Proyecto Genoma Humano

PRACTICANTE: Darwin Quiroz Tomas PROFESORA: Esperanza Moreno C. 2002.

Proyecto Genoma Humano

El Proyecto Genoma Humano (P.G.H) es un proyecto internacional, que parti el ao 1988, cuyo objetivo principal es conocer la secuencia completa del genoma humano. Se llama genoma a la totalidad del material gentico de un organismo. El genoma humano posee entre 50.000 y 100.000 genes distribuidos entre los 23 pares de cromosomas de la clula somtica humana. Cada cromosoma puede contener ms de 250 millones de pares de bases de DNA, y se estima que la totalidad del genoma humano tiene 3000 millones de pares de bases.

La idea de iniciar un estudio coordinado del genoma humano surgi de una serie de conferencias cientficas celebradas entre 1985 y 1987; idea que gan impulso en Estados Unidos en 1990 con la ampliacin de la financiacin del Departamento de Energa, y la posterior unin al proyecto de los Institutos Nacionales de Salud (N.I.H). Uno de los primeros directores del programa en Estados Unidos fue el bioqumico James Watson, que en 1962 junto con el biofsico Francis Crick, recibieron el Premio Nobel de Fisiologa y Medicina por el descubrimiento de la estructura del DNA . Comenzando los aos 50, J. Watson y F. Crick se unieron en el trabajo de dilucidar la estructura del DNA. La estructura tenia que permitir: - Que la molcula de DNA portara informacin; - Que la molcula de DNA pudiera autoduplicarse

Segn el modelo propuesto por Watson y Crick, la molcula de DNA consta de dos columnas hechas de grupos fosfato, alternados con molculas de desoxirribosa, las cuales forman dos hebras paralelas que estn enrolladas como una hlice, dejando las bases nitrogenadas hacia adentro. Las bases nitrogenadas son adenina la que se aparea con timina y citosina con guanina (o viceversa). Este tipo de asociacin entre las dos cadenas del DNA le confiere dos caractersticas importantes: -Las dos cadenas son complementarias -Yy tambin antiparalelas .

Cartografa y Secuenciacin

El P.G.H., al tratarse de un proyecto que pretende identificar la secuencia completa del genoma humano, con toda una secuencia codificante y no codificante, necesita de tcnicas que permitan identificar el lugar y la distancia en que se encuentran los ms de 100.000 genes. En un principio, el P.G.H. fue acordado realizarlo en dos etapas, una de Mapeo fsico de todos los cromosomas, etapa que termino el ao 1998; luego, la segunda etapa corresponde a Secuenciacin, la que parti en 1998.

Hay dos categoras principales de tcnicas de cartografa gentica: Ligamiento o cartografa gentica. que identifica slo el orden relativo a los genes a lo largo del cromosoma;y Cartografa fsica,un conjunto de mtodos ms precisos que permite determinar las distancias entre genes dentro del cromosoma. ambos tipos de cartografa utilizan marcadores genticos, que son caractersticas fsicas o moleculares detectables que se diferencian entre los individuos y se transmiten por herencia. El cdigo gentico, entonces, viene determinado por el orden que ocupan las bases en la escalera de DNA. Por lo general cada seccin de esta escalera tiene una secuencia nica que puede utilizarse para diferenciar unos genes de otros y fijar su posicin en el cromosoma . La siguiente imagen corresponde al supuesto modelo de la cadena de DNA.

Los mapas de ligamiento humano se han elaborado sobre todo siguiendo las pautas de herencia de familias extensas a lo largo de muchas generaciones. Estos estudios se limitan a los rasgos fsicos heredados, fcilmente observables en todos los miembros de la familia. La cartografa fsica determina la distancia real entre puntos diferenciados de los cromosomas. Las tcnicas ms precisas combinan robtica, uso de lser e informtica para medir la distancia entre marcadores genticos. Para realizar estos mapas se extrae DNA de los cromosomas humanos y se rompe aleatoriamente en numerosos fragmentos.

Una de las estrategias para lograrlo consiste en utilizar secuencias de DNA complementarias .Estas secuencias se obtienen gracias al uso de una protena de origen viral (transcriptasa inversa) que es capaz de copiar una molcula de DNA a partir de una molcula de RNA. Debido a que el RNA pierde todas las secuencias no codificantes (intrones) durante su paso desde el ncleo al citoplasma, al utilizarlo como "modelo" uno se asegura que el DNA obtenido de ese RNA posee slo genes "tiles" o codificantes. Posteriormente las secuencias se amplifican cientos de veces en un sistema de "copia automtica" conocido como reaccin de polimerasa en cadena (PCR), con lo cual se obtienen cientos de fragmentos de la secuencia deseada en pocas horas. Finalmente estas secuencias pueden ser sometidas a las distintas estrategias de mapeo que existen en la actualidad.

La secuenciacin es el proceso por el cual se identifican las secuencias en que estn unidas los 300 mil millones de pares de bases y luego, posteriormente, saber que significan estas secuencias. Para determinar la secuencia real de nucletidos, hacen falta mapas fsicos muy detallados que recojan el orden exacto de las piezas clonadas del cromosoma. El mtodo por el cual se secuencia el DNA, consiste en replicar piezas especficas de DNA y modificarlas de modo que terminen en una forma fluorescente de uno de los cuatro nucleotidos. En los modernos secuenciadores automticos de DNA, el nucletido modificado situado al extremo de una de estas cadenas se detecta con un haz de lser y se determina el numero exacto de nucletidos de la cadena a continuacin se combina esta informacin en un ordenador para reconstruir la secuencia de pares de bases de la molcula original de DNA.

El ritmo de acumulacin de secuencias de DNA es vertiginoso ya que su cantidad se dobla cada pocos meses. Actualmente se estima que ya se ha secuenciado casi un dos por ciento del total del genoma humano, pero este dato no debe engaar: con las tcnicas y ritmos actuales, en los prximos aos se obtendr una tasa de 500 Mb por ao. La siguiente imagen corresponde a un mapa gentico del genoma humano.

Alcances del Proyecto Genma Humano

La principal justificacin del P.G.H., de cara a la sociedad, en la promesa de avances importantes en medicina. Aunque el estudio de las enfermedades en humanos se ha venido haciendo mayoritariamente en ausencia de su comprensin gentica, la disponibilidad de tcnicas poderosas anima a emprender la secuenciacin, sistemtica, lo que suministrar un formidable impulso sobre todo para las enfermedades polignicas y multifactoriales. Una de las consecuencias ms inmediatas del P.G.H. es la de disponer de sondas y marcadores moleculares para el diagnstico de enfermedades genticas, de cncer y de enfermedades infecciosas. A plazos mayores, se espera que la investigacin genmica permita adems nuevas generaciones de frmacos, que sean ms especficos y que tiendan a tratar las causas y no slo los sntomas.

Sondas y marcadores moleculares La investigacin y la implementacin de pruebas genticas logr en 1970 una importante tcnica para cartografiar los genes humanos o cariotipos. En el Instituto Karolinska de Suecia se descubri un mtodo para teir los cromosomas humanos con colores fluorescentes, los que al ser iluminados con luz ultra violeta se hacen visibles como bastones a franjas claras y oscuras. Estos cariotipos son un instrumento muy til para el diagnostico de anomalas. Para realizar una prueba en una persona adulta alcanza con una sola gota de sangre, dado que el DNA se puede extraer de los leucocitos (glbulos blancos). Tambin se puede extraer de las muestras de semen (en la cabeza del espermatozoide), algunos mtodos permiten obtenerlo de la saliva) e incluso, examinando el cabello cuando va acompaado de la raz.

Estas son algunas de las enfermedades de las cuales ya existen pruebas disponibles: -hemofilia (defecto en el control de las hemorragias) -fibrosis qustica (acumulacin de mucosidades en los pulmones, interfiere en la respiracin) -mal de alzheimer (enfermedad degenerativa neurolgica marcada por una senilidad precoz) - anemia falciforme ( anemia crnica hereditaria) Terapia gnica Consiste en la aportacin de un gen funcional a las clulas que carecen de esta funcin, con el fin de corregir una alteracin gentica o enfermedad adquirida.

La terapia gnica se divide en dos categoras: -La primera es la alteracin de las clulas germinales lo que origina un cambio permanente de todo el organismo y generaciones posteriores. Esta terapia gnica en la lnea germinal no se considera en los seres humanos por razones tica. -El segundo tipo de terapia gnica, terapia somtica celular, es anloga a un trasplante de rganos. En este caso uno o ms tejidos especficos son objetos, mediante tratamiento directo o extirpacin del tejido, de la adicin de un gen o genes teraputicos en el laboratorio, junto a la reposicin de las clulas tratadas en el paciente. Se han iniciado diversos ensayos clnicos de terapia gentica somtica celular, destinados al tratamiento de cnceres o enfermedades sanguneas, hepticas o pulmonares.

Problemas a causa del Proyecto Genoma Humano

Sin duda el P.G.H. traer como resultado un sin fn de conocimiento y de aplicaciones, pero ser posible secar provecho de algo tan personal como puede ser para la persona la revelacin de su intimidad gentica? o cmo puede el hombre tomar "algo" y hacerlo propio siendo que es patrimonio de toda la humanidad?. Esta discusin comenz cuando en junio de 1991, J.Craig Venter present una peticin para obtener el derecho de propiedad intelectual y comercial sobre 337 genes de tejido nervioso humano obtenidos por l y su laboratorio con la tcnica del cDNA y el uso de la reaccin de la Polimerasa en Cadena (P.C.R.).

El problema se solucion slo cuando se logro que se aceptara la patentacin de genes en los cuales no solo se patenta la secuencia, sino que tambin la mutacin especfica, y adems se patenta el permiso para idear desde ah algn mtodo de terapia gnica, alguna droga especfica o algn tipo de test gnico, a partir de la secuencia que se quiere patentar, dado que el patentamiento debe ir acompaado de una invencin sobre la secuencia seguida. Adems se tuvo que permitir algn tipo de patentamiento, para de esta manera inducir a las empresas privadas a que inviertan en la investigacin y desarrollo del P.G.H.

Consideraciones ticas
El desarrollo cientfico,en lo que respecta al P.G.H., abre las puertas a un sinnmero de tratamientos que podran ser beneficiosos para el hombre. Pero no se debe olvidar que esto implica manipular directamente los mecanismos que transmiten la vida y dirigen la evolucin de las especies, incluyendo la nuestra. As surgen preguntas como: se debe prohibir o desaconsejar algn tipo de manipulacin gentica?, a quin le corresponde la responsabilidad de discriminar entre lo permitido o no?. As, la UNESCO se compromete a promover y desarrollar la reflexin tica en los avances cientficos en las reas de la biologa y la gentica, proclamando los siguientes principios y aprobando la declaracin de estos.