UNIVERSIDAD SAN FRANSISCO DE QUITO LABORATORIO DE BIOQUIMICA Cristian Parra (104154), Javier Moran (103903) Prof.

Diego Gangotena 04/05/2012 TEMA Determinacin de minerales en suero sanguneo por absorcin atmica OBJETIVOS Determinar la cantidad de minerales encontrados en suero sanguneo mediante absorcin atmica. METODO Materiales: Tubos de ensayo, pipetas volumtricas de 1 y 5mL, pipetas graduadas de 10mL, buretas, soporte universal, vasos de precipitacin, centrifuga, equipo de absorcin atmica. Reactivos: Suero sanguneo de humanos, acido tricloroacetico al 5,05%, EDTA al 1%, solucin estndar de 1000ppm de calcio, solucin estndar de 1000ppm de magnesio, solucin estndar de 1000ppm de potasio. RESULTADOS Absorbancia para potasio (K) Muestra (ppm) 0 1 2 3 Absorbancia 0 0,319 0,586 0,778

Tabla 1: Estndares de absorbancia para potasio

0.9 0.8 0.7 Absorbancia 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 1 2 3 Concentracion en ppm Absorvancia de potasio

y = 0.2601x - 0.2295

Grafica 1: Relacion entre absorbancia con concentracin de potasio Muestras de sangre: 1.- 2,811ppm de K en sangre 2.- 2,811ppm de K de sangre Longitud de onda: 765nm Absorbancia para calcio Muestra (ppm) 0 1 2 3 4 5 Absorbancia 0 0,0115 0,0358 0,0535 0,086 0,117

Tabla 2: Estndares de absorbancia para calcio

0.14 0.12 0.1 Absorbancia 0.08 0.06 Absorvancia de calcio 0.04 0.02 0 -0.02 0 1 2 3 4 5 Concentracion ppm y = 0.0236x - 0.032

Grafica 2: relacin entre absorbancia y concentracin de calcio Muestras de sangre: 1.-0,615ppm de calcio en sangre 2.-0,600ppm de calcio en sangre Longitud de onda: 422nm Absorbancia para el magnesio Muestra (ppm) Absorbancia 0 0 0,5 0,281 1 0,47 1,5 0,634 2 0,851 Tabla 3: Estandares de absorbancia para magnesio

1 0.9 0.8 0.7 Absorbancia 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 0.5 1 1.5 2 Concentracion en ppm y = 0.2055x - 0.1693 Absorvancia de magnesio

Grafica 3: relacin entre absorbancia y concentracin de magnesio Muestras de sangre: 1.-0,305ppm de Mg en la sangre 2.-0,405ppm de Mg en la sangre Longitud de onda: 285nm Para terminar nuestro experimento consultamos los valores normales de Ca, K y Mg en la sangre los cuales son: Ca: 0.890ppm K: 3,392ppm Mg: 0,17 a 0,24ppm DISCUSIN En la elaboracin de la prctica que consista en la determinacin de minerales en el suero sanguneo podemos decir que se realiz con xito ya que al momento de medir la absorbancia de cada una de las soluciones, es decir Ca, Mg y K con el equipo de absorcin atmica con las lmparas de cada mineral el grfico de absorcin versus concentracin (en ppm) nos mostr una lnea recta que indica que a mayor concentracin del mineral mayor va a ser la absorbancia del mismo. Es decir que los pacientes de las diferentes muestreas si tienen en buena cantidad estos tres minerales en su plasma sanguneo.

Aunque se observ una lnea recta casi perfecta en los grficos se pudo haber cometido pequeos errores en la elaboracin de la prctica como por ejemplo al momento de obtener el sobrenadante del segundo centrifugado de las muestras de sangre pudimos haber obtenido un poco de la parte no centrifugada lo que pudo haber generado que los minerales no se encuentren en la misma concentracin. Otro error que pudo haber ocurrido tambin puede ser al momento de preparar las soluciones diluidas de ppm de cada mineral y de las sustancias de control que no contenan el mineral, ya que como son concentraciones tan pequeas una gota ms o una gota menos de cualquiera de los reactivos usados para preparar las muestras alteraran la concentracin de ste y por ende el posterior resultado. A ms de estos dos errores lo nico que podra haber causado un mal resultado de la prctica pudo haber sido contaminacin en alguno de los tubos que contenan a las concentraciones de los minerales. Comparando nuestros resultados obtenidos de la prctica con las concentraciones normales minerales en la sangre podemos decir que las muestras de sangre contienen niveles poco bajos de calcio en la sangre pero no muy significativos. Las muestras de sangre tambin contienen niveles bajos de potasio y un poco altos de magnesio. Estas variaciones pueden ser causa del paciente o una mala prctica de laboratorio, tal vez se realizo equivocadamente la absorvancia o las soluciones estndar fueron mal realizadas CONCLUCION Podemos concluir entonces que en las tres muestras diferentes de plasma sanguneo todos los pacientes contenan una buena cantidad de minerales ya que en la medicin de absorcin mediante el equipo de absorcin atmica con las lmparas de cada mineral el grafico muestra una lnea recta ascendente, lo que quiere decir que a medida que la concentracin en ppm de cada mineral aumente tambin lo va a hacer la absorbancia de cada uno de estos, culminando entonces con una buena realizacin de la prctica sin ningn tipo de error significativo. CUESTIONARIO 1.- Cul es la diferencia entre sangre y suero sanguneo? El suero sanguneo es el componente de la sangre resultante despus de la coagulacin de sta y la eliminacin del coagulo resultante. Es lo mismo que el plasma sanguneo, pero sin las protenas involucradas en la coagulacin. En cambio la sangre es un tejido que circula por el cuerpo de todos los organismo, de color rojo por la hemoglobina y se divide en dos fracciones principales que son los elementos formes y el plasma sanguneo (Randall, 1998). 2.- Enumerar los constituyentes de la sangre La sangre tiene cuatro componentes principales que son los glbulos rojos, los glbulos blancos, el plasma y las plaquetas (El pas, 2012). 3.- Enumerar los constituyentes del suero sanguneo

El suero, es el remanente el plasma sanguneo una vez consumidos los factores hemostticos por la coagulacin de la sangre; es decir que tiene los mismos componentes del plasma pero sin las protenas de coagulacin: componentes inorgnicos, componentes orgnicos, minerales, metabolitos secundarios y protenas plasmticas (Randall,1998). 4.- Qu funcin cumple el acido tricloroacetico cuando se lo mezcla con el suero sanguneo? Desnaturaliza a las protenas 5.- Qu elementos no se pueden determinar por absorcin atmica y por que? Todos los elementos que no son analitos. 6.- Enumerar los usos de la absorcin atmica. En agricultura y alimentos para anlisis de suelos, fertilizantes, materias vegetales y alimentos. En biologa determinacin de txicos en orina, sangre, heces, leche materna. En geologa anlisis de suelos, sedimentos y rocas. En tratamiento de aguas contaminadas, salmueras y aguas de mar. (Clemente santana) 7.- Explicar cmo funciona un equipo de absorcin atmica. El equipo de absorcin atmica se basa en un mtodo qumico analtico que consiste en la atomizacin del componente de inters en una matriz lquida utilizando un nebulizador prequemador y un quemador con forma que muestra una llama con una determinada longitud de onda. La niebla atmica es descompuesta y expuesta a una energa de una lmpara de ctodo hueco construida con el mismo compuesto a analizar. La temperatura de la llama es lo bastante alta para que la llama de por s no mueran los tomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos del analito es hecha por el uso de lmparas que brillan a travs de la llama a diversas longitudes de onda para cada tipo de analito o compuesto de inters (Jacinto, n.f.).

ANEXOS Para preparar 200ml de acido tricloroacetico al 5,05%

Para preparar 100mL de EDTA al 1%

Para preparar 100mL de LiCl

Para sacar solucin de 10ppm de calcio ( ) ( ) ( )

( ) ( ) ( )

Bibliografia Randall, D.; Burggren, W. et French, K. (1998). Eckert Fisiologa animal (4 edicin) Cf. "Descifrados dos grupos sanguneos ms", en El Pas 28-II-2012, http://sociedad.elpais.com/sociedad/2012/02/28/actualidad/1330437322_008896.html Jacinto, Christian (n.f.). Conociendo el equipo de absorcin atmica. Unversidad Nacional de ingenieras. Facultad de ciencia. Tomado de http://www.slideshare.net/cjacintoh/conociendo-el-equipo-de-absorcin-atmica Clemente santana. Espestroscopia de absorcin atmica. 11/02/2010. 3/05/2012 http://www.ua.es/es/investigacion/sti/servicios/analisis_instrumental/analisis/aas.html