核磁共振基本原理 7

讲
吴季辉

核磁 共振原 理及 其在
生物学中 的应 用

第六章 多重共振
§ 6.1 — § 6.4
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

在早期的连续波（ CW) 谱仪上多重

共振指除了观测用的射频场，另外
再加上其他照射场，若另加一个射
频场，称为双共振实验
现代的脉冲 Fourier 变换谱仪上多
重共振是指核磁实验中施加针对不
同核的射频脉冲，在采集信号时也
可加上其他照射场
 双共 振实验
按照被 照射的核 和被观察的 核是相同的
还是不同的，可 分为 同核去 耦和异核
去耦。
习惯上 以 A{X} 的方式 表示，其中 X 放
在括号内表示被 照射的核， A 表示被
观察的核。
因此 13C{1H} 就是 指把射频场 H2 加在
质子上，观察 13C 。
 按照照射场的磁场强度 H2 不同，又可分
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

为以下几种类型
γH2 /2π > 2J ： 自旋去

耦 H2

/2π ∼ J : 选择自旋去耦
γH2 /2π ~ ν1/2 << J : 自旋轻扰

γ2H22T1T2 ≅ 1 : 核欧沃豪

斯效应 (NOE)
双共振实验用于使波谱简化和确
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

同核去耦
图 (a) 是正常氢谱，
它是很复杂的，因
为它属于 ABCX3 体
系。图 (b) 是把去耦
场频率设置在 CHO
峰上，此时谱就变
成 ABX3 体系。图
(c) 是把去耦场频率
设置在 CH3 峰上，
这时谱就简化为
ABC 体系。图 (d)
是用两个去耦场，
分别对准 CHO 与
CH3 共振照射，这
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

去耦原理
有两种解释方法：
•若照射场 H2 以频率 X
照射 X 核，则引起 X 自
旋在 ， 两个自旋态之间来回跃迁 (α→β, β→
α) 。若 H2 的功率足够大，这种来回跃迁的频率与
耦合常数相比足够的高，对 A 核而言， B 核的这两
种取向就不再能够区分， A 核的这两种相应的分裂
就消失了，而变成单峰
•用矢量模型分析，考虑两个核磁矩在旋转坐标系中
感受到的有效磁场，当两者垂直时没有耦合
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

其中 H0(J) 是Ａ与 X 之间自旋－自旋

耦合产生的磁场， 2∆H0(J) 相当于波谱中
X 多重峰中最外侧两个峰之间的距离， k
表示 z 方向
如自旋 A 的角动量矢量和自旋 X 的角动
量矢量彼此近乎垂直，自旋－自旋相互作
用为零
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

异核去耦
因为 13C 的天 然丰度 是 0.01, 所以一 般来说 不
能观 察到 13C-13C 之间 的耦合
13
C-1H 的耦 合是可 以观 察到的 ，主 要是大 的
1
JCH ，再加 上许多 较小 的远程 13C-1H 耦合

这使 得一个 典型 的有机 化合 物的 13C 谱变 得异

常复 杂，大 量多 重峰互 相重 叠，谱 线难 以确定
归属
C-1H 之间 的耦合 不仅 使波谱 复杂 化，而 且也
13

使总 的灵敏 度降 低
为研 究 13C 谱， 通常需 要进 行质子 噪声去 耦，
核磁共振基本原理 7
讲

质子 噪声去 耦
吴季辉

将去耦器的频率设在质子区的中心，用一个带
宽足以复盖全部质子区的噪声发生器来进行调
制，这就等于同时照射所有的质子共振频率，
从而使分子中所有的质子都去耦，有效地使波
谱得到简化
质子噪声去耦除了使自旋裂分消失而提高信噪
比外，还由于去耦产生欧沃豪斯效应，提高信
噪比，在极窄的条件下，
照射质子观察 13C, NOE= 2.988 ，信噪比提高
近三倍
质子噪声 去耦
核磁共振基本原理 7

偏共 振去耦
讲
吴季辉

虽然质子噪声去耦大大简化了 13C 谱 , 但是它也去掉了

有用的耦合信息，给谱的鉴定带来困难，解决这个问题的
一个办法是用偏共振去耦

如果将质子去耦的频率定在质子区外 1000-2000Hz ，将噪

声调制关闭，则可得到一个部分去 耦的波谱，在这样的
条件下， 13C-1H 的耦合除一键耦合 1JCH 存在外，其余远程
耦合都除去，而且一键耦合减小到 30-50Hz 。在此情况下
-CH3 碳表现出四重峰， -CH2 碳表现为三重峰， -CH 碳
表现为两重峰，而 -C( 季碳 ) 表现为单峰，这对测定谱线
归属特别有用。在质子噪声去耦波谱中所得到的欧沃豪斯
效应的大部分在偏共振去耦中仍然保留。
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉
核磁共振基本原理 7
讲

选择性 质子 去耦
吴季辉

(a) 以 C3-H
质子频率照
射 ; (b) 以
C4-H 质子
频率照射

选择性质子去耦主要是用单一频率选择性地照射单个质子
，在 13C 谱上除去与这个质子的全部耦合，主要用于波谱
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

门去耦 和反 门去耦

•核欧沃豪斯效应的建立，需要一
个大体相当于自旋－晶格弛豫时
间 T1 数量级的时间间隔，其消失
也要时间
•去耦则是即时的
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

H1 观察射频场， H2 去耦射频场
采集的 信号是 有耦合 的波谱 ( 因为这时
去耦器 已关闭） 但保留 有欧沃豪斯效应
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

门去 耦技 术的 主要用 途
•在质子谱中测同核欧沃豪斯增强，此时饱和照射
是 1H 选择性照射
常规质 子谱是有耦 合 , 没有 NOE,
门去耦 质子谱 是有 耦合， 有 NOE ，
差谱得到质 子 NOE
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

门去 耦技 术的 主要用 途
•在 13C 谱中得到既有耦合作用又有 NOE 增强的波
谱
核磁共振基本原理 7

门去 耦技术 的主 要用途
讲
吴季辉

•用来消除波谱中不需要的峰，如用来抑制溶剂峰
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

反门去 耦

采集的信号是去耦的波谱 ( 因为这时去耦器打开
）没有欧沃豪斯效应，因为 NOE 效应需要时间建
立
反门去耦主要用于测量异核欧沃豪斯增强
质子噪 声去耦 ，去耦的波谱 ，有欧沃 豪斯效
应
反门去 耦， 去耦的波谱 ，无欧沃豪斯 效应
差谱。 异核 NO E
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

去耦方式 的小 结
照射方式 脉冲前照射 采样时照射 NOE 效应
耦合裂分
无照射 无 无 无 有
质子噪声去耦 有 有 有
无
门去耦 有 无 有 有
反门去耦 无 有 无 无
照射核与观察核 宽带去耦 选择去耦
不同，如 13C ｛ 1H ｝ 可以 可以
相同，如 1H ｛ 1H ｝ 不可以 可以
（脉冲同核去耦
）
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

组合 脉冲去 耦
理想的宽带去耦要求：
• 对于给定的 rf 功率，具有较宽的有效的
去耦宽带；
或者反过来对于一定的去耦宽带所需的功率
较低
• 剩余分裂 ( 剩余 J 耦合分裂 ) 相对于观测
核的线宽较小
• 对脉冲长度的小误差，射频通道相位小
误差以及去耦场的非均匀性不敏感
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

组合脉冲
组合脉 冲：几个 脉冲组合起 来完成一个脉
冲的作 用， 但具有更好的特 性如 在较宽 的
频率范 围内起作 用，对脉冲 宽度的变化不
太敏感 ，对频 偏效应有一 定的纠正，等 等

组合 90 度脉 冲： 90 °(x) 90 °(y) 能补偿射频场不

均一
组合 180 度脉冲 ： R1 ＝ 90°(x)240°(y)90°(x)
R2 ＝ 90°(x)180°(y)90°(x)
R3 ＝ 90°(x)180°(-x)270°(x)
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

MLEV 组合脉冲
沿 R 相反方向
R 组合 180° 脉
冲

通常 MLEV-16 用于二维同核 TOCSY 序列

核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

WALTZ-16 组合脉冲

其中

数字表示 90° 脉冲的倍数 , 4 表示 4x90° （ x)

WALTZ-16 不仅比 MLEV-64 具有较宽的去耦带
宽，而且能克服去耦射频场不均匀性的影响
通常 WALTZ-16 用于质子去耦
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

GARP 组合 脉冲

R 中的数字表示脉冲的旋转角，单位为度，其上面
有横线的表示相移 180°
在这三种去耦序列 MLEV-16 ， WALTZ-16 和
GARP 中， GARP 具有最宽的去耦带宽。 一般
用于对 15N 和 13C 核的去耦
核磁共振基本原理 7
讲
吴季辉

0.06
J scaling factor for WALTZ-4

J scaling factor for WALTZ-16

0.0006

0.0 0.5  /( B1) 1.0

0.0 0.5  /( B1) 1.0

0.006 J scaling factor for GARP-1

J scaling factor for WALTZ-8

0.006

0.0 0.5  /( B1) 1.0

0.0 0.6 1.2  /( B1) 1.8 2.4