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TEMAS DE INTERES
Definicin y Generalidades Cepas ATCC Historia ATCC MicroBiologics Clasificacin Reconstitucin y Almacenamiento Registro y control Usos en el control de Calidad interno Ventajas de ingresar a un programa de licencia derivada.
Que son las Cepas Referencia Cepas Certificadas: es un material biolgico de referencia certificado. La coleccin certifica que se suministra una determinada cepa, que es un cultivo puro, y que se han observado las convenientes pruebas morfolgicas, bioqumicas y moleculares correspondientes.
ATCC: American Type Culture Collection. Rockville, EU CCTM: Collection Nationale de Cultures de Microorganismes. Institut
Pasteur
NCYC: National Collection of Yeast Cultures. Norwik UK. NCIBM: National Collections of industrial and Marine Bacteria. CECT: Coleccin espaola de cultivos tipos.
Generalidades de la ATCC
La coleccin que almacena la ATCC se inici en 1925, sobre una coleccin de bacteriologa iniciada en 1911. Es una organizacin en la que participan actualmente 21 sociedades cientficas. En la actualidad mantiene colecciones de Bacteriologa, Cultivos celulares, Plsmidos, cidos nucleicos y Genotecas, Micologa y Botnica, Protistologa y Virologa.
Quien es
El primer fabricante de productos Biologicos (microorganismos liofilizados) para el control de calidad, con licencia aprobada por ATCC Patente de distribucin ATCC desde el ao 2004 35 Aos en el Mercado - Laboratorio Comercial (1971) - Fabricante de Medios de Cultivo Preparados (1975) - Microorganismos para el Control de Calidad (1982) - 100% Devocin a los Productos para el Control de Calidad Microbiolgico (1996).
PRINCIPIO DEL SISTEMA DE LIOFILIZACIN Gelatina: medio transporte Leche descremada,acido ascrbico, dextrosa y carbn activado: Agentes Crioprotectores (preservan pared celular, evitan deshidratacin por congelacin). Carbn Vegetal: Neutraliza sustancias toxicas generadas por la liofilizacin
El Certif icado es entregado personalmente por LABCARE a los Usuarios Finales de MicroBioLogics para que el laboratorio lo presente como soporte mientras las Cepas estn siendo utilizadas exclusiv amente en los procedimientos del Control de Calidad. El Certif icado v alida la trazabilidad y autenticidad de las metodologas y controles hechos por los Usuarios Finales clnicos e industriales ante la ATCC y organismos de v erif icacin. Si el prov eedor de microorganismos no puede entregar un CERTIFICADO DE CONFORMIDAD, estos materiales no son autnticos
ATCC.
CEPAS DE REFERENCIA
A fin de demostrar la trazabilidad : las cepas de referencia deben obtenerse directamente de una coleccin con la resea nacional o internacional de cultivo de referencia reconocido. "ISO 11133-1:2000", son: microorganismos definidos, por lo menos a nivel de gnero y especie, catalogados , caracterizados y de origen conocido
CEPAS DE REFERENCIA
Son distribuidas y presentadas comercialmente liofilizadas; los organismos de acreditacin son los encargados de considerar vlida la fuente de procedencia de la cepa a fin de que se cumpla con el requisito de prevenir mutaciones, deterioro o alteracin de las caractersticas tpicas de las cepas. El nmero de repiques a partir de la cepa de referencia a de ser limitado, aceptndose hasta cuatro pases como mximo a partir de la cepa o semilla original de referencia.
PRESENTACION
KWIK-STIK
CEPAREO
Reconstitucion:
Las Cepas de referencia son almacenadas entre 2-8 C hasta su uso. En la reconstitucin y siembra de la Cepas de referencia, se utilizan medios de cultivo de enriquecimiento, las condiciones de incubacin y el procedimiento de almacenamiento varia para cada tipo de microorganismo. Boletin de informacion tecnica TIB.081 Recommended Growth Requirements
CEPAREO
www.microbiologics.com Requerimientos:Hidratacion,Medios de cultivo,Incubacion(atmosferas y Tiempo). Las Cepas de referencia sern sometidas a un control de calidad de pureza y viabilidad, as se le dar registroCepas ATCC\kwik.pdf. Cepas ATCC\lyfodisk.pdf
CEPAS DE RESERVA
Son cepas idnticas logradas mediante un nico subcultivo de una cepa de referencia. Son preparadas y conservadas en el laboratorio, dentro del cual se destina un lugar para su almacenaje, se trata de cepas potencialmente peligrosas y cuya manipulacin queda exclusivamente restringida al personal autorizado. Cada Vial debe estar perfectamente identificado con el nombre de la cepa, procedencia y fecha de congelacin
CEPAS DE RESERVA
Las Cepas de Reserva una vez descongeladas no deben volver a Congelarse. Los mtodos para la preservacin y mantenimiento de cepas de reserva son la LIOFILIZACIN y la CONGELACIN A BAJAS TEMPERATURAS. Se da el uso de agentes Crioprotectores
CEPA DE TRABAJO
Se obtienen por subcultivo de las Cepas de Reserva Se subcultivan en medios slidos de enriquecimiento apropiados para C/microorganismo Se debe Verificar la calidad, pureza y morfologa tpica del subcultivo Nunca subcultivarlas para sustituir a las cepas de Reserva
Cepas de Referencia
Sub cultiv ada una sola v ez
No permitido
Cepa de Reserv a
(Liofilizacin, nitrgeno liquido, ultra congelacin rpida etc.) Especificar tiempo y condiciones de Almacenamiento
6 Pasaje
7Pasaje
8Pasaje
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UTILIDAD DE LOS CULTIVOS DE REFERENCIA ATCC EN EL QC INTERNO 1.Evaluar la calidad de los medios de cultivo. 2.Asegurar la calidad de los resultados de ensayos de laboratorio (coloraciones y desempeo de reactivos) 3.Validar mtodos microbiolgicos.(Pruebas de Sensibilidad)
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Agar Chocolate Agar Thayer Martn Agar Sangre Agares suplementados con Antibioticos Agares Cromogenicos
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METODO ECOMETRICO
Es una tcnica simple que permite Recuperar, Comparar y Cuantificar el crecimiento de microorganismos ATCC con cargas de UFC definidas en diferentes medios de Cultivo con el fin de evaluar su MANUFACTURA.
TECNICA ECOMETRICA DE MOSSEL (RADIAL) MTODO ECOMETRICO MODIFICADO de MILES y MISRA
A. PRUEBA DE PRODUCTIVIDAD Y SELECTIVIDAD PARA MEDIOS DE CULTIVO SLIDOS. B. PRUEBA DE PRODUCTIVIDAD Y SELECTIVIDAD PARA MEDIOS DE CULTIVO LIQUIDOS .
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PRODUCTIVIDAD
Determina el Rendimiento, Recuperacin y crecimiento de microorganismos que habitualmente se desarrollan en un medio de cultivo.
SELECTIVIDAD
Evala la supresin del crecimiento del microorganismo, que se espera sea inhibido en el medio.
450 uL s.s
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-2
-3
-4
-5
-6
1000000 a 10 U F C
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Contar el numero de colonias presente en cada una de las diluciones Calcular IR RP: 70% a 80% RS: 0.1% a 0% IR: N de colonias presentes x Factor dilucin
N de colonias Control x Factor dilucin
-5
-2
-4
-3
PRODUCTIVIDAD Crecimientos por encima de la 5 dilucin.(100 UFC) SELECTIVIDAD Inhibicion completa y/o crecimiento unicamente en la 1 dilucin.(1000.000 UFC)
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pH de 7.2- 7.4
21 22 ml
McFarland DO
0.5% 625 nm
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T est Discos
Ampicilina 10 ug Tetraciclina 30 ug Gentamicina 10 ug Imipenem 10 ug Polimixina B 300 IU Sulfamethoxazole 1.25 ug T rimehoprim 23.75 ug
Cepa ATCC
S.S
Sembrado homogneo con torunda, por estra con rotacin por tres veces
Encubar por 18 horas a 35 + 2 C. En estafilococos y estreptococos por 24 horas completas. Leer con regla y establecer que estn dentro de los rangos de la tabla de ref erencia para cada cepa analizada.
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Nota: Las normas LSCCI/NCCLS sugieren un control de calidad diario y semanal. De no tener las facilidades, se sugiere un control de calidad mensual, debiendo incrementar la frecuencia del mismo de acuerdo a las posibilidades del laboratorio. Pero, se debe realizar por lo menos un control de calidad quincenal para los siguientes antibiticos: Oxacilina, imipenen, meropenem y beta-lactamasa.
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Es un programa amplio de distribucin comercial que asegura la autenticidad de los Materiales Biolgicos de ATCC, que son distribuidos por compaas elegidas por sus credenciales de Sistemas de Calidad, cuidadosas auditorias, investigacin y evaluacin continua de los productos por parte de ATCC.
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TRAZABILIDAD SEGURA
El Programa asegura la trazabilidad de los Materiales Biolgicos desde su origen en ATCC, a travs de los procesos de manufactura de la compaa, el almacenamiento fsico, el manejo y envo del producto desde el fabricante, pasando por los canales de distribucin hasta llegar al Usuario Final. Los acuerdos contractuales unen a todas las partes de este proceso en una cadena de custodia y cadena de responsabilidad adecundose a nuestro mundo actual.
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www.microbiologics.com
mimontoya@ces.edu.co
TEL: (4) 305 35 00 EXT 312
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