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核磁共振基本原理 6


吴季辉

核磁 共振原 理及 其在
生物学中 的应 用

第五章 化学交换 现象
§ 5.1 — § 5.3
化学交换现 象

• 一个核在 A, B 两个不同状态下的交换
• A, B 两个不同状态:
• ( 1 )处于不同分子,
如蛋白质上的 NH,OH 质子与水中质子交

( 2 )同一个分子的不同构象
如顺式与反式异构体
化学交换现 象

乙醇分子与靶分子结合,甲基基团处于两种不同的
环境:结合,游离
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动态 NMR
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• 核磁共振可以检测包括化学反应 ,构象
变化等动力学过程
确定运动相关时间 c 的 NMR 方法

1s < τc 初始扰动后的实时检测
10ms <τc <10s 2D 或 3D 交换谱 (EXSY)
100µs <τc <1s 线型分析,交换加宽,和交换变窄
1µs <τc <10ms 旋转坐标系里的弛豫时间 T1 ρ 测量
实验室坐标系里的弛豫时间 T1 的测
30ps <τc < 1µs

τc < 100ps 平均的序参数
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化学交换 对核 磁线 型的影 响

PB>PA PA=PB
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两态交 换 k1
A B
平衡时处于 A,B 态的 k −1
核所占的比例 ·
1
τB τA
PA = =
1 1 τ A +τ B
+
τA τB

1
τA τB
PB = =
1 1 τ A +τ B
+
τA τB
慢交换与 快交 换
考虑体系 A↔B
A , B 进动频率分别为 vA,vB
平均寿命分别为 A , τB
选择旋转坐标系的频率为
v0=(vA+vB)/2

慢交换 : 交换频率 << |vA-vB|


快交换 : 交换频率 >> |vA-vB|
( 并非交换过程本身的速率 )
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Bloch 方程
 1 
 
 T2 
dM      1 
= γ (M × H ) − R ⋅ (M − M 0 ) R=
dt T2 
 
 1

 T1 

每个核都有类似的方程,在有化学
交换时还要加上交换项,成为联立
的方程组,称为 McConnell 方程
交换速 率
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慢交换
核磁吸收信号

 γB1∆ωT22 M 0 将上式和普通
u = 的 Bloch 方程
 1 + ( ∆ω ) 2
T 2
2
+ γ 2
B 2
1 T1T2
 的解加以比较
 γB1M 0T2
v = 得知得到的是
 1 + ( ∆ω ) 2
T2
2
+ γ 2
B 2
1 T1T2 在频率 A
 1 + ( ∆ω) 2 T22
M z = M0 和 B
处两

 1 + ( ∆ω) T2 +γ B1 T1T2
2 2 2 2
条分立的谱线
有效横向驰豫时间
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快交换

这相应的是得到一条谱线

如果 PA = PB , T2A = T2B =
T
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中等 交换速 度
温度对交换的影响
线型 分析例 一 : 阻碍内 旋
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N , N′- 二甲基乙酰胺
在不同温度下的质子

线型分 析例 二 : 质子交换 平
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纯乙醇的质 子谱
随着酸 量的增加
,羟基 质子和酸
的质子 间交换加

交换去 偶
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线型 分析例 三 : 环反转 过

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重氢环己烷在不同温度时的图谱
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化学交 换的应用 :
交换速度的测 量

交换过程很明显的影响波谱,这
个作用可以用来测量交换速度

线型拟合
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化学 交换的应用 :平衡常 数测

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限于快 交换 A + B ←
k ,k
→ AB
1 −1

令 0
=PARAB - PARA , ∆=PARobs - PARA
因为 PA+PAB=1 故
[ AB]
δ obs − δ A = (δ AB −δ A)
[ AB ] + [ A]
δ AB δ obs δA
[ AB ] [ AB]
Kd = PAB =
[ AB ] + [ A] [ A] + [ B]

我们可以将 PAB 写

∆ 0 [ B]
∆=
[ B] + K d
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平衡常数测 量

测定不同温度下的平衡常数,还可以得到其他热力学参
数如焓,熵,活化能等
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磁化转 移 / 饱和 转移

X , Y 处于交换之中,当 Y 受到射频照射,偏离热平衡
的 Y 磁化将传递给 X 使 X 也偏离热平衡,而 X 的弛豫过
程与之竞争,使之恢复热平衡。这个性质可于研究慢交换
饱和转 移
180° 脉冲 选择性 地加 在 B 上, A 核与 它有
交换
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NOE 转移( transfer NOE )


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蛋白 质的酰 胺质 子

pH 3-5 之间酰胺质子与 H2O 的交换比较慢

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