todos os descendentes com as mesmas caractersticas dos parentais. Vamos imaginar, por exemplo, uma linhagem pura de ervilha que possusse as seguintes caractersticas: comprimento do caule longo, posio da flor terminal, vagem de forma inflada e cor verde. Ao se reproduzir por autofecundaco, essa linhagem deve apresentar gerao aps gerao descendentes com comprimento do caule longo, posio da flor terminal, vagem de forma inflada e cor verde.
Figura 4.4: Um exemplo de duas variedades de Pisum sativum: esquerda, (a), com as caractersticas comprimento do caule longo, posio da flor terminal, vagem de forma inflada e de cor verde; direita, (b), com comprimento do caule curto, posio da flor axial, vagem de forma deprimida e de cor amarela.
C E D E R J 59
AULA
MDULO 1
Outra investigao feita por Mendel antes de iniciar seus experimentos de hibridao foi quanto fertilidade dos hbridos obtidos do cruzamento entre essas linhagens. Isto reduziu o nmero de linhagens favorveis a 22, pois algumas das linhagens puras, ao serem cruzadas entre si, no apresentavam descendentes frteis. Mendel escolheu sete caractersticas a serem estudadas, cada uma delas apresentando dois estados contrastantes de fcil classificao, como mostra a tabela abaixo:
Tabela 4.1: Variedades de ervilhas utilizadas por Mendel em seus experimentos. Caractersticas
Estados de carter
.
Era hora de iniciar os cruzamentos pra valer!!! Ou seja, a partir do cruzamento entre linhagens puras que apresentassem caractersticas contrastantes, obter a primeira gerao de hbridos. A maneira como Mendel analisou seus resultados foi um dos pontos fundamentais para o sucesso do seu trabalho. Embora
O termo hbrido, originalmente empregado por Mendel, refere-se semente ou indivduo proveniente do cruzamento entre duas plantas de linhagens puras diferentes. Atualmente, o emprego desse termo refere-se, geralmente, aos indivduos provenientes do cruzamento de espcies diferentes. No texto est sendo empregado o sentido a que Mendel se referiu.
outros resultados semelhantes ao obtido por Mendel j tivessem sido descritos, a regra era analisar a planta como um todo. Como as plantas parentais diferiam entre si em vrias caractersticas, os indivduos da prole se apresentavam, em geral, como intermedirios entre os parentais. Mendel esqueceu a planta como um todo e se concentrou na anlise dos detalhes, na observao de uma caracterstica de cada vez. Ou seja, ao cruzar duas linhagens contrastantes quanto cor da semente, ele se perguntava apenas qual seria a cor da semente de sua prole, no se importando, a princpio, com a altura da planta ou a posio de suas flores.
60 C E D E R J
OS RESULTADOS DE MENDEL
Para todas as caractersticas analisadas, a primeira gerao hbrida (F1) apresentou plantas que exibiam o estado da caracterstica de um dos genitores. O que teria acontecido com algumas das caractersticas dos parentais que sumiram? Ser que essas caractersticas reapareceriam nas prximas geraes? A resposta a essa questo poderia ser vista a partir da observao da descendncia das plantas da F1 obtidas atravs de autofecundao. A anlise das caractersticas da descendncia da F1 por autofecundao apresentou plantas com as mais diversas combinaes das caractersticas em estudo. Com base nos resultados obtidos podia-se verificar que os estados de carter ausentes nos hbridos da gerao F1 no eram perdidos; eles ficavam encobertos, reaparecendo na gerao F2. Mendel chamou o estado de carter que desaparecia na gerao F1 de recessivo (pelo fato de ficarem em recesso), enquanto o que se mantinha na F1 foi denominado dominante. Para que fique mais claro, vamos imaginar um exemplo de cruzamento entre duas variedades puras de Psium sativum e considerar trs das sete caractersticas analisadas por Mendel: posio da flor, cor e forma da vagem. Esse cruzamento est representado na Figura 4.5 e, embora hipottico, apresenta o mesmo padro de resultados obtidos por Mendel em seus experimentos.
C E D E R J 61
AULA
MDULO 1
vagem verde vagem inflada flor terminal
vagem amarela vagem deprimida flor axilar
gro de plen vulo zigoto
F1
vagem verde vagem inflada flor axilar
vulos
gros de plen
zigotos
descendncia da autofecundao das plantas da F1 (Tabela 4.2)
Figura 4.5: Fentipo da F1 proveniente do cruzamento entre duas linhagens puras de ervilha que apresentam trs caractersticas contrastantes. Na seqncia, a autofecundao dos hbridos da F1, resultando na segunda gerao (F2), cujas propores fenotpicas so apresentadas na Tabela 4.2.
62 C E D E R J
Tabela 4.2: Descendncia da autofecundao das plantas da F1. Tipo Forma da vagem 1 2 3 4 5 6 7 8 Inflada Inflada Inflada Inflada Deprimida Deprimida Deprimida Deprimida Caracterstica Cor da vagem Verde Amarela Verde Amarela Verde Amarela Verde Amarela Disposio da flor Axilar Axilar Terminal Terminal Axilar Axilar Terminal Terminal 2700 900 900 300 900 300 300 100 Total: 6400 Quantidade
Para cada uma das caractersticas, qual a forma dominante? Isso fcil de responder: posio da flor axilar, vagem inflada e verde, pois todas as plantas da F1 apresentaram estes fentipos. Mas, vamos um pouco mais alm. Com base nos resultados apresentados possvel chegar-se a algum tipo de lei que esteja regendo a herana das caractersticas mencionadas? A resposta a essa questo no fcil; muitos cientistas nos sculos passados obtiveram resultados semelhantes aos apresentados, em seus experimentos sobre herana, e no conseguiram deduzir lei alguma. A principal razo para Mendel ter conseguido determinar as leis fundamentais da herana foi a maneira pela qual ele analisou os resultados obtidos. Ele analisou uma caracterstica por vez e determinou a proporo com que apareciam os diferentes tipos de indivduos na gerao F2. A partir da, tentou estabelecer uma explicao para a obteno dessas propores.
C E D E R J 63
AULA
MDULO 1
No nosso exemplo, considere uma caracterstica por vez e verifique que proporo de indivduos da gerao F2 apresentou o estado do carter dominante e recessivo. Complete a tabela abaixo:
Caracterstica
Total de indivduos com carter dominante
Total de indivduos com carter recessivo
Proporo entre indivduos com carter dominante e recessivo
Forma da vagem
Cor da vagem
Posio da flor
No lembra como calcular isto? Veja como exemplo o carter posio da flor. Do total de 6400 plantas da F2, 4800 so axilares e 1600 so terminais. Ou seja, para cada planta terminal, observa-se 3 axilares (4800/1600 = 3). Temos, neste caso, a razo ou proporo de 3:1. Sua vez de completar a tabela acima.
64 C E D E R J
A prxima tabela apresenta os resultados obtidos por Mendel para cada um dos sete caracteres:
Tabela 4.3: Resultados obtidos por Mendel nos cruzamentos monobridos. Tipo de carter analisado no cruzamento entre linhagens puras 1. textura das sementes lisa x rugosa Resultado da autofecundao das plantas F1 Plantas da F2 5.474 lisas Lisa 1.850 rugosoas 6.022 amarelas amarela 2.001 verdes 705 cinzas cinza 224 brancas 882 infladas inflada 299 deprimidas 428 verdes verde 152 amarelas 651 axilares axilar 207 terminais 787 longos longo 277 curtos 2,84:1 3,14:1 2,82:1 2,95:1 3,15:1 3,01:1 2,96:1
Estado do carter nas plantas F1
Razo entre os tipos F2
2. cor das sementes amarela x verde
3. cor da casca das sementes cinza x branca
4. textura da vagem inflada x deprimida
5. cor da vagem verde x amarela
6. posio das flores axilar x terminal
7. comprimento do caule longo x curto
Voc notou que h homogeneidade nesses resultados? Ao considerar uma caracterstica por vez, Mendel verificou que, na F2, os resultados se aproximavam muito de uma proporo de 3 plantas com o estado da caracterstica dominante para 1 com o estado recessivo (proporo 3:1). Em outras palavras, 3/4 (75%) das plantas da F2 apresentavam o estado dominante e 1/4 (25%), o estado recessivo. Outro fato constatado por Mendel foi que cruzamentos recprocos apresentavam resultados semelhantes. Isto , a partir do cruzamento entre duas linhagens puras, uma com carter dominante e outra com carter recessivo, independente de que linhagem parental fornecesse os vulos ou gros de plen, os resultados obtidos na F1 e F2 eram semelhantes.
C E D E R J 65
AULA
MDULO 1
A HIPTESE DE MENDEL
Esta semelhana no comportamento de caractersticas to diferentes como posio da flor e cor das sementes levou Mendel concluso de que deveria existir algum tipo de lei geral regendo a herana dos caracteres. Agora Mendel precisava inventar uma explicao para os resultados obtidos. Inventar? , ter um palpite sobre o que estaria acontecendo. Podemos tambm dizer de uma forma mais cientfica: Mendel deveria formular uma hiptese para explicar os resultados observados. Para Mendel, as plantas possuam fatores que determinavam suas caractersticas hereditrias e eram transmitidos de uma gerao a outra atravs dos gametas. Ele imaginou que uma planta teria vagem inflada ou deprimida se recebesse fatores de uma ou outra caracterstica. Mendel representou seus fatores hipotticos por letras, usando a forma maiscula para o fator que determina o fentipo dominante e a minscula para o fator que determina o fentipo recessivo.
!
Os fatores de hereditariedade de Mendel so denominados atualmente genes. Os genes so segmentos das molculas de DNA que constituem os cromossomos. Os fatores determinantes dos estados contrastantes de uma mesma caracterstica so o resultado de pequenas variaes de um mesmo segmento de DNA. Mas isso ns veremos com detalhe em aulas posteriores.
Considerando apenas uma caracterstica, a forma da vagem, Mendel props o seguinte modelo para explicar por que, a partir do cruzamento das linhagens puras, se obteria na F2 a proporo de 3:1. Acompanhe o texto, observando os resultados apresentados para essa caracterstica na Tabela 4.4.
66 C E D E R J
Gerao P
X
Linhagens puras parentais DD vulo 100% D dd Plen 100% d Gametas da GP
Gerao F1
Primeira gerao hbrida
Dd vulo 50% D 50% d Plen 50% D 50% d
Gametas da GF1
Gerao F2
DD Descendncia da autofecundao das plantas F1
Dd
Dd
dd
14 DD
2/4 Dd
14 dd
C E D E R J 67
AULA
Tabela 4.4: Vamos analisar isoladamente a caracterstica forma da vagem. Os desenhos representam os fatos observados por Mendel e as letras representam a hiptese formulada por Mendel para explicar esses dados.
MDULO 1
1. Cada uma das linhagens parentais deveria possuir apenas um tipo de fator hereditrio que determinasse a forma da vagem, e esse fator estaria presente em seus gametas, o elo entre uma gerao e outra. A linhagem pura inflada, como s possua o fator inflado, s produziria gametas portando o fator inflado (D). Da mesma forma, a linhagem pura deprimida s produziria gametas portando o fator deprimido (d). 2. Os gametas masculino e feminino contribuiriam de modo equivalente na determinao das caractersticas dos descendentes. 3. Do cruzamento dessas duas linhagens puras s poderia haver um tipo de descendncia, j que havia somente um tipo de plen e um tipo de vulo. Um passo decisivo na construo desse modelo foi a concluso de que as plantas hbridas da F1, embora apresentassem a forma inflada, possuiriam, necessariamente, os fatores D e d. 4. Quando as plantas da F1 produzissem vulos e gros de plen, cada gameta s poderia apresentar fatores de hereditariedade de um tipo. Ou seja, os dois tipos de fatores existentes em uma planta hbrida deveriam se separar (segregar) na formao dos gametas, de modo que cada gameta portasse apenas um ou outro fator, D ou d. 5. Os dois tipos de gametas produzidos pelas plantas F1 estariam em igual freqncia, ou seja, 50% de D e 50% de d. 6. Combinaes entre gros de plen e vulos na determinao da gerao F2 seriam totalmente ao acaso, resultando em 25% DD, 50% Dd e 25% dd. Ou seja, os diferentes indivduos puros e hbridos se distribuiriam na proporo de 1 puro dominante: 2 hbridos: 1 puro recessivo. Como o fator D dominante sobre o fator d, observa-se na gerao F2 75% das plantas com vagem inflada e 25% com vagem deprimida.
F1 vulo F1 Plen 50%D 50%d
50%D
50%d
Proporo genotpica esperada na F2: 1DD : 2Dd : 1dd
25%DD 25%Dd 25%Dd 25%dd
Esse modelo vlido para todos os cruzamentos que envolvem apenas um par de estados contrastantes de uma caracterstica onde um membro do par seja dominante e o outro recessivo.
68 C E D E R J
Deve-se enfatizar que a concordncia entre os dados e o modelo de Mendel no casual. Quando inventamos uma hiptese, ela necessariamente deve explicar os dados. Mas, como vimos ao estudarmos o procedimento cientfico, isso no quer dizer que ela seja verdadeira. A hiptese pode ser considerada uma tentativa de explicao que ser rejeitada ou no por meio de testes das dedues feitas a partir dela.
O TESTE DA HIPTESE DE MENDEL

Era fcil realizar um teste decisivo. Note que na gerao F2 do cruzamento que estamos usando como exemplo (Tabela 4.4) para cada planta com caracterstica recessiva (forma deprimida), h trs plantas com caracterstica dominante (forma inflada). Isso um fato. No entanto, se a hiptese de Mendel fosse verdadeira, as vagens infladas deveriam ser de dois tipos, puras (DD) ou hbridas (Dd), e em propores previsveis: dentre as infladas 1/3 seriam DD e 2/3, Dd. Embora no fosse possvel distinguir visualmente as vagens DD das Dd, se essas plantas fossem autofecundadas a descendncia daria a resposta.
P: A Tabela 4.3 apresenta o total de vagens infladas obtidas na F2 do cruzamento monobrido realizado por Mendel. Se a hiptese de Mendel fosse verdadeira, qual seria o resultado esperado na descendncia dessas plantas aps se autofecundarem? R: Segundo o modelo proposto por Mendel, 2/3 das 882 plantas com vagem inflada presentes na F2 so hbridas (Dd) e 1/3 so puras (DD). Sendo assim, aps a autofecundao, 294 plantas (1/3 de 882), por serem puras, produziriam toda descendncia com vagem de forma inflada e 588 plantas, por serem hbridas, produziriam 34 de sua descendncia com vagem inflada e 14 com vagem deprimida.
Mendel realizou o teste de sua hiptese plantando as sementes da gerao F2 e obteve, para os sete caracteres analisados, resultados como esperado pela deduo acima. Logo, no havia razo para que a hiptese de Mendel fosse rejeitada e, de forma sinttica, a Lei da Segregao dos Fatores ou Primeira Lei de Mendel pode ser expressa como se segue:
O princpio bsico da herana biolgica estabelece que as caractersticas hereditrias so determinadas por fatores que ocorrem aos pares. Na formao dos gametas, os fatores membros de cada par se segregam, isto , se separam de forma que cada gameta s recebe um membro de cada par de fatores, sendo, portanto, sempre puro.
C E D E R J 69
AULA
MDULO 1

Na prxima aula daremos prosseguimento anlise do trabalho de Mendel, investigando o padro de transmisso da herana de duas ou mais caractersticas em conjunto.
RESUMO
Em 1865, Mendel apresentou os resultados de sua pesquisa com hibridao em Pisum sativum em duas palestras realizadas na Brnn Society for the Study of Natural Science. Embora essas palestras tenham sido publicadas nos Proceedings dessa sociedade no ano seguinte com o ttulo: Versuche ber Pflanzen-Hybriden (Experimentos em hibridao de plantas), a importncia do trabalho de Mendel no foi compreendida de imediato pela comunidade cientfica e ficou esquecido at que, em 1900, foi redescoberto por Hugo de Vries, Carl Correns e Erich Von Tschermak. A partir da, as idias de Mendel foram sendo cada vez mais divulgadas na comunidade cientfica, que passou a utiliz-las na formulao de hipteses, desenvolvendo, como veremos ao longo deste curso, as bases da Cincia que hoje conhecemos como Gentica. Mendel observou que: 1. No cruzamento de duas variedades puras que diferem entre si quanto a um determinado carter hereditrio, a caracterstica que no aparece na gerao F1 no perdida, mas fica encoberta, reaparecendo na F2. 2. Na F2, a proporo entre o nmero de indivduos que apresentam a forma dominante de uma caracterstica e os que apresentam a forma recessiva 3:1. 3. Cruzamentos recprocos apresentam resultados semelhantes. Mendel concluiu que: 1. Os gametas masculino e feminino contribuem de modo equivalente na determinao das caractersticas dos descendentes. 2. As caractersticas hereditrias so determinadas por fatores que passam de gerao a gerao atravs dos gametas.
70 C E D E R J
3. A gerao F2 de um cruzamento onde os tipos parentais diferem quanto a uma caracterstica constituda por trs tipos de indivduos, na proporo de 1 puro dominante: 2 hbridos: 1 puro recessivo. Essa proporo conseqncia de, na gerao F1, um hbrido para um determinado par de fatores formar apenas gametas puros e estes gametas se unirem ao acaso para dar origem gerao seguinte. A partir dessas concluses, Mendel formulou sua primeira lei, tambm conhecida como Lei da Segregao dos Fatores ou Lei da Pureza dos Gametas, que pode ser expressa como se segue: O princpio bsico da herana biolgica estabelece que as caractersticas hereditrias so determinadas por fatores que ocorrem aos pares. Na formao dos gametas, os fatores membros de cada par se segregam, isto , se separam de forma que cada gameta s recebe um membro de cada par de fatores, sendo, portanto, sempre puro.
EXERCCIOS
1. Preencha os espaos em branco usando o termo abaixo mais apropriado. (a) dominante (b) gentipo (c) segregao (d) gerao F1 Mendel chamou de ( (e) fentipo (f) monobrido (g) recessivo (h) gerao F2 ) o estado da caracterstica que aparecia em todas as
plantas da primeira gerao hbrida. O estado da caracterstica que no aparecia nos indivduos hbridos foi denominado por Mendel de ( ).
A primeira gerao hbrida, ou seja, aquela resultante do cruzamento entre indivduos de variedades diferentes, chamada de ( ).
A descendncia resultante da autofecundao da primeira gerao hbrida chamada de ( ).
C E D E R J 71
AULA
MDULO 1
O termo (
) empregado para designar as caractersticas apresentadas por um
indivduo, sejam elas morfolgicas, fisiolgicas, ou comportamentais. O termo ( ) refere-se constituio gentica do indivduo, isto , aos fatores
hereditrios, ou genes, que ele possui. Um cruzamento ( ) envolve indivduos que diferem apenas quanto a um carter,
com dois estados contrastantes. A pureza dos gametas resultado da ( dos gametas. 2. Quais as razes que levaram Mendel a escolher a ervilha como material para os seus experimentos? 3. No que a anlise de Mendel diferiu da de seus predecessores que trabalharam com hibridao de plantas? 4. O que voc entende por autofecundao e fecundao cruzada? 5. Com base nas hipteses e observaes de Mendel, esquematize os resultados esperados nos seguintes cruzamentos: a. ervilha com revestimento da semente cinza (dominante) com ervilha com revestimento da semente branco. b. F1 do cruzamento (a) entre si. c. F1 do cruzamento (a) com a ervilha com revestimento da semente branco. 6. Se voc tem uma Pisum sativum com vagem do tipo inflada (caracterstica dominante), que tipo de teste poderia ser feito para se determinar se ela pura ou hbrida segundo os critrios de Mendel? 7. Coleus blumei uma espcie de planta muito usada na ornamentao de jardins que pode apresentar suas folhas com bordas levemente onduladas (forma crenada) ou profundamente recortadas (forma lobada). Ao realizar um cruzamento entre uma planta dessa espcie apresentando folhas crenadas com outra apresentando folhas lobadas, um produtor obteve apenas folhas lobadas na descendncia. Com base nestes resultados, o produtor concluiu que os fatores que condicionam a forma crenada no so transmitidos prole neste tipo de cruzamento. Voc concorda com a concluso tirada por este produtor? Caso no concorde, proponha uma hiptese para explicar o resultado obtido. Como voc poderia testar sua hiptese experimentalmente? ) dos fatores de cada par na formao
72 C E D E R J
8. O bilogo francs Cuenot, no incio do sculo XX, cruzou camundongos selvagens de cor cinza com camundongos brancos (albinos). Na primeira gerao todos os indivduos tinham cor cinza. O cruzamento desses ltimos indivduos entre si produziu uma gerao F2 constituda por 198 camundongos cinzas e 72 brancos. Proponha uma hiptese para explicar esses resultados. Com base na sua hiptese, faa um diagrama do cruzamento e compare os resultados observados com os esperados de acordo com o diagrama. 9. Um dos diferentes tipos de albinismo que ocorrem na espcie humana determinado por um fator recessivo a. a. Do casamento entre uma mulher portadora do fator para albinismo (Aa) e um homem albino, qual a proporo esperada de filhos albinos? b. Do casamento entre dois portadores (Aa), qual a proporo esperada de filhos albinos? 10. Em algumas variedades de gado bovino, a ausncia de chifres condicionada por um fator dominante (C). Um touro sem chifres foi cruzado com trs vacas. No cruzamento com a vaca I, portadora de chifres, foi produzido um bezerro sem chifres. No cruzamento com a vaca II, portadora de chifres, foi produzido um bezerro com chifres. No cruzamento com a vaca III, sem chifres, foi produzido um bezerro com chifres. a. Proponha uma hiptese para explicar esses resultados. b. Com base na sua hiptese faa um diagrama do cruzamento e compare os resultados observados com os esperados de acordo com o diagrama.
C E D E R J 73
AULA
MDULO 1
O trabalho de Mendel: desvendando a Segunda Lei
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Compreender o modelo proposto por Mendel para explicar os resultados obtidos nos cruzamentos envolvendo duas caractersticas (cruzamento dibrido). Enunciar a Segunda Lei de Mendel, lei da segregao ou associao independente.
Pr-requisitos
Voc precisar rever os conceitos da teoria das probabilidades: regras da adio e multiplicao apresentados nas aulas de Bioestatstica. E a Primeira Lei de Mendel.
AULA
Gentica Bsica | O trabalho de Mendel: desvendando a Segunda Lei
Na aula passada, vimos como Mendel explicou o padro de transmisso da herana em ervilha considerando algumas das caractersticas da espcie Pisum sativum isoladamente. Mendel postulou que as caractersticas hereditrias so determinadas por fatores que ocorrem em pares. Nas caractersticas analisadas por Mendel, em cada par de fatores, um membro do par dominante e o outro, recessivo. Os fatores membros de cada par se separam (segregam) na formao dos gametas, sendo que cada gameta recebe apenas um fator de cada par. A combinao ao acaso dos gametas durante a fecundao produz, ento, trs tipos de descendentes: 1/4 com os dois fatores dominantes (homozigoto dominante); 2/4 com um fator dominante e um recessivo (heterozigoto) e 1/4 com os dois fatores recessivos (homozigoto recessivo). Uma vez que os homozigotos dominantes e os heterozigotos so indistinguveis entre si, a proporo fenotpica esperada pelo modelo de 3 indivduos com fentipo dominante para 1 indivduo com fentipo recessivo.
!
Chamamos de cruzamentos monobridos aqueles em que apenas uma das caractersticas contrastantes entre as duas linhagens parentais analisada. Nos cruzamentos dibridos, a anlise inclui duas caractersticas contrastantes entre as linhagens parentais.
ANALISANDO DUAS CARACTERSTICAS EM CONJUNTO CRUZAMENTOS DIBRIDOS

E se analisssemos duas ou mais caractersticas simultaneamente, como seria o padro de transmisso das caractersticas de uma em relao outra? Seriam estas caractersticas herdadas segundo um padro definido? Mendel deve ter feito uma pergunta semelhante a esta quando resolveu considerar em suas anlises duas caractersticas ao mesmo tempo. Para facilitar o entendimento, vamos tomar como exemplo o cruzamento entre duas linhagens puras que apresentavam os caracteres cor e textura das sementes contrastantes. Ou seja, uma das linhagens parentais possua semente amarela-lisa e a outra, verde-rugosa. A F1 deste cruzamento apresentou todas as sementes amarelas-lisas, ou seja, apresentou o estado de carter dominante para as duas caractersticas em questo. A autofecundao das plantas da F1 forneceram na F2 os seguintes tipos de sementes:
76 C E D E R J
Amarelo-liso
315
9,8
Verde-liso
108
3,4
Amarelo-rugoso
101
3,2
Verde-rugoso
32
O resultado a proporo de 9,8(315/32) : 3,4(108/32) : 3,2(101/ 32) : 1(32/32). Estas propores representam os dados reais obtidos nessa amostra com um total de 556 plantas, mas Mendel props que as propores tericas deveriam ser 9:3:3:1. Voc j deve ter visto no curso de Bioestatstica que, quando trabalhamos com amostras, podemos obter desvios dos valores tericos esperados. Retomaremos isso em aulas futuras. Por enquanto, vamos tentar entender por que Mendel considerou que a proporo terica da F2 deveria ser 9:3:3:1. Ou, em outras palavras, que 9/16 da F2 apresentam ambos estados dominantes, 3/16 apresentam um estado dominante e o outro recessivo, 3/16 apresentam o outro dominante e o primeiro recessivo e 1/16 mostra ambos recessivos. Em primeiro lugar, porque valores prximos a estas propores foram obtidos para todos os experimentos quando ele considerava duas caractersticas simultaneamente. Esta regularidade indicava que deveria haver algum princpio fundamental responsvel por ela. Segundo, porque ele foi capaz de prever que estas propores seriam obtidas a partir das propores 3:1 dos cruzamentos monobridos. Voc quer saber como? Vamos descobrir... A partir do cruzamento dibrido que tomamos como exemplo (ervilha com semente amarela-lisa x ervilha com semente verde-rugosa), procure analisar as propores da F2 considerando uma caracterstica por vez. Para cor da semente vamos verificar que 416 so amarelas e 140 so verdes. O que d uma proporo de 2,9 : 1, um pequeno desvio da proporo terica 3:1. Calcule agora a proporo da F2 para a outra caracterstica, textura da semente.
C E D E R J 77
AULA
Fentipo
Nmero de sementes
Propores observadas
MDULO 1
O que voc observou? Isto mesmo, a proporo 3:1 tambm est mantida. Ento a proporo 9:3:3:1 deve ser uma combinao das propores 3:1 de cada uma das caractersticas. Mendel, que era fsico e sabia bem matemtica, logo percebeu que poderia aplicar as leis da probabilidade para explicar seus resultados. Vamos tentar resolver esta questo? Primeiro vamos analisar as caractersticas separadamente. Com seus conhecimentos de probabilidades (se necessrio, reveja as regras de multiplicao e adio de probabilidades no curso de Bioestatstica), responda sobre a F2 do cruzamento do exemplo acima: 1. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica dominante amarela? 416/140 => proporo 3 amarelas : 1 verde => freqncia de 34 da amostra de amarelas. 2. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica recessiva verde? 3. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica dominante lisa? 4. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica recessiva rugosa? At aqui voc no deve ter dvidas. As respostas seriam, respectivamente, 3/4; 1/4; 3/4 e 1/4. Agora vamos considerar as duas caractersticas simultaneamente e, como Mendel logo percebeu, vamos considerar que a transmisso da caracterstica cor da semente seja um evento independente da transmisso da caracterstica textura da semente.
!
Qual a probabilidade de obtermos duas vezes cara no lanamento de duas moedas? Os lanamentos de duas moedas simultaneamente constituem-se em eventos independentes. A probabilidade de dois ou mais eventos independentes ocorrerem juntos o produto das probabilidades com que ocorrem separadamente. Assim, a probabilidade de obter-se duas vezes a face cara em dois lanamentos igual a 1/2 x 1/2, ou 1/4. Ou seja, esperamos obter duas caras uma vez a cada quatro em que lanarmos duas moedas simultaneamente.
78 C E D E R J
5. Com que freqncia devero aparecer indivduos com as caractersticas dominantes cor amarela e textura lisa? A resposta ser o produto das probabilidades independentes. Sendo a probabilidade de ser amarela = P(amarela) = 3/4 e a probabilidade de ser lisa = P(lisa) = 3/4, a probabilidade de ser amarela e lisa = P(amarela e lisa) ser: P(amarela e lisa) = P(amarela) x P(lisa) = 3/4 x 3/4 = 9/16. Ops!!! Este nmero no nos estranho. Ento, se a transmisso da caracterstica cor da semente for um evento independente da transmisso da caracterstica textura da semente, em uma amostra da F2 eu esperaria que para cada dezesseis plantas nove apresentassem sementes amarelas e lisas. Responda voc as outras questes. 6. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica dominante cor amarela e a recessiva textura rugosa? 7. Com que freqncia devero aparecer indivduos com a caracterstica recessiva cor verde e a dominante textura lisa? 8. Com que freqncia devero aparecer indivduos com as caractersticas recessivas cor verde e textura rugosa? Voc matou a charada!!! Se a transmisso das duas caractersticas forem eventos independentes, a partir do produto das probabilidades de cada uma delas poderemos explicar as propores fenotpicas 9:3:3:1 da F2. Ao considerar, a partir dos cruzamentos que realizou, duas das sete caractersticas simultaneamente, Mendel obteve resultados semelhantes ao descrito acima para a cor e a forma das sementes. Embora as propores obtidas experimentalmente pudessem diferir um pouco da proporo 9:3:3:1, Mendel considerou que isto seria o resultado de desvios aleatrios do esperado terico e que deveria haver um princpio fundamental responsvel pelo padro observado.
C E D E R J 79
AULA
MDULO 1
A HIPTESE DE MENDEL PARA O CRUZAMENTO DIBRIDO

Para explicar seus resultados, Mendel props que os fatores para duas ou mais caractersticas deveriam segregar-se independentemente na formao dos gametas das plantas hbridas lei da segregao independente (conhecida tambm como Segunda Lei de Mendel ou lei da associao independente). Isto , cada gameta deveria receber apenas um fator para cada caracterstica: V ou v, para os fatores que condicionam a cor da semente amarela ou verde, e R ou r, para os fatores que condicionam sua textura lisa ou rugosa. Os fatores para duas caractersticas se combinariam ao ASSOCIAO
INDEPENDENTE DOS FATORES
acaso na formao dos gametas (ASSOCIAO INDEPENDENTE DOS FATORES). Na planta dibrida (F1) do nosso exemplo, um gameta que tivesse recebido o fator dominante para uma das caractersticas (V) poderia receber tanto o fator dominante (R) quanto o recessivo (r) da outra; da mesma maneira, um gameta que tivesse recebido o fator recessivo (v) poderia receber tanto o fator dominante (R) quanto o recessivo (r). Uma planta dibrida formaria, portanto, quatro tipos de gametas: VR, Vr, vR, vr (Figura 5.1).
Nas plantas da F1 de um cruzamento dibrido para cor e forma da semente, a segregao independente dos fatores de cada uma das caractersticas produz quatro tipos de gametas em propores iguais.
O fator V se segrega do fator v
Figura 5.1: Associao independente dos fatores na formao dos gametas de um indivduo dibrido.
80 C E D E R J
Durante a fecundao, os gametas se uniriam ao acaso, ou seja, cada tipo de plen teria igual probabilidade de se unir a qualquer tipo de vulo (Figura 5.2).
Segregao dos fatores Rr e dos fatores Vv na formao dos gros do plen
Tipo de freqncia do gentipo dos gros de plen Segregao dos fatores Rr e dos fatores Vv dos vulos
Tipo de freqncia dos gentipos dos vulos
Figura 5.2: Representao da hiptese de Mendel para explicar os resultados do cruzamento dibrido para cor e forma da semente. Cada indivduo da F1 (VvRr) gera gametas como descrito na Figura 5.1. A combinao de fatores hereditrios na F2 ser determinada pela combinao aleatria dos quatro gametas produzidos em igual freqncia. Conhecendo-se essas combinaes e sabendo-se que fatores so os dominantes para cada caracterstica, as propores fenotpicas podem ser determinadas.
Mas note uma coisa muito importante. Para que as classes fenotpicas observadas na F2 estivessem da proporo de 9:3:3:1, h algumas outras condies que deveriam ser satisfeitas. A partir do esquema do cruzamento dibrido da Figura 5.2, procure identificar estas condies. Viu? Ento, vamos list-las: 1. Os quatro tipos de gametas formados pela planta dibrida deveriam aparecer em igual freqncia, ou seja, 25% (ou 1/4) cada um. 2. Para cada uma das caractersticas analisadas, deve haver dominncia completa de um dos fatores sobre o outro. 3. Os fatores que determinam uma das caractersticas no devem influenciar na determinao da outra caracterstica.
C E D E R J 81
AULA
MDULO 1
Se qualquer uma das condies listadas no for satisfeita, as propores fenotpicas na F2 sero diferentes. Vamos analisar a condio de que cada tipo de gameta seja formado com igual freqncia, isto , 1/4 RV; 1/4 Rv; 1/4 rV; 1/4 rv. Na Figura 5.2 observe a freqncia de cada gameta e das classes resultantes do cruzamento ao acaso entre eles. Por exemplo, 1/4 dos vulos seriam RV e 1/4 dos gros de plen seriam rV. Logo, em 1/4 x 1/4, ou 1/16, das vezes um gro de plen rV fecundaria um vulo RV formando uma planta que possuiria os fatores Rr para a forma da semente e VV para a cor da semente e teria o fentipo sementes amarelas-lisas. Note que 9 em 16 combinaes de gros de plen e vulos produziriam sementes amarelas-lisas na F2. O mesmo raciocnio pode ser feito para as outras classes fenotpicas. Resumindo, a condio de que os gametas sejam formados nas mesmas freqncias (1/4 de cada tipo) fundamental para explicar os resultados observados na F2 dos cruzamentos dibridos. Se violarmos esta ou qualquer das outras condies citadas, veremos que a proporo fenotpica na F2 no ser mais de 9:3:3:1.
O TESTE DA HIPTESE DE MENDEL PARA O MODELO DE CRUZAMENTO DIBRIDO

Aps propor um modelo para explicar os resultados obtidos nos cruzamentos dibridos, Mendel era capaz de fazer previses e test-las. preciso que esteja claro que o nico dado disponvel para Mendel eram os fentipos das plantas e suas freqncias nas geraes. Tudo mais faz parte do modelo criado por ele para explicar estes resultados. Revendo a Figura 5.2, possvel identificar que, segundo a hiptese de Mendel, as sementes lisas e verdes da F2 deveriam ser de dois tipos, sendo que, 1/3 delas seria do tipo vvRR e 2/3 seriam do tipo vvRr. A partir da, Mendel pde testar sua hiptese, pois ele podia prever que, se sua hiptese estivesse correta, ao deixar as plantas com sementes lisas e verdes da F2 se autofecundarem, 1/3 delas deveria apresentar descendncia com 100% das sementes lisas e verdes e 2/3 delas deveriam apresentar descendncia com 3/4 das sementes lisas verdes e 1/4 das sementes rugosas verdes. Mendel fez previses semelhantes para todos os fentipos obtidos na F2 e testou-as, obtendo os resultados esperados por sua hiptese.
82 C E D E R J
Tabela 5.1: Teste da hiptese de Mendel para o cruzamento dibrido.
Tipos de plantas com sementes verde-lisas da F2, segundo a hiptese de Mendel
Resultado esperado para a autofecundao das plantas verde-lisas da F2, segundo a hiptese de Mendel
Resultado esperado aps a autofecundao de 102 plantas da F2
Resultado obtido aps a autofecundao de 102 plantas da F2
100% vvRR 1/3 vvRR
100% verde-lisa
1/3 de 102 = 34 plantas com toda descendncia verde-lisa
35 plantas apresentaram F3 com toda descendncia verde-lisa
1/4 vvRR 2/4 vvRr
75% verde-lisa 2/3 de 102 = 68 plantas com descendncia de 3 verde-lisa: 1 verderugosa 67 plantas apresentaram descendnciacom,aproximadamente, 3 sementes verde-lisas: 1 verderugosa.
2/3 vvRr 1/4 vvrr 25% verde-rugosa
Um objetivo de todas as hipteses e teorias em cincia o seu poder de previso. As hipteses mendelianas permitiram a formulao de um modelo to especfico que, a partir dele, dedues podiam ser feitas e testadas por meio de observaes e experimentos. Em 1865, nenhum campo da Biologia Experimental tinha atingido equivalente nvel de desenvolvimento. Os experimentos de Mendel com cruzamentos de variedades de ervilhas e sua notvel anlise dos resultados levaram a importantes concluses, inicialmente vlidas s para ervilhas e posteriormente demonstradas como princpios universais da Gentica.
INFORMAO PARA PRXIMA AULA

Na prxima aula veremos como surgiram as primeiras idias de que os fatores da hereditariedade estariam localizados nos cromossomos.
C E D E R J 83
AULA
MDULO 1
RESUMO
Atravs de estudos desenvolvidos em ervilhas (Pisum sativum), Mendel reconheceu que a transmisso da herana seguia regras definidas e props um modelo explicativo para estas regras. O passar do tempo mostrou que as concluses tiradas por Mendel para ervilhas eram gerais e aplicveis a outras espcies. Os fundamentos do modelo proposto so: 1. A hereditariedade condicionada por fatores transmitidos, por meio dos gametas, de gerao a gerao. Para cada caracterstica pode haver fatores diversos, responsveis por determinar seus diferentes estados. 2. Os fatores condicionantes dos estados contrastantes de uma mesma caracterstica podem apresentar uma relao de dominncia-recessividade entre si, e apenas um deles (dominante) se manifesta nos hbridos. 3. Quando duas variedades de plantas so cruzadas entre si, no h mistura dos fatores da hereditariedade que determinam os estados contrastantes de suas caractersticas. O hbrido resultante desses cruzamentos idntico, em aparncia, ao parental dominante puro. 4. Os dois tipos de fatores hereditrios presentes no hbrido (A e a) separam-se na formao dos gametas e combinam-se aleatoriamente na fertilizao, resultando na proporo fenotpica 3:1. Essa proporo s pode ocorrer se cada gameta receber um tipo de fator de hereditariedade, A ou a. 5. Cada par de fatores em uma planta dibrida, como AaBb, se comporta de maneira independente em relao ao outro par. Assim, os membros do par Aa segregamse independentemente dos membros do par Bb, produzindo quatro tipos de gametas em freqncias iguais: 1/4 AB, 1/4 Ab, 1/4 aB, 1/4 ab. Os gametas assim formados combinam-se aleatoriamente na fertilizao, resultando em quatro tipos de descendentes na proporo 9:3:3:1.
84 C E D E R J
EXERCCIOS
Utilize as alternativas abaixo para responder s questes 1 e 2. (a) associao (b) dominncia (c) segregao independente (d) segregao 1. A pureza dos gametas resultado da ( dos gametas. 2. Os quatro tipos de gametas que um dibrido forma conseqncia da ( fatores dos dois pares. 3. Como pode ser derivada a proporo 9:3:3:1, tpica de um cruzamento dibrido, a partir da proporo 3:1, tpica de um cruzamento monobrido? 4. Responda s seguintes questes: a. Quais das condies necessrias para que o modelo mendeliano fosse vlido podiam ser consideradas fatos? b. Qual a diferena bsica entre a 1 e a 2 Leis de Mendel? 5. Com base nas hipteses e observaes de Mendel, esquematize os resultados esperados nos seguintes cruzamentos em ervilhas: a. linhagem pura de ervilha alta e vagem inflada linhagem pura de ervilha an e vagem deprimida. b. F1 do cruzamento (a) entre si. c. F1 do cruzamento (a) linhagem de ervilha an e vagem deprimida original. 6. Admitindo-se a segregao independente, quantos tipos de gameta cada indivduo abaixo produz? I II AaBbCCdd AaBbCc ) dos ) dos fatores de cada par na formao
III AabbCcDDEe Utilize as alternativas abaixo para completar as frases de 7 a 11. (a) 1:1 (b) 1:2:1 (c) 3:1
C E D E R J 85
(d) 1:1:1:1 (e) 9:3:3:1
AULA
MDULO 1
7. Nos cruzamentos envolvendo apenas um par de caracteres contrastantes, Mendel obteve na gerao F2 indivduos com caractersticas dominante e recessiva, na proporo de ( ).
8. Quando Mendel seguiu a herana de duas caractersticas, isto , em cruzamentos dibridos, encontrou na gerao F2 indivduos com ambos os estados dominantes para as duas caractersticas analisadas, com um dominante e o outro recessivo, com o primeiro recessivo e o outro dominante e com ambos recessivos, respectivamente, na proporo de ( 9. A proporo de ( ). ) na gerao F2 corresponderia, segundo o modelo do
monoibridismo, aos gentipos dos indivduos dominantes puros, hbridos e recessivos, respectivamente. 10. Um organismo heretorozigtico quanto a um par de fatores formar gametas na proporo de ( ).
11. Um organismo duplo-heterozigtico quanto a dois pares de fatores com segregao independente formar gametas na proporo de ( ).
12. No cruzamento entre uma linhagem pura de semente amarela, lisa e envoltrio cinza com outra de semente verde-rugosa e envoltrio branco, Mendel obteve na F1 todas as sementes amarelas lisas e com envoltrio cinza. a. De acordo com as leis da segregao e da associao independente, quantos tipos de gametas devem ser produzidos pelas plantas tribridas da F1? b. Quantas combinaes de gametas podero ser produzidas a partir da autofecundao das plantas F1? c. A Figura 5.3 apresenta o mtodo de ramos. Este mtodo pode ser utilizado para calcular as freqncias esperadas de cada uma das classes fenotpicas da F2. Complete a Figura 5.3, estimando as propores fenotpicas esperadas na F2 do cruzamento tribrido.
86 C E D E R J
Razes fenotpicas determinadas por cada par de fatores Fentipos

Sementes lisa x rugosa Sementes amarelas x verdes
3/4
coberturas das sementes cinza x brancas
Razo fenotpica esperada na F2
Cinza
3/4
Amarela
1/4 3/4
Branco Lisa
3/4 Cinza 1/4
Verde
1/4
Branco
3/4 Cinza 3/4
Amarela
1/4
Branco
1/4 Rugosa 3/4 Cinza 1/4
Verde Figura 5.3: Prevendo as propores fenotpicas na prognie de um cruzamento tribrido atravs do mtodo de ramos.
1/4 Branco
C E D E R J 87
AULA
MDULO 1
H IPTESE (H 0 )
NULA
APNDICE TESTE DE HIPTESE: A DISTRIBUIO DO QUI-QUADRADO

Em cruzamentos experimentais, freqentemente observamos propores fenotpicas que apresentam desvios dos valores esperados de acordo com a nossa hiptese. Estatisticamente, podemos testar se esses desvios so ou no significativos. Ou seja, podemos testar se os resultados observados em um experimento esto de acordo com uma determinada hiptese. No caso da anlise de freqncias, o teste do qui-quadrado (2) um dos mais utilizados. Nosso objetivo neste apndice mostrar, da forma mais direta possvel, a aplicao desse teste em experimentos genticos. Abordagens mais rigorosas podem ser obtidas no material didtico que voc recebeu no curso de Elementos de Matemtica e Estatstica, ou em livros especializados como o Curso Prtico de Bioestatstica ; veja as referncias bibliogrficas. O teste compara uma distribuio de freqncias observada com uma distribuio de freqncias tericas. De que maneira? Quando calculamos o valor do 2, os desvios ocorridos em relao aos valores previstos so convertidos na probabilidade de se obter um desvio dessa magnitude ou maior ao acaso, levando em conta o tamanho da amostra e o nmero de classes (os graus de liberdade). Ficou complicado? Vamos analisar o objetivo desse teste durante sua aplicao. Acompanhe a Tabela 5.2, onde esto apresentados os resultados de dois cruzamentos. O primeiro cruzamento (I) foi realizado entre uma variedade de ervilha com sementes amarelas e lisas, duplo-heterozigtica RrVv, e uma variedade com sementes verdes e rugosas, duplo-homozigtica recessiva rrvv. O nmero de indivduos observado em cada uma das classes fenotpicas na prole desse cruzamento est na primeira coluna. As colunas dois e trs apresentam, respectivamente, a proporo e o nmero de indivduos esperado, caso os genes que condicionam as duas caractersticas segreguem independentemente. O segundo cruzamento (II) foi realizado entre uma variedade de ervilha-de-cheiro, duplo-heterozigtica para as caractersticas cor da flor e forma do plen e uma variedade duplo-homozigtica recessiva, apresentando cor da flor vermelha e forma do plen redondo. A segregao independente tambm foi usada como hiptese nula para o clculo das propores esperadas nesse cruzamento.
uma hiptese estatstica a ser testada, podendo ser rejeitada ou no de acordo com a probabilidade de que os desvios matemticos entre os resultados observados no experimento e os resultados esperados por essa hiptese se devam ao acaso. chamada hiptese nula, por se tratar de uma afirmativa a respeito da ausncia de diferenas (diferena nula). Assim, se ao final do teste no pudermos rejeitar a hiptese nula, teremos um caso em que os dados observados esto de acordo com o esperado por essa hiptese, ou seja, a probabilidade de que os desvios tenham ocorrido ao acaso alta (geralmente maior do que 5%), ao passo que, se rejeitarmos a hiptese nula, teremos um caso em que os dados observados no esto de acordo com o esperado por esta hiptese, isto , a probabilidade de que os desvios tenham ocorrido ao acaso significativamente pequena (geralmente menor do que 5%). Nesse caso, portanto, deve haver uma causa que explique os desvios encontrados, e uma nova hiptese deve ser formulada, a hiptese alternativa (HA).
88 C E D E R J
amarelalisa verderugosa
252 248 250 258 1008 567 46 48 142 900
1/4 1/4 1/4 1/4 1 1/4 1/4 1/4 1/4 1
252 252 252 252 1008 225 225 225 225 900
(252-252) 2 (248-252) 2 (250-252) 2 (258-252) 2 (567-225) 2 (46-225) 2 (48-225) 2 (142-225) 2
0/250 = 0,000 16/250 = 0,064 4/250 = 0,016 36/250 = 0,144 2 = 0,224 116964/225 = 519,84 32041/225 = 142,40 31329/225 = 139,24 6889/225 = 30,62 2 = 832,100
amarelarugosa verdelisa TOTAL () prpura-longo prpura-redondo
II
vermelha-longo vermelha-redondo TOTAL ()
Tabela 5.2: Valor do qui-quadrado (2), calculado para (I) o resultado de um cruzamento entre variedades de ervilha que diferem quanto cor e quanto forma das sementes; e (II) resultado de um cruzamento entre variedades de ervilha de cheiro que diferem quanto cor das flores e quanto ao tamanho do plen. Observado (O) o nmero de indivduos observados para cada classe fenotpica, Proporo esperada calculada pela hiptese nula a ser testada (lei da segregao independente), Esperado (E) o nmero de indivduos esperado pela hiptese nula (no mesmo total do nmero de indivduos observados).
Observe que o nmero de indivduos esperado calculado em relao ao total de indivduos observados. Basta que voc multiplique o total de indivduos, observados pela proporo esperada em cada classe fenotpica. No primeiro cruzamento, por exemplo, o total observado 1008 indivduos e a proporo esperada em cada classe fenotpica 1/4. Logo, o nmero de indivduos esperado (E) em cada classe fenotpica : 1008 x 1/4 = 252. O valor do
2
obtido atravs da soma dos quadrados dos desHIPTESE NULA),
vios entre o nmero de indivduos observado (O) e o nmero esperado (E) pela hiptese a ser testada (a esperado:
2 = [(O E)2 / E]
divididos pelo nmero
Ateno: o teste do 2 deve ser feito sempre com valores absolutos, nunca com propores. O uso de propores elimina uma informao fundamental para o teste estatstico, que o tamanho da amostra.
C E D E R J 89
AULA
Classes fenotpicas
Observado (O)
Proporo esperada
Esperado (E)
(O E)2
(O E)2 / E
MDULO 1
Com os valores do 2 calculados para os resultados de cada cruzamento (2 calculado), podemos testar se cada resultado est de acordo com a lei da segregao independente (nossa hiptese nula H0), atravs da comparao desses valores com o valor crtico de 2 (2 crtico). O 2 crtico determina a partir de que valor a probabilidade de os desvios ocorrerem ao acaso (P) menor do que o
NVEL DE SIGNIFICNCIA
() do
teste, ou seja, a partir de que valor podemos dizer que a diferena entre o observado e o esperado grande demais para ser unicamente devida ao acaso. Na prtica, existem dois resultados possveis (geralmente utilizamos = 0,05): 1. 2 calculado 2 crtico, ou seja, se a probabilidade de os desvios terem ocorrido ao acaso for do que 5%, a hiptese nula no pode ser rejeitada; 2. 2 calculado > 2 crtico, ou seja, se a probabilidade de os desvios terem ocorrido ao acaso for < do que 5%, a hiptese nula deve ser rejeitada, pois os desvios so considerados significativos. Mas, para chegarmos ao valor do 2 crtico, precisamos calcular os graus de liberdade (gl) do experimento. Os graus de liberdade so obtidos quando subtramos uma unidade (1) do nmero de classes (k) utilizadas no experimento, em nosso caso, o nmero de classes fenotpicas. Logo, para quatro classes fenotpicas o grau de liberdade (gl = k 1) ser igual a 3 (gl = 4 1). Agora s falta encontrar o valor do 2 crtico na tabela de distribuio dos valores crticos de 2, para gl = 3 e = 0,05 (Tabela 5.3).
NVEL
DE SIGNIFICNCIA
Quando testamos uma hiptese, estamos dispostos a correr o risco de rejeit-la quando ela verdadeira (erro Tipo I) com uma probabilidade mxima (P), que chamamos de nvel de significncia (). Por exemplo, ao nvel de significncia de 0,05, temos 5% de chance de errar quando dizemos que um desvio significativo. Em outras palavras, temos uma confiana de 95% de que a deciso de rejeitar a hiptese nula esteja correta. Normalmente escolhemos o nvel de significncia de 0,05 para a maioria dos problemas biolgicos, embora outros valores possam ser utilizados.
90 C E D E R J
DISTRIBUIO DO gl
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
0,02 0,21 0,58 1,06 1,61 2,20 2,83 3,49 4,17 4,86
0,06 0,45 1,00 1,65 2,34 3,07 3,82 4,59 5,38 6,18
0,15 0,71 1,42 2,20 3,00 3,82 4,67 5,53 6,39 7,27
0,46 1,39 2,37 3,36 4,35 5,35 6,35 7,34 8,34 9,34
1,07 2,41 3,66 4,88 6,06 7,23 8,38 9,25 10,66 11,78
1,64 3,22 4,64 5,99 7,29 8,56 9,08 11,03 12,24 13,44
2,71 4,60 6,25 7,78 9,24 10,64 12,02 13,36 14,68 15,99
3,84 5,99 7,82 9,49 11,07 12,59 14,07 15,51 16,92 18,31
6,64 9,21 11,34 13,28 15,09 16,81 18,48 20,09 21,67 23,21
DESVIO NO-SIGNIFICATIVO
DESVIO SIGNIFICATIVO
Tabela 5.3: Tabela de distribuio dos valores crticos de 2, de acordo com os graus de liberdade (gl) e o nvel de significncia (), ou seja, a probabilidade (P) de que os desvios sejam ou no significativos. Tabela modificada de Fisher, R.A. e Yates, F. Statistical tables for biological, agricultural and medical research. 6 ed. Harlow: Longman, 1974.
No primeiro cruzamento, o cruzamento das ervilhas que diferem quanto cor e forma das sementes, o 2 calculado menor do que o 2 crtico (0,22 < 7,82) e, portanto, a probabilidade de que os desvios em relao ao esperado pela H0 estejam ocorrendo ao acaso maior do que 5%. Assim, no podemos rejeitar a H0, o que nos leva a concluir que os resultados obtidos nesse cruzamento esto de acordo com os resultados esperados pela 2 Lei de Mendel. Quanto ao resultado do segundo cruzamento, envolvendo variedades de ervilha-de-cheiro que difere quanto cor da flor e ao tamanho do plen, o 2 calculado maior do que o 2 crtico (832,100 > 7,82). Neste caso, portanto, a probabilidade de que os desvios em relao ao esperado pela H0 estejam ocorrendo ao acaso menor do que 5%. Por esse motivo, devemos rejeitar a H0, considerando que o resultado observado nesse cruzamento no est de acordo com o esperado pela 2 Lei de Mendel. Uma hiptese alternativa (HA) deve, ento, ser sugerida; por exemplo, os genes envolvidos na determinao da cor da flor e do tamanho do plen nas ervilhas-de-cheiro podem estar localizados no mesmo cromossomo e, portanto, no segregam de maneira independente quando os gametas so formados. A partir da Aula 13 voc saber mais sobre genes ligados, e compreender melhor este desvio 2 Lei de Mendel.
!
Limitao do teste do qui-quadrado Esse teste no pode ser aplicado em experimentos nos quais a freqncia esperada de qualquer classe fenotpica seja menor que do 5.
C E D E R J 91
AULA
0,90
0,80
0,70
0,50
0,30
0,20
0,10
0,05
0,01
MDULO 1
A teoria cromossmica da herana e a descoberta dos cromossomos sexuais
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Compreender que a construo da teoria cromossmica da herana foi fruto do acmulo de evidncias fornecidas por diversos pesquisadores nas primeiras dcadas do sculo XX. Descrever como foi descoberto o cromossomo sexual. Descrever como se d a determinao do sexo em diversos sistemas. Descrever como foi descoberta a herana ligada ao sexo. Explicar a herana ligada ao sexo com base na teoria cromossmica da herana.
AULA
Gentica Bsica | A teoria cromossmica da herana e a descoberta dos cromossomos sexuais
INTRODUO
Aps a redescoberta do trabalho de Mendel em 1900, muitos cientistas se dedicaram a testar as leis da transmisso da herana em diversos organismos. Em parte, a beleza da anlise de Mendel estava no fato de no ser necessrio saber a natureza fsica dos fatores hereditrios (FH), ou como eles controlam o fentipo, para analisar os resultados dos cruzamentos ou fazer previses. Entretanto, algumas perguntas no deixavam de ser feitas: o que so os fatores hereditrios? Onde esto localizados? A Gentica deu um grande passo com a descoberta de que os fatores hereditrios, hoje conhecidos como genes, so parte de estruturas celulares especficas, os cromossomos. Conceito que ficou conhecido como a teoria cromossmica da herana (TCH).
W ILLIAM BATESON (1861-1926)

Bateson foi um dos primeiros a aceitar as leis mendelianas que foram redescobertas em 1900. Ele popularizou a gentica mendeliana na Inglaterra, descobriu a ligao gnica e introduziu o termo Gentica.
O batismo da Gentica e a origem de alguns de seus termos

WILLIAM BATESON foi quem props, em 1906, o termo Gentica para a nova cincia que estava nascendo e ainda no tinha um nome. Por volta de 1897, Bateson comeou a desenvolver experimentos de hibridao com aves domsticas e borboletas e ao ler os trabalhos de Mendel reconheceu a importncia das leis propostas. Em 1902, Bateson traduziu o trabalho de Mendel para o ingls e divulgou fortemente as leis mendelianas na transmisso da herana biolgica. Um outro fato interessante que, embora ao apresentarmos o trabalho de Mendel os termos zigoto, homozigoto e heterozigoto sejam usados, eles s foram propostos mais tarde, tambm por Bateson, que ainda criou o termo alelomorfos, hoje reduzido para alelos. Mas a criao dos termos gene, gentipo e fentipo creditada a outro importante cientista, WILHELM LUDVIG JOHANNSEN. A partir de estudos com feijes (Phaseolus vulgaris), Johannsen observou que indivduos com a mesma constituio gentica poderiam apresentar pesos diferentes devido influncia de fatores ambientais, introduzindo assim o termo gentipo para a constituio gentica do organismo e fentipo para a caracterstica apresentada pelo organismo que depende da interao de seu gentipo com o ambiente. O termo gene, tambm proposto por Johannsen, veio da abreviao do termo pangene, usado por De Vries para nomear as partculas discretas que ele acreditava serem responsveis pela determinao da herana biolgica.
WILHELM LUDVIG JOHANNSEN (1857-1927)

Geneticista dinamarqus que, junto com Bateson, foi um dos principais arquitetos da Gentica moderna. Introduziu os termos gene, gentipo e fentipo.
94 C E D E R J
aos termos: fatores, elementos ou alelomorfos usados anteriormente. Nesta mesma ocasio ele prope tambm os termos gentipo, fentipo:
Therefore I have proposed the words gene and genotype and some further terms, as phenotype and biotype to be used in the science of genetics. The gene is nothing but a very applicable little word, easily combined with others, and hence it may be useful as an expression for the unit factors, elements or allelomorphs in the gametes, demonstrated by modern Mendelian researches. A genotype is the sum total of all the genes in a gamete or zygote( . . .) As to the nature of the genes, it is as yet of no value to propose any hypothesis; but that the notion of the gene covers a reality is evident in Mendelism. The Mendelian workers have the great merit of being prudent in their speculations. In full accordance with this restraint - a quite natural reaction against the morphologicophantastical speculations of the Weismann school it may be emphatically recommended to use the adjectival term genotypical instead of the noun genotype. Johannsen, 1911
C E D E R J 95
AULA
Johannsen onde ele sugere a criao do termo gene em substituio
Abaixo est um fragmento extrado do texto original de
MDULO 1
Atribumos a WALTER STANBOROUGH SUTTON e a THEODOR BOVERI, por seus trabalhos publicados no incio do sculo XX, as primeiras idias que relacionaram os fatores hereditrios aos cromossomos. Sutton, atravs de estudos com gafanhotos, demonstrou que havia um paralelismo entre o comportamento das unidades hereditrias postuladas por Mendel e o comportamento dos cromossomos na meiose e na fertilizao. Boveri conseguiu alterar o nmero de cromossomos em ourios-do-mar e demonstrou que os cromossomos de uma
WALTER S TANBOROUGH S UTTON (1877-1916)

Estudante graduado americano quando props a teoria cromossmica da herana.
espcie diferem uns dos outros e que o conjunto completo de cromossomos necessrio para o desenvolvimento normal do organismo. A origem da TCH baseia-se em relaes indiretas, pois Sutton e Boveri nunca viram um FH no cromossomo, mas, em cincia, com freqncia, descobertas de relaes causais se baseiam no comportamento paralelo de fenmenos. Atualmente, embora a idia de que genes esto nos cromossomos parea bvia para ns, na poca, esta idia no estava clara, nem era aceita pela maioria da comunidade cientfica. Willian Bateson, um dos mais proeminentes geneticistas, no se convenceu das sugestes propostas por Sutton. E mesmo o prof. EDMUND BEECHER WILSON, um dos mais importantes citologistas, teve dificuldade de entender o que estava sendo proposto. E Sutton trabalhava no laboratrio de Wilson na Columbia University! Foi necessrio que diversas evidncias cientficas fossem acumuladas para que a idia proposta por Sutton e Boveri fosse aceita acima de qualquer suspeita
THEODOR BOVERI (1862-1915)

Bilogo alemo.
e a fuso entre a gentica e a citologia se tornasse uma parte essencial da anlise gentica.
A DESCOBERTA DOS CROMOSSOMOS SEXUAIS

No final do sculo XIX e incio do sculo XX, comearam a surgir as primeiras evidncias do envolvimento de cromossomos na determinao dos sexos. Estas evidncias foram mais um ponto a fortalecer a idia de que os cromossomos so a base da hereditariedade. Em 1891, H. Henking publicou suas observaes sobre a existncia e o comportamento de um cromossomo acessrio durante a espermatognese de Pyrrhocoris sp., uma espcie de percevejo. Henking EDMUND BEECHER WILSON (1856-1939)
Um dos mais importantes citologistas do incio do sculo XX.
observou que cada clula diplide nos machos da espcie estudada possua um total de 23 cromossomos, sendo 11 pares de cromossomos homlogos, alm de um cromossomo adicional, ao qual chamou elemento X. Entretanto, o comportamento desse cromossomo X durante a meiose parecia incomum. No incio da meiose, todos os cromossomos estavam duplicados, inclusive o cromossomo X. At agora, tudo bem.
96 C E D E R J
Mas, como no possua um cromossomo homlogo, o X no podia se emparelhar e, portanto, apenas uma das duas clulas-filhas recebia esse cromossomo no final da primeira diviso meitica.
Figura 6.1: Esquema da meiose em macho de Pyrrhocoris sp. apresentado por Henking em 1891. a) Espermatcito em telfase da primeira diviso meitica. Note o comportamento diferenciado do cromossomo X que est se dirigindo para o plo da direita em atraso em relao aos outros cromossomos. b) e c) Clulas-filhas resultantes; o cromossomo X est presente em apenas uma delas.
J na segunda diviso meitica, quando as cromtides de cada cromossomo duplicado se separavam e migravam para plos opostos, eram formadas quatro clulas-filhas das quais duas possuam 11 cromossomos, enquanto as outras duas possuam 11 cromossomos mais o X. Assim, esse cromossomo X era encontrado em apenas metade dos espermatozides desta espcie de percevejo. No entanto, Henking se limitou a descrever o que tinha observado, sem criar hipteses para explicar o que estava acontecendo.
C E D E R J 97
AULA
MDULO 1
!
Fique alerta! Se voc ainda no est to familiarizado com as fases da meiose a ponto de visualizar mentalmente o que foi descrito, procure fazer um esquema que reflita o que Henking observou. Faa o mesmo sempre que o texto parecer confuso. Voc pode conferir o seu esquema com os esquemas apresentados nas nossas aulas ou com uma visita ao tutor no seu plo.
Outro pesquisador de grande importncia para a citologia na virada do sculo XX foi Montgomery. Ele investigou detalhadamente a espermatognese e a ovognese de vrios insetos hempteros e interpretou seus resultados sugerindo que os cromossomos eram estruturas celulares permanentes; que existiam em pares de homlogos, sendo que um dos membros do par era herdado do pai e o outro da me e que a sinapse consistia no emparelhamento dos homlogos. Como Henking, ele tambm descreveu os cromossomos acessrios, mas no os relacionou com a determinao do sexo. Foi ento que um citologista americano, C. E. McClung (1901), formulou uma hiptese na qual o cromossomo X estaria associado de alguma forma com a determinao do sexo:
Assumindo que h uma diferena qualitativa entre os vrios cromossomos do ncleo, segue-se necessariamente que so formados dois tipos diferentes de espermatozide que, por fertilizao do vulo, produziriam dois tipos diferentes de indivduos. Uma vez que o nmero de cada um destes tipos de espermatozides o mesmo, deveria haver um nmero aproximadamente igual destes tipos de indivduos na descendncia. Ns sabemos que a nica qualidade que separa os membros de uma espcie em dois grupos o sexo.
Esta hiptese no parece ser bastante lgica? Foi o que muitos cientistas da poca tambm pensaram, e comearam ento a test-la atravs de estudos com diversas espcies de plantas e animais.
O TRABALHO DE SUTTON EM BRACHYSTOLA

Em 1902, Sutton publicou um artigo em que descreveu seus estudos sobre os cromossomos das clulas do testculo de gafanhotos do gnero Brachystola. Baseado nas observaes feitas nesse trabalho e nos trabalhos de Henking, Montgomery e McClung, Sutton, em 1903, publicou The Chromosomes in Heredity, em que mostra que existe uma impressionante semelhana entre o comportamento dos cromossomos e
98 C E D E R J
o comportamento dos fatores hereditrios postulados por Mendel. Os resultados de Mendel poderiam ser explicados supondo-se que os fatores fossem parte dos cromossomos (Figura 6.2). As observaes bsicas do estudo foram: 1. Os cromossomos de uma clula diplide podem ser agrupados em dois conjuntos morfologicamente semelhantes. Isto , cada cromossomo est representado duas vezes (cromossomos homlogos). J havia fortes razes na poca para acreditar que, durante a fertilizao, um conjunto era derivado do pai e o outro da me. 2. Os cromossomos homlogos se emparelham numa fase da meiose. 3. A meiose resulta em gametas que portam apenas um cromossomo de cada par de homlogos. 4. Os cromossomos mantm a sua individualidade atravs dos processos de diviso celular, apesar das grandes mudanas de aspecto que sofrem. 5. Na meiose, a distribuio dos cromossomos de um par de homlogos para as clulas-filhas independente da distribuio dos outros cromossomos dos outros pares. Se uma clula recebe um cromossomo de origem paterna de um par de homlogos, poder receber tanto o cromossomo paterno quanto o materno de um outro par, sendo isto uma questo de probabilidade (Figura 6.3).
C E D E R J 99
AULA
MDULO 1
Cromossomo herdado maternalmente
METFASE I
Os cromossomos homlogos duplicados e emparelhados se alinham na placa metafsica da clula heterozigtica para o gene A.
A A a a
Cromossomo herdado paternalmente
ANFASE I
1 Lei de Mendel: segregao dos homlogos (e seus alelos), embora cada cromossomo permanea duplicado.
a
a
TELFASE I
So formadas duas clulas com apenas um homlogo duplicado. A seguir (Meiose II) as cromtides-irms de cada cromossomo se segregam, formando os gametas.
A A
a a
TELFASE II
Cada clula heterozigtica para um gene produz 2 tipos de gametas. Deste modo, quando consideramos todas as clulas meiticas do indivduo, 2 tipos de gametas so formados na proporo de 1A : 1a
1/2 A
1/2 a
Figura 6.2: Segregao dos fatores hereditrios postulados por Mendel em sua primeira lei, admitindo que eles esto nos cromossomos.
100 C E D E R J
Cromossomos de origem materna
1/2 Ab
1/2 aB
Cromossomos de origem paterna
OU
2 METFASE I
Cromossomos de origem materna
ANFASE I
TELFASE I
TELFASE II
1/2 AB
1/2 ab
Cromossomos de origem paterna
METFASE I
2 Lei de Mendel: associao independente entre pares de cromossomos (j duplicados e emparelhados) - veja os possveis alinhamentos metafsicos (1 ou 2) para clulas duplo-heterozigticos.
ANFASE I
1 Lei de Mendel: segregao dos homlogos (e seus alelos) de cada par, embora cada cromossomo permanea duplicado.
TELFASE I
So produzidas duas clulas com apenas um cromossomo (embora dupicado) de cada par.
TELFASE II
As cromtides-irms de cada cromossomo se separam, formando os gametas.
Figura 6.3: Comparao entre a Lei da Segregao e a Lei da Associao Independente com o comportamento dos cromossomos na meiose. Cada clula duplo-heterozigtica (AaBb) pode apresentar alinhamento metafsico do tipo 1 ou 2, produzindo apenas dois tipos de gametas (Figura 6.3). Quando consideramos o conjunto de clulas gamticas de um indivduo, espera-se que 12 apresente o alinhamento do tipo 1 e 12 apresente o alinhamento do tipo 2. Assim, no conjunto de gametas desse indivduo, so esperados os quatro tipos de gentipos na proporo de 1AB : 1Ab : 1aB : 1ab.
C E D E R J 101
AULA
METFASE I
ANFASE I
TELFASE I
TELFASE II
MDULO 1
As dedues de Sutton foram alm. Ele previu que se a hiptese proposta fosse correta, resultados diferentes dos observados por Mendel deveriam ser esperados, pois deveria haver mais de um FH em cada cromossomo; do contrrio o nmero de caractersticas herdveis de uma espcie seria igual ao nmero de seus cromossomos. Sutton comenta: Ns devemos, assim, assumir que pelo menos alguns cromossomos esto relacionados a um certo nmero de diferentes alelomorfos. Se for este o caso, e tendo em vista que os cromossomos mantm sua individualidade, os alelomorfos presentes em um mesmo cromossomo devem ser herdados juntos. Se os genes de um cromossomo fossem herdados juntos, nohaveria a possibilidade de segregao independente e no observaramos, nesse caso, as propores fenotpicas observadas por Mendel. Embora os cromossomos fossem fortes candidatos, as anlises realizadas por Sutton no podiam ser consideradas como uma prova absoluta de que os FH estariam nessas estruturas. Os FH poderiam ser parte de alguma outra estrutura celular que tivesse o comportamento semelhante ao dos cromossomos durante a meiose e a fertilizao. A anlise de Sutton foi apenas um primeiro passo. Veremos que vrios cientistas continuaram as pesquisas nesse campo, sedimentando a teoria cromossmica da herana e estabelecendo os fundamentos da Gentica.
SISTEMAS DE DETERMINAO DO SEXO

Wilson, professor de Sutton, foi um dos que se tornou forte defensor da hiptese de Sutton. A princpio, Wilson trabalhava no campo da Biologia do Desenvolvimento, mas, aps as publicaes de Sutton, sua pesquisa voltou-se para o estudo citolgico dos cromossomos e resultou numa srie de artigos intitulada Studies on Chromosomes. Foi Wilson o principal responsvel pela soluo do problema dos cromossomos acessrios, em 1905. Observando clulas germinativas de machos e fmeas de Hemiptera, ele demonstrou que as diferenas cromossmicas entre os sexos podiam ser de dois tipos e se convenceu de que existia algum tipo de relao definitiva entre cromossomos e a determinao do sexo. Atualmente, esses dois tipos de diferenas cromossmicas entre os sexos observadas por Wilson so conhecidos como os sistemas XX/XY e XX/X0 de determinao do sexo (Quadro 6.1).
102 C E D E R J
Quadro 6.1: Sistemas XX/XY e XX/X0 de determinao do sexo.
Sistema XX/XY Todos os mamferos, incluindo os humanos, tm o sexo dos indivduos determinado pela combinao de dois cromossomos sexuais: o X e um cromossomo no-homlogo ao X, chamado Y. Nestes organismos, as fmeas possuem um par de cromossomos homlogos (XX) e produzem, portanto, apenas um tipo de gameta com relao ao cromossomo sexual, sendo chamadas homogamticas (do grego homos, igual). Por sua vez, os machos possuem um X como o das fmeas e um cromossomo Y, exclusivo dos machos e geralmente menor. Esses machos (XY) so chamados heterogamticos (do grego heteros, diferente) por produzirem dois tipos distintos de gametas, metade deles contendo um cromossomo X e a outra metade contendo um cromossomo Y.
Conjunto cromossmico diplide
Gametas
Prole
autossomos cromossomos sexuais
Sistema XX/X0 Alguns outros organismos, como os gafanhotos, possuem um sistema de determinao do sexo parecido com o sistema XX/XY, exceto pela ausncia do cromossomo Y nos machos. As fmeas so XX enquanto os machos so X0. Nesse caso, o zero representa a falta de um cromossomo sexual. No entanto, os machos continuam sendo o sexo heterogamtico, j que metade de seus espermatozides carrega um cromossomo X, enquanto a outra metade no carrega cromossomo sexual. Neste caso, assim como no caso do sistema XX/XY, so os machos que determinam o sexo dos indivduos da prole.
Conjunto cromossmico diplide Gametas
Prole
autossomos cromossomo sexual
!
Como os cromossomos sexuais X e Y se emparelham durante a meiose? Na espcie humana, apenas as extremidades do cromossomo Y possuem homologia com as extremidades do cromossomo X (regies de pareamento), o que permite o emparelhamento dos cromossomos X e Y durante a meiose masculina. Dessa forma, a meiose segue seu curso normal e as clulas-filhas recebem apenas um dos cromossomos sexuais.
C E D E R J 103
AULA
MDULO 1
A DESCOBERTA DA HERANA LIGADA AO SEXO

Em 1906, Doncaster e Raynor observaram um tipo de herana ligada ao sexo a partir de um estudo envolvendo cruzamentos de duas variedades de mariposas do gnero Abraxas, as variedades grossulariata e lacticolor. As mariposas grossulariata eram caracterizadas por possurem asas escuras devido presena de grandes manchas, enquanto as lacticolor apresentavam asas mais claras, uma vez que as manchas eram menores. Quando machos grossulariata foram cruzados com fmeas lacticolor (Figura 6.4.a), s foram observados indivduos grossulariata na prole (F1). Dessa forma, Doncaster e Raynor concluram que o fator condicionante do estado de carter grossulariata era dominante (G) em relao ao fator que condiciona o estado de carter lacticolor (g). Voc se lembra dos experimentos de Mendel? Entretanto, quando os indivduos F1 foram intercruzados, eles produziram a proporo esperada de 3 grossulariata para 1 lacticolor na F2, mas todos os indivduos lacticolor eram fmeas o que no era esperado. Para tentar entender por que s as fmeas eram lacticolor, Doncaster e Raynor realizaram cruzamentos recprocos, nos quais machos lacticolor foram cruzados com fmeas grossulariata selvagens (Figura 6.4b) provenientes de regies onde no existia a variedade lacticolor, e que, portanto, deveriam ser puras. Eles observaram que na F1 todas as fmeas eram lacticolor, enquanto todos os machos eram grossulariata, e no o esperado de 100% dos indivduos grossulariata. A partir destas observaes, Doncaster e Raynor formularam uma hiptese, um pouco complicada, que fornecia uma explicao possvel para o problema. Entretanto, essa hiptese foi rejeitada quando comearam a surgir os primeiros trabalhos com Drosophila. De qualquer maneira, Doncaster e Raynor fizeram duas observaes importantes: a existncia de caracteres que possuem herana ligada ao sexo; e, que no sistema de determinao do sexo nessa espcie de mariposas, as fmeas deveriam ser heterozigticas enquanto que os machos seriam homozigticos. Hoje sabemos que a determinao do sexo em algumas espcies de mariposas segue o sistema ZZ/ZW (Quadro 6.2) e que o gene que condiciona as manchas da asa est no cromossomo Z.
104 C E D E R J
Figura 6.4: Padro de transmisso da caracterstica mancha escura nas asas em cruzamentos recprocos entre mariposas do gnero Abraxas. a) cruzamento entre machos grossulariata e fmeas lacticolor. b) cruzamento entre machos lacticolor e fmeas grossulariata.
Procure determinar o gentipo dos indivduos apresentados na Figura 6.4, sabendo que a fmea desta mariposa o sexo heterogamtico e que o gene para manchas na asa, est no cromossomo Z. Para isso, substitua o "-" sobre a letra Z, nos esquemas direita, pelos fatores (alelos) G ou g correspondentes. Veja a resposta no final dessa aula.
C E D E R J 105
AULA
MDULO 1

Quadro 6.2: Sistemas de determinao do sexo ZZ/ZW e ZZ/Z0.
Sistema ZW/ZZ Em muitas espcies de aves e em lepidptera (mariposas e borboletas), so os machos que possuem um par de cromossomos sexuais homlogos (ZZ), enquanto as fmeas possuem um par no-homlogo (ZW), sendo que um dos cromossomos equivalente ao dos machos. Note que estes cromossomos sexuais recebem nomes diferentes (Z e W) para que no haja confuso com o sistema XX/XY. No sistema ZZ/ZW, so as fmeas que determinam o sexo dos indivduos da prole e no os machos, j que elas que so heterogamticas.
Gametas
Prole
Sistema Z0/ZZ Existe tambm um sistema semelhante ao sistema ZW/ZZ. Mas, neste caso, as fmeas (Z0) possuem apenas um cromossomo sexual e constituem o sexo heterogamtico, sendo a ausncia do cromossomo W indicada pelo zero. Este sistema de determinao do sexo est presente em algumas espcies de mariposas e alguns outros insetos.
Gametas
Prole
106 C E D E R J
HERANA LIGADA AO X
Abaixo do laboratrio de Wilson, estava o laboratrio de THOMAS MORGAN e um notvel grupo de alunos que, atravs de seus estudos com Drosophila melanogaster, desenvolveram os fundamentos da Gentica. O laboratrio de Morgan tornou-se o centro mundial da Gentica. Pesquisadores de todas as partes do mundo vinham sala das moscas, apelido dado ao laboratrio, para visitar ou fazer pesquisas. Ao longo desta e das prximas aulas vamos conhecer alguns dos experimentos desenvolvidos com drosfilas pelo grupo de Morgan, incluindo aqueles que se tornaram provas definitivas de que os fatores da hereditariedade esto nos cromossomos. THOMAS MORGAN (1866-1945)
Por seu intenso trabalho com Drosophila, o laboratrio de Morgan na Columbia University ficou conhecido como a sala das moscas. Em 1915, Morgan, Bridges e Sturtevant publicaram The Mechanism of Mendelian Heredity, uma obra que estabeleceu definitivamente a Drosophila como um importante modelo experimental em Gentica. Morgan ganhou o Prmio Nobel de Fisiologia e Medicina em 1933.
Figura 6.5: Drosophila melanogaster (mosca-das-frutas, mosca-da-banana ou moscado-vinagre). A espcie Drosophila melanogaster um dos mais populares organismos experimentais utilizados em Gentica. Os estudos utilizando drosfila em Gentica comearam com Thomas Morgan no incio dos anos 1900.
C E D E R J 107
AULA
MDULO 1
Em 1910, enquanto lavava os vidros usados em experimentos, um dos alunos de Morgan, Calvin Bridges, encontrou uma mosca de olhos brancos (um fentipo mutante) ao invs dos olhos vermelhos normais da sua espcie (fentipo selvagem). Esse macho de olhos brancos foi cruzado com fmeas selvagens para que o padro de herana dessa mutao, atualmente chamada white, fosse estabelecido. Morgan observou que apenas indivduos de olhos vermelhos apareceram na prole, o que demonstrava que essa mutao poderia ser determinada por um fator recessivo (w). Quando a F1 foi intercruzada, uma proporo fenotpica de 3 moscas de olhos vermelhos para 1 mosca de olhos brancos foi encontrada na F2. Embora, a princpio, essa proporo parea estar de acordo com os resultados obtidos por Mendel, havia um problema: todos os indivduos de olhos brancos da F2 eram machos. Morgan se deparou com um problema semelhante ao de Doncaster e Raynor, no qual a herana de um carter estaria associada ao sexo. Para investigar mais a fundo, Morgan realizou um cruzamento recproco ao original, no qual fmeas white foram cruzadas com machos selvagens. Na prole desse cruzamento, todos os machos F1 tinham olhos brancos e todas as fmeas tinham olhos vermelhos, o que no estava de acordo com o esperado, de 100% de indivduos com olhos vermelhos. Na F2 foram encontrados machos e fmeas white e machos e fmeas selvagens na proporo de 1:1:1:1. Como Morgan notou que o padro de herana da mutao white era o mesmo padro de herana do cromossomo X, ele concluiu que o fator determinante da cor do olho branca deveria estar localizado no cromossomo X, ou seja, ligado ao X (Xw). O macho que possua apenas um cromossomo X possuiria apenas uma cpia do fator determinante da cor do olho. Isso explicaria os resultados observados. Segundo a hiptese de Morgan, no cruzamento de fmeas white (XwXw) com machos selvagens (XWY), todos os filhos deveriam ter olhos brancos (XwY), enquanto todas as filhas teriam olhos vermelhos (XWXw). Haveria, portanto, na F2, uma proporo de 1:1:1:1 de machos white (XwY), fmeas white (XwXw), machos selvagens (XWY) e fmeas selvagens (XWXw). Esta hiptese, com outros caracteres e em outros organismos, foi exaustivamente testada por Morgan e outros pesquisadores, e no pde ser rejeitada.
108 C E D E R J
PRIMEIRO CRUZAMENTO a b
SEGUNDO CRUZAMENTO
Vermelho
Branco
Branco
Vermelho
w+
w+ X
w X
w+
XX
XY
XX
XY
F1
Gametas
1/2
1/2
w
Gametas
F1
Y
Gametas
1/2
w+
1/2
Gametas
X
100% 1/2 1/2
X
100% 1/2
Y w+
1/2
w+
w+
w+
XX
Vermelho
XY
Vermelho
XX
Vermelho
XY
Branco
F2
Gametas
1/2
w+
1/2
F2
Gametas
1/2
1/2
Gametas
Gametas
X
1/2 1/4
Y w+
1/4
X
1/2
Y
1/4
w+
w+
w+
w+
1/4
w+
w+
X
1/2 1/4
XX
Vermelho 1/4
XY
Vermelho 1/2
X
1/4
XX
Vermelho 1/4
XY
Vermelho
w+
XX
Vermelho
XY
Branco
XX
Branco
XY
Branco
Figura 6.6: Hiptese para explicar o padro de herana da mutao white nos cruzamentos entre a) fmea de olhos vermelhos x macho de olhos brancos; b) cruzamento recproco (fmea de olhos brancos x macho de olhos vermelhos).
HERANA LIGADA AO Y
Genes localizados no cromossomo Y so transmitidos de pai para filho, uma vez que s os machos recebem este cromossomo, e so chamados de genes holndricos (do grego holos, completamente; andros, masculino).
C E D E R J 109
AULA
MDULO 1
Um bom exemplo de herana ligada ao Y ocorre no peixe Poecilia reticulata, no qual machos com uma colorao ornamental mais atrativa para as fmeas transmitem este fentipo para todos os filhos. As fmeas desta espcie nunca carregam ou expressam o gene. Em humanos, at recentemente, o nico gene conclusivamente localizado e mapeado no cromossomo Y o gene SRY (do ingls sex-determining region Y gene). Este gene tem um papel primrio na determinao do sexo do embrio, por ser responsvel pela diferenciao dos testculos no comeo do desenvolvimento embrionrio.
!
Projetos genoma e a descoberta de genes no cromossomo Y Os projetos genoma oferecem uma grande oportunidade para a busca de genes localizados em regies heterocromticas dos cromossomos, como grande parte do cromossomo Y de diversos organismos. Regies heterocromticas so caracterizadas pela presena de longas seqncias de DNA repetitivo e de DNA no-codificante, dificultando a localizao de genes por razes tcnicas. Devido sua natureza repetitiva, o seqenciamento e a montagem das seqncias destas regies na ordem correta no to simples. Apesar das dificuldades, foram desenvolvidos mtodos computacionais eficientes que comparam seqncias do DNA com seqncias de protenas, e at de RNA-mensageiro, com o objetivo de otimizar a busca de genes no cromossomo Y. Junto com uma comprovao experimental, esses mtodos podem ento revelar a existncia de genes nesse cromossomo.
Antes mesmo da publicao da seqncia completa do cromossomo Y humano, mais de 20 genes ou famlias gnicas com diversas funes foram identificados neste cromossomo, sendo expressos em tecidos diferentes, como no crebro e nos testculos. No entanto, muitos destes genes esto envolvidos com funes macho-especficas, como a espermatognese e a determinao do sexo masculino, podendo apresentar mais de uma cpia ao longo do cromossomo Y. O cromossomo Y de Drosophila parece ser mais especializado por possuir genes relacionados a funes exclusivamente masculinas, j que os machos X0 so normais exceto pela esterilidade. Aps o seqenciamento do genoma de Drosophila, foram identificados pelo menos 15 genes no cromossomo Y, estando a maioria deles relacionada a fatores de fertilidade ou caractersticas masculinas, como o batimento da cauda dos espermatozides.
OUTROS SISTEMAS DE DETERMINAO DO SEXO

Existem ainda sistemas de determinao sexual que no dependem apenas dos cromossomos sexuais. Exemplos deste tipo de sistema so o sistema haplide-diplide e o sistema que depende do balano entre o nmero de cromossomos X e dos autossomos (Quadro 6.3).
110 C E D E R J
Quadro 6.3: Alguns sistemas de determinao do sexo que no dependem apenas dos cromossomos sexuais.
Sistema haplide-diplide O sistema de determinao do sexo em alguns organismos, como nas abelhas, um tanto peculiar, porque envolve o conjunto completo de cromossomos. Os machos so produzidos por partenognese, a partir de ovos no-fecundados. Quando as condies so favorveis, esses ovos se desenvolvem, dando origem aos zanges, que so, portanto, haplides (n) e seu conjunto cromossmico inteiramente materno. Os zanges ento fecundam os ovos, dando origem a fmeas diplides (2n). Estas fmeas podem se tornar rainhas frteis ou operrias infrteis, dependendo do tipo de alimentao que iro receber durante a fase de larva. Para que se tornem rainhas, as larvas devem ser alimentadas com a gelia real.
Conjunto cromossmico haplide ou diplide
n
meiose modificada Gametas
2n
meiose normal
fecundao normal
partenognese
Prole
2n
Autossomos
Proporo X:A X:AAA
Razo X/A 1/3 = 0,33 1/2 = 0,5 2/3 = 0,67 1 1 3/2 = 1,5
Sexo Metamacho Macho normal Intersexo Fmea normal Fmea triplide Metafmea
Razo X/A No caso das drosfilas, a determinao do sexo depende da razo X/A, em que X representa o nmero de cromossomos X e A representa o nmero de conjuntos haplides de autossomos. As fmeas normais possuem dois X e dois conjuntos haplides de autossomos, sendo a razo X/A igual a 1. Machos normais possuem apenas um cromossomo X para dois conjuntos haplides autossmicos, numa razo de 0,5. Indivduos que possuem uma razo maior que 1 so chamados metafmeas, enquanto indivduos com razo menor do que 0,5 so chamados metamachos. J indivduos com razo entre 0,5 e 1 apresentam um fentipo intermedirio chamado intersexo.
X:AA XX:AAA XX:AA XXX:AAA XXX:AA
Obs.: Em Drosophila, o cromossomo Y determina a fertilidade e no o sexo dos indivduos, j que este cromossomo no possui genes de determinao sexual. Como o Y no essencial para que um indivduo se torne macho, um indivduo XXY ser uma fmea, enquanto um indivduo X0 ser um macho estril.
C E D E R J 111
AULA
MDULO 1
Fmea
Macho
Sistemas mltiplos Sistemas mltiplos de determinao sexual so caracterizados pela presena de mais de um par de cromossomos sexuais em pelo menos um dos sexos. Nesses sistemas, o sexo que possui um nmero mpar de cromossomos sexuais o sexo heterogamtico. Assim, os machos X1X2Y, X1X20 e XY1Y2, e as fmeas ZW1W2 e Z1Z2W produzem mais de um tipo de gameta.
Em alguns vertebrados, particularmente nos mamferos.
X1X1X2X2
X1X2Y
Maioria das espcies de aranha. Morcegos da famlia Phyllostomatidae e alguns outros vertebrados. Algumas espcies de serpentes podem apresentar um desses tipos de sistema.
X1X1X2X2
X1X20
XX
XY1Y2
ZW1W2 Z1Z2W
ZZ Z1Z1Z2Z2
AS PLANTAS TAMBM TM SEXO

As plantas vasculares possuem diversos arranjos sexuais. Quando os rgos sexuais masculinos e femininos esto presentes numa mesma flor, chamamos a espcie hermafrodita. Mas quando esses rgos aparecem em flores separadas numa mesma planta, a espcie chamada monica (significa uma casa). So as espcies diicas (duas casas), entretanto, que possuem dimorfismo sexual. Nestas espcies existem plantas fmeas, que produzem flores contendo apenas ovrios, e plantas machos com flores que contm apenas anteras. Algumas das plantas diicas possuem um par de cromossomos heteromrficos associados e provavelmente envolvidos com a determinao do sexo da planta. Uma grande proporo dessas plantas possui um sistema XX/XY. Mesmo as plantas diicas que no possuem cromossomos heteromrficos visveis podem possuir cromossomos sexuais.
112 C E D E R J
!
Como representar os alelos de um gene Durante o Ensino Mdio, em geral, usamos apenas uma letra para designar o alelo de um gene. Contudo, existem muitas possveis representaes para esses alelos. A escolha de um ou outro tipo de representao est, em geral, relacionada com a possibilidade de introduzirmos informaes sobre os alelos a partir de sua representao. Por exemplo, temos usado letras maisculas para alelos autossmicos dominantes e minsculas para os alelos autossmicos recessivos. Em termos atuais, o gene para a cor da semente de ervilha possui dois alelos: o alelo dominante V que condiciona a cor amarela e o alelo recessivo v que condiciona a cor verde. J ao representarmos genes localizados nos cromossomos sexuais, podemos utilizar uma notao diferente que inclua esta informao. Para os genes localizados no cromossomo sexual, usaremos a letra que representa o cromossomo com a letra que representa o alelo do gene em questo sobrescrita. Por exemplo, o gene cujo alelo mutante causa a hemofilia na espcie humana est localizado no cromossomo X. Vamos representar o alelo normal do gene por XH e o alelo mutante Xh. Os cruzamentos com drosfila utilizam muito o conceito de alelos selvagens e mutantes. Os alelos selvagens so aqueles que ocorrem com alta freqncia (maior do que 99%) na populao natural. Os alelos selvagens so representados, em geral, pelo smbolo (+) ou pela letra inicial do alelo mutante com o + sobrescrito. Por exemplo, h um gene autossmico em D. melanogaster que quando o alelo mutante se apresenta em homozigose resulta no fentipo asas vestigiais. O alelo mutante pode ser representado por vg e o alelo selvagem (normal) por vg+, ou simplesmente, +. Seguindo o mesmo padro para genes no cromossomo sexual, no exemplo da mutao white podemos ter outras representaes alm da mostrada acima para o alelo selvagem: Xw+ ou X+. Outras notaes sero apresentadas ao longo do curso.
Vamos conferir as respostas do exerccio da Figura 6.4?

Na nossa prxima aula, faremos uma releitura dos trabalhos de Mendel. Veremos como o desenvolvimento da Citogentica e da Biologia Molecular permitiu o entendimento da natureza fsica dos fatores propostos por Mendel, que hoje conhecemos como genes, e dos mecanismos de sua transmisso.
C E D E R J 113
AULA
MDULO 1
RESUMO
A Gentica deu um grande passo com a descoberta de que os fatores hereditrios, hoje conhecidos como genes, so parte de estruturas celulares especficas, os cromossomos. Conceito que ficou conhecido como a teoria cromossmica da herana. No final do sculo XIX e incio do sculo XX, comearam a surgir as primeiras evidncias do envolvimento de cromossomos na determinao dos sexos. Essas evidncias foram mais um ponto a fortalecer a idia de que os cromossomos so a base da hereditariedade. A relao entre as Leis de Mendel e o modo como os gametas so formados durante a meiose pde, ento, ser estabelecida. Existem vrios sistemas de determinao do sexo: sistemas onde h apenas um par de cromossomos sexuais e o macho o sexo heterogamtico, XX/XY, XX/X0; sistemas onde h apenas um par de cromossomos sexuais e as fmeas so o sexo heterogamtico, ZZ/ZW, ZZ/Z0; sistemas onde h mais de um par de cromossomos sexuais (sistemas mltiplos), como, por exemplo, X1X1X2X2/X1X2Y. Muitas das caractersticas de uma espcie podem ser condicionadas por genes localizados nos cromossomos sexuais. A melhor maneira de descobrir se um fentipo est ligado ao sexo, ou seja, se o gene que condiciona esse fentipo se localiza em um dos cromossomos sexuais, atravs de cruzamentos recprocos com indivduos de fentipo selvagem. Se o alelo que determina o fentipo mutante est ligado ao sexo, as propores fenotpicas na prole desses cruzamentos sero distribudas de maneira desigual entre os sexos.
114 C E D E R J
EXERCCIOS
Preencha os espaos em branco nas frases numeradas de 1 a 8 usando o termo mais apropriado dentre os arrolados abaixo: (a) autossomo (c) herana ligada ao sexo (e) recessividade (g) dominncia 1. ( (b) cromossomos sexuais (d) herana limitada ao sexo (f) herana holndrica (h) codominncia
) o fenmeno pelo qual um alelo impede a manifestao de outro alelo
de um mesmo gene. 2. ( ) qualquer cromossomo que no os sexuais.
3. Os cromossomos relacionados com a determinao do sexo de um indivduo so denominados ( ).
4. A expresso de uma caracterstica (por exemplo, produo de ovos ou de leite) restrita a apenas um dos sexos denominada ( ).
5. Os genes localizados no cromossomo Y seguem um padro de herana denominado ( 6. ( ).
) o fenmeno pelo qual um alelo no se manifesta fenotipicamente,
porm mantm a sua individualidade. 7. Os genes localizados no cromossomo X seguem um padro de herana denominado ( 8. ( ).
) a situao em que ambos os alelos de um indivduo heterozigtico se
manifestam igualmente no fentipo. Utilize as alternativas abaixo para responder s questes 9 e 10: (a) herana ligada ao sexo recessiva. (b) herana autossmica recessiva. (c) herana ligada ao sexo dominante. (d) herana autossmica dominante.
C E D E R J 115
AULA
MDULO 1
9. Nos cruzamentos entre drosfilas fmeas de asas curtas com machos de asas longas, todos os descendentes machos apresentaram asas curtas e todas as fmeas, asas longas. Um cruzamento recproco (fmea de asas longas com machos de asas curtas) produziu apenas descendentes de asas longas, tanto machos como fmeas. Esses resultados sugerem a hiptese de que o estado de carter asa curta siga um padro de ( ).
10. Carneiros pretos cruzados com ovelhas brancas produziram apenas descendentes brancos, de ambos os sexos. Alguns cruzamentos recprocos produziram apenas machos e fmeas brancos, enquanto outros produziram metade da descendncia branca e metade preta, de ambos os sexos. Esses resultados permitem levantar a hiptese de que o estado de carter cor preta da l em carneiros segue um padro de ( ).
11. Um homem afetado por certa doena casa-se com uma mulher no afetada. Eles tm oito filhos (quatro meninas e quatro meninos); todas as meninas tm a doena do pai, mas nenhum dos meninos a tem. Trata-se provavelmente de um caso de herana __________________________. 12. Em camundongos, um alelo dominante B, ligado ao sexo, responsvel pelo fentipo cauda curta e retorcida, enquanto seu alelo recessivo b responsvel pelo fentipo cauda longa e reta. Se uma fmea de cauda longa cruzada com um macho de cauda curta, que proporo fenotpica deve ser esperada na gerao F1? 13. O alelo m (miniature) que determina asas curtas em Drosophila melanogaster recessivo e ligado ao sexo. Seu alelo dominante + determina a formao de asas longas. Que propores fenotpicas podemos prever nos seguintes cruzamentos: a) macho de asas curtas X fmeas de asas curtas. b) fmea de asas curtas X machos de asas longas. c) fmea de asas longas (homozigtica) X macho de asas curtas. 14. Em galinceos, o alelo dominante B, que ligado ao sexo, produz penas com padro barrado. O seu alelo recessivo b, em homozigose, produz penas no-barradas. O alelo autossmico dominante R produz crista com forma rosa e seu alelo recessivo r produz crista com forma simples, quando em homozigose. Uma fmea de penas barradas, homozigtica para crista com forma rosa cruzada com um macho de penas no-barradas e crista com forma simples. Qual a proporo fenotpica esperada na gerao F1? Procure saber qual o sistema de determinao dos sexos em aves.
116 C E D E R J
Cromossomos, genes, DNA: uma viso atual dos fatores mendelianos
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Reconhecer a natureza fsica dos fatores da hereditariedade. Relacionar os conceitos de DNA, gene e cromossomo. Compreender como o material gentico est organizado.
Pr-requisitos
Estrutura e replicao do DNA.
AULA
Gentica Bsica | Cromossomos, genes, DNA: uma viso atual dos fatores mendelianos
A INTERPRETAO ATUAL DOS FATORES PROPOSTOS POR MENDEL

Nas aulas anteriores, conhecemos o trabalho de Mendel e tivemos oportunidade de observar a elegncia com que ele formulou hipteses para explicar a transmisso da herana biolgica em meados do sculo XIX. Para Mendel, as plantas possuam fatores determinantes de suas caractersticas hereditrias que eram transmitidos de uma gerao a outra por meio dos gametas. Embora Mendel tenha proposto a existncia desses fatores, ele no tinha nenhuma idia da sua natureza fsica e, muito menos, de como esses fatores eram capazes de determinar o fentipo. Voc deve lembrar tambm que, logo no incio do sculo XX, comparando o comportamento dos cromossomos durante a meiose com as leis da segregao e da associao independente (1a. e 2a. leis de Mendel), Sutton props que os fatores hereditrios deveriam estar nos cromossomos. Essa idia no foi logo aceita por toda a comunidade cientfica, s aps muitos estudos e um grande acmulo de evidncias, por volta de 1920, foi definitivamente aceita a idia de que os fatores estavam nos cromossomos. Em meados da dcada de 1940, chegou-se concluso de que o DNA era o material hereditrio e que de alguma forma controlava a sntese de protenas. Em 1953, foi proposto o modelo que explica a estrutura do DNA e, no incio da dcada de 1960, o cdigo gentico foi decifrado. A partir da, inmeros estudos sobre a organizao e funcionamento dos genes vm sendo desenvolvidos. Atualmente, chamamos os fatores hereditrios sugeridos por Mendel de genes e conhecemos sua natureza. Cada gene, unidade fsica e funcional da hereditariedade, um segmento de uma molcula de DNA (cido desoxirribonuclico) que contm as informaes necessrias para a produo de um RNA (cido ribonuclico) ou de uma protena. A Figura 7.1 apresenta o modelo da estrutura do DNA mais aceito atualmente.
118 CEDERJ
Figura 7.1: Estrutura da molcula de DNA: a molcula de DNA constituda por dois longos filamentos (cadeias) enrolados um sobre o outro formando uma estrutura helicoidal (dupla-hlice). Cada uma das cadeias do DNA constitui-se de milhares de nucleotdeos ligados em seqncia. As duas cadeias de desoxirribonucleotdeos que formam a molcula de DNA se mantm unidas por meio de ligaes de hidrognio entre as bases nitrogenadas. Essas ligaes ocorrem entre pares de bases especficas: adenina (A) liga-se timina (T) e citosina (C) liga-se guanina (G). (a) Representao plana da molcula, mostrando as pontes de hidrognio entre as bases nitrogenadas. A letra S representa o acar (desoxirribose) que se liga a cada uma das bases nitrogenadas, formando o esqueleto da molcula de DNA. (b) Representao da estrutura em dupla-hlice da molcula de DNA.
A ORGANIZAO DO MATERIAL GENTICO

Ento, qual a relao entre os genes, as molculas de DNA e os cromossomos? Diversos genes se distribuem ao longo das molculas de DNA que constituem o genoma de um organismo. De forma geral podemos dizer que, um gene corresponde a um segmento da molcula de DNA que transcrito em um RNA. Alguns genes so transcritos dando origem a RNA nuclerares, RNA ribossmicos ou RNA transportadores. Outros, do origem aos RNA mensageiros (RNAm) que, por sua vez, so traduzidos em polipeptdeos (Figura 7.2a). Nos eucariontes, a estrutura de um gene transcrito em RNAm formada por dois tipos distintos de regies (Figura 7.2b): os xons, seqncias codificantes que contm a informao para a produo da protena; e os ntrons, seqncias no-codificantes que se inserem entre os xons e precisam ser retiradas antes da traduo, atravs de um mecanismo chamado processamento do mRNA. Quanto aos procariontes, a grande maioria no possui ntrons.
CEDERJ 119
AULA
MDULO 1
Os processos de transcrio, traduo e processamento do mRNA sero abordados com mais detalhes na disciplina Biologia Molecular. As molculas de DNA so, em geral, bastante longas, podendo atingir vrios centmetros de comprimento. Surpreendentemente, os genes correspondem a uma quantidade relativamente pequena da molcula do DNA. A maior parte do DNA nunca transcrita em RNA e no contm informao para a produo de protena. Na espcie humana, por exemplo, calcula-se que apenas cerca de 3% do DNA correspondam aos genes. Os 97% restantes so seqncias de nucleotdeos que no produzem RNA e cuja funo ainda no conhecida, constituindo o DNA no-codificante. No entanto, muito do DNA no-codificante pode desempenhar funes importantssimas na estrutura, funcionamento e evoluo do genoma.
a
Genes
Gene 1 Gene 2 Gene 3
Transcrio
mRNA 1 mRNA 2 mRNA 3
Traduo
Protena 1 b
Protena 2
Protena 3
Gene
Gene 1 Gene 2 Gene 3 Gene 4
xon 1
xon 2
xon 3
ntron 1
ntron 2
Figura 7.2: (a) Esquema simplificado de um segmento da molcula de DNA que contm 3 genes ; (b) estrutura de um gene.
120 CEDERJ
Cada molcula de DNA est associada a uma srie de protenas, formando o que chamamos de cromossomos. Essa mistura de DNA e protenas que compe os cromossomos recebe o nome de cromatina. A cromatina pode assumir diferentes nveis de compactao, dependendo da regio do cromossomo e da fase do ciclo celular. Estudos in vitro, utilizando diferentes concentraes de sais no tratamento da cromatina, permitiram a construo de um modelo para a compactao do DNA (Figura 7.3). Esse modelo inclui quatro nveis progressivos: 1. A formao dos nucleossomos pela associao do DNA a protenas especiais chamadas histonas: cada nucleossomo formado quando o DNA passa duas vezes por volta de um complexo de histonas, sendo esse complexo um octmero composto por duas molculas de cada tipo (H2A, H2B, H3, H4); 2. O enovelamento das cadeias de nucleossomos, formando uma estrutura conhecida como solenide: os nucleossomos enovelam-se formando o solenide, que estabilizado por um outro tipo de histona (H1); 3. A formao de alas a partir do solenide que se ligam a um arcabouo de protenas no-histonas; 4. A super-helicoidizao do arcabouo protico ao qual as alas do solenide se associaram: a super-helicoidizao pode ser mais ou menos relaxada dependendos de se o cromossomo est em intrfase ou em diviso celular. Durante a diviso celular, a super-helicoidizao intensificada at que o cromossomo assuma o aspecto de um basto compacto.
CEDERJ 121
AULA
MDULO 1
Nucleossomo (10 nm) Histona H1 Histonas formando o octmero
DNA (2nm)
Solenide (30nm)
Alas do solenide
Protenas de ligao (no-histonas)
Super-helicoidizao
Figura 7.3: (a) Compactao da molcula de DNA. (b) Aspecto do cromossomo duplicado e em seu grau mximo de compactao durante a diviso celular. 122 CEDERJ
O MATERIAL GENTICO NA INTRFASE

Durante a intrfase das clulas de organismos eucariotos, os cromossomos se apresentam como longos fios, formando uma massa onde no se consegue identificar cada cromossomo individualmente. Foi essa massa de fios finssimos que originou o termo cromatina (do grego chromatos, cor), criado em meados do sculo XIX, quando os citologistas descobriram que certos corantes de tecidos tingiam os ncleos das clulas. Como vimos, em algumas regies, os filamentos cromossmicos esto dobrados de forma mais compacta. Essas regies tm um aspecto mais denso ao serem observadas ao microscpio, sendo denominadas heterocromatina (hetero = diferente). A heterocromatina contrasta com regies onde os filamentos esto menos condensados, denominadas eucromatina (eu = verdadeiro). As regies de heterociomatica se mantm condensadas durante a maior parte do ciclo celular. Geralmente, so regies que possuem maior afinidade pela maioria dos corantes celulares, tornando-se mais escuras, da o nome heterocromatina. Aparentemente, essas regies apresentam as mesmas propriedades em todos os animais e vegetais: possuem grande quantidade de DNA repetitivo; quase no sofrem recombinao; possuem pequena quantidade de genes; sua replicao ocorre mais tarde durante o ciclo celular, se comparada com a regio eucromtica. A heterocromatina pode ser dividida em constitutiva e facultativa. A heterocromatina facultativa difere da constitutiva pela capacidade de, eventualmente, assumir uma estrutura similar da eucromatina. Ainda na intrfase, as clulas que entraro em diviso duplicam seu material gentico. A duplicao dos cromossomos ocorre no perodo S da interfase e corresponde replicao das molculas de DNA que formam esses cromossomos (Figura 7.4). Sabemos que a replicao de uma molcula de DNA d origem a duas molculas idnticas (exceto no caso de haver algum erro durante a replicao). Logo, cada cromossomo duplicado fica constitudo de dois fios idnticos, unidos pela regio do centrmero. Cada um dos fios uma cromtide. Assim, depois da duplicao, cada cromossomo fica constitudo por duas molculas de DNA idnticas, as cromtides-irms, unidas pela regio do centrmero.
CEDERJ 123
AULA
MDULO 1
Pontes de Hidrognio
Comeo da deselicoidizao Ligaes covalentes
Novos filamentos duplos:

A duplicao est completa
Figura 7.4: Replicao do DNA e cromossomos. (a) O modelo mostra que a duplicao do DNA semiconservativa, produzindo duas molculas idnticas molcula de DNA original. (b) Modelo apresentando a relao entre a replicao do DNA e a duplicao do cromossomo. Aps a duplicao, as cromtides-irms permanecem unidas pelos centrmeros at que se complete o processo de diviso celular (o sombreado marca a regio centromrica).
124 CEDERJ
O MATERIAL GENTICO DURANTE AS DIVISES CELULARES

Quando a clula entra em processo de diviso, cada filamento que compe o cromossomo (cromtide) enrola-se sobre si mesmo, tornando-se progressivamente mais curto e grosso, at assumir o aspecto de um basto compacto. Cada cromtide condensa-se independentemente de sua irm, de modo que, na clula em diviso, pode-se visualizar cada cromossomo constitudo por dois bastes unidos pelos centrmeros. Em geral, ao falarmos de cromossomos, essa a imagem que temos em mente. Mas bom frisar que os fios que constituem a cromatina so os cromossomos que, na intrfase, no estando em seu grau mximo de compactao, no podem ser visualizados como estruturas individuais. Na Figura 7.5, temos um cromossomo com o aspecto que apresenta durante a intrfase e outro durante a metfase. A diferena que na metfase os cromossomos esto em seu grau mximo de compactao, o que permite sua visualizao como corpos independentes. Alm disso, como esto na metfase da mitose, os cromossomos j se encontram duplicados, apresentando duas cromtides.
Figura 7.5: Fotomicroscopia eletrnica do cromossomo na intrfase (a) e durante a metfase da mitose (b).
CEDERJ 125
AULA
MDULO 1
CENTRMEROS E TELMEROS
Todo cromossomo possui um estrangulamento denominado centrmero ou constrio primria. Este consiste numa regio do DNA responsvel pela segregao do cromossomo replicado para as clulas-filhas durante a diviso celular (Figura 7.6a). Caso um cromossomo perca sua regio centromrica, a segregao no acontecer, o cromossomo se perde e pode ser degradado pela clula. No centrmero tambm encontramos um disco de protena, o cinetcoro, ao qual se prendem os filamentos do fuso acromtico durante o processo de diviso da clula. A posio do centrmero (Figura 7.6 b) delimita dois braos no cromossomo. Dependendo da razo entre o tamanho desses braos, r = l/c, onde l o tamanho do brao longo e c o tamanho do brao curto, os cromossomos podem ser classificados em: Metacntrico: centrmero localizado aproximadamente no meio do cromossomo, formando dois braos de tamanho semelhante; 1,00 < r < 1,49. Submetacntrico: o centrmero est um pouco deslocado da regio mediana do cromossomo, formando dois braos de tamanhos diferentes; 1,50 < r < 2,99. Acrocntrico: centrmero est bem prximo a uma das extremidades do cromossomo, formando um brao grande e outro muito pequeno; 3,00 < r. Telocntrico: o centrmero est em uma das extremidades, adjacente ao telmero, tendo um nico brao visvel. No ocorre na espcie humana, embora possa estar presente em outras espcies animais. As regies terminais dos cromossomos so denominadas telmeros. Os telmeros so regies de DNA compostas por seqncias repetitivas de nucleotdeos. Faz algum tempo que j se sabe que estas so regies especializadas que previnem que dois cromossomos se unam atravs de suas extremidades. Em experimentos em que o uso do raio X provocou a perda da regio telomrica, os cromossomos apresentaram tendncia a se ligar por essas extremidades.
126 CEDERJ
Constrio primria (centrmeros)
Cromtides
Telmeros Metacntrico (centrmero em posio central) Submetacntrico (centrmero deslocado do centro) Acrocntrico (centrmero prximo a uma das extremidades) Telocntrico (centrmero em uma das extremidades)
!
Alm do material gentico contido no ncleo (genoma nuclear), as mitocndrias tambm contm DNA. O genoma mitocondrial humano contm 16.569 pares de base de DNA, incluindo 37 genes que codificam algumas das protenas e RNAs envolvidos na atividade mitocondrial. As clulas humanas podem conter milhares de mitocndrias; logo, milhares de cpias do genoma mitocondrial. Esse genoma herdado praticamente s da me. Isso porque, durante a formao do zigoto, o espermatozide contribui com seu genoma nuclear, mas no o mitocondrial. Por sua vez, o vulo contribui com seu genoma nuclear e com seu genoma mitocondrial, que transmitido somente atravs do citoplasma do vulo materno. Na Aula 12, voc poder estudar a herana de genes extranucleares com mais detalhes.
CEDERJ 127
AULA
Telmeros
Figura 7.6: O cromossomo compactado. a. Desenho de um cromossomo duplicado, mostrando cada uma de suas partes. b. Diferentes formas dos cromossomos, segundo a posio de seu centrmero.
MDULO 1
OS CROMOSSOMOS NAS ESPCIES

O genoma nuclear de uma espcie definido como a informao gentica total presente nos seus cromossomos. Em espcies que possuem cromossomos sexuais, o nmero de tipos de cromossomos (ou molculas de DNA) da espcie pode ser diferente do nmero de cromossomos do genoma haplide. A espcie humana um bom exemplo. Embora nosso genoma haplide tenha 23 cromossomos (Figura 7.7), nossa espcie possui 24 tipos de cromossomos diferentes, sendo 22 tipos de cromossomos autossmicos e 2 tipos de cromossomos sexuais, o cromossomo X e o cromossomo Y.
1 2
4 5
6 7
8 9 10 11 12
1 2
4 5
6 7
8 9 10 11 12
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X ou Y
13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X
Figura 7.7: Genoma haplide na espcie humana. a) espermatozide. b) vulo.
128 CEDERJ
A Tabela 7.1 mostra o nmero de cromossomos do genoma haplide de diversas espcies. Como voc pode verificar, o nmero de cromossomos no est relacionado ao tamanho nem complexidade biolgica de um organismo.
Tabela 7.1: Nmero de cromossomos que constituem o genoma haplide em algumas espcies eucariontes. Organismo Fungos Levedura de padaria (Saccharomyces cerevisiae) Mofo de po (Neurospora crassa) Plantas Milho (Zea may) Tomate (Lycopersicon esculentum) Feijo (Vicia faba) Sequia gigante (Sequia sempovirens) Animais invertebrados Mosca de frutas (Drosophila melanogaster) Mosquito (Anoheles culicifacies) Estrela-do-mar (Asterias forbesi) Animais vertebrados Ser humano (Homo sapiens) Chimpanz (Pan tryglodites) Cachorro (Canis familiaris) Gato (Felis catus) Camundongo (Mus musculus) Sapo (Xenopus tropicalis) 23 24 39 19 20 10 4 3 18 10 12 6 11 16 7 Nmero haplide de cromossomos
CEDERJ 129
AULA
MDULO 1
Cromossomos geneticamente equivalentes, ou seja, apresentando a mesma seqncia de genes, so ditos cromossomos homlogos (do grego homos, igual, semelhante). Nas espcies diplides, so cromossomos homlogos aqueles membros de um mesmo par. Apesar de possurem os mesmos genes, os homlogos no codificam, necessariamente, a mesma informao gentica. Cada um dos homlogos pode possuir um alelo diferente do mesmo gene, produzindo protenas diferentes com efeitos distintos no organismo. Mais detalhes sobre alelos, seus produtos e sua origem sero vistos na Aula 8. Na Figura 7.8 so apresentados caritipos de algumas espcies de plantas e animais. Chamamos caritipo constituio cromossmica de uma clula ou de um indivduo. Diferentes tcnicas para observao de caritipos vm sendo desenvolvidas e voc ter oportunidade de conhec-las melhor em aulas futuras. A tcnica apresentada na Figura 7.8 uma das mais simples; corando os cromossomos uniformemente, ela permite que voc identifique a diversidade de tamanho, forma e nmero de cromossomos nas diferentes espcies.
a b
Figura 7.8: Caritipos de diversas espcies (fora de escala). (a) Vicia faba (feijo); (b) Marmosa cinerea (marsupial); (c) Felis catus (gato).
130 CEDERJ
INFORMAES SOBRE A PRXIMA AULA

Agora voc j sabe um pouco mais sobre a natureza fsica dos fatores de Mendel e como eles se organizam. Na prxima aula, veremos como os genes atuam dando origem ao fentipo e como surgem variantes para um mesmo gene. Veremos tambm como se d a relao de dominncia entre os alelos de um mesmo gene. Enfim, o que representam, em termos moleculares, os azes (A) e azinhos (a), to utilizados na Gentica.
RESUMO
Embora o conceito tradicional de gene esteja em discusso, de forma geral, podemos dizer que cada gene um segmento de uma molcula de DNA que contm as informaes necessrias para a produo de um RNA ou de uma protena. Diversos genes se distribuem ao longo das molculas de DNA que constituem o genoma de um organismo. Cada molcula de DNA est associada a uma srie de protenas, formando o que chamamos cromossomos. Durante a intrfase das clulas de organismos eucariotos, os cromossomos se apresentam como longos fios, formando uma massa onde no se consegue identificar cada cromossomo individualmente. Ainda na intrfase, as clulas que entraro em diviso duplicam seu material gentico. A duplicao dos cromossomos ocorre no perodo S da intrfase e corresponde replicao das molculas de DNA que formam esses cromossomos. Quando a clula entra em processo de diviso, cada filamento que compe o cromossomo (cromtide) enrola-se sobre si mesmo, tornando-se progressivamente mais curto e grosso, at assumir o aspecto de um basto compacto. Cada cromtide condensa-se independentemente de sua irm, de modo que, na clula em diviso, pode-se visualizar cada cromossomo constitudo por dois bastes unidos pelo centrmero. Chamamos genoma a um conjunto completo de cromossomos da espcie. Os organismos podem conter em suas clulas somticas um, dois, trs ou mais conjuntos de cromossomos.
CEDERJ 131
AULA
MDULO 1
ATIVIDADE 1: CONSTRUINDO UM MODELO DE CLULA INTERFSICA

A. Vamos imaginar uma espcie hipottica, diplide com 2n = 6 cromossomos. Voc dever construir um modelo que represente o ncleo de uma clula somtica de um indivduo dessa espcie no perodo G1 da intrfase. Considere ainda as caractersticas listadas abaixo para a construo do seu modelo: 1. Os cromossomos sero denominados cromossomo 1; cromossomo 2 e cromossomo 3. O cromossomo 1 o maior de todos e metacntrico; o cromossomo 2 tem tamanho intermedirio e submetacntrico e o cromossomo 3 o menor e acrocntrico; 2. O cromossomo 1 possui 4 genes, denominados A, B, C e D; o cromossomo 2 possui 4 genes, denominados E, F, G e H; e o cromossomo 3 possui 2 genes, denominados I e J; 3. Os genes A e B esto em um dos braos do cromossomo 1 e os genes C e D no outro brao; 4. O gene E est no brao curto do cromossomo 2 e os genes F, G e H esto no brao longo desse mesmo cromossomo; 5. Os genes I e J esto no brao longo do cromossomo 3; 6. O indivduo cujo ncleo ser representado homozigoto dominante para os genes A, C, F e J; homozigoto recessivo para os genes B e E e heterozigoto para todos os outros genes. Os alelos dominantes de cada gene sero representados por letras maisculas e os recessivos por letras minsculas. Como sugesto para a construo do seu modelo voc poder utilizar o seguinte material: 1 bolinha de isopor oca de cerca de 4cm de dimetro cortada ao meio; 50cm de l ou barbante; etiquetas de cerca de 0,5cm x 1cm; A bolinha de isopor representar o ncleo, delimitado pela membrana nuclear. Os fios de l ou barbante sero usados na representao dos cromossomos. E as etiquetas delimitaro as regies dos cromossomos onde se encontram os genes. Os centrmeros sero delimitados por um n nos fios de l ou barbante.
132 CEDERJ
O material citado acima s uma sugesto. Voc poder usar sua criatividade e montar seu modelo com o material que achar mais conveniente. O mais importante que voc tenha em mente que o modelo pretende ser uma representao da viso que temos sobre um determinado conceito terico. Muitas vezes, ao construir um modelo, simplificamos o objeto ou processo a ser representado, visando priorizar a compreenso de uma idia mais geral. Mas devemos ter sempre cuidado para que nossos modelos no induzam erros conceituais em outras pessoas que possam vir a utiliz-los. Por isso, antes de construir seu modelo, reveja os conceitos sobre o ncleo interfsico e sobre a organizao do genoma. Pense o que cada material utilizado estar representando e descreva isso, criando, alm do modelo, uma folha de orientao para o entendimento do mesmo. B. Imagine agora que voc obteve uma preparao com os cromossomos desse indivduo na metfase da mitose. Desenhe o caritipo observado. Verifique no seu guia da disciplina quando voc dever apresentar seu modelo para discusso com seus colegas e tutores.
ATIVIDADE 2: MONTAGEM DE CARITIPO HUMANO (2n = 46).

A Figura 7.9 apresenta os cromossomos de uma clula humana obtida a partir de cultura de linfcitos. A tcnica utilizada inclui as seguintes etapas: 1. Retirada de sangue; 2. Separao dos leuccitos; 3. Transferncia dos leuccitos para meio de cultura contendo indutor de divises celulares (fitohemaglutinina); 4. Cultivo das clulas por alguns dias; 5. Adio de colchicina para bloquear as mitoses na fase de metfase; 6. Adio de soluo hipotnica para que as clulas fiquem mais trgidas (inchadas); 7. Centrifugao para precipitao dos leuccitos; 8. Coleta dos leuccitos e gotejamento sobre lmina microscpica; 9. Colorao com Giemsa.
CEDERJ 133
AULA
MDULO 1
A partir da preparao descrita acima, uma clula foi selecionada e fotografada. Cada cromossomo est composto por duas cromtides, pois a clula estava em processo de mitose quando foi fixada. Para a anlise de caritipos, o prximo passo recortar cada um dos cromossomos da fotografia e mont-los segundo a classificao dos cromossomos humanos. Sua tarefa ser: 1. fazer uma pesquisa sobre como so classificados os cromossomos humanos e como so feitas as montagens de caritipos; 2. recortar e montar, colando em uma folha de papel, os cromossomos da Figura 7.9 segundo o padro utilizado para montagem de caritipo humano; 3. indicar se a clula analisada de um indivduo do sexo feminino ou masculino e se esse indivduo apresenta o nmero de cromossomos normal da espcie humana.
134 CEDERJ
Figura 7.9: Fotografia dos cromossomos de uma clula humana corados com soluo de Giemsa na fase de metfase da mitose.
CEDERJ 135
AULA
MDULO 1
ATIVIDADE 3: RELACIONANDO GENES, CROMOSSOMOS E MEIOSE

1) Complete o esquema da meiose de uma clula diplide de um macho heterozigtico para os genes C e D, localizados em cromossomos autossmicos diferentes. Alm disso, no cromossomo X est localizado um alelo recessivo para o gene E.
2) Agora responda: quantos tipos de gametas foram formados ao final da meiose desta clula? como podem ser formados outros tipos de gametas neste mesmo indivduo (CcDdXeY)? 3) Indique todos os tipos de gametas que este indivduo, com gentipo CcDdXeY, formaria. E se fosse uma fmea CcDdX EX e, que tipos de gametas seriam formados?
136 CEDERJ
Do gene ao fentipo
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Explicitar relaes entre a Gentica Mendeliana e a Biologia Molecular. Compreender as bases moleculares da determinao do fentipo. Compreender como surgem as variaes no gentipo e como estas determinam as variaes no fentipo.
Pr-requisitos
Estrutura e Duplicao do DNA. Mecanismo da sntese de protenas transcrio e traduo.
AULA
Gentica Bsica | Do gene ao fentipo
REVENDO A TRANSCRIO E A TRADUO

Na disciplina Biologia Molecular, voc ter a oportunidade de aprofundar seus conhecimentos sobre a organizao molecular dos genes e os processos de transcrio e traduo. No entanto, precisamos lembrar de alguns conceitos fundamentais desses processos para entender esta aula. Voc deve se recordar que os genes so segmentos da molcula de DNA responsveis por armazenar e transmitir as informaes genticas. De acordo com o dogma central da Biologia Molecular, a informao gentica flui do DNA para o DNA (processo de replicao) durante sua transmisso de gerao a gerao e do DNA para a protena durante sua expresso fenotpica em um organismo. A maioria dos genes contm informaes para a sntese de RNA mensageiros (mRNA) processo de transcrio que, por sua vez, contero as informaes para a sntese de protenas processo de traduo. No final da dcada de 1950, os cientistas demonstraram a natureza trplice do cdigo gentico cada aminocido de uma protena especificado por uma seqncia de trs pares de nucleotdeos no DNA. Logo em seguida, decifrou-se o cdigo gentico e demonstrouse a correspondncia entre as trincas de bases nitrogenadas do mRNA (cdons) e os aminocidos nas protenas. O cdigo inequvoco, cada cdon corresponde a um nico aminocido, e degenerado, pois quase todos os aminocidos tm mais de um cdon.Voc encontra a tabela com o cdigo gentico no final desta aula.
ATC ATC TTT GGT GTT ... - fita senso DNA TAG TAG AAA CCA CAA - fita anti-senso (molde para o RNAm)
mRNA
...AUC - AUC - UUU - GGU - GUU...
PTN
... ILE- ILE- PHE- GLY- VAL...
138 C E D E R J
Mas h, tambm, aqueles genes que codificam para RNA nucleares (snRNA), RNA transportadores (tRNA) e RNA ribossmicos (rRNA), e todos estes RNAs nunca so traduzidos. Um resumo dos processos de transcrio e traduo est apresentado na Figura 8.1.
MDULO 1
Figura 8.1: Esquema apresentando um resumo dos processos de transcrio e traduo. As estruturas no esto em escala.
C E D E R J 139
AULA
!
Os tRNA so pequenas molculas de RNA que funcionam como adaptadores entre os aminocidos e os cdons do mRNA durante a traduo. Os rRNA so componentes estruturais dos ribossomos, organelas celulares responsveis pela traduo do mRNA em protenas. Os snRNA so componentes estruturais dos spliceossomos, estruturas nucleares responsveis pela retirada dos ntrons das seqncias dos pr-mRNA.
Nos procariontes, os produtos da transcrio, transcritos primrios, em geral, so equivalentes molcula de mRNA a ser traduzida. J nos eucariontes, os transcritos primrios de muitos genes contm seqncias especficas que devero ser retiradas para a completa formao do mRNA, da serem chamados pr-mRNA. O processamento do pr-mRNA inclui a retirada de seqncias de nucleotdeos nocodificantes, chamadas ntrons, que se inserem entre as seqncias codificantes chamadas xons dos genes. A remoo dos ntrons realizada por estruturas macromoleculares chamadas spliceossomos (do ingls splicing). Alm da exciso dos ntrons, o processamento do pr-mRNA em mRNA inclui modificaes em suas duas extremidades: o capeamento da extremidade 5 e a poliadenilao da extremidade 3.
Gene A
stio de exciso 5 stio de exciso 3 Exon 2
DNA
Pr-mRNA (transcrito primrio)
Exon 1
Intron
TRANSCRIO
Capeamento 5
mG PROCESSAMENTO do Pr-mRNA em mRNA AAAAA...
Poliadenilao 3
mG
Exciso
mRNA (transcrito maduro) mG Exon 1 Exon 2 AAAAA...
TRADUO
PROTENA A
Figura 8.2: Processamento do pr-mRNA em mRNA, incluindo a exciso de seqncias de ntrons e modificaes nas duas extremidades dos transcritos primrios.
140 C E D E R J
Como resultado da traduo do mRNA, temos a sntese de polipeptdeos (seqncias de aminocidos ligados por unies peptdicas). Um ou mais polipeptdeos associados formam macroestruturas que chamamos protenas. As protenas exercem inmeras funes na clula, podendo participar da estrutura de organelas ou do controle das reaes qumicas (protenas enzimticas ou, simplesmente, enzimas). A funo de uma protena , em ltima anlise, determinada por sua seqncia de aminocidos (aa), que, como vimos, depende da seqncia de nucleotdeos de seu gene correspondente. Mudanas na seqncia de nucleotdeos do DNA podem alterar a seqncia de aa, causando a perda ou modificao da funo da protena.
REVISITANDO AS ERVILHAS DE MENDEL

Voltando s ervilhas estudadas por Mendel, hoje sabemos que a espcie Pisum sativum uma espcie diplide, com 2n = 14 cromossomos. Isto significa que esta espcie possui 7 tipos de cromossomos ou molculas de DNA diferentes que se apresentam em dose dupla. Em um desses cromossomos, h um gene responsvel por determinar a caracterstica textura da semente. Mas, como isso acontece? Para que as sementes sejam lisas, parte substancial da glicose contida nos cotildones deve ser transformada em molculas de amido grandes e ramificadas. A sntese do amido ramificado depende de uma protena enzimtica chamada SBE-I (do ingls Starch-Branching Enzyme). E a sntese desta enzima depende da transcrio e traduo de um segmento de DNA, com 3.300 pares de nucleotdeos, localizado em uma regio especfica de um dos cromossomos da ervilha. Chamaremos essa verso do gene que condiciona a sntese da enzima SBE-I funcional de alelo R.
Gene SBE-I normal (segmento do DNA com 3,3 mil pares de nucleotdeos alelo R)
TRANSCRIO
mRNA
TRADUO
protena enzimtica SBE-I funcional

REAO EMZIMTICA
Glicose --------------- amido ramificado
C E D E R J 141
AULA
MDULO 1
Mas h uma outra verso para este gene, pois esse segmento de DNA pode ter sua seqncia de nucleotdeos alterada pela insero de 800 pares de nucleotdeos. Essa forma alterada do gene no produz a
ALELO
enzima SBE-I funcional, sendo um chamaremos alelo r (Figura 8.3).
ALELO
no funcional desse gene que
O termo alelo usado para identificar verses diferentes de um mesmo gene, ou seja, pequenas variaes de um segmento de DNA.
Gene SBE-I com a insero de 800 nucleotdeos em sua seqncia (segmento do DNA com 4.100 pares de nucleotdeos alelo r)
TRANSCRIO
mRNA
TRADUO
protena enzimtica SBE-I no-funcional

NO OCORRE REAO ENZIMTICA
Glicose ----------------------------- amido ramificado
ALELO NORMAL r
ALELO MUTANTE
Insero de um segmento de 800 nucleotdeos
O UTA
DNA TRANSCRIO
mRNA
TRADUO
PROTENA SBE-I FUNCIONAL
PROTENA SBE-I NO FUNCIONAL
GLICOSE
AMIDO RAMIFICADO
Figura 8.3: Origem molecular da alterao da forma da semente de ervilha. O fentipo rugoso resulta da insero de uma cadeia de nucleotdeos no gene que codifica a protena SBE-I, responsvel pela sntese de amido ramificado a partir da glicose. (a) alelo normal; (b) alelo mutante.
142 C E D E R J
As plantas com sementes rugosas possuem gentipo rr. Isto , os dois cromossomos do par de homlogos que possui a seqncia de DNA que codifica a protena SBE-I possuem a verso r deste gene. J vimos que o alelo r produz uma protena que no capaz de catalisar a reao que transforma a glicose no amido ramificado, o que resulta num acmulo de sacarose, aumentando a presso osmtica no interior das clulas dos cotildones. Conseqentemente, as clulas dos cotildones absorvem e acumulam grande quantidade de gua durante seu desenvolvimento. Com o amadurecimento das sementes, h perda de grande quantidade de gua, o que provoca o enrugamento de sua casca. As plantas que possuem em seu gentipo pelo menos uma cpia do alelo R (RR ou Rr), a verso do gene capaz de sintetizar a enzima SBE-I funcional, sintetizam o amido ramificado e tm nas clulas dos cotildones presso osmtica menor, no acumulando tanta gua. Quando amadurecem, seus cotildones perdem muito pouca gua, mantendose praticamente com o mesmo tamanho e, por isso, no enrugam sua casca. Note que nesse caso, a presena de um nico alelo R produz a quantidade suficiente da enzima para que a reao de transformao de glicose em amido ramificado ocorra nos nveis necessrios para que a forma da semente seja lisa (Figura 8.4).
GENTIPO
Protena
R/R homozigoto Funcional
R/r heterozigoto Funcional
r/r homorozigoto No Funcional
mRNA
Cromossomos homlogos Cromossomos homlogos
alelo R alelo R
alelo R alelo r
alelo r alelo r
mRNA
Protena
Funcional Ervilha lisa
No Funcional Ervilha lisa
No Funcional Ervilha rugosa
Fentipo
Figura 8.4: As bases moleculares dos fatores de Mendel.
C E D E R J 143
AULA
MDULO 1
COMO SURGEM NOVOS ALELOS?

No exemplo da textura da semente em ervilha, usamos as letras R e r para nomear os dois alelos responsveis pela determinao da variao dessa caracterstica. Vimos que a diferena entre estes alelos est na diferena entre a seqncia de nucleotdeos do segmento de DNA que codifica a enzima SBE-I. O alelo r possui 800 pares de base a mais do que o alelo R na sua seqncia. Bhattacharya e colaboradores, em 1990, publicaram um trabalho no qual mostram que esta diferena teve origem na insero de um elemento de transposio no gene SBE-I, resultado no alelo r a partir do alelo R. Dizemos, ento, que o gene SBE-I sofreu uma mutao, ou seja, uma alterao na sua seqncia de nucleotdeos.
!
Elementos de transposio (ou transposons) so segmentos de DNA que tm a propriedade de mudar de posio no genoma. Quando os elementos de transposio se movem de um local para o outro, eles podem quebrar cromossomos ou mutar genes, tendo assim um importante significado gentico. O primeiro relato sobre a existncia de elementos de transposio foi publicado em 1948 pela cientista americana BARBARA MCCLINTOCK, que devotou grande parte de sua vida s pesquisas com gentica de milho. A princpio suas idias sobre a possibilidade de existirem segmentos de DNA que mudavam de lugar no foram bem aceitas. O conceito de transposio contradizia o ponto de vista estabelecido, de que os genes ocupam posies fixas nos cromossomos. Nas dcadas de 1960 e 1970, elementos de transposio foram observados tambm em bactrias e em drosfilas, e hoje sabemos que ocorrem em muitas espcies, inclusive na espcie humana. McClintock ganhou, em 1983, o Prmio Nobel de Fisiologia e Medicina por seu trabalho. S para no haver dvida, nosso conhecimento atual sobre os genomas dos seres vivos confirma que os genes ocupam posies fixas nos cromossomos. Os elementos de transposio so segmentos de DNA que apresentam um comportamento particular.
BARBARA MCCLINTOCK
Nesse caso, a mutao ocorreu devido a uma insero, mas outros tipos de mutao podem modificar as seqncias de DNA. Voc poderia identificar outros processos que poderiam alterar a seqncia de nucletdeos da molcula de DNA? Vejamos se voc respondeu bem: a seqncia de nucleotdeos do DNA de um gene pode ser alterada por: 1. insero ou adio de um ou mais pares de nucleotdeos; 2. deleo ou perda de um ou mais pares de nucleotdeos; 3. substituio de um ou mais pares de nucleotdeos.
144 C E D E R J
Qualquer mutao que ocorra dentro de um determinado gene produzir um alelo novo deste gene. Os genes podem possuir mltiplos alelos, como o caso do gene que codifica a protena da molcula de hemoglobina (Figura 8.5).
Figura 8.5: Exemplos de seqncias de aminocidos na cadeia da hemoglobina. Cada cadeia apresenta a troca de um aminocido quando comparada cadeia A que compe a Hemoglobina A (HbA normal). Todos os exemplos apresentados resultam da substituio de um par de bases na seqncia de nucleotdeos do gene que codifica a protena . Assim, cada uma dessas mutaes deu origem a um novo alelo do gene para a cadeia . Nesse gene, a mutao mais conhecida a que causa a anemia falciforme (ou siclemia) na espcie humana. Se compararmos o DNA do alelo que codifica a cadeia beta normal (A) e o alelo que codifica a cadeia mutante (S) que causa a siclemia, verificaremos que a diferena entre elas resume-se na substituio de um nico par de nucleotdeo, entre os 438 pares que codificam essa cadeia polipeptdica. Na regio do DNA que codifica o sexto aminocido, a trinca de bases CTC no alelo normal e CAC no alelo siclmico. Verifique na tabela do cdigo gentico que esta substituio da timina por adenina causa a substituio de um cido glutmico por uma valina na seqncia de aminocidos da protena.
C E D E R J 145
AULA
MDULO 1
OS EFEITOS DAS MUTAES NA FUNO DAS PROTENAS

Nem toda variao no DNA (mutao) resulta em variao no fentipo. Por exemplo, pode ocorrer uma substituio de um nucleotdeo que no resulte em mudana na seqncia de aminocidos da protena a ser codificada. D outra olhada na tabela do cdigo gentico e voc ver que o cdigo degenerado, ou seja, h mais de uma trinca de bases que codificam um mesmo aminocido.
a) sem mutao
b) troca de aminocido troca de uma base
DNA Figura 8.6: Tipos de mutao segundo a alterao que causa na funo da protena. mRNA conformao e atividade normais da protena. CUU CCU Leu Pro nova conformao da protena e perda da atividade devido mudana de aminocidos.
c) mutao silenciosa troca de uma base
d) mutao sem sentido troca de uma base
CUU Leu
CUA CUU CUG ou Leu Leu Leu conformao e atividade normais da protena.
UAC UAA ou UAG Tyr Fim protena incompleta perda de atividade
e) mudana de quadro de leitura adio de bases
mudana de conformao perda de atividade
146 C E D E R J
Outra possibilidade quando, mesmo havendo a substituio de um ou mais aminocidos, a protena continua desempenhando perfeitamente a sua funo. A mudana do aa pode ocorrer, por exemplo, numa regio da protena que no seja fundamental para a sua atividade. A Figura 8.6 apresenta as possibilidades de alterao da funo de uma protena quando seu gene correspondente sofre mutao. O geneticista Hermann Muller props um sistema de classificao para os alelos mutantes segundo as alteraes que causam em relao funo desempenhada pelo alelo normal do gene. Segundo o sistema de classificao proposto por MULLER, os alelos podem ser: 1. Hipomrficos, quando a mutao causa uma diminuio da funo do gene em relao ao alelo normal. 2. Amrficos, quando a mutao, embora mantenha a capacidade do alelo produzir um RNA ou protena, causa a perda da funo do gene. 3. Nulos, quando a mutao elimina a capacidade do alelo para produo do RNA ou protena codificada pelo gene. Todo alelo nulo um alelo amrfico, mas nem todo alelo amrfico um alelo nulo. Para sabermos se um alelo amrfico tambm um alelo nulo, precisamos fazer um teste capaz de detectar a presena fsica do produto do gene, ou seja, da protena ou do RNA. 4. Hipermrficos, quando a mutao causa o aumento da funo do gene em relao ao seu alelo normal. 5. Neomrficos, quando a mutao produz uma nova funo. 6. Antimrficos, quando a mutao produz uma funo antagnica funo desempenhada pelo alelo original. As trs primeiras classes incluem alelos onde h perda de funo, enquanto nas trs ltimas a mutao cria alelos que apresentam ganho de funo em relao ao alelo original. Um alelo classificado como amrfico pode ser ou no um alelo nulo. No se preocupe em memorizar esses nomes, mas sim em entender o que cada uma das classes apresentadas representa em termos das alteraes de funo das protenas correspondentes. HERMANN MULLER
C E D E R J 147
AULA
MDULO 1
AS RELAES DE DOMINNCIA ENTRE ALELOS DO MESMO GENE

Dominncia a relao entre dois alelos de um mesmo gene, que definida pelo fentipo de indivduos heterozigticos para esses dois alelos. No estudo realizado por Mendel, para os sete caracteres analisados, os alelos apresentavam uma relao de dominncia completa. Ou seja, o fentipo das plantas heterozigticas era idntico ao das homozigticas para um dos alelos. H casos em que o fentipo do heterozigoto intermedirio em relao aos dois homozigotos, da dizermos que h uma dominncia incompleta. Um exemplo de dominncia incompleta o caso do gene que determina a cor da flor em Mirabilis jalapa. Um dos alelos conhecidos desse gene (A1) condiciona a cor vermelha flor e o outro alelo (A2), a cor branca. Os indivduos heterozigticos (A1A2) possuem flor de cor rosa. Um ponto que em geral causa confuso a diferena entre os conceitos de dominncia incompleta e codominncia. Vamos ver se conseguimos resolver isso. Dizemos que h codominncia quando somos capazes de perceber, no heterozigoto, o fentipo expresso pelos dois alelos em questo. A maior parte dos exemplos de codominncia ocorre quando estamos analisando caractersticas cujo fentipo est relacionado diretamente com a identificao da protena codificada pelo gene. Ainda no est claro? Vamos ao exemplo clssico, grupos sangneos. O sistema sangneo ABO em seres humanos controlado por um gene (Gene I), que possui vrios alelos. Dentre estes alelos, existe o alelo IA, que produz o antgeno especfico A e o alelo IB, que produz o antgeno especfico B. Os homozigotos IAIA s produzem protenas do tipo A, o fentipo desses indivduos para o sistema ABO grupo sangneo A. Da mesma forma os homozigotos IBIB so do grupo sangneo B. Os heterozigotos IAIB produzem os dois tipos de protenas, mas no s isso, somos capazes de identificar estes produtos isoladamente, por isso dizemos que esses alelos apresentam codominncia. Os heterozigotos IAIB so do grupo sangneo AB. No caso do gene que codifica os antgenos do sistema ABO, costuma-se identificar a diferena entre o produto do alelo IA (antgeno A) e do alelo IB (antgeno B) atravs de reaes antgenoanticorpo, uma alternativa tcnica de eletroforese.
148 C E D E R J
H um outro caso em que os indivduos heterozigticos tm fentipo mais extremo do que ambos os homozigotos. Neste caso, dizemos que a relao entre os alelos de sobredominncia. Em Arabidopsis thaliana, uma planta muito usada como modelo experimental em Gentica, observou-se que h um gene cujo alelo mutante an em homozigose produz o fentipo plantas ans. Mas as plantas heterozigticas portadoras de um alelo normal (An) e um alelo mutante (an) possuem um tamanho maior do que as homozigticas (AnAn).
ALELOS DE UM MESMO GENE PODEM APRESENTAR DIFERENTES RELAES DE DOMINNCIA

Vejamos um exemplo de como alelos de um mesmo gene podem apresentar diferentes relaes de dominncia. Um dos genes que condiciona a cor dos olhos em Drosophila melanogaster est localizado no cromossomo X e denominado gene white. O alelo normal ou selvagem (w+) deste gene codifica uma protena que est relacionada deposio de pigmentos nos olhos das drosfilas. As drosfilas normais possuem olhos vermelho-escuros, resultado da deposio de dois pigmentos, o pigmento vermelho e o pigmento marrom. Existem, no entanto, alelos mutantes desse gene que causam o aparecimento de diferentes fentipos relacionados variao na cor dos olhos. Dentre esses alelos esto o alelo white (w) e o alelo white-apricot (wa). A protena codificada pelo alelo w perde completamente sua funo e no capaz de fazer a deposio dos pigmentos. A protena codificada pelo alelo wa, embora ainda seja capaz de depositar os pigmentos, tem sua funo reduzida. Resultado: os indivduos homozigticos para o alelo w possuem olhos brancos, pois no so capazes de depositar nenhuma quantidade de pigmento nos olhos. Indivduos homozigticos para o alelo wa possuem olhos de cor alaranjada. Se usarmos a classificao de Muller, diremos que o alelo w amrfico, pois ele no capaz de realizar a funo do alelo normal de pigmentao do olho, e o alelo wa classificado como hipomrfico, pois, a funo do gene de pigmentao do olho, embora seja mantida, reduzida.
C E D E R J 149
AULA
MDULO 1
Quanto s relaes de dominncia, o alelo selvagem (w+) possui dominncia completa em relao a estes dois genes; fmeas heterozigticas w+w ou w+wa possuem olhos de cor vermelho-escuros. No entanto, o alelo wa apresenta dominncia incompleta em relao ao alelo w, pois fmeas waw apresentam olhos com um tom de laranja mais claro do que as fmeas homozigticas wawa. Um alelo que codifica uma protena defeituosa recessivo quando, em heterozigose com o alelo normal, esse ltimo ainda capaz de fornecer a quantidade adequada de protena para suprir as necessidades da clula (haplo-suficincia). Se este no for o caso que h haplo-insuficincia do alelo normal. No nosso exemplo, o alelo normal (w+) capaz de suprir as necessidades para que a cor dos olhos seja normal, mesmo quando em heterozigose com os alelos defeituosos; logo, h uma haplo-suficincia desse alelo.
!
S para lembrar, os machos de drosfila so XY; por possurem apenas um cromossomo X, no cabe o uso dos termos homozigtico ou heterozigtico para nos referirmos ao gentipo de genes localizados em seu cromossomo sexual X. Usamos neste caso, o termo hemizigtico, ou seja, os machos so hemizigticos para este ou aquele alelo. A mesma observao serve para qualquer espcie que apresente sistema semelhante de determinao cromossmica do sexo.
150 C E D E R J
A tcnica conhecida como eletroforese (do grego phresis, migrao) permite separar molculas com cargas e/ou pesos moleculares diferentes. Para isso, deve-se colocar as amostras a serem testadas em uma das extremidades de um gel e aplica-se a este gel uma corrente eltrica. As protenas iro migrar mais ou menos rpido segundo seu peso molecular e sua carga eltrica, que dependem da seqncia dos aminocidos. Aps a migrao, a posio de cada molcula pode ser identificada, indicando possveis diferenas ou semelhanas entre as amostras. A tcnica de eletroforese usada tambm para separar molculas de DNA e RNA.
Figura 8.7: Representao esquemtica de um gel de eletroforese onde amostras de indivduos com diferentes gentipos foram analisadas. Note que os indivduos homozigticos formam apenas uma banda na corrida eletrofortica, enquanto o heterozigoto forma duas. Isto se d porque nos homozigotos os dois alelos formam protenas idnticas. J os heterozigotos possuem dois alelos diferentes e, conseqentemente, podem formar protenas com diferenas em suas seqncias de aminocidos.
ALGUNS EXEMPLOS DAS BASES MOLECULARES DE ALGUMAS DOENAS GENTICAS NA ESPCIE HUMANA A fibrose cstica
A fibrose cstica (FC) ou mucoviscosidade uma doena hereditria onde um alelo defeituoso de um nico gene responsvel por disfunes em diversos rgos do organismo, como pulmes, fgado, pncreas, intestinos e trato reprodutivo. A principal causa dessas disfunes a obstruo dos ductos em diversos rgos por secrees de viscosidade muito aumentada. Os indivduos afetados por essa doena se caracterizam ainda por apresentar uma alta concentrao de sais no suor e, em geral, morrem sufocados pelo espesso muco que obstrui suas vias respiratrias.
C E D E R J 151
AULA
Como podemos identificar diretamente a protena codificada pelo gene?
MDULO 1
A FC uma doena autossmica recessiva. Isso significa que o gene cujo alelo mutante causa esta doena est localizado em um cromossomo autossmico e, para que uma pessoa seja afetada, suas duas cpias do gene devem ser defeituosas. O gene cuja mutao causa a FC (Gene CFTR) est localizado no brao longo do cromossomo 7. Uma pessoa que leva o alelo normal do gene em um de seus cromossomos e um alelo defeituoso no cromossomo homlogo no apresenta a doena. Neste caso, como nos exemplos do gene para a textura da semente de ervilha e da cor dos olhos da drosfila, dizemos que h uma haplo-suficincia, ou seja, a presena de um nico alelo normal produz a quantidade suficiente de protena para prover o funcionamento normal da clula e, conseqentemente, o fentipo normal do indivduo. Mas qual a causa primria da fibrose cstica? Como vimos, a FC uma doena monognica. Isso indica que a causa primria deve ser um defeito ou falta das funes de uma protena.
Figura 8.8: Localizao de gene cuja mutao causa a doena fibrose cstica, no brao longo do cromossomo 7. A perda dos trs pares de bases marcados em cinza resulta na remoo do aminocido fenilalanina na protena correspondente. Consulte a tabela do cdigo gentico e verifique a seqncia de aminocidos na protena normal e na mutante.
Nesse caso, a doena tem como causa primria a inativao de uma protena que controla a passagem de ons atravs da membrana celular nos tecidos secretores. A perda do canal protico por onde passam os ons causa um desbalano das concentraes de Na+ e Cl-, levando produo do muco muito espesso e da obstruo dos ductos nos diversos rgos. J foram detectados mais de 1000 alelos com diferentes mutaes que causam a perda da funo dessa protena. Contudo, a maioria dos indiSeqencia de nucleotideos Aminocidos da protena CFTR em seqencia
Isoleucina 506
Cromosssomo 7
vduos afetados so portadores do alelo mutante denominado F508. A diferena entre este alelo e o alelo normal consiste em uma deleo de 3 pares de bases. A perda desses nucleotdeos cor-
A T C A T C T T T G G C G T T
Isoleucina 507
responde produo de uma protena com a perda do aminocido fenilalanina na 508 posio (Figura 8.8).
Fenilalanina 508
Gene CFTR
Glicina 509
Deleo em muitos pacientes com fibrose cstica
Valina 510
152 C E D E R J
A Doena de Tay-Sachs
As crianas homozigticas para o alelo mutante que causa a doena de Tay-Sachs so normais ao nascimento, mas aps alguns meses tornamse hipersensveis a barulhos e desenvolvem pontos vermelhos na retina do olho. Entre seis meses e um ano aps o nascimento, comeam a sofrer uma progressiva degenerao neurolgica que rapidamente leva ao retardo mental, cegueira, surdez e perda geral do controle de funes corpreas. A morte, em geral, ocorre entre trs e quatro anos de idade. Na maioria das populaes mundiais, o alelo que causa a doena de Tay-Sachs raro; no entanto, entre a populao de judeus ashkenazi da Europa Central o nmero de crianas que nasce com a doena de cerca de 1 em 3.600 e o nmero de adultos heterozigticos portadores do alelo mutante de cerca de 1 em 30. A mutao que causa a doena de Tay-Sachs est no gene HEXA, que codifica a enzima hexosaminidase A. Essa enzima atua clivando o complexo lipdeo gangliosdeo GM2 em um gangliosdeo menor (GM3) e em N-acetil-D-galactosamina.
Gene HEXA normal
codifica a
Protena enzimtica hexosaminidase A
catalisa a reao
gangliosdeo GM2 ----------------- gangliosdeo GM3 + N-acetil-D-galactosamina
A funo do gangliosdeo GM2 revestir as clulas nervosas, isolando-as de eventos que ocorrem nas clulas vizinhas e acelerando a transmisso dos impulsos nervosos. Na ausncia da enzima que o degrade, h excesso de GM2 que se acumula na clula. O acmulo de lipdeos complexos na clula nervosa bloqueia sua ao, levando deteriorao do sistema nervoso e paralisia.
C E D E R J 153
AULA
MDULO 1
A anemia falciforme
A hemoglobina uma protena responsvel pelo transporte de gs oxignio em nosso corpo. Ela consiste tipicamente em dois pares diferentes de cadeias polipeptdicas. Na hemoglobina normal do adulto (Hemoglobina A - HbA), essas cadeias so designadas (alfa) e (beta). As quatro cadeias se organizam formando uma estrutura globular com a frmula A2A2, onde o ndice
A
indica que as cadeias polipeptdicas
e so do tipo normal e o ndice 2, que esto representadas em dose dupla (Figura 8.9). A cadeia codificada por um gene localizado no cromossomo 16, enquanto o gene que codifica a cadeia est no cromossomo 11.
Figura 8.9: Os quatro nveis de organizao da hemoglobina humana estrutura primria, secundria, terciria e quaternria da protena, com destaque para a cadeia .
154 C E D E R J
A anemia falciforme (do latim falcis, foice) ou siclemia (do ingls sickle, foice) uma doena hereditria, caracterizada por uma severa anemia, freqentemente fatal. Como j vimos, este tipo de anemia causada por uma mutao na cadeia beta da hemoglobina que resulta na mudana de um cido glutmico por uma valina na posio 6. Essa cadeia mutante denominada S e a hemoglobina que possui a Hemoglobina S (HbS), cuja frmula A2S2 (Tabela 8.1). As hemoglobinas alteradas tendem a se agregar, formando massas em forma de basto que distorcem as hemcias para a forma de foice. Essas hemcias deformadas no se deslocam com facilidade pelos finos capilares sangneos, causando danos a diversos tecidos, principalmente ossos e rins. Alm disso, as hemcias deformadas rompem-se com facilidade.
Tabela 8.1: Os trs possveis gentipos quanto aos dois alelos, A e S, seus respectivos fentipos e as relaes de dominncia entre estes alelos. Observe que o conceito de dominncia relativo, dependendo do que estamos considerando como o fentipo.
Gentipo
Fentipo quanto composio das molculas de hemoglobina
Fentipo quanto forma das hemcias em condies normais de oxignio
Fentipo quanto forma das hemcias em condies de baixa concentrao de oxignio
AA
A2A2 (HbA) A2A2 , A2S2 (HbA e HbS) e

A A 2
forma normal
forma normal deformao intermediria forma acentuada de foice
AS
forma normal forma acentuada de foice
S S
A2S2 (HbS)
Relao de dominncia entre os alelos
codominncia
dominncia completa
dominncia incompleta
Com as aulas que vimos at aqui esperamos que voc se sinta familiarizado com a organizao do genoma e com os processos de expresso e transmisso da herana biolgica. Esperamos tambm que voc consiga estabelecer as relaes entre as Leis de Mendel e os processos celulares.
C E D E R J 155
AULA
MDULO 1

A nossa prxima aula ser uma introduo metodologia de anlise gentica na espcie humana.
RESUMO
Os genes so segmentos da molcula de DNA responsveis por armazenar e transmitir as informaes genticas. O DNA serve de molde para a fabricao de um RNA - transcrio, o qual pode conter informao para sntese de uma protena - traduo. As protenas podem ter funes estruturais ou enzimticas, sendo estas determinadas pela seqncia de aminocidos da protena. A seqncia de nucleotdeos do DNA pode ser alterada (mutao) por: insero, deleo ou substituio de um ou mais pares de nucleotdeos. As mutaes no DNA podem causar modificaes na seqncia de aminocidos da protena correspondente com perda ou modificao de sua funo. Contudo, nem toda variao no DNA resulta em variao no fentipo. Qualquer mutao que ocorra dentro de um determinado gene produzir um alelo novo deste gene. Chamamos de dominncia a relao entre dois alelos de um mesmo gene que definida pelo fentipo de indivduos heterozigticos para esses dois alelos. Segundo as relaes de dominncia, os alelos podem apresentar: dominncia completa, dominncia incompleta, codominncia ou sobredominncia. Um alelo que codifica uma protena defeituosa recessivo quando, em heterozigose com o alelo normal, esse ltimo capaz de fornecer a quantidade adequada de protena para suprir as necessidades da clula (haplo-suficincia). O conceito de dominncia relativo, dependendo do que estamos considerando como o fentipo.
156 C E D E R J
EXERCCIOS
1. Na aula passada, voc iniciou a construo de um glossrio. Continue esta atividade incluindo agora as palavras em negrito no texto desta aula. 2. Preencha os espaos em branco nas frases usando o termo abaixo mais apropriado. (a) alelo (b) loco (c) gene (d) mutao 2.1. ( (e) heterozigtico (f) homozigtico (g) dominncia (h) codominncia (i) diplide (j) haplide
) pode ser definido como a poro do cromossomo (um segmento da
molcula da hereditariedade) que produz um efeito detectvel no indivduo. 2.2. Uma alterao hereditria em uma caracterstica chamada ( 2.3. Cada uma das formas detectveis de um ( 2.4. A posio que um determinado ( ) chamada ( ). ). ).
) ocupa no cromossomo seu (sua) (
2.5. O zigoto, e conseqentemente o indivduo, resultante da unio de gametas portadores de um mesmo tipo de alelo chamado ( ).
2.6. O zigoto, e conseqentemente o indivduo, resultante da unio de gametas portadores de alelos diferentes de um mesmo gene denominado ( ).
2.7. O fenmeno de um alelo de um gene mascarar o efeito de um outro alelo do mesmo gene chamado ( ).
2.8. No cruzamento entre um indivduo com um carter hereditrio dominante e outro com o carter recessivo, todos os descendentes apresentaram o carter dominante. Pode-se dizer, portanto, que, muito provavelmente, o tipo parental dominante ( ).
2.9. Em um cruzamento entre um indivduo com um carter hereditrio dominante e outro com o carter recessivo, foram produzidos descendentes com o carter dominante e descendentes com o carter recessivo. Esse resultado permite concluir que o tipo parental dominante ( ).
2.10. Um indivduo que apresenta em suas clulas apenas um alelo de cada gene ( ).
2.11. Um indivduo que apresenta em suas clulas um par de alelos de cada gene ( ).
C E D E R J 157
AULA
MDULO 1
3. Em ervilhas doces, a sntese do pigmento prpura nas ptalas controlada por dois genes, B e D. O alelo normal do gene B, alelo B1, codifica a enzima B que participa da primeira etapa da via metablica de sntese do pigmento prpura. O alelo D1 do gene D codifica a enzima D, que participa da segunda etapa da via.
alelo B1 do gene B codifica Enzima B (funcional) transforma
alelo D1 do gene D codifica Enzima D (funcional) transforma
substncia inicial (branca) ---------- substncia intermediria (azul) ---------- pigmento final (prpura)
a. Que cor voc espera que tenha a ptala de uma planta homozigtica para
uma mutao recessiva que impea a primeira reao?
b. Que cor voc espera que tenha a ptala de uma planta homozigtica para
uma mutao recessiva que impea a segunda reao?
c. Qual o gentipo das plantas citadas em a e b, segundo os dois genes em

questo? Escolha o smbolo para os alelos mutantes recessivos. 4. Imagine que, ao dosar a enzima codificada pelo gene E, em Drosophila melanogaster, um pesquisador observou os seguintes resultados, dependendo do gentipo dos indivduos: Homozigotos selvagens (normais) = 20 unidades da enzima; Homozigotos para um alelo mutante = 0 unidades da enzima; Heterozigotos = 10 unidades da enzima. O pesquisador observou tambm que as moscas heterozigticas tinham o mesmo fentipo das homozigticas mutantes. Interprete esses resultados.
158 C E D E R J
5. Normalmente o hormnio do crescimento (tiroxina) produzido a partir da seguinte reao:
(enzima)
Tirosina -------------------- Tiroxina
Se a enzima que catalisa essa reao apresentar uma deficincia, o indivduo passa a apresentar uma doena conhecida como cretinismo, uma sndrome rara que consiste no crescimento lento, alargamento da tireide e retardo mental. Sabendo que o alelo normal que codifica a enzima em questo haplo-suficiente, voc espera que essa doena seja herdada com um fentipo recessivo ou dominante?
ATIVIDADE 1
Alm do sistema de grupos sangneos ABO, existem outros sistemas sangneos na espcie humana. Faa uma pesquisa sobre a gentica da determinao de pelo menos trs desses sistemas, incluindo o sistema ABO. Para cada sistema, procure descobrir a posio cromossmica do gene, o nmero de alelos j identificados, a relao de dominncia entre os alelos e, se possvel, a diferena molecular entre os alelos e como funcionam estes genes. Envie sua pesquisa ao tutor conforme a data indicada no guia do aluno. Esta e outras pesquisas futuras podem ser feitas atravs do material disponvel no plo, em outras bibliotecas e, tambm, na Internet.
ATIVIDADE 2
A doena de Huntington (DH) uma doena monognica que se caracteriza pela degenerao das clulas nervosas. Diferente da fibrose cstica, a DH tem herana autossmica dominante. Assim, basta uma cpia do gene conter o alelo mutante para o indivduo apresentar a doena. Faa uma pesquisa e procure obter informaes sobre essa doena, principalmente no que se refere s bases moleculares de sua causa.
C E D E R J 159
AULA
MDULO 1
APNDICE
Tabela 8.2: O cdigo gentico. Cada trinca de nucleotdeos (ou cdons) referese seqncia de nucleotdeos do mRNA e carrega a informao para que o respectivo aminocido seja adicionado protena em construo. Marcadas em cinza esto as trincas de iniciao (AUG) e trmino (UAA, UAG e UGA) da traduo de qualquer protena. O nome de cada aminocido est abreviado da seguinte maneira: fenilalanina (Phe), leucina (Leu), isoleucina (Ile), metionina (Met), valina (Val), serina (Ser), prolina (Pro), treonina (Thr), alanina (Ala), tirosina (Tyr), histidina (His), glutamina (Gln), asparagina (Asn), lisina (Lys), cido asprtico (Asp), cido glutmico (Glu), cistena (Cys), triptofano (Trp), arginina (Arg), glicina (Gly).
160 C E D E R J
objetivos
Ao final desta aula,voc dever ser capaz de: Identificar as principais formas de transmisso dos genes nas famlias humanas. Construir heredogramas. Estabelecer os critrios utilizados para reconhecer os diferentes padres de herana monognica atravs de heredogramas. Aplicar as leis da probabilidade para clculo de riscos associados s questes genticas.
Recorde os fundamentos de probabilidade: leis da adio e multiplicao e tambm distribuio binomial probabilidades binomiais.
AULA
Introduo Gentica Humana: anlise de caractersticas monognicas
Pr-requisitos
Gentica Bsica | Introduo Gentica Humana: anlise de caractersticas monognicas
To logo as leis que governam a transmisso da herana biolgica foram descobertas, procurou-se estender os estudos da Gentica espcie humana. Porm existem algumas peculiaridades no estudo dos padres de herana em seres humanos decorrentes da inadequao de nossa espcie como material experimental. Ao contrrio de espcies como as POLIMORFISMO
GENTICO
ervilhas ou as drosfilas, a espcie humana apresenta: pequeno nmero de indivduos na prole; longo tempo de gerao; e impossibilidade de manejar acasalamentos. Assim, embora as leis que regem a transmisso da herana em ervilhas ou humanos possam ser semelhantes, os mtodos utilizados para seus estudos so diferentes. O estudo da herana de caracteres na espcie humana constitui um ramo especial da Gentica conhecido como Gentica Humana. A Gentica Humana se tornou uma rea de particular interesse dos cientistas por sua importncia na prtica clnica, atravs de seu papel na etiologia (origem) de vrios distrbios. Muitos genes humanos foram identificados atravs de um distrbio clinicamente significativo causado por um alelo mutante desse gene. Praticamente qualquer doena resultado da ao combinada de genes e do ambiente, embora o papel relativo de cada um desses fatores possa variar. Os principais distrbios causados total ou parcialmente por fatores genticos podem ser de trs tipos: monognicos, cromossmicos ou multifatoriais. Nesta aula nos concentraremos no estudo das caractersticas com herana monognica, analisando exemplos relacionados tanto a distrbios quanto a
POLIMORFISMOS GENTICOS
O conceito de polimorfismo gentico referese freqncia dos alelos de um determinado gene em uma populao. Diz-se que um gene apresenta polimorfismo quando este possui pelo menos dois alelos normais na populao, tendo o alelo mais raro uma freqncia superior a 1%. Na espcie humana, por exemplo, a caracterstica forma do lbulo (ou lobo) da orelha (solto ou preso) determinada por um gene que possui pelo menos dois alelos, sendo o alelo que determina o estado solto dominante sobre o que determina o estado preso. Estes dois alelos esto em alta freqncia na populao, o que pode ser constatado pela alta freqncia de indivduos com cada um dos tipos de fentipos. Dizemos ento que o gene que condiciona a forma do lbulo de orelha polimrfico e, tambm, que esta caracterstica polimrfica na populao humana. Muitas das caractersticas em diversas espcies so polimrficas.
na espcie humana.
Caractersticas multifatoriais, ou seja, condicionadas pela interao de vrios genes e destes com o ambiente, sero estudadas em aulas futuras, bem como alguns dos distrbios causados pela variao do nmero ou estrutura dos cromossomos humanos. Nos estudos da determinao do padro de herana de caractersticas humanas no podemos realizar cruzamentos experimentais. As anlises so feitas a partir do levantamento do histrico familiar, o que permite avaliar se uma determinada caracterstica ou no hereditria e de que modo herdada. Esse levantamento feito a partir de uma representao grfica denominada heredograma (do latim hereditariu), tambm conhecida como genealogia, rvore genealgica ou pedigree.
162 C E D E R J
A CONSTRUO DE HEREDOGRAMAS
Na construo de heredogramas usamos smbolos para os indivduos de uma famlia e suas relaes de parentesco. A Figura 9.1 apresenta a simbologia usada na construo de heredogramas e a Figura 9.2 apresenta o exemplo de um heredograma.
Figura 9.1: Smbolos usados nos diagramas de heredogramas.
C E D E R J 163
AULA
MDULO 1
Figura 9.2: Heredograma de uma famlia. Os smbolos em negrito representam indivduos afetados por uma anomalia gentica
Atividade
EXPRESSIVIDADE
VARIVEL
Procure construir o heredograma de sua famlia quanto caracterstica forma do lbulo de orelha. Seja rigoroso na utilizao dos smbolos, inclua o maior nmero possvel de indivduos e procure determinar os seus gentipos. Ao fazer esta atividade, voc ver que para alguns indivduos a classificao entre solto ou preso muito fcil de ser feita, mas para outros nem tanto. Uma outra coisa que eventualmente acontece o aparecimento de casos no explicveis a partir do fentipo dos pais. Estes casos podem ser explicados pelo fato da ao gnica ser, mais ou menos, afetada por fatores biolgicos ou fsicos do ambiente, que podem resultar na EXPRESSO VARIVEL dos alelos de um gene ou na sua PENETRNCIA
INCOMPLETA. Ns voltaremos a estes conceitos na Aula 11 e veremos tambm
Diz-se do alelo que no se manifesta exatamente da mesma forma em todos os indivduos que o possuem.
PENETRNCIA
INCOMPLETA
Diz-se do alelo que, mesmo estando presente, pode ou no se manifestar no indivduo cujo gentipo deveria express-lo fenotipicamente.
como analisar genealogias que apresentem estes e outros fenmenos. No momento, basta saber que voc no deve se assustar caso seu heredograma apresente algum resultado inesperado.
164 C E D E R J
ANLISE DE HEREDOGRAMAS E OS PADRES DE HERANA MONOGNICA

A fim de estabelecer o padro de transmisso de uma caracterstica, a primeira etapa a construo do heredograma. A anlise do padro apresentado pelo heredograma permite que se determine o padro mais provvel de transmisso da herana para a caracterstica em questo. Muitas vezes ficamos inclinados a fazer isso atravs de tentativa e erro, considerando cada um dos padres de herana possveis (autossmica dominante, autossmica recessiva, ligada ao X dominante, ligada ao X recessiva) e, para cada uma das possibilidades, tentando ajustar os gentipos dos indivduos da famlia. Essa, sem dvida, no a melhor, nem a forma mais elegante de analisarmos um heredograma. Ento, como proceder? Vamos olhar os heredogramas como um todo e procurar padres que nos indiquem o tipo de herana mais provvel. No Quadro 9.1 esto algumas dicas sobre os diferentes padres de herana que facilitam o seu reconhecimento.
Quadro 9.1: Critrios para avaliao do padro de herana de caractersticas monognicas em heredogramas
Autossmica recessiva 1. Freqncias aproximadamente iguais de machos e fmeas afetados. 2. Quase sempre o trao pula geraes. 3. O trao pode aparecer em irmos sem estar presente em seus pais.
Autossmica dominante 1. Freqncias aproximadamente iguais de machos e fmeas afetados. 2. Em geral, o trao aparece em todas as geraes. 3. Pelo menos um dos pais de um indivduo afetado afetado
Ligada ao X recessiva 1. O trao mais comum nos homens do que nas mulheres. 2. No h transmisso de pai para filho. 3. Todas as filhas de um homem afetado so portadoras do alelo mutante.
Ligada ao X dominante 1. Normalmente, todas as filhas de um homem afetado sero afetadas. 2. No h transmisso de pai para filho.
C E D E R J 165
AULA
MDULO 1
Agora, baseado no exposto no Quadro 9.1, voc pode tentar determinar o tipo de herana mais provvel para os traos apresentados em negrito nos heredogramas da Figura 9.3. Procure fazer isso observando o padro geral do pedigree e no atravs de tentativa e erro. As respostas esto no final desta aula.
Figura 9.3: Heredogramas apresentando a herana de diversas caractersticas.
166 C E D E R J
APLICAO DOS CLCULOS DE PROBABILIDADES GENTICA HUMANA

Nas famlias humanas, o nmero de filhos produzidos por um casal tipicamente pequeno. Conseqentemente, as propores fenotpicas em geral se desviam significativamente de suas expectativas tericas. Vamos tomar um exemplo hipottico. Suponha um casal onde ambos os cnjuges sejam heterozigticos para um gene que possui dois alelos, F e f, sendo o alelo F dominante sobre o alelo f e condicionador do fentipo normal. Os indivduos que apresentam o alelo f em homozigose so afetados por uma determinada doena. Nosso conhecimento sobre a segregao dos alelos durante a formao dos gametas nos permite dizer que cada um dos membros deste casal formar 12 de seus gametas portando o alelo recessivo f e 12 portando o alelo dominante F. Como a fecundao ocorre ao acaso, se pudssemos obter os zigotos resultantes da fecundao de todos os gametas produzidos por este casal observaramos que: 14 seria homozigtico FF e normal; 12 seria heterozigtico Ff e, tambm, normal e 14 seria homozigtico ff e afetado.
Tabela 9.1: Probabilidades esperadas na prole de um casal heterozigtico para o gene F.
Gametas da Me
1/2 F
Gametas do Pai
1/2 f
1/2 F
1/4 FF normal 1/4 Ff normal
1/2 f
1/4 fF normal
1/4 ff afetado
Da mesma forma, se o casal tiver quatro filhos esperamos que 3 sejam normais e 1 afetado, certo? No, errado. Existem cinco possibilidades distintas: 1) 4 normais; 2) 3 normais e 1 afetado; 3) 2 normais e 2 afetados; 4) 1 normal e 3 afetados; 5) 4 afetados.
C E D E R J 167
AULA
MDULO 1
Intuitivamente, o segundo resultado parece ser o mais provvel, pois est de acordo com a proporo mendeliana 3:1. Mas esta no a forma correta de procedermos nesta anlise. Ao analisarmos esta questo, devemos tratar cada nascimento como um evento independente para o clculo da probabilidade. Ou seja, ao considerarmos um nascimento, a probabilidade de a criana em questo ser normal de 34. Se considerarmos os quatro nascimentos, a probabilidade de cada criana ser normal de 34, mas a probabilidade de as quatro crianas serem normais ser 34 34 34 34 = (34)4 = 81/256 (lembre-se da regra da multiplicao). De modo semelhante, a probabilidade de uma criana ser afetada ser de 14 e a probabilidade de as quatro crianas serem afetadas ser de (14)4 = 1/256. At aqui tudo bem, mas qual a probabilidade de o casal ter uma das quatro crianas afetada, independente do sexo da mesma? Novamente temos mais de uma possibilidade: 1) a primeira criana a nascer ser a afetada e as outras trs serem normais (ANNN); 2) a segunda criana a nascer ser a afetada e as outras trs serem normais (NANN); 3) a terceira criana a nascer ser a afetada e as outras trs serem normais (NNAN); 4) a quarta criana a nascer ser a afetada e as outras trs serem normais (NNNA). Vamos, ento, calcular a probabilidade para a possibilidade 1 (P(ANNN)), ou seja, a primeira criana ser a afetada e a segunda no ser afetada e a terceira no ser afetada e a quarta no ser afetada: 14 (= probabilidade da primeira ser afetada) 34 (= probabilidade da segunda ser normal) 34 (= probabilidade da terceira ser normal) 34 (= probabilidade da quarta ser normal) = 27/256. Da mesma forma, podemos calcular as probabilidades para as outras trs possibilidades (P(NANN), P(NNAN), P(NNNA)). Em todos os casos, a probabilidade ser a mesma, 27/256. Finalmente, a probabilidade de um dos filhos do casal ser afetado pela doena, no importando se o primeiro, ou o segundo, ou o terceiro ou o quarto igual a soma das probabilidades para cada uma das possibilidades, ou seja: 27/256 + 27/256 + 27/256 + 27/256 = 4 (27/256) = 108/256 (regra da adio). Agora a sua vez. Calcule a probabilidade de o casal ter apenas uma das quatro crianas normais.
168 C E D E R J
O resultado seria: P(NAAA) + P(ANAA) + P(AANA) + P(AAAN) = 4 (3/256) = 12/256. Na Tabela 9.2 voc pode conferir as probabilidades associadas a todas as possibilidades de fentipo para os quatro filhos do casal no exemplo em questo.
Tabela 9.2: Probabilidades associadas ao fentipo dos 4 filhos de um casal heterozigtico para um gene autossmico cujo alelo recessivo causa uma determinada doena. Normais 4 3 2 1 0 Afetados 0 1 2 3 4 Probabilidade 1 (34) (34) (34) (34) = 81/256 4 (34) (34) (34) (14) = 108/256 6 (34) (34) (14) (14) = 54/256 4 (34) (14) (14) (14) = 12/256 1 (14) (14) (14) (14) = 1/256
Ser que toda essa conversa no fez voc lembrar das Probabilidades Binomiais? isso, podemos obter uma generalizao para a estimativa das probabilidades associadas ao resultado de cruzamentos genticos aplicando a frmula da distribuio binomial. Isso pode ser feito sempre que a prole dos cruzamentos se segregar em duas classes distintas, por exemplo, macho ou fmea, normal ou afetado, dominante ou recessivo. A frmula para calcular a probabilidade binomial de que x indivduos da prole caiam em uma das classes :
[n! / (x! y!)] pxqy

Frmula 9.1
onde: n= nmero total da prole; x= nmero de indivduos da prole que pertence primeira de duas classes possveis; y= nmero de indivduos da prole que pertence segunda de duas classes possveis; p= probabilidade de cada indivduo da prole pertencer primeira das duas classes; q= probabilidade de cada indivduo da prole pertencer segunda das duas classes.
C E D E R J 169
AULA
MDULO 1
No precisa se assustar. Com um exemplo tudo fica mais fcil. Voltando ao casal em que ambos eram heterozigticos para o gene F, vamos usar a frmula da distribuio binomial para calcular a probabilidade de, tendo 4 filhos, um desses ser afetado. Neste caso, podemos usar a probabilidade binomial, pois na prole temos duas classes possveis, a primeira, ser normal; e a segunda, ser afetado. Temos ento que: n = 4; x = 3; y = 1; p = 34; q = 14. Aplicando estes valores Frmula 9.1 obtemos: [4! / (3! 1!)] (34) 3 (14)1 = [ (4321) / (3211) ] 27/64 1/4 = 4 27/256 = 108/256, valor que confere com o que estimamos anteriormente. Vamos ver mais um exemplo para garantir que o assunto est entendido. Considere que um casal pretende ter trs filhos e quer saber qual a probabilidade de todos serem do sexo masculino. Temos duas classes possveis para a prole, a primeira ser do sexo masculino; a segunda, ser do sexo feminino. Aplicamos a frmula com os valores de n = 3; x = 3; y = 0; p = 12; q = 12 . Assim, [3! / (3! 0!)] (12)3 (12)0 = 27/27 1/8 = 1/8, lembrando que 0! = 1 e que qualquer nmero elevado a zero tambm igual a 1. A resposta, ento, que o casal tem uma chance de 1/8 (ou 0,125 ou 12,5% ) de, tendo trs filhos, os trs serem do sexo masculino. Uma outra aplicao das leis da probabilidade em Gentica Humana ocorre quando os futuros pais desejam saber se seus filhos correm risco de herdar uma determinada condio, especialmente se outros membros da famlia forem afetados. A avaliao do risco requer um bom conhecimento de Gentica, aliado familiaridade com probabilidades e estatstica. Esta anlise se inicia pela construo da genealogia da famlia, visando a determinar o mais provvel padro de herana e, quando possvel, o gentipo dos pais. Agora voc participar do aconselhamento gentico na questo a seguir. A amelognese imperfeita por hipomaturao uma alterao do esmalte dos dentes, em que estes se tornam pouco resistentes e sua colorao varia de branco-leite a um marrom-claro meio transparente.
170 C E D E R J
O esmalte quebradio, desprendendo-se em pequenos fragmentos. Trs casais de uma mesma famlia procuraram o servio de aconselhamento gentico para saber o risco de terem filhos afetados por essa anomalia, j que h casos na famlia. A Figura 9.4 apresenta o heredograma da famlia em questo. As pessoas que solicitaram a informao foram o casal III-3 e III-4 e o casal II-7 e II-8. O terceiro casal formado pelos indivduos IV-1 e IV-2, que pretendem se casar, mas esto receosos quanto probabilidade de terem filhos com a anomalia. O que voc diria a cada um destes casais?
Figura 9.4: Heredograma de uma famlia que apresenta amelognese imperfeita por hipomaturao.
A anlise do heredograma permite concluir que este tipo de amelognese imperfeita apresenta padro de herana autossmico recessivo. Alm das caractersticas j listadas no Quadro 9.1, observase ainda que o casal III-3 e III-4 so primos. O que isso tem a ver? A maioria dos alelos dos distrbios autossmicos recessivos est presente em portadores (heterozigotos) e no nos homozigotos. Eles podem ser transmitidos nas famlias por numerosas geraes sem jamais aparecer na forma homozigtica. De fato, acredita-se que todas as pessoas possuem pelo menos alguns alelos de distrbios autossmicos recessivos, que em homozigose poderiam ser nocivos ou mesmo letais. A presena desses alelos recessivos revelada, quando o portador se acasala com algum que possua a mesma mutao, ou uma outra muta-
C E D E R J 171
AULA
MDULO 1
o no mesmo loco, e os dois alelos deletrios so herdados por algum de seus filhos. A chance de isto acontecer muito aumentada se os pais forem aparentados, pois numa mesma famlia vrios indivduos podem ser portadores do mesmo alelo mutante que transmitido ao longo das geraes. A consanginidade dos genitores de um paciente com distrbio gentico uma forte evidncia (embora no comprove) em favor da herana autossmica recessiva. Voltando anlise do heredograma, os indivduos III-3 e III4 so heterozigticos (Aa) para o alelo em questo, o que indica uma probabilidade de 14 (25%) de que seu prximo filho,
Quando analisamos um heredograma de uma anomalia gentica rara devemos considerar que os indivduos provenientes da populao, ou seja, os indivduos no-afetados da populao que se casam com algum da famlia, so homozigticos para o alelo normal do gene em questo. Isto porque, no caso de anomalias raras, o alelo mutante est em baixa freqncia na populao, sendo muito pequena a chance de um indivduo da populao em geral ser portador desse alelo. Entretanto, a chance de um indivduo no-afetado da famlia em questo ser portador desse alelo mutante depender da anlise do fentipo e do gentipo de seus ancestrais e, quando possvel, da anlise de seus descendentes.
independente do sexo, seja afetado pela anomalia. No caso do casal II-7 e II-8, a mulher (II-8), sendo afetada, uma homozigota recessiva (aa). Quanto ao homem (II-7), ele um indivduo que no pertence a nenhuma das duas linhagens onde o alelo que causa a amelognese imperfeita est segregando. Logo, a chance de ele ser portador deste alelo igual a chance de qualquer indivduo da populao, ou seja, muito baixa. Podemos consider-la desprezvel, sendo muito provvel que o II-7 seja homozigoto dominante (AA). A chance de este casal ter uma criana afetada
pela anomalia em questo , aproximadamente, zero. No entanto, todos os seus filhos, independente do sexo, sero portadores do alelo a. No caso do casal IV-1 e IV-2, o clculo da probabilidade um pouquinho mais complicado, pois no sabemos se eles so ou no portadores do alelo a. Teremos ento que calcular a probabilidade de eles serem portadores. Comeando por IV-2, como j sabemos que ele no afetado, a probabilidade de ser portador passa a ser 2/3. Isto porque, como sua irm (IV-3) afetada (aa), podemos deduzir que tanto sua me (III-3) quanto seu pai (III-4) sejam heterozigticos (Aa). Assim, considerando as quatro possibilidades genotpicas resultantes de um cruzamento entre heterozigotos (AA, Aa, Aa, aa), a probabilidade de IV-2 ser portador ser de 2 chances am 3 (AA, Aa, Aa, aa), pois definitivamente este indivduo no pode ser aa, j que ele no afetado. Vamos agora calcular a probabilidade de IV-1 ter herdado o alelo a. A av paterna, II.2, heterozigtica e precisaria passar o alelo a para o indivduo III-1, pai de IV-1. H uma chance de 12 disso ter ocorrido. Havendo recebido o alelo a, o indivduo III-1 precisaria ter passado o
172 C E D E R J
alelo a para IV-1, chance de 12 tambm. A probabilidade desses eventos terem ocorrido igual ao produto das probabilidades de cada um deles, ou seja, 12 x 12 = 14. Resumindo, 2/3 a chance de IV-2 ser heterozigtico e 1/4 a chance de IV-1 ser heterozigtica. A chance de o casal ter uma criana afetada ser igual chance de os dois serem heterozigticos (= 2/3 1/4) multiplicada pela chance de a criana receber dos dois pais o alelo a (= 1/4). Isto , 2/3 1/4 1/4 = 2/48 = 1/24 (= 0,04 = 4%). Vamos conferir as respostas do exerccio da Figura 9.3? A. Autossmica dominante; B. Ligada ao X dominante; C. Ligada ao X recessiva; D. Autossmica recessiva; E. Ligada ao X dominante; F. Autossmica recessiva; G. Autossmica dominante; H. Ligada ao X recessiva.
provvel que, em alguns dos casos, voc tenha ficado na dvida entre dois padres possveis, mas lembre-se de que, ao analisarmos um pedigree, procuramos determinar o padro de herana mais provvel. Veja, por exemplo, o caso do heredograma B. Algum poderia sugerir que a herana do trao representado pelos smbolos em negrito pudesse ser autossmica dominante e no ligada ao X dominante. verdade que os dois tipos de herana podem explicar o heredograma B, mas temos que escolher o mais provvel. Note que o homem da primeira gerao apresenta o trao e passa o alelo correspondente para todas as suas filhas, mas para nenhum de seus filhos. Isto uma forte indicao de que o padro de herana em questo seja ligado ao X dominante, pois na herana ligada ao X as filhas recebem um de seus cromossomos X do pai, enquanto os filhos recebem do pai o cromossomo Y e nunca o cromossomo X. menos provvel que o padro apresentado tenha ocorrido por puro acaso.

Na prxima aula terica vamos ver que diversos fatores podem alterar o padro de herana esperado, incluindo a inativao do cromossomo X, a idade do indivduo e interaes do gentipo com o ambiente, por exemplo. Contudo, nossa prxima aula ser uma prtica onde apresentaremos estratgias para sedimentar os conceitos e as relaes conceituais que vimos at aqui. Verifique, no Guia do Aluno, a data e horrio em que voc deve se dirigir ao plo e no esquea de levar o resultado das propostas de atividades desta aula e das anteriores para discusso com seus colegas e tutores.
C E D E R J 173
AULA
MDULO 1
RESUMO
Embora as leis que regem a transmisso da herana em ervilhas ou humanos possam ser semelhantes, os mtodos utilizados para seus estudos so diferentes. O estudo da herana de caracteres na espcie humana constitui um ramo especial da Gentica conhecido como Gentica Humana. Nos estudos da determinao do padro de herana de caractersticas humanas no podemos realizar cruzamentos experimentais. As anlises so feitas a partir do levantamento do histrico familiar, o que permite avaliar se uma determinada caracterstica ou no hereditria e de que modo herdada. Esse levantamento feito a partir de uma representao grfica denominada heredograma (do latim hereditariu), tambm conhecida como genealogia, rvore genealgica ou pedigree. Os resultados de uma anlise de pedigree dependem da distribuio dos alelos atravs dos gametas passados de pais para filhos e permitem que consultores genticos determinem a probabilidade de uma pessoa herdar uma determinada caracterstica.
EXERCCIOS
1. Nos heredogramas abaixo, indique com S ou N caso estes sejam compatveis com os padres de herana listados.
A Autossmica recessiva Autossmica dominante Ligada ao X recessiva Ligada ao X dominante Ligada ao Y
174 C E D E R J
2. Qual o mais provvel padro de herana apresentado nos heredogramas abaixo? Considere que as caractersticas em questo so doenas genticas que tm freqncia muito baixa na populao. Logo, os indivduos que vm de fora da famlia devem ser considerados homozigotos para o alelo normal, exceto se houver alguma evidncia contrria.
C E D E R J 175
AULA
MDULO 1
3. Catarina est grvida pela segunda vez. Seu primeiro filho, Dagoberto, apresenta fibrose cstica (FC). Catarina tem dois irmos, Csar e Daniel, e uma irm, Diva. Daniel e Diva so solteiros. Csar casado com uma mulher no aparentada, Carolina, e tem uma filha, Dbora. Os pais de Catarina so Roberto e Eliza. Brbara, irm de Eliza, me do marido de Catarina. No h histria familiar prvia de FC. a) Construa o heredograma. b) Qual o padro de herana da FC? c) Qual o risco de o prximo beb apresentar fibrose cstica? d) Nesse heredograma, quais so os heterozigotos certos? 4. Analise o seguinte heredograma:
1 I 1 II 1 III 2 3 4 5 2 3 4 5 6 7 8 2 3 4
Determine: a) O padro de herana do carter. b) Os homozigotos certos. c) Os heterozigotos certos. d) A probabilidade de o casal III-3 e III-4 vir a ter trs crianas, uma sem o carter e duas com o carter.
5. A carncia de esmalte dentrio e o daltonismo so anomalias condicionadas por genes de herana ligada ao X. Uma mulher com carncia de esmalte e viso normal, que tem pai daltnico com esmalte dentrio normal e me com carncia de esmalte e viso normal casada com um homem daltnico com esmalte dentrio normal. Esse casal tem dois meninos, um com carncia de esmalte dentrio e daltonismo e outro daltnico com esmalte dentrio normal. Explique como se originaram esses meninos.
176 C E D E R J
6. No pedigree abaixo, o indivduo em negrito afetado por uma doena autossmica recessiva rara. Estime a probabilidade de uma criana do casal III-1 III-2 apresentar essa doena. Note que este pedigree est apresentado de forma simplificada, suprimindo alguns indivduos da famlia.
C E D E R J 177
AULA
MDULO 1
Atividade prtica
10
objetivos
Ao final desta aula, voc dever ser capaz de: Relacionar as Leis de Mendel com a meiose. Analisar a transmisso da herana biolgica na famlias.
AULA
Observao
Esta aula deve ser realizada no plo, sob a superviso do seu tutor.
Gentica Bsica | Atividade prtica
INTRODUO
A diviso celular um dos temas mais importantes do Ensino Mdio, sendo pr-requisito indispensvel para a compreenso mais aprofundada no s dos processos genticos mas de grande parte dos fenmenos biolgicos. Desta forma, os processos de mitose e meiose devem ser estudados com certo grau de detalhamento e profundidade. Voc j viu, nas aulas anteriores, que todas as clulas so formadas pela diviso de clulas preexistentes. Quando uma clula se divide, a informao contida no seu DNA j deve estar precisamente duplicada e, ento, cada cpia deve ser transferida para cada clula-filha atravs de uma srie de processos complexos. Vamos, agora, relembrar algumas caractersticas desses processos (em caso de dvida, d uma olhada nas aulas de diviso celular). A maioria das divises celulares que ocorrem nos organismos envolve um processo denominado mitose, que assegura a cada clula-filha uma cpia de cada cromossomo e, conseqentemente, de cada gene, proveniente das clulas parentais. Entretanto, durante a reproduo sexual em eucariotos dois gametas se fundem para formar uma nica clula, chamada zigoto. Cada gameta deve conter apenas metade do nmero de cromossomos parentais, garantindo a manuteno correta do nmero de cromossomos nos zigotos. Por essa razo, os organismos que realizam a reproduo sexual necessitam de um tipo diferenciado de diviso, chamada meiose, que reduz o nmero de cromossomos metade. Acredita-se que, evolutivamente, a meiose tenha se desenvolvido como uma variao da mitose, permitindo o surgimento da reproduo sexuada. Agora, com o conhecimento obtido nas aulas anteriores, voc est pronto para realizar a atividade proposta a seguir:
180 C E D E R J
ATIVIDADE 1
RELACIONANDO MEIOSE COM AS LEIS DE MENDEL
Para esta atividade voc precisar dos seguintes materiais: Massa de modelar de duas cores diferentes (cromossomos); Etiquetas adesivas de 2 a 3cm de comprimento (regio dos genes); Barbante ou linha (fibras cromossmicas do fuso e membrana celular); Contas (cinetcoros e centrolos).
Forme com seus colegas um grupo de, no mximo, quatro alunos. Cada grupo receber bastes de massa de modelar de duas cores diferentes. Nosso objetivo ser analisar a formao dos gametas e a fecundao em um casal, considerando dois genes para os quais o homem sabidamente heterozigtico e a mulher homozigtica para o alelo normal. Cada grupo dever representar uma clula germinativa do testculo do homem heterozigtico durante a meiose. Para simplificar, apenas os cromossomos portadores dos genes em questo sero representados. Ou seja, dos 22 pares de cromossomos autossmicos de uma clula humana, representaremos o cromossomo 7, que grande e submetacntrico, e o cromossomo 19, que bem menor e metacntrico. Para auxili-lo, utilize o caritipo humano ilustrado na Figura 10.1. Cada um dos homlogos de um par deve ser modelado com cor diferente, representando sua origem materna ou paterna. Inicie essa atividade representando os cromossomos no perodo G1 da intrfase. Note que, embora nessa fase do ciclo celular os cromossomos estejam descondensados e no seja possvel identificlos, estamos construindo um modelo e, com fins didticos, representaremos os cromossomos j como bastes visveis nessa fase.
C E D E R J 181
AULA
TEORIA CROMOSSMICA DA HERANA:
10 MDULO 1
Figura 10.1: Montagem do caritipo humano a partir dos cromossomos de uma clula durante a metfase da mitose.
Agora coloque os pares de alelos dos dois genes (descritos a seguir) nos cromossomos autossmicos em questo. Para isso, utilize as etiquetas adesivas, representando os alelos.
!
Gene F - gene que condiciona a fibrose cstica, doena caracterizada por uma disfuno pancretica e pulmonar, que normalmente leva o indivduo morte nas primeiras dcadas de vida. Est localizado no brao longo do cromossomo 7. O alelo recessivo (f) condiciona a doena, e o dominante (F) d a condio normal. Gene H - gene que condiciona a hipercolesterolemia familiar, doena caracterizada pelos elevados nveis de colesterol no organismo. Est localizado no cromossomo 19. O alelo dominante (H) condiciona a doena, e o recessivo (h) d a condio normal.
O homem em questo heterozigtico para estes dois genes (FfHh), isto , no apresenta fibrose cstica, porm apresenta hipercolesterolemia familiar. Sabe-se que seu primo materno possui fibrose cstica e seu pai hipercolesterolemia familiar. Use estas informaes para distribuir os alelos nos cromossomos homlogos de cada um dos pares.
182 C E D E R J
1. Agora, pense: quantos tipos de gametas este indivduo dever formar? Quais? Anote sua primeira idia. __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ _____ hora de preparar sua "clula" para entrar em diviso, ou seja, duplicar os cromossomos (perodo S da intrfase). Em seguida, voc deve simular as fases da meiose, utilizando os cromossomos em questo e representando os centrolos nos plos das clulas e as fibras cromossmicas do fuso acromtico. No entanto, considere, sempre, que a permuta entre as cromtides no-irms ocorra entre o gene considerado e o telmero, para os dois pares de homlogos. Interrompa a sua simulao na metfase I da meiose e aguarde que o tutor v sua mesa para acompanhar as fases subseqentes da diviso at a formao dos gametas. Esquematize as fases observadas em uma folha de papel e responda s questes: 2. Quantos tipos de gametas a clula que voc simulou formou? Quais? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ _____ Compare seus resultados com os dos demais grupos. Observe as propores obtidas.
3. Como voc explica, considerando este indivduo duplo-heterozigtico, que cada uma de suas clulas ao sofrer meiose s forma dois tipos de gametas, ao passo que o indivduo forma quatro tipos de gametas (FH, Fh, fH, fh)? __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ _________
C E D E R J 183
AULA
10 MDULO 1
Note que uma clula que sofra permuta entre o gene em questo e o centrmero formar os quatro tipos de gametas. No entanto, a freqncia de clulas gamticas cuja permuta ocorre justamente nessa condio varia segundo a distncia entre o gene em questo e o centrmero. Como no a permuta que explica a formao dos quatro tipos de gametas produzidos pelo indivduo duplo-heterozigtico na mesma proporo (1:1:1:1), que outro fenmeno poderia ser o responsvel pela formao dos diferentes gametas nessa proporo? Voc se lembra de que, durante a anfase I, os cromossomos dos dois pares de homlogos podem segregar de forma independente, uns dos outros, de acordo com a Segunda Lei de Mendel? Como esse um processo ao acaso, assumimos que em 50% das clulas os cromossomos de origem materna iro para um dos plos e os de origem paterna para o outro. Nos outros 50%, cada um dos plos receber o membro de um dos pares de origem paterna, enquanto o membro do outro par ser de origem materna (reveja a Figura 6.3 da Aula 6, para que fique claro). Assim, se pudssemos analisar o conjunto de gametas obtidos a partir todas as clulas germinativas do indivduo, esperaramos observar a formao de 25% de cada tipo. Pense sobre isso e discuta com seus colegas e tutor.
4. Simule, agora, cinco fecundaes entre os gametas masculinos e femininos do casal em questo. Determine os gentipos e fentipos dos cinco filhos resultantes destas fecundaes:
INDIVDUO 1 2 3 4 5
GENTIPO
FENTIPO
184 C E D E R J
5. Construa o heredograma da famlia formada. Discuta com seus colegas a utilizao de heredogramas nos estudos da herana na espcie humana.
HEREDROGRAMA
6) Calcule a probabilidade de o primeiro filho desse casal, casando-se com uma pessoa normal da populao, vir a ter um filho afetado por fibrose cstica ou por hipercolesterolemia familiar. ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________
C E D E R J 185
AULA
10 MDULO 1
Gentica Bsica
Gabarito
Aula 1
1. O fato o que a natureza nos apresenta: seres vermiformes surgem em cadveres em decomposio. A hiptese uma explicao sobre o porqu de um fenmeno: h uma transformao espontnea da matria em decomposio em seres vermiformes. A deduo uma previso do que vai ocorrer em determinada situao, tendo como base uma explicao provisria para um fato: se h uma transformao espontnea da matria em decomposio em seres vermiformes, tanto nos frascos cobertos como nos abertos dever haver o surgimento desses seres. O teste da hiptese por falseabilidade: ao fazer o experimento sugerido pela deduo acima, Redi vericou que os seres vermiformes no surgiam nos frascos onde a matria em decomposio estava isolada do contato com as moscas. Logo, a hiptese de que h transformao espontnea deveria ser descartada. Uma nova hiptese pode ser formulada: os seres vermiformes fazem parte do ciclo de vida das moscas. 2. Neste exerccio, mais de uma resposta pode estar correta. O importante que voc tenha em mente quais so os conceitos que ainda no esto bem claros para que voc possa entend-los mais adiante. No deixe suas dvidas guardadas! Isto s ir atrapalhar a sua compreenso dos demais conceitos. Anote suas dvidas e verique, ao longo do curso, se elas esto sendo esclarecidas. a) Um fator hereditrio, ou gene, pode ser denido em termos moleculares como um segmento de uma molcula de DNA. b) Os fatores hereditrios esto localizados nos cromossomos, dentro do ncleo de todas as clulas do organismo. c) Esses fatores so transmitidos para a prxima gerao atravs dos gametas dos pais que, no ato da fecundao, se unem para formar o zigoto. d) Porque a expresso dos genes nem sempre to direta. Recessividade, sobredominncia, ligao ao sexo, penetrncia e expressividade variadas, interaes entre genes ou o simples fato de que o alelo que condiciona o carter pode no ter sido herdado so possveis explicaes para esse fato. Ainda neste curso, voc ter a oportunidade de aprender e de aprofundar seus conhecimentos sobre os tipos de herana e de expresso dos genes.
188 C E D E R J
e) A duplicao do material gentico DNA que precede a diviso celular. f) As mutaes. Mudanas na constituio dos fatores hereditrios podem acontecer devido a falhas durante o processo de duplicao ou exposio do material gentico a substncias qumicas que causam dano ao DNA, como por exemplo, os radicais livres, os teratgenos e alguns tipos de radiao. 3. Neste exerccio voc deve fazer uma reexo no s sobre o texto da primeira aula, mas tambm sobre seus conhecimentos prvios dos fundamentos da Gentica. Lembre-se de que dvidas s atrapalham, e que os tutores ainda (!) no possuem poderes telepticos para adivinhar quais so os pontos onde voc tem mais diculdade. S depende de voc!
Aula 2
1. 1. d 2. a 3. b 4. c 5. e 6. f 7. c 8. a
2. O centrossomo forma a estrutura responsvel pela distribuio correta dos cromossomos durante a diviso celular. Essa estrutura consiste de um material amorfo que envolve cada par de centrolos. A partir deles um conjunto de bras proticas (microtbulos) se projeta em direo aos plos opostos da clula, formando o fuso mittico. O centrossomo tem uma funo fundamental na orientao da polimerizao desses microtbulos durante a formao do fuso: os microtbulos do fuso se ligam aos centrmenos dos cromossomos duplicados, garantindo a distribuio correta das cromtides nas clulas-lhas. Antes do incio da diviso celular, os centrolos e os outros componentes dos centrossomos so duplicados, porm permanecem unidos como um nico complexo no mesmo lado do ncleo. Ao incio da mitose, este complexo se divide em dois, e cada par de centrolos se transforma num nico centro organizador de microtbulos.
C E D E R J 189
3. Antigos cientistas no conheciam a importncia da intrfase para a ocorrncia da diviso celular. Flemming j tinha observado que, quando os cromossomos aparecem pela primeira vez no incio da prfase, eles j esto com duas cromtides; assim, em algum momento entre seu desaparecimento na telfase e seu reaparecimento na prfase, cada cromossomo deve ter se duplicado. Hoje, se sabe que a duplicao dos cromossomos ocorre durante a intrfase. Mas naquela poca, essa associao no era feita. Com isso, os cientistas chamavam o ncleo interfsico de ncleo em repouso, porque s era possvel observar o movimento dos cromossomos nas etapas da diviso celular. 4. Se os gametas fossem produzidos por mitose, seria de se esperar que cada nova gerao apresentasse o dobro de cromossomos devido juno dos dois gametas no ato da fecundao; uma vez que a mitose produz clulas-lhas com o mesmo nmero de cromossomos que a clula-me. Deste modo, imprescindvel que exista um mecanismo capaz de manter o nmero de cromossomos das espcies a cada gerao. 5. Neste exerccio, mais de uma resposta podem estar corretas. O importante que voc saiba reconhecer como os cromossomos devem estar organizados em cada uma das fases da mitose. Prfase: 2 ou 3 esquemas da primeira linha pois, nesta fase, os cromossomos j se encontram duplicados, condensados e com algum grau de organizao devido ligao dos microtbulos do fuso acromtico aos cinetcoros dos centrmeros; ligao essencial para que os cromossomos possam se locomover durante as prximas etapas da diviso celular. Metfase: 1 esquema da segunda linha j que, nesta etapa, os cromossomos j se encontram alinhados na placa equatorial da clula, em preparao para a diviso mittica. Anfase: 2, 3 ou 4 esquemas da segunda linha, ou mesmo o 1 esquema da terceira linha, pois nesta momento, as cromtides-irms de cada cromossomo duplicado comeam a se separar, sendo puxadas para plos opostos da clula atravs do encurtamento dos microtbulos do fuso acromtico que esto ligados aos centrmeros. Telfase: 4 ou 5 esquemas da terceira linha uma vez que, nesta etapa da mitose, a migrao das cromtides se completa e a membrana celular comea a se dividir para formar duas clulas contendo o mesmo nmero de pares de cromossomos homlogos da clula inicial.
190 C E D E R J
Citocinese: 2, 3 ou 4 esquemas da quarta linha, pois, nesse momento, a diviso da membrana celular se completa, formando duas clulas-lhas idnticas. 6. Se seu mapa estiver diferente deste gabarito, apresente-o ao tutor para que possveis pontos de dvida possam ser identicados e esclarecidos.
7. Esquema simplicado das fases da mitose de uma clula que possui 3 pares de cromossomos homlogos (2n = 6 cromossomos):
C E D E R J 191
Aula 3
1. Weismann acreditava que a substncia hereditria fornecida por cada um dos genitoresdeve ser igual ou aproximadamente igual entre si. Assim, as clulas dos descendentes conteriam as informaes hereditrias de ambos os pais unidos. Isso implica que as clulas germinativas de cada progenitor s podem conter metade das informaes hereditrias. Weismann imaginou, ento, que deveria existir um processo que reduzisse o material hereditrio metade durante a formao das clulas germinativas; processo atualmente conhecido como meiose. 2. Nesse primeiro estgio da meiose acontece o emparelhamento dos cromossomos homlogos que possibilita a troca de material gentico entre eles, chamada permutao. Essa etapa necessita de vrios eventos importantes para haver maior preciso no emparelhamento dos cromossomos homlogos, possibilitando a permutao gentica. Essa troca de material gentico importante, pois aumentar a variabilidade gentica da prole em relao aos seus genitores. Um erro nessa etapa pode impedir que a permutao acontea. 3. Esquemas simplicados das etapas da meiose (I e II) de uma clula que possui 2 pares de cromossomos homlogos (2n = 4 cromossomos):
192 C E D E R J
4. Esquema simplicado da meiose de uma outra clula do mesmo organismo onde os cromossomos se posicionaram na placa metafsica de forma diferente da apresentada no esquema do exerccio anterior:
5. Uma diferena fundamental entre a mitose e a meiose que na mitose h uma duplicao de cada cromossomo (prfase) para cada diviso celular. Esse mecanismo mantm a constncia do nmero de cromossomos aps a diviso celular. Por sua vez, na meiose h somente uma duplicao dos cromossomos para duas divises celulares: Meiose I (diviso reducional) que reduz o nmero de cromossomos metade; e Meiose II (diviso equacional) onde ocorre a separao das cromtides irms de cada cromossomo. Outra diferena marcante o comportamento dos cromossomos homlogos durante a metfase: na mitose os homlogos se alinham na placa equatorial, ao passo que na meiose os homlogos se emparelham (metfase I). 6. a) Prfase I 92 cromtides, pois todos os cromossomos esto duplicados nesta etapa. b) Prfase II 46 cromtides, uma vez que o nmero de cromossomos foi reduzido metade no nal da 1 diviso meitica, embora ainda se encontrem duplicados. c) Telfase I 46 cromtides, pelo mesmo motivo do item b. d) Telfase II 23 cromtides, pois ocorrem a 2 diviso meitica na qual as cromtides irms dos cromossomos duplicados se separam, formando clulas haplides.
C E D E R J 193
7. As clulas que representam os estgios haplides do ciclo de vida deste fungo possuem apenas dois cromossomos, uma vez que seu nmero haplide n = 2. Mas no estgio diplide (meicito diplide transitrio), dois pares de cromossomos homlogos esto presentes (2n = 4). Observe:
!
Se voc no acertou este exerccio, reveja os conceitos de organismos haplides e diplides, cromossomos e cromossomos homlogos. Tire suas dvidas com o tutor. muito importante que voc possa distinguir claramente entre estes conceitos.
Aula 4
1. a, g, d, h, e, b, f, c. 2. As ervilhas eram vantajosas porque existiam muitas variedades disponveis, eram fceis de cultivar, seu tempo de gerao era curto, se autofecundavam mas tambm podiam ser manipuladas para evitar a autofecundao (o que possibilitava o cruzamento de diferentes variedades atravs do corte das anteras e da transferncia do plen de uma planta para o ovrio de outra) e os descendentes obtidos por cruzamentos entre variedades diferentes eram frteis. 3. Mendel concentrou-se na anlise da herana de cada caracterstica individualmente e no do indivduo como um todo. Dessa forma, foi capaz de propor hipteses que explicassem o padro de herana observado em seus experimentos. Alm disso, Mendel fez uma coisa simples e extraordinria quando contou as propores fenotpicas da prole. Atravs dessa contagem, Mendel foi capaz de formular hipteses para explicar os resultados encontrados e fazer uso da anlise matemtica para testar e predizer os resultados esperados por suas hipteses.
194 C E D E R J
4. A autofecundao ocorre quando o gameta masculino fecunda o gameta feminino do mesmo indivduo, como no caso de uma planta hermafrodita na qual os rgos sexuais masculino e feminino esto presentes numa mesma or. Fecundao cruzada ocorre quando o gameta masculino de um indivduo fecunda o gameta feminino de outro indivduo, como acontece quando o plen produzido pela or de uma planta fecunda o vulo presente na or de uma outra planta. 5. gentipo da ervilha com revestimento da semente cinza (dominante): CC gentipo da ervilha com revestimento da semente branco (recessiva): cc a) P CC x cc F1 Proporo fenotpica 100% de ervilhas com revestimento cinza (Cc) Proporo genotpica 100% Cc b) P F1 x F1 (Cc x Cc) F1 Proporo fenotpica 3 ervilhas com revestimento cinza (C-) : 1 ervilha com revestimento branco (cc) Proporo genotpica 1 CC : 2 Cc : 1 cc c) P F1 x ervilha com revestimento branco (Cc x cc) F1 Proporo fenotpica 1 ervilha com revestimento cinza (Cc) : 1 ervilha com revestimento branco (cc) Proporo genotpica 1 Cc : 1 cc 6. Poderamos fazer um cruzamento-teste, ou seja, um cruzamento da planta em questo com uma planta homozigtica recessiva (aa) para a mesma caracterstica. Este tipo de cruzamento feito quando se deseja determinar o gentipo de um indivduo com fentipo dominante. Dessa forma, a identicao do gentipo do indivduo testado se d atravs da visualizao do fentipo da prole, j que o indivduo testador homozigtico recessivo, contribuindo apenas com alelos recessivos para a prole. Por exemplo: Se o indivduo testado for AA, ou seja, puro segundo os critrios de Mendel: AA x aa (indivduo testador) 100% da prole com caracterstica dominante (Aa). Se o indivduo testado for Aa, ou seja, hbrido segundo os critrios de Mendel: Aa x aa (indivduo testador) 50% da prole com caracterstica dominante (Aa) e 50% da prole com caracterstica recessiva (aa).
C E D E R J 195
7. Observado no cruzamento: P planta com folhas crenadas x planta com folhas lobadas F1 proporo fenotpica 100% folhas lobadas No posso concordar com o produtor, uma vez que o fator que condiciona a forma crenada pode ter sido transmitido prole mas no ter sido expresso, por ser recessivo, por exemplo. Hiptese para explicar o resultado obtido: a caracterstica folha crenada recessiva (l) em relao caracterstica folha lobada (L), e por isso plantas com folhas crenadas (ll) no apareceram na F1 (100% Ll). Teste da hiptese proposta: cruzamento da F1 entre si. Se aparecerem plantas com folhas crenadas na F2, os resultados observados neste cruzamento estaro de acordo com os resultados esperados pela hiptese proposta. Assim, poderemos rejeitar a hiptese proposta pelo produtor, na qual os fatores que condicionam a forma crenada no teriam sido transmitidos gerao F1. 8. Observado nos cruzamentos: P camundongos cinza x camundongos brancos (albinos) F1 proporo fenotpica 100% cinza F2 proporo fenotpica 198 cinzas : 72 albinos ( 3 cinzas : 1 albino) total de 270 camundongos Hiptese: a caracterstica cinza dominante (C) em relao caracterstica Albina (c). Esperado pela hiptese proposta: P CC x cc F1 proporo fenotpica 100% cinza proporo genotpica 100% Cc F2 proporo fenotpica 202,5 cinzas : 67,5 albinos (3 cinzas : 1 albino) proporo genotpica 1 CC : 2 Cc : 1 cc Os resultados esperados por essa hiptese esto de acordo com os resultados observados no experimento. 9. gentipo da mulher normal (portadora do fator para albinismo): Aa gentipo do homem albino: aa a. P Aa x aa F1 Propores genotpica e fenotpica esperadas na F1; devido fecundao dos gametas masculinos ( ) e femininos ( ) da gerao parental (note que apenas um tipo de gameta masculino pode ser produzido pelo indivduo com gentipo aa):
A a
196 C E D E R J
a aa
proporo genotpica 1 Aa : 1 aa proporo fenotpica 1 normal (Aa) : 1 albino (aa)
Aa
P Aa x Aa F1 Propores genotpica e fenotpica esperadas na F1; devido fecundao dos gametas masculinos () e femininos () da gerao parental:
b.
A a
A AA Aa
a Aa aa
proporo genotpica 1 AA : 2 Aa : 1 aa proporo fenotpica 3 normais (A_) : 1 albino (aa)
10. Observado nos cruzamentos: Cruzamento I: P touro sem chifres x vaca I com chifres F1 bezerro sem chifres Cruzamento II: P touro sem chifres x vaca II com chifres F1 bezerro com chifres Cruzamento III: P touro sem chifres x vaca III sem chifres F1 bezerro com chifres a) Hiptese: o touro sem chifres heterozigtico (Cc), as vacas I e II com chifres so homozigticas recessivas (cc) e a vaca III sem chifres heterozigtica (Cc). b) Esperado pela hiptese proposta: Cruzamento I: P touro sem chifres (Cc) x vaca I com chifres (cc) F1 bezerro sem chifres (Cc) Cruzamento II: P touro sem chifres (Cc) x vaca II com chifres (cc) F1 bezerro com chifres (cc) Cruzamento III: P touro sem chifres (Cc) x vaca III sem chifres (Cc) F1 bezerro com chifres (cc) Os resultados esperados por essa hiptese esto de acordo com os resultados observados no experimento.
C E D E R J 197
Aula 5
1. d 2. c 3. Quando duas ou mais caractersticas com estados contrastantes esto envolvidas, podemos vericar que a proporo 3 : 1 ainda mantida se considerarmos cada caracterstica individualmente, devido segregao independente dos fatores.
Exemplo: a proporo fenotpica esperada de uma autofecundao de ervilhas duplo heterozigticas liso-amarelo (RrVv) de 9 liso-amarelo (R_V_) : 3 liso-verde (R_vv) : 3 rugoso-amarelo (rrV_) : 1 rugoso-verde (rrvv). Se considerarmos as caractersticas individualmente: 1 cruzamento entre lisos (Rr x Rr) 3 lisos (R_) : 1 rugoso (rr) logo, o fentipo liso tem a probabilidade de 3/4 de aparecer na prole, enquanto o fentipo rugoso tem 1/4 de probabilidade. 2 cruzamento entre amarelos (Vv x Vv) 3 amarelos (V_) : 1 verde (vv) logo, o fentipo amarelo tem a probabilidade de 3/4 de aparecer na prole, enquanto o fentipo verde tem 1/4 de probabilidade. Considerando as probabilidades que cada fentipo tem de aparecer na prole, podemos esperar que num cruzamento dibrido: A probabilidade de aparecer liso-amarelo (R_V_) = 3/4 x 3/4 = 9/16 A probabilidade de aparecer liso-verde (R_vv) = 3/4 x 1/4 = 3/16 A probabilidade de aparecer rugoso-amarelo (rrV_) = 1/4 x 3/4 = 3/16 A probabilidade de aparecer rugoso-verde (rrvv) = 1/4 x 1/4 = 1/16 Portanto, a proporo 9 : 3 : 3 : 1 pode ser derivada a partir da proporo 3 : 1 4. a. Poderiam ser consideradas fatos as seguintes condies para que o modelo mendeliano fosse vlido: em cada par de fatores hereditrios contrastantes (isto , Rr) um membro do par deveria ser dominante enquanto o outro membro deveria ser recessivo; e os fatores hereditrios dominantes e recessivos no seriam modicados quando ocorressem juntos no hbrido, ou seja, a prole de um cruzamento entre hbridos apresentaria tanto a caracterstica dominante quanto a recessiva, sem nenhuma modicao no fentipo. b. A diferena bsica entre a 1 e a 2 Leis de Mendel que enquanto a 1 trata da segregao de um par de fatores, a segunda se refere segregao em mais de um par de fatores.
198 C E D E R J
5. gentipo da ervilha alta e vagem inada (estados dominantes): AAEE gentipo da ervilha an e vagem deprimida (estados recessivos): aaee a. P AAEE (1) x aaee (2) F1 Propores genotpica e fenotpica esperadas na F1; devido fecundao dos gametas das plantas da gerao parental (1 ou 2):
2 ae
AE AaEe
proporo genotpica 100% AaEe proporo fenotpica 100% ervilha alta e vagem inada b. P AaEe (1) x AaEe (2) F1
1 2 AE Ae aE ae
AE AAEE AAEe AaEE AaEe
Ae AAEe AAee AaEa Aaee
aE AaEE AaEe aaEE aaEe
ae AaEe Aaee aaEe aaee
proporo genotpica 1 aaEE: 2 aaEe: 1 aaee proporo fenotpica
1 AAEE : 2 AAEe : 1 AAee : 2 AaEE : 4 AaEe: 2 Aaee :
9 ervilha alta e vagem inada (A_E_) : 3 ervilha alta
e vagem deprimida (A_ee) : 3 ervilha an e vagem inada (aaE_) : 1 ervilha an e deprimida (aaee) c. P AaEe (1) x aaee (2)
F1
2 ae
AE AaEe
Ae Aaee
aE aaEe
ae aaee
proporo genotpica
1 AaEe : 1 Aaee : 1 aaEe: 1 aaee
proporo fenotpica 1 ervilha alta e vagem inada (AaEe) : 1 ervilha alta e vagem deprimida (Aaee) : 1 ervilha an e vagem inada (aaEe) : 1 ervilha an e deprimida (aaee)
C E D E R J 199
6. I) 4 tipos (ABCd, AbCd, aBCd, abCd) B C d (1 tipo) A b C d (2 tipo)
B C d (3 tipo) a b C d (4 tipo)
II) 8 tipos (ABC, ABc, AbC, Abc, aBC, aBc, abC e abc) C (1 tipo) B c (2 tipo) A C (3 tipo) b c (4 tipo)
C (5 tipo) B c (6 tipo) a C (7 tipo) b c (8 tipo)
200 C E D E R J
III. 8 tipos (AbCDE, AbCDe, AbcDE, AbcDe, abCDE, abCDe, abcDE, abcDe) E (1 tipo) C D e (2 tipo) A b E (3 tipo) c D e (4 tipo)
E (5 tipo) C D e (6 tipo) a b E (7 tipo) c D e (8 tipo)
7. c 8. e 9. b 10. a 11. d
C E D E R J 201
12. a) 8 tipos de gametas. b) 27 tipos de combinaes. c) Razes fenotpicas determinadas por cada par de fatores.
Fentipos
Sementes lisa x rugosa Sementes amarelas x verdes
3/4
coberturas das sementes cinza x brancas = 27/64 lisas amarelas com envoltrio cinza.
Razo fenotpica esperada na F2
Cinza
3/4
Amarela
1/4 3/4
= 9/64 lisas amarelas com cobertura branca. Branco
Lisa
3/4 Cinza 1/4
= 9/64 lisas verdes com cobertura cinza.
Verde
1/4
= 3/64 lisas verdes com cobertura branca.
Branco = 9/64 rugosas amarelas com cobertura cinza.
3/4 Cinza 3/4
Amarela
1/4
= 3/64 rugosas amarelas com cobertura branca. Branco
1/4 Rugosa 3/4 Cinza 1/4
= 3/64 rugosas verdes com cobertura cinza.
Verde = 1/64 rugosas verdes com cobertura branca.

1/4 Branco
202 C E D E R J
Aula 6
1. g 2. a 3. b 4. d 5. f 6. e 7. c 8. h 9. a 10. b 11. dominante ligada ao cromossomo X. 12. gentipo da fmea de cauda longa e reta: XbXb gentipo do macho de cauda curta e retorcida: XBY P F1 XbXb x XBY
Xb
XB XBXb
Y X bY
100% das fmeas com cauda curta e
proporo fenotpica esperada

B b
retorcida (X X ) e 100% dos machos com cauda longa e reta (XbY) 13. gentipo da fmea de asas curtas: XmXm gentipo da fmea de asas longas: X+X+ ou X+Xm gentipo do macho de asas curtas: XmY gentipo do macho de asas longas: X+Y a. P F1 XmXm x XmY
Xm
Xm X mX m
Y X mY
100% asas curtas (XmXm e XmY).
proporo fenotpica
C E D E R J 203
b. P F1
XmXm x X+Y
Xm
X+ X+Xm
Y X mY
proporo fenotpica 100% das fmeas de asas longas (X+Xm). 100% dos machos de asas curtas (XmY).
c. P
X+X+ x XmY
F1
X+
Xm X+Xm
Y X+Y
proporo fenotpica 100% asas longas (1 X+Xm : 1 X+Y).
d. P F1
X+Xm x X+Y
X+ Xm
X+ X +X + X+Xm
Y X +Y X mY
proporo fenotpica 100% fmeas de asas longas (X+X+ e X+Xm), 50% dos machos de asas longas (X+Y) e 50% dos machos de asas curtas (XmY).
e. P F1
X+Xm x XmY
X+ Xm
Xm X+Xm X mX m
Y X+Y XmY
proporo fenotpica 50% das fmeas de asas longas (X+Xm), 50% das fmeas de asas curtas (XmXm), 50% dos machos de asas longas (X+Y) e 50% dos machos de asas curtas (XmY).
204 C E D E R J
14. gentipo da fmea de penas barradas e homozigtica para crista rosa: ZBWRR gentipo do macho de penas no-barradas e crista simples: ZbZbrr P F1 ZBWRR x ZbZbrr
Zbr
ZBR ZBZbRr
WR ZbWRr
proporo fenotpica esperada 100% dos machos com penas barradas e crista rosa (ZBZbRr) e 100% das fmeas com penas no-barradas e crista rosa (ZbWRr) OBS.: Lembre-se que em aves a determinao do sexo se d pelo sistema ZZ / ZW, no qual fmea o sexo heterogamtico (ZW) enquanto que macho o sexo homogamtico (ZZ).
Aula 7
Atividade 1: apresente seu modelo para discusso com seus colegas e tutores. Atividade 2: 1. Os cromossomos humanos so classicados em sete grupos (de A a G) de acordo com o tamanho e a morfologia. Alm disso, os autossomos so numerados de 1 a 22 pelo tamanho. Grupo A: compreende os trs pares cromossmicos de maior tamanho. Os cromossomos dos pares 1 e 3 so metacntricos, e os do par 2 so submetacntricos. Grupo B: pares 4 e 5, submetacntricos. O tamanho de seus braos curtos equivale a 1/3 de seus braos longos. Grupo C: total de 14 cromossomos. Como no se pode identicar os pares de cromossomos pela anlise morfolgica, estes cromossomos devem ser organizados em ordem decrescente de tamanho. Grupo D: consiste dos pares 13, 14 e 15. So acrocntricos, de tamanho mdio, com a presena de satlites nos braos curtos. Estes satlites so pequenas esferas terminais nem sempre visveis.
C E D E R J 205
Grupo E: par 16, metacntrico, e pares 17 e 18, submetacntricos, sendo que os braos curtos do par 17 so ligeiramente maiores do que os do par 18. Grupo F: os cromossomos dos pares 19 e 20 constituem este grupo e so os menores cromossomos metacntricos humanos. Grupo G: composto pelos pares cromossmicos 21 e 22. Estes so os menores cromossomos acrocntricos humanos e podem apresentar satlites, nem sempre visveis, nos braos curtos. Par sexual: nas mulheres formado por um par de cromossomos X, enquanto nos homens composto por um par de cromossomos no-homlogos, os cromossomos X e Y. O cromossomo Y acrocntrico e pode ser diferenciado dos pares 21 e 22 pela posio paralela dos braos maiores e pela ausncia de satlites. OBS.: Os cromossomos dos grupos B, C, D, F e G no podem ser identicados somente pela anlise de sua morfologia.
2. Atividade para ser desenvolvida pelo aluno e discutida com seus colegas e tutores. 3. Atividade para ser desenvolvida pelo aluno e discutida com seus colegas e tutores.
206 C E D E R J
Atividade 3: 1. Existe mais de uma maneira de completar este esquema. Conra se sua resposta est correta com seus colegas e tutores.
C E D E R J 207
2. Ao nal da meiose desta clula, apenas dois tipos de gametas foram formados; com os gentipos cdY ou CDXe. Os outros tipos de gametas podem ser formados a partir de diferentes alinhamentos dos cromossomos emparelhados, durante a metfase I de outras clulas meiticas.
3. Quando consideramos todas as clulas meiticas deste indivduo (CcDdXeY), podemos concluir que este indivduo formar 8 tipos de gametas na proporo de 1:1:1:1:1:1:1:1. Observe, a seguir, o mtodo de ramos para a determinao dos tipos de gameta formados.
Se fosse uma fmea CcDdXEXe, seriam formados 8 tipos de gametas na proporo de 1:1:1:1:1:1:1:1. Observe:
208 C E D E R J
Aula 8
1. atividade para ser desenvolvida pelo aluno e discutida com os colegas e tutores. 2. 2.1) c 2.2) d 2.3) c, a 2.4) a, b 2.5) f 2.6) e 2.7) g 2.8) f 2.9) e 2.10) j 2.11) i 3. a) A ptala de uma planta homozigtica para uma mutao recessiva que impea a primeira reao deve ser branca, uma vez que esta planta no produzir a enzima necessria para transformar a substncia inicial de cor branca na substncia intermediria de cor azul. Note que mesmo que esta planta possua a enzima D normal capaz de transformar a substncia intermediria de cor azul no pigmento nal de cor prpura, esta planta no tem capacidade de produzir a substncia intermediria e, portanto, no pode produzir o pigmento nal. b) A ptala de uma planta homozigtica para uma mutao recessiva que impea a segunda reao deve ser azul. Esta planta capaz de transformar a substncia inicial na substncia intermediria, por possuir a enzima B normal, mas no capaz de produzir a enzima D necessria para transformar a substncia intermediria de cor azul no pigmento nal de cor prpura. c) A planta citada em a possui o gentipo bbD_, enquanto a planta citada em b possui o gentipo B_dd. 4. Provavelmente, 10 unidades da enzima no so sucientes para produzir o fentipo normal. Dessa forma, indivduos heterozigticos e homozigticos para o alelo mutante produzem o mesmo fentipo, um caso de haplo-insucincia. Nesse caso, o alelo mutante o alelo dominante. 5. Essa doena deve ser herdada com um fentipo recessivo, uma vez que apenas um alelo normal (dominante) suciente para produzir o fentipo normal, ou seja, haplo-suciente. Assim, um indivduo heterozigtico apresentar fentipo normal por possuir um dos alelos dominantes.
C E D E R J 209
Aula 9
1.
A Autossmica recessiva Autossmica dominante Ligada ao X recessiva Ligada ao X dominante Ligada ao Y S N S N N B N S N N N C S S S N N D S S N S N E S N N N N F S S S N N
2. a) Autossmica dominante. b) Ligada ao X dominante. c) Ligada ao X recessiva. d) Autossmica recessiva. 3. a)
b) Autossmico recessivo. c) 25%, uma vez que ambos os pais so heterozigotos. d) Catarina (II-2), seu marido (II-1), Elisa (I-3) e Brbara (I-2) 4. a) Autossmico dominante. b) I-1, I-4, II-3, II-4, II-6, II-7, III-2 e III-5. c) I-2, I-3, II-1, II-2, II-5, II-8, III-1, III-3 e III-4. d) A partir da anlise deste heredograma, podemos concluir que ambos os indivduos III-3 e III-4 so heterozigotos certos (Aa). Logo, a probabilidade (P) deste casal vir a ter trs crianas, uma sem o carter e duas com o carter, independentemente do sexo e da ordem dos lhos, pode ser deduzida atravs do binmio de Newton:
210 C E D E R J
P = [3! / (1!2!)] (1/4)1 (3/4)2 P = [3x2x1 / (1x2x1)] x 1/4 x 9/16 P = [6/2] x 9/64 P = 27/64 42,2% 5. Considerando cada carter separadamente, podemos observar que a condio carncia do esmalte dentrio apresenta uma herana ligada ao X dominante, uma vez que a me afetada (XAXa) teve um lho afetado (XAY) e outro normal (XaY). Por sua vez, a herana do daltonismo ligada ao X recessiva, j que a mulher (XDXd) lha de um pai afetado (XdY) e de uma me normal (XDX_) no expressa esta condio. Se o daltonismo fosse ligado ao X dominante, esta mulher deveria ser afetada por ser lha de um pai afetado. Como os lhos de uma me normal (XDXd) podem expressar esta condio, enquanto que ela prpria no afetada, a herana do daltonismo no pode ser ligada ao X dominante. Assim, podemos dizer que o gentipo da me XADXad, e o gentipo dos lhos XAdY para o lho com carncia de esmalte dentrio e daltonismo e XadY para o lho com esmalte dentrio normal e daltonismo. Note que o lho com gentipo XAdY fruto de um gameta que sofreu permuta entre estes genes. 6. A partir da anlise deste heredograma, podemos deduzir a probabilidade de o indivduo IV-1 ser afetado atravs dos seguintes passos: 1. Probabilidade de III-2 ser heterozigtica = 2/3 Como seu irmo III-3 duplo homozigtico recessivo (afetado aa) podemos deduzir que sua me II-2 e seu pai (que no aparece no heredograma) sejam heterozigticos. Considerando as quatro possibilidades genotpicas resultantes de um cruzamento entre heterozigotos (AA, Aa, Aa, aa) a probabilidade de III-2 ser heterozigtica ser de 2 chances am 3, pois denitivamente este indivduo no pode ser aa (AA, Aa, Aa, aa). 2. Probabilidade de III-1 ser heterozigtico: 1/2 x 1/2 (probabilidade de sua me II-1 ter recebido o alelo recessivo de um dos pais x probabilidade do prprio indivduo III-1 ter recebido o alelo recessivo de sua me) = 1/4
C E D E R J 211
3. Probabilidade de III-2 e III-1 serem heterozigticos: 2/3 x 1/4 (probabilidade de III-2 ser heterozigtica x probabilidade de III-1 ser heterozigtico) = 1/6 4. Probabilidade de III-2 e III-1, sendo heterozigticos, terem um lho afetado (indivduo IV-1): 1/6 x 1/4 (probabilidade de III-2 e III-1 serem heterozigticos x probabilidade do indivduo IV-1 ser duplo homozigtico recessivo - afetado) = 1/24 Portanto, a probabilidade de o indivduo IV-1 ser afetado 1/24 4,2%
Obs.: Quando analisamos um heredograma de uma anomalia recessiva devemos considerar que os indivduos provenientes da populao, ou seja, os indivduos no-afetados da populao que se casam com algum da famlia, so homozigticos dominantes (AA, por exemplo). Isto porque muito pequena a chance de um indivduo da populao em geral ser portador (Aa) do alelo recessivo daquele gene especco que causa a doena na famlia analisada. Entretanto, a chance de um indivduo no-afetado da famlia em questo portar um alelo recessivo, ou seja, ser heterozigtico (Aa), depender da anlise do fentipo e do gentipo de seus ancestrais e, quando possvel, da anlise de seus descendentes.
212 C E D E R J

Cederj - Genética Básica - Módulo 1

Uploaded by

Document Information

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Cederj - Genética Básica - Módulo 1

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

Gentica Bsica

Aula 2 Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Aula 3 Diviso celular II Meiose

Aula 4 Mendelismo: o nascimento da Gentica

Aula 5 O Trabalho de Mendel: desvendando a Segunda Lei

Aula 6 A teoria cromossmica da herana e a descoberta

Blanche Christine Bitner-Math

Aula 7 Cromossomos, genes, DNA:

uma viso atual dos fatores mendelianos

Blanche Christine Bitner-Math

Aula 8 Do gene ao fentipo

Aula 9 Introduo Gentica Humana:

anlise de caractersticas monognicas

161 179 187 213

Aula 10 Atividade prtica

As origens das idias sobre hereditariedade

Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade

ENTO, VAMOS VOLTAR NO TEMPO?

Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade

KARL RAIMUND POPPER (1902-1994)

A TENTATIVA DE DARWIN PARA EXPLICAR A HERANA BIOLGICA

Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade

Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA

THOMAS KUHN (1923-1996)

Gentica Bsica | As origens das idias sobre hereditariedade

Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Figura 2.1: Ilustraes dos animais do esperma feitas por Leeuwenhoek.

RUDOLPH ALBERT VON KLLIKER (1817-1905)

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

DESVENDANDO A DIVISO CELULAR

Figura 2.4: Ciclo da diviso celular.

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Figura 2.6: Esquema geral da mitose em clulas animais.

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Genica Bsica | Diviso celular I Mitose e o ciclo celular

Diviso celular II Meiose

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

EDOUARD BENEDEN (1846-1910)

AUGUST WEISM A N N (18341914)

Embriologista citologista belga.

No final do sculo XIX, trs importantes pesquisadores, EDOUARD

BENEDEN, THEODOR BOVERI e WIHELM AUGUST OSKAR HERTWIG , encon-

THEODOR BOVERI (1862-1915)

WIHELM AUGUST OSKAR HERTWIG (1849-1922)

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

Cromossomos homlogos emparelhados.

Cromossomos homlogos totalmente emparelhados. Ocorre a permutao

Cromossomos homlogos comeam a se repelir . Cromtides tornam-se visveis evidenciando as quiasmas.

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

ANFASE II Cromtides-irms de cada cromossomo se separam (segregam) e se movem para os plos.

Ciclo haplobionte diplonte

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

Figura 3.5: Ciclo de vida haplobionte diplonte.

Ciclo haplobionte haplonte

Figura 3.6: Ciclo de vida haplobionte haplonte.

Figura 3.7: Ciclo de vida diplobionte.

Gentica Bsica | Diviso celular II Meiose

INFORMAO SOBRE A PRXIMA AULA

METFASE I Cromossomos homlogos duplicados e emparelhados se organizam na placa equatorial.