ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE

FITOMEJORAMIENTO

SUSANA GMEZ POSADA

Ingeniero Agrnomo. MANUEL FRANCISCO POLANCO Ingeniero Agrnomo Esp.

PEREIRA - 2007
1

COMIT DIRECTIVO Jaime Alberto Leal Afanador Rector Roberto Salazar Ramos Vicerrector Acadmico Sehifar Ballesteros Moreno Vicerrector Administrativo y Financiero Maribel Crdoba Guerrero Secretaria General Edgar Guillermo Rodrguez Director de Planeacin

MDULO

FITOMEJORAMIENTO

Copyrigth Universidad Nacional Abierta y a Distancia ISBN

2007 Centro Nacional de Medios para el Aprendizaje

Contenido
UNIDAD 1 ....................................................................................................... 9 PRINCIPIOS Y OBJETIVOS DEL FITOMEJORAMIENTO ............................ 9 INTRODUCCIN ........................................................................................ 9 CAPITULO 1................................................................................................. 10 OBJETIVOS BSICOS DEL FITOMEJORAMIENTO Y SISTEMAS EVOLUTIVOS DE LAS PLANTAS............................................................... 10 INTRODUCCIN. ..................................................................................... 10 1.Leccin 1. Importancia del Fitomejoramiento. .................................... 12 1.1 Justificacin del fitomejoramiento .................................................... 13 1.2 Objetivos bsicos de fitomejoramiento ............................................ 15 1.3 El Fitomejoramiento en Colombia.................................................... 16 2.Leccin 2. Hechos histricos de la biologa y la gentica relacionados con el fitomejoramiento. ........................................................................... 19 2.1. Hechos histricos ms sobresalientes............................................ 19 2.2 El impacto de la biotecnologa en el desarrollo sostenible de la agricultura. ............................................................................................. 22 3. Leccin 3. Mecanismos naturales de la multiplicacin de las plantas. .. 24 3.1. La reproduccin sexual................................................................... 24 3.2. Reproduccin asexual. ................................................................... 26 4. Leccin 4. Origen de las especies vegetales y su domesticacin ......... 29 4.1 Centro de origen de las especies cultivadas.................................... 29 4.2. Domesticacin de las plantas ......................................................... 33 CAPITULO 2................................................................................................. 35 BASES DEL FITOMEJORAMIENTO CONVENCIONAL ............................ 35 INTRODUCCIN. ..................................................................................... 35 5. Leccin 5. Gentica Mendeliana. .......................................................... 36 5.1 Las Leyes de Mendel....................................................................... 36 5.2 El Gen.............................................................................................. 39 5.3 Los Genes Alelos............................................................................. 40 5.4 Los cromosomas. ............................................................................ 41 5.5 El Genotipo. ..................................................................................... 42 5.6 Fenotipo........................................................................................... 43 3

6. LECCIN 6. CRUZAMIENTOS Y SEGREGACIN.............................. 45 6.1. Cruzamientos ............................................................................... 45 6.2 SEGREGACIN. ............................................................................. 46 7. Leccin 7. Carcter, heredabilidad y variabilidad gentica.................... 49 7.1 El carcter........................................................................................ 49 7.2 Heredabilidad................................................................................... 52 7.3 La variabilidad gentica. .................................................................. 53 8. Leccin 8. Cruzamiento polihbrido ....................................................... 56 9. Leccin 9. Herencia ligada al sexo....................................................... 59 CAPITULO 3................................................................................................. 62 Patrones modificadores de la herencia Mendeliana................................ 62 INTRODUCCIN. ......................................................................................... 62 10. Leccin 10. Interacciones Allicas. .................................................... 63 10.1 Dominancia.................................................................................... 63 10.2 Recesividad. .................................................................................. 63 10.3 Codominancia................................................................................ 63 10.4 Sobredominancia........................................................................... 64 10.5 Series allicas o Alelismo mltiple. ................................................ 65 11. Leccin 11. Interacciones no allicas.................................................. 67 11.1 Epstasis o interaccin interallica :............................................... 67 11.2 Epstasis dominante: 12:3:1........................................................... 67 11.3 Epstasis recesiva: ......................................................................... 68 11.4 Epstasis Doble Dominante. (15:1) ................................................ 68 11.5 Doble Epstasis recesiva (9:7) ....................................................... 69 11.6 Genes duplicados con efectos acumulativos (9: 6: 1).................... 69 12. Leccin. 12. Ligamiento y recombinacin gentica ........................... 71 12.1 Clases de ligamiento:..................................................................... 71 13. Leccin 13. Cruce de prueba. ............................................................. 74 14. Leccin 14. Interaccin genotipo por ambiente. .................................. 76 15. Leccin 15. Estabilidad y adaptabilidad............................................... 79 UNIDAD 2 ..................................................................................................... 82 SISTEMAS DE REPRODUCCIN DE LAS PLANTAS CULTIVADAS ....... 82 INTRODUCCIN ...................................................................................... 82

CAPITULO 4................................................................................................. 83 Sistemas de reproduccin sexual en plantas autgamas y algamas y factores que la favorecen........................................................................... 83 INTRODUCCIN. ..................................................................................... 83 16. Leccin 16. Plantas Autogamas .......................................................... 84 16.1 Gametognesis en plantas. Mecanismo de Fertilizacin ............... 84 16.2 Plantas autgamas ........................................................................ 87 17. Leccin 17. Plantas algamas............................................................. 90 18. Leccin 18. Mecanismos que Aseguran la Alogamia. ......................... 93 18.1 Dicogamia...................................................................................... 93 18.2 Plantas Intermediarias ................................................................... 94 18.3 Barreras mecnicas ....................................................................... 95 18.4 Agentes polinizadores.................................................................... 95 19.Leccin 19. Plantas dioicas ............................................................... 100 19.1 Presentacin secundaria de polen............................................... 101 19.2 Evolucin de la dioecia ................................................................ 102 19.3 Dioecia y polinizacin .................................................................. 105 20. Leccin 20. Incompatibilidad ............................................................. 106 20.1 Incompatibilidad bioqumica y gentica ..................................... 106 20.2 Incompatibilidad gametoftica ...................................................... 110 20.3 Incompatibilidad esporoftica ....................................................... 112 21. Leccin 21. Polinizacin Cruzada ..................................................... 115 21.1 Coevolucin ................................................................................. 115 21.2 Incompatibilidad morfolgica ....................................................... 117 21.3 La Esterilidad ............................................................................... 122 22. Leccin 22. Androesterilidad ............................................................. 124 22.1 Androesterilidad gentica ............................................................ 125 22.2 Androesterilidad citoplasmtica ................................................... 127 23. Leccin 23. Androesterilidad gentica- citoplasmtica...................... 129 CAPITULO 5............................................................................................... 132 Reproduccin asexual de las Plantas..................................................... 132 INTRODUCCIN. ................................................................................... 132 24. Leccin 24. Apomixis ........................................................................ 133 24.1 Mecanismos de Reproduccin Asexual ....................................... 133 24.2 Apomixis o Agamospermia .......................................................... 135 5

25. Leccin 25. Embriona Adventicia ..................................................... 139 25.1 Embriona nucelar........................................................................ 140 25.2 Seudogamia................................................................................. 141 25.3 Andrognesis............................................................................... 141 25.4 Poliembriona............................................................................... 142 26. Leccin 26. Aposporia y Diplosporia ................................................. 144 26.1 Aposporia..................................................................................... 144 26.2 Diplosporia................................................................................... 145 26.3 Control gentico de la apomixis ................................................... 149 CAPITULO 6............................................................................................... 150 Gentica cuantitativa................................................................................ 150 INTRODUCCIN. ................................................................................... 150 27. Leccin 27. Gentica de Poblaciones. .............................................. 151 27.1Frecuencias fenotpicas, genotpicas y allicas o gnicas............ 152 27.2 Cuantificacin de la frecuencia allica y genotpica..................... 153 27.3 Variabilidad en poblaciones naturales. Polimorfismo y heterocigosidad. .................................................................................. 154 28. Leccin 28. Medidas de tendencia central. ....................................... 156 29. Leccin 29. Medidas de variabilidad. ................................................ 158 30. Leccin 30. Aptitud combinatoria ...................................................... 161 30.1 Evaluacin de la aptitud combinatoria general (ACG.) ................ 161 30.2 Evaluacin de aptitud combinatoria especfica ACE.................... 162 30.3 Seleccin recurrente para aptitud combinatoria general.............. 163 30.4 Seleccin recurrente para aptitud combinatoria especfica.......... 164 UNIDAD 3 ................................................................................................... 165 MTODOS DE MEJORAMIENTO GENTICO DE PLANTAS .................. 165 INTRODUCCIN .................................................................................... 165 CAPITULO 7............................................................................................... 166 Mtodos de mejoramiento de plantas autgamas ................................. 166 INTRODUCCIN. ................................................................................... 166 31. Leccin 31. Seleccin individual........................................................ 167 32. Leccin 32. Seleccin masal. ............................................................ 170 33 Leccin 33. Mtodo genealgico pedigr ......................................... 173 34 Leccin 34. Mtodo por hibridacin con seleccin masal. ................. 177 6

35 Leccin 35. Mtodo de retrocruzamiento ........................................... 179 CAPITULO 8............................................................................................... 183 Mtodos de mejoramiento de .................................................................. 183 plantas algamas...................................................................................... 183 INTRODUCCIN. ................................................................................... 183 36 Leccin 36. Teora de Hardy-Weinberg.............................................. 184 36.1. Condiciones para que se presente en equilibrio en una poblacin. ............................................................................................ 184 36.2. Consecuencias del Equilibrio Hardy-Weinberg ....................... 186 36.3 Procesos que cambian las frecuencias gnicas. ......................... 187 37 Leccion 37. Seleccin Masal .............................................................. 189 37.1 Requisitos para una seleccin masal adecuada.......................... 190 37.2 Seleccin masal estratificada. ..................................................... 191 37.3 Seleccin masal convergente-divergente. ................................... 192 38. Leccin 38. Seleccin Recurrente intrapoblacional........................... 194 38.1. Seleccin recurrente usando promedios de familias. .............. 197 38.2. Seleccin de medios hermanos: mazorca por surco modificada (Lonnquist 1964).................................................................................. 197 38.3. Seleccin de hermanos completos.......................................... 198 38.4. Seleccin recurrente de lneas S1 ........................................... 199 38.5. Seleccin recurrente de lneas S2........................................... 200 39. Leccin 39. Seleccin recurrente interpoblacional. ........................... 201 39.1. Seleccin recurrente recproca de familias de medios hermanos 201 39.2. Seleccin recurrente recproca de familias de hermanos completos ............................................................................................ 203 39.3. Modificacin de la seleccin recurrente recproca de medios hermanos usando bloques aislados .................................................... 204 39.4. Modificacin de la seleccin recurrente recproca de medios hermanos usando plantas prolficas. ................................................... 205 40. Leccin 40. Seleccin por hibridacin. .............................................. 206 40.1. Hbridos entre lneas consanguneas ...................................... 207 40.2. Utilizacin de la androesterilidad para la produccin de semilla hbrida 209 41. Leccin 41. Seleccin en variedades sintticas ............................... 213 41.1. Prueba de policruzamiento o poly-cross ................................. 214 41.1.1 Variedades sintticas de lneas homocigticas ........................ 214 41.1.2 Variedades sintticas obtenidas de clones. .............................. 215 41.1.3 Variedades sintticas obtenidas de autofecundaciones. .......... 215 7

41.2. Variedades sintticas de cultivos forrajeros ............................ 216 41.3. Diferencias entre variedades sintticas e hbridos. ................. 217 CAPITULO 9............................................................................................... 219 Mtodos de fitomejoramiento no convencional..................................... 219 INTRODUCCIN. ................................................................................... 219 42. Leccion 42. Mejoramiento de especies de reproduccin asexual .... 220 42.1. La seleccin clonal. ................................................................. 220 42.2. Hibridacin y seleccin clonal ................................................. 223 42.3. Mtodos de mejoramiento en especies apomticas................. 229 43. Leccin 43 Mejoramiento gentico mediante induccin de mutaciones. ................................................................................................................ 232 44. Leccin 44. Seleccin asistida con marcadores moleculares............ 236 44.1 Los Marcadores morfolgicos. ................................................ 236 44.2 Los marcadores morfoagronmicos. ....................................... 236 44.1. Los marcadores bioqumicos .................................................. 237 44.3 Los marcadores moleculares .................................................. 237 45. Leccin 45. Construccin de plantas transgnicas ........................... 244 45.1. Cmo se crea una Planta Transgnica? ................................. 244 45.2 Beneficios de las plantas transgnicas. ................................... 249 45.3 Desventajas de las plantas transgnicas ................................ 249 45.4 Descubiertas plantas transgnicas naturales.......................... 251 BIBLIOGRAFIA.................................................................................... 252

UNIDAD 1
PRINCIPIOS Y OBJETIVOS DEL FITOMEJORAMIENTO

INTRODUCCIN
El fitomejoramiento es la disciplina de las ciencias biolgicas, responsable de la creacin de nuevas variedades o hbridos de especies vegetales con caractersticas mejoradas de importancia como son altos rendimientos por rea de produccin, resistencia a las principales plagas y enfermedades, capacidad de adaptacin a diferentes condiciones de clima y suelo, precocidad, mayor contenido nutricional y excelente presentacin entre otras, lo cual se logra alterando o modificando la herencia gentica de las plantas. Por tanto, el fitomejoramiento ha contribuido en forma decisiva al incremento de la produccin agrcola desde los mismos inicios de la agricultura, pero fue con el redescubrimiento de las leyes de Mendel en 1900 por parte de Correns, De Vries y Tschermak que se instituye como ciencia y en la dcada de 1960 a 1970 da origen a la famosa revolucin verde, con la creacin de variedades de gran rendimiento en especies como el maz, arroz, trigo y soya, que hicieron posible un aumento espectacular de la produccin de alimentos en todo el mundo. Este curso pretende que el estudiante adquiera los conocimientos bsicos que necesita un fitomejorador para manejar un programa de mejoramiento vegetal tanto para especies conocidas como de nuevas especies promisorias, que contribuyan a la produccin de alimentos y/o dems productos tiles al hombre. De igual manera se busca profundizar en los aspectos morfofisiolgicos y genticos de las principales especies cultivadas.

CAPITULO 1.
OBJETIVOS BSICOS DEL FITOMEJORAMIENTO Y SISTEMAS EVOLUTIVOS DE LAS PLANTAS

INTRODUCCIN.
Cuando el hombre nmada da el paso hacia el sedentarismo dando origen a ncleos sociales organizados, se ve en la necesidad de proveerse de alimento por medios diferentes a la caza y la recoleccin. En ste preciso momento surgen las bases empricas de la agricultura. El hombre prehistrico, buen observador de la naturaleza, reconoce los procesos de desarrollo de las plantas y empieza a domesticar especies a fin de proveerse alimento en forma continua. En ste proceso debi haber escogido las mejores semillas, aplicando de manera emprica procesos de seleccin discriminatorio, en donde supo manejar de forma conciente las variaciones hereditarias de las especies, dando origen a una serie de poblaciones diferentes de plantas cultivadas cuyas caractersticas agronmicas fue manipulando a fin de crear condiciones aptas para su desarrollo y produccin. Las diversas razas de maz que aun se cultivan en toda Amrica, son un ejemplo claro de la exitosa manipulacin de la variabilidad genotpica que realizaron nuestros ancestros sobre la que se sustentaron la mayora de las culturas de Mesoamrica. As, desde el inicio de la agricultura el hombre se ha preocupado por hacer que sus plantas cultivadas sean mas productivas, posean una mayor resistencia a plagas, enfermedades y a condiciones adversas del medio ambiente y ltimamente por que posean propiedades nutricionales superiores y de mejor calidad. Esto ha sido posible gracias al desarrollo de la ciencia del 10

mejoramiento vegetal o fitomejoramiento, enfocada a la obtencin de tipos de especies aptos para satisfacer estas necesidades. El fitomejoramiento se define entonces, como la ciencia que tiene como objeto modificar o alterar la herencia gentica de las plantas para obtener tipos mejorados (variedades o hbridos), mejor adaptados a condiciones especificas y de mayores rendimientos econmicos que las variedades nativas o criollas (Vallejo. 1992). El mejoramiento interacta con muchas disciplinas, entre ellas la fisiologa, la fitopatologa, la entomologa, la climatologa, la bioqumica, la gentica, la biometra, la sociologa, la economa, para obtener materiales genticamente superiores, econmicamente sustentables y socialmente aceptados. En un pas como el nuestro, con una fuerte tradicin agrcola, el desarrollo de nuevas variedades vegetales mejoradas es imperante para facilitar el desarrollo de los dems sectores productivos de la nacin. Este curso pretende por tanto, dar a los estudiantes del programa de agronoma una fundamentacin bsica del mejoramiento de plantas, para que conozcan los mtodos modernos de fitomejoramiento y su utilizacin en especies autgamas y algamas.

OBJETIVOS Al finalizar el estudio del captulo, el estudiante estar en capacidad de: 1. Reconocer la importancia de los programas de fitomejoramiento en el desarrollo agrcola de los pases. 2. Deducir la influencia que tiene el fitomejoramiento en la produccion agrcola y sus consecuencias en el desarrollo socioeconmico de las regiones. 3. Conocer como ha sido el desarrollo del fitomejoramiento en Colombia y las entidades que se dedican a este fin.

11

1. Leccin 1. Importancia del Fitomejoramiento.

Hoy da y de manera global parece superado con creces las previsiones que hiciera el reverendo Thomas Malthus en el ao de 1798 de que el hambre sera el principal controlador de la explosin demogrfica, al analizar como el crecimiento de la poblacin humana segua un comportamiento geomtrico, mientras que el crecimiento de la produccion de alimentos era aritmtico. El flagelo del hambre que afecta aun buen nmero de poblaciones en especial en pases llamados del tercer mundo, a pesar de los grandes avances logrados en la agricultura al incrementar los rendimientos por rea y en el tiempo, obedece mas a decisiones polticas y de mala distribucin de la riqueza, que hace que los mas pobres no puedan tener una alimentacin adecuada. El incremento de la productividad de las plantas, se ha logrado bsicamente de tres maneras: Por el mejoramiento de las condiciones abiticas (medioambientales) donde se desarrollan los cultivos; con la adecuacin del suelo, suministro adecuado de agua, control de heladas, suministro de nutrientes y el manejo de los factores biticos como el mejor control de plagas, enfermedades y malezas, en otras palabras, por el mejoramiento del manejo agronmico de los cultivos. Por la alteracin gentica de las plantas, que resulta del fitomejoramiento, que produce plantas genticamente superiores en su adaptacin al medio ambiente y con mayores posibilidades de defensa ante las condiciones adversas de tipo bitico y abitico. Por el aprovechamiento simultaneo del mejoramiento vegetal y manejo agronmico.

En los pases industrializados la agricultura utiliza los grandes avances tecnolgicos para forzar a las plantas a expresar todo su potencial gentico y para modificar el genoma vegetal con biotecnologa, con el fin de producir plantas transgnicas capaces de utilizar de mejor manera los insumos agrcolas y que se adecuan mejor a las condiciones agronmicas ideadas para ellas y al uso de la maquinaria diseada para las diferentes labores culturales. Los pases en va de desarrollo enfocan los esfuerzos en fitomejoramiento al incremento de la produccin agrcola a fin de garantizar la seguridad alimentaria y el aumento de los ingresos del sector agrcola. Aqu, la gran 12

mayora de los cultivos segn estimaciones, expresan slo el 20 por ciento de su potencial productivo, debido generalmente a las altas presiones abiticas (suelos inadecuados, sequa), pero tambin a algunas presiones biticas, como enfermedades, insectos plaga, competencia con arvenses y nutricin deficiente de las plantas. Bajo estas condiciones, los grandes avances logrados por el fitomejoramiento no puede resolver por si solos todos estos problemas. Adems, los materiales mejorados son ms costosos que los materiales autctonos, requieren de insumos acompaantes tambin costosos, del uso de maquinaria y tecnologas que la mayora de las veces no estn al alcance de los agricultores de bajos recursos financieros, sin contar que los materiales mejorados pueden no estar adaptados a las condiciones locales, llevando al fracaso de la produccin. En estos casos los fitomejoradores pueden contribuir a incrementar las producciones mediante la creacin de variedades mejoradas, aptas para las condiciones agroecolgicas particulares de regin y con suficiente rusticidad para tolerar las presiones que sufren en zonas donde a menudo los fertilizantes, los productos qumicos y el riego son demasiado costosos o inasequibles. As mismo, los fitomejoradores pueden contribuir con el desarrollo de las regiones mejorando la produccin de aquellas especies o cultivos nativos con mercados potenciales como productos naturaceuticos, frutas exticas, fibras, resinas etc; poco conocidos en los mercados internacionales.

1.1 Justificacin del fitomejoramiento

Se puede afirmar con toda certeza que aun hoy en da, el hombre sigue dependiendo directa o indirectamente de las plantas, para su alimentacin, vestido, salud, vivienda y sus procesos industriales. Sin embargo el nmero de especies vegetales que el hombre utiliza en su alimentacin es mnima comparada con el gran nmero de especies existentes en la naturaleza. De las mas de 3000 especies probadas por el hombre, actualmente se usa un poco mas de 100; entre esas 100 hay 20 que suplen sus necesidades fundamentales de sustento, entre las que se destacan, el trigo, arroz, maz, soya, cebada, sorgo, frjol y algunos tubrculos como la papa y la yuca. La dependencia de un nmero tan limitado de cultivos amenaza la seguridad alimentara de la humanidad. (Valois, 1996). La preocupacin del hombre por satisfacer la demanda de alimentos de una cada vez ms creciente poblacin mundial, que se estima aumentar en los prximos 25 a 30 aos en mas de 2.500 millones de habitantes hasta llegar a los 8.500 millones, requerir mejorar el rendimiento de los cultivos de manera 13

eficiente y sostenible (FAO. 1996). Esta preocupacin ha contribuido a resultados espectaculares en el mejoramiento gentico de las plantas, produciendo miles de variantes de las especies cultivadas, incluyendo plantas transgnicas, que se convierten en el mayor patrimonio para la seguridad alimentara de un pas. Los pases que realizan investigacin en el mejoramiento gentico de las plantas, pueden enfrentar de mejor manera los retos del desarrollo socioeconmico de sus diferentes regiones y condiciones de sus agricultores, acortando la brecha con los pases industrializados al ser menos dependientes de estos. En Colombia como en muchos pases vecinos, el fitomejoramiento fue inicialmente obra de los mismos agricultores, posteriormente paso ser obra de las instituciones del estado como el ICA, de Universidades y de algunas empresas privadas, que en la mayora de los casos no tomaron en cuenta a los usuarios para la obtencin de las plantas mejoradas. Recientemente, en muchos pases, los cientficos fitomejoradores han reconsiderado su posicin e involucran en sus trabajos de una manera u otra, a los agricultores, dentro de lo que ha sido denominado fitomejoramiento participativo (FP). A partir de ste ha sido posible desarrollar variedades que obedecen a las verdaderas condiciones agro-ecolgicas, socio econmicas, al nivel tecnolgico y cultural de los agricultores, generando una agricultura, mas sostenible.
Figura 1: Ilustracin del proceso de la Investigacin Accin Participativa

Fuente: Agronoma mesoamericana 17(3): 291-308. 2006

El fitomejoramiento debe ser considerado como la mejor estrategia para generar: Ciencia y tecnologa 14

 Desarrollo socioeconmico independiente de un pas y garantizar su seguridad alimentara La conservacin de los recursos fitogenticos

1.2 Objetivos bsicos de fitomejoramiento

Desde el inicio de la agricultura, hace unos 10.000 aos, el fitomejoramiento, ha sido la principal estrategia utilizada por el hombre, para convertir las plantas con algn potencial agrcola e industrial en verdaderos cultivos (domesticacin) y posteriormente para mejorar su adaptacin y defensa a los diversos factores biticos y abiticos adversos. Aunque los objetivos del fitomejoramiento pueden variar de acuerdo a la especie, al estado de domesticacin o mejoramiento en que est se encuentre y de las condiciones y recursos del agricultor que va utilizar finalmente los materiales mejorados. En trminos generales y como consecuencia de la labor del fitomejoramiento, se puede afirmar que el hombre ha logrado producir nuevos cultivares con caractersticas tales como: Amplia adaptacin ambiental y especfica: plantas menos exigentes y mas rusticas para adaptarse a nuevas zonas de cultivo, con las que el agricultor puede tener mas confianza de sembrarlas y tener un buen rendimiento, en aquellas en regiones con problemas de suelo y climas difciles, sin que sea necesario la aplicacin de correctivos al suelo, fertilizantes y riego entre otros. Mayor resistencia o tolerancia a plagas y enfermedades limitantes: Es quizs una de las mas importantes del fitomejoramiento, porque para muchas especies, esta ha sido la nica va para combatir plagas y enfermedades y en la mayora de los cultivos ha permitido reducir ampliamente los costos de produccin tanto como la contaminacin ambiental por el no uso de agroqumicos. Mayor rendimiento y produccin por unidad de rea: Mediante aumento de la eficiencia fisiolgica de las plantas, mejor aprovechamiento de los recursos ambientales y de insumos agrcolas y de ciertos caracteres agronmicos. Como ejemplo, en maz y sorgo, la obtencin de variedades mas enanas para evitar el volcamiento; en variedades de soya, la obtencin de las primeras vainas a mayor altura del suelo para poder realizar cosecha mecanizada. Mejora de la calidad de los productos agrcolas: A partir del mejoramiento de caracterstica intrnsecas de calidad de cada producto. Algunos ejemplos son en algodn, una fibra mas fuerte y larga; habichuelas sin hebras; manzanas con mejor sabor; tomates con mas vitaminas y trigo con mayor contenido de protenas.

15

Plantas ms precoses en su desarrollo, que permiten cosechar el producto en menor tiempo; posibilitando con ello, obtener mas cosechas durante el ao y escapar a agentes dainos para las plantas como plagas y enfermedades presentes en el campo. Mejor competencia frente a malas hierbas y plantas arvenses mediante la obtencin de plantas con un crecimiento ms rpido en sus fases juveniles, que le permiten superar a las malas hierbas. Materiales desarrollados para las condiciones de agricultores que utilizan bajo nivel tecnolgico y/o practican agricultura de subsistencia. Materiales mejorados adecuados para ser sembrados en asocio con otras especies, que toleran y resistente la asociacin y la competencia.

Podemos concluir en esta parte, que los programas de mejoramiento de plantas, junto con el fitomejorador y aun los mismos agricultores, identifican y definen las prioridades de mejora de sus cultivares, que les permita ser ms competitivos en las condiciones de los mercados a los que van dirigidos sus productos.

1.3 El Fitomejoramiento en Colombia.

No se tienen datos precisos sobre el nacimiento del fitomejoramiento en Colombia, por lo que se supone que ste naci en el pas con la fundacin de las estaciones experimentales del Instituto Colombiano Agropecuario ICA en la dcada de 1930 a 1940, tales como: el centro de investigaciones de Palmira (Valle del Cauca), Tulio Ospina (Ro negro Antioquia), Aracata (Magdalena), Armero (Tolima) y La Picota (Bogot-C/marca). Posteriormente en el ao de 1950 el Gobierno Nacional, bajo la direccin de la Oficina de Investigaciones Especiales del Ministerio de Agricultura, firmo un convenio con la Fundacin Rockefeller, que marc el inicio de las investigaciones sobre fitomejoramiento en el Pas, iniciando los trabajos de fitomejoramiento regional en maz, frjol, trigo, cebada, avena, papa y arroz, que dieron grandes frutos en los subsiguientes aos, con la obtencin de variedades mejoradas, adaptadas a las condiciones locales, que aumentaron ampliamente los rendimientos de estas especies, colocando a Colombia como un pas reconocido por sus programa de fitomejoramiento y de materiales que se han convertido en la base para posteriores investigaciones en otros pases. Cuando el Estado fue retirando el apoyo para la investigacin al ICA, esta responsabilidad pas los gremios de productores y entidades privadas, crendose centros de investigacin como Cenicaf, Cenicaa, Cenipalma, Cenibanano, La Universidad Nacional de Colombia, Corpoica y empresas semillistas, con investigacin de fitomejoramiento para sus cultivos de inters, lo que ha permitido seguir ofreciendo a los agricultores materiales 16

vegetales que cumplen con las mas altas exigencias de los mercados nacionales e internacionales. Gracias a estas nuevas instituciones se continua produciendo variedades e hbridos de maz, frjol, yuca, papa, cebada, con Corpoica y Fenalce, Hortalizas con la Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira, Caf con resistencia a roya por Cenicaf, nuevas variedades de caa de azcar con mayor produccion por rea, en Cenicaa e ICA, nuevas variedades en arroz y yuca por el Centro Internacional de Agricultura Tropical CIAT e ICA entre otras. Los programas nacionales de mejoramiento se orientan principalmente a adaptar el germoplasma que se importa a las condiciones y necesidades locales y a introducir caractersticas determinadas (resistencia a las plagas, tolerancia a las sequas), en especial en el caso de cultivos empresariales. El mejoramiento de las variedades locales es una actividad a la que se le ha dado alguna importancia, en el caso de variedades de cultivos de economa campesina lo cual se tipifica en los materiales nativos de maz y frjol que se han utilizado para mejoramiento con destino a pequeos productores. El objetivo final de los programas de fitomejoramiento ha sido preponderantemente, aumentar la produccin mediante incrementos en rendimiento, no obstante los programas ms recientes incluyen resistencia a condiciones de estrs por clima, suelos cidos, etc. En general, la cantidad y calidad del fitomejoramiento cientfico que actualmente se lleva a cabo en el pas, no cubre completamente ni las necesidades ni los objetivos nacionales en esta rea. Los principales obstculos que se sealan son: El empleo de metodologas de fitomejoramiento con nfasis en obtencin de hbridos en algunas especies. El nfasis en rendimiento/hectrea. El enfoque de amplia adaptabilidad para variedades de economa campesina. La subutilizacin del germoplasma local. El desconocimiento de las prcticas locales de mejoramiento.

Estos obstculos se podran superar razonablemente mediante la utilizacin de nuevos enfoques de mejoramiento como el de sostenibilidad; el desarrollo 17

de estrategias para el fomento y validacin de la agricultura tradicional y la creacin y transferencia de tecnologas adecuadas a estos nuevos enfoques. Las variedades obtenidas del mejoramiento de los cultivos en el pas se ponen a disposicin de los agricultores a travs de das de campo e informacin escrita sobre los materiales; sin embargo, la entrega de semilla bsica para la multiplicacin de dichas variedades no alcanza mucha difusin entre los pequeos agricultores ya que en muchas oportunidades las variedades producidas no corresponden a sus necesidades. Las variedades derivadas de las actividades nacionales de fitomejoramiento revisten una gran importancia para los agricultores comerciales y son empleadas en menor escala por los pequeos agricultores, quienes utilizan sus propias variedades, ms adaptadas a sus sistemas productivos, mientras que son de poco inters para las comunidades indgenas y algunas comunidades locales ms aisladas, las cuales dependen casi exclusivamente de sus mismas semillas. En general los agricultores participan muy poco de las actividades de fitomejoramiento y evaluacin de variedades. Su participacin se limita a la evaluacin final de las posibles nuevas variedades, facilitando reas para las pruebas regionales de rendimiento y multiplicando lneas promisorias en lotes comparativos.

18

2. Leccin 2. Hechos histricos de la biologa y la gentica relacionados con el fitomejoramiento.

A continuacin se relacionan de manera cronolgica, una serie de eventos histricos de las ciencias biolgicas y la gentica que guardan una estrecha relacin con el desarrollo del fitomejoramiento.

2.1. Hechos histricos ms sobresalientes.

11.000 aos antes de Cristo, el hombre descubre la agricultura e inicia el proceso de domesticacin de las plantas y animales. 1.000 A.A.C. los Babilonios y los Egipcios, producen frutos por fecundacin artificial. 1590. Janssen inventa el microscopio 1630. W. Harvey, postula que las plantas y los animales se reproducen de manera sexual: esperma y huevo. 1642. Los Europeos aprenden de los Incas, que la Quinua combate la malaria. 1665. El Fsico Robert Hooke publica sus observaciones de clulas al microscopio 1676. El Holandes Anton van Leeuwenhoek, examina al microscopio seres nfimos nadando en gotas de agua tomada de un lago. Es la primera observacin de lo que hoy llamamos protozoarios. Siete aos despus, l ve microbios 100 veces ms pequeos que lo protozoarios a los que llam bacterias. 1710. Fairchild, obtiene el primer hbrido artificial. 1727. Vilmorin, crea la primera compaa de semillas en Francia. 1735. Linneo, postula la taxonoma binomial de los organismos. 1761. Kolreuter, descubre la fertilidad de los hbridos interespecficos 1809. El naturalista francs Jean-Baptiste de Lamarck propone una hiptesis sobre a evolucin de las especies. La teora de la adaptacin directa o de caracteres adquiridos. 1831. Estudiando partes de las plantas al microscpico, el botnico ingls Robert Brown, descubre el ncleo de las clulas y concluye que sta es la parte esencial para la vida. 1838. El Aleman Mathias Jacob Schleiden, botnico, y Ambrose Hubert chwann fisilogo, fueron los primeros en afirmar que las clulas son las unidades bsicas de los organismos vivos, que viven para sustentar la planta y para sustentarse y que se encuentran en todas las partes y rganos de los animales y plantas. 1856. Luis de Vilmorin, Establece la prueba de progenie. 1858. Surge la Teora de la Evolucin por seleccin natural, elaborada al mismo tiempo por dos bilogos ingleses, Charles Robert Darwin y Alfred Russel Wallace. 19

 1865. El monje austriaco Johann Gregory Mendel, formula las leyes de la herencia al descubrir como las caractersticas de los padres son transmitidas a sus hijos y que stas caractersticas son codificadas en los genes, que son transmitidos de generacin en generacin. 1879. Flemming. Descubri y defini la mitosis. 1881. Balbn. Descubre los cromosomas 1883. Beneden. Descubre que los gametos poseen la mitad del nmero de cromosomas. 1883. Schimper. Descubre los cloroplastos. 1900. Correns, Tschermak y De Vries, redescubren y de manera independiente las Leyes de Mendel. 1906. Bateson. Propone los trminos de gentica, alelo, homocigoto, Heterocigoto, F1, F2, factores epistticos. 1907. El genetista norte americano Thomas Hunt Morgan estudia como las caractersticas de la mosca de las frutas son transmitidas a las cras. Postula que esas caractersticas pasan de padre a hijo gravadas en pedazos de cromosomas. Mas tarde, esos fragmentos serian llamados genes. 1910. Kossel. Aisl la Adenina, Guanina, Citosina y Tiamina por hidrlisis a partir de la nucleina. 1912. Morgan, Sturtevant, Bridges y Muller. Postulan la teora cromosmica de la herencia. Elaboran el mapa gentico de Drosophila. Morgan recibe el premio Nobel en 1933. 1918. Jones. Crea los hbridos dobles. 1925. El Ruso Nicolai Ivanovich Vavilov, postula la teora de los centro de origen las especies: comienza el auge de la agricultura. 1928. Fred Griffith descubre una molcula hereditaria transmisible entre bacterias 1931. Stern, Creighton y McClintock. Presentaron la prueba citogentica del crossinng-over sobre el intercambio de la cromtida entre cromosomas homlogos. 1932. Knoll y Ruska. Descubren el microscopio electrnico. 1948. Chargaff. Define la composicin qumica del ADN: A/T=1, G/C=1, (A + G)/ (C + T) = 1. 1944. Oswald Theodore Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty demuestran que el ADN es el material gentico (denominado entonces principio transformante). 1948. Boivin y Vendrely. Postularon el Dogma Central de la biologa: la cantidad de ADN es constante en todas las clulas de un organismo que tenga el mismo nmero de cromosomas. 1997. Nace el primer clon de un mamfero adulto bautizado oveja Dolly por su autor el escoces Ian Wilmut, dando un salto gigantesco en relacin a la clonacin anterior. 1953. James D. Watson y Francis Crick determinan que la estructura del ADN es una doble hlice. 20

 1956. Ochoa y Kornberg , realizaron sntesis In Vitro del ADN; descubrieron y aislaron la ADN polimerasa: Premio Nobel 1959. 1971. Cohen y Boyer. Desarrollaron las primeras tecnologas del ADN recombinante para permitir la transferencia de material gentico de un organismo a otro. Nace la ingeniera gentica. 1972. Boulaugh. Recibe el premio Nobel, por ser el artfice de la revolucin verde en Mxico. 1975. Sanger, Couison, Maxam y Gilbert. Desarrollaron tcnicas de secuenciacin del ADN. Premio nobel en 1980. 1980. Mullis. Desarroll la tecnologa de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) premio Nobel en 1993. 1982. Schell y Van Montagu. Producen la primera planta transgnica (tabaco), utilizando como vector el plasmidio Ti de Agrobacterium tumefaciens. 1982. Se oficializ la primera vacuna animal creada por ADN recombinante y aprobada para la venta en Europa (Colibaciosis). Primer producto farmacutico (insulina) proveniente de ADN recombinante y aprobado para la venta en USA e Inglaterra. Primer xito en la transferencia de un gen de una especie animal a otra (ratn transgnico portador del gen de la hormona de crecimiento) 1983. McClintonck. Recibi el premio Nobel por el descubrimiento de los genes saltarines del maz. 1984. Sanford. Desarrollo la biobalstica para la transformacin de plantas. 1985. Jefreys. Desarrollo el ADN fingerprinting. 1985. la oficina de patentes de USA extendi la proteccin a las plantas transgnicas. 1987. Se realizan los primeros ensayos de campo USA, con plantas transgnicas (tomates con un gen de resistencia a insectos) 1989. Francis Collins y Lap-Chee Tsui secuencian un gen humano por primera vez. El gen codifica la protena CFTR, cuyo defecto causa fibrosis qustica. 1990. Se funda el Proyecto Genoma Humano por parte del Departamento de Energa y los Institutos de la Salud de los Estados Unidos. 1992. Se inicia la comercializacin en USA de los primeros tomates transgnicos. 1995. El genoma de Haemophilus influenzae es el primer genoma secuenciado de un organismo de vida libre. 1996. Se da a conocer por primera vez la secuencia completa de un eucariota, la levadura Saccharomyces cerevisiae. 1997. Wilmut. Anuncia la creacin de la oveja Dolly, primer mamfero clonado por cientficos del instituto Roslin. 1998. Se da a conocer por primera vez la secuencia completa de un eucariota pluricelular, el nematodo Caenorhabditis elegans que provocan la tuberculosis y el tifo. 21

 2001. El Proyecto Genoma Humano y Celera Genomics presentan el primer borrador de la secuencia del genoma humano. 2003. (14 de abril) Se completa con xito el Proyecto Genoma Humano con el 99% del genoma secuenciado con una precisin del 99,99% 1. 2003. El Instituto Roslin, anunci el nacimiento de los primeros nios clonados en el mundo.

2.2 El impacto de la biotecnologa en el desarrollo sostenible de la agricultura.

Las modernas tecnologas agrupadas en la biotecnologa, han planteado nuevos desafos para la agricultura y sobre todo para la proteccin del medio ambiente, con posiciones polarizadas. En un extremo estn los que hablan solo de los beneficios reales y potenciales de los Organismos Genticamente Modificados (OGM), omitiendo sus limitaciones y eventuales riegos. En el otro extremo se enfatizan stos, omitiendo las contribuciones que pueden lograr los OGM al desarrollo cientfico, tcnico y econmico, as como a la produccin de alimentos y a la salud humana. La preocupacin permanente del ser humano de incrementar la productividad de las plantas que parecen llegar en las especies agrcolas mas importantes a sus niveles mximos de produccin, por medio de los sistemas tradicionales de mejoramiento vegetal, han hecho que se recurra a la biotecnologa para transformar genticamente a estas plantas, esto es introducir en el genoma original de las plantas, ADN de otra planta o de cualquier otro organismo vegetal o animal, es decir de cualquier ser vivo. Esta tecnologa gentica hace que sea posible identificar y transferir rasgos deseables como la resistencia al ataque de insectos, algunas formas de tolerancia a herbicidas y algunos atributos nutricionales, que no podran ser transferidos por mtodos de mejora gentica convencional. Cualquier planta derivada de un proceso que utilice cualquier tecnologa en cuyo genoma se inserte ADN externo (diferente a la especie a la que pertenece dicha planta), es considerada un Organismo Genticamente Modificado. El trmino transgnico es tambin utilizado para referirse a plantas desarrolladas a travs de este tipo de tecnologas. El Fitomejoramiento tradicional resalta caractersticas en las plantas para su mejor aprovechamiento, involucra principalmente cruzamiento, inspeccin y pruebas de miles de plantas para identificar aquellas de calidad superior. Los fitomejoradores han usado estos mtodos por siglos para mejorar el valor nutricional de las plantas cultivadas, incrementar la tolerancia a plagas, tolerancia a herbicidas y al estrs producido por el ambiente. La tecnologa 22

transgnica es otra herramienta disponible para los fitomejoradores, que involucra la incorporacin de ADN que no pertenece a la planta a mejorar. A raz de la problemtica generada por los cultivos transgnicos los fitomejoradores han optado por optimizar los mtodos de mejora gentica convencional, esto es que involucran en la evaluacin de colecciones de plantas, plantas regeneradas por cultivos de tejidos o poblaciones desarrolladas a travs de variacin gentica. Estos mtodos permiten a los fitomejoradores crear e identificar ms rpidamente nuevos rasgos deseados en las plantas cultivadas sin adicionar ADN externo. Ms de 1800 variedades de plantas de uso comercial han sido desarrolladas utilizando mtodos de mejora gentica convencional optimizados. De acuerdo con los estudios recientes de la FAO, la poblacin de los pases de Amrica Latina y del Caribe ALC, en los prximos 20 aos aumentar de los actuales 490 millones de personas a 680 millones en el ao 2025 y para el ao 2020 es posible que mas del 30% del consumo de cereales para la alimentacin sea importado. La prdida de suelo para agricultura continua aumentando por la erosin y la degradacin continua y puede alcanzar el 30% del rea destinada a la agricultura en ALC, mientras el rea potencialmente expandible en estos mismos pases que puede ser utilizada en agricultura es de tan slo el 12% segn datos de la FAO, con altos costos sobre la biodiversidad. Mientras tanto el aumento en la demanda de comida de los pases de ALC para este mismo perodo es estimado por la FAO en 61%. Los sistemas de produccin en la regin no son homogneos, en especial por los diferentes escenarios productivos de los agroecosistemas de sabana, valles interandinos, laderas, zonas hmedas y secas, zonas tropicales de gran diversidad, en las que se requiere de tecnologas apropiadas a los ecosistemas propios y de mucha investigacin para evaluar los posibles efectos que puede causar la introduccin de materiales vegetales transgnicos, los cuales puedan transmitir algunas de esas modificaciones genticas a las especies silvestres cercanas causando el rompimiento del equilibrio poblacional en las comunidades biticas y ecosistemas, la prdida y el deterioro de los recursos genticos y la homogenizacin de los cultivos. Por lo tanto, se requiere desarrollar muchas mediadas de control tanto tecnolgicas como legislativas y de conciencia para poder aprovechar plenamente las nuevas biotecnologas de una forma segura para el bienestar socioeconmico de las comunidades, el medio ambiente, la salud humana y los sistemas de produccin de las regiones. .

23

3. Leccin 3. Mecanismos naturales de la multiplicacin de las plantas.

Uno de los aspectos ms importantes de las plantas es su capacidad de auto reproducirse. Una vez que ha cumplido con todo su ciclo metablico y de crecimiento, inicia el proceso de decrecimiento que llevan al final del periodo de vida de la planta, sin embargo, la especie sobrevive por un periodo de tiempo mayor que el periodo de vida de cualquiera de sus individuos. Esto se logra mediante la produccin de nuevos individuos por parte de los individuos de mayor edad antes de que estos mueran. Existen dos modos de reproduccin en las plantas: Uno, es la reproduccin sexual; esto es, la reproduccin de nuevos individuos, en los cuales se combina la informacin gentica de las clulas diferentes, generalmente provenientes a su vez, de dos padres distintos. En la mayora de los organismos, estas clulas son los gametos. En el otro modo de reproduccin toma parte solamente un progenitor y se denomina reproduccin asexual.

3.1. La reproduccin sexual

La reproduccin sexual, implica la unin de clulas germinales, es decir la fecundacin por fusin de gametos masculinos y femeninos para producir un cigoto, que al desarrollarse formar en las embrifitas un embrin y ste a su vez un nueva planta. Su importancia se debe a que en el cigoto se combinan caracteres paternos y maternos, resultando diferente genticamente a cada uno de los padres. Esta fecundacin est encaminada a la variabilidad gentica por recombinacin cromosmica, proceso que se realiza en varias etapas. Primero se realiza la meiosis para transformar las clulas 2n en n que son los gametos. Posteriormente se produce la singamia o unin de gametos n para formar un zigoto 2n, que implica una plasmogamia (unin de citoplasmas) y una cariogamia o fecundacin (unin de ncleos). Los gametos suelen ser haploides, n, y de polaridades (sexos) opuestos, adems se producen en estructuras especiales llamadas gametangios. Para que ocurra la reproduccin sexual primero debe ocurrir la polinizacin. Por medio de esta, es que la planta lleva el polen hasta los ovulos y por consiguiente tenemos un flujo de genes de una planta a otra. Existen varias formas para que la polinizacin sea posible, entre estas tenemos a los 24

animales como insectos, aves y murcilagos, transportadores indirectos de polen y que por consiguiente polinizan las flores. En caso de las plantas angiospermas han desarrollado con el paso del tiempo diversas formas de atraer a los polinizadores y asegurar un xito reproductivo. Por ejemplo, ptalos vistosos, olores atrayentes y recompensa de nctar o polen que proveen alimento de alto contenido energtico al polinizador que los consume. Dependiendo del polinizador, la flor a evolucionado de manera diferente: Plantas polinizadas por insectos - usualmente plantas con ptalos azules, amarillos o blancos con "guas" que pueden verse con luz ultravioleta. Adems, suelen tener mucho olor. Esto es as pues los insectos pueden ver bien el rango violeta, azul y amarillo del espectro de luz, pero no el rojo. Tambin ven bien en el rango ultravioleta. Los insectos poseen un olfato bien desarrollado y es por eso que las flores producen mucho olor, aunque necesariamente no agradable. Por ejemplo flores polinizadas por moscas a menudo tienen un olor a carne podrida. Plantas polinizadas por aves - Usualmente son de color rojo, naranja o amarillo y no tienen olor, pues las aves ven bien en ese rango del espectro y no suelen tener el olfato bien desarrollado. Plantas polinizadas por murcilagos - estos animales son importantes polinizadores en los trpicos, salen a buscar alimento de noche y no ven bien. Por lo tanto, las flores polinizadas por murcilagos no son coloreadas, siendo blancas o cremas y con un olor fuerte y atrayente, como a fruta fermentada. Tambin los animales han reaccionado produciendo cambios en su cuerpo para maximizar la obtencin de la recompensa. Esto se le conoce como coevolucin, una relacin interdependiente entre la planta y su polinizador que ambos han desarrollado con el tiempo a manera de cambios en las estructuras florales de la planta y en el cuerpo del animal. Ejemplos de estas adaptaciones en los animales son pelos en el cuerpo del animal (abejas, cigarrones) para atrapar polen y picos tubulares en algunas aves (zumbadores) para obtener el nctar de flores con corola tubular. Algunas plantas no usan animales para asegurar la polinizacin sino que necesitan de viento para estos efectos. Estas plantas por lo general tienen flores pequeas e inconspicuas (sin ptalos, color o nctar), los estigmas son fimbriados o plumosos y adems producen grandes cantidades de polen de tamao diminuto para ser ms fcil su transporte por el viento. Luego de que ocurre la polinizacin viene el proceso de doble fecundacin por el cual se forma la planta embrinica. Esta se encuentra dentro de la semilla que se form a partir del vulo dentro de un fruto, que a su vez, se form a partir del ovario. La semilla adems contendr alimento para ese 25

embrin ya sea almacenado en forma de endospermo o cotiledones, si este fue absorbido por los mismos. Un embrin maduro es funcionalmente una pequea planta con todas sus partes: una raz corta (radcula), un tallo corto y una o dos hojas (cotiledones) protegida por el fruto, que adems le ayuda en la dispersin.
Figura 2 . Esquema de la reproduccin sexual de las plantas

Las flores contienen las estructuras necesarias para la reproduccin sexual. La parte masculina es el estambre, formado por el filamento y la antera. La parte femenina, el carpelo, incluye el estigma, que recoge el polen; el ovario que contiene el vulo; y el estilo, un tubo que conecta el estigma con el ovario (A). El polen es producido en la antera (B) y cuando est maduro es liberado (C). Cada grano de polen contiene dos gametos masculinos. Cuando tiene lugar la autopolinizacin el polen llega al estigma de la misma flor, pero en las plantas con polinizacin cruzada (la mayora) el polen es transportado por el aire, el agua, los insectos o pequeos animales hasta una flor distinta. Si el polen alcanza el estigma de una flor de la misma especie, se forma un tubo polnico que crece hacia abajo por el estilo y transporta los gametos masculinos hasta el vulo (D). Dentro del saco embrionario del vulo, un gameto masculino fecunda la ovoclula y forma un cigoto que da lugar al embrin. El segundo gameto masculino se une a dos clulas del saco embrionario llamadas ncleos polares para formar el endospermo nutritivo que rodea el embrin de la semilla (E).

Fuente:

http://html.rincondelvago.com/polinizacion.html

La aparicin de la reproduccin sexual se produjo a partir del perfeccionamiento de la mitosis y la aparicin de la meiosis y ciclo sexual. El origen de la mitosis pudo producirse en los protistas y especialmente en los dinoflagelados ya que su mitosis es "anmala", no hay huso mittico. Y el origen de la reproduccin sexual tambin pudo haberse dado al mismo tiempo que la mitosis debido a que estos organismos poseen ambos procesos incompletos. Surgi como consecuencia de la ventaja adaptativa que supona, ya que al haber recombinacin cromosmica se incrementa la capacidad de los individuos para explorar y colonizar nuevos hbitats.

3.2. Reproduccin asexual.

Aunque todas las plantas superiores producen semillas, no siempre stas son fcilmente germinables, en ocasiones las produce en poca cantidad o 26

muchas veces, las plantas cultivadas fuera de sus zonas de origen ni siquiera llegan a producir semillas. Es en estos casos y cuando se desea obtener gran cantidad de plantas bien desarrolladas y uniformes fenotpicamente en un corto tiempo , se acude a la multiplicacin vegetativa o asexual. La reproduccin vegetativa consiste en la reproduccin de individuos a partir de porciones vegetativas de las plantas, lo que es posible gracias a que muchos de los rganos vegetativos tienen la capacidad de regeneracin . Las porciones de tallos tienen la capacidad de formar nuevas races y las partes de las races pueden generar un nuevo tallo. Las hojas pueden regenerar nuevos tallos y races, un tallo y una raz (o dos tallos). Cuando se les combina de manera adecuada por medio de un injerto, forman una conexin vascular continua. La reproduccin vegetativa es un tipo de reproduccin asexual, es decir que involucra solamente a un progenitor y no hay fusin de gametos (clulas sexuales), con lo que se obtienen nuevos individuos genticamente idnticos al que los origin. Los mtodos de multiplicacin vegetativa de las plantas son muy variados: algunas usan rganos de almacenamiento especializados conocidos como propgulos, entre los cuales se encuentran: Los rizomas (tallos subterrneos horizontales). Los bulbos (bases de las hojas abultados), Los tubrculos del tallo (tallos subterrneos engrosados). Los tubrculos de raz (races adventicias abultadas) Los cormos (estructuras slidas del tallo con nudos y entrenudos). Los estolones o sepas, (tallos horizontales rastreros que producen races y dan lugar a nuevas plantas). Los bulbillos, (bulbos pequeos que crecen en el tallo en el lugar de las flores, se caen y crecen como plantas nuevas) Los brotes propgulos o adventicios (plantas minsculas que se alinean en los brotes de las hojas antes de caer al suelo y crecer hasta convertirse en plantas adultas. La reproduccin vegetativa tambin puede llevarse a cabo mediante fragmentacin natural o mecnica originando nuevas plantas de cualquier trozo o fragmento de la planta, por ejemplo: Divisin: Este mtodo se lleva a cabo en aquellas plantas que de modo natural emiten proliferaciones con brotes y races, separando stas, las cuales constituirn nuevas plantas Estacas o esquejes: Consiste en separar un fragmento de un vegetal, (tallos, rizomas, cormos, bulbos, hojas o races), ayudarle a subsistir y regenerarle en una nueva planta. Acodo: Consiste en provocar la emisin de races a partir de una rama y posteriormente separar el fragmento con las nuevas races emitidas, convirtindose en una nueva planta. 27

Injerto: Es un caso mixto en que una parte obtenida mediante semilla (PATRON) proporciona las races, mientras que un fragmento separado de otra planta, unido al anterior (Yema), proporcionar la parte area (INJERTO). Cultivo in vitro: Mediante tcnicas especializadas de laboratorio se obtienen nuevas plantas de unas pocas clulas de meristemos, las cuales se cultivan en un medio nutritivo artificial asptico. Es la ltima novedad en cuanto a multiplicacin de plantas se refiere.
Figura 3 . Sistemas de reproduccin vegetativa.

Fuente: http://www.uc.cl/sw_educ/biologia/bio100/html/portadaMIval10.2.2.html

Otro caso de reproduccin vegetativa es la Apomixis; fenmeno de los vegetales superiores donde hay formacin asexual de un embrin, sin fecundacin. Existen dos vas para la reproduccin apomctica: Embriona adventcia: Comn en los Citrus, se forman embriones a partir de clulas de la nucela del vulo. Es comn que estos embriones asexuales se produzcan al mismo tiempo que los embriones sexuales (poliembriona). Tcnicas modernas de cultivo in vitro permiten la produccin de embriones "somticos" a partir de clulas no sexuales. Partenocarpia: el embrin se forma a partir de una clula gamtica no reducida. Apogamia: Se forman embriones a partir de una clula vegetativa derivada de una sinrgida del gametofito femenino que no sea la ovoclula. En algunos Olmos (Ulmus sp.). 28

4. Leccin 4. Origen de las especies vegetales y su domesticacin

4.1 Centro de origen de las especies cultivadas
La agricultura moderna se planteo la teora de que conociendo el centro de origen y el de domesticacin de las plantas cultivadas, se puede entender como modificar las plantas de acuerdo con las necesidades actuales y brindarle las condiciones ambientales requeridas para su desarrollo ptimo. Poe ejemplo, si la sanda, originaria de un centro tropical es trasladada a una zona templada como Chile, requerir de una ubicacin en zonas de temperaturas relativamente altas y por un perodo prolongado para que logre cumplir su ciclo vital sin problemas. Esta preocupacin llevo a uno de los mas grandes cientficos agrcolas de su poca, el director del Instituto de Botnica Aplicada y de Mejoramiento de las Plantas de Leningrado, Nicolai Ivanovich Vavilov (1887 1943), a desarrollar la teora de la existencia de genocentros o centros de origen de las plantas cultivadas. Mediante las observaciones que desarroll en sus recorridos por todo el mundo, concluy que las plantas cultivadas tienen sus centros de origen en regiones en las que muestran actualmente mayor densidad y variabilidad gentica, y a partir de los cuales se dispersaron a otras zonas. Se bas en el principio de que el lugar para la domesticacin de la planta silvestre tuvo que ser necesariamente su rea de distribucin natural. Como resultado de sus investigaciones sobre varios cientos de plantas cultivadas, Vavilov estableci siete centros originarios fundamentales e independientes de las plantas cultivadas en la tierra y que para l tambien fueron probablemente al mismo tiempo los focos del desarrollo independiente de la agricultura mundial. En el continente Asitico, encontr los centros de origen de la mayora de nuestras actuales plantas cultivadas, diferenciando en este continente tres centros fundamentales de formacin de especies. El primero, al Suroeste de Asia, incluyendo el interior de Asia Menor, Persia, Afganistn, Turkestn y la India noroccidental. All est el hogar del trigo suave, del centeno, del lino, de la alfalfa, del trbol persa (Trifolium resupinatum L.), de diversos rboles frutales europeos (manzana, pera, Prunus divaricata L., granada, membrillo, (guindas), uvas, y de diversos vegetales. El segundo centro mundial independiente en Asia est localizado en la India propiamente, incluyendo el valle del Ganges, toda la pennsula del Indostn, y las zonas colindantes de Indochina y Siam. Este es el hogar original del arroz, la caa de azcar, algodones asiticos, rboles frutales tropicales (por ejemplo, los mangos). 29

El tercer centro asitico est localizado en la montaa central y oriental de China, es el hogar de diversas plantas tales como los peculiares repollos chinos, el rbano, ctricos, el azufaifo (Zizyphus), el caqui, el melocotn, la ciruela china (Prunus Simoni), el t de arbusto y el moral. Es el lugar de nacimiento de varias plantas tropicales y especialmente de plantas subtropicales. El cuarto centro mundial abarca los antiguos pases baados por el Mediterrneo, incluyendo el Pirineo, los Apeninos y las pennsulas Balcnicas, la regin costera de Asia Menor, Egipto, y tambin el territorio de los actuales Marruecos, Argelia, Tnez, Siria y Palestina. A pesar de la enorme importancia histrica y cultural del centro Mediterrneo, que ha dado lugar a las grandes civilizaciones de la antigedad como fue la Egipcia, la Etrusca, Egea, y antigua Hebrea, este centro, ofrece muy pocos cultivos autctonos importantes. La agricultura antigua se basa en el olivo, el algarrobo (Ceratonia siliqua L.), y la higuera. La mayora de los cultivos, tales como trigo, cebada, judas y guisantes han sido tomados obviamente de otros centros. La diversidad de variedades de cultivos es aqu considerablemente ms pobre que en los centros principales de los cultivos correspondientes. Slo una serie de plantas forrajeras tales como Hedysarum coronarium L., la sulla, Ervum ervilia L., el yeros, Lathyrus cicer L. Gorgonia sp., Trifolium alexandrinum L., son originarias de la regin mediterrnea. El quinto centro mundial se encuentra situado en la montaa oriental de frica, principalmente en la montaosa Abisinia, se caracteriza por tener un pequeo nmero de importantes plantas cultivadas independientes, pero con una extraordinaria variedad de clases. Aqu encontramos la mxima diversidad del mundo, al menos en lo que concierne a las variedades de trigo, cebada, y quizs tambin del sorgo de grano. Este es el hogar de plantas tales como el teff (Eragrostis abyssinica (Jacq.) LinK.): uno de los cereales ms importantes de Abisinia; Nger (Guizotia abyssinica (Lf.) Cass.): una planta oleaginosa original de esta tierra. El lino se distingue por sus pequeas semillas. A diferencia de los antiguos pases del Mediterrneo y del sudoeste de Asia, en Abisinia nace slo como una planta de pan para obtener su harina. El cultivo de lino para aceite y fibra es todava desconocido en la primitiva Etiopa. Abisinia es el hogar de la planta de caf as como de la cebada utilizada para la elaboracin de la cerveza. En Amrica se encuentran dos centros principales: el centro del sur de Mxico incluyendo parte de Amrica Central, y el peruano que incluye Bolivia. El primero es el ms importante. Ha dado nacimiento a cultivos tales como el maz, el algodn del altiplano, el cacao, el agave (henequn), la calabaza tropical, la juda escarlata y la juda comn, chiota (Sechium edule Jacq.), papaya, y diversos cultivos indgenas de importancia secundaria. 30

Per y Bolivia son el hogar de la patata, el rbol de la quina, el arbusto de la coca, as como de una serie de cultivos secundarios. Aqu se han distinguido grupos extraordinariamente polimrficos del maz suave. Las otras regiones de Amrica Central y del Sur, aunque han dado lugar a diversos cultivos, no son de importancia decisiva para la historia de la agricultura mundial Estos son los siete centros principales del mundo, que han dado lugar a toda la agricultura mundial. Como se puede ver en el mapa siguiente, estos centros ocupan un territorio muy limitado. De acuerdo con nuestras estimaciones el centro de Mxico en Norteamrica ocupa alrededor de 1/40 del territorio total del vasto continente. El centro de Per ocupa aproximadamente la misma rea con relacin al continente sudamericano en su totalidad.
Figura 4. Ilustracin de los Centros de origen de Vavilov.

Fuente: Pascual Trillo, J.A El arca de la biodiversidad. Celeste Ed. 1997 http://www.prodiversitas.bioetica.org/nota63-3.htm

Lo mismo puede decirse de la mayora de los centros del Viejo Mundo. La diferenciacin en los tipos de instrumentos agrcolas corresponde a la diferenciacin en los centros primarios de origen de las plantas cultivadas. En las montaas de frica oriental, as como en la totalidad del frica primitiva, puede observarse incluso hoy en da el cultivo de la tierra con azada. Como han mostrado las investigaciones sobre la agricultura con arado en todo el mundo, los arados de Abisinia, China, Sudoeste de Asia, y de los pases del Mediterrneo, son de tipos diferentes.

31

La localizacin geogrfica de los centros agrcolas originarios es bastante peculiar. Todos ellos estn confinados principalmente en las regiones montaosas tropicales y subtropicales. Los centros del Nuevo Mundo estn confinados en los Andes tropicales, los del Viejo Mundo en el Himalaya, el Hindu-Kush, las montaas de frica, las regiones montaosas de los pases mediterrneos, y las montaas de China. Tambin estos centros de origen y de mayor diversidad biolgica estn relacionados con los sitios donde hubo mayor desarrollo de la agricultura. Estas reas coinciden con los asentamientos de las culturas mas avanzadas de la antigedad, como los Mayas y los Aztecas en Mxico, los Incas en el Per y los Muiscas en Colombia. En la tabla 1 se presentan los diferentes centros de origen con los diferentes nombres de las especies de plantas cultivadas que all se originaron.
Tabla 1. Centros de origen de plantas cultivadas
CENTRO CHINO: Poroto Soya (Glycine max) Rbano (Raphanus sativus) Nabo (Brassica campestris) Pak-Choi (Brassica rapa var. Chinensis) Repollo Chino (Brassica rapa var. Pekinensis) Cebolln (Allium fistulosum) Rakkyo (Allium hnense) Pepino (Cucumis sativus) Yam (Dioscorea batatas) CENTRO INDIO-MALASIO a. Assam y Burma Berenjena (Solanum melongena) Pepino (Cucumis sativus) Poroto mung (Phaseolus aureus) Caup (Vigna sinensis) Taro (Colocasia sativus) Yam (Dioscorea alata) b. Indochina y archipilago malayo Banana (Musa paradisiaca) Bread fruit (Artocarpus communis) CENTRO INDO-AFGANISTANO ASIA CENTRAL Arveja (Pisum sativum) Haba (Vicia faba) Poroto mung (Phaseolus aureus) Mostaza (Brassica juncea) Cebolla (Allium cepa) Ajo (Allium sativum) Espinaca (Spinacia oleracea) Zanahoria (Daucus carota) CENTRO CERCANO ORIENTE Lenteja (Lens esculenta) Lupino (Lupinus albus) E. CENTRO ABISINIO Okra (Hibiscus esculentus) Berro (Lepidium sativum) Caup (Vigna sinensis) F. CENTRO MEDITERRNEO Apio (Apium graveolens) Esparrago (Asparagus officinalis) Betarraga (Beta vulgaris) Nabo (Brassica campestris var. rapifera) Repollo (Brassica oleraceae var. capitata) Achicoria (Cichorium intybus) Pastinaca (Pastinaca sativa) Arveja (Pisum sativum) Ruibarbo (Rheum officinale) G. CENTRO MEXICO-AMERICA CENTRAL Pimentn - Aj (Capsicum annuum) Alcayota (Cucurbita ficifolia) Zapallo (Cucurbita moschata) Camote (Ipomoea batatas) Poroto Lima (Phaseolus lunatus) Poroto (Phaseolus vulgaris) Maz (Zea mays) H. CENTRO SUDAMERICANO a) PerEcuador-Bolivia Pimentn - Aj (Capsicum annuum) Zapallo (Cucurbita maxima) Tomate (Lycopersicon esculentum) Poroto Lima (Phaseolus lunatus) Poroto Comn (Phaseolus vulgaris) Tomatillo (Physalis peruviana) Papa andina (Solanum andigenum) Pepino Fruta (Solanum muricatum) Papa (Solanum tuberosum) (2n = 24) b) Chile Papa (Solanum tuberosum) ( 2n = 48) c) Brasil-Paraguay Mandioca (Manihot esculenta)

32

Vavilov reconoci tambin los centros secundarios de orign, teniendo cuidado de sealar que se encuentran formas vegetales de gran valor lejos de sus centros primarios de origen. Cit por ejemplo el caso de la naranja Washington navel, descubierta en Brasil, mientras que el centro de dispersin del gnero Citrus se encuentra en el sudeste de Asia. El mismo Vavilov tambin propuso la Ley de las series homologas en variacin basado en las propuestas de botnicos anteriores, de que los caracteres que se encuentran en una especie pueden tambin pertenecer a una especie similar, estos conceptos los expreso Vavilov en trminos genticos. Posteriormente J.R. Harlan en un viaje de exploracin a Turqua en 1948, propuso los microcentros de diversidad, al encontrar en pequeas reas gran diversidad de plantas que parecan llevar un ritmo ms acelerado de evolucin que en las otras reas. Estos microcentros parece que ofrecieron una excelente oportunidad, no slo para coleccionar nuevos tipos de gran valor, sino tambin para estudiar la evolucin de las plantas de un modo experimental.

4.2. Domesticacin de las plantas

La agricultura fue un proceso gradual en la produccin alimentara que dio mayor seguridad a la vida de aquellos primeros grupos humanos, afianz el sedentarismo, facilit el crecimiento de la poblacin y propici el desarrollo de una vida aldeana con una serie de culturas originales que se apegaron a su propia tradicin. De una manera muy rigorosa, se puede decir que la domesticacin es el hecho de poner una especie salvaje bajo el cuidado del hombre, en cuanto a plantas se refiere es un mtodo de mejora en el sentido de que proporciona, cuando se hace con xito, tipos domsticos que son superiores a los que se tenan anteriormente. (Allard. 1967) La domesticacin de las plantas alimenticias fue un proceso lento que se realiz a travs de muchos milenios y estuvo ntimamente relacionado con la disponibilidad local y regional de los recursos vegetales, as como con la naturaleza de la economa de subsistencia local. El trmino "domesticacin" implica una serie de cambios genticos en las plantas, los cuales generalmente afectan los mecanismos de dispersin y fertilizacin, creando una dependencia de la planta a los cuidados del hombre para asegurar su reproduccin efectiva. A su vez, "agricultura", implica el establecimiento de un sistema de subsistencia humana, en la cual domina la produccin y consumo de alimentos agrcolas. No obstante, muchos de estos productos no son 33

propiamente domesticados sino slo cultivados. "El cultivo" de plantas no necesariamente implica su domesticacin. Es posible cuidar y explotar determinadas especies para asegurar su rendimiento, sin provocar cambios genticos en ellas y, por lo tanto, sin domesticarlas. A partir del sptimo milenio a.C., se encuentran muchos vestigios de la creciente transformacin en las formas de vida de los pobladores prehistricos. Tales indicios muestran que se haba ampliado considerablemente la actividad de recoleccin de diversas especies de semillas. La conversin de estas semillas en alimentos se puede interpretar por los utensilios que haba ya para molerlas o machacarlas: morteros, manos y piedras a modo de primitivos molinos. Entre los ms tempranos testimonios del paso a una incipiente domesticacin de plantas, es decir, a la agricultura, estn los hallazgos en varias cuevas de la sierra de Tamaulipas, como las del Can del Infiernillo al norte de Mxico. (6500-5500 a.C.). A partir de entonces se practicaba ya el cultivo del frjol, el chile y la calabaza. Tambin en Tehuacn, Puebla, hay indicios de que la incipiente agricultura lleg a incluir, hacia 4000 a.C., ciertas variedades de maz. La primeras civilizaciones que se originaron a orillas del ro Tigris y del Eufrates, estuvo centrada alrededor del lugar considerado como la cuna del trigo. La antigua civilizacin China dependa del arroz. La bsqueda de vegetales alimenticios y de otras plantas tiles condujo a la explotacin y descubrimiento de nuevas tierras. Por ejemplo el descubrimiento de Amrica lo motivo el intento de hallar nuevas rutas, que permitieran llegar a las tierras donde crecan las especias. El deseo de poseer nuevas tierras origin continuas luchas entre las naciones por la ocupacin de esos lugares donde los vegetales tiles se encontraban o podan ser cultivados. Cabe destacar que an hay conflictos por reas de importancia florstica. Aunque en un principio el hombre llev a cabo un trabajo de domesticacin de las especies tiles para la alimentacin, el vestido o medicamentos, posteriormente realizo cruzamientos entre las especies que le permitieron incrementar la producciones y adaptarlas a sitios donde era impensable la siembra de ciertas especies; hoy da los nuevos avances de las modernas ciencias de la biotecnologa plantea nuevos retos que permitan aumentar las producciones, minimizando cualquier posible efecto adverso al medio ambiente y a la salud humana y animal.

34

CAPITULO 2.
BASES DEL FITOMEJORAMIENTO CONVENCIONAL
INTRODUCCIN.
El concepto de gen fue propuesto por primera vez en 1865 por el monje Austriaco Gregory Joham Mendel (1822-1884), porque hasta ese entonces el concepto de la herencia era escaso y se mantena la idea de que el espermatozoide y el vulo contenan un conjunto de esencias originales en las distintas partes del organismo parental y que de alguna manera esas esencias se mezclaban a la hora de la concepcin para formar el diseo de un nuevo individuo, es decir que la descendencia resultaban caractersticas no de una combinacin sino de una mezcla de la informacin de los progenitores. Pero haba un problema ya que la herencia no resultaba siempre en la herencia intermedia de los progenitores. Los intentos por demostrar esta teora, fueron los que llevaron a un mejor entendimiento del mecanismo de la herencia. OBJETIVOS. 1. Comprender las leyes de la herencia 2. Comprender los conceptos de gen, alelo, cromosoma y su relacin con el cruzamiento gentico y las caractersticas de las generaciones filiales. 3. Comprender la influencia del ambiente sobre los mecanismos de la seleccin natural para alelos dominantes. 4. Identificar claramente las diferencias entre Genotipo y Fenotipo 5. Entender los principios bsicos de cruzamiento, herencia ligada al sexo, ligamiento, segregacin y variabilidad gentica con vistas a la produccin de variedades mejoradas de plantas.

35

5. Leccin 5. Gentica Mendeliana.

5.1 Las Leyes de Mendel
Como resultado de sus investigaciones con la planta de arveja (guisante), Mendel propone la teora de la herencia particulada; con la que afirma que los caracteres estn determinados por unidades genticas discretas que se transmiten de forma intacta a travs de las generaciones. Los estudios de Mendel sentaron las bases en el sentido de que se centr en un solo carcter, en un solo fenotipo y en un modelo que adems tenia varias propiedades que facilitaron explicar muchas de las observaciones que no lo eran por la teora de la herencia mezclada, siendo muy fructfera en la comprensin del mecanismo de la herencia, tanto que se convirtieron en el prototipo del anlisis gentico y en los cimientos de una aproximacin lgica experimental a la herencia todava en uso. Mendel inici sus experimentos con plantas puras de arveja, en las cuales identifico siete caractersticas distintas y contrastantes, cruz una variedad de planta que produca semillas amarillas con otra que produca semillas verdes, estas plantas forman la Generacin Parental (P). Como resultado de este cruce salieron plantas que producan nada ms que semillas amarillas, repiti los cruces con otras plantas de guisante que diferan en otros caracteres y el resultado era el mismo, sala un carcter de los dos en la generacin filial. Al carcter que apareca le llamo Dominante y al que no, Recesivo. En este caso el color amarillo es dominante frente al color verde. Las plantas obtenidas de la Generacin Parental se denominan Primera Generacin Filial (F1). Para explicarlo, Mendel concibi la idea de unas unidades hereditarias, que en la actualidad llamamos genes, los cuales expresan, a menudo, caracteres dominantes o recesivos. Al formular su primer principio (La ley de la segregacin), Mendel plante que los genes se encuentran agrupados en parejas en las clulas somticas y que se segregan durante la formacin de las clulas sexuales (gametos femeninos o masculinos). Cada miembro del par pasa a formar parte de clulas sexuales distintas. Cuando un gameto femenino y otro masculino se unen, se forma de nuevo una pareja de genes en la que el gen dominante (color amarillo) oculta al gen recesivo (color verde). Para comprobar la existencia de tales unidades hereditarias Mendel dej que se autofecundaran las plantas de la Primera Generacin Filial y obtuvo la 36

Segunda Generacin Filial (F2) compuesta por plantas que producan semillas amarillas y plantas que producan semillas verdes en una proporcin 3:1 (3 de semillas amarillas y 1 de semillas verdes).Repiti el experimento con otros caracteres diferenciados y obtuvo resultados similares en una proporcin 3:1. Dedujo, con acierto, que los genes se agrupan en pares de los tipos AA, Aa, y aa ("A" representa dominante y "a" representa recesivo). Tras posteriores experimentos de cruzamiento, descubri que cuando se polinizaban entre s ejemplares AA, se producan solamente plantas de tallo alto, y que cuando los cruces se realizaban entre ejemplares aa, se obtenan slo plantas de tallo enano. As mismo, los cruces entre hbridos altos Aa generaban una descendencia de plantas de tallo alto y de tallo enano, en una proporcin de tres a uno respectivamente. Ms adelante Mendel decidi comprobar si estas leyes funcionaban en plantas diferenciadas en dos o ms caracteres, eligi como Generacin Parental plantas de semillas amarillas y lisas y plantas de semillas verdes y rugosas. Las cruz y obtuvo la Primera Generacion Filial compuesta por Plantas de semillas amarillas y lisas, la primera ley se cumpla, en la F1 aparecan los caracteres dominantes (Amarillos y lisos) y no los recesivos ( Verde y rugosos ). Obtuvo la Segunda Generacin Filial autofecundando la Primera Generacin Filial y obtuvo semillas de todos los estilos posibles, plantas que producan semillas amarillas y lisas, amarillas y rugosas, verdes y lisas y verdes y rugosas, las cont y prob con otras variedades y siempre salan en una proporcin 9:3:3:1 ( 9 plantas de semillas amarillas y lisas, 3 de semillas amarillas y rugosas, 3 de semillas verdes y lisas y una planta de semillas verdes y rugosas). Desde entonces, Mendel pudo comprender que las unidades hereditarias no se mezclan entre s, como crean sus predecesores, sino que permanecen inalterables en el transcurso de las sucesivas generaciones. Apoyndose en esto, Mendel formul su segundo principio (la Ley de la segregacin independiente). En l se afirma que la expresin de un gen, para dar una caracterstica fsica simple, no est influida, generalmente, por la expresin de otras caractersticas. La segunda Ley o principio de la segregacin resulta muy importante para el Fitomejoramiento, por que despus de realizar un cruce entre dos lneas puras, en la F2 se pueden identificar caracteres que haban quedado enmascarados en la F1 y que pueden resultar provechosos para el mejoramiento y que reafirman caractersticas dominadas por genes como unidades independientes que pueden ser pasados de generacin en generacin. En la figura 5 se representa algunos de los resultados obtenidos por Mendel en sus experimentos con la arveja.

37

Figura 5 .Dihibridismo, caso de cruzamiento entre dos lneas puras o natural que difieren en 2 caracteres, segregacin encontrada por Gregory Mendel. 9:3:3:1.

Las siete caractersticas con que Mendel experimento fueron: Forma de la semilla. Color interno de la semilla: amarillo o verde. Color de la cubierta o tegumento de la semilla: blanco o gris. Color de la vaina de la semilla inmadura: verde o amarilla. Forma de la vaina de la semilla madura: Inflada o apretada. Largo del tallo: corto (23 a 45 cm) o largo (1.50 m a 2 m) Posicin de las flores: axial (a lo largo del tallo) o Terminal (en la extremidad del tallo). El xito del trabajo de Mendel se debe a: Acierto al escoger la especie: especie autogama con la que se puede obtener individuos puros, con alta variabilidad, de diferentes colores y formas fciles de distinguir, de ciclo corto y alta produccin de semilla. A la aplicacin del mtodo cientfico, que incluye observar, pensar, analizar y volver a replicar. Observacin de los caracteres contrastantes, diseo cuidadoso de los experimentos y utilizacin del anlisis estadstico, para demostrar que los resultados eran coherentes con una hiptesis explicatoria. A partir de la inferencia estadstica se da una primera definicin de gen y de constitucin gnica, para llegar a la brillante idea que los caracteres estn determinados por pares de genes.

38

5.2 El Gen.
El termino gen fue propuesto por primara vez por Mendel pero no con este nombre, sino con el termino Factores; estos factores eran los responsables de la transmisin de los caracteres de padres a hijos. Fue el dans Wihem L. Johansen quien acuo el termino Gen junto con los de genotipo y fenotipo e hizo clara la distincin entre genes y caractersticas de un organismo y que dichas caractersticas son el resultado de la accin de los genes. El gen Mendeliano es una unidad de funcin, estructura, transmisin, mutacin y evolucin, que se distribuye ordenada y linealmente en los cromosomas. A nivel gentico el gen es la unidad bsica de la herencia de los seres vivos y es la unidad mnima de funcin gentica, que puede heredarse. A nivel molecular el gen es una secuencia lineal de nucletidos en la molcula de ADN, que contiene la informacin necesaria para la sntesis de una macromolcula con funcin celular especfica. Por ejemplo: Protenas, RNAm, RNA ribosmico, RNA de transferencia y RNA pequeos. Los genes se encuentran en una gran molcula llamada cido desoxirribonucleico (ADN), la cual esta asociada a una matriz de protenas formando la cromatina o nucleoprotena y se organiza en estructuras con propiedades de tincin distintivas llamadas cromosomas que se localizan en el ncleo de la clula. La informacin gentica fluye del ADN al ARN y de estos a las protenas. Cada gen en un cromosoma ocupa una posicin definida llamada locus. El ADN es una molcula o polmero de desoxirribonucletidos de cadena doble, que puede ser circular o lineal, que porta la informacin gentica con capacidad de dirigir su propia replicacin y su trascripcin a RNA, el cul a su vez dirige su propia traduccin a protenas. En algunas ocasiones ocurren o pueden ocurrir cambios espontneos o inducidos en algunas de sus partes, lo que origina una mutacin la cual altera el cdigo gentico. En la figura 6 se muestra una representacin esquemtica de la cadena del ADN y su estructura propuesta por Watson y Crick.

39

Figura 6. Representacin esquemtica de la estructura de Watson-Crick del DNA

Fuente: http://www.uc.cl/sw_educ/biologia/bio100/html/portadaMIval4.1.3.1.html

5.3 Los Genes Alelos.

Cada carcter particular est controlado o determinado por un par de unidades hereditarias las cuales conocemos como genes. En la terminologa actual el termino genes alelos es un par de genes que califican o determinan una caracterstica o carcter y que ocupan el mismo locus en los Cromosomas Homlogos. Estos cromosomas se separan en la Gametognesis en virtud de un proceso denominado Meiosis de manera independiente y aleatoria. En otra palabras los genes alelos son aquellos que controlan un mismo carcter pero con distinta informacin; cuando son idnticos se llaman homocigticos o raza pura, cuando son diferentes son Hbridos. Un gen cualquiera que tenga una determinada forma de calificar un carcter puede cambiar de tal manera que califique de otra forma el mismo carcter, es decir un gen por mutacin puede transformarse en un alelo del primero. Si el alelo es disfuncional, y determina para una caracterstica que es crtica para el organismo, no ser seleccionado y el individuo que lo porte ser inviable, por lo que en este caso, la mutacin que dio origen a este alelo es negativa y perjudicial para el individuo. Sin embargo puede darse el caso de que la mutacin sea sobre un gen no critico, y que por lo tanto puede dar origen a tantas variantes allicas como sea posible ya que no hace inviable al individuo, y en este caso la mutacin es neutra. Si el gen que es mutado 40

hace ms apto al individuo, hay Seleccin natural y por lo tanto la variante allica tender a mantenerse en la poblacin. El ambiente determina mediante la seleccin natural que un alelo sea dominante. Un alelo intrnsecamente, por s solo, no es dominante. Ser dominante no significa que se expresa ms, si no que significa que es ms til para la especie y por lo tanto se mantiene a travs del tiempo. Si hubiesen cambios ambientales radicales, que hicieran al alelo recesivo ms til para la especie, entonces ese alelo sera seleccionado y pasara a ser dominante respecto al otro. Entonces quien determina si una mutacin es positiva, neutra o negativa, es el ambiente.
Figura 7. Ilustracin de la ubicacin de dos pares de genes alelos y sus loci en 2 cromosomas homlogos hipotticos diferentes.

Fuente: http://www.uc.cl/sw_educ/biologia/bio100/html/portadaMIval4.1.3.1.html

5.4 Los cromosomas.

Los cromosomas son cuerpos coloreados que se observan al interior del ncleo de las clulas eucariticas, que en estado de condensacin de la cromatina se observan en forma de filamentos y que por lo tanto estn constituidos principalmente de los cidos nucleicos y protenas. Las protenas dan soporte, sirven de armazn a los cromosomas, el DNA cumple un papel informativo pues es el que aporta el cdigo gentico. En las plantas y animales superiores los cromosomas se encuentran en pares, siendo cada miembro de un par similar en forma y tamao, cada uno se denomina homologo respecto al otro del par, (figura 8) los dos en conjunto forman un par de cromosomas homlogos y los genes que empaquetan 41

uno de ellos, califica las mismas caractersticas que los que empaqueta el otro y estn distribuidos a lo largo de un orden similar, es decir los miembros de un par de genes alelos ocupan una misma posicin relativa o locus en el cromosoma homologo. Sin embargo esta igualdad entre los cromosomas homlogos no es absoluta. Cada cromosoma tiene muchos genes distribuidos en un orden lineal nico. Cada gen ocupa un lugar determinado o locus dentro de la estructura cromosmica. En cada cromosoma por pequeo que sea se encuentran muchos genes y cada gen est constituido por la secuencia de muchos pares de nucletidos en la doble hlice de ADN, se estima que entre 100 a 1500 nucletidos constituyen un gene como unidad funcional.
Figura 8. Parejas de cromosomas homlogos, es decir, aquellos que poseen idntica secuencia de genes alelos que se relacionan con la determinacin de los mismos caracteres fenotpicos.

Fuente: http://www.puc.cl/sw_educ/biologia/bio100/html/portadaMIval4.1.3.2.html

5.5 El Genotipo.
El genotipo es el contenido gentico (el genoma especfico) de un individuo, en forma de ADN que posee el ncleo celular o clulas somticas. En otras palabras, es el conjunto de genes que cada individuo ha heredado y que se reflejan en un determinado fenotipo o expresin de dichos genes. Este genotipo es esencialmente fijo, permanece constante a lo largo de toda la vida de un individuo y es inmodificable por efectos ambientales. Dependiendo del medio ambiente un genotipo puede producir varios fenotipos diferentes o tambin varios genotipos pueden producir un solo fenotipo; es el caso de los mangos en que frutos de un mismo rbol producen frutas con colores diferentes, por la colocacin dentro del rbol y por el efecto de las antocianinas y carotenides que se manifiestan cuando la fruta recibe mas directamente los rayos del sol. 42

Toda la variabilidad gentica de una especie, que se expresa a travs de algunas caractersticas visibles en el fenotipo, pueden ser fiel reflejo del genotipo de la especie, como forma de la raz, del tallo, de la hoja, de las flores, semillas, que describen e identifican la especie y son comunes a todos los individuos de la especie; estos caracteres son altamente heredables, presentan poca variabilidad y son poco influenciadas por el ambiente. Pero en cambio existen otros caracteres que son relevantes en la utilizacin de especies cultivadas, de tipo cualitativo y/o cuantitativo, como la pigmentacin en tallos, raz, flores, y frutos, arquitectura de la planta, habito de crecimiento, ramificacin, macollas, resistencias, que si son afectados por el ambiente y por tanto tienen poco o aceptable heredabilidad. Con la ayuda de aquellos caracteres fijos, poco influenciados por el ambiente, se puede mantener la identidad gentica de una especie, lo que es sumamente importante en los procesos de fitomejoramiento. Con la fecundacin se unen los gametos, combinando dos conjuntos de genes uno de cada progenitor. Cada gen tiene una posicin especifica dentro del un cromosoma que afecta a un carcter particular y est representado por dos copias, una procedente de la madre y otra del padre. Cada copia se localiza en la misma posicin sobre cada uno de los cromosomas pares del cigoto. Cuando las copias son idnticas se dice que el individuo es homocigoto para aquel gen en particular y cuando son diferentes, es decir cuando cada progenitor ha aportado una forma distinta de alelo del mismo gen, el individuo es heterocigoto para dicho gen. La forma de determinar el genotipo es a travs de experimentos de reproduccin o descendencia y no simplemente mediante el examen del fenotipo de un organismo.
Figura 9. Formas de determinar el genotipo en plantas.

5.6 Fenotipo
El fenotipo es la manifestacin visible del genotipo en un determinado ambiente, por lo tanto esta determinado fundamentalmente por el genotipo o por la identidad de los alelos, los cuales, individualmente, cargan una o ms 43

posiciones en los cromosomas. Algunos fenotipos estn determinados por los mltiples genes y adems influenciados por factores del medio. De esta manera, la identidad de uno o de unos pocos alelos conocidos, no siempre permite una prediccin del fenotipo. En este sentido, la interaccin entre el genotipo y el fenotipo ha sido descrita usando siguiente ecuacin: Fenotipo = Genotipo + Ambiente En conclusin, el fenotipo es la apariencia final fsica o externa de un individuo (estructural, bioqumica, fisiolgica o conductual) que resulta de una interaccin entre su genotipo y el medio ambiente en el que se desarrolla. La relacin entre el fenotipo y el genotipo es compleja, en donde entran en juego las relaciones entre alelos dentro de un gen (las relaciones de dominancia) y las interacciones entre genes. stas no vienen determinadas nicamente por el estado de los genes sino tambin por la secuencia de ambientes por la que pasa cada genotipo durante su desarrollo. La descripcin del fenotipo de un individuo tiene pues, una dimensin temporal. Un ejemplo es la flor Bella de da (Bella matutina) que da color rojo o rosado en el da y en la noche cambia a color blanco los ptalos, debido a la temperatura alta en el da y bajas en la noche y la incidencia de la luz solar por la que se concentran las antocianinas en sus ptalos, cambiando su fenotipo transitoriamente sin que se afecte su composicin gentica. En el proceso de seleccin de mejores materiales, el fitomejorador puede dejarse engaar si solo identifica los mejores padres por su fenotipo, ya que estos puede ser el producto de los efectos del ambiente y no del verdadero potencial gentico de los individuos, por lo tanto los mejores padres no son los que tienen un buen fenotipo, si no aquellos que pueden transmitir los genes buenos a su descendencia.
Figura 10. Caracteres fenotpicos trabajados por Gregorio Mendel en arveja.

Fuente: http://www.plataforma.uchile.cl/fg/semestre2/_2004/biotec/modulo1/clase2/img/html/08.htm

44

6. LECCIN 6. CRUZAMIENTOS Y SEGREGACIN

6.1. Cruzamientos

El cruzamiento en las plantas se realiza mediante la reproduccin sexual de dos individuos diferentes, dando como resultado una descendencia que hereda parte del material gentico de cada progenitor. Los organismos parientes deben ser genticamente compatibles y pueden ser de variedades diferentes o de especies muy cercanas. El cruzamiento originalmente se da bajo polinizacin cruzada natural entre plantas cuya constitucin gentica es diferente. El cruzamiento en las plantas, como en los animales, se da como una forma de evitar la endogamia y aumentar al mximo la diversidad gentica y las oportunidades asociadas para la supervivencia. El cruzamiento entre variedades o entre especies relativamente distantes es un mtodo muy utilizado en el mejoramiento de la productividad de las plantas. Para ello fue necesario conocer la forma como se heredaban las caractersticas de los progenitores e identificar las caracteres deseables. El cruzamiento tiene entonces como objetivos: combinar alelos, introducir alelos, seleccionar alelos en la obtencin de materiales o lneas mejoradas. Mendel fue el primero que estudi la herencia, iniciando con la forma de la semilla de la arveja. l cruz una raza pura de plantas de semillas lisas con una raza pura de otra que siempre produca semillas rugosas (60 fertilizaciones en 15 plantas). Todas las semillas resultantes resultaron lisas. A ste fenmeno se le llam Cruzamiento de un solo carcter o monohibridacin. Al ao siguiente, Mendel plant esas semillas y permiti que las mismas se auto fecundasen. Recogi 7324 semillas en total: 5474 lisas y 1850 rugosas. Para sistematizar el registro de datos, las generaciones fueron nombradas y numeradas. La generacin parental se denomina como P. Los descendientes de la generacin P son la generacin F1 (la primera filial). La autofecundacin de la generacin de F1 produce la generacin F2 (la segunda filial). P1. Lisa X Rugosa F1 Todas lisas F2. 5474 lisas y 1850 rugosas Lo mismo sucedi con cada par de caracteres elegidos: cuando cepas puras de plantas con semillas amarillas se cruzaron con razas puras de plantas con 45

semillas verdes, todos los descendientes fueron plantas con semillas amarillas. Los padres del entrecruzamiento son la generacin P1, y los descendientes representan la generacin F1.

6.2 SEGREGACIN.
El trmino segregar hace referencia a apartar, separar una cosa de otra. Genticamente segregacin es cromosomas homlogos (y genes) de los diferentes meiosis. La segregacin se hace evidente en la F2 posteriores de una cruza. a alguien de algo o la separacin de progenitores en la o en generaciones

Cuando los miembros de la generacin F1 se entrecruzaron, Mendel recobro muchos descendientes con semillas amarillas, y algunos de semillas verdes. Luego del anlisis estadstico de la generacin F2, Mendel determin que la relacin entre plantas con semillas amarillas/verdes era 3:1. Las plantas con semillas verdes no aparecan en la primera generacin F1, y se encontraban en la segunda F2 y sucesivas generaciones. (Figura 11). Mendel concluy que el carcter estudiado estaba gobernado por factores discretos (separables) y que el rasgo del carcter que aparece en la F1 es el dominante. Los factores se heredaban a pares, teniendo cada generacin un par de los mismos. Actualmente nos referimos a esos factores como alelos. El hecho de que los caracteres se hereden de a pares permiten explicar el fenmeno observado del "salto" de una generacin.
Figura 11. Cruzamiento monohbrido entre semillas amarillas (dominantes) y verdes (recesivo).

Los caracteres dominantes fueron definidos por Mendel como aquellos que aparecen en la primera generacin ( F1) en los entrecruzamientos entre dos 46

especies puras. Las letras maysculas se usan generalmente como notacin para los caracteres dominantes. Los caracteres recesivos son los que "saltan" una generacin y se observan nicamente cuando el carcter dominante esta ausente. Las letras minsculas se usan generalmente como notacin para los caracteres recesivos. Las plantas de Mendel exhiban dominancia completa, en las cuales las expresiones fenotpicas de los alelos eran dominantes o recesivas, sin "caracteres intermedios". Mendel entendi que era necesario realizar su experimento en una situacin mas compleja y realiz experimentos siguiendo dos caracteres de las semillas, cruzamiento Dihbrido: forma y color. La generacin F2 resultante no muestra la caracterstica relacin fenotpica 3:1 dominante: recesivo. Los dos caracteres, si consideramos que se heredan independientemente, "calzan" dentro del principio de la segregacin. En vez de los 4 posibles genotipos de un monohibrido, el cruzamiento dihibrido tiene 16 posibles genotipos as: Cruzamientos con dos caracteres Las semillas lisas (S) son dominantes respecto a la semillas arrugadas (s). El color amarillo (Y) es dominante sobre el verde (y). Mendel parti de cepas puras que tenan plantas con semillas lisas y amarillas, y las cruz con cepas puras de plantas con semillas verdes y arrugadas. Todas las semillas de la generacin F1 tenan semillas lisas y amarillas. Las plantas de la generacin F2 se obtuvieron por autofertilizacin, y produjeron cuatro fenotipos: 315 lisas y amarillas 108 lisas verdes 101 arrugadas amarillas 32 arrugadas verdes Mendel analiz cada carcter por separado como si fuera que el otro carcter no estuviera presente. la relacin 3:1 se vea separadamente y estaba de acuerdo con el Principio de Segregacin. La segregacin de los alelos S y s deban haber ocurrido independientemente de la separacin de los alelos Yey. La probabilidad de que un gameto tenga Y es 1/2; la probabilidad de cualquier gameto detener S es 1/2.

47

La probabilidad de que un gameto contenga ambos Y y S se calcula por el producto de las probabilidades individuales (o 1/2 X 1/2 = 1/4). La probabilidad de que dos gametos formen cualquier mezcla de estos alelos en su genotipo 1/4 X 1/4 (recuerde el producto de las probabilidades individuales). Por lo tanto, existen 16 posibilidades y el cuadro de Punnett tiene 16 casillas. Dado que hay mas posibilidades de combinaciones que producen el fenotipo liso y amarillo (SSYY, SsYy, SsYY, y SSYy), este fenotipo es mas comn en la F2. De los resultados de su segundo experimento, Mendel formul el Principio de la distribucin independiente, esto es, cuando se forman los gametos, los alelos de un gen para una caracterstica dada se separan (segregan) independientemente de un alelo para otra caracterstica . Si los caracteres se separan independientemente unos de otros durante la formacin de los gametos, puede entenderse el resultado de un entrecruzaminto dihbrido.
Figura 12. Cruzamiento Dihbrido en un cuadro de Punnett.

Fuente: http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/genet1.htm#contenido

48

7. Leccin 7. Carcter, heredabilidad y variabilidad gentica. 7.1 El carcter.

El carcter es la expresin fenotpica detectable de la accin de uno o ms genes en un individuo, por lo tanto varios genes pueden intervenir en la manifestacin de un carcter. Este hecho determina que ese carcter aparezca en muchas formas fenotpicas diferentes, que pueden ser la expresin de la variabilidad de una especie y que permiten su identificacin. Por tanto, desde el punto de vista de su expresin, la variabilidad contenida en el genoma de una especie puede ser agrupada en dos grandes clases: (1) la que se expresa en caractersticas visibles y que conforman el fenotipo, y (2) la que no se expresa en caractersticas visibles y que en general se refiere a los procesos o productos internos de la planta: el genotipo. Los caracteres o caracterstica morfolgicas y agronmicas de inters directo para los fitomejoradores y agrnomos, como produccin de semilla, resistencia a factores biticos a abiticos, precocidad, calidad, etc; es decir, caracteres de baja y alta heredabilidad medidos a travs del fenotipo, presentan la desventaja de que su expresin est fuertemente influenciada por las condiciones ambientales y que adems no toda la variacin gentica est expresada en el fenotipo, por tanto la identificacin de los genotipos superiores no es una tarea fcil para el fitomejorador ya que el efecto de la variabilidad ambiental puede debilitar la asociacin entre genotipo y fenotipo. Las formas fenotpicas pueden mostrar una variacin discontinua o continua. La variacin discontinua se aprecia en aquellos caracteres que pueden cambiar cualitativamente; tal es el caso de los caracteres que us Mendel, como la presencia o ausencia de cierta condicin, por ejemplo tener semillas verdes o amarillas por un lado, o arrugadas o lisas por el otro. El estudio de estas caractersticas, como el de todas aquellas que el fitomejorador estudia, se lleva a cabo cruzando individuos que tienen una condicin diferente en ellas. Por ejemplo, cruzar plantas altas con bajas, se puede realizar una clasificacin exacta en dos categoras. Alta y baja, por una simple estimacin visual de la altura, se puede continuar efectuando el anlisis por fciles procedimientos genticos, llegando al resultado de que el alto es dominante sobre el bajo. La expresin fenotpica monognica o cualitativa, es decir aquella en la que unos pocos genes tienen un efecto grande sobre la expresin del carcter, es poco influida (no lo es en absoluto) por el ambiente, por ejemplo una planta de maz portadora del gen opaco, mantendr siempre este carcter as se siembre en ambientes diferentes. En caracteres de este tipo, se puede afirmar que el fenotipo (F) representa con precisin el genotipo (G): Para carcter cualitativo: F G 49

La variacin continua puede ser estudiada de manera precisa mediante mediciones tales como longitud, tiempo, peso o proporcin, por lo que se les llama caracteres cuantitativos o mtricos. Cuando se examina con cuidado la variacin dentro de los grupos alto y bajo, se encontrar varios grados intermedios entre los mas bajos y entre los mas altos, siendo la frecuencia de la altura media la de mayor valor y disminuyendo hacia los extremos. Muchos de los caracteres de importancia agrcola son de variacin continua, es decir con caracteres en los que no existen unas diferencias que se puedan distinguir fcilmente. Estas caractersticas estn determinadas por mltiples genes y a su estudio se le llama estudio de la herencia cuantitativa. La herencia Cuantitativa o polignica como ya se dijo, es controlada por muchos genes los cuales, cada uno, tiene un efecto pequeo sobre la expresin final del carcter y en ella el ambiente ejerce generalmente una gran influencia en la expresin del carcter, es decir, en el fenotipo; en otras palabras el ambiente puede modificar la expresin del genotipo, como por ejemplo al altura de la planta, la cantidad de produccion, la calidad del grano. Este efecto se puede generalizar en la siguiente expresin: Para un carcter cuantitativo: F G + A Los procesos de caracterizacin y evaluacin permiten conocer la variabilidad gentica de las especies e identificar caractersticas de importancia econmica para ser utilizados en programas de mejoramiento gentico. As mismo permite tener informacin segura sobre la base gentica de la especie o de los caracteres de inters, con las que se puede seleccionar genotipos nicos que satisfagan las exigencias del fitomejorador o para obtener poblaciones mejoradas constituidas de una mezcla de buenos genotipos. En las investigaciones de fitomejoramiento se evalan, con frecuencia, los genotipos en distintos ambientes, aparece entonces, un nuevo elemento que sirve para definir un fenotipo determinado en un ambiente especifico: la interaccin entre el genotipo y el ambiente (G x A). Para carcter cuantitativo medido en muchos ambientes: F G+A+(GxA) La bsqueda de los buenos genotipos puede resultar fcil o complicada, dependiendo del nmero total de genotipos presentes en una poblacin o de si el carcter es controlado por uno o muchos genes, lo cual determina que el genotipo sea fcilmente diferenciable de los dems. Por ejemplo, no es un problema distinguir entre un planta de maz de grano blanco de otra de grano de color amarillo; pero si puede resultar un poco mas difcil identificar los individuos que contienen los alelos mas favorables para la produccin de 50

mayor cantidad de grano de maz, carcter este, que puede estar controlado por muchos genes; por tanto el efecto de cada gen es muy pequea, en la expresin del carcter, lo cual imposibilita la distincin genotpica a travs del fenotipo. En el siguiente ejemplo tomado de Vallejo y Estrada (1992), se puede apreciar el efecto de caracteres polignicos. En plantas de maz la produccin por planta puede variar entre 0 y 100 gramos. Las plantas no productivas (0 grs.) sern aquellas cuyos genotpos contienen todos los alelos desfavorables para la produccin y los que producen 100 grs. , los portadores de todos los alelos favorables. (como ejemplo didctico, no se considera el mnimo fisiolgico). Suponiendo que la produccin fuese controlada, por un par de alelos (sin dominancia), podramos imaginar que los tres genotpos tendran las siguientes producciones: Planta aa = 0 gramos. Planta Aa = 500 gramos Planta AA = 100 gramos

En este caso es fcil detectar el genotipo deseado (AA), porque la diferencia entre los genotipos es muy grande. Se sabe que este carcter tiene una base gentica ms compleja, entonces admitiendo que hay dos locis con dos alelos cada uno, tendramos 9 genotipos. Con este mismo raciocinio se puede construir la siguiente tabla (admitiendo que no hay dominancia y que cada genotipo tiene expresin propia):
Tabla 2. Diferencias fenotpicas entre genotipos No. de loci que controla el carcter 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 15 20 Plantas con produccin Mnima (0 grs.) Aa Aabb Aabbcc Aabbccdd --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Mxima (1000 grs.) AA AABB AABBCC AABBCCDD --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------No. de genotipos diferentes 3 9 27 81 243 729 2187 6551 19683 59.049 6 14,35x10 9 3,49x10 Diferencia entre las producciones de los genotipos (grs.). 500 125 38,46 12,50 4,13 1,37 0,46 0,15 0,051 0,017 -8 7x10 -10 2,9x10

Fuente: Vallejo y Estrada (1992).

51

En la anterior tabla se puede observar que para un nmero relativamente bajo de locis (7, 8, 9, 10, .... 15) las diferencias entre genotipo ya son nfimas a punto de no poder ser detectadas experimentalmente. Con 10 locis, por ejemplo las diferencias entre las expresiones de los fenotipos seran del orden de 0,017 gramos, valor muy pequeo para ser detectado en balanzas de campo. Si se asume que existe dominancia en todos los loci, tendramos 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256, .....2 r clases fenotpicas para 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, .... n loci. Para 10 loci tendramos 1024 clases fenotpicas lo que da una diferencia de menos de un gramo entre las expresiones fenotpicas. Por lo tanto en los caracteres controlados por muchos genes, las diferencias entre las expresiones fenotpicas de los genotipos son muy pequeas y difciles de distinguir los genotipos experimentalmente a travs de medidas de sus genotipos. Segn Allard (1967). La diferencia entre caracteres cuantitativos y cualitativos depende tanto de la extensin del efecto de genes individuales como de la importancia relativa de la herencia y el medio en la produccin del fenotipo final. El problema de si cierta caracterstica es hereditable o ambiental no tiene ningn significado. Los genes no pueden hacer que se desarrolle un carcter si no se tiene el medio adecuado, y al contrario, ninguna manipulacin del medio har que se desarrolle cierta caracterstica si no estn presentes los genes necesarios. A pesar de ello la variabilidad observada en algunos caracteres es debida principalmente a diferencias entre genes que llevan los diferentes individuos de una especie y que la observada en otros se debe a todas las diferencias en los medios en los cuales se han sembrado.

7.2 Heredabilidad.
El grado de asociacin entre el genotipo y el fenotipo se mide por un parmetro llamado heredabilidad, el cual mide o especifica la proporcin de la variabilidad total que es debida a causas genticas o la proporcin de la varianza gentica a la varianza total. Existen distintas formas de calcular la heredabilidad, la utilidad y la veracidad de los resultados dependen en gran medida, del procedimiento usado para estimarla. h2 = 2G / 2F En donde: h2 es la heredabilidad; G2 es la varianza gentica y varianza fenotpica debida al ambiente.

F2 es la

52

La anterior ecuacin corresponde a la llamada heredabilidad en sentido amplio porque tiene en el numerador una variancia que agrupa todos los factores genticos que afectan la expresin de un determinado carcter (2G). Existe otro tipo de heredabilidad denominada en sentido estricto, en la que el numerador contiene slo una fraccin de la variacin de origen gentico: la variancia aditiva; esta variancia, es la que ms interesa al fitomejorador por su importancia prctica: Ceballos (2002). h2 = 2A / 2F Cuanto mayor sea la heredabilidad (cuyo rango de variacin, expresado como porcentaje va de 0 a 100%), el fenotipo reflejara con mas fidelidad al genotipo. una heredabilidad cercana a100% garantiza que los fenotipos seleccionados son en realidad genticamente superiores. Una heredabilidad baja, digamos un 20%, implica que hay poca certeza de que se ha seleccionado a los mejores genotipos. Por tanto, gran parte del trabajo del fitomejorador consiste en asegurarse de que sus evaluaciones le permitan identificar, con la mayor precisin posible, los genotipos superiores, lo cual equivale a aumentar la heredabilidad del carcter gentico en que se est trabajando. La heredabilidad depende, entonces, de dos aspectos: la naturaleza del carcter gentico y del trabajo del fitomejorador. Ceballos (2005). Hay que aclarar, ante todo, que la heredabilidad se atribuye especficamente a la poblacin de referencia en la que se midi y se mide o calcula para las condiciones ambientales en que se realiz la evaluacin.

7.3 La variabilidad gentica.

Como sucede con todos los organismos vivos que se desarrollan en condiciones naturales, la poblacin de individuos que conforman una especie vegetal estn bajo una continua interaccin dinmica de adaptacin con los factores en los que crece esa poblacin. Dichos factores son los biticos (microorganismos, otras especies vegetales, animales inferiores y superiores) y los abiticos (clima y suelo), para ello, cada especie adapta la informacin contenida en el genoma de acuerdo con las necesidades de sobrevivir en su entorno. El resultado de esta interaccin adaptativa se traduce en la acumulacin de la informacin gentica que a manera de variantes, cada especie va guardando entre los miembros de su poblacin y que se va transmitiendo en las subsiguientes generaciones a travs del tiempo. De esta manera, aunque la poblacin de individuos en una especie comparte caractersticas comunes y se pueden cruzar entre ellos, tambin es cierto que en cada uno existen muchas variantes individuales. La suma de todos los individuos con sus respectivas variantes es lo que se conoce como variabilidad gentica de una especie, la cual permite a dicha especie adaptarse a los cambios que se pueden presentar en su entorno. (Hidalgo 2003). 53

Segn Hidalgo (2003). La informacin gentica de la variabilidad de una especie, se conserva y transmite por generaciones a travs de los miembros de la poblacin de la especie. Aunque dicha informacin se mantiene mediante una dinmica continua entre los miembros de la especie, la expresin de esa variabilidad puede o no manifestarse en caracteres visibles. La variabilidad que se expresa en caracteres visibles se denomina fenotpica y dentro de ella se encuentran las caractersticas botnicas-taxonmicas, las morfoagronmicas y las evaluativas como respuesta a factores biticos y abiticos. La variabilidad que no se expresa en caractersticas requiere para su identificacin el uso de tcnicas especiales de laboratorio que en la actualidad se refieren principalmente a marcadores moleculares basados en protenas o isoenzimas y fragmentos de ADN. Es decir con los marcadores moleculares (RFLPs, RAPDs, AFLPs, SSRs o Microsatlites) que presentan una mayor objetividad debido a que son secuencias de ADN fragmentado. La variabilidad es ms evidente en las especies vegetales cultivadas, porque adicionalmente a las presiones del medio, han sufrido la seleccin ejercida por el hombre para adaptarlas a sus propsitos. Existen numerosos tratados en los que se discute cmo se ha producido y an se produce la variabilidad de las especies vegetales. Sin embargo, para los propsitos prcticos de este modulo, las fuentes de variabilidad para las especies de plantas cultivadas se pueden resumir en las categoras siguientes: Variabilidad Evolutiva: Se refiere a la variabilidad producida durante los procesos evolutivos de especiacin por los que haya pasado una especie, principalmente durante las etapas de aislamiento reproductivo, as como a la dinmica que la especie ha tenido y sigue teniendo en condiciones naturales. En este aspecto Ford-Lloyd y Jackson (1986), citados por Hidalgo (2003) consideran que los patrones de diversidad gentica de las plantas cultivadas resultan de la interaccin de los factores principales siguientes: mutacin, migracin, recombinacin, seleccin (natural y artificial) y deriva gentica. Los tres primeros estimulan la produccin de nueva variabilidad, mientras que los dos restantes pueden reducirla. En esta interaccin entra a jugar un papel relevante la biologa reproductiva autogama o algama, con sus variantes que desarrolle la especie esperando, por lo general, una mayor variabilidad en las algamas que en las autgamas. Variabilidad Geogrfica: Esta fuente de variabilidad es importante para un buen nmero de especies cultivadas que tienen un amplio rango de distribucin geogrfica, porque adems de su dispersin natural, han sufrido una extensa dispersin artificial por accin del hombre. En ambos casos, al llegar a un nuevo nicho ecolgico empiezan un nuevo proceso 54

evolutivo en el cual crean variantes genticas de adaptacin como respuesta a variaciones en los componentes ambientales. Una vez ms entran a jugar los factores principales mencionados en la variabilidad evolutiva. En trminos generales, se espera que a mayor rango de dispersin geogrfica de una especie vegetal, ocurra una mayor variabilidad. Variabilidad por Domesticacin: Durante el proceso de domesticacin de las especies cultivadas el hombre ha ejercido una fuerte presin de seleccin que ha permitido la preservacin de muchas variantes las cuales, posiblemente, hubieran desaparecido en condiciones naturales. De la misma manera, el hombre tambin indujo la produccin de nuevas variantes, tanto para facilitar el manejo agronmico como para incrementar la produccin. Este fenmeno se puede encontrar en todas las especies cultivadas, especialmente en las altamente domesticadas como los cereales (trigo, maz, arroz), papa, frjol y otras. En el proceso de domesticacin se pueden identificar dos etapas distintas de presin de seleccin del hombre con el objeto de preservar o producir variabilidad: (1) La domesticacin que abarca todo el proceso de seleccin emprica mediante el cual el hombre fue adaptando las especies para suplir sus necesidades bsicas en alimentacin, vestido, salud e industria. Esto fue posible mediante la seleccin y conservacin de variantes tiles que aparecan en las poblaciones en un proceso que para la mayora de las especies cultivadas tuvo una duracin superior a 10,000 aos. (2) El descubrimiento de la gentica que proporcion una va alterna a la naturaleza permitindole ampliar su variabilidad en el corto tiempo. Por otra parte, desde el comienzo del siglo XX, es decir hace aproximadamente 100 aos, genetistas y mejoradores han estado produciendo nuevas variantes genticas mediante infinidad de cruzamientos en la bsqueda de solucionar problemas de produccin y aquellos ocasionados por plagas y enfermedades en las especies cultivadas. Hidalgo (2003)

55

8. Leccin 8. Cruzamiento polihbrido

El cruzamiento polihbrido es el cruce en el que se involucran dos progenitores que exhiben formas alternadas de mas de tres caractersticas reguladas por tres o mas genes alelos independientes; por tanto un polihbrido es un individuo heterocigoto para n loci, es decir, un individuo cuyo genotipo contiene dos alelos distintos en cada locus. Si los loci en estudio son biallicos (por ejemplo: A,a ; B, b ; ... N,n) el genotipo polihbrido es AaBb...Nn. Los polihbridos producen tantos tipos de gametos distintos como combinaciones diferentes de n alelos, uno por locus, se pueden formar, es decir 2n. En nuestro ejemplo, el polihbrido producir gametos: ABC...N, ABC...n,... AbC...N, etc., etc. hasta abc...n. Como los alelos se reparten al azar entre los gametos (ley de la segregacin independiente) para cada locus X,x la mitad de los gametos sern de "tipo X" y la otra mitad de "tipo x". Por otra parte, como los alelos se combinan independientemente, los alelos A y a se combinan con los alelos B y b con la misma probabilidad y estas combinaciones, a su vez, se combinan con los alelos C y c con la misma probabilidad. Es decir, los 2n tipos de alelos se formarn con la misma frecuencia (1/2n) Si cruzamos dos polihbridos (o autofecundamos un polihbrido) obtendremos una descendencia en la que, si es lo suficientemente grande, aparecern todos los genotipos que se pueden formar al juntar al azar dos gametos, uno procedente del padre y otro de la madre.
Tabla 3. Tabla de Punnett que esquematiza la segregacin de un trihbrido AaBbCc

Fuente: http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/mendelismo/Mendelismo_Polihibrido.htm

56

Por tanto, en la descendencia del cruzamiento polihbrido aparecen 3n = 27 genotipos diferentes que resultan de las combinaciones de (AA, Aa y aa) con (BB, Bb , cc) .... y (NN, Nn, nn) y cuyas frecuencias siguen la segregacin que se deduce del producto cartesiano de {1 AA : 2 Aa : 1 aa} x {1 BB : 2 Bb : 1 bb} x... x {1 NN : 2 Nn : 1 nn} En el caso del trihbrido, la segregacin ser: 1 AABBCC : 2 AABBCc : 1 AABBcc : 2 AABbCC : 4 AABbCc : 2 AABbc: 1 AAbbCC : 2 AAbbCc : 1 AAbbcc : 2 AaBBCC : 4 AaBBCc : 2 AaBBcc : 4 AaBbCC : 8 AaBbCc : 4 AaBbcc : 2 AabbCC : 4 AabbCc : 2 Aabbcc : 1 aaBBCC : 2 aaBBCc : 1 aaBBcc : 2 aaBbCC : 4 aaBbCc : 2 aaBbcc 1aabbCC : 2 aabbCc : 1 aabbcc Cuando hay dominancia completa de alguno de los dos alelos en alguno de los loci, en ese locus, el heterocigoto es igual al homocigoto para el alelo dominante; por tanto, en la descendencia anterior slo existen dieciocho, doce u ocho fenotipos dependiendo de que exista dominancia completa en uno, dos o tres loci, respectivamente. En la tabla 4 se indica la segregacin fenotpica de la descendencia y su correspondencia con la segregacin genotpica en el caso en que existe dominancia completa en los tres loci.
Tabla 4. Segregacin fenotpica y genotpica de la desdendencia para dominancia completa en los tres loci.

En resumen, en el cruzamiento trihbrido, si consideramos tres loci con dominancia completa, intervienen 8 tipos de gametos que, al unirse dan lugar a 27 genotipos distintos en los que se distinguen 8 fenotipos y en el caso general del polihbrido, si todos los genes muestran dominancia completa, estarn involucrados 2n tipos de gametos que, al unirse dan lugar a 3n genotipos distintos en los que se distinguen 2n fenotipos . En el caso general de un cruce entre individuos heterocigotos para n loci biallicos (n = 1, 2,... n) el nmero de gametos implicados ser igual a 2n y 57

sus frecuencias, por la primera y la segunda ley de Mendel, se pueden calcular como: ( )n
Tabla 5. Segregacin de las combinaciones genticas totales y diferentes de gametos heterocigotos. No. de Genes No. de Gametos Combinaciones genticas totales F2 Combinaciones Genotpicas diferentes Lneas F2

1 2 3 4 .. 10 n

2 4 8 16 . 1024 2n

4 16 64 256 . . 4n

3 9 27 81 . . 3n

2 4 8 16 . . 2n

58

9. Leccin 9. Herencia ligada al sexo.

En la mayora de los organismos existen dos sexos (macho y hembra) y aparecen en proporciones mas o menos iguales; el sexo es determinado por la presencia de cromosomas sexuales en los que cada integrante del par puede diferir en su tamao dependiendo del organismo del cual se origina, por ejemplo, en los humanos y Drosophila, los machos tienen un cromosoma sexual ms pequeo llamado Y (masculino) y uno ms grande llamado X (femenino). Los machos son XY, y se dice que son heterogamticos y las hembras son XX y son por lo tanto homogamticas. . Los machos (si son heterogamticos) contribuyen con el X o el Y a su descendencia, mientras que las hembras proveen uno de sus X. Por lo tanto en estos casos el macho determina el sexo de la descendencia. Recuerde que en la meiosis cada cromosoma se duplica y solo una copia de cada uno de ellos es portada por el gameto. En otras palabras la herencia ligada al sexo, no es ms que la expresin de los genes en aquellas regiones del cromosoma X que no tienen su correspondencia en el cromosoma Y. Una de las primeras evidencias de la herencia ligada al sexo fue dada por Thomas H. Morgan cerca de 1920 durante sus estudios del color de ojos en Drosophila melanogaster la mosca de las frutas, un organismo ideal para los trabajos en gentica ya que tienen tamao pequeo, son fciles de cuidar, son susceptibles de mutar , tienen un tiempo de generacin corto (7 a 9 das) y poseen tan solo cuatro pares de cromosomas. Normalmente los ojos de Drosophila son rojos pero Morgan descubri una mutante con un color de ojos diferente (blancos) y trat de duplicar con ella los experimentos de Mendel. La mayor parte de las mutaciones son generalmente recesivas, por lo tanto la aparicin de una mutante de ojos blancos le brind a Morgan la posibilidad de estudiar, en animales, los fenmenos que observ Mendel. Pero, en vez de conseguir un resultado tipo 3:1 en F2 (segundo entrecruzamiento) la relacin fue cercana 4:1 (ojos rojos a ojos blancos) y por otra parte todos los individuos de la generacin F2 de ojos blancos eran machos. La cruza de un macho homocigota para el color blanco con una hembra homocigota para el rojo da una descendencia que en su totalidad tienen ojos rojos. El rojo es dominante sobre el blanco. Sin embargo, la cruza de una hembra homocigota para ojos blancos con machos de ojos color rojo, da un resultado inesperado: todos los machos tienen ojos blancos y todas las hembras ojos rojos. Esta situacin se explica solo de la siguiente manera: si el gen para color rojo solo esta en el cromosoma X, el macho de ojos rojos en un segundo cruce 59

pasar sus ojos rojos solo a sus hijas, que por otra parte recibirn un X portador del color blanco recesivo. Por lo tanto las hembras tendrn ojos rojos igual que su padre. Dado que la mosca de la fruta pasa solo un Y a sus hijos, el color de los ojos est enteramente determinado por el cromosoma X que recibe de su madre (en este caso blanco). Esta es la razn por la cual todos los machos de la segunda cruza tienen ojos de color blanco. (Figura 13).
Figura 13. Herencia ligada al sexo en Drosophila sp.

Fuente: http://fai.unne.edu.ar/biologia/genetica/genet2.htm#mutaciones

En seres humanos se han identificado algunos genes que se encuentran localizados en los heterocromosomas y por lo tanto se trata de herencia ligada al sexo. Por ejemplo, los genes que codifican para el daltonismo y la hemofilia se encuentran localizados en el heterocromosoma X. 60

Los hombres son homicigotos, por lo tanto se espera que el fenotipo de un carcter recesivo ligado al sexo sea ms frecuente en los hombres que en las mujeres, ya que los hombres no poseen un segundo cromosoma X que pueda llevar el alelo normal. Si este tipo de herencia es correcto, se pueden realizar varias predicciones. Primero, puesto que todos los varones obtienen el cromosoma X de su madre, los varones afectados han de ser descendientes de mujeres portadoras (heterocigotas). Una mujer es portadora si su padre presenta la enfermedad, pero si su padre no posee la enfermedad, su madre entonces debe ser la portadora. El carcter no se transmite de padre a hijo debido a que l aporta el cromosoma Y, no el X que es donde se lleva la enfermedad. Cuando una caracterstica se transmite a travs del heterocromosoma Y se habla de herencia holndrica. A manera general se puede concluir que: La expresin genotpica de la herencia ligada al sexo de genes recesivos como el color blanco de los ojos de la mosca de la fruta o la hemofilia, distrofia muscular y el daltonismo es ms comn en machos Los hijos no pueden heredar de sus padres pero si las hijas Los hijos heredan el cromosoma Y de su padre.

61

CAPITULO 3.
Patrones modificadores de la herencia Mendeliana

INTRODUCCIN.
La fortuna de Mendel fue que trabajo con caracteres regulados por genes que se comportan de acuerdo con el patrn clsico de de dominancia y recesividad, por lo cual nunca averigu que existen otros patrones de comportamiento gentico como el de codominancia, sobredominancia, dominancia incompleta, recesividad, Epstasis, ligamiento, etc. llamadas interacciones gnicas. La interaccin gnica indica que las funciones de un gen estn relacionadas con las funciones de otros genes y que la manifestacin fenotpica puede estar influenciadas por esa interaccin, lo que puede enmascarar, suprimir o alterar las proporciones de los descendientes de los cruces monohbridos de la F1 produciendo proporciones no esperadas del 2:1 o 1:2:1. As mismo, en los cruces dihbridos o trihbridos ,el medio ambiente tambin tiene influencia en la manifestacin fenotpica, atenuando o eliminando algunas manifestaciones de los genes segn sus interacciones. OBJETIVOS 1. Identificar los patrones que inciden en la variacin y modificacin de la herencia Mendeliana. 2. Identificar los efectos de las interacciones allicas y no allicas de los genes 3. Identificar los efectos de la interaccin de genes con Epstasis 4. Determinar el efecto del ligamiento gentico 5. Identificar el efecto de la interaccin de genotipo-ambiente 62

10. Leccin 10. Interacciones Allicas.

Los genes alelos, es decir, aquellos que se encuentran en el mismo locus en los cromosomas homlogos, pueden interactuar de diversas maneras y generar distintos mecanismos de herencia con dominancia, recesividad, herencia intermedia, codominancia, y series allicas.

10.1 Dominancia.
Es un tipo de interaccin allica en dnde uno de los genes presente en alguno de los dos cromosomas homlogos, se expresa y a la vez enmascara al gen que se encuentra en el mismo locus del otro cromosoma homlogo. El gen que enmascara se llama gen dominante y el enmascarado gen recesivo. En los experimentos de Mendel, al cruzar dos lneas puras, los hbridos obtenidos expresaban uno de los rasgos de sus progenitores, que corresponda a la expresin del gen dominante. En este caso no se puede diferenciar el heterocigoto Aa del homocigoto AA. O____________2 aa Aa AA

10.2 Recesividad.
Al cruzar lneas puras se observa que una de las caractersticas consideradas desaparece en la F1, o se encuentra enmascarada, para luego desaparecer en un 25% de la descendencia de la F2. En este caso se dice que tanto la caracterstica heredada como el factor o gen que controla son recesivos.

10.3 Codominancia.
Este tipo de interaccin se dilucid estudiando la herencia de los grupos sanguneos en el hombre. En la especie humana se distinguen cuatro grupos sanguneos: A, B, AB y O. cuando uno de los progenitores es del grupo A y el otro del grupo B, el hijo puede ser del grupo AB, ya que los genes que determinan los grupos sanguneos A y B se expresan de igual manera en el nuevo individuo, lo que se conoce como codominancia.

63

Ejemplo:

M1 M1 x M2 M2
Res. Raza 1 Res. Raza 2 Mezcla de los fenotipos de los progenitores

F1

M1M2

F2 1M1M1; Proporcin fenotpica en la F2 es 1:2:1.

2M1M2;

1M2M2

Res. Raza 1 Res. Raza 1 y 2 ; Res. Raza 2

Otro ejemplo de codominancia o dominancia incompleta es el encontrado en el color de los ptalos en la planta Mirabilis Jalapa, o "don Diego de noche", que al cruzar una planta de la lnea pura, que produce flores rojas, con una planta de lnea pura que produce flores blancas, se obtiene en la primera generacin, plantas de flores rosadas, es decir, un rasgo intermedio al de los dos progenitores puros. Cuando las plantas de flores rosadas se cruzan entre s, la F2 resultante produce 25% de plantas de flores rojas, 50% de flores rosadas y 25% de flores blancas, con lo que se obtiene una proporcin del color de las flores o fenotpica de 1:2:1. Estos resultados se producen si uno de los miembros del par alelo para el color de las flores ejerce una dominancia incompleta sobre el otro miembro del par alelo. RR x bb
Rojas Blancas

F1

Rb Rosadas
Rojas, Rosadas, Blancas

F2. 1 RR ; 2Rb; 1 bb

10.4 Sobredominancia
Es una interaccin allica donde el fenotipo del heterocigoto se sita fuera del intervalo establecido por los fenotipos de los homocigotos, es decir el fenotipo heterocigoto es superior. aa AA Aa 10 35 60 80 ______-a___________+b______
Valores fenotpicos _____________d_______

Ejemplo:

AABB x aabb

AA = BB = 60 Un. = 120 Un. aa = bb = 10 Un. = 20 Un. AaBb Aa = Bb = 80 Un = 160 Unidades. 64

10.5 Series allicas o Alelismo mltiple.

La mayora de los genes alelos se pueden presentar en ms de dos formas alternativas constituyendo las llamadas series allicas, estos genes interactan entre si y su efecto no depende de su funcin propia si no tambien de la funcin de otros genes y del medio ambiente en el que se desarrolle el organismo. Un ejemplo es el color del pelaje en los mamferos, como es el caso del ratn en que se han determinado cinco genes distintos que interactan en el color del pelaje (A, B, C, D, y S). El gen A controla la distribucin del color en el cabello, el gen B determina el tipo de pigmento que se produce, el gen C permite la aparicin del color, el gen D controla la intensidad de la pigmentacin producida por los otros genes del color del pelaje y el gen S controla la presencia o ausencia de manchas por lo que se deduce que la apariencia normal del pelaje de los ratones silvestres se produce mediante la interaccin de un conjunto complejo de genes; este tipo de interacciones es la que determina la mayora de las caractersticas de cualquier organismo. El grupo sanguneo en los humanos es el caso de un solo gen con tres formas alternativas A; B; y O, En donde A= B significa que existe una relacin de codominancia entre ellos, pero que cualquiera de ambos domina sobre "O" que es el alelo recesivo de la serie. A>O, B>0, A=B Fenotpicamente se presentan cuatro grupos sanguneos= A, B, AB y O. Las clulas sanguneas del grupo A tienen el antgeno A en su superficie. Adems, la sangre de este grupo contiene anticuerpos contra el antgeno B presente en las clulas rojas de la sangre del grupo B. La sangre de este ltimo grupo tiene la composicin inversa al grupo A. En el suero del grupo AB no existe ninguno de los dos anticuerpos previos, pero los glbulos rojos contienen los antgenos A y B. El grupo O carece de estos antgenos en los eritrocitos, pero este suero es capaz de producir anticuerpos contra los hemates que los contengan. Si se transfunde sangre del grupo A a una persona del grupo B, los anticuerpos anti-A del receptor destruirn los glbulos rojos de la sangre transfundida. Como los eritrocitos de la sangre del grupo O no contienen ningn antgeno en su superficie, la sangre de este grupo puede ser empleada con xito en cualquier receptor. Las personas del grupo AB no producen anticuerpos, y pueden por tanto recibir transfusiones de cualquiera de los cuatro grupos. As, los grupos O y AB se denominan donante universal y receptor universal respectivamente. Gen A produce antgeno A Gen B produce antgeno B Gen A B produce antgeno AB Gen O NO produce antgeno Como cada individuo puede tener dos y slo dos de estos alelos, las combinaciones posibles con sus correspondientes fenotipos son las 65

siguientes: AA, Ab, AO, BB, BO,OO. En la siguiente tabla se puede apreciar ms fcilmente las diferentes combinaciones de los alelos.
Tabla 6. Combinacin de alelos de genes que codifican para tipo de sangre en humanos. Madre A A A B B O Padre A O B B O O Genotipo cigoto AA AO AB BB BO OO Fenotipo cigoto A A AB B B O

El grupo sanguneo o Rh se basa en la existencia o no de diversos aglutingenos, los factores Rh, en los glbulos rojos. Es otro grupo sanguneo de transmisin hereditaria que tiene gran importancia en obstetricia y que tambin hay que tener muy en cuenta en las transfusiones sanguneas. Al igual que en el sistema ABO, tambin est implicado un antgeno que se localiza en la superficie de los eritrocitos. El grupo Rh+ posee este antgeno en su superficie; el Rh- no lo posee y es capaz de generar anticuerpos frente a l, por tanto, se puede desencadenar una respuesta inmune cuando se hace una transfusin de sangre de un individuo Rh+ a uno Rh-, aunque no al contrario. Tambin puede aparecer respuesta inmune entre la madre y el feto: la madre Rh- se inmuniza por va placentaria contra los antgenos del hijo Rh+. La inmunizacin resulta del paso de los glbulos rojos fetales a la madre, y, al igual que en el caso de las transfusiones, no ocurre cuando la madre es Rh+, de ah su importancia en obstetricia. La inmunidad en la madre se mantiene durante toda la vida. En posteriores embarazos, si el feto es Rh+, se genera la denominada incompatibilidad fetomaterna, de forma que los anticuerpos maternos atraviesan la placenta y se fijan a los antgenos que portan los glbulos rojos fetales. El resultado es una enfermedad denominada eritroblastosis fetal o anemia hemoltica del recin nacido. Encarta 2005.
Tabla 7. Reaccin entre los eritrocitos de la sangre y el suero. Eritrocitos sangre A B AB O Suero A + + B + + AB O + + + -

66

11. Leccin 11. Interacciones no allicas

11.1 Epstasis o interaccin interallica :
La epistasia, deriva de la palabra griega que significa interrupcin. El termino fue originalmente utilizado por Bateson en 1909 para describir los genes cuyos efectos enmascaran o cubren los efectos de otros genes. Desde entonces, el trmino ha evolucionado hasta tener un significado ms general, sinnimo de interacciones entre genes de distintos loci, es decir se le utiliza para describir el fenmeno por el cual el efecto de un gen puede cambiar por la presencia o ausencia de otro gen o genes. Se denomina episttico al gen que se manifiesta e hiposttico al gen no allico que se inhibe. En las especies autgamas la espistasis es quiz ms importante para los fitomejoradores que la dominancia, por que esta ltima es necesariamente efmera en dichas especies. La epistasia que no depende necesariamente de la heterocigosis, permite recombinaciones que son algo ms que nuevas de agrupar viejos caracteres. A travs de las interacciones de los genes pueden aparecer tipos diferentes inesperados y algunos de ellos pueden presentar autnticas ventajas sobres su progenitores. Allard (1999) En un dihbrido la segregacin independiente seria F2 9:3:3:1 es decir 4 fenotipos diferentes; cuando se presenta situaciones epistticas la segregacin se altera completamente produciendo segregaciones en la F2 como relaciones 9:7, 13:3, 15:1, 9:3:4, y 12:3:1. Cuando se interaccionan tres genes, las posibilidades son mayores y pueden darse relaciones 37:27, 55:9, y 27:9:9:19.

11.2 Epstasis dominante: 12:3:1

En este caso el alelo dominante de un gen inhibe o suprime totalmente el efecto del otro gen no alelos. Para entender esta interaccin gnica citaremos el siguiente ejemplo del color de la cebolla de bulbo el cual es controlado por dos genes as: color del bulbo = Blanco, Amarillo y Rojo V v I i Cruce Blanco X Amarillo F1 Blancos 67

Normal F2 12 Blancos V_ I_ 3 Rojos 3 Fenotipos I = inhibe el color i = Amarillo V= Rojo v = Blanco V_ ii 1 Amarillo vvii 9 V_I_ 3 V_ii 3 vvI_ 1 vvii

11.3 Epstasis recesiva:

El gen recesivo a no deja expresar el gen B o b

A _______B __________ a b Ejemplo: el color de la flor del frjol Caup es gobernado por 2 genes y se presentan tres fenotipos: Violeta oscuro, violeta claro y blanca; al cruzar: Violetas oscuras X Blancas
AABB aabb F1 Violetas oscuras AaBb F2 9 Violetas oscuras A_ B_ 3 Violetas claras A_bb + aabb 4 Blancas aabb + aaB_ Proporcin fenotpica 9:3:4.

11.4 Epstasis Doble Dominante. (15:1)

Genes Duplicados. Para que se presente el genotipo normal basta con que se presente un gen dominante. 68

A _______B __________ a b

mutante aabb

Normal 9 A_B_; 3 A_bb; 3 aaB_, La proporcin 9 : 3 : 3 : 1 se modifica a 15 : 1 si los alelos dominantes de ambos loci producen cada uno el mismo fenotipo sin efecto acumulativo. Por ejemplo: El color de la hoja de frjol puede ser: Verde normal o variegada y es manejada por 2 genes

A _______B __________ a b
Hoja verde X Hoja Variegada F1 Verde F2. 15 verdes 1 variegada

11.5 Doble Epstasis recesiva (9:7)

Es el caso en que ambos genotipos homocigotos recesivos producen fenotipos idnticos, la proporcin se modifica a 9:7. Los genotipos aaB_, A_bb y aabb producen un solo fenotipo. Cuando ambos alelos son dominantes, se complementan uno con otro, y se produce un fenotipo diferente. En ausencia del alelo dominante se produce el fenotipo mutante: ejemplo; el contenido de cianuro en la hoja de trbol es controlado por dos genes:

A _______B __________ a b

Alto Cianuro X Bajo Cianuro

F1 Alto cianuro F2 9 Alto cianuro A_B_

7 Bajo cianuro A_bb, aaB_, aabb

11.6 Genes duplicados con efectos acumulativos (9: 6: 1)

Si la condicin dominante (heterocigoto) se encuentra en uno o en otro locus (pero no en ambos) y produce el mismo fenotipo, la proporcin se convierte en 9: 6: 1. 69

Por ejemplo, cuando los genes epistticos estn involucrados en la produccin de varias cantidades de un producto, como por ejemplo pigmentos, puede considerarse que los genotipos dominantes de cada locus producen independientemente una unidad de pigmento. As los genotipos A_bb y aaB_ producen cada uno una unidad de pigmento y tienen, por lo tanto el mismo fenotipo. El genotipo aabb no produce pigmento y en el genotipo A_B_ se produce un efecto acumulativo, es decir se producen dos unidades de pigmento.

70

12. Leccin. 12. Ligamiento y recombinacin gentica

De acuerdo con las leyes de Mendel los genes que controlan diferentes caracteres son heredados de forma independiente uno de otro y esto se cumple cuando los genes se hallan en cromosomas diferentes. T.H. Morgan demostr que los genes se encuentran en forma lineal en los cromosomas, por lo cual, se dice que ligamiento es la expresin de la distancia entre dos genes localizados en un mismo cromosoma y dependiendo de la lejania o cercana entre ellos se puede o no presentar sobrecruzamiento dando origen a segregaciones independientes. Todos aquellos loci que se encuentran situados sobre el mismo cromosoma forman un Grupo de Ligamiento; cuando la distancia entre los dos genes que estn situados en un mismo cromosoma es menor a 0.5 Centimorgan (CM) hay ligamiento. Cuanto ms alejados estn entre s dos loci ligados ( A,a y C,c) ms probable es que se d sobrecruzamiento entre ellos, cuanto ms cerca estn entre s dos loci ligados (A,a y B,b) menos probable es que se d sobrecruzamiento entre ambos.

Los loci Aa y Bb tienen tendencia a heredarse conjuntamente no permitiendo la recombinacin gentica; por tanto el ligamiento puede ser bueno si los genes ligados codifican caracteres buenos y malo, cuando condiciona un ligamiento de un gen bueno y uno malo, por ejemplo: A___________B a b A = Alto rendimiento B = Mala calidad.

Para probar si existe ligamiento, se realiza la prueba en la F2 examinando las proporciones de la descendencia y realizando el cruzamiento prueba.

12.1 Clases de ligamiento:

12.1.1. Ligamiento total:

No hay recombinacin gentica, los genes estn muy prximos C = 0

71

12.1.2. Ligamiento segn disposicin en los genes. Dos loci ligados pueden estar en Fase de Acoplamiento AB/ab (los dos alelos dominantes sobre el mismo cromosoma, y los dos recesivos sobre el cromosoma homologo) o en Fase de Repulsin Ab/aB (un alelo dominante y otro recesivo sobre cada cromosoma). Configuracin Cis o Acoplamiento = AB/AB o ab/ab Configuracin Trans. o repulsin = Ab/Ab; o aB/aB

La recombinacin (C) puede variar entre 0 y 0,5 as: Segregacin independiente C = 0,5 Ligamiento total. C = 0,0 Ligamiento parcial C = 0,5 > C > 0,0. Ligamiento en Atraccin; segregacin independiente AB/AB x ab/ab F1 AB/ab F2 AB,
Parental

Ab, aB,
Recombinantes

ab
Parental

C = 0,5

Ligamiento Total; no hay recombinante AB ____ , ____ , ab

Parental Parental

Ligamiento total

Ligamiento parcial: la recombinacin se encuentra dividida entre el nmero de gametos. C AB; C/2 Ab; C/2 aB; C/2 ab; C = 0,5 > C < 0,0.

Ejemplo: Estudio de color de la flor y textura de la hoja 72

Color de la flor V = Normal color amarillo; v = mutante color oro Textura hoja B = Normal Lisa; VB/VB F1 x b = bullota arrugada

vb/vb En configuracin CIS

VB/bv vb VvBb vvbb 3 V_B_ Paternal 0 V_bb Recombinante 0 vvBb Recombinante 1 vvbb Paternal

F2 ___VB VB vb VVBB VvBb

Vb/Vb x F1

vB/vB En configuracin Trans

Vb/vB vB VvBb vvBB 2 V_B_ Recombinante 1 V_bb Parental 1 vvB_ Parental 0 vvbb Paternal

F2 ___Vb Vb vB VVbb VvBb

73

13. Leccin 13. Cruce de prueba.

Gregorio Mendel para probar su hiptesis de que los alelos estn en pares y se separan en la formacin de gametas realiz un experimento adicional: cruz la F1 (semillas lisas) con la raza pura paterna de semillas rugosas (padre homocigota recesivo) a lo que se denomin CRUZAMIENTO DE PRUEBA. En un cruzamiento de prueba se cruzan un genotipo desconocido que muestra el carcter dominante con el padre homocigota recesivo. Lo que se pretende demostrar es si el genotipo desconocido es homocigota dominante o heterocigota para ese carcter. Si se producen dos fenotipos distintos quiere decir que el progenitor desconocido era heterocigota para ese carcter. Si por el contrario aparece un solo fenotipo es homocigoto. Para ello Mendel llevo a cabo el siguiente experimento: Cruz sus guisantes heterocgoticos de semillas redondas (Rr) con semillas arrugadas homocigticas (rr). Pens que el progenitor homocigtico recesivo podra solamente producir gametos que contenan el alelo r. El padre heterocigtico producira igual nmero de gametos R y gametos r. Mendel predijo adems que la mitad de las semillas producidas a partir de este cruce seran redondas (Rr) y que la mitad seran arrugadas (rr). Por este medio se prueba la composicin del genotipo en aquellos casos en donde dos genotipos diferentes (como RR y Rr) producen el mismo fenotipo. Para un observador casual, este cruce no le parecera diferente del cruce P1 descrito antes. Guisantes de semilla redonda se cruzaban con guisantes de semilla arrugada. Pero Mendel, suponiendo que los guisantes de semillas redondas utilizados en este cruce en realidad eran heterocigticos, predijo que se produciran tanto semillas redondas como arrugadas y en una proporcin 50:50. Mendel llev a efecto los apareamientos y cosech 106 semillas redondas y 101 semillas arrugadas de guisantes, tal cual como se ilustra en la siguiente figura.
Figura 14. Representacin esquemtica del cruce de prueba.

74

La hiptesis de Mendel haba explicado todos los hechos conocidos. Haba conducido tambin a la prediccin de hechos hasta entonces no conocidos. Cuando se pusieron en evidencia estos hechos, su hiptesis se fortaleci considerablemente. Una hiptesis que explica todos los hechos conocidos en un momento dado y predice con xito nuevos hechos, se convierte en una teora. Si una teora contina cumpliendo su papel explicativo y predictivo, finalmente puede llegar a ser una ley. Dos de las suposiciones de Mendel se llaman hoy en da Las Leyes de Mendel.

75

14. Leccin 14. Interaccin genotipo por ambiente.

El estudio de la interaccin genotipo-ambiente (G x A) es un tema de relevancia en la etapa final del mejoramiento gentico, siendo uno de los factores determinantes en la seleccin y recomendacin de cultivares evaluados en pruebas regionales de rendimiento, debido a que los patrones de respuesta de los cultivares no son uniformes a travs de los diversos ambientes donde se evalan y que seguramente cambiaran en los lugares en donde los agricultores los siembren. El Ambiente es el conjunto de factores que afectan el desarrollo de una planta, el cual comprende todos los efectos predecibles edficos (qumica y fsica del suelo), climatolgicos, (radiacin solar, hora luz) y los efectos no predecibles como; Climatolgicos (lluvias, humedad relativa del aire, temperatura) y biolgicos (insectos, enfermedades, agentes simbiticos, micorrizas) que afectan el crecimiento o el desarrollo (o ambos estados) de una planta determinada en un sitio especfico y la probabilidad de que estas condiciones se repitan en otro sitio se considera casi nula. La evaluacin de cultivares en diferentes ambientes se realiza con el objetivo de recomendar a aqullos que se comporten mejor en la mayor cantidad de ambientes de una regin determinada. Los cambios en el ordenamiento de los cultivares al cambiar de ambiente indican la presencia de interaccin genotipo x ambiente (IGA) y la ausencia de estabilidad para el carcter en cuestin. Los avances genticos de la seleccin, dependen de tres factores fundamentales, segn Allard (1967) de la variabilidad gentica entre los diferentes individuos, del efecto de enmascaramiento del ambiente y sus componentes de interaccin sobre esta variabilidad, y de la intensidad de seleccin aplicada. Si no existiera influencia del ambiente el valor genotpico sera igual al fenotpico. Cuando medimos el valor fenotpico de un carcter en individuos que han crecido en el mismo ambiente, las diferencias entre unos y otros se deben exclusivamente a causas genticas. Si no hubiera influencia del genotipo todo el valor fenotpico se debera al efecto ambiental. Cuando medimos el valor fenotpico de un carcter en individuos con el mismo genotipo, las diferencias se debern a causas ambientales. En un sentido ms amplio, tendramos que decir que el fenotipo es igual al genotipo ms el ambiente ms la interaccin genotipo-ambiente. F = G + A + GxA 76

Se dice que existe interaccin genotipo-ambiente cuando una diferencia especfica del ambiente no tiene el mismo efecto sobre diferentes genotipos. Esto significa que el genotipo A puede ser superior al genotipo B en el ambiente X, pero inferior en el ambiente Y. Ejemplo un frijol sembrado en Palmira y en los Llanos Orientales presenta rendimientos diferentes, lo que demuestra la incapacidad de un genotipo de responder de manera igual a varios ambientes. Se puede presentar tambien no interaccin genotipo por ambiente en algunos genotipos estables o si lo presenta esta no es significativa. Tambin se presentan casos donde IGA es significativa, pero el orden del merito de un material con respecto a otro no varia de una localidad a otra; ejemplo dos variedades de frjol sembrados en Palmira tienen el siguiente orden de importancia V1 > V2 y estas mismas variedades evaluadas en los Llanos Orientales conservan el mismo orden de merito, es decir, V1 > V2 . Por otro lado, una falta de IGA puede significar falta de diversidad gentica, lo que puede ser desastroso si est asociado a vulnerabilidad gentica de un cultivo a enfermedades, ataque de insectos u otros factores u homogeneidad de los ambientes donde se prueban los genotipos. La evaluacin extensiva a travs de localidades y aos permite identificar el germoplasma superior para una amplia rea geogrfica por un lado y por el otro, permite minimizar las IGA modificando genticamente a los cultivares, por ejemplo confirindoles resistencia o tolerancia a los estreses a los que pueden estar sometidos y que son responsables de sus interacciones con el ambiente. Esto tendera al mejoramiento del comportamiento a travs de un amplio espectro ambiental, lo que resultar ms rentable para los agricultores y para las empresas semilleras. Los cambios de ambiente pueden producir cambios dramticos en las plantas, en especial en aquellos caracteres cualitativos que son manejados por pocos genes. Para ser efectiva la seleccin, hay que recurrir a mtodos que permitan diferenciar el efecto del medio ambiente del efecto hereditario, tomndose en cuenta la forma de reproduccin de las plantas y la heredabilidad del carcter o caracteres a seleccionar El muestreo ambiental, es un factor importante para el xito de las seleccin de un cultivar o material comercial de cultivo a recomendar en un determinado lugar. La medicin de la IGA es una actividad costosa y demorada, esta se puede realizar por dos metodologas: bajo condiciones naturales; combinando localidades y semestres; combinando variedades, localidades y semestres. Bajo condiciones artificiales se puede evaluar: utilizando fechas de siembras 77

diferentes en el mismo sitio; utilizando diferentes gradientes de fertilidad; diferentes gradientes de humedad; diferentes densidades de siembra, diferente incidencia de plagas y enfermedades. La magnitud de la interaccin GxA es estimada mediante el anlisis de varianza de un conjunto de grupos de experimentos, repetidos en diferentes localidades y aos. Y la otra es con regresin. Las varianzas debidas a interacciones genotipo-medio ambiente basada en un solo ensayo puede conducir a graves errores, esto es debido a que en las experiencias basadas en un solo ao y en una sola localidad no puede separarse la varianza genotpica y si la varianza debida a las interacciones es importante, las predicciones basadas en la sobreestimacin de la varianza gentica no cumplir en aos futuros y en otros localidades y por lo tanto fracasar al tratar de predecir hechos sin tener en cuenta la interaccin entre el genotipo y el medio ambiente. Ejemplo: Se realiza un anlisis de varianza para evaluar la interaccin genotipo por ambiente midiendo el caracter rendimiento de 10 genotipos en una localidad y un semestre.
FV
Repeticiones Genotipo G x R x Error

Gl
R-1 G-1

SC

CM
Cm CmGRe CmGReE

CM. Esperados
E+ r g 2 E
2 2

FV = fuente de variacin Gl = Grados de libertad SC = Suma de cuadrados CM = Cuadrado medio F = F tabulado

Se presento interaccin genotipo por ambiente.

2F = 2R + 2g + 2g x R Hay variacin de genotipos, de repeticiones y de interaccin genotipo por ambiente.

Si se utilizan varias localidades, varios semestres

FV
Localidad Semestre Genotipos Gxlocalidad GxSemestre GxLoxSe Error

GL
Loc-1 Sem-1 G-1 G-1xLo-1 G-1xSe-1 G-1xLo-1xSe-1 Lo(G-1)(lo-1)Se-1)

SC

CM
CmG CmGxloc CmxSe CmGxLxS Cm error

CM Esperados
2l+r2gls+rl2gxs+2L+rs2gls+rls2g 2 l+ r 2gls+rs2gxl 2l + r 2gls+rl2gxs 2l + r 2gls 2e

Para expresar la diferencia entre las variedades y medir y cuantificar los cambios en una variable con respecto a otra se realiza una regresin propuesta por Finlay y Wilkinson. 78

15. Leccin 15. Estabilidad y adaptabilidad.

La estabilidad es el atributo que le permite a los genotipos ajustar su capacidad productiva a la ms amplia variacin del estmulo ambiental cuando son evaluados en ambientes diferentes; en otras palabras es el comportamiento similar y predecible de un material, el cual, al cambiar las condiciones medio ambientales no cambia su genotipo. Ejemplo, una variedad de maz responde con un rendimiento igual en el semestre 1 que en el semestre 2 en el Valle del Cauca. La estabilidad no implica una constancia general del fenotipo en diferentes ambientes. Implica estabilidad en aquellos aspectos del fenotipo, especialmente el rendimiento y la calidad, que son de importancia econmica. As, los genotipos fenotpicamente estables pueden serlo para caractersticas agrcolas importantes, pero no necesariamente para todas las que constituyen el fenotipo. (Escobar, 1997) Se han propuesto diversos procedimientos para determinar la estabilidad fenotpica; todos ellos contemplan la evaluacin de todos los genotipos en ambientes con condiciones diferentes. Entre estos se ha propuesto que la estabilidad de los fenotipos se puede identificar mediante la comparacin del comportamiento de los genotipos y de la ubicacin de ellos en una escala de mayor a menor comportamiento en cada uno de los ambientes en que se evalan. El rango promedio es un ndice de estabilidad: el menor promedio corresponde a la poblacin ms estable y viceversa. Escobar (1997) Eberhart y Russell (1966) propusieron un modelo basado en la tcnica de regresin y consideraron dos parmetros empricos: la pendiente de la lnea de regresin (bi) y las desviaciones de la lnea de regresin (S2di). El modelo propuesto es el siguiente:
Yij = i + iIj + dij donde: Yij = promedio del genotipo i en el ambiente j. i = promedio del genotipo i en todos los ambientes. i = coeficiente de regresin que mide la respuesta del genotipo i al variar los ambientes. Ij = ndice ambiental del ambiente j-simo, que se calcula como la desviacin del promedio de los genotipos en un ambiente dado a partir del promedio general. dij = desviacin de la regresin.

79

De acuerdo con los autores, un genotipo estable es aquel para el cual se obtiene un coeficiente de regresin igual a la unidad (bi = 1) y una mnima desviacin de la lnea de regresin (S2di=0). Valores del coeficiente bi mayores que la unidad, indican que el correspondiente genotipo responde bien a ambientes favorables, pero su comportamiento es pobre en ambientes desfavorables. Por el contrario, si el valor de bi es menor que la unidad, indica que tal genotipo se comporta bien en ambientes desfavorables. La interpretacin generalizada de los estadsticos de estabilidad de Eberhart y Russell es como se indica a continuacin:
Tabla 8. Interpretacin generalizada de los estadsticos de estabilidad de Eberhart y Rusell.

Valor
bi = 1 bi > 1 bi < 1 bi = 0 S2di = 0 S2di > 0

Comportamiento
Estabilidad media. Asociado con rendimientos altos: adaptabilidad general; rendimientos bajos: pobre adaptabilidad Genotipos sensibles. Adaptacin a ambientes favorables Resistencia a cambios ambientales. Adaptacin a malos ambientes Estabilidad absoluta. Asociado con rendimientos altos: genotipo ideal Buena estabilidad. Mala estabilidad

Fuente: Escobar 1997. http://www.unalmed.edu.co/~cescobar/mani_estabilidad.htm

Para Carballo y Mrquez (1970), el genotipo deseable es aquel que, adems de los parmetros de estabilidad bi = 1 y S2di = 0, presenta alto rendimiento. Los fitomejoradores buscan seleccionar cultivares que se comporten bien en un amplio rango de ambientes. Sin embargo, la identificacin de cultivares ampliamente adaptados se hace difcil cuando existe interaccin genotipo x ambiente (G x A). La interaccin G x A ha mostrado que reduce el progreso en la seleccin y complica la identificacin de cultivares superiores en ensayos regionales y muchas veces ocasiona que el fitomejorador deba desarrollar genotipos adaptados a diferentes localidades a travs de seleccin independiente, intentando entonces alcanzar el mximo potencial 80

de rendimiento en dicho sustancialmente los costos. especfica de los genotipos, consistentes de ao a ao y una localidad y no en otra.

ambiente y aumentando, por lo tanto, De aqu surge el concepto de adaptabilidad cuando las diferencias entre localidades son explican que el genotipo se comporte bien en

La adaptabilidad es entonces el comportamiento similar y predecible en funcin de localidades; para algunos autores los trminos adaptabilidad y estabilidad son sinnimos. De la estabilidad se derivan otras definiciones como estabilidad biolgica, estabilidad agronmica, homeostasis, amortiguamiento y plasticidad: Estabilidad biolgica; es aquella que responde de manera similar en todos los ambientes, no cambia en la medida de se mejora el ambiente; biolgicamente es interesante, en el caso de ambientes con alta o baja incidencia de patgenos, ya que su produccion permanece constante. Estabilidad agronmica: es aquella que en la medida que se mejora el ambiente tambien se mejora la produccion de la especie; estas dos variables determina la filosofa del mejoramiento. La revolucin verde se baso en el principio de la estabilidad agronmica, produciendo materiales que responden a la aplicacin de insumos. Los genotipos que presenten una estabilidad agronmica para un amplio rango de ambientes, se dice que tienen una adaptabilidad general o amplia. Si por el contrario, muestra una estabilidad para un rango angosto de ambientes se dice que el genotipo tiene una adaptabilidad especifica o estrecha. En este sentido se puede hablar de genotipos especialistas y de genotipos generalistas. Homeostasis : Es la capacidad alta que tiene una especie o variedad de responder uniformemente a los cambios del ambiente, no tiene una IGA significativa, por ejemplo, responde igual a suelos buenos o pobres. Plasticidad; es un termino para referirnos cuando el fenotipo varia en la medida que cambia el ambiente, es decir no es adaptable.

81

UNIDAD 2

SISTEMAS DE REPRODUCCIN DE LAS PLANTAS CULTIVADAS

INTRODUCCIN
El Mejoramiento gentico tiene como fin producir plantas con caractersticas deseables segn el cultivo de que se trate. En cultivos hortofrutcolas se buscan caractersticas como homogeneidad, mayor productividad por planta, tolerancia a plagas y enfermedades, precocidad, neutralidad al fotoperiodo y a fitorreguladores. En algunos casos se requieren plantas de menor altura o en el caso de flores de corte nuevos colores y formas novedosas de ptalos e inflorescencias. Para lograrlo es necesario tomar esas caractersticas de plantas que las poseen y transferirlas a aquellas que no las tienen, es decir que se necesita de progenitores con caractersticas deseables de donde se pueda obtener una descendencia que contenga las caractersticas deseables de ambos parentales y esto se logra manipulando los mecanismos de reproduccin de las plantas a fin de lograr genotipos y fenotipos deseables. La unidad dos por tanto tratar sobre los diferentes sistemas de reproduccin de plantas as como aspectos generales de variabilidad gentica, gentica cuantitativa y gentica de poblaciones.

82

CAPITULO 4.
Sistemas de reproduccin sexual en plantas autgamas y algamas y factores que la favorecen

INTRODUCCIN.
La constitucin genotpica de cada planta depende de cierta manera de la forma en que sta se reproduce, por lo tanto el sistema reproductivo de cada planta estar relacionado con el mtodo especfico que debe utilizarse para poder mejorarla. Las plantas que se reproducen sexualmente mediante polinizacin pueden hacerlo de varas formas, ya sea fertilizndose a si mismas o fertilizndose unas a otras entre individuos de la misma especie. As, ser importante determinar que tipo de fertilizacin se da en cada especie a fin de poder manipular practicas como las de polinizacin artificial antes de comenzar programas de mejora gentica. OBJETIVOS 1. Conocer el mecanismo general de reproduccin sexual en plantas 2. Reconocer la diferencia entre plantas algamas y autgamas y su importancia en el mejoramiento gentico y conservacin de la biodiversidad 3. Reconocer los mecanismos que aseguran la Alogamia 4. Conocer los mecanismos de dioecia y su aplicabilidad al mejoramiento de plantas. 5. Conocer los mecanismos de incompatibilidad y esterilidad y su aplicacin en el mejoramiento gentico. 83

16. Leccin 16. Plantas Autogamas

16.1 Gametognesis en plantas. Mecanismo de Fertilizacin
En plantas superiores los gametos masculino y femenino (grano de polen y vulo) se localizan dentro de los gametfitos masculinos y femenino (saco embrionario) que se forman dentro de unas estructuras denominadas micro y macroesporangios respectivamente. Estas estructuras se hallan en la flor que forma parte de la generacin esporoftica (2n o diploide). Esta generacin es el resultado de la fecundacin de la gameta femenina (vulo, n o haploide) contenida en el saco embrionario o gametofito femenino con el grano de polen (n, haploide) alojado en el gametofito masculino. El ciclo de vida de las plantas superiores se caracteriza por la alternancia de generaciones (esporoftica versus gametoftica). La generacin esporoftica, diploide o 2n se caracteriza porque todos los rganos y tejidos de la planta son diploides (2n). La parte masculina de la flor est representada por los estambres formados por el filamento y la antera, en tanto que, la parte femenina la constituye el gineceo cuyas partes son: estigma, estilo, y ovario. En las anteras y dentro de sus tecas se localizan los microesporangios, estructuras en las que por meiosis, se forman los granos de polen o gametos masculinos (n, haploides) a partir de las Clulas Madres de las Microsporas (CMMi) o Granos de Polen. (CMGP). (Pisabarro A. et al.2005.).
Figura 15 . Proceso de fecundacin.

Fuente: Pisabarro A, Ramrez L. Universidad de Navarra.

84

Estos granos de polen son traslados por el viento o por insectos hasta el estigma de la flor donde se hidratan, germinan y sufren una mitosis que da origen a dos ncleos haploides genticamente iguales: el ncleo vegetativo y el ncleo reproductivo. El primero es el responsable de la formacin de un tubo polnico o gametofito masculino que atraviesa el estilo del gineceo con el propsito de llegar al vulo y que contiene en su interior al ncleo reproductivo. Este ltimo sufrir una nueva mitosis y dar lugar a dos ncleos que intervendrn en el proceso de fertilizacin. La gameta femenina (vulo: n haploide) se forma a partir de una clula del megaesporangio. Dicha clula (Clula Madre de la Megaspora. CMM) sufre meiosis. y da origen a cuatro productos meiticos, haploides) de los cuales tres degeneran. El ncleo que sobrevive sufre tres divisiones mitticas sucesivas y da origen a una estructura llamada gametofito femenino saco embrionario que contienen ocho ncleos haploides genticamente iguales, uno de los cuales es el vulo. Las generaciones gametofticas masculinas y femeninas (haploides) estn contenida dentro de la generacin esporoftica (2n) por lo que se dice que las primeras son parsitas en el espacio y en el tiempo de la segunda. Como consecuencia de la fecundacin de la gameta femenina u vulo contenida en el gametofito femenino o saco embrionario por la gameta masculina contenida en el gametofito masculino se forma el embrin 2n que al germinar da origen a la generacin esporoftica. (Pisabarro A. et al.2005.).
Figura 16.Gametognesis femenina

Fuente: Pisabarro A. Ramrez L. Universidad de Navarra.

85

Figura 17.Gametognesis Masculina

Fuente: Pisabarro A. Ramrez L. Universidad de Navarra.

Figura 18 . Polinizacin

Fuente: Pisabarro A. Ramrez L. Universidad de Navarra.

En las Angiospermas la fertilizacin es doble. Uno de los dos ncleos (haploide) del gametofito masculino fecunda a la ovoclula (clula huevo haploide) formando un cigoto (diploide, 2n) que por mitosis dar lugar al embrin. El otro ncleo se une a los dos ncleos polares (cada uno de ellos haploide) del gametofito femenino y forma el endospermo (triploide, 3n) tejido nutricio a partir del cual se desarrollar el embrin en sus primeras etapas de desarrollo. (Pisabarro A. et al.2005.). 86

Figura 19 . Fecundacin

Fuente: Pisabarro A. Ramrez L. Universidad de Navarra.

16.2 Plantas autgamas

Se consideran plantas autgamas a aquellas que utilizan la autofecundacin como mecanismo reproductivo. La autogamia casi nunca es completa, presentndose algn porcentaje de fertilizacin cruzada. Sin embargo, se consideran especies autgamas aquellas en que el porcentaje de fertilizacin interespecfica se reproducen sexualmente por autofecundacin. La autogamia absoluta no es comn, pero desde el punto de vista del mejoramiento gentico se consideran autgamas si el porcentaje de fecundacin entre plantas de la misma especie no supera el 4 %. En algunas plantas debido a la morfologa de la flor, la autogamia se presenta debido a que las anteras de la flor liberan el polen justo encima de su propio estigma el cual se presenta receptivo mientras la flor permanece cerrada. De sta manera se evita que polen de otras flores pueda ingresar. A ste mecanismo de la flor se le denomina cleistogamia. Este mecanismo se da en cereales como el trigo, la avena y el arroz. En otras plantas como el sorgo, el frjol, la arveja, el tomate y el algodn, las flores no poseen el mecanismo de Cleistogamia, por lo que son fertilizadas mientras permanecen abiertas, sin embargo el porcentaje de fertilizacin cruzada es muy pequeo. La tendencia a la fertilizacin cruzada o alogamia en estas plantas vara dependiendo del genotipo. As, algunas variedades de arroz pueden ser ms alogmicas que otras.

87

El clima tambin influye sobre todo en cereales, lo cuales en climas tropicales y subtropicales se muestran ms alogmicos que cuando se desarrollan en zonas templadas. Cuando se realiza mejoramiento, es necesario no solo escoger el mtodo adecuado sino tambin hacer una buena seleccin de parentales para lo cual es preciso reconocer los tipos superiores existentes dentro de una poblacin determinada y variable. Segn el tipo de planta de que se trate, sea algama o autgama hay restricciones a la seleccin impuestas por la gentica misma, de manera que es posible aprovechar la variabilidad natural existente dentro de la poblacin en pro del mejoramiento. (Pisabarro A. et al.2005.)
Figura 20.Flor del algodn

Autor: Kekita 20/7/06 23:31.static.flickr.com

Figura 21.Espiguilla y flor del arroz

Fuentes: www.puc.cl/.../cereales/arroz/espiguil.htm www.ciat.cgiar.org

88

Las especies en las que la autogamia es comn pero la alogamia no es rara se dice que son autgamas facultativas, tambin denominadas por algunos autores como autgamas opcionales. Las plantas de especies autgamas son por lo general anuales, con flores pequeas, no conspicuas, sin atraccin para los agentes polinizadores. La autogamia es una estrategia til cuando existe un pequeo nmero de individuos por rea ya que el xito de la propagacin es ms importante que la produccin de nuevos genotipos. En las flores monoclinas o perfectas, es posible la autofecundacin, ya sea por la accin de diversos dispositivos florales o por la intervencin de un polinizador. En el lirio, Lilium martagon, el estilo inicialmente erecto, se mueve curvndose para ponerse en contacto con los estambres para autopolinizarse.( Gonzalez Ana M. et al).
Figura 22. Lilium Martagn. Estilo mvil

Autor: Spencer C.H.Barrett

89

17. Leccin 17. Plantas algamas

Se considera como algamas a aquellas plantas que no se autofecundan sino que por el contrario, poseen mecanismos de fecundacin cruzada. La alogamia es un sistema que garantiza la variabilidad gentica y por tanto las nuevas combinaciones allicas dentro de una especie. No est restringido slo a plantas con flores sino que tambin se da en otros tipos de organismos (por ejemplo en Briofitas) en los que en vez de existir granos de polen (como gametas masculinas) existen gametos masculinos (anteridios). En la evolucin de plantas fueron apareciendo mecanismos de reproduccin que favorecan la alogamia y que excluan total o parcialmente la autogamia. Las ventajas de la alogamia radican en la produccin de nuevas combinaciones genticas en la poblacin, que aseguran la variabilidad de la especie y en consecuencia, la posibilidad de sobrevivir a los cambios de medio ambiente. Por eso las Angiospermas desarrollaron numerosas adaptaciones florales para favorecer la alogamia, como por ejemplo la separacin espacial y temporal de los sexos y otras variaciones como la presentacin secundaria de polen.(Gonzlez Ana et al). Segn el tipo de flor que posean, las plantas algamas se clasifican en tres grupos : Plantas con flores hermafroditas: Son flores completas que poseen los dos sexos. Ejemplo de ellas son: Cebolla, el centeno y el maracuy.
Figura 23. Flor hermafrodita del Maracuy

Fuente: http://www.bespa.agrarias.ufpr.br/paginas/apresentacoes/1reprodutivos.pdf

Plantas monicas: Tienen flores unisexuales masculinas y femeninas en la misma planta, como el meln, el mijo, el pepino y el maz.

90

Figura 24. Planta monoica, Maz

Fuente: http://www.bespa.agrarias.ufpr.br/paginas/apresentacoes/1reprodutivos.pdf

Plantas dioicas: Plantas con flores masculinas y femeninas, como araucaria y kiwi.
Figura 25. Planta Dioica. Kiwi.

plantas con flores

Fuente: http://www.bespa.agrarias.ufpr.br/paginas/apresentacoes/1reprodutivos.pdf

Un gran nmero de angiospermas posean flores hermafroditas con estambres y carpelos en la misma flor y eran en su mayora auto incompatibles. An hoy la situacin perdura. Las angiospermas ms modernas se caracterizan por ser monoicas o dioicas. Es ms, se han 91

descrito algunas especies como Bryonia por ejemplo que presenta individuos monoicos y dioicos. En la mayora de las familias de las angiospermas la estructura floral presenta mecanismos que previenen la transferencia accidental del polen al estigma, de manera que solamente con la ayuda de polinizadores (insectos, pjaros) puede garantizarse la transferencia del polen al estigma de otra flor. Muchas de las plantas algamas necesitan de la participacin de polinizadores para poder desarrollar frutos y semillas. Algunas poseen nectarios que atraen a los insectos que buscan las mieles azucaradas. Otras no poseen nectarios pero han desarrollado colores atractivos para los insectos y formas especiales que facilitan la entrada del insecto a la flor y aseguran que el polen quede adherido a l, quien se encargar de llevarlo hasta otra flor. Para una especie algama o de fecundacin cruzada, el proceso de autofecundacin o cruzamientos con individuos estrechamente emparentados, lleva a grandes problemas con consecuencias drsticas para algunos alelos pues durante el proceso de autofecundacin se manifiestan alelos letales que no se manifestaban en el estado heterocigtico. En las poblaciones de plantas algamas, es frecuente la presencia de factores desfavorables que se mantienen en heterocigosis, tales como genes de esterilidad floral en centeno, letales por deficiencias cloroflicas en maces y otros. En la mayora de los casos estos genes se mantienen porque la seleccin natural favorece a los heterocigotos.(Ramrez L.). Los genes considerados letales hacen que el individuo no llegue a desarrollarse, muriendo en estado de embrin. Sin embargo, a veces la letalidad no es completa y se considera ms bien como subletalidad, caracterizada por una disminucin de la sobre vivencia de los individuos homocigticos para un determinado gen o por la manifestacin a una determinada edad de los efectos del gen. Las plantas algamas han desarrollado mecanismos que les permiten mantener o incentivar la alogamia, tales como la dicogamia y la presencia de barreras mecnicas.

92

18. Leccin 18. Mecanismos que Aseguran la Alogamia.

18.1 Dicogamia
El fenmeno de dicogamia es un mecanismo para garantizar la fecundacin cruzada. Consiste en que el androceo y el gineceo de las flores de algunas especies maduran uno a continuacin del otro. En la homogamia, por el contrario ambos verticilos florales maduran simultneamente. Si los estambres maduran antes que el gineceo, las flores son protndricas. As, la flor funciona primero como flor masculina y luego como flor femenina. La protandria favorece la alogamia y es el caso ms frecuente en especies con dicogamia intrafloral.(Gonzlez Ana et al). En las flores protognicas, el gineceo es el que madura primero. En algunos gneros como por ejemplo Tulipa (tulipn) y Hyacinthus (jacinto) las especies tetraploides son autocompatibles mientras que las diploides de las que provienen son autoincompatibles. La dicogamia puede ocurrir tanto en plantas con flores monoclinas (intrafloral) como en plantas monoicas con flores diclinas (interfloral). Por ejemplo, en Cucurbita maxima var. zapallito, con flores diclinas, primero aparecen las flores masculinas y unas dos semanas despus, las flores femeninas. .(Gonzlez Ana et al).
Figura 26. Dicogamia en Zapallo

Cucurbita maxima, flor femenina

C. maxima, flor masculina

Fuente: http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

93

El ejemplo ms claro de Dicogamia se observa en Aguacates, cuyo comportamiento floral es muy peculiar. Las flores, de color blanco verduscas, de pequeo tamao, de 1 cm de dimetro, se presentan en forma agrupada (inflorescencia) en forma de pancula en los extremos de las ramas y/o en las axilas de las hojas. Son completas, con ambos sexos presentes (hermafroditas) y funcionales, pero con perodos de maduracin fisiolgica distintos; es decir, la capacidad de estos rganos para fecundar o ser fecundados ocurre en perodos distintos de tiempo en cada una de ellas. La flor, en condiciones normales, tiende a presentar una fase femenina y, posteriormente una fase masculina. Adems existen dos tipos florales denominados A y B, en los cuales la alternancia de la dicogamia es diferente y por lo tanto en el cultivo se necesitan de ambos tipos varietales para lograr la polinizacin. Plantas o cultivares del grupo floral A: 1.a. Primera apertura de la flor: se sucede en la maana, el rgano femenino (estigma) est receptivo, el rgano masculino (anteras) no est dehiscente (soltando polen). 1.b. Primer cierre de la flor: se sucede al medioda de este primer da. 1.c. La segunda apertura de la flor: se sucede al da siguiente despus del medioda, estando los rganos masculinos (anteras) soltando polen (dehiscentes), pero el estigma, rgano femenino de la flor, no est receptivo por estar marchito. 2. Plantas o cultivares del grupo floral B 2a. Primera apertura de la flor: despus del medioda, el rgano femenino (estigma) est receptivo, el rgano masculino (antera) no est dehiscente (soltando polen). 2b. Primer cierre de la flor: se sucede al anochecer de ese mismo da. 2c. La segunda apertura de la flor: se sucede al da siguiente en la maana, estando los rganos masculinos (anteras) dehiscentes (soltando polen), pero el estigma (rgano femenino) en estado no receptivo.

18.2 Plantas Intermediarias

Se consideran plantas intermediarias aquellas que poseen un porcentaje de fecundacin cruzada entre un 5 y un 95%. Entre estas especies se encuentra el algodn, el caf y el sorgo. Cuando el porcentaje de alogamia est por encima del 95%, se consideran plantas algamas.4

94

18.3 Barreras mecnicas

Un ejemplo clsico de la presencia de barrearas mecnicas se da en la Alfalfa. La flor posee una membrana sobre el estigma que impide la fecundacin con polen de la misma flor. Esta barrera solo puede ser rasgada por los insectos polinizadores quienes traen polen de otras plantas.( Joo Carlos Bespalhok).

18.4 Agentes polinizadores

Los granos de polen son inertes y su transporte lo realizan agentes externos abiticos como agua y viento o biticos como animales diversos. Las plantas han evolucionado de manera que han logrado desarrollar formas y mecanismos que faciliten la polinizacin tanto bitica como abitica. Polinizacin Hidrfila (por medio del agua) Algunas Angiospermas hidrfitas como Potamogeton striatus y P.pusillus, Najas marina (Monocotiledneas) Ceratophyllum demersum (Dicotilednea) ,habitantes de humedales, tienen flores masculinas y femeninas sumergidas, en ese caso la reproduccin tambin est adaptada y la polinizacin es hidrfila. En todos los casos el polen es llevado por el agua hasta los estigmas, y a pesar de que las plantas no estn emparentadas, el polen tiene aspecto similar: es filamentoso, flexible, pegajoso. Las flores de Zostera marina, planta que vive sumergida en el mar, las flores presentan granos de polen filiformes de ms de 2 mm de longitud, y las unidades se adhieren entre s formando copos. En otras especies con polen esfrico, las unidades van embebidas en largas tiras de muclago. Su forma facilita el contacto y la adherencia a los largos estigmas. (Gonzlez Ana et al.).
Figura 27. Zostera marina, planta sumergida y polen y estigma

http://www.laisladelsur.com

Imagen de Cox 1993

95

Vallisneria (monocotilednea acutica.) presenta flores flotantes, las femeninas permanecen fijas a la planta por un largo pednculo floral; las flores masculinas se desprenden, flotan, y son llevadas por la corriente del agua o el viento hasta las flores femeninas.(Gonzalez Ana et al).
Figura 28.Vallisneria spiralis (monocotilednea) - polinizacin hidrfila

Fuente: http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

Polinizacin Anemfila (por medio del viento) La polinizacin por medio del viento se presenta en la mayora de las Gimnospermas. Es ms frecuente en Monocotiledneas (Gramneas, Cyperceas, Palmeras) que en Dicotiledneas (Salicceas, Chenopodiceas, Fagceas). El transporte de polen no est orientado, por lo cual se producen grandes cantidades de polen, de tamao pequeo, superficie lisa (facilita la dispersin), y seco, que garanticen que por lo menos un porcentaje lograr polinizar otras flores. En Pinus (Gimnosperma) los granos de polen tienen sacos aerferos para aumentar la flotabilidad, llegan directamente a los vulos, que presentan en el micrpilo gotas receptoras de polen, mucilaginosas o azucaradas. En ese momento, las escamas y las brcteas de la inflorescencia estn bien separadas. Cuando la gota de fludo micropilar se evapora, el polen se hunde y queda sobre la nucela. Despus de la polinizacin las escamas se juntan, protegiendo a los vulos entre ellas. Poco despus que el polen queda en contacto con la nucela, germina, emitiendo el tubo polnico.(Gonzlez Ana et al). En Angiospermas las flores anemfilas carecen de medios de atraccin (perianto, olor, nctar), suelen ser unisexuales, las masculinas ms numerosas que las femeninas, que generalmente son uniovuladas.

96

Los estilos y estigmas estn agrandados para facilitar la captacin del polen, como se puede ver en las flores de Poterium sanguisorba; la expulsin del polen est facilitada por la movilidad de los filamentos estaminales (Gramneas) o del eje de la inflorescencia (gimnospermas, Quercus, Alnus). La floracin es temprana, las flores aparecen antes que el follaje que puede obstaculizar la captacin del polen. Las plantas estn reunidas en poblaciones grandes y en lugares expuestos al viento (llanuras o estratos superiores de los bosques). No hay plantas anemfilas en las selvas tropicales ricas en animales antfilos. La anemofilia tiene baja eficiencia. Se calcula que un pie de maz produce 50 millones de granos de polen; para fecundar los vulos de un pie son necesarios slo 1000 granos.(Gonzlez Ana et al).
Figura 29. Polinizacin Anemfila

Polinizacin Zofila (Por medio de animales) En la polinizacin bitica intervienen insectos, pjaros y murcilagos, siendo los dos primeros los agentes biticos ms importantes. En muchos hbitats, polinizadores y flores han evolucionado juntos, creando relaciones de mutualismo. La polinizacin entomfila es realizada por diferentes tipos de insectos como Colepteros, Moscas, Himenpteros y Lepidpteros. Las flores que son polinizadas por Colepteros se denominan Cantarfilas. Son las ms primitivas y son flores polinferas, es decir que tienen muchos estambres que producen polen en exceso y lo ofrecen como recompensa a los polinizadores.

97

Son generalmente flores rotceas, fcilmente accesibles, robustas, verdosas o blanquecinas, fuertemente olorosas. Son frecuentes en las Magnoliaceae, Ranunculaceae, Nymphaeaceae. Probablemente las Rosaceae, Papaveraceae y Dilleniaceae (Paeonia) son secundariamente polindricas y polinferas.Los colepteros, con sus fuertes mandbulas masticadoras, adems de comer las anteras, destruyen frecuentemente diversas partes florales, por esta razn los vulos de las flores cantarfilas estn profundamente ubicados.(Gonzlez Ana et al).
Figura 30.Flores (Ranunculaceae) cantarfilas: Nuphar (Nymphaeaceae) y Hepatica americana

Foto de Raven. 2003

La inflorescencia de muchas Arceas, cuando est lista para la polinizacin, sufre un brusco aumento de temperatura, gracias a la oxidacin de sustancias de reserva acumuladas (en Philodendron scandens, planta nativa de Amrica del Norte, la inflorescencia alcanza 46 cuando la temperatura ambiente es de 4). Los colepteros que visitan estas plantas son atrados por el olor desagradable, similar a la carne en putrefaccin, provocado por sustancias qumicas como aminas e indoles, que se dispersan ms eficientemente con el calor.(Gonzlez Ana et al). Las flores polinizadas por Abejas y Avispas (Himenopteros), se denominan melitfilas y atraen a los insectos con la secrecin de nectar. As, las flores nectarferas tienen un costo energtico menor para la planta, por que el nctar constituye un ahorro de polen. Estas, atraen a las abejas por una combinacin de forma, olor y color. Las corolas de estas flores son generalmente amariposadas, labiadas o en fauce, con superficies para que la abeja se pose, con guas (manchas o lneas coloreadas) que sealan dnde se encuentra el nctar. Las flores producen sustancias aromticas en los osmforos, que se encuentran en la corola (Citrus), corona (Narcissus) u otros rganos florales. 98

Figura 31. Flores Melitfilas

Foto: Raven. 2003.

Tambin existen otras recompensas, las llamadas "flores de aceite" ofrecen aceites o cuerpos grasos secretados o almacenados en glndulas especiales llamadas elaiforos. Las flores de la familia Malpighiaceae, y de varias especies de orqudeas presentan esta caracterstica, que atrae a determinados grupos de himenpteros (abejas Antophoridae).)Gonzlez Ana et al.).

99

19.Leccin 19. Plantas dioicas

Las especies dioicas son plantas bisexuales. Cada especie presenta individuos con flores masculinas e individuos con flores femeninas, lo que determina la alogamia obligada. Esto significa que las dos estructuras reproductoras se hallan en plantas diferentes (plantas estaminadas y plantas pistiladas). Muchas plantas dioicas presentan flores relativamente pequeas, blancas, amarillentas o verdosas, de morfologa no especializada, que atraen una variedad de insectos pequeos, especialmente abejas pequeas de las familias Halictidae, Megachilidae y Meliponini. La dioecia o diferenciacin sexual es claramente un mecanismo de fecundacin cruzada que impide la autofecundacin, pero no impide el apareamiento entre hermanos o formas ms estrechas de consanguinidad. (Allard, 1967). A menudo la dioecia est asociada con plantas de gran tamao y polinizacin abitica como el sauce (Salix spp). Es rara en plantas con flores grandes, especializadas, con morfologa compleja. Entre las plantas cultivadas las especies dioicas mas importantes son: la palmera africana, camo, lpulo, espinaca, papayo, la marihuana, lamo y el esprrago.
Figura 32. Dioecia

Fuente: http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/tema23-6dioecia.htm Dibujos: Flora de Entre Ros

La determinacin del sexo en este tipo de plantas crea serios problemas, especialmente en especies donde el dioecismo y monoecismo estn juntos; la condicin de poligamia ocurre cuando los dos sexos pueden estar en diferentes plantas, en la misma planta o puede estar representado por flores hermafroditas (Chattopadhyay & Sharma, 1991),(Madriz R. et al). 100

Tabla 9. Clasificacin de algunas plantas segn el tipo de fecundacin.

Tipo de Fecundacin
Autofecundacin Normalmente autogmas

Especies

Tomate, Lechuga, Arroz, Soya, Caf, Trigo, Cebada, Frjol, Arveja Alfalfa, A. Autofecundacin Prevalentemente Algodn, Aj, Pimentn, autgamas (5- 20% de cruzamiento natural) Berenjena. Fecundacin Cruzada Prevalentemente Sorgo algamas (20 70% de cruzamiento natural) Fecundacin Cruzada Normalmente Cebolla, Zapallo, Melon, Maz, Algamas (> 70% de cruzamiento natural) Yuca, Girasol, Cacao, Zanahoria, Repollo, Coliflor, Esparrago, Centeno, Papa, Uva, Ajo, Ray grass .

19.1 Presentacin secundaria de polen.

Es la transferencia del polen de las anteras a otra estructura de donde es recogida por los polinizadores. Es virtualmente universal en las Compositae y es comn en las Leguminosae y Papilionoideae. Por ejemplo en Pisum sativum (arveja) el estilo lleva sobre la cara adaxial un conjunto de pelos que semejan un cepillo. La quilla y el estilo son reflejos. Con la visita de un polinizador el estilo baja, y al retomar su posicin recoge polen sobre el cepillo desde el cual lo recoge el polinizador.(Gonzlez Ana et al).
Figura 33. Pisum sativum, arveja, flor con presentacin secundaria del polen

Los sistemas reproductivos como la dioecia y la monoecia han sido considerados de origen secundario. 101

Vestigios de rganos sexuales en individuos unisexuales, indican su origen va hermafroditismo (Richards, 1986). La unisexualidad es as causada por la supresin de un sexo en una flor. Las bases genticas de la determinacin del sexo as como su expresin pueden ser controladas por cromosomas sexuales (Lloyd, 1975; Chattopadhyay y Sharma, 1991). Sin embargo, el control gentico de la expresin sexual no parece ser suficientemente fuerte para vencer totalmente los efectos y modificaciones de la expresin sexual por el ambiente (Lloyd, 1975). Recientemente, muchas hiptesis sobre la evolucin de la dioecia en relacin a la ecologa de la polinizacin o dispersin han sido planteadas, presentando usualmente dos partes: una correlacin y un mecanismo (Thomson y Brunet, 1990). Las correlaciones son filogenticas: la dioecia es ms frecuente en plantas leosas, con frutos carnosos dispersados por vertebrados frugvoros y poseen flores pequeas e incospicuas, polinizadas por insectos no especializados o por viento. Los mecanismos involucran circunstancias ecolgicas que favorecen a la dioecia a travs de vas especficas como los modelos de seleccin sexual y la teora de asignacin de recursos. Bawa (1980) comparte esta idea y establece que la evolucin de la dioecia no solo se debe a la presin selectiva que favorece la fertilizacin cruzada, sino que factores ecolgicos como la asignacin de recursos para las funciones masculinas y femeninas, seleccin sexual, dispersin de semillas, polinizacin y depredacin pueden influir en la evolucin de la dioecia.(Madriz R. et al).

19.2 Evolucin de la dioecia

La mayora de las angiospermas son hermafroditas. Sin embargo en numerosos linajes han evolucionado otros sistemas sexuales (andromonoecia, ginomonoecia, monoecia, androdioecia, ginodioecia, subdioecia y dioecia. (Richards, 1997). La presencia de dioecia y monoecia, en trminos generales, tiene un fuerte componente filogentico y est asociada a determinados grupos taxonmicos ms que a factores selectivos locales de floras especficas, que desde luego, tambin actan de forma importante, pero en segundo lugar (Renner & Ricklefs, 1995; Richards, 1997; Freeman et al., 1997). La ginodioecia se define como un a modalidad de poligamia en que unos individuos presentan flores hermafroditas, mientras que otros de la misma especie y poblacin las tienen femeninas. Es frecuente en las labiadas. 102

La subdioecia se presenta en poblaciones de individuos en donde prima la monoecia pero puede haber una ocurrencia alta de individuos que se comporten como exclusivamente femeninos. En la polgamo dioecia las hermafroditas. plantas dioicas presentan algunas flores

En la dioecia crptica las plantas presentan flores hermafroditas en donde una de las funciones est suprimida, actuando como flores unisexuales. Para evaluar los sistemas de reproduccin, cruzamiento o de polinizacin de una determinada especie se considera fundamental conocer la historia y peculiaridades evolutivas de los caracteres reproductivos del gnero y/o familia en cuestin. Principio universalmente conocido como determinismo filogentico que se refiere a que la historia evolutiva de un taxon, est condicionando la respuesta a la seleccin (Webb, 1984; Hamrick & Godt, 1996; Gitzendanner & Soltis, 2000). Segn esto, se debe reconocer el verdadero significado biolgico de las diferencias estructurales reproductivas considerando al mismo tiempo: a) la aparicin en otros taxones geogrficamente lejanos, b) las posibles adaptaciones especficas a fuerzas selectivas ambientales y c) las consecuencias genticas a niveles de poblacin natural (Webb, 1984; Karron et al.,1988; Hamrick & Godt, 1996; Gitzendanner & Soltis, 2000). El origen de la dioecia en las Angiospermas es diverso, se manifiesta en taxones no relacionados y como consecuencia de presiones selectivas diferentes, incluso con situaciones donde las expresiones sexuales varan constantemente en el tiempo. La hiptesis generalizada de que la causa principal que provoca la manifestacin de dioecia es la de evitar la auto-fecundacin para favorecer la fecundacin cruzada o xenogamia, no es la nica, hay autores que no slo son partidarios de esta idea, sino que tambin consideran que hay fuerzas selectivas que favorecen especialmente la especializacin sexual para promocionar y favorecer las ventajas inherentes a cada uno de los morfos masculino y femenino (Webb, 1979; Bawa, 1980; Renner & Ricklefs, 1995; Freeman et al., 1997; Richards, 1997). Segn esto, el acceso a la dioecia desde el hermafroditismo se puede producir segn tres vas evolutivas diferentes : 1) va monoecia 2) va ginodioecia inestable 3) Desde el heteromorfismo asociado a sistemas de auto-incompatibilidad heteromrficos (Ganders, 1979; Renner & Ricklefs, 1995; Freeman et al., 1997; Sakai et al., 1997). 103

El acceso va monoecia, se caracteriza por la presencia generalizada de flores unisexuales frecuentemente con sndromes de anemofilia, donde la presencia de las flores hermafroditas es ya escasa u ocasional. Presenta una gran labilidad sexual pudiendo coexistir formas exclusivamente masculinas, exclusivamente femeninas e intermedias. El acceso va ginodioecia inestable suele estar fijado genticamente (McCauley & Brock, 1980; McCauley, 1998; Maurice et al.,1994; Haan et al., 1997), aunque presenta formas intermedias de gran labilidad con manifestaciones incluso de androdioecia que suelen estar correlacionadas a factores ecolgicos diferentes con incluso tipos distintos de polinizacin.(Prez de P. Julia. 2004.). La va de acceso desde el heteromorfismo es la ms rara y pueden haber asociaciones de heterostilia y ginodioecia. Los mecanismos reproductivos que favorecen la dioecia o diferenciacin sexual en individuos diferentes para favorecer la xenogamia y con ello aumentar la diversidad gentica, siguen constituyendo una de las principales estrategias para incrementar la biodiversidad en las poblaciones naturales de algunas especies, sobre todo, despus de un evento colonizador en ecosistemas aislados. Se puede decir tambin que esta estrategia reproductiva es frecuente en hbitats tropicales y de islas ocenicas con altos porcentajes de dioecia y por tanto especialmente comn en la floras endmicas.(Prez de P. Julia. 2004.). Dentro de una misma especie y a nivel de poblaciones naturales, la ratio de sexos o nmero de individuos masculinos en relacin a los femeninos, puede variar en el tiempo y en el espacio, ya que los individuos masculinos por lo general suelen ser ms tolerantes a los hbitats inestables que los femeninos, que tienen que asegurar la progenie. Hay incluso especies que dentro de una misma poblacin con manifestaciones de dioecia e individuos unisexuales, pueden albergar tambin individuos monoicos de inflorescencias uni o bisexuales.(Prez de P. Julia. 2004.).

La andromonoecia, presencia de flores masculinas (estaminadas) y bisexuales (hermafroditas) en un mismo individuo, es un sistema sexual poco comn, presente en aproximadamente 2% de las angiospermas (Yamplosky & Yamplosky 1922) y comn en especies polinizadas por animales y por el viento (Bawa & Beach 1981; Bertin 1982; Primack & Lloyd 1980). Una de las hiptesis ms aceptadas para explicar la evolucin de la andromonoecia es aquella que seala que se trata de un mecanismo para maximizar los recursos asignados a las funciones reproductivas (Diggle 1993). De aqu, se ha reportado que las flores estaminadas requieren menor 104

asignacin de recursos que las flores perfectas (Schlessman et al. 2004) y se ha postulado que las plantas hermafroditas, que frecuentemente se autofertilizan, invierten menos en estructuras florales para atraer polinizadores que las especies que regularmente se entrecruzan (Charlesworth & Charlesworth 1987; Lloyd 1987). De acuerdo a los modelos de asignacin de recursos, la andromonoecia se presenta en plantas donde el nmero ptimo de flores funcionalmente estaminadas es mayor que el nmero de flores que puede producir frutos y el costo de madurar un fruto es alto.( Hokche D. Omaira et al.2004). As, la evolucin hacia uno u otro tipo sexual dependern en gran parte de las condiciones ambientales en que se haya desarrollado una determinada especie y de los mecanismos que haya tenido que adaptar para asegurar su supervivencia y perpetuacin de su descendencia. (Traveset Anna.2004).

19.3 Dioecia y polinizacin

Muchos investigadores han formulado teoras evolutivas que sugieren que plantas que han evolucionado en hbitats aislados con pocos polinizadores han podido desde el hermafroditismo desarrollar tipos dioicos capaces de perpetuarse por fecundacin mediante polinizacin anemfila. Estas hiptesis estn basadas en la idea de que la anemofilia implica: a) independencia de los polinizadores, b) en algunas islas, los fuertes vientos hacen desfavorable la polinizacin por animales, y c) una mayor dispersin del polen y beneficios de la xenogamia. Lo que parece evidente, por el nmero creciente de estudios que lo demuestran, es que las plantas, an con sndrome de polinizacin entomfila, pueden adoptar una combinacin de polinizacin por viento y por insectos, especialmente en condiciones de limitacin de polinizadores.8 La dioecia, en particular, raramente representa ms del 3% de la flora en reas continentales, mientras que a menudo sobrepasa el 10% de las floras insulares (Eliasson 1995). Los recientes estudios de Sakai et al.(1995a,b) en las islas Hawai muestran que de las 971 especies nativas existentes, un 14.7% son dioicas mientras que un 20.7% son sexualmente dimrficas (las ms altas proporciones de todas las floras estudiadas hasta la fecha). De las sexualmente dimrficas, ms de la mitad provienen de linajes colonizadores que ya eran dimrficos al llegar a las islas, y aproximadamente un tercio ha evolucionado de forma autctona en estas islas. Estos autores encuentran tambin que el dimorfismo sexual est asociado significativamente a la leosidad y a la produccin de flores verdes de pequeo tamao, que las especies anemfilas estn supra -representadas entre las especies leosas dioicas, y que entre las especies colonizadoras, a nivel genrico, el dimorfismo sexual est asociado a la produccin de frutos carnosos (Sakai et al. 1995a,b). (Traveset Anna. 2004). 105

20. Leccin 20. Incompatibilidad

20.1 Incompatibilidad bioqumica y gentica
La especiacin se define como el Origen de dos o ms especies a partir de un ancestro comn, mediante la evolucin de barreras biolgicas que restringen el flujo de genes entre las poblaciones ancestrales.3 El concepto ms adecuado para describir a una especie es el conocido como concepto biolgico de especie, que la define como una poblacin o serie de poblaciones de organismos entre los cuales ocurre un flujo gentico libre en condiciones naturales, es decir, que los individuos de esa (s) poblacin (es) pueden cruzarse libremente y tener progenie frtil en las condiciones del ambiente en el que viven. Por contraposicin, los individuos de una especie no pueden cruzarse libremente con los de otra.(El origen de las especies. http://omega.ilce.edu.mx).. Las especies estn subdivididas en la naturaleza en poblaciones ms o menos bien definidas en las que los individuos se cruzan. A medida que la distribucin de las especies es ms amplia, las poblaciones de una especie se encuentran con una mayor variedad de ambientes. Esta diversidad propicia que las mutaciones que se produzcan tengan mayor probabilidad de ser seleccionadas favorablemente y fijadas en cada condicin, de manera que la diversidad gentica de las poblaciones aumenta con su rea de distribucin. Si el flujo gentico entre las diferentes poblaciones es pobre, la divergencia entre los contingentes genticos de las poblaciones puede aumentar lo suficiente como para crear barreras al cruzamiento o a la fertilidad entre ellas, incluso si llegasen a ponerse en contacto nuevamente por algn cambio ambiental. La reduccin de la fertilidad se origina por varias causas, entre ellas la incompatibilidad gentica, las diferencias en comportamiento, el aislamiento temporal por diferencias en pocas reproductivas, etc. Las barreras al cruzamiento y el aislamiento reproductivo no ocurren sbitamente ni en un solo individuo; son el producto de cambios acumulativos que toman mucho tiempo y que ocurren en toda una poblacin. (El origen de las especies. http://omega.ilce.edu.mx).. Los mecanismos de aislamiento reproductivo corresponden a Barreras biolgicas que previenen el intercambio de genes entre dos o ms poblaciones y pueden ser de dos tipos: Precigticas (mecanismos de aislamiento precigtico o precpula): Previenen o reducen la probabilidad de formar cigotos hbridos y pueden darse varias situaciones a saber: 106

a) Las parejas potenciales (aunque en simpatra) no se encuentran en aislamiento temporal (por estaciones o perodo del da): Los miembros de una poblacin alcanzan la madurez sexual en momentos distintos (diferentes estaciones o diferentes horas del da)
Figura 34.Aislamiento temporal: Tiempos de floracin y fructificacin de especies simptricas de Miconia en Myconia spp

Fuente:http://docencia.udea.edu.co/cen/mecanismosevolucion/pdf_files/especiacion/2.barreras%20al%20flujo%20genico.pdf

b) Aislamiento del hbitat: Tiene lugar cuando en respuesta a cambios morfolgicos, fisiolgicos o de hbitos producidos como consecuencia de variaciones genticas, una parte de la poblacin puede diferenciarse del resto, pasando a ocupar distintos hbitats (biotopos) en el mismo territorio.(teoras evolutivas. http://three.fsphost.com). c) Tambin puede ser que en un momento determinado una poblacin sea dividida geogrficamente por un evento atpico, como la desviacin de un ro, una erupcin volcnica, etc. Despus de mucho tiempo de aislamiento geogrfico, puede surgir el aislamiento gentico, originando especies distintas. d) Las parejas potenciales se encuentran pero no se reproducen debido a diferentes dinmicas de seleccin sexual como la Autofertilizacion. e) Ocurre la polinizacin pero no hay transferencia de los gametos del macho (aislamiento mecnico). Por ejemplo, incompatibilidad en el acoplamiento entre la flor y su polinizador. 107

f) Hay transferencia de gametos, pero el huevo no es fertilizado (incompatibilidad gamtica), las gametas masculinas son inviables en los conductos sexuales femeninos. (Futuyma,1998).3 Postcigticas: Reducen la supervivencia o la reproduccin de organismos hbridos. a) El hbrido F1 tiene viabilidad reducida (inviabilidad del hbrido).Baja supervivencia en los estados embrionarios. Este mecanismo gentico est coordinado de tal manera que una clula o un sistema multicelular no puede funcionar normalmente si se introducen en los dos conjuntos de informaciones extraas. Cuanto ms cercanas sean las informaciones genticas , ms ser posible que se avance en las etapas de desarrollo embrionario. (Teoras evolutivas. http://three.fsphost.com ). b) El hbrido F1 es viable, pero tiene fertilidad reducida (esterilidad del hbrido). c) El huevo fecundado se desarrolla en un adulto sano, pero estril, hay segregacin de gametos aneuploides durante la meiosis. Es provocada por diferentes asociaciones de genes en los cromosomas de los progenitores. d) Viabilidad o fertilidad reducida en F2 (Futuyma,1998).( http://docencia.udea.edu.co). Ver: Barreras genticas y especiacin Los eventos de interaccin especficos se producen clula a clula cuando ocurre la polinizacin y fecundacin. El estigma es eficiente para discriminar polen de otras especies, evitando as la fecundacin interespecfica. Los mecanismos de que se valen las plantas para evitar la polinizacin interespecfica corresponden a reacciones de incompatibilidad entre el polen y el pistilo, de modo que muchas plantas logran discriminar entre el polen propio y el forneo o a barreras genticas para la autofertilizacin denominadas como autoincompatibilidad, la cual especficamente, interrumpe la va del desarrollo del polen propio en el pistilo. La importancia de la incompatibilidad es que hace que las plantas tengan una polinizacin cruzada forzada, lo cual evita la consanguinidad de las especies. Se distinguen dos tipos de incompatibilidad: el heteromrfico y el homomrfico: 108 o de retrocruces.

La incompatibilidad en el sistema heteromrfico, se basa en diferencias morfolgicas de las flores; como ser longistilas o brevistilas, este carcter en el caso de la especie Primula vulgaris es controlado por un solo locus con dos alelos S y s, los cuales condicionan dos genotipos Ss (brevistilas) y ss (longistilas), el genotipo SS es deletreo. Los nicos cruzamientos totalmente compatibles son brevistilas x longistilas (Ss x ss) o Longistilas x brevistilas (ss x Ss). Ambos cruzamientos segregan para dar una descendencia con igual nmero de plantas longistilas y brevistilas. Ss x ss Ss + ss ss x Ss Ss + ss

Los granos de polen que contienen los alelos S o s, procedentes de una planta brevistila (Ss) son compatibles sobre estigmas de una planta longistila (ss) e igualmente, el polen suministrado por una planta longistila es compatible sobre una planta brevistilas (Ss). En la mayora de las especies estudiadas se ha encontrado que un solo locus (S) multiallico controla genticamente la autopolinizacin. La respuesta de autoincompatibilidad es regulada durante el desarrollo de la flor y es funcional frecuentemente 1 a 2 das antes de la antesis. El rechazo del gameto masculino, por mecanismos de incompatibilidad ocurre tanto en el estigma como en las paredes del estilo. En especies que presentan mecanismos que reducen la autopolinizacin se ha determinado una baja retencin de granos en el estigma, una reduccin en la germinacin del polen y en algunos casos tambin la muerte. La autoincompatibilidad puede actuar en el estigma, estilo u ovario. As, por ejemplo en Tectona grandis, la autoincompatibilidad gametoftica puede ocurrir con algunos tubos polnicos en el estilo, pero, la mayor parte es inhibida en el ovario. El cruzamiento interespecfico de diferentes Caspicum logr como resultado diversas manifestaciones de incompatibilidad entre especies de flor blanca y flor prpura, con obstculos tan variables como barreras en el ovario, estilo o estigma u otras restricciones.( http://www.lasemilla.ucv.cl).
Figura 35.Mecanismos de incompatibilidad en Caspicum spp

109

Las flechas indican la direccin de la polinizacin hacia el parental femenino. (__) Lnea completa indica penetracin del tubo polnico en la clula huevo (_.._) Lnea segmentada indica barreras en el ovario. () Lnea separada indica barreras en el estilo. (...) Lnea punteada indica barreras en el estigma.

Fuente: http://www.lasemilla.ucv.cl/htm/gen09.html

La incompatibilidad en el sistema homomrfico, no se basa en las diferencias morfolgicas, sino en la constitucin genotpica de la planta, especialmente en el genotipo del gametofito o esporofito. En el sistema homomrfico se distinguen dos tipos de incompatibilidad: el gametoftico y el esporoftico.

20.2 Incompatibilidad gametoftica

La incompatibilidad de las especies se puede clasificar de acuerdo al fenotipo al cual sea incompatible el polen, pudiendo ser gametoftica o esporoftica. Adems, se presentan diferencias en el tiempo, que media en la seal que induce a la reaccin.( http://www.lasemilla.ucv.cl). En la incompatibilidad gentica la autofecundacin y la fecundacin entre parientes se encuentra impedida por la presencia de genes de incompatibilidad gentica., de manera que ocurre incompatibilidad entre el polen y el pistilo cuando se comparten los mismos alelos de incompatibilidad. Es denominada tambin como incompatibilidad gametoftica, puesto que depende de la constitucin gentica del gametofito masculino. El polen puede germinar, pero el crecimiento del tubo polnico es detenido despus de su penetracin en el estilo. Es comn en leguminosas, gramneas, crucferas y solanceas.(Gonzlez Ana et al.). 110

La incompatibilidad del grano de polen es determinada por un gen haploide complementario que es transmitido a cada microspora despus de la meiosis, en general la germinacin y el crecimiento del tubo polnico son normales, pero a cierta distancia del estilo es inhibido el crecimiento.( http://www.la semilla.ucv.cl). Segn la definicin de Lundquist (1964), la autoincompatibilidad es "la inhabilidad de una planta hermafrodita para producir zigotos despus de la Autopolinizacin. Los sistemas de autoincompatibilidad se pueden clasificar segn el tiempo de accin gnica, la asociacin con polimorfismo sexual, el sitio de expresin gnica y la influencia de series poliallicas.( Saboro M,Ca Costa P.1992). El tipo ms comn de control gentico de la autoincompatibilidad incluye el locus S con alelos mltiples. (S1, S2, S3...Sn). El rechazo del polen en el pistilo ocurre cuando los productos de los alelos S en el estigma, estilo u ovario son tambin expresados por el grano de polen o por el tubo polnico. El locus S contiene un gen que codifica glicoprotenas con actividad ribonucleasa en los pistilos y un gen desconocido que controla la funcin del polen. En el sistema gametoftico no existe dominancia de los alelos S, o sea, las progenies son heterocigotos para ese locus (Gaude y Dumas ,1987. Citado por Saboro M.et al.1992.). Si un grano de polen contiene por ejemplo, el alelo S1, este no crecer normalmente en el estilo diploide de una planta portadora del mismo alelo. As, si una planta S1 S2 es polinizada por su propio polen o por el de otra planta S1 S2, ningn grano de polen alcanzar a los vulos a tiempo para fecundar. El sistema gametoftico presenta tres tipos incompatibilidad: Incompatibilidad completa; la cual ocurre entre las plantas con igual genotipo de incompatibilidad, incluyendo la autopolinizacin. Ejemplo: S1 S2 x S1 S2 100% incompatible S1 S1 x S1 S1 100% Incompatible

O la polinizacin de un homocigoto cualquiera como padre con un heterocigoto como madre que tenga un alelo en comn con el homocigoto S1 S2 x S1 S1 111

100% incompatible Incompatibilidad incompleta: la mitad del polen es compatible, es decir que las plantas tienen un alelo de incompatibilidad en comn S1 S2 x S1 S3 S1 S3 + S2 S3 Incompatibilidad completa; cuando las plantas tienen alelos diferentes; ejemplo S1 S2 x S3 S4 S1 S3 + S2 S3 + S1 S4 + S2 S4

Segn Yaquab (1967), el sistema de alelos mltiples controlado gametofticamente es el ms comn en trminos de nmero de familias y especies en que est presente y ha sido determinado en especies de importancia econmica como Nicotiana, Solanum, Caspicum y 6 Lycopersicon. En estas especies se da la inhibicin de la germinacin del tubo polnico.

20.3 Incompatibilidad esporoftica

La autoincompatibilidad esporoftica es de tipo bioqumico, ya que depende de la pared del grano de polen, que es de origen esporoftico. Para que el grano de polen pueda germinar, debe adherirse al estigma, lo que ocurre solamente cuando hay compatibilidad entre las protenas de reconocimiento que se encuentran en la esporodermis, y los receptores que existen en el estigma. De este modo, el fenotipo del polen es determinado por la constitucin gentica del esporfito o de la planta diploide sobre la cual el polen nace. La autoincompatibilidad esporoftica est presente en Crucferas, y su estado crtico se produce durante las primeras horas tras la polinizacin. En este caso la superficie estigmtica consiste en clulas papiladas, cubiertas con una cutcula que actuara como barrera para prevenir la penetracin del tubo polnico. La principal barrera de autoincompatibilidad es que el esporfito no se reconoce a s mismo.( http://www.lasemilla.ucv.cl). El anlisis molecular de la interaccin polen pistilo se ha focalizado en genes que codifican glicoprotenas y que adems, participaran en el 112

reconocimiento de la autopolinizacin en al menos dos familias de plantas (Solanceas y Brassicas). Se han determinado diferencias en los sitios de accin o sntesis de las glicoprotenas.( http://www.lasemilla.ucv.cl). El estigma de las flores secreta diversas sustancias que cumplen funciones especficas, como son la atraccin de polinizadores, adhesin y reconocimiento del polen crecimiento del tubo polnico y penetracin del tubo polnico dentro de los vulos. En las flores que presentan nectarios, el nctar est constituido por azcares, protenas, aminocidos, lpidos, cidos orgnicos, antioxidantes, y una variedad de otras sustancias que incluyen fenoles y alcaloides. Las sustancias mas fcilmente removidas de la superficie estigmtica corresponden a compuestos lipdicos y fenlicos (antocianinas, flavonoides, cido cinmico) y los carbohidratos presentes pueden estar unidos a compuestos fenlicos o estar ausentes. Los lpidos del fluido estigmtico posiblemente corresponden a compuestos cerosos de la epidermis, cuya funcin puede ser reducir la prdida de agua, de manera que se evite la deshidratacin del polen y se provea un medio adecuado para la germinacin del polen. Los fenoles tienen una importancia significativa ya que protegen el estigma de los insectos y enfermedades, permiten la interaccin con sustancias de crecimiento que regulan la germinacin del polen y juegan un rol definitivo en la especificidad para reconocerlo. Todas las sustancias se producen de acuerdo a la codificacin gentica de las plantas, en donde sta, determina el proceso de trascripcin de protenas. De manera que el tipo de sustancias que se produzcan correspondern a la informacin gentica especfica de cada especie. Los fenoles y flavonoides funcionan como seales de reconocimiento, importantes en el reconocimiento no solo del polen por el estigma sino tambin el que ocurre entre la flor y sus polinizadores naturales y sern especficos para cada especie, tanto ms dependiendo de si la planta admite solo a determinada especie como polinizador. Por otra parte, el polen tambin presenta sustancias especficas y su metabolismo est genticamente gobernado. La cubierta del polen es la base para el contacto y el inicio de las seales de reconocimiento para la adhesin y posterior germinacin al entrar en contacto con el estigma. Esta cubierta est formada por dos capas, una interior de celulosa y pectina y una exterior de exina altamente tallada.(Pealoza P.2001.). En el ultimo estado de de desarrollo del polen, la capa tapetal (capa parietal mas interna de la antera) se desintegra y el contenido celular es depositado sobre la superficie del grano de polen formando una capa de composicin 113

muy heterognea que incluye ceras, lpidos, molculas aromticas pequeas y protenas. Los lpidos de la cubierta del polen participan en el reconocimiento clula a clula, necesario para la hidratacin del polen en le estigma. Dentro de las molculas aromticas se encuentran fitohormonas, carotenoides, cidos fenlicos y flavonoides. Estos ltimos son de origen esporoftico, sintetizados en el tapete, liberados en el lculo y modificados por el desarrollo del gametofito.(Pealoza P.2001.). Muchos de los atributos citolgicos del polen se basan en las diferencias de los dos grupos presentes en las angiospermas. Los plenes binucleados se asocian con los mecanismos de incompatibilidad que guan la inhibicin del tubo polnico en el estilo. Los trinucleados no logran enlongar el tubo polnico y generalmente inhiben su propia germinacin.(Pealoza P. 2001.).
Figura 36. Autoincompatibilidad esporoftica y gametoftica

Un ejemplo de incompatibilidad esporoftica se presenta en el Cacao (Teobroma Cacao), la cual esta gobernada por un locus simple S con alelos mltiples con el siguiente orden de dominancia: S1 > S2 = S3 > S4 > S5. Adems se ha comprobado que la reaccin de incompatibilidad no se produce en el estilo, como sucede en la mayora de las otras especies, sino dentro del saco embrionario. Es esta especie tambin se presenta dos locis simples (A y B) con dominancia completa que actan como precursores necesarios para que se presente la incompatibilidad. Algunas reaciones de incompatibilidad en cruzamientos entre varios genotipos de cacao son los siguientes: S1 S2 x S1 S2
S1S1+S2S2+S1S2+S2S2

S1 S2 x S1 S3
S1S1+S2S1+S1S3+S2 S3

S1 S2 x S3 S4
S1S3+S2S3+S1S4+S2S4

25% incompatible

25% incompatible

100% compatible 114

21. Leccin 21. Polinizacin Cruzada

Se denomina Polinizacin cruzada a la transferencia de polen entre plantas de diferente constitucin gentica, donde los gametos no son genticamente idnticos a los gametos de los vulos. Este proceso es muy ventajoso, por que aumenta el grado de variabilidad y vigor de las especies, posibilita la formacin de nuevas combinaciones de factores hereditarios y favorece la produccin de semillas capaces de germinar. A travs de la seleccin natural, las plantas realizan adaptaciones estructurales complejas a fin de facilitar la polinizacin cruzada por medio de diferentes agentes polinizadores. As, las flores pueden ser de colores vistosos que atraen determinado tipo de insectos o segregar mieles azucaradas. Algunas han desarrollado formas especiales de las estructuras florales que facilitan el ingreso del insecto que portar el polen a otra flor. Los agentes polinizadores son muy variados, destacando en orden de importancia: viento, insectos, aves, agua y murcilagos. Sin embargo, desde el punto de vista agrcola, los insectos sociales tienen gran importancia en la polinizacin. Dentro de la polinizacin entomfila, la abeja es el insecto ms eficiente y manejable, debido a que es el principal transportador de polen. Las abejas contribuyen con ms del 90% de la polinizacin cruzada. Por otra parte, la polinizacin hidrfila (por el agua) ocurre en pequea escala y la anemfila (por el viento) ocurre cuando el polen deja libre sustancias adherentes que le permiten cruzarse con otras flores. Debido a que hay granos de polen pesados y unidos a secreciones viscosas que impiden que el viento los arrastre, son requeridos medios de transporte ms eficientes como son los insectos.

21.1 Coevolucin
Segn Darwin, las flores coevolucionaron junto con sus polinizadores. A travs de sus experimentaciones con plantas de arveja, observ que haba flores de color llamativo que atraan a las abejas, mientras que otras plantas posean flores desprovistas de colores vistosos, que no atraan insectos y que en consecuencia deban ser polinizadas por otros agentes como el viento y el agua. En su obra El Origen, puede leerse textualmente: Diversas plantas producen habitualmente dos clases de flores: Unas abiertas y coloreadas de tal modo que atraigan a los insectos, y otras cerradas, no coloreadas, desprovistas de nctar y que nunca son visitadas por los insectos. Por consiguiente podemos llegar a la conclusin de que, si los insectos no se hubiesen desarrollado sobre la faz de la Tierra, nuestras plantas no se hubieran cubierto de bellas flores y hubieran producido solamente flores tan pobres como las que vemos en el abeto, el roble, el nogal y el fresno, y en las 115

gramneas, espinacas, acederas, y ortigas, que se fecundan por la accin del viento." (El Origen de las Especies. Captulo VI. Pg. 213). Sus numerosas observaciones lo llevaron a formular la teora de que por seleccin natural las flores fueron evolucionando en su morfologa a fin de facilitar el acceso a los insectos polinizadores. Al ocurrir polinizacin cruzada se originaran individuos ms vigorosos que tendran mayor probabilidad de florecer y sobrevivir, de manera que las plantas que fuesen capaces de producir flores y nectarios ms grandes, seran visitadas con una mayor frecuencia por los polinizadores y se cruzaran ms frecuentemente, adquiriendo una ventaja sobre los dems individuos de la poblacin y formaran por tanto una comunidad local. En el caso de flores que no producen nctar, aquellas que contengan los pistilos y estambres colocados en relacin al tamao y costumbres del insecto polinizador tendrn una mayor probabilidad de dejar su polen impregnado en el insecto visitante, de manera que se asegura que por lo menos una dcima parte del polen producido pueda llegar a fertilizar la flor de otra planta y as, los individuos que produjeran cada vez mas polen y anteras mas grandes se iran seleccionando de forma natural. De igual manera habra seleccin natural entre insectos y los que llevaran la ventaja seran aquellos con estructuras y aparatos bucales capaces de llegar con mayor facilidad hasta los nectarios florales de determinadas especies vegetales, formando comunidades que heredaran las mismas caractersticas y prevaleceran por encima de los individuos de otras especies de insectos menos adaptados a la morfologa de la estructura floral de una planta especfica. Es importante sealar que la mayora de las especies de plantas no son polinizadas por un tipo determinado de polinizador. Sin embargo, hay casos en los cuales una especie particular poliniza una planta (en algunas orqudeas), pero estos casos son la excepcin. Los tubos de la corola del trbol rojo comn y del encarnado (*Trifolium platense y T. incarnatum) no parecen diferir a simple vista, en longitud; sin embargo, la abeja comn puede chupar fcilmente el nctar del trbol encarnado, pero no el del trbol rojo, que es visitado por los abejorros; de modo que campos enteros de trbol rojo ofrecen en vano una abundante provisin de precioso nctar a la abeja comn Por otra parte, como la fecundidad de ste trbol depende por completo de las abejas que visitan las flores, si los abejorros llegasen a ser raros en algn pas, podra ser una gran ventaja para la planta tener una corola ms corta o ms profundamente separada, de suerte que otro insecto pudiese succionar sus flores. As puedo comprender como una flor y una abeja pudieron lentamente, y de una manera simultnea o una 116

despus de otra, modificarse y adaptarse entre si del modo ms perfecto, mediante la conservacin continuada de todos los individuos que presentasen ligeras desviaciones de estructura mutuamente favorables. (El Origen de las Especies. Captulo IV. Pg. 126-128. nfasis aadido). Para que haya coevolucin es necesario que las adaptaciones que desarrolla la especie 1 sean resultado de las adaptaciones de la especie 2 y de esta manera la especie 1 pueda incrementar su xito reproductivo (o "fitness"), luego la especie 2 desarrollar por seleccin natural otra adaptacin (o una mejora de las ya presentes) que le permitirn utilizar las caractersticas de la especie 1 para dejar ms descendencia. Esta influencia evolutiva mutua llevar a establecer una relacin de mutualismo entre las especies 1 y 2. Las aves son otro grupo de animales que han evolucionado de forma paralela con las plantas con flores y han influido en el desarrollo de sndromes particulares de polinizacin. Las flores que son visitadas por aves no tienen olores ya que sus polinizadores no tienen muy desarrollado el sentido del olfato, en cambio tienen colores vivos como rojos, naranjas o a amarillos. Muchas flores tienen corolas (el conjunto de ptalos) largas, fuertes y pendulares, las cuales son accesibles a los colibres que pueden mantener el vuelo suspendido. Las paredes de la corola de estas flores son ms duras que las de otras plantas para evitar daos por el pico del ave a otros rganos. Adems de lo anterior, estas flores se caracterizan por tener grandes volmenes de nctar por flor. La presencia de estas caractersticas en las plantas recibe el nombre de "sndrome de ornitofilia". En Amrica los colibres (familia Trochilidae) son el grupo que ha coevolucionado con muchas familias de plantas, entre ellas la familia de las orqudeas (Orchidaceae) y la familia de las bromelias (Bromeliaceae). Los murcilagos son tambin polinizadores de algunas especies. Al ser estos ms grandes que las aves, requieren flores ms grandes y con ms nctar. Adems, como los murcilagos visitan las flores de noche, estas poseen aromas intensos en lugar de colores vivos. La presencia de estas caractersticas en las plantas recibe el nombre de "sndrome de quiropterofilia". (Rodriguez F).

21.2 Incompatibilidad morfolgica

Las plantas adems de haber coevolucionado con sus polinizadores desarrollando estructuras que aseguren que el polen ser arrastrado por el agente polinizador hasta otra planta, tambin han creado mecanismos para impedir la autopolinizacin a fin de asegurar a travs de la alogamia, el mantenimiento e incremento del vigor hbrido, el cual solo es posible si se producen individuos heterocigticos. 117

En muchas especies la polinizacin cruzada es obligada por ser autoincompatibles, es decir que poseen barreras genticas y fisiolgicas que impiden la germinacin del propio polen o del tubo polnico (como es el caso del Manzano). Los fenmenos que favorecen la incompatibilidad morfolgica y por tanto la polinizacin cruzada natural son los siguientes:

Dioecia

La dioecia es el mecanismo mas importante de alogamia ya que las gametas masculinas y femeninas se originan separadamente en individuos diferentes (el esprrago es un ejemplo de planta dioica). El aguacate es un ejemplo de Dioecia, en donde se combinan diferentes mecanismos que hacen que la fertilizacin sea complicada. Los problemas de polinizacin estn referidos al particular comportamiento de floracin que posee el aguacate, el cual a pesar de poseer flores completas, presenta el fenmeno de dicogamia del tipo protognea, madurando a destiempo los verticilios sexuales, lo que se traduce en una menor posibilidad de autopolinizacin de las flores. Adems, se suma a esto el hecho de poseer dos patrones de floracin, A y B, los cuales se diferencian en los tiempos de apertura floral, siendo complementarios para una adecuada polinizacin. La dioecia est asociada comnmente a plantas de gran tamao y polinizacin abitica, siendo rara en plantas con flores grandes de morfologa completa.

Monoecia

Las plantas monoicas presentan flores unisexuales femeninas y masculinas. Muchas plantas productoras de esporas (Briofitas, Talofitas, helechos) son monoicas, es decir que los gametos masculinos y femeninos se desarrollan en lugares diferentes de una misma planta (por ejemplo, en maz) o bien se desarrollan asincrnicamente, esto es madura antes el gineceo o el androceo de la misma flor (Ejemplo: algunos helechos y algunas rboles con polinizacin anemfila)(www.lasemilla.com). Puede o no estar asociada con autoincompatibilidad. Las plantas monoicas autocompatibles presentan geitonogamia obligada. Se ha comprobado que las especies monoicas pueden alterar la proporcin de flores masculinas y femeninas en respuesta a estmulos ambientales. Esta plasticidad reproductiva es la principal virtud del sistema.(http://docencia.udea.edu.co).
Figura 37. Monoecia en Sagitaria

118

http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

Protandria

La mayora de las plantas dioicas son protndricas El mecanismo de protandria consiste en la maduracin del androceo mucho antes que la maduracin del gineceo, de manera que cuando el polen de la flor est activo, el aparato femenino aun no se ha desarrollado y el estigma no estar receptivo, evitndose la autopolinizacin. As, la misma flor, acta primero como flor masculina y luego como flor femenina. En las plantas que son autocompatibles, la protandria evita que se autopolinicen, favoreciendo la diversidad gentica a travs de la alogamia. Los ejemplos ms comunes de plantas protndricas son las Campanulceas y la mayora de las Umbelferas.3 Ejemplo cebolla, girasol, maz.
Figura 38 . Protandria en Agave (Bromeliaceae)

Inflorescencia Inflorescencia parcial

Flores protndricas Flores en Estado femenino

Fuente: www.infojardin.com/

En la achicoria, Cichorium intybus, las flores son protndricas. El estilo al crecer, se carga de polen en su cara externa. Si no ocurre polinizacin cruzada por medio de insectos, las ramas estigmticas se alargan y se 119

curvan sobre s mismas, poniendo en contacto su superficie receptiva interna con el propio polen.
Figura 39. Autopolinizacin en Cichorium intybus, achicoria.

Fuente: Esquemas modificados de Valla 1979. http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

Protognia

Cuando el gineceo madura antes que el androceo, las flores son protginas. En ste caso, la flor funciona primero como flor femenina y luego como flor masculina. Es el caso de la magnolia y algunas especies leguminosas, el aguacate y el nogal. Frecuentemente, la protognia intrafloral est asociada a autocompatibilidad. Este parece ser un mecanismo evolutivo para asegurar la produccin de frutos y semillas. (Bertin & Newman 1993). 3
Figura 40.Protognia en Magnolia

Autor: K.R.Robertson, http://www.life.uiuc.edu

120

Hercogamia ( Separacin espacial)

Se presenta en flores en las cuales las anteras y estigmas estn muy separados unos de otros. Es muy comn y es un mecanismo para reducir la autofecundacin al igual que la dioecia. El estigma por lo general sobresale mucho ms alto en la flor quedando los estambres por debajo de ste, lo cual impide la autopolinizacin.
Figura 41.Heterostilia en Ayenia mansfeldiana.

A.Flor de Ayenia entera en vista spero-lateral. B. vista lateral del androginforo, tubo estaminal y un ptalo. C.flor en vista lateral.

Dibujos de Cristbal,1960. Foto de M.Bonifacino, http://www.Plantsystematics.org

La Hercogamia puede ser de tres tipos: a) Hercogamia de aproximacin: En donde los estigmas estn por encima de las anteras y son los primeros en entrar en contacto con los polinizadores que ingresan a la flor. b) Hercogamia revertida: Las anteras estn por encima del estigma
Figura 42. Hercogamia de aproximacin en Turnera. Hercogamia revertida

Fuente: http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

c) Heterostilia: Las poblaciones estn compuestas por individuos hermafroditas, pero hay 2 (dstila) o 3 (tristilia) tipos de individuos con formas florales caracterizadas por la disposicin y longitud recproca de anteras y estigmas. 121

En las especies dstilas hay flores longistilas (estilos largos y estambres cortos) y brevistilas (las anteras estn por encima de los estigmas). Los granos de polen de las flores brevistilas son mayores, y a veces presentan escultura diferente. En las flores con estigmas papilosos hay correspondencia entre el tamao de los granos de polen y la longitud de las papilas del estigma. En las especies tristilas hay una tercer forma floral, las flores mediostilas. El estigma y el estilo actan como filtros impidiendo la germinacin o llegada del polen propio y la fructificacin resulta ptima slo cuando la polinizacin es cruzada. Se presenta con frecuencia en flores tubulosas, actinomorfas, nectarferas, polinizadas por diferentes insectos. La distilia es frecuente en Sterculiaceae, Plumbaginaceae, Turneraceae, Rubiaceae y Borraginaceae. La tristilia se presenta en los gneros Lythrum, Pontederia, Eichhornia y Oxalis. (http://docencia.udea.edu.co).
Figura 43. Heterostilia

Fuente: http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm

21.3 La Esterilidad
Se caracteriza por que los gametos no son funcionales debido a ciertas aberraciones cromosomitas, acciones gnicas o influencias citoplasmticas que producen el aborto o la medicacin de flores enteras, estambres o 122

pistilos, lo que impide el desarrollo del polen, del saco embrionario o del endospermo. Existen varios tipos de esterilidad, pero la que ms interesa a los fitomejoradores es la androesterilidad, que puede darse por efectos de genes mutantes, por factores citoplasmticos o por efecto combinado de ambos.

123

22. Leccin 22. Androesterilidad

Darwin razona que las especies son simplemente variedades bien marcadas. Un bilogo moderno definira una especie como un grupo de organismos que pueden interfecundarse entre s. En otras palabras, se trata de un grupo en el que el material gentico puede fluir libremente, pero que se halla aislado genticamente de otros grupos. (http://www.terra.es). La especie puede reconocerse como una categora especialmente significativa en taxonoma porque su aislamiento gentico le permite evolucionar independientemente, produciendo as caractersticas distintivas. Sin embargo, el mundo natural no se halla enteramente dividido en especies, y la lnea entre esterilidad y fertilidad puede ser confusa, como cuando dos especies estn en proceso de separarse una de otra. En algunas especies de plantas existe esterilidad entre individuos determinados, aunque todos pertenezcan a la misma especie. Las diferencias que impiden la fecundacin interespecfica se denominan hoy mecanismos de aislamiento. Hoy da se sabe que puede haber seleccin natural para esto mecanismos. All donde, por ejemplo, dos especies ocupan hbitats diferentes pero todava pueden hibridarse, los hbridos de ambas pueden ser incapaces de sobrevivir en uno u otro hbitat. Cualquier mecanismo heredado que reduzca el cruzamiento entre los individuos de las dos especies se ver favorecido por la seleccin natural, puesto que ser ventajoso no malgastar esfuerzo reproductor en la produccin de hbridos inadaptados. En algunos casos los cromosomas de las especies diferentes no pueden emparejarse adecuadamente durante la meiosis debido a que desarrollan diferencias estructurales. El hbrido puede ser todava sano y vigoroso, pero ser estril o tendr la fertilidad reducida porque los gametos que produzca tendrn demasiados o demasiado pocos cromosomas debido a un defecto en la meiosis. La seleccin natural tender entonces a favorecer mecanismos de aislamiento que acten antes sobre el proceso reproductor para evitar que tales hbridos se produzcan. (http://www.terra.es). Al clasificar las plantas por su inhabilidad de producir semillas, es importante hacer distincin entre la esterilidad y la incompatibilidad. Cuando existe un fallo funcional de las anteras o el polen, se denomina esterilidad masculina o androesterilidad. En las plantas androestriles, las flores no producen anteras o polen viable, pero los estigmas funcionan normalmente. Aunque estas flores no pueden ser autopolinizadas, se pueden cruzar con otras 124

fuentes de polen. Esto hace que la androesterilidad sea de utilidad para el fitomejorador. La incompatibilidad es una forma de infertilidad causada por la inhabilidad de las plantas con gametos funcionales, ya sean masculinos o femeninos, de producir semilla cuando sean autopolinizadas o cruzadas. Es un proceso bioqumico bajo un control gentico simple. Se presenta en ambos gametos y puede ocurrir en cualquier momento entre la polinizacin y la fertilizacin. Es la esterilidad de los gametos masculinos, se vuelven no funcionales por el efecto de los genes mutantes de los mltiples loci que controlan las diferentes etapas vitales para la formacin del polen en el ncleo, por los factores citoplasmticos, o por el efecto combinado de ambos. La androesterilidad no es un mecanismo comn para controlar la hibridacin en poblaciones naturales; puesto que las plantas androestriles aparecen espordicamente en poblaciones tanto de especies autgamas como de algamas (Clar R. et al. 1980). El uso de la androesterilidad, permite a los fitomejoradores eliminar el proceso de la emasculacin en muchas especies autgamas, facilitando de esta manera la produccin de hbridos a nivel comercial, lo cual es difcil en las plantas autgamas. La androesterilidad, segn la forma como est controlada, puede ser Gentica, citoplasmtica y Gentica - citoplasmtica. Existe otra clase de androesterilidad causada por el medio ambiente, por temperaturas muy bajas, u otros factores abiticos, denominada androesterilidad ecolgica. (Clar R. et al. 1980).

22.1 Androesterilidad gentica

Se manifiesta mediante genes en el ncleo (genes nucleares) que inhiben el desarrollo normal de las anteras y el polen. Esta androesterilidad se ha encontrado en varias especies y est controlada por el gen recesivo ms, mientras que el gen dominante Ms, produce plantas con anteras y polen normales. La androesterilidad gentica, suele producirse por mutacin: MsMs Frtil ms ms Esteril

125

Las plantas con el genotipo ms ms, son androestriles, mientras que las Ms ms o Ms Ms son androfrtiles. Como las plantas androestriles no se pueden mantener por s mismas deben ser polinizadas por plantas frtiles que lleven, por lo menos, un gen dominante (Ms ms). Si la polinizacin se lleva a cabo utilizando un gene dominante, la descendencia de la poblacin ser la mitad frtil y la mitad estril (50% Ms ms:50% ms ms). (Clar R. et al. 1980). ms ms Estril x Ms ms Frtil Ms ms + ms ms Frtil Estril

En algunas especies se utiliza la androesterilidad gentica para la produccin comercial de hbridos, sembrando como progenitor femenino una lnea heterocigtica (Ms ms) segregando para androesterilidad o una homocigtica (ms ms) y como progenitor masculino una lnea homocigtica dominante (Ms Ms) o heterocigtica (Ms ms); al momento de inicio de la floracin y antes de iniciarse la antesis, se identifican y se eliminan las plantas frtiles en el progenitor femenino. Algunas especies poseen caractersticas fenotpicas asociadas con la androesterilidad gentica, las cuales sirven para identificar las plantas androestriles (Juda de Lima). El problema en la produccin de hbridos comerciales no es solamente el costo elevado de la semilla sino tambin la dificultad en identificar las plantas androfrtiles en los surcos del progenitor femenino. En los cultivos de tomate, judas y cebada la produccin de semilla en las plantas androestriles es escasa, debido a la falta de buenos polinizadores. (Clar R. et al. 1980). Ejemplo de Produccin de hbrido comercial:

ms ms Estril x

Ms Ms Frtil Ms ms Frtil

ms ms Estril x

Ms ms Frtil Ms ms + ms ms Frtil Esteril

La semilla heterocigota Ms ms constituye el material de reserva del gen ms , el cual queda guardado en los bancos de germoplasma. Este tipo de androesterilidad no es usado en la produccin comercial de semilla hibrida, debido a la dificultad de mantener el gen ms en forma homocigoto. El gen de androesterelididad en el arroz fue descubierto en 1981 por Singh e Ikehashi en un mutante de IR36. Se trata de un gen nuclear recesivo (ms). 126

Las plantas que contienen el par ms ms son androestriles y aquellas con combinacin de genes Ms ms y Ms Ms son frtiles.
Figura 44. Plantas de arroz androestriles

Fuente: http://agr.unne.edu.ar/fao/Cuba-ppt/P13SelecciOn%20Recurrente.pdf

22.2 Androesterilidad citoplasmtica

Esta clase de esterilidad masculina est controlada por factores citoplasmticos. Las plantas androestriles (ms ms) poseen citoplasma estril (S) y genes homocigticos recesivos para la fertilidad en el ncleo (ms ms)S. Estas plantas producen semilla y mantienen su esterilidad masculina cuando se polinizan con plantas de citoplasma frtil (F) y ncleo con genes recesivos para la fertilidad (ms ms)F. Las primeras se conocen como lneas A, las segundas como lneas B o mantenedoras de la androesterilidad. La diferencia de los progenitores es solamente en el citoplasma y la descendencia lleva siempre el citoplasma (ms ms)S, o sea con dominancia del citoplasma estril (S), lo que tambin se conoce como herencia materna o matroclinia. En ste tipo de esterilidad masculina, no intervienen factores genticos nucleares, excepto cuando entran a modificar el citoplasma para restaurar la fertilidad. Generalmente se produce por mutacin. (Vallejo et al, 2002).

N Frtil

Mutacin

S Estril

Los hbridos obtenidos mediante esta metodologa son androestriles y no producen semilla; por lo tanto no es importante en cultivos donde el producto comercial es la semilla.

127

Una vez detectada la androesterilidad citoplasmtica se debe cruzar con una planta frtil de la misma variedad, a fin de aumentarla y almacenarla en los bancos de germoplasma para su uso posterior.

X S Esteril

N Frtil S Esteril

La progenie ser androestril, ya que su citoplasma se deriva casi en su totalidad del gameto femenino. La androesterilidad citoplasmtica es bastante utilizada en plantas ornamentales, debido a que los hbridos androestriles producen flores ms hermosas y se mantienen frescas mucho ms tiempo que las plantas androfrtiles dentro de la misma especie El gene de esterilidad masculina, se conoce como ms, el androestril citoplasmtico como msc. Sin embargo para mejor explicacin, tambin se utiliza RR y rr para denominar lo genes dominantes y recesivos, de la androesterilidad (Allard, 1967. Citado por Clar R. et al. 1980).

128

23. Leccin 23. Androesterilidad gentica- citoplasmtica

Es una interaccin entre el ncleo y el citoplasma que produce plantas androestriles y frtiles. Se restaura la fertilidad en la F1 cuando se cruzan plantas con citoplasma estril y genes homocigticos recesivos para la fertilidad (rr)S, con plantas de citoplasma estril o frtil y genes homocigticos dominantes en el ncleo (RR)_. Estos ltimos genes tienen la capacidad de restaurar la fertilidad del polen en el citoplasma androestril, y se conocen como Restauradores y las plantas como lneas R. (Clar R. et al. 1980).
Tabla 10. Descendencia hbrida encontrada utilizando una misma lnea hembra cruzada con machos de diferentes genotipos.

Existen varios casos de androesterilidad gentico- citoplasmtica:

Tabla 11. Casos de androesterilidad gentico citoplasmtica

Citoplasma N N N S S S
Vallejo et al 2002.

Ncleo Ms-Ms Ms-ms Ms-ms Ms-Ms Ms-ms Ms-ms (Amdroesteril)

Para que las plantas sean andro estriles debe existir la interaccin entre el factor gentico (ms ms) y el factor citoplasmtico S. Cuando las plantas androestriles son cruzadas con plantas frtiles se obtienen los siguientes genotipos:

129

Androestril S-ms ms S-ms ms S-ms ms S-ms ms S-ms ms X X X X X

Frtil N - Ms Ms N - Ms ms N - ms ms S Ms Ms S Ms ms

F1 S Ms Ms S Ms ms + S ms ms S ms ms S Ms ms S Ms ms + S ms ms 100% Frtil 50% Frtil + 50 % Estril 100% Estril 100% Frtil 50% Frtil + 50% Estril

La androesterilidad gentica citoplasmtica se utiliza para producir hbridos simples, triples y dobles
Figura 45.Produccin de hbridos simples

Fuente: Clar Valencia Ren , D' Croz-Mason Nora E. Androesterilidad. INSTSORMILCENTA.

130

Figura 46. Hbridos Triples

Fuente: Clar Valencia Ren , D' Croz-Mason Nora E. Androesterilidad. INSTSORMILCENTA.

Figura 47 . Hbridos dobles

Fuente: Clar Valencia Ren , D' Croz-Mason Nora E. Androesterilidad. INSTSORMILCENTA.

131

CAPITULO 5.
Reproduccin asexual de las Plantas.

INTRODUCCIN.
Las plantas poseen una ventaja evolutiva sobre el reino animal y es su capacidad para regenerarse a partir de propagacin vegetativa, denominada tambin como reproduccin asexual. Muchas especies son capaces de regenerar un individuo completo a partir de una seccin desprendida de una planta madre. A esta caracterstica se la denomina totipotencialidad. Este tipo de propagacin asegura la conservacin del genotipo que se propaga, pues el nuevo individuo ser idntico al individuo que le dio origen por cuanto no ha habido recombinacin de genes excepto en el caso de que ocurra una mutacin. Estos nuevos individuos son denominados como clon. La propagacin puede realizarse a travs de esquejes (vid), estolones (fresa), tubrculos (papa), bulbos escamosos (azucena, cebolla), rizomas (Heliconias),cormos (pltano), acodos (Mora), injertos y por micro propagacin o cultivo in Vitro.

OBJETIVOS 1. Conocer los mecanismos de reproduccin asexual de plantas 2. Diferenciar los mecanismos de Apomixis, Embriona Adventicia y Aposporia 3. Determinar la importancia y aplicabilidad de los mecanismos de reproduccin asexual en los programas de mejoramiento gentico.

132

24. Leccin 24. Apomixis

24.1 Mecanismos de Reproduccin Asexual
Existen varios tipos de mecanismos en la reproduccin asexual: La fragmentacin y la divisin celular que engloba la biparticin y la gemacin :

Consiste en el desprendimiento o ruptura de partes de clulas, talos o vstagos de los que surgen individuos hijos. En la biparticin, la clula madre se divide por completo en dos clulas hijas nuevas de igual tamao. En la gemacin celular el tamao de la clula hija es al principio menor que el de la clula madre. Por grmenes:

Los grmenes son clulas asexuales reproductivas que desarrollan directamente el individuo. Existen varios tipos: pluricelulares (propgalos) y generalmente unicelulares (esporas). Hay zonas en que porciones del talo o del tallo de las plantas pluricelulares denominados propgalos (agrupaciones de clulas) que estn particularmente especializadas para separarse de la planta madre y extenderse. Son muy comunes en las plantas inferiores. Existen varios tipos, los hormogonios de las cianobacterias, los tubrculos de la patata y los dientes del ajo. Las esporas:

Son clulas germinales especialmente diferenciadas para la reproduccin asexual. Son la forma ms corriente de reproduccin asexual en plantas, producen en general poca variabilidad, son agentes de dispersin y normalmente unicelulares aunque hay esporas con varias clulas o ncleos. Existen varios tipos segn las condiciones de formacin: 1. Segn la situacin: exsporas o conidios si se forman al exterior por estrangulacin y endsporas si se forman en el interior de un esporangio. 2. Segn la capacidad de dispersin: aplansporas si son inmviles como el polen, muchos conidios y zoosporas o plansporas si son mviles.

133

3. Segn la formacin: mitsporas o neutrsporas si son 2n y meiosporas, gonosporas o esporas "sexuales" si son n. Las esporas tienen tambin nombres especiales como por ejemplo: diplosporas si son 2n, haplsporas si son n, si son esporas de resistencia se las llama clamidosporas. Si se producen en ascas son ascosporas, basidiosporas si se producen en basidios. Hetersporas si son distintas generalmente de tamao, macrosporas si son pequeas y masculinas, megsporas si son grandes y femeninas. Las estructuras especializadas donde se producen las esporas son los esporangios. Son unicelulares (sin cubierta) en algas y hongos; Pluricelulares (con cubierta y arquesporio que es el tejido frtil) de Brifitos a Espermatfitos. Su nomenclatura es igual que la de las esporas, por ejemplo de meispora meiosporangio. La reproduccin asexual permite a un organismo producir descendientes rpidamente. Es comn en plantas cuya semilla sexual es infrtil o cuando la produccin de sta es espordica, como en el caso de la guadua, en donde algunas especies solo fructifican cada 30 a 70 aos. La ausencia de variabilidad gentica en especies que se reproducen por va asexual, puede convertirse en una desventaja cuando las condiciones ambientales (para la cual todos los clones estn bien adaptados) cambian rpidamente.( www.porquebiotecnologia.com.ar).
Figura 48.Formas de reproduccin asexual en plantas.

Fuente: http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/doc/El%20Cuaderno%2056.doc

134

24.2 Apomixis o Agamospermia

Se denomina Apomixis al fenmeno de los vegetales superiores donde hay formacin asexual de un embrin en ausencia de fecundacin. Por lo tanto, las semillas apomcticas contienen embriones cuyo origen es totalmente materno. Este trmino fue introducido por Wrinkler (1908) para denominar a aquellas plantas que se reproducen sin la intervencin de meiosis ni singamia y que por lo tanto originan clones en forma natural de un genotipo determinado. La apomixis fue descrita por primera vez en 1841 en la planta australiana Alchornea ilicifolia por J. Smith. Cuando un ejemplar femenino de esta especie dioica fue llevado a los Kew Gardens de Londres desde Asia, la planta aislada floreci y produjo semillas en abundancia, poniendo al carcter en evidencia. Paradjicamente, los primeros experimentos con plantas apomcticas fueron realizados en forma involuntaria por Gregor Mendel, quien utiliz cruzas entre especies del gnero Hieracium para intentar confirmar los resultados obtenidos en sus famosos estudios sobre la herencia de las arvejas de jardn. Mendel atribuy errneamente a una supuesta frecuente autopolinizacin la falta de segregacin observada. Hoy sabemos que muchas especies de este gnero son apomcticas.( Ortiz, Juan Pablo A. et al.). La apomixis es un fenmeno muy comn en angiospermas y pteridfitas (helechos), pero hasta ahora no se ha descrito en gimnospermas. Es comn en algunas gramneas como: Poa, en rosceas (Rubus), compuestas o en rutceas (Citrus). Los gneros en los que existe apomixis son muy variables y es muy difcil identificar taxonmicamente las especies pertenecientes a l ya que muchas de ellas a veces aparecen como clones nicos. La situacin se hace an ms difcil cuando la apomixis es facultativa ya que la complejidad de los patrones (fenotipos) que aparecen es an mayor. Parece ser que la apomixis es obligatoria en la mayora de las plantas con inflorescencias de tipo compuesta y facultativa en rosceas y en gramneas. En estas dos familias se ha descrito progenie de tipo sexual y de tipo apomctico. La mayora de las plantas apomcticas son hbridos poliploides aunque la poliploida por s sola no promueve la apomixis y la hibridacin per se no necesita de ella. Los hbridos con frecuencia tienen dificultades con la meiosis producindose como consecuencia de ello una prdida de fertilidad. La ventaja selectiva de la apomixis en esos casos es clara ya que asegura la existencia de hbridos 135

al mismo tiempo que ofrece una salida al problema de la esterilidad. Plantas que sean hbridos y apomcticas es frecuente hallarlas en ambientes desestabilizados. En contraste con la autogamia que propaga la consanguinidad y la homocigosis, la apomixis estabiliza el statu quo. El genotipo de un determinado individuo permanece inalterable en su descendencia. Las plantas conocidas como plantas pioneras usan sistemas genticos que resultan de un compromiso entre una alta tasa de recombinacin y una estabilizacin de tipos adaptados. La apomixis facultativa y la formacin de hbridos ha demostrado ser una combinacin ptima.( Ramirez Luca. Univ. Navarra). El proceso apomctico sobrepasa la meiosis y la fertilizacin y envuelve varios procesos todos necesarios para la produccin de una semilla viable. En primer lugar se da ausencia de la alteracin por meiosis evitando la reduccin (apomeiosis), luego se da la activacin de la oosfera para formar un embrin en ausencia de fertilizacin (partenognesis) y por ltimo de da la iniciacin del endosperma, tanto de manera autnoma como pseudogmica. El desarrollo apomctico puede ser considerado como un corto circuito o desarreglo en los estados clave del programa de desarrollo sexual. El ambiente puede en algunos casos influir sobre la expresin de la apomixia, caso en el cual se denomina apomixia facultativa. Este fenmeno ha sido observado en especies como Dichantium aristatum., donde el fenmeno est asociado a condiciones de fotoperiodo. Sin embargo, no hay evidencias de la influencia del ambiente en especies con apomixia obligada. (Dallagnol Miguel et al. 2004.). La apomixia parece ser controlada cualitativamente por pocos genes. Las relaciones gnicas tanto dominantes como recesivas han sido reportadas tanto para la misma especie como en especies distintas. La presencia de apomixia obligatoria y facultativa en la misma especie , as como variaciones en el grado de expresin de apomixia facultativa, indican que la apomixia puede ser afectada por genes modificantes y tambin por la constitucin gentica de las poblaciones. (HANNA,1995 citado por Dallagnol Miguel et al. 2004). Actualmente, la propagacin por apomixis est tomando ms fuerza ya que representa una forma de clonacin de plantas a travs de semillas, que brinda la oportunidad a los agricultores de desarrollar nuevos y nicos cultivares de especies. La propagacin de ctricos usando semilla apomctica es la forma de propagacin ms utilizada y eficiente. Muchos pastos comerciales tambin se propagan de esta forma, tales como Paspalum notatum pasto horqueta, Pennisetum ciliare pasto buffel y Poa pratensis L. blue grass o pasto azul de Kentucky,as como parientes silvestres del maz, el trigo y el mijo. 136

Aunque las causas de la formacin del embrin sin fecundacin sean an difciles de determinar, la apomixis constituye una forma de reproduccin de especies que asegura un mejor control en la produccin. Debido a que no hay intercambio de material gentico, la apomixis permite la reproduccin de especies con caractersticas favorables, resaltando su eficiencia y la produccin de semillas de alta calidad. Es decir que esta tcnica combina las ventajas de la propagacin por semilla (por fecundacin) y los mtodos de propagacin vegetativa.(www.porquebiotecnologia.com.ar). El control gentico de la apomixia fue recientemente revisado por Savidan (2000). La hiptesis de que el carcter apomctico esta ligado a un alelo dominante en un nico locus, ha sido apoyada por anlisis de gentica mendeliana en Bothriochloa-Dichanthium, Panicum maximum, Ranunculus auricomus, Cenchrus ciliaris e Brachiaria sp (Valle & Savidan 1996). Otros estudios sugieren un control multignico de la apomixia e la existencia de una estrecha relacin entre el nivel de ploidia y de apomixia. Carman (1997) defiende la hiptesis, basada en anlisis filogenticos, en donde la apomixia resultara de la expresin asincrnica de genes de desarrollo del gametfito femenino duplicados en alopoliplides. Los Apomcticos serian, segn esta hiptesis, poliplides originados de hibridacin entre especies ancestrales distantes que presentaran diferencias en el momento de la megasporognesis y del desenvolvimiento del saco embrionario. (Tavares de Campos Vera C et al.). La apomixis permite a los fitomejoradores generar nuevas variedades en menos tiempo y a menor costo. Se puede fijar instantneamente una caracterstica gentica deseada en una sola planta apomctica, en contraste con las miles de plantas que hay que cultivar y seleccionar durante aos cuando se utiliza el mejoramiento tradicional. (Proyecto Apomixis.IRDCIMMYT).
Figura 49. Seleccin en Maz por el mtodo tradicional y a partir de variedades apomcticas.

137

Fuente: IRD- CIMMYT

Existen tres vas para la reproduccin apomctica: 1. Aposporia 2. Diplospora 3. Embriona adventicia

138

25. Leccin 25. Embriona Adventicia

En las angiospermas, las semillas se desarrollan a partir de los vulos como consecuencia de la doble fecundacin (uno de los gametos masculinos se une con la osfera; el segundo, a los ncleos polares). En dicho momento, el vulo consiste de una nucela central, que contiene al saco embrionario y uno o dos tegumentos. En un vulo bitgmico la nucela est rodeada por un tegumento interno y otro externo generalmente de menor desarrollo. La apertura delimitada por los extremos de ambos tegumentos forma el micrpilo. Sin embargo, los tegumentos pueden tener distinto desarrollo y sus extremos presentarse excntricos, en zig zag, como en los vulos jvenes de la soja (Glycine max) o en Ceiba insignis. De esta forma las aperturas se denominan endostoma y exostoma respectivamente. Los vulos unitgmicos son los que presentan un solo tegumento, como en las gimnospermas; en este caso, contienen a la nucela y al prtalo. Excepcionalmente se presentan vulos atgmicos (sin tegumentos).
Figura 50.Partes del Ovulo y tipos del Ovulos.

Te, tegumento externo; Ti, tegumento interno; Ca, claza; Hv, haz vascular; S, sinrgidas; Se, A, antpodas; Np, ncleos polares; En, endostoma; Ex, Exostoma.

Fu, saco

funculo; embrionario;

Nu, O,

nucela; osfera;

Fuente: Periss Patricia. 2002

139

La embriona adventicia, llamada tambin apomixis esporoftica, difiere de la Apomixis gametoftica en que los embriones surgen directamente de una clula somtica de la nucela o de los tegumentos del vulo. Comnmente se forman embriones mltiples a partir de clulas nucleares (esporofticas) que comparten el vulo junto con el embrin de origen sexual y utilizan su endospermo para desarrollarse.

Esta forma de apomixis aparece comnmente en los ctricos, los cuales constituyen un sistema modelo para estudiar el proceso y en especies de Mangifera.. En la embriona adventicia, no se desarrolla saco embrionario. Los embriones diploides se desarrollan directamente a partir de clulas del esporofito diploide, es decir de las clulas del envoltorio del vulo (ejemplo, integumento).(Ortz Juan p. et al.). La poliembriona es la formacin de ms de un embrin dentro del vulo. Este fenmeno es inusual en angiospermas pero muy comn en gimnospermas. Cuando ocurre en angiospermas, es clasificada como simple o mltiple, dependiendo de la presencia de uno o ms sacos embrionarios dentro del mismo vulo y puede ser de naturaleza sexual o asexual (apomixis).( Snchez Damas J.Jet al. 2006.). Es frecuente que las especies que poseen embriona adventicia presenten ste fenmeno. La embriona adventicia es uno de los tipos de apomixis ms ampliamente distribuido en la naturaleza y se clasifica en embriona nucelar y embriona integumentaria, dependiendo del origen de los embriones asexuales.( Snchez Damas J.J et al. 2006.).

25.1 Embriona nucelar

En este caso, el embrin se forma fuera del saco embrionario y se desarrolla a partir de clulas somticas del vulo como la nucela. En ctricos el fenmeno de embriona adventicia ha sido ampliamente estudiado y se considera como modelo para explicarlo. Es estas especies, la embriona nucelar parece ocurrir solo en presencia de la reproduccin sexual normal, ya que el estmulo del embrin cigtico en desarrollo, conduce al crecimiento posterior de los embriones apomcticos en la nucela. De sta manera, los procesos sexual y apomctico, coexisten 140

dentro del mismo vulo y por tanto se dice que la apomixis es de tipo facultativo.( Snchez Damas J.J et al. 2006.). Las clulas iniciales de los embriones nucleares aparecen primero en las capas de las clulas nucleares que rodean a la parte calazal del saco embrionario sexual, inmediatamente despus de antesis. Luego, aparecen ms iniciales en la regin micropilar y alrededor del saco embrionario. La primera divisin de las clulas iniciales nucleares en Citrus, ocurre aproximadamente cuando se da la primera divisin del cigoto. Slo, las iniciales nucleares localizadas en la regin micropilar se dividen y forman embriones, y durante todo el desarrollo de la semilla se pueden seguir diferenciando embriocitos en la regin micropilar del vulo. (Koltunow,1993 citado por Snchez Damas J.J et al. 2006.) El desarrollo del embrin nucelar es morfolgicamente casi idntico al desarrollo del embrin sexual, diferencindose solo en la rapidez del desarrollo. Los embriones nucleares se desarrollan ms rpidamente que los cigticos y en algunos casos, los embriones cigticos pueden no completar su desarrollo en semillas que contienen embriones nucleares mltiples. Se ha observado que en naranja valencia, tanto en vulos fecundados como no fecundados se da iniciacin de embriones nucleares, lo que indica que su iniciacin es independiente de la fecundacin, sin embrago parece ser que se necesita de la fecundacin sexual, para que el embrin nucelar complete su desarrollo y pueda formar el endospermo, indispensable para su nutricin.

25.2 Seudogamia
Se presenta en algunas especies en donde se requiere de la polinizacin y posterior fecundacin de los ncleos polares para inducir y estimular el desarrollo de la semilla apomctica. En ste caso, el embrin se forma a partir de la osfera. Cuando se presenta seufogamia y el embrin se desarrolla a partir de la nucela se denomina Embriona nucelar inducida.

25.3 Andrognesis
Es un caso particular de embriona adventicia en la que el embrin se origina del gameto masculino, debido a que cuando ste llega a la osfera, el ncleo de sta degenera y es reemplazado por el ncleo del gameto masculino

141

25.4 Poliembriona
Es el fenmeno por el cual se forman en la semilla ms de un embrin, independientemente del origen de los mismos. Los embriones se pueden originar del cigoto, de las sinrgidas, las antpodas, la nucela o del tegumento. Por lo tanto, pueden ser haploides, diploides o triploides en distintas combinaciones. Se dice que la poliembriona es simple cuando en un mismo saco embrionario se desarrollan varios embriones, y mltiple cuando stos se forman en varios sacos embrionarios. En las angiospermas puede ocurrir que el cigoto, luego de la primera mitosis se divida por clivaje en dos y as se forme un embrin de cada una de las partes. Tambin puede suceder que la nucela se divida en varias partes, de las que se originan numerosos sacos embrionarios. A veces, slo uno de ellos desarrolla completamente. En el caso de los Citrus, se encuentra un embrin normal de origen sexual y otros que evolucionan a partir de la nucela del vulo; por lo que estos ltimos son idnticos a la planta madre, y por su caracterstica de rusticidad son utilizados como patrn de injerto. Otras especies que presentan casos de poliembriona son: el mango (Mangifera indica), manzano (Malus sylvestris) y el falso azafrn (Carthamus tinctorius). Son numerosas las especies citadas en las cuales se ha encontrado embriones dobles, como por ejemplo en: alfalfa (Medicago sativa) dos embriones diploides (2n), uno del cigoto, el otro de la nucela; papa (Solanum tuberosum) y lino (Linum usitatissimum) dos embriones, un embrin diploide del cigoto (2n) y uno haploide (n) de una sinrgida; trigo (Triticum aestivum), dos embriones en el mismo saco, un embrin de la osfera (n) y otro de la sinrgida fecundada (2n); esprrago (Asparagus officinalis ) dos embriones diploides por clivaje del proembrin. Generalmente, los clones derivados de repetidas multiplicaciones vegetativas tienden a deteriorarse; sin embargo es posible restablecer el vigor mediante el cultivo de embriones nucelares. As, en los Citrus, se obtienen plntulas uniformes y libres de virus, muy buscadas por los horticultores por su buen sistema radical. Adems, las plntulas haploides se usan para explotar la homocigosis (induciendo la duplicacin de cromosomas) y son una herramienta til en el mejoramiento. Es as como las tcnicas de cultivo de tejidos se han utilizado ampliamente para la induccin de la poliembriona a partir de tejidos somticos y reproductivos.

142

Las causas por las cuales se dan los fenmenos de poliembriona y apomixis son genticas. Se considera que las especies apomcticas son activamente ms evolucionadas porque tienen posibilidades de cambio y por lo tanto de adaptacin.( Periss Patricia. 2002.).

143

26. Leccin 26. Aposporia y Diplosporia

Se considera que la apomixis ha evolucionado como un sistema de reproduccin alternativo a la sexualidad a travs de la reformulacin de sus programas de desarrollo. En la reproduccin sexual de angiospermas, ocurre una alternancia cclica entre los estados de esporfito (la planta misma, 2n) y gametfito (el grano de polen y el saco embrionario, n). La meiosis que ocurre en las flores posibilita la recombinacin y reduccin del contenido gentico y da lugar a la formacin de las esporas femeninas (megsporas) en el ovario y masculinas (micrsporas) en las anteras. La megasporognesis genera cuatro clulas haploides, tres de las cuales degeneran. La restante constituye la megspora funcional, que por el proceso de megagametognesis desarrolla un megagametfito conocido como saco embrionario. El tipo de saco embrionario ms comn entre las angiospermas (conocido como Polygonum) est formado por 8 ncleos haploides (n) contenidos en siete clulas, a saber: la ovoclula, dos sinrgidas, una clula central binucleada, y tres antpodas. Por otra parte, las microsporas desarrollan los granos de polen mediante un proceso de microgametognesis. El polen maduro est tpicamente integrado por tres clulas haploides (n), dos de las cuales constituyen los gametos masculinos. La otra tiene una funcin relacionada con el crecimiento del tubo polnico. La formacin de la semilla requiere previamente de un proceso de doble fecundacin: un gameto masculino (n) se fusiona con la ovoclula (n) para originar al cigoto (2n). A partir de este cigoto se desarrolla el embrin. La clula central del saco embrionario con sus dos ncleos (n + n) se fusiona con el otro gameto masculino para originar el endospermo. As, la fusin de dos gametos haploides nicos derivados de la distribucin al azar del material gentico durante las meiosis masculina y femenina resulta en la generacin de progenies genticamente diversas.( Ortiz, Juan Pablo A et al.).

26.1 Aposporia
En la Aposporia, el saco embrionario tiene su origen en una clula somtica de las mltiples que rodean la clula madre del saco embrionario (nucela), que no ha sufrido reduccin meitica de un vulo y por tanto el embrin es 2n. Se forman siempre sacos embrionarios que difieren en algunos aspectos del gametofito femenino haploide (n) generado a partir de la Megaspora 144

funcional. Se trata de aposporia generativa si la clula es arquesporial y aposporia somtica si la clula es nucelar. Su principal diferencia es precisamente el hecho de ser diploides (2n), puesto que los ncleos que los conforman no han pasado por el proceso de meiosis y por lo tanto no han reducido su contenido de ADN. Por eso se dice que estos sacos embrionarios o mega gametofitos surgen por un proceso de apomeiosis (apo: prefijo griego de significacin negativa).( Ortiz, Juan Pablo A
et al.).

Los embriones se originan por partenognesis de la ovoclula no reducida donde el tejido central del vulo entra en divisiones mitticas para desarrollar el saco embrionario. Es un carcter regulado genticamente y en algunas gramneas se determin que posee un control monognico y dominante (Savidan 1982; do Valle y col. 1994; Sherwood y col. 1994, Ozias-Akins y col. 1998, Martnez y col. 2001,citados por Martnez, Eric J. et al.2003.). Los sacos embrionarios apospricos, clasificados como de tipo Pnicum, presentan cuatro ncleos, siendo un ncleo polar, uno la oosfera y dos de las sinrgidas. En ste tipo de saco embrionario no se presentan antpodas. En los sacos embrionarios de Tipo Hieracium se observan tres antpodas y un total de ocho ncleos. En algunas especies el embrin o el endosperma se desarrollan de forma autnoma, independiente de la fecundacin. En otras, los ncleos polares son fertilizados para formar el endosperma, en cuanto la oosfera se desarrolla de forma autnoma formando un embrin por partenognesis (pseudogamia).( Tavares de Campos Vera C et al.). La ausencia de apomixis a nivel diploide es un aspecto que an no ha sido del todo dilucidado. An no se sabe si se debe a un problema de ausencia de los factor(es) necesario/s para su expresin o al hecho de que existe algn mecanismo que condiciona la expresin del carcter. Se ha propuesto que el factor que controla la apomixis estara asociado a un gen letal para los gametos monoploides (n=x) y por lo tanto no se podra transmitir en los gametos del nivel diploide (Nogler 1982 citado por Martnez, Eric J. et al. 2003.).

26.2 Diplosporia
En la Diplosporia, la clula madre del saco embrionario o gametfito femenino se desarrolla directamente en un embrin, proceso conocido con el nombre de partenognesis diploide. El embrin resultante es 2n. La meiosis de la clula madre o megaspora es interrumpida y el saco embrionario se forma directamente de ella por mitosis sucesivas. 145

Se forman sacos embrionarios que presentan ocho ncleos, siendo dos, ncleos polares, uno el de la oosfera, dos para las sinrgidas y tres para las antpodas. Este tipo de sacos son clasificados como Tipo de Taraxacum, Ixeris o Antennaria dependiendo de la ontognesis.12 Tanto en la aposporia como en la diplosporia, en los sacos embrionarios no reducidos habr un desarrollo del embrin a partir de la oosfera y las clulas contendrn el mismo nmero de cromosomas de cualquier otra clula de la planta madre. Este proceso es denominado partenognesis y ms raramente a partir de las sinrgicas o antpodas en cuyo caso el proceso se denomina apogametia. El endosperma puede desarrollarse de forma autnoma, es decir a partir de dos ncleos polares o por la unin de un ncleo masculino con los ncleos polares. En ste caso el proceso se denomina pseudogamia. As, en apomcticos pseudogmicos hay por tanto necesidad de polinizacin pero solamente para la formacin del endosperma. Los sacos embrionarios, sean stos apospricos o diplospricos, contienen un gameto femenino 2n, la ovoclula, a partir de la cual se desarrolla directamente el embrin por partenognesis sin que exista fecundacin. As, mientras en el proceso sexual la reduccin meitica se complementa con la fecundacin que restaura el nivel de ploida 2n, en la apomixis gametoftica la ausencia de reduccin se complementa con la partenognesis. En ambos casos, se desarrolla un gametofito pero la meiosis o no existe o en el caso de que se produzca no tiene consecuencias observables. Por esta razn se llama tambin a este fenmeno apomixis gametoftica.( Ortiz, Juan
Pablo A. et al).
Figura 51.Rutas de la reproduccin sexual y apomctica

Fuente: http://www.argenbio.org/h/biblioteca/libro/27_VIII_3.pdf

146

Durante la sexualidad una clula de la nucela del vulo se diferencia como clula madre de la megspora y luego de sufrir un proceso de meiosis da origen a cuatro megsporas haploides. Tres de estas megsporas degeneran y la cuarta da origen a la formacin de un saco embrionario luego de una serie de mitosis, donde todos los ncleos celulares estn reducidos (n). La ovoclula y los ncleos polares del saco son fecundados por los ncleos generativos del polen para generar el cigoto y el ncleo primario del endosperma, respectivamente. El cigoto da origen al embrin a travs de sucesivas mitosis. La apomixis consiste en la formacin de un embrin a partir de una clula no reducida (que no ha sufrido mitosis). En algunos casos hay formacin de un megagametofito con clulas no reducidas, cuya ovoclula (2n) genera un embrin por partenognesis (apomixis gametoftica). En otros casos el embrin es generado directamente a partir de una clula de la nucela en un proceso similar a la embriognesis somtica (embriona adventicia).( Ortiz,
Juan Pablo A. et al.).

En la apomixis gametoftica la partenognesis excluye uno de los procesos de la doble fecundacin: la unin de los gametos masculinos con los femeninos, pero no necesariamente se anula la fecundacin de los ncleos polares. Aunque en algunos casos el endospermo puede desarrollarse en forma autnoma (sin la unin de un gameto masculino con los ncleos polares del saco embrionario aposprico o diplosprico) en muchas especies apomcticas, como en la mayora de las gramneas tropicales, es necesario que un gameto masculino se fusione con el o los ncleos polares de la clula central del saco embrionario para formar el endospermo. A este proceso se lo llama pseudogamia. Los sacos embrionarios diplospricos conservan la tpica estructura de los sacos embrionarios de origen meitico, generalmente con siete clulas y ocho ncleos. En la aposporia por lo general tienen una constitucin distinta y muy variable, tanto en taxones diferentes como dentro de un mismo taxn. Por ejemplo, en gramneas tropicales o subtropicales, el saco aposprico se forma por dos mitosis consecutivas, con permanencia de los cuatro ncleos en un solo polo celular. As, se organiza un megagametfito con una ovoclula flanqueada por dos sinrgidas y una clula central uninucleada y extensamente vacuolizada. Esta estructura de saco aposprico fue descrita por primera vez para Panicum maximum y por esa razn a los megagametfitos con esta morfologa se los conoce como sacos apospricos de tipo Panicum. Sin embargo, en las especies apospricas de Paspalum, un gnero tambin 147

perteneciente a la tribu Panaceas igual que Panicum, existe una caracterstica en la constitucin de los sacos apospricos que los diferencia netamente del tipo Panicum: en Paspalum los sacos generalmente tienen una clula central con dos ncleos polares y a veces tres. Esta caracterstica es importante porque debido a la pseudogamia, a veces la relacin genmica materna/ paterna del endospermo es distinta en las plantas sexuales y en las apospricas. En las sexuales, hay una relacin 2/1 materno/ paterno (madre n + n; padre n), mientras que en las apospricas esa relacin es generalmente 4/1 (madre 2n + 2n; padre n).
Figura 52. Distintos tipos de sacos embrionarios formados durante los procesos de sexualidad y de apomixis gametoftica

En la sexualidad, la clula madre de la megspora realiza un proceso de meiosis y genera cuatro megsporas haploides, tres de las cuales degeneran. La cuarta megspora lleva a cabo una serie de tres divisiones mitticas para formar un saco embrionario reducido y octanucleado. En el proceso de apomixis diplosprica la clula madre de la megspora realiza una serie de mitosis para generar un saco embrionario no reducido y octanucleado (tipo Antennaria) o inicia un proceso de meiosis que falla para generar un saco embrionario no reducido y octanucleado (tipo Taraxacum). En la apomixis aposprica clulas de la nucela cercanas a la clula madre de la megspora realizan varias mitosis consecutivas para generar un saco embrionario no reducido que puede ser pentanucleado (tipo Paspalum) y cuya caracterstica ms notable es la ausencia de antpodas. (Ortiz, Juan Pablo A. et al.).

La apomixis usualmente no altera la formacin del microgametfito y la meiosis ocurre normalmente en las anteras generando polen perfectamente viable y reducido. Adems, apomixis y sexualidad no son procesos mutuamente excluyentes ya que pueden aparecer simultneamente sacos reducidos (meiticos) y no reducidos (provenientes de apomixis) en una misma planta, en una misma inflorescencia y an en un mismo vulo. Una planta apomctica capaz de generar al menos una parte de su progenie por medios sexuales se conoce como facultativa. Por lo tanto, en los genotipos apomcticos facultativos las progenies segregan como clases maternas (2n + 0) y no-maternas o aberrantes. Hay tres tipos diferentes de individuos aberrantes que pueden encontrarse en la progenie de una planta apomctica: 148

1. hbridos BIII (2n + n) que resultan de la fecundacin de una ovoclula no reducida 2. hbridos BII (n + n) que resultan de la fecundacin de una ovoclula reducida y 3. haploides (n + 0) generados por partenognesis a partir de una clula huevo reducida. La apomixis gametoftica se relaciona siempre con la poliploida. En general aparece en especies que presentan razas de bajos niveles de ploida (usualmente diploides) que se reproducen por sexualidad y otras de mayor nivel de ploida (por ejemplo tri, tetra o pentaploides) que se reproducen por apomixis. Estos complejos integrados por individuos sexuales y apomcticos de distinto nivel de ploida se conocen como complejos agmicos y se consideran estructuras reproductivas complejas y evolucionadas donde la sexualidad permite la generacin de nuevos genotipos y la apomixis la propagacin clonal muy eficiente de las combinaciones genticas superiores. Existen evidencias que sugieren que la diversidad generada a niveles menores de ploida puede ser impulsada hacia los niveles poliploides por medio de eventos sucesivos de hibridizacin 2n + n. (Ortiz, Juan Pablo A. et
al.)..

26.3 Control gentico de la apomixis

La apomixis es un carcter heredable, pero su control gentico no est claramente establecido. En principio se consider que sus determinantes bsicos podran haberse originado por mutacin y que la mayora de los otros genes involucrados son similares a los de la sexualidad. A pesar de su amplia distribucin en las angiospermas, el carcter no es muy comn en los cultivos mayores o en sistemas modelos, condicin que forz a que los estudios en este campo sean realizados en especies silvestres que son poliploides, altamente heterocigotas y con una pobre caracterizacin gentica. La diseccin de las bases genticas del carcter es por lo tanto dificultosa y compleja ya que los estudios de herencia slo son posibles si pueden cruzarse progenitores completamente sexuales y apomcticos y si la progenie F1 segregante puede ser examinada por mtodos citoembriolgicos. Los diferentes estudios desarrollados en las gramneas coinciden en sealar que tanto la Aposporia como la diplospora parecen estar controladas por un nico locus en donde un gen mayor dominante o un grupo de genes ligados y coadaptados, que funcionan como una sola unidad gentica a causa de una fuerte supresin de la recombinacin, son los responsables de la expresin del carcter.( Ortiz, Juan Pablo A. et al.). 149

CAPITULO 6.
Gentica cuantitativa
INTRODUCCIN.
La gentica cuantitativa es la rama de la gentica que permite el clculo y el anlisis de la herencia de caracteres controlados por muchos genes, que originan caractersticas cuantitativas o caracteres continuos que se pueden medir con valores cuantitativos. La segregacin de stos caracteres, que controlan factores de importancia econmica y que estn altamente influenciados por el ambiente como son la altura, tamao del fruto, rendimiento, resistencia a enfermedades, se pueden cuantificar fcilmente usando una escala apropiada (por ejemplo, centmetros, gramos, toneladas por hectrea) y al graficar los valores se observa que la curva sigue un comportamiento de distribucin Normal con su clsica forma de campana. Otros caracteres, como la resistencia a enfermedades, pueden clasificarse y analizarse comparando individuos con estndares definidos. La gentica cuantitativa tambien permite evaluar las ventajas y desventajas de los distintos mtodos de seleccin y fitomejoramiento, que conlleven al desarrollo de nuevas variedades, lneas e hbridos que permiten incrementar la cantidad, calidad y diversidad de la produccin agrcola. Para ello es importante conocer el comportamiento de las poblaciones, la interaccin de los genes y la forma como se analizan dichas interacciones. OBJETIVOS 1. Identificar que es una poblacin, sus variaciones, cambios de las frecuencias de los genes y genotipos que se pueden presentar. 2. Conocer los modelos que explican la accin de los genes. 3. Distinguir los mtodos estadsticos para analizar la variacin. 4. Conocer lo que es la aptitud combinatoria de las especies.

150

27. Leccin 27. Gentica de Poblaciones.

La gentica de poblaciones es la rama de la gentica cuya problemtica es describir la distribucin de los genes en las poblaciones y la manera o forma en que la frecuencia de los genes y genotipos se mantiene o cambia, con el objeto de dar explicacin a fenmenos evolutivos. Para ello, se define a una poblacin como un grupo de individuos de la misma especie, con genotipos diferentes, que comparten un mismo espacio y tiempo, entre los cuales hay apareamiento aleatorio, se recombinan todos contra todos y estn aislados reproductivamente de otros grupos afines. Genticamente una poblacin es un grupo de individuos que comparten un acervo gentico comn y tienen la posibilidad de aparearse Todos los individuos de la poblacin tienen gametos viables frtiles y cada uno de los individuos contribuye por igual. El concepto de poblacin slo puede ser aplicado a aquellas plantas de polinizacin cruzada natural, por lo que es impractico utilizar el termino de poblacin en especies de plantas autgamas, por que no hay apareamiento aleatorio. En la gentica de poblaciones, se parte del supuesto de que los cambios evolutivos a pequea escala, los que se dan al interior de las poblaciones de las especies, contienen todos los elementos necesarios para explicar toda la evolucin, pues la macroevolucin o evolucin a gran escala, no sera ms que la extrapolacin en el espacio y en el tiempo de los procesos bsicos de las poblaciones. Casi todas las especies estn formadas por una o ms poblaciones de individuos que se cruzan entre s, formando una comunidad de intercambio gentico, denominada poblacin mendeliana. Esta poblacin es el sustrato bsico donde se forja la evolucin. En el interior de la poblacin se da el hecho inevitable de que algunos individuos dejan ms descendientes que otros. Como el nico componente que se transmite de generacin en generacin es el material gentico (los genes), el que un individuo deje ms descendientes implica que sus genes estarn ms representados en la siguiente generacin. De este modo, las frecuencias de los distintos genes cambiarn de una generacin a otra y este cambio ser irreversible cuando se considera el conjunto de los genes de la poblacin, pues es muy improbable que se vuelva a una configuracin previa en todos los genes. Por tanto, desde el punto de vista de la poblacin, la evolucin es en ltimo trmino, un cambio acumulativo e irreversible de las proporciones de las diferentes variantes de los genes o alelos en las poblaciones. 151

Las poblaciones estn sujetas a cambios evolutivos que originan cambios genticos, los que a su vez estn influenciados por factores como: seleccin natural y deriva gnica, que actan principalmente disminuyendo la variabilidad de las poblaciones o migracin y mutacin que actan aumentndola, conceptos estos que trataremos mas adelante en la leccin 36, cuando veamos la teora de Hardy-Weinberg y los conceptos de una poblacin en equilibrio, en el mejoramiento de plantas algamas. Por ahora, slo nos ocuparemos por definir que las poblaciones, no los individuos son la unidad de la evolucin. La Gentica de Poblaciones estudia: La constitucin gentica de los individuos que componen las poblaciones (frecuencias gnicas y genotpicas). La transmisin de los genes de una generacin a la siguiente (gametos=nexos de unin entre una generacin y la siguiente). La aplicacin de modelos matemticos sencillos, cuando se considera un slo locus y una sola fuerza actuando sobre la poblacin, diseados para individuos diploides con reproduccin sexual.

27.1Frecuencias fenotpicas, genotpicas y allicas o gnicas.

El mejoramiento gentico consiste en alterar las frecuencias allicas y las frecuencias genotpicas. La frecuencia allica es la proporcin de un alelo de un gen determinado en una poblacin: Un gen A//a: con dos alelos A y a Genotipos posibles: AA, Aa, aa, En codominancia existen 3 genotipos = 3 fenotipos En dominancia completa existen 3 genotipos = 2 fenotipos Frecuencias fenotpicas de una poblacin son las proporciones o porcentajes de individuos de cada fenotipo que estn presentes en la poblacin. Ff = Nmero de individuos de un fenotipo Nmero total de individuos 152

Frecuencias genotpicas de una poblacin son las proporciones o porcentajes de individuos de cada genotipo que estn presentes en la poblacin. Fg = Nmero de individuos de un genotipo Nmero total de individuos

La suma de las frecuencias genotpicas ser 1. En Codominancia: frecuencias fenotpicas = frecuencias genotpicas. En dominancia: frecuencias fenotpicas frecuencias genotpicas.

27.2 Cuantificacin de la frecuencia allica y genotpica

Un gen R // r; n1 = RR; n2 Rr; n3 rr. N = poblacin Frecuencia Fenotpica Frecuencia RR: D = n1/N Frecuencia Rr : H = n2/N Frecuencia rr: R = n3/N N = n1 + n2 + n3 Entonces D + H + R = 1.0 Frecuencia Allica.

Frecuencia del alelo R = p = 2n1 + n2 /2N p= D+H Frecuencia del alelo r = q = 2n3 + n2 / 2N q=R+H p+q=1 p=1-q Ejemplo
N de individuos RR rojos 400 Rr rosados 3000 Rr blancos 1600 Total 5000 Fenotipos Frecuencias genotpicas 400/5000 = 0,08 => 8% 3000/5000 = 0,6 => 60 % 1600/5000 = 0,32 => 32 % 1 100%

Frecuencia allica R = 2 (400) + 3000 / 2 x 5000 = 0,38 Frecuencia allica r = 2 (1600) + 3000 / 2 x 5000 = 0,62 , q = 0,32 + (0,60) = 0,62 p = 1 0,62 = 0,38.

Conclusin: Las frecuencias gnicas o allicas pueden calcularse a partir de las frecuencias genotpicas, pero no se pueden calcular las frecuencias genotpicas a partir de las frecuencias gnicas o allicas. 153

27.3 Variabilidad en poblaciones naturales. Polimorfismo y heterocigosidad.

En las poblaciones existe variabilidad debida a causas genticas o bien, debida a causas ambientales. La variacin gentica puede medirse por: Polimorfismo y por heterocigosidad El polimorfismo es el mantenimiento de dos o ms formas de gen en el mismo locus presencia de una serie de formas genticas (y genotpicas) en una especie, debido a la presencia de varios alelos diferentes para un gen. Por lo general, los diversos fenotipos son originados por los alelos alternos de un gen. A nivel molecular, el polimorfismo se refiere a la coexistencia de patrones alternos de bandas o variantes de ADN que se evidencian mediante mtodos de deteccin molecular. Tipos de polimorfismos: Polimorfismo por variaciones morfolgicas: Ej. En arveja, lisos/rugoso; verdes/amarillos. Polimorfismo cromosmico: Ej: nmero y morfologa de los cromosomas Polimorfismo inmunolgico. Produccin de antgenos en vertebrados. Ej: grupos sanguneos: Sistema AB0, Sistema MN, Sistema Rh. Polimorfismo proteico: Una protena puede tener diferentes secuencias de aminocidos (distinta carga neta). Heterocigosidad: Frecuencia media de individuos heterocigticos esperados en condiciones de apareamiento aleatorio, se estima calculando la frecuencia de heterocigticos para cada locus y dividiendo por el total de loci. En cualquier generacin, la frecuencia de heterocigotos Aa se acercar o alejar del valor de 0.5 en cualquiera de las subpoblaciones (siempre que el alelo Aa no se haya fijado o perdido). Por tanto, la frecuencia de heterocigotos en cualquiera de las subpoblaciones puede aumentar o disminuir. Sin embargo, la tendencia media en el conjunto de las subpoblaciones es a que las frecuencias gnicas deriven alejndose de los valores intermedios, hacia 0 o 1. Por tanto, la frecuencia media de heterocigotos, en el conjunto de subpoblaciones (y en la poblacin total), tender a disminuir. Eventualmente, uno u otro alelo se habr fijado en cada una de las subpoblaciones y la frecuencia media de heterocigotos caer a 0. 154

Como ya hemos visto, es posible predecir la rapidez con que cabe esperar que disminuya la heterocigosidad de una poblacin finita en funcin de su tamao poblacional. Sewall Wright (1931) demostr que la heterocigosidad virtual promediada para el conjunto de subpoblaciones se ajusta a la relacin: Ht = (1 1/2N) Ht-1 donde Ht y Ht-1 es la heterocigosidad de la poblacin en las generaciones t y t-1, respectivamente, y N es el nmero de individuos reproductivos en la poblacin. Puesto que el valor de (1 1/2N) vara siempre entre y 1, la frecuencia esperada de heterocigotos en cualquier generacin, ser siempre menor que la frecuencia de heterocigotos encontrada en la generacin previa. Cuanto menor sea el tamao poblacional, ms rpido ser el descenso en la frecuencia de heterocigotos (Figura 53).
Figura 53. Descenso medio de la heterocigosidad en poblaciones de diferentes tamaos (N) como consecuencia del proceso de deriva gentica. El eje de ordenadas muestra la proporcin de la frecuencia inicial de heterocigotos que conserva la poblacin.

Fuente.http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/joaquina/BOXES_CCAA/TAMAGNO_EFEC TIVO/tamagno_efectivo.htm

La formulacin terica desarrollada hasta ahora, parte de un modelo concreto de poblacin fragmentada que asume que cada una de las subpoblaciones es una POBLACIN IDEAL formada por N adultos reproductivos. En estas poblaciones, la tasa de cambio por deriva puede describirse en funcin del descenso en la frecuencia de heterocigotos.

155

28. Leccin 28. Medidas de tendencia central.

Los procedimientos de mejoramiento vegetal generan datos que necesitan ser procesados de acuerdo a los objetivos que se persiguen en stas como son: Anlisis de estabilidad, heredabilidad, estimadores de varianzas, avance gentico e ndices de seleccin Un carcter cuantitativo en una poblacin grande indica relativamente que muy pocos individuos poseen fenotipos extremos de los que fue origen y que a medida que se incrementa una cantidad mayor de sus individuos se acerca ms al promedio. Como los caracteres cuantitativos exhiben una distribucin continua de fenotipos, no pueden ser analizados de la misma manera que los caracteres controlados por genes mayores. Estos caracteres se describen entonces en trminos de parmetros estadsticos. Los dos utilizados principalmente son: la media y la varianza. La media aritmtica es el valor fenotpico promedio para un carcter cuantitativo que se distribuye normalmente en una poblacin y est dado por la suma de las mediaciones individuales (Xi) divididas entre el nmero de individuos.

Debido de lo difcil de medir cada individuo en una poblacin, se toman muestras significativas de la misma y sobre ella se estiman los valores de la poblacin, lo que se denomina parmetro. As pues, si la muestra es bien representativa de la poblacin total de la que forma parte, entonces X promedio debe ser una estimacin precisa de la media de la poblacin completa (); a mayor tamao de la muestra, los datos estadsticos o medidas derivadas de la muestra se estiman con mayor precisin. Varianza = S2 = (xi - x )2/(n-1)

La desviacin estndar es un parmetro estadstico tambin relevante porque se encuentra expresado en las mismas unidades que la media. Desvo estndar = S = S 2

La media es el valor promedio de la distribucin. Dos distribuciones pueden tener la misma media pero muy diferentes curvas con forma marcadamente diferente. Una distribucin amplia sugiere un gran rango de variacin, 156

mientras que una distribucin estrecha ocurre cuando el rango de los valores observados es pequeo.

La varianza es una medida de la variabilidad de la distribucin. La grfica siguiente muestra dos distribuciones con la misma media pero varianzas diferentes (). Una manera simple de describir una distribucin es en trminos de su media y su desviacin estndar. La media + - la desviacin estndar abarca el 66% de la distribucin. De manera que una desviacin estndar ms grande sugiere que la distribucin es ms amplia que aqulla con una desviacin estndar menor. Adems el 95% de toda la distribucin se encuentra entre +dos desviaciones estndar a partir de la media y el 99% de la distribucin se encuentra entre +- tres desviaciones estndar.
Figura 54. Representacin de la distribucin normal, campana de Gauss.

La representacin de este tipo de distribucin simtrica que tiene forma de campana de Gauss, se denomina distribucin normal 157

29. Leccin 29. Medidas de variabilidad.

El valor fenotpico para un individuo especfico es el resultado de factores genticos, factores ambientales y la interaccin entre ambos tipos de factores. La suma de estos factores contribuye a la varianza de la poblacin de individuos que estn segregando para un carcter cuantitativo. Es as que la varianza total se puede subdividir de la siguiente manera: VP= VG + VE + VGE VP: Variacin fenotpica total para la poblacin que est segregando. VG: Variacin Gentica que contribuye a la varianza fenotpica total VE: Contribucin ambiental a la variacin fenotpica total VGE: Variacin asociada a las interacciones de los factores genticos y ambientales. La variacin gentica puede a su vez subdividirse en tres componentes. El primer componente es el llamado variacin gentica aditiva. Algunos alelos pueden contribuir con un valor fijo al valor mtrico del valor cuantitativo. Por ejemplo si los genes A y B controlan el rendimiento en el maz (realmente est controlado por muchos genes) y cada alelo contribuye en forma diferente al rendimiento de la siguiente manera: A = 4, a=2, B= 6, b = 3. Entonces el genotipo AABB tendr un rendimiento de 20 (4+4+6+6) y el genotipo AaBb tendr uno de 15 (4+2+6+3). Los genes que actan de esta manera son aditivos y contribuyen a la varianza gentica aditiva (VA). Adems de los genes que tienen un efecto aditivo sobre un carcter cuantitativo, existen otros que pueden poseer una accin dominante que enmascara la contribucin de los alelos recesivos en ese locus. Por ejemplo, si los dos genes que se mencionan exhibieran dominancia el valor mtrico del genotipo heterocigota AaBb sera de 20. Este valor es igual al del homocigota dominante. Esta fuente de variabilidad se atribuye a la Varianza gentica por dominancia (VD). El otro tipo de varianza gentica, est asociada a las interacciones entre los genes. La base gentica de esta varianza es la epistasis y se denomina Variacin gentica por interaccin (VI). La Varianza Gentica Total puede subdividirse en tres formas de varianza: VG = VA + VD + VI La Varianza Fenotpica Total tiene entonces los siguientes componentes: VP = VA + VD + VI + VE + VGE

158

Los fitomejoradores cuantitativos pueden estimar qu proporcin de la varianza fenotpica total es atribuible a la varianza gentica total y cul se atribuye a la varianza ambiental realizando experimentos especficos. Si los fitomejoradores estn tratando de mejorar un rasgo cuantitativo tal como rendimiento o ganancia en peso, el estimar la proporcin de estas varianzas proveer una direccin a sus investigaciones. Si una gran proporcin se debe a la varianza gentica entonces se pueden obtener ganancias seleccionando individuos cuyo valor mtrico es el deseado por el fitomejorador. Por el contrario si la varianza gentica es baja, lo que implica que la varianza ambiental es alta, se obtendran resultados ms exitosos optimizando las condiciones ambientales. Es conveniente aclarar que stas no son las nicas dos alternativas. Los caracteres con baja heredabilidad pueden ser objeto de seleccin pero requieren procedimientos ms complejos que la seleccin fenotpica directa. Estos procedimientos, con una importante contribucin de la estadstica, intentan eliminar la interferencia producido por la varianza ambiental de modo de reconocer la contribucin gentica. Para realizar un estudio gentico se debe definir perfectamente la poblacin de la cual se desea hacer inferencias; a su vez, la definicin de la poblacin o del material gentico implica su descripcin mediante parmetros genticos de distinta ndole. Este primer paso es fundamental no slo para definir los procedimientos estadsticos correctos que se emplearn, sino para entender la validez y la extensin de las conclusiones a las que se llega. Para ello es necesario comprende la diferencia entre un modelo fijo, (el mismo material que se evala, es la poblacin que se desea estudiar y sirve de referencia) y el modelo aleatorio, (se evala una muestra que se espera sea representativa de la poblacin de referencia que se caracterizar). En este caso, no es posible conocer los parmetros poblacionales sino slo una aproximacin a los mismos, ms o menos precisa, es decir, los estadsticos o estimadores muestrales. Ceballos (2007) Genticamente, uno de los parmetros de variabilidad mas tiles de una poblacin es la desviacin estndar (). Una muestra de una poblacin elegida al azar tendr una desviacin estndar (S) . Para calcularla se utiliza la siguiente formula.

El objetivo del anlisis de varianza es probar la homogeneidad de los tratamientos; es decir, si los efectos de los tratamientos son idnticos o no, por supuesto con un cierto nivel de riesgo. 159

El anlisis de varianza ANAVA, se utiliza para el anlisis de diseos experimentales de efectos aleatorios como; bloques completamente al azar, parcelas divididas, cuadrados y rectngulos latinos y ltice; en el que se realiza comparacin del valor promedio de una muestra , con su respectiva media poblacional , o con la media de otra muestra de referencia; comparacin de dos promedios en funcin de las diferencias de sus poblaciones, para probar homogeneidad entre tratamientos; comparacin de valores promedio de dos muestras independientes. En todos estos casos, se utiliza una potente prueba, el test de Student (t) Generalmente las muestras comparadas deben tener un tamao tal, que en conjunto se renan ms de 30 datos, ya que el nmero de grados de libertad con que se analiza la t es igual a (n1 + n2) 2, donde n1 y n2 son los tamaos de las respectivas muestras. En esta prueba, al igual que en la correlacin y la regresin, es muy importante que el tamao de la muestra no sea muy pequeo, porque la ms leve dispersin intra-muestral, produce un valor de t que no permite hacer amplias las diferencias entre los tratamientos, si la cantidad de grados de libertad no es alta. El anlisis de correlacin, su objetivo es conocer si dos ms variables estn relacionadas entre s y en que grado y sentido lo hacen El Anlisis de regresin, presupone una relacin de causalidad entre dos variables relacionadas y establecimiento a priori, de un efecto (y, variable dependiente) y una causa (x, variable independiente). La variable independiente es medida generalmente sin error y es pre-fijada por el investigador. La variable dependiente se mide con error y su variabilidad responde a la variacin deliberada de la variable independiente Modelo estadstico de la regresin lineal: y = a + bx (1) Este ajuste en ms perfecto, cuanto menos se alejen los valores de y observados de los tericos obtenidos a partir de la funcin ajustada. Esto puede estimarse a partir del clculo de los coeficientes de determinacin (r2), que oscilan entre 0 y 1 y entre 0 y 1, y representan el porcentaje de variacin de la variable y que es determinado por las variaciones de la variable x.
Figura 55. Representacin de la regresin lineal y de la cuadrtica

160

30. Leccin 30. Aptitud combinatoria

La aptitud combinatoria (AC) es la capacidad de un genotipo (lnea consangunea, individuo o clon) o de una poblacin, de dar descendencia hbrida caracterizada por la alta expresin de un carcter. En otras palabras la AC, es el mtodo utilizado para escoger los mejores progenitores La AC. mide la capacidad para producir heterosis en ciertos caracteres y se cuantifica, evaluando el comportamiento del genotipo o poblacin en todos los cruzamientos posibles. Si el genotipo produce buenos hbridos en todos los cruzamientos en los que participa, se dice que tiene buena aptitud combinatoria general (ACG). Si slo es con determinados genotipos, se dice que tiene buena aptitud combinatoria especfica (ACE.). La aptitud combinatoria es hereditaria. En un programa de mejoramiento cuya finalidad sea la obtencin de hbridos, la ACE es ms importante que la aptitud combinatoria general, debido a que se aprovechan los efectos no aditivos como la dominancia y la Epstasis (Hoegenmeyer & Hallahuer 1976).

30.1 Evaluacin de la aptitud combinatoria general (ACG.)

Como ya se haba mencionado la ACG, se define como el comportamiento medio de una lnea en combinaciones hbridas. La ACG est relacionada a factores genticos con efecto aditivo. Al principio, para probar la aptitud combinatoria general de las lneas consanguneas, se cruzaban todas las lneas entre s. Si tenemos n lneas, el nmero de hbridos posibles es n(n-1)/2, si se hace en una direccin y n(nl) si se hacen los recprocos. As, si tenemos 30 lneas la AC. ser. 30(29)/ 2 = 435. Nos encontramos que tenemos que analizar 435 cruzamientos (sin incluir los recprocos). Como se haca imposible manejar todo ese material, se idearon distintos procedimientos para ensayar la aptitud combinatoria sobre la base de cruzamientos naturales. Entre esos mtodos cabe destacar: Top-cross Policruzamiento Cruces dialelos El top-cross: es un mtodo para averiguar la aptitud combinatoria general de lneas puras o consanguneas. Este mtodo consiste en cruzar cada lnea consangunea (actuando como hembra) con una variedad utilizada como probador o "tester", que acta como polinizador. 161

El diseo es el siguiente.

LC = Lnea consangunea. Se siembra el probador entre cada 4 5 hileras de las lneas consanguneas. Como probador o "tester" se suele utilizar una buena variedad de polinizacin abierta, autctona del rea donde se cultivar el hbrido. El probador tendr una amplia base gentica, es decir, tiene que ser una poblacin que produzca gametos con diversos genotipos. La diversidad de los gametos del probador permite una valoracin de la aptitud combinatoria general de cada lnea, ya que la progenie de cada lnea ser el resultado de cruzamientos de la lnea con distintos genotipos. En el cruce dialelo: se cruza cada lnea con todas las dems de todas las formas posibles. Este mtodo que indudablemente da mucha exactitud, resulta imposible de llevar a la prctica cuando el nmero de lneas es elevado. El mtodo del policruzamiento: es el ms utilizado, consiste en obtener la descendencia de cada lnea por todos los dems, realizar un ensayo comparativo de las descendencias y seleccionar las lneas cuya descendencia policruzada tiene mayor productividad. Las lneas seleccionadas son, por tanto, las que muestran mejor ACG.

30.2 Evaluacin de aptitud combinatoria especfica ACE.

Tal como se dijo arriba, la ACE es el comportamiento esperado sobre la base del comportamiento promedio de las lneas involucradas. la ACE esta relacionada con factores genticos con efecto no aditivo (dominancia y Epstasis). Se usa para designar aquellos casos en que ciertas combinaciones tienen un comportamiento relativamente mejor o peor de los que se podra esperar basados en el comportamiento promedio (ACG) de las lneas parentales Es de fundamental importancia la aptitud combinatoria en hbridos dobles. Es importante recordar que no interesa cun buena es una lnea consangunea en un hbrido simple, ya que el mismo carecer de valor comercial si no se comporta como un buen parental en un cruzamiento doble. 162

30.3 Seleccin recurrente para aptitud combinatoria general

En el mejoramiento de variedades o poblaciones algamas o de las lneas consanguneas, es muy importante la seleccin teniendo en cuenta la aptitud combinatoria tanto general como especfica. En cualquier caso se puede proceder del modo siguiente: Se elige un probador adecuado, el cual podr ser, un genotipo con lo que los ciclos de recurrencia intentarn acumular genes para ACE, o puede ser una poblacin, en cuyo caso se mejorar la ACG. El probador debe tener una base gentica amplia. Elegido el probador, se siembra una parcela, con plantas espaciadas, de la poblacin que se trata de mejorar y al mismo tiempo se siembra otra parcela del probador. En la primera de estas parcelas se eligen plantas por su morfologa, resistencias, etc. (plantas S,) y se hace con ellas una doble operacin consistente en autofecundarlas y simultneamente, cruzarlas como padres (polen) con el probador (como hembra). Como se trata en general de plantas en las que cada individuo tiene varias flores o inflorescencias, esta operacin es fcil de realizar. Pero aunque se tratara de plantas unifloras, siempre se podra utilizar el polen de una flor, tanto para autofecundarla como para polinizar una o varias flores del probador. En el segundo ao, se siembran las descendencias obtenidas por autofecundacin para realizar cruzamientos entre ellas de todas las maneras posibles, por polinizacin libre o por cruzamiento controlado. A la vez se hacen ensayos comparativos con las descendencias obtenidas con el probador; ensayos que indicarn cules son las plantas de la poblacin original que muestran mejor ACG. Entonces, de las combinaciones realizadas entre las descendencias obtenidas por autofecundacin, slo se eligen las que incluyen las procedentes de plantas con buena ACG. El siguiente ciclo de seleccin empezar con las plantas obtenidas en los cruzamientos no eliminados. El proceso ser el mismo. Si la segunda etapa de cada ciclo se realizara en dos aos en lugar de simultneamente, entonces cada ciclo durara 3 aos. Este mtodo es til para aumentar el rendimiento y las condiciones de adaptabilidad de un gran nmero de cultivos de algamas.

163

30.4 Seleccin recurrente para aptitud combinatoria especfica

La estrategia de este mtodo es igual al descrito anteriormente, excepto que el probador tiene una base gentica estrecha o restringida. Es decir, puede ser una lnea pura, clon, etc.
Figura 56. Representacin esquemtica del proceso de mejora utilizando AC.

Fuente: Ramirez L.

164

UNIDAD 3
MTODOS DE MEJORAMIENTO GENTICO DE PLANTAS

INTRODUCCIN
La seleccin es una herramienta fundamental en el mejoramiento gentico de las plantas. De hecho, la clave del xito del fitomejorador no es tanto el mtodo que use como la habilidad de reconocer los tipos superiores en un limitado o amplio rango de variabilidad de las plantas. El propsito de esta unidad es presentar los diferentes mtodos de seleccin que han venido siendo utilizados en el mejoramiento de plantas autgamas y en las plantas algamas, aunque algunos de ellos, son utilizados indistintamente.

OBJETIVOS 1. Qu el estudiante conosca y se apropie de las diferentes metodologas utilizadas para el cruzamiento de plantas con vistas al mejoramiento gentico. 2. Diferenciar entre los mtodos de seleccin individual y de seleccin masal as como los objetivos que persigue cada uno de ellos. 3. Reconocer la metodologa de mejoramiento por el mtodo de Pedigr 4. Conocer las metodologas utilizadas en la seleccin de poblaciones 5. Reconocer la metodologa de retrocruzamiento como herramienta fundamental del mejoramiento de plantas.

165

CAPITULO 7.
Mtodos de mejoramiento de plantas autgamas

INTRODUCCIN.
Las plantas autgamas son aquellas que se reproducen sexualmente por autofecundacin. La autogamia absoluta no es comn, si bien se consideran prcticamente autgamas, desde el punto de vista de mejora gentica, aquellas plantas con menos de un 5% de alogamia. La autogamia puede deberse a un mecanismo floral de cleistogamia, por el cual las anteras liberan el polen sobre el propio estigma, que est receptivo, con la flor cerrada. De esta manera se evita la entrada de polen extrao. Esto ocurre por ejemplo en el trigo, la cebada, la avena y la mayora de las variantes del arroz. En otras plantas no existe este mecanismo floral, las flores se abren, pero la proporcin de fecundacin cruzada puede ser tan pequea como en las cleistogmicas, como es el caso del frjol, la arveja, el algodn, el tomate, el tabaco y el sorgo. En el programa de mejora de plantas autgamas, contrario a lo que se piensa, hacer los cruzamientos es lo que menos tiempo ocupa; aunque es necesario emascular, es decir, quitar las anteras de las plantas que actuarn como parental femenino o como madre y aislarlas, para que no reciban el polen no deseado, ms tarde cuando el estigma est receptivo, se transfiere el polen de la planta que se desea que acte como parental masculino. En algunos casos se pude sembrar a diferentes tiempos con el fin de que solapen la maduracin de la parte femenina y masculina. Como se estudiar en este captulo, a partir de este procedimiento, se inicia el verdadero trabajo de mejoramiento.
OBJETIVOS 1. Reconocer las diferencias entre el mtodo de seleccin individual y de seleccin masal 2. Conocer las caractersticas del mtodo de Seleccin genealgico 3. Conocer las caractersticas del Metodo de Seleccin de Poblacin 4. Conocer los principios del retrocruzamiento y su aplicabilidad al mejoramiento de plantas.

166

31. Leccin 31. Seleccin individual

La seleccin individual es unos de los mtodos de seleccin ms importantes en las poblaciones variables de plantas autgamas. Este mtodo se basa en el principio por el cual un genotipo, en su descendencia, se reproduce de forma ms o menos uniforme dependiendo de su patrimonio gentico ms o menos estable y homocigtico. El primer fitomejorador de que se tenga reporte, que realizo seleccin individual fue John Le Couter quien publico sus trabajos en 1843. Agricultor de la isla de Jersey, se dio cuenta de la diversidad de tipos en su campo de trigo y descubri que la descendencia de plantas individuales era marcadamente uniforme y que existan diferencias en valor agronmico entre las distintas selecciones (Allard, 1967). Con los trabajos de Johannsen (1903 -1926) se establecen las bases cientficas para la seleccin de especies autgamas cuando defini las lneas puras como la descendencia de un individuo homocigoto autofecundado. Puso de manifiesto que la autofecundacin continua de las lneas conducan a la homocigosis, efecto descrito por Mendel, quien demostr que partiendo del heterocigoto Aa, la autofecundacin continua daba lugar a una disminucin en la heterocigosis de un medio por generacin. En unas pocas generaciones se llega a una poblacin con igual nmero de individuos AA y aa y una proporcion muy pequea de heterocigotos. Para implementar un programa de seleccin individual se deben cumplir tres etapas diferentes: En la primera etapa se hace un gran nmero de selecciones en la poblacin original genticamente variable; este paso es sumamente importante porque en los individuos seleccionados se encuentra casi toda la diversidad gentica con las formas ms favorables necesarias en el proceso de mejora, mxime si recordamos que la seleccin no puede crear variabilidad gentica. Deben hacerse tantas selecciones iniciales como las posibilidades de tiempo, dinero y espacio lo permitan; adems, debe cultivarse la poblacin sobre la cual ha de hacerse la seleccin de tal manera que se puedan estudiar fenotpicamente los individuos y despus sea posible seleccionar los que ms interesan por un carcter determinado. En la segunda etapa, se cultiva para su observacin la descendencia de las selecciones individuales de planta; se siembran en filas separadas las semillas producidas por cada planta. Se originan lneas puras con las que se pueden comprobar caracteres determinados (resistencia a enfermedades, tamao, peso, etc.). Se continua realizando ms seleccin y cultivo por varios 167

aos eliminando las formas no convenientes hasta reducir mucho el nmero de lneas. En el momento en que todas las plantas de la parcela sean similares entre s, tanto que el fitomejorador ya no pueda decidir entre lneas basndose solo en su observacin y siendo necesario realizar clculos estadsticos, en este momento se pasa a la siguiente etapa, para entonces se puede tener la certeza de que la poblacin obtenida son realmente lneas puras. La tercera etapa es entonces la seleccin basada en comparaciones estadsticas de las diferentes lneas entre s y con las variedades comerciales conocidas con las mejores caractersticas de rendimiento u otros caracteres. Se procede entonces a seleccionar la mejor lnea para su distribucin y se inicia la multiplicacin de la semilla. La seleccin de una lnea pura puede ser llevada a la prctica como siempre ha sucedido por los agricultores quienes identifican plantas que sobresalen en sus cultivos. Una vez que se tiene aislada una lnea pura superior, seleccionar dentro de esta lnea no tiene sentido. Todas las plantas de esta lnea tienen el mismo genotipo, la superioridad o inferioridad depende del efecto del medio ambiente. La seleccin de las plantas superiores dar lugar a una descendencia con un peso promedio de los caracteres seleccionados igual al de la poblacin original. Se puede concluir entonces que no habr respuesta a la seleccin (h2=0, R =0). El riesgo que se corre con este mtodo es la segregacin en generaciones posteriores y la prdida del carcter seleccionado, as como el descarte de las progenies sin una evaluacin estricta. El mtodo es ms de seleccin fenotpica en funcin de los criterios establecidos para la seleccin y su eficiencia depender de la facilidad con que se pueda identificar el o los caracteres deseados. Las lneas puras pueden dejar de serlo por mezclas mecnicas con semillas de otras variedades, por cruzarse en forma natural con otras variedades y por mutaciones. Existen muchos ejemplos que ilustran la seleccin individual en la obtencin de variedades en especies comerciales, como son las variedades mas importantes de los Estados Unidos de trigo que proceden del trigo de Turkey, las cuales tienen tambin la misma adaptacin general y productividad que la variedad original, sin embargo todas ellas presentan una evidente mejora en una o ms caractersticas importantes como, mayor precocidad, caa mas fuerte o resistencia a enfermedades con respecto a las del trigo de Turkey. 168

La variedad Columbia de avena es otro buen ejemplo, la cual se obtuvo de una sola planta seleccionada de la variedad Fulghum en los campos agrcolas de Missuri, en 1920. La lnea que se obtuvo de esta planta, fue ms precoz, de mayor altura, mayor uniformidad y de mas rendimiento que el Fulgghum, a la vez la variedad Fulghum, tambin haba sido seleccionada por un agricultor mejorador de Warreton, Georgia, quien observ una planta que era ms alta y ms precoz que las restantes plantas de su parcela de la avena Red Rustprof. El, recolect la planta y multiplic la semilla dando origen a la variedad Fulghum. La variedad autctona; variedad local, variedad indgena, son poblaciones mayormente homocigticas que tienen tres caractersticas principales: Son endmicas de un rea, sus orgenes se remontan a varios cientos de aos. Son una mezcla de tipos (genotipos). Estn bien adaptadas al ambiente en el que se cultivan. La mayora de las variedades autctonas no tienen buenas cualidades desde el punto de vista agronmico. Generalmente son menos productivas que las variedades mejoradas, su variabilidad las hace difcil de cultivar y cosechar mecnicamente. Sin embargo, es interesante mantener estas variedades indgenas heterogneas porque es muy probable que en ellas se encuentren genes de inters para la adaptacin a suelo y a condiciones climticas especficas y para resistencias a plagas y enfermedades locales.

169

32 Leccin 32. Seleccin masal.

El mtodo de seleccin masal, consiste en elegir dentro de una poblacin de plantas, las mejores plantas o las que se acerquen ms a las caractersticas deseadas (seleccin individual) y recoger sus semillas reunindolas en una mezcla de todas las plantas seleccionadas para sembrar una nueva parcela, de la cual se vuelven a tomar los individuos mas deseables, para obtener nuevamente su semilla y proseguir as generacin tras generacin de la misma forma el proceso de seleccin. Una forma ms refinada de la seleccin masal es cosechar las mejores plantas separadamente y cultivarlas como lneas puras para compararlas entre s. Una vez evaluadas, las lneas puras superiores y similares se mezclaran para mejorar una variedad ya establecida. En muchos casos la seleccin masal es el primer paso en la mejora de las variedades autctonas. Aplicando este mtodo, las caractersticas que han hecho que la variedad autctona tenga xito, se mantendrn y obviamente todos los defectos se eliminarn. Cuando se quiere introducir un nuevo cultivo en un rea, la mejora inicial del mismo comienza por la realizacin de una seleccin masal. Por eso se puede decir que este es el mtodo ms antiguo utilizado por los seleccionadores de las viejas variedades, para conservar la pureza o la homogeneidad y tambin para llegar a su constitucin a partir de poblaciones indiferenciadas. Con la seleccin masal llegamos a n genotipos. En cuanto se refiere, por ejemplo, al carcter rendimiento, este tipo de seleccin ofrece bastante uniformidad debido a que la variabilidad ambiental hace que los n genotipos se adapten ms y por tanto, la variedad se adapte mejor. El arroz es una planta considerada autgama,sin mebargo tiene cierto grado de aptitud para el cruzamiento espontneo. Con motivo de ste y de las mutaciones, se puede llegar a constituir una nueva variedad por un proceso gradual, que ser tanto ms largo cuanto menos uniforme sea el material gentico de origen. Aunque las variedades ms antiguas, incluida la Balilla, se hayan obtenido segn este sistema, el mtodo sirvi fundamentalmente para conservar la pureza de las semillas de las variedades en cultivo. Actualmente, se hace seleccin masal para mantener las caractersticas de las variedades establecidas . Por regla general, esto implica la cosecha de alrededor de 200 plantas tpicas de la variedad. El nmero de plantas debe ser grande para preservar la identidad y la variabilidad original de la variedad. Estas plantas se cultivan en hileras y las que no son tpicas de la variedad se destruyen antes de que florezcan. Las restantes se cosechan en masa. Este 170

proceso se repite tantas veces como sea necesario a fin de mantener las caractersticas de la variedad. Este proceso de seleccin con plantas autgamas puede llevarnos a la obtencin de resultados ms rpidos y definitivos. Las ventajas de esta metodologa de seleccin son:

La sencillez y la rapidez con que se puede efectuar la mejora de variedades locales y la liberacin de una variedad.
Es sencilla por que cualquier persona (campesino o agricultor) puede realizarla una vez ha aprendido el procedimiento ya que en el campo es fcil identificar las mejores plantas dentro de una poblacin. Se pude aprovechar mejor el germoplasma, debido a que se maneja un grupo mayor de plantas Es econmica porque no se llevan a cabo polinizaciones, evaluaciones, etc. Este mtodo puede ser utilizado para purificar variedades existentes.

Las desventajas que presenta el mtodo son: No se conoce si las plantas que se estn seleccionando son homocigticas o heterocigticas Las plantas que estn en estado heterocigtico, segregan en la generacin siguiente, obligando al fitomejorador a repetir la seleccion. El ambiente en el que la planta crece afecta su desarrollo y apariencia. Con la seleccin masal no es posible conocer si el fenotipo seleccionado es superior en apariencia debido a la herencia o al ambiente.

No se ha determinado experimentalmente el tamao idneo de la poblacin para la seleccin ni la proporcin de lneas que se han de seleccionar, pero se aconseja trabajar con poblaciones de varios centenares o millares de plantas; con respecto a la intensidad de seleccin, se debe aplicar una que permita eliminar un buen numero de estas sin alterar las principales caractersticas agronmica de la variedad. La principal diferencia entre la seleccin individual y la seleccin masal en las plantas autgamas, es el nmero de lneas que se conserva. En la seleccin individual el tipo obtenido procede de una sola lnea pura. En la seleccin masal se conserva la mayora de las lneas seleccionadas. La seleccin 171

masal en plantas autgamas tiene un menor uso en relacin con la seleccin de plantas individual Un ejemplo de seleccin masal se puede citar el caso de la variedad de cebada de Missouri Early Beardless, la cual se origino de un lote de semilla comprado por un agricultor de Missouri en el otoo de 1931, que al cultivarlas observo que un 25% de las plantas eran ms pequeas y precoces que las dems. Muchas de dichas plantas precoces se cosecharon a mano y se mezcl su semilla. Posteriormente se realiz una seleccin de varios cientos de plantas con un fenotipo similar, se cosecharon y se mezclaron las semillas. En el segundo ao se siembran las semillas con pruebas preliminares de rendimiento, se observa y se compara la altura, precocidad, acame, tolerancia a temperaturas bajas, resistencias a las enfermedades y calidad. Del tercero a sexto ao, se contina con las pruebas de seleccin relacionadas con el rendimiento, comportamiento y adaptabilidad, comparndolas con variedades tipo como testigo. En el sptimo ao se da inicio a la multiplicacin de la semilla para su distribucin. (Figura #.)
Figura 57.Mtodo de Seleccin masal

La progenie de una cruza se siembra de forma masal hasta la generacin F5, en la F5, la progenie se siembra por plantas individuales, se seleccionan las plantas o espigas, en la F7 se siembran en surcos por espigas o por planta. Se seleccionan los surcos sobresalientes, los cuales nuevamente se multiplican en siembras por surcos como pruebas de rendimiento en la F8. las lneas mas sobresalientes, se prueban en ensayos de rendimiento, de la generacin F9 a F13.

172

33 Leccin 33. Mtodo genealgico pedigr

La seleccin basada en el mtodo genealgico en las especies autgamas, consiste esencialmente en la aplicacin prctica de los mtodos mendelianos, en la que se elige los progenitores teniendo en cuenta sus caracteres favorables, con el fin de cruzar entre s lneas progenitoras en las que cada una contenga caracteres en las que la otra est en desventaja; posteriormente se selecciona plantas individuales en la poblacin segregante de un cruzamiento, tomando como base sus buenas caractersticas agronmicas juzgadas individualmente y los datos de su genealoga. Este mtodo de seleccin es bastante sencillo y eficiente para seleccionar caracteres de tipo oligognicos (controlados por algunos genes), como es el caso de la altura de planta, la precocidad y los mayores componentes del color de grano. El principio de este mtodo es que en cada generacin se debe seleccionar las mejores plantas presentes en las mejores familias y luego sembrar sus descendencias en pancula por surco. La seleccin en la descendencia del cruce inicial se realiza por varias generaciones, hasta encontrar un elevado nmero de lneas que posean los caracteres deseados. Puede ocurrir que muchas de las lneas sean ya homocigticas para todos los caracteres en la generacin F5. En la generacin F2 se anotan las caractersticas de todas las plantas y se seleccionan las adecuadas. Las plantas F2 seleccionadas producen semillas por autofecundacin, las semillas de una planta de la F2 forman una familia de la generacin F3, que ser una lnea. Los primeros criterios de seleccin en la F2, estn referidas a vigor, fecha de maduracin, resistencia a enfermedades o a algunos insectos etc. En la F3 y en generaciones ms avanzadas, las selecciones deben estar relacionadas especialmente con datos preliminares de rendimiento. La acumulacin de informacin es de vital importancia a la hora de tomar decisiones sobre que lneas se deben eliminar y cuales deben de seguir en el programa de mejora. Al manejar poblaciones hbridas de plantas autgamas, el fitomejorador debe tener siempre en mente, que se est cambiando la estructura gentica de la poblacin. Un punto fundamental a considerar es que el potencial mximo de un cruzamiento (esto es el mayor nmero de fenotipos y genotipos segregantes) lo obtiene en la F2. Las generaciones sucesivas a la F2 repetirn bsicamente las caractersticas de sta. Otro punto importante es que la heterocigosis disminuir rpidamente de modo que las progenies derivadas de la seleccin de una planta sern tanto ms homocigticas ( F2 ...F5) cuanto mayor sea el nmero de generaciones del programa de mejoramiento. Esto significa que el fitomejorador est evaluando el 173

comportamiento de plantas individuales desde generaciones tempranas y luego evaluar las familias y lneas derivadas de ellas. El nmero de plantas F2 deber ser 10 a 20 veces ms el nmero deseado de familias F3 . Un nmero manejable de plantas seran 5000. En la F3 las semillas de las 250 plantas de la F2 se siembra en una lnea y el tamao de la familia debera ser lo suficientemente grande para mostrar la variabilidad existente en ella. La seleccin se hace a nivel de planta, se hace nfasis en familias que sean uniformes. No se descartan individuos que sobresalen en otras familias que habitualmente se hubieran descartado. El nmero de selecciones raramente excede el nmero total de familias F3. Puede asumirse que se hacen 150 selecciones y que 25 de ellas se descartan despus de llevar el material al laboratorio. En la generacin F4 la seleccin es similar a la anterior. Se tiene 125 familias y 12 variedades control, an cuando las familias se muestren homogneas se har seleccin de planta. La F4 ofrece una buena oportunidad para reducir el tamao de la poblacin. Esta reduccin se hace visualmente y analizando el pedigr. Aqu suponemos que se cosechan 100 plantas procedentes de 40 familias y que el nmero se reduce a 90, despus de analizarlas en el laboratorio. En la generacin F5 la seleccin es semejante a la F4. La diferencia radica en que se usan parcelas ms grandes, cuyas dimensiones se asemejan bastante a las condiciones de campo. Las selecciones que se hacen se basan en: pedigree, apariencia visual, y rendimiento por parcelas, si stas son lo suficientemente grandes. Como en F4, se eligen alrededor de 100 plantas, que se reducen luego a 80, despus de pasar por el laboratorio. Al hacer las selecciones, asumimos que las plantas son homocigticas. Por tanto, las selecciones deben hacerse de familias que se muestren uniformes. Para la generacin F6 la unidad de seleccin no es la planta individual, sino la familia derivada de una nica planta. En este momento las parcelas se cosechan en conjunto y no separadamente la semilla de cada planta. Por tanto, la tasa de siembra se aproxima mucho a la siembra que se hace con fines comerciales. El tamao de siembra ser lo suficientemente grande como para permitir una identificacin visual rpida de cada familia y si es posible tambin obtener valores de rendimiento. Si se dispone de abundante semilla, se deben hacer repeticiones de parcela. Si se tiene 80 selecciones la parcela de siembra ser similar a la F5 . La seleccin, al igual que la F5 , tiene en cuenta, no slo el pedigr, sino tambin el comportamiento en parcela. Probablemente 15 de las familias ms uniformes y prometedoras se conservan despus de hacer evaluacin visual, anlisis de rendimiento y anlisis de laboratorio. 174

En la generacin F7, las 15 selecciones y variedades control se siembran en pruebas replicadas utilizando un diseo de bloques al azar. Aproximadamente 4 5 selecciones sobrevivirn esta prueba que incluye pruebas de calidad. En las generaciones F8 a F10 durante 3 aos como mnimo y en algunos casos hasta 5, se repetirn pruebas como la efectuada en F7. en diferentes localidades de la misma rea donde se iniciar la produccin. Este procedimiento disminuir el nmero de selecciones a uno o como mximo a dos. Ya en las generaciones F11-F12 se dedican a ensayos y pruebas en campo. Estos ensayos consisten en analizar parcelas de aproximadamente 0,4 Ha o ms, que se siembran y cosechan como lo hara el productor. Durante este periodo se busca un nombre para la seleccin y se comienzan los trmites para el registro de las semillas en agencias para tal fin. El anterior procedimiento demuestra que se requieren aproximadamente 12 aos para producir una variedad, 5 de los cuales se centran en seleccionar plantas aisladas y 7 para seleccionar poblaciones. Este esquema es flexible, ya que la seleccin de planta puede llevar de 4 a 8 aos, y los test poblacionales de 6 a 8 aos, razn por la cual una variedad de plantas autgamas necesita un perodo de 16 aos, antes de iniciar su comercializacin.

Ventajas e inconvenientes del mtodo pedigr El mtodo de pedigr permite ms oportunidades que cualquier otro mtodo para evaluar los resultados del cruzamiento si el fitomejorador conoce bien el cultivo y es lo suficientemente habilidoso para estimar el comportamiento en campo de cada planta en particular. Si no se tiene este conocimiento es mejor no iniciar un programa de mejora, utilizando esta metodologa, ya que el mtodo de seleccin masal permite lograr homocigosis con mucho menos trabajo. Permite la eliminacin temprana de los tipos con caracteres cualitativos, tales como susceptibilidad a enfermedades, altura, color de la flor, forma del fruto, etc. no deseables. Permite la evaluacin de selecciones en funcin de su comportamiento de ao en ao. Permite llegar rpidamente a la homocigosis cuando la seleccin de planta nica se traduce en progenie de planta nica uniforme. 175

Las desventajas de este mtodo son: Se trabaja con una cantidad limitada de material debido al tiempo que se consume para elegir planta por planta. Es un mtodo muy engorroso y requiere de mucho tiempo, ya que se requiere hacer el criadero (parcela de multiplicacin) y la cosecha planta a planta.

Figura 58 . Mtodo de seleccin genealgico

De las plantas seleccionadas en la F2, se siembran en surcos progenies de 25 a 30 plantas en la F3 de los mejores surcos se seleccionan las mejores plantas y se siembran por familias en la F4, la seleccin se repite en la F5 y F6, en la F7 las familias debern ser relativamente uniformes, en la F8 se siembran pruebas de rendimiento preliminares, las que continan hasta F12. Ver anexo 1. sobre mejoramiento por el mtodo de Pedigr.

176

34

Leccin 34. Mtodo por hibridacin con seleccin masal.

Los mejoradores de plantas, en el pasado han utilizado el trmino hibridacin para referirse a los cruzamientos entre distintas variedades o en algunos casos entre especies diferentes. En el siglo XX, el uso que se le da al trmino hibridacin no es otro que el cruzamiento planificado entre parentales cuidadosamente seleccionados. Cuando un fitomejorador cruza (hbrida) 2 variedades de una planta autgama, su preocupacin es: i) Saber los lmites y naturaleza de la variabilidad en F2, o primera generacin segregante. ii) El progreso de la poblacin hacia la homocigosis completa y iii) La naturaleza de la combinacin gnica ms adecuada. El cruzamiento (la hibridacin) puede ser intraespecfico, cuando se refiere al cruzamiento entre individuos de la misma especie o interespecfico, cuando los individuos cruzados son de distintas especies. En este caso nos referiremos slo a los cruzamientos intraespecficos. Cuando se realiza un cruzamiento entre lneas puras la F1 es genotpicamente heterocigtica y genotpicamente homognea. En la F2 (primera generacin segregante), de dicho cruzamiento aparecern genotipos recombinantes, que renen caracteres que antes estaban separados en los dos parentales. El nmero de recombinantes de la F2 depender de: El nmero de genes diferentes en ambos parentales; el nmero de alelos en cada locus; del ligamiento gnico frente a segregacin Se siembra la generacin F2 en una parcela lo suficientemente grande para cultivar varios cientos a miles de plantas, esta parcela se cosecha en conjuntos y la semilla reunida se utiliza para sembrar un nueva parcela en el siguiente periodo. El proceso se repite tantas veces como crea conveniente el fitomejorador. En ste periodo de multiplicacin masal, la seleccin natural juega un papel muy importante desviando las frecuencias genticas en la poblacin segn las condiciones ambientales reinantes. El fitomejorador decide en que momento del proceso efecta la seleccin para desviar la poblacin hacia los tipos agronmicamente convenientes, eliminando de la poblacin los genotipos no deseados, especialmente cuando estos son buenos competidores. El cultivo en masa puede terminar tan pronto como la generacin F2 en este caso, no difiere del tpico procedimiento genealgico. Por otra parte, si no se dan las condiciones adecuadas para la seleccin durante algunos aos, el cultivo en masa de la descendencia se puede continuar por muchos aos.

177

Este tipo de seleccin es adecuado para poder manejar poblaciones grandes segregantes, aumentando la probabilidad de encontrar tipos con productividad alta entre los caracteres deseados, aumentando la homocigosis durante todo el periodo de multiplicacin masal y por tanto las selecciones hechas despus de unas pocas generaciones serian seguramente lneas puras.

178

35

Leccin 35. Mtodo de retrocruzamiento

Es un mtodo para mejorar variedades que son muy buenas para un gran nmero de caracteres, pero que tambin son deficientes para algunas pocas caractersticas. Puede considerarse como una variante de la hibridacin. Primero se obtiene el hbrido entre dos parentales y a continuacin se cruza con el parental que se considera ms valioso. La progenie de este retrocruzamiento experimenta casi siempre una fuerte segregacin y est formada por individuos que presentan una combinacin de caracteres de ambos parentales y el carcter o caracteres a ser mejorados son mantenidos por seleccin, para al final del proceso obtener una nueva variedad exactamente igual al progenitor recurrente con la misma adaptacin, productividad etc., pero superior a su padre en las caractersticas especficas para la cual se mejor. El mejoramiento por retrocruzamiento es ms fcil de manejar si el carcter que est siendo adicionado cumple con los siguientes requisitos: i) es de herencia simple, ii) es dominante y iii) es fcilmente reconocido en los hbridos. Por lo tanto, el retrocruzamiento tiene su mayor aplicacin en la obtencin de variedades resistentes a enfermedades y plagas. La transferencia de las caractersticas que se desean de la espacie B a la A, es posible gracias al mecanismo de introgresin. Esto ocurre en la naturaleza cuando los productos de cruzamientos de 2 especies se cruzan repetidamente durante varias generaciones con el parental A (por ejemplo). Los cruzamientos repetidos con la especie A significan que la poblacin toma las caractersticas de A, sin embargo, por azar o por seleccin natural sobreviven algunas caractersticas de B, que se incorporan a la especie A. Cuando este proceso est controlado se dice que se aplica el mtodo de mejora por retrocruzamiento o seleccin recurrente. La especie A se la denomina parental recurrente y a B genitor donante. Los genes de B incorporados en A se denominan genes bajo transferencia. La variedad de inters o lnea consangunea acta como parental recurrente que se cruza con otra variedad que presenta un carcter de inters, no presente en el parental recurrente. Los productos del cruzamiento que llevan el gen o los genes (F1) se retrocruzan con el parental recurrente (se abrevia as BC). Este proceso se repite con los productos de los retrocruzamientos, por lo general, se llevan a cabo 5 6 retrocruzamientos. El nmero de veces que se usa el parental recurrente en un retrocruzamiento se indica por un subndice o por superndice. La poblacin que se origina despus del tercer retrocruzamiento se simbolizara A4 x B, lo que significa el 179

cruzamiento original de A x B y 3 retrocruzamientos ms A4. La ltima poblacin de la figura # se simbolizara A6 x B A6 x F2. Los retrocruzamientos pueden considerarse desde 2 puntos de vista: a) El Parental recurrente y su recuperacin; y b) Como carcter que se transfiere y su recuperacin. Parental recurrente y su recuperacin En este mtodo de retrocruzamiento, se reconoce la existencia de una variedad superior ya probada, que en la mayora de los casos est disponible. Frecuentemente, esta variedad es deficiente en algunos aspectos ej: puede ser susceptible a una raza patgena que produzca enfermedad, tener un tallo endeble, etc. Los agricultores estn acostumbrados a esta variedad y la utilizan como forrajera. Cada vez que se hace el retrocruzamiento con el parental recurrente se reduce a la mitad el aporte del germoplasma del donante, Por tanto, si el nmero de retrocruzamientos con el parental recurrente es n, la proporcin de germoplasma del genitor donante ser de (1/2)n+1 y despus de 5 retrocruzamientos sera (1/2)6= 1/64, que est representado por 1 de los 64 puntos de la variedad B. La proporcin de homocigticos se calcula por la misma frmula que vimos anteriormente ((2m 1)/ 2m )n donde m =nmero de retrocruzamientos y n = el nmero de loci heterocigticos en la F1 del cruzamiento original. Suponiendo que el nmero de retrocruzamientos productores es 5 y el nmero de loci heterocigticos es 10, tenemos: ((2m 1)/ 2m )n = ((25 1 )/ 25)10 = (31 / 32)10 = 72,8% de los BC5 F1 sern homocigticos para 10 loci del genitor recurrente. El nmero de retrocruzamientos utilizados en los programas de mejora vara entre 3 a 10. Cuando se hacen 10, se logra prcticamente total identidad del genitor recurrente. Algunos fitomejoradores utilizan 5 6 retrocruzamientos. Cuando se desee recuperar el genitor recurrente es recomendable durante el ltimo retrocruzamiento cruzar a los descendientes con distintas plantas con el fenotipo del genitor recurrente. Esto se hace bajo el supuesto de que el genitor recurrente es la resultante de la sntesis de genotipos levemente diferentes. Carcter que se transfiere y su recuperacin Cuando la variedad donante tiene 2 caracteres para transferir es ms eficiente transferir cada carcter en programas separados. Cuando se ha 180

completado las transferencias los caracteres pueden combinarse cruzando los tipos recuperados. Cuando un determinado carcter est controlado por un gen dominante es relativamente fcil transferirlo con un retrocruzamiento en cada generacin. Esto se ha visto que es as cuando se incorporan genes de resistencia por retrocruzamientos y se cultivan las poblaciones bajo condiciones naturales o artificiales de infeccin. Si el carcter que se desea transferir est controlado por un gen recesivo es aconsejable cultivar las generaciones de retrocruzamiento hasta la F2 para permitir la identificacin del genotipo homocigtico recesivo. Un procedimiento alternativo es retrocruzar dos o incluso tres veces en generaciones sucesivas y cultivar los productos del segundo y tercer retrocruzamiento a fin de encontrar plantas homocigticas recesivas para el carcter en cuestin. Cuando se desea transferir un carcter cuantitativo, cada generacin de retrocruzamiento se debe cultivar hasta la obtencin de lneas F3 y luego se sigue con el siguiente retrocruzamiento. Si aparte la heredabilidad del carcter es baja y varios genes estn envueltos en la expresin del carcter, las poblaciones F2 y F3 procedentes de los retrocruzamientos deben ser suficientemente grandes. El ligamiento puede tambin complicar el mtodo de seleccin por retrocruzamiento. La complicacin surge cuando el gen que se desea transferir est ligado a otro indeseable o a un bloque de genes no beneficiosos, ya que la seleccin para el de inters aumenta tambin la seleccin del no deseable. Cuando el efecto del gen indeseable es conspicuo, una serie de autofecundaciones despus de un cruzamiento es ms efectivo para romper el ligamiento, pues la oportunidad de romper el ligamiento existe tanto en el parental masculino como en el femenino (por meiosis), mientras que en el retrocruzamiento no puede ocurrir ruptura de ligamiento en el parental recurrente. El retrocruzamiento no es un mtodo limitado slo para mejora de la resistencia. Se ha utilizado tambin para obtener tomates que maduren ms pronto y para la acumulacin de caracteres deseados Los retrocruzamientos pueden hacerse en cualquier ambiente donde la planta se espere que crezca y donde el carcter que se ha transferido deba expresarse. La evaluacin agronmica no es necesaria. Por tanto, se puede utilizar el invernadero para adelantar generaciones y para evaluar en carcter que se transfiere. Una caracterstica importante del retrocruzamiento es que las variedades obtenidas as, pueden darse a los agricultores, sin evaluacin de 181

rendimiento, adaptacin a calidad, pues es la misma variedad de la tierra con algn carcter deseable incorporado. El mtodo de retrocruzamiento presenta 3 requisitos: Se debe disponer de una variedad recurrente buena, la que deba mejorarse en uno o ms caracteres. Se debe disponer de variedades donantes que complementen a la variedad recurrente, para el carcter de inters. El nmero de retrocruzamientos que se hagan deben ser lo suficiente para reconstituir el parental recurrente.

Las ventajas del mejoramiento por retrocruzamiento pueden resumirse en los siguientes puntos: Nada de lo ganado se pierde, debido a que las mejoras se hacen paso a paso. El programa de mejora es independiente del ambiente. No son necesarias evaluaciones de las variedades obtenidas por retrocruzamiento. Es rpido y requiere un nmero pequeo de plantas. Es predecible y repetible. Es tambin adecuado para la modificacin de caracteres morfolgicos o caractersticas de color y caracteres cuantitativos dependientes de pocos genes como la precocidad, altura de la planta y tamao y forma de la semilla . La desventaja del mtodo es que No permite obtener combinaciones gnicas poco comunes de las 2 variedades.
Figura 59.Representacin del procedimiento de retrocruzamiento

182

CAPITULO 8.
Mtodos de mejoramiento de plantas algamas
INTRODUCCIN.
Las plantas algamas son aquellas que se aparean libremente dentro de sus poblaciones como consecuencia de su sistema reproductor y de su historia evolutiva previa. Son muy heterocigotas por lo que rara vez se utilizan de manera individual para construir una nueva variedad, ya que la segregacin y la polinizacin cruzada dificultan la conservacin del progenitor. Por esta razn los mtodos de mejoramiento de estas especies difieren de los empleados en las plantas autgamas. Las plantas algamas pueden ser: hermafroditas, monoicas y dioicas. Monoecia y dioecia, evidentemente favorecen la fecundacin cruzada. En algunas plantas la alogamia se asegura por distintos mecanismos como la maduracin de estambres y estigmas en distinta poca, o los distintos sistemas de incompatibilidad. Dentro de las plantas algamas, se pueden encontrar desde las que tienen una completa autoesterilidad, hasta las que tienen una perfecta autofertilidad, con gran variabilidad incluso dentro de la misma especie y an dentro de la misma variedad comercial o poblacin local. Otro factor importante es que algunas plantas algamas cuando se les somete a autogamia forzada suelen sufrir depresin por consanguinidad, mientras que otras no. En las poblaciones de especies algamas, puede identificarse y seleccionarse individuos con caracteres sobresalientes y deseables agronmicamente, sin embargo, estos no son de herencia constante debido a que todos sus gametos son diferentes, lo que crea diferentes individuos en cada generacin. Por eso, la mejora gentica de una poblacin algama se basa en dos hechos principales: i)La eleccin de los individuos que han de originar la generacin siguiente seleccin y ii) La forma por la cual dichos individuos seleccionados se han de cruzar entre s para formar la descendencia que constituir la generacin siguiente. Los distintos mtodos de mejora que en alogamas se pueden realizar son Seleccin masal , Seleccin de lneas endogmicas y explotacin de la heterosis y por seleccin de los componentes de las variedades sintticas. OBJETIVOS 1. Reconocer los principales mtodos de mejoramiento de especies algamas 2. Conocer la Teora del Equilibrio gentico y su aplicacin en el mejoramiento gentico. 3. Reconocer los factores que afectan el equilibrio gnico de poblaciones. 4. Identificar los procesos que alteran el equilibrio de pobalciones 183

36.

Leccin 36. Teora de Hardy-Weinberg

Tambin llamada ley del equilibrio gentico, es un conjunto de frmulas matemticas que describen cmo la proporcin de distintos genes, que determinan una caracterstica particular en un organismo, puede permanecer igual a lo largo del tiempo en una poblacin numerosa de individuos. En 1908, el matemtico britnico Godfrey Harold Hardy y el mdico alemn Wilhelm Weinberg describieron de forma independiente esta ley. Basados en una aplicacin de la distribucin binomial descubierta por Isaac Newton, explican que una poblacin se comporta de acuerdo con las condiciones que se basa esta formula y no debe haber cambios en las frecuencias gamticas o cigticas de generacin en generacin. La composicin gentica de una poblacin permanece en equilibrio mientras no acten ni la seleccin ni ningn otro factor y no se produzca mutacin alguna. A pesar de la mezcla de genes que supone la reproduccin sexual, la persistente reorganizacin de estos en este tipo de reproduccin, no cambia la frecuencia de estos en las sucesivas generaciones. Es decir, la herencia mendeliana, por s misma, no engendra cambio evolutivo, no es un mecanismo de alteracin de las frecuencias de los genes en las poblaciones. Esta ley indica la frecuencia con la que determinados alelos, variantes de un gen determinado que contienen informacin especfica respecto a un carcter (por ejemplo el color de los ojos), deberan aparecer en una poblacin. La ley establece tambin la frecuencia con la que determinados genotipos, combinacin real de genes de la que un organismo es portador y puede trasmitir a sus descendientes, deberan aparecer en esta misma poblacin.

36.1. Condiciones para que se presente en equilibrio en una poblacin.

Para que la poblacin permanezca en equilibrio de generacin en generacin, debe cumplir las siguientes condiciones ideales: Ser lo suficientemente amplia como para que todos los cambios que se produzcan en ella sigan las leyes de la estadstica. No debe existir inmigracin ni emigracin. Los organismos componentes de esa poblacin han de ser diploides y de reproduccin al azar (panmixia). Individuos viables y frtiles, con reproduccin sexual. 184

En esta poblacin no hay mutaciones, ni seleccin natural, ni artificial, de modo que los individuos tienen las mismas probabilidades de reproducirse, independientemente de sus genotipos

Se considera que, si en una poblacin lo infinitamente grande y con un apareamiento libre al azar, un gen est representado por los alelos A y a, de igual adaptabilidad, en la proporcin qA(1-q)a, las frecuencias de estos dos alelos permanecern constantes como se explica a continuacin: Ejemplo, gen con dos formas alternativas Frecuencias allicas observadas. Apareamiento aleatorio Aya gametos

Frec. A = p Frec. a = q

Genotipos = AA, 2 Aa, aa Frecuencias genotpicas esperadas segn H-W Frec. AA = p2 Frec. Aa = 2pq Frec. aa = q2 Formula H-W = p2 + 2pq + q2 = 1 = (p + q)2 Frec. A = p = 4/8 = 0,5 Frec. a = q = 4/8 = 0,5 Frecuencia allica

El apareamiento aleatorio es un supuesto razonable, pero en la realidad este no existe en la mayora de los casos, ya que siempre hay algn tipo de seleccin de pareja. 185

Ejemplo numrico: Una poblacin de 5000 plantas se encontr la siguiente frecuencia genotpica: Frec. Genot. Frec. Alelica 400 Rojas 8% p = 0,38 3000 Rosadas 60% q = 0,62 1000 Blancas RR Rr rr Frec. Genotpicas p2 (0,38)2 = 0,1444 2pq 2(0,38)x(0,62) = 0,4712 q2 (0,62)2 = 0,3844

Significa que la poblacin no esta en equilibrio gnico, por que hay variacin genotpica.

36.2. Consecuencias del Equilibrio Hardy-Weinberg

Una vez que se alcanz el equilibrio, las frecuencias allicas y genotpicas se mantienen constantes a travs del tiempo. El equilibrio H-W se alcanza con una o dos generaciones de apareamiento al azar (para un locus autosmico). Si las frecuencias allicas difieren entre sexos, en la primera generacin de apareamiento al azar las mismas se igualan, y en la segunda, las frecuencias genotpicas llegan al equilibrio. La heterocigosis esperada aumenta con el nmero de alelos y se maximiza cuando, para k alelos, sus frecuencias son 1/k. La importancia y utilidad del modelo de H-W radica en su simplicidad y falta de realismo. Se utiliza como hiptesis nula. Pese a ser un modelo hipotetico, las poblaciones naturales suelen encontrarse cerca del equilibrio H-W.

Est claro que una poblacin de este tipo no existe en la naturaleza, pero sirve de punto de partida para el estudio de otras leyes: los organismos estn sujetos a mutacin, seleccin o otros procesos que cambian las frecuencias gnicas, pero lo efectos de estos procesos pueden ser medidos a partir de sus desviaciones de la ley de equilibrio. 186

36.3 Procesos que cambian las frecuencias gnicas.

Los procesos bsicos que cambian las frecuencias gnicas son la mutacin, la migracin, la deriva gentica y la seleccin natural La mutacin.

La mutacin es un fenmeno natural, de frecuencia muy baja y de muy lenta aparicin, que posibilitan la evolucin. A manera de jemplo: Consideremos un alelo A que se convierte en B por mutacin a una tasa del 1 por 100.000, que es tpica de muchos genes (en cada generacin una cienmilsima de todos los alelos A se convierte en B). Si en un momento dado, la frecuencia del alelo A es 0'10, en la generacin siguiente ser del 0'0999999, un cambio pequesimo. Y as sucesivamente. La fraccin del alelo que cambia es siempre la misma; pero como la frecuencia del alelo es cada vez menor, el efecto de la mutacin se va reduciendo de generacin en generacin. En nuestro caso, se requieren 10.000 generaciones para que la frecuencia del alelo A se reduzca de 0'1 a 0'09. Por otra parte, las mutaciones son reversibles: el alelo B tambin puede mutar a A. La frecuencia de los alelos cambiar an ms lentamente. De todo esto se deduce que la mutacin, aunque tiene su contribucin, no es fuerza suficiente para impulsar todo el proceso evolutivo. Las frecuencias de los genes estn determinadas por la interaccin entre mutacin y seleccin. La migracin gentica.

La migracin, en el sentido gentico, implica que los organismos (o sus gametos o semillas) que van de un lugar a otro se entrecruzan con los individuos de la poblacin a la que llegan. Por eso la migracin se llama flujo gentico. En este caso, lo que cambian son las frecuencias gnicas de una localidad dada, si es el caso que las frecuencias de los emigrantes y de los residentes no sean iguales. La deriva gentica.

Es una fuerza de cambio muy importante en la seleccin, en la que las frecuencias gnicas pueden cambiar por razones puramente aleatorias, debido a que cualquier poblacin consta de un nmero finito de individuos. La frecuencia de un gen puede por ello cambiar de una generacin a otra gracias a lo que se llaman errores de muestreo, ya que de todos los genes de la poblacin slo una pequesima fraccin pasar a la siguiente (por lo mismo tambin es posible que salgan ms de 50 caras al lanzar una moneda 100 veces). 187

Si en una poblacin de 1.000 individuos, la frecuencia de a es 0'5 en una generacin, en la siguiente generacin puede ser, por azar, de 0'505 de 0'493, a causa de la produccin fortuita de unos pocos ms o unos pocos menos descendientes de cada genotipo. En la segunda generacin habr otro error de muestreo, que ahora trabaja sobre la nueva frecuencia gnica, as que la frecuencia de a puede llegar de 0'505 hasta 0'511 bajar a 0'498. Este proceso de fluctuacin aleatoria contina de generacin en generacin, sin que ninguna fuerza empuje a la frecuencia a retornar a su valor original. De este modo, el resultado final es que la deriva provoca que las frecuencias gnicas sean p=1 q=1 (q=0 p=1, respectivamente). Tras este final, ya no es posible ningn cambio: la poblacin se ha hecho homocigtica. Una poblacin aislada a partir de la primera tambin sufre esta deriva gentica aleatoria, pero en lugar de hacerse homocigtica para el gen A, puede hacerse para el gen a. A medida que el tiempo transcurre, las poblaciones aisladas divergen entre ellas, perdindose heterocigosidad: la variacin que apareca en las poblaciones aparece ahora entre poblaciones. Si no existieran estos procesos de cambio evolutivo, como la mutacin y la seleccin natural, las poblaciones llegaran al final a tener un solo alelo de cada gen, aunque se tardase muchas generaciones en llegar a ello. La razn es que, tarde o temprano, uno u otro alelo sera eliminado por la deriva gentica sin posibilidad de que reapareciera por mutacin o migracin. Debido a la mutacin los alelos desaparecidos de una poblacin pueden reaparecer de nuevo y gracias a la seleccin natural, la deriva gentica no tiene consecuencias importantes en la evolucin de las especies, excepto en poblaciones de pocos individuos.

Efecto Fundador.

Es una situacin extrema de deriva gentica que se da cuando se establece una nueva poblacin a partir de pocos individuos, cuando una poblacin pequea se separa de otra original ms grande. Es lo que ocurre en numerosas islas ocenicas, con poblaciones numerossimas establecidas por muy pocos individuos. Las frecuencias de muchos genes pueden ser diferentes en los pocos colonizadores y en la poblacin de la que proceden y ello puede tener efectos duraderos en la evolucin de tales poblaciones aisladas. El efecto fundador es, probablemente, responsable de la prctica ausencia de grupo sanguneo B entre las poblaciones de indios de Amrica, cuyos antecesores llegaron en nmeros muy pequeos a travs del Estrecho de Behring hace unos 10.000 aos.

188

37. Leccion 37. Seleccin Masal

La seleccin masal es el mtodo ms simple de mejora en plantas algamas y consiste en elegir los mejores individuos (por sus fenotipos), recoger la semilla que ellos producen, mezclar esta semilla para formar la generacin siguiente y repetir el ciclo de seleccin y mezcla de semilla sucesivamente. La seleccin masal puede tener varias formas, pero siempre implica la cosecha de un lote en masa de semillas a partir de algunas plantas seleccionadas. Evidentemente, lo que se hace es una seleccin para gametos femeninos, puesto que al tomar la semilla producida por la planta seleccionada se est seleccionando la aportacin gnica femenina, mientras que no se puede seleccionar las plantas que van a actuar como polinizadores. A pesar de ello, se espera un progreso en la seleccin por acumulacin de genes favorables. La seleccin masal por el fenotipo es efectiva cuando los caracteres para los que se selecciona son fcilmente observables o medibles; por ejemplo: altura de planta, contenido en aceite o protena de la semilla. Cuando los caracteres no pueden ser prejuzgados por el fenotipo individual de las plantas, se realizan ensayos con la descendencia de las madres seleccionadas, lo cual recibe el nombre de (prueba de progenie). La descendencia puede obtenerse mediante polinizacin abierta normal (sin control de los gametos masculinos) o puede hacerse controlando la reproduccin. Esto depender de si el carcter que estemos teniendo en cuenta puede observarse o medirse antes de la fecundacin. Por ejemplo, la altura de la planta se puede medir antes de la fecundacin, pero el contenido en protena de la semilla no. Si la seleccin se hace antes de la antesis, las plantas se eliminan y se permiten cruces aleatorios slo entre las elegidas. Si se hace despus de la fecundacin, las plantas seleccionadas se habrn cruzado, en parte, con las no deseadas. Cuando la poblacin es muy variable, la presin de seleccin debe ser suave, para dar oportunidad a que se mezcle bien los caracteres. Despus de varios ciclos se debe llevar a cabo un ciclo de seleccin fuerte para escoger los individuos ms sobresalientes y obtener as la mxima respuesta. De lo contrario, si utilizamos siempre una presin de seleccin fuerte, la variabilidad gentica se agota rpidamente, esto conduce a la homocigosis y por tanto a poca respuesta a la seleccin. La efectividad de la seleccin masal depende entre otros factores de los caracteres en estudio y del tipo de herencia que estos tengan. Es ms efectiva para aquellas caractersticas de alta heredabilidad como: la altura de la planta, resistencia a enfermedades, precocidad, prolificidad, alto contenido 189

de protena, adaptabilidad, etc. por otro lado, dicha seleccin es poco efectiva para las caractersticos de baja heredabilidad, como: rendimiento, acame, resistencia a insectos, etc. Se puede afirmar que el xito de la seleccin masal se debe a los siguientes factores: Tcnicas adecuadas de campo. Alta heredabilidad. Amplia variabilidad genetica.

37.1 Requisitos para una seleccin masal adecuada.

Para adelantar un programa de seleccin masal en plantas algamas se deben de considerar los siguientes factores: Aislamiento del lote donde se har la seleccin; este se puede llevar a cabo mediante las siguientes practicas: Distancia: estableciendo una distancia mnima entre los lotes de seleccin y otros de produccin comercial, teniendo en cuenta que el polen de las plantas algamas se transportan por el viento a grandes distancias. Fecha de siembra: adelantando o retrazando la siembra de los lotes para seleccin con aquellos lotes comerciales sembrados alrededor es otra forma eficaz de aislar los lotes. Barreras artificiales: se utilizan cuando no se puede aislar el lote mediante algunas de las formas anteriores Factores ambientales: entre los mas importantes se encuentra la Uniformidad del terreno: en lo que respeta a fertilidad, profundidad, textura, pendiente, como de la buena preparacin del terreno. Practicas culturales uniformes: esto quiere decir la siembra se realice a la misma profundidad y a la misma distancia, la fertilizacin tambin debe ser uniforme, en lo posible se recomienda sobre fertilizar el lote para eliminar posibles diferencias en la fertilidad del suelo. Se debe planificar el riego, de tal manera que se suministre el agua en el momento en que lo necesite el cultivo. El control de malezas, plagas y enfermedades, debe ser muy eficiente y uniforme de tal manera que las diferencias presentadas en los resultados se atribuya principalmente a la constitucin gentica de las plantas y no a efectos de estos factores. Presin e intensidad de seleccin: Se debe aplicar una adecuada presin de seleccin que no cause endocra, esto se logra con una presin que puede variar de 10 a 20%. En teora, mientras la presin sea 190

ms intensa se obtienen mayores ganancias, pero tambin se provoca ms rpido la homocigosis. Los inconvenientes que presenta la seleccin masal son: Para determinados caracteres la seleccin fenotpica no es la ms adecuada para seleccionar genotipos superiores. La polinizacin incontrolada hace posible que los genotipos superiores hibriden con los inferiores en la poblacin en la que cohabiten.

Se han obtenido buenos resultados prcticos en remolacha, alfalfa, maz, trbol, etc., que justifican la aplicacin de la seleccin masal en determinadas circunstancias y caracteres. Las especies algamas y autgamas, responden similarmente a la seleccin masal. Ambas tienden a responder en la direccin de la presin de seleccin y ambas retendrn considerablemente la variabilidad. A continuacin se describen las distintas variaciones de la seleccin masal.

37.2 Seleccin masal estratificada.

Este mtodo de seleccin masal fue propuesto por Gardner en 1961, para ser aplicado a materiales de amplia variabilidad gentica, posteriormente otros fitomejoradores han modificado y ampliado esta metodologa. Consiste en una estratificacin o divisin de las parcelas de evaluacin / Se recombinacin en reas de igual tamao y preferiblemente cuadradas. Se sugieren 25 subparcelas, las cuales resultan de dividir el lote en cinco franjas de 10 m. de largo y subdividir cada franja en 10 surcos (ver figura #). Dentro de cada subparcela se eligen las mejores plantas, como en la seleccin masal ordinaria.
Figura 60.Representacin de Seleccin Masal Estratificada.

191

El objetivo principal de esta modificacin es, precisamente, reducir dentro de cada subparcela el efecto ambiental que se tiene en toda la parcela; lo anterior permite una mayor eficiencia en la seleccin, al trabajar ms sobre la variacin gentica.

37.3 Seleccin masal convergente-divergente.

Para la aplicacin de este mtodo, se requiere definir una regin amplia o rea grande en cuanto a diferencias ambientales (suelo, temperatura, humedad, etc.), as como integrar una poblacin base de amplia variabilidad gentica, para ello se puede hacer lo siguiente: i) Recolectar variedades criollas de las localidades representativas de diferentes ambientes del rea o regin agroecolgica definida. ii) Formar una mezcla de igual nmero de semillas de cada una de los materiales recolectados. Estas semillas se siembra en un lote aislado de la localidad de evaluacin y las semillas obtenidas de esta recombinacin se convierte en la poblacin base de amplia variabilidad gentica. Una vez formada la poblacin base, se subdivide en muestras de acuerdo con las localidades previamente definidas, en donde se sembrarn los materiales para la seleccin (divergencia). Los lotes de siembra en cada localidad deben estar aislados, con la suficiente rea que permita tener un buen nmero de individuos. En la cosecha de cada localidad se aplicar una presin de seleccin del 5% aunque est vara de acuerdo a los objetivos del fitomejorador, seleccionando las plantas que posean las mejores caractersticas agronmicas deseables. De esta manera se obtiene el primer ciclo de seleccin masal en todas las localidades. El segundo y tercer ciclo se lleva a cabo de la misma manera. Despus del tercer ciclo de seleccin en cada localidad, se toma una muestra de semilla de cada una de ellas, se forma una mezcla de todas y se siembra en un lote aislado en el campo experimental inicial (convergencia) con el fin de recombinar por una generacin. En la cosecha, la semilla obtenida se divide nuevamente de igual manera y con el mismo nmero de muestras, se llevan nuevamente a las localidades iniciales para evaluar el segundo ciclo de seleccin convergente-divergente. (figura 61). Durante la realizacin de cada ciclo de seleccin por localidad, deben evaluarse paralelamente los ciclos anteriores, incluyendo la variedad original y los testigos regionales. El objetivo de estas evaluaciones es ver la ganancia que se est obteniendo por ciclo de seleccin en cada localidad. 192

Al hacer la divergencia y la seleccin en cada una de las localidades se aslan los genotipos deseables de cada uno de ellas y al hacer convergencia se renen por medio de la recombinacin todos los genes deseables. As se puede esperar que el material obtenido sea adaptable a toda el rea o regin a la que pertenecen las localidades en donde se realiz la seleccin.
Figura 61. Esquema de metodologa de la seleccin masal Convergente-divergente.

193

38. Leccin 38. Seleccin Recurrente intrapoblacional.

Se conoce como seleccin recurrente los mtodos de fitomejoramiento en los que se llevan a cabo ciclos alternantes de seleccin y cruzamiento. Seleccin para elevar la frecuencia de genes favorables en la poblacin de plantas a mejorar y cruzamiento de las mejores plantas entre s, para mantener la variabilidad gentica que permita obtener las mejores combinaciones gnicas, en el caso de seleccin recurrente intrapoblacional se busca mejorar el comportamiento dentro de una poblacin dada Todas las modalidades de seleccin recurrente tienen el mismo fundamento gentico, que es el siguiente: En una poblacin algama, todas las plantas que muestran determinada intensidad de expresin de un carcter favorable, regulado por genes mayores o por poligenes, no tienen necesariamente el mismo genotipo. Por ejemplo, si un carcter favorable depende, en su mxima expresin, de los genes dominantes A, D, E, F, G, y H, y de los recesivos b, c y g, pueden existir en una poblacin genotipos con la misma intensidad del carcter, tales como: A_ B_ ccddE_ ffgghh aaB_C_D_ eeF_G_H_ aabbccddeeF_gghh y otros. Si somos capaces de seleccionar en esta poblacin, plantas que muestren una expresin fenotpica del carcter favorable superior a un nivel dado y luego las cruzamos entre s de manera forzada o en polinizacin libre, podemos conseguir una nueva poblacin en la que la frecuencia de genes favorables sea superior a la poblacin inicial y en la que la recombinacin haya producido genotipos superiores. Si efectuamos en esta poblacin un nuevo ciclo de seleccin y recombinacin, podremos conseguir un mayor grado de acumulacin de genes favorables. Para Ceballos (2000). El xito de la SR depende de numerosos factores. Uno de ellos, quizs el ms obvio, es que exista suficiente variabilidad gentica para permitir progreso en la direccin deseada. En otras palabras, las frecuencias allicas al comenzar el programa de mejoramiento, tendrn una gran influencia en los resultados del mismo, sean stos a corto, mediano, o largo plazo. Es precisamente reconociendo este requerimiento, que los fitomejoradores prestan gran cuidado y atencin a los materiales con los que se iniciar un determinado programa ya sea utilizando SR u otro mtodo de mejoramiento como el de retrocruzamiento. Si se cuenta con numerosas poblaciones y la variabilidad gentica es similar en todas ellas, entonces se puede elegir la que presente el mejor promedio para el o los caracteres a 194

mejorar. Por el contrario, si entre las poblaciones iniciales existen diferencias en cuanto a variabilidad gentica, sta debe tenerse en cuenta junto con los respectivos promedios. Una ilustracin simplificada de los objetivos de la SR se presenta en la Figura 62. En este ejemplo idealizado, se asume una poblacin de tamao finito y que la variabilidad gentica en los distintos ciclos de seleccin ha permanecido inalterada, aunque el promedio poblacional se desplaz en la direccin deseada. Se trata de una seleccin para una sola variable. Resultados como los presentados en la Figura 62 rara vez pueden apreciarse luego de un slo ciclo de seleccin para la mayora de los caracteres a mejorar. Se pretende simplemente ilustrar el potencial de este mtodo de mejoramiento, luego de varios ciclos de seleccin.
Figura 62. Distribucin de frecuencias y medias poblacionales luego de dos ciclos de seleccin recurrente.
Ciclo 0 Frecuencia Poblacin original Xo s Ciclo 1 Frecuencia XS 0

X1 G1

XS1 G1 = X1 - X0

Frecuencia

Ciclo 2 X2 G2 G2 = X2 - X0

La variabilidad gentica permanece inalterada, pero la media poblacional se desplaza en la direccin deseada, resultando en un progreso gentico (G).

Fuente: Ceballos, 2000. Los objetivos resumidos de la SR son: Modificar las medias poblacionales mediante el incremento de la frecuencia de alelos deseables para el (los) carcter(es) a mejorar. Mantener la variabilidad gentica de modo que sea posible un progreso continuo en cada ciclo sucesivo de seleccin. Cul de los numerosos mtodos de SR un fitomejorador emplear, depender de numerosos factores tales como: modo de reproduccin del 195

cultivo, la herencia y tipo de carcter a mejorar, producto requerido (hbrido, variedad de polinizacin abierta, lnea pura, variedad sinttica, etc.). Con excepcin de la seleccin masal fenotpica, todos los mtodos de SR incluyen tres etapas claramente identificables as: i) Obtencin de progenies. ii) Evaluacin de progenies en el (o los) ambiente(s) adecuado(s). iii) Seleccin y recombinacin de las mejores progenies para iniciar un nuevo ciclo de seleccin. Ceballos (2000) Grficamente se pueden representar estos conceptos tal como se ilustra en la Figura 63. Ntese claramente la naturaleza cclica de la seleccin recurrente, y cmo cada ciclo debe producir germoplasma superior que es luego usado por el fitomejorador para los propsitos de su programa de mejoramiento. Es importante destacar que cada etapa de la SR est definida por elementos llamados Unidad de Seleccin (en la etapa de evaluacin), Unidad de Recombinacin (durante los cruzamientos de progenies seleccionadas) y Nuevo Ciclo de Seleccin o Poblacin Mejorada (con la obtencin de nuevas progenies a partir de la etapa anterior). Es necesario entender la diferencia entre la unidad de seleccin y la de recombinacin para poder calcular con precisin las ganancias genticas que se esperan lograr como resultado de la seleccin
Figura 63. Esquema bsico de mejoramiento por seleccin recurrente con sus tres etapas y Los elementos que la caracterizan.

Cada ciclo de seleccin produce germoplasma superior que es usado por el fitomejorador para la produccin de cultivares comerciales

196

38.1. Seleccin recurrente usando promedios de familias.

A diferencia de la seleccin masal, los siguientes mtodos de mejoramiento que se describirn incluye alguna forma de evaluacin de progenies, en los que los genotipos se evalan y seleccionan en trminos de comportamientos promedio. Esta distincin es muy importante, pues se busca basar la seleccin en valores genotpicos no fenotpicos y si se seleccionan genotipos a partir de medias de ensayos replicados, frecuentemente a travs de numerosos ambientes, las varianzas fenotpicas de medias sern mucho menores que las correspondientes a plantas individuales, como es el caso en la seleccin masal. Tambin la interaccin genotipo x ambiente tendr un efecto menor.

38.2. Seleccin de medios hermanos: mazorca por surco modificada (Lonnquist 1964).
Este mtodo consiste en la seleccin entre y dentro de familias de medios hermanos (MH) y fue propuesto para el caso especfico de maz, aunque es adaptable a otros cultivos. El trmino de medios hermanos se refiere al nmero de progenitores que los individuos tienen en comn, en este caso slo uno en comn, sea el padre o la madre. Luego de obtener las familias MH se siembran en ensayos con una replicacin en varios ambientes como se ilustra del la figura 64. Simultneamente con la evaluacin, se siembran en un bloque aislado las mismas familias, cada una en surcos individuales (como en los lotes de evaluacin), los que actuarn como hembra ya que son despanojados (o emasculados), antes que ocurra la floracin. Adems se intercalan, cada cierto nmero de surcos, uno que actuar como fuente de polen. Este surco denominado 'macho', consiste en un 'masal balanceado' con semilla de todas las familias que definen la poblacin. La unidad principal de evaluacin-seleccin ser cada una de las familias de MH. Una vez identificadas las mejores familias (seleccin entre), se cosechan en el lote de recombinacin, las mazorcas de las mejores plantas de esas familias (seleccin dentro). Por otro lado, si una planta macho poliniza a cuatro o seis plantas hembra diferentes y la semilla de cada una de ellas se siembra en surcos individuales, las plantas dentro de cada surco son hermanos completos HC, porque tienen el mismo padre y la misma madre. As, las plantas de surco uno son MH de las plantas del surco dos; estos a su vez son MH de las del surco tres y as sucesivamente ya que tienen un padre en comn (macho) pero diferente madre. 197

Tambin, si la semilla de las plantas hembras polinizadas por un macho comn se mezcla en cantidades iguales, se da origen a una familia de MH. Las familias de MH estn ms relacionadas entre s que aquellas de HC, debido a que las de MH se originan al cruzar una hembra con varios machos o viceversa, es decir tienen un padre en comn, mientras las familias de HC se originan al cruzar pares de plantas, todos diferentes.
Figura 64 . Seleccin de mazorca por surco modificada (Lonnquist, 1964).

Las familias MH se evalan en 3 ambientes y simultneamente se siembran en un lote de recombinacin en el que son emasculadas (surcos hembra). El polen proviene de surcos macho formado por un volumen balanceado de la poblacin. Fuente. Ceballos (2000)

38.3. Seleccin de hermanos completos

Este esquema de mejoramiento es uno de los de mayor eficacia para el mejoramiento de una poblacin y ha sido usado intensamente por el Centro Internacional de Mejoramiento de Maz y Trigo (CIMMYT). Existen numerosas variantes y se utilizan grupos grandes de familias, (nunca menos de 100). Se realizaba una seleccin moderada dentro de surco y al momento de la floracin se efectuaban cruzamientos planta a planta entre las distintas familias para reconstituir un nuevo grupo de familias de hermanos completos. 198

Debido al gran nmero de familias evaluadas, se utilizaban diseos experimentales tipo ltice, que requiere un nmero cuadrtico de tratamientos (13 x 13 = 169, hasta 16 x 16 = 256). Se evalan las familias en ensayos de rendimiento y caractersticas agronmicas deseadas con dos o tres repeticiones en tres o cuatro localidades durante el mismo ao. En la cosecha se selecciona el 10% de las mejores familias de HC. Una vez determinadas las mejores se recurre a la semilla remanente, tomando un 30% ms de semilla de cada una de ellas y se forma un compuesto balanceado de todas las semillas de las familias seleccionadas con la que se inicia un segundo ciclo de seleccin en la siguiente generacin. Para ello, en el momento de la floracin se forman cruzas de la misma manera que en la primera generacin para formar familias de HC e iniciar as el segundo ciclo de seleccin.
Figura 65. Esquematizacin de la obtencin de familias de hermanos completos por medio de cruzas entre pares de plantas

38.4. Seleccin recurrente de lneas S1

El mejoramiento a travs de lneas S1, se ha utilizado para mejorar varias caractersticas, requiere tpicamente de tres estaciones de crecimiento: obtencin de lneas S1, evaluacin en ensayos replicados de esas familias y recombinacin de las mejores lneas para reiniciar otro ciclo de seleccin. En este esquema de mejoramiento se puede realizar seleccin en dos etapas: al recombinar las mejores lneas se pueden formar, por ejemplo, familias de hermanos completos. Estas familias se pueden sembrar en condiciones adecuadas para hacer una seleccin de modo que slo se autofecundan las mejores plantas de las mejores familias HC. Alternativamente las familias HC se pueden sembrar en ensayos a travs de varias localidades y luego de evaluarlas, en el semestre siguiente se siembra semilla remanente de las mejores familias para ser autofecundadas. Esto alarga cada ciclo de seleccin a dos aos, pero reduce considerablemente en nmero de autofecundaciones a realizar. 199

De una poblacin de amplia variabilidad gentica, para el caso de maz, se autofecundan ms o menos 400 plantas agronmicamente deseables para obtener lneas S1. En la cosecha se toman slo 200 mazorcas autofecundadas (lneas S1) de las plantas ms deseables y con suficiente semilla, las cuales se desgranan individualmente; parte de esta semilla se guarda y el resto se utiliza en los ensayos en la segunda generacin. En la segunda generacin, las 200 lneas se evalan en ensayos de rendimiento y caractersticas agronmicas deseables en tres o cuatro localidades, con una o dos repeticiones durante el mismo ao. En la cosecha se selecciona el 10% de las mejores lneas S1. Una vez seleccionadas las mejores 20 mazorcas, se recurre a sus semillas guardadas para recombinarlas en la siguiente generacin; esta recombinacin se realiza a travs de cruzas posibles (dialelicos) y una vez obtenidas las 190 cruzas se forma un compuesto balanceado para integrar una poblacin C1 donde se practicar el siguiente ciclo de seleccin. Se siembra el compuesto balanceado para iniciar el segundo ciclo de seleccin semejante al descrito anteriormente y as sucesivamente hasta formar una nueva variedad mejorada. Este mtodo tiene la ventaja que facilita la eliminacin de individuos recesivos indeseables.

38.5. Seleccin recurrente de lneas S2

El mejoramiento a travs de lneas S2 es similar a la seleccin entre lneas S1, con el alargamiento de un ciclo mas de seleccin para poder llegar hasta el nivel de endocra S2 antes de la seleccin. Como en el caso anterior, en este mtodo se aprovecha los efectos genticos aditivos, ya que ambos son igual de eficaces para cambiar las frecuencias de genes que poseen efectos adictivos, superando a los mtodos de seleccin que implican cruzas de prueba. La seleccin entre lneas S2 se usa generalmente para mejorar el rendimiento, mientras que la seleccin entre lneas S1 se utiliza para mejorar otras caractersticas como resistencia a enfermedades, plagas, adems de rendimiento. La recombinacin se puede realizar con semilla remanente de la generacin S1 o de la S2 aunque el efecto de endogamia es mayor en la S2. La desventaja de este mtodo es que la apariencia fenotpica y produccin de las lneas S1 son superiores a las de las lneas S2; por lo tanto al seleccionar en el nivel S1 puede falsearse la informacin a nivel S2 por lo que quiz las mejores plantas S1 pueden ser las ms malas a nivel S2 .

200

39. Leccin 39. Seleccin recurrente interpoblacional.

Este tipo de seleccin fue propuesta por primera vez por Comstock et al. en 1949. A partir de este trabajo surgieron numerosas modificaciones. Todos estos mtodos se conocen con el nombre genrico de seleccin recurrente recproca. Es un procedimiento para seleccionar simultneamente para Actitud combinatoria general ACG y actitud combinatoria especifica ACE. Para ello se toman dos poblaciones llamadas A y B, que no deben estar emparentadas genticamente, que se mejoran simultneamente y se conocen como poblaciones recprocas. El objetivo bsico es poder usar las dos poblaciones en la derivacin de lneas y producir hbridos comerciales superiores o bien para formar cruzas poblacionales. Como resultado se mejora tanto el comportamiento de las poblaciones como la heterosis de la cruza entre ellas (basada en efectos de dominancia). La seleccin interpoblacional tambin tiene ventaja sobre la intrapoblacional cuando existe alelos mltiples, produciendo mejores hbridos que las derivadas de las poblaciones originales. La desventaja de esta metodologa es quiz que sea un poco ms complicada que los sistemas de mejora intrapoblacional, sin embargo si se realiza seleccin intrapoblacional en las dos poblaciones, la seleccin recurrente reciproca SRR no es ms complicada que la seleccin entre lneas de MH en dos poblaciones. A continuacin, se presentan los mtodos de mejoramiento interpoblacional, con los que se mejoran simultneamente dos o ms poblaciones.

39.1. Seleccin recurrente recproca de familias de medios hermanos

Este mtodo parte de dos poblaciones recprocas A0 y B0, de amplia base gentica. Se elige en A0 m plantas que sern usadas como macho para polinizar un nmero determinado (h) de plantas en B0 las que actuarn como hembras (Figura #). Estas m plantas tambin se autofecundan para producir familias S1. De esta forma se producen m familias de MH, cada una de ellas constituida por h familias de HC. En total se producirn (m x h) familias HC. Lo mismo se hace con la poblacin B0, eligiendo m plantas que sern usadas como macho para cruzarlas con h plantas de la poblacin A0. En este esquema de mejoramiento, la unidad de seleccin son las m familias MH (cada una representada por h familias de HC) y la unidades de recombinacin son las familias S1 originadas en las plantas que produjeron las mejores familias de MH. 201

Una manera normal del procedimiento es seleccionar 100 plantas agronmicamente superiores de la poblacin A. Cada planta se autofecunda y a la vez se cruza con cuatro a seis plantas tomadas al azar de la poblacin B; de la misma manera se autofecundan plantas de la poblacin B y se cruzan con cuatro o seis plantas tomadas al azar de la poblacin A. En la cosecha de la semilla proveniente de las autofecundaciones (lneas S1) de cada planta seleccionada de cada una de las poblaciones, se almacena y la semilla de cada una de las seis plantas cruzadas se mezcla en cantidades iguales (familia de MH) para usarse en pruebas de rendimiento en la segunda generacin.
Figura 66. Esquema representativo del mejoramiento interpoblacional por seleccin recurrente recproca con evaluacin de familias de medios hermanos y recombinacin de familias S1 en las poblaciones A y B.

Fuente Ceballos (2000)

202

En la segunda generacin se evalan las 200 familias de MH formados en A y B (plantas A x B) y (plantas B x A) con dos o tres repeticiones, en tres o cuatro localidades durante el mismo ao; en la cosecha se seleccinale 10% de las mejores familias de MH y se recurre a las semillas autofecundadas de los progenitores masculinos (lnea S1) de las familias de MH seleccionados, para recombinarlos en la siguiente generacin. Para la tercera generacin se realizan cruzas (diallico) en forma separada entre las 10 lneas S1 seleccionadas de la poblacin A y las 10 lneas S1 de B para recombinarlas, al momento de la cosecha se forma un conglomerado base de las 45 cruzas directas obtenidas en cada poblacin para integrar las poblaciones C1 de A y B respectivamente e iniciar el siguiente ciclo de seleccin. Este procedimiento se lleva a cabo en tres generaciones por ciclo. Ya en la cuarta generacin, se siembran por separado los compuestos balanceados provenientes de los diallicos de las poblaciones A y B, para iniciar el segundo ciclo de seleccin.

39.2. Seleccin recurrente recproca de familias de hermanos completos

Esta metodologa es similar a la seleccin recurrente reciproca de medios hermanos. Se emplea para mejorar dos poblaciones y a la vez derivar nuevas lneas de estas poblaciones bajo seleccin. Se cruzan pares de plantas entre las dos poblaciones A y B de amplia base gentica y no relacionados genticamente y con potencial prolfico en cuanto al nmero de inflorescencia. A la vez se autofecundan los progenitores masculinos de cada cruza (directa o reciproca), as en esta generacin se forman simultneamente los HC y las lneas S1 en las dos poblaciones (ver figura #9). Esta metodologa es particularmente til cuando las poblaciones pueden producir dos o ms inflorescencias. Las semillas proveniente de las autofecundaciones (lneas S1) de cada progenitor masculino de las cruzas, se almacena. La semilla de cada cruza (S0 x S0) directa y reciproca se mezcla (HC) para usarlas en pruebas de rendimiento en la siguiente generacin. En la segunda generacin se evala los HC (S0 x S0) en varias repeticiones y en varias localidades durante el mismo ao y en la cosecha se selecciona el 10% de las mejores familias de HC. Obtenidas estas semillas seleccionadas, se recurre a las semillas de las lneas S1 en A y en B progenitores masculinos de las familias de HC seleccionadas para recombinarlas en la siguiente generacin.

203

Ya en la tercera generacin se realiza la recombinacin mediante diallicos, en forma separada las lneas seleccionadas de cada poblacin A y B. A la cosecha se forma un compuesto balanceado de las cruzas obtenidas en cada diallico para obtener poblaciones C1 de A y B, respectivamente para el siguiente ciclo de seleccin.
Figura 67. Esquema de seleccin recurrente recproca con evaluacin de familias de hermanos completos

39.3. Modificacin de la seleccin recurrente recproca de medios hermanos usando bloques aislados
Este es el mtodo de seleccin recurrente reciproca modificado por Paterniani (1967), en el que las familias de medios hermanos se producen despanojando el progenitor de la misma, quien acta como hembra. Se puede comenzar con cualquier tipo de familia (en el mtodo original se propone 'mazorcas de polinizacin abierta', es decir, familias de medios hermanos) haciendo siembras de mazorca por surco en dos bloques aislados de recombinacin. En el primero se siembran familias de la poblacin A en surcos hembra y un consolidado de la poblacin B en los surcos macho. En el otro lote se hace lo inverso, surcos hembra con la poblacin B y surcos macho con la A. De esta manera se producen los dos grupos de familias de MH que son evaluados en ensayos de rendimiento. Una vez identificadas las mejores familias de MH se obtiene semilla remanente de los progenitores que le dieron origen, la que es sembrada para la etapa de recombinacin. En este caso, por lo tanto, se tendran familias MH tanto en la etapa de evaluacin como en la de recombinacin, pero debe quedar claro que no se trata de las mismas familias de MH (unidad de evaluacin unidad de recombinacin).

204

39.4. Modificacin de la seleccin recurrente recproca de medios hermanos usando plantas prolficas.
Esta segunda modificacin propuesta por Paterniani al mtodo original, tambin usa plantas prolficas. La poblacin A se siembra en un lote aislado de recombinacin (lote-I), actuando como hembra y es polinizada por la poblacin B, sembrada en surcos macho. En otro lote de recombinacin (loteII) se hace lo mismo pero con la poblacin B como hembra y la poblacin A como macho. Al momento de la floracin se colecta un masal de polen de la poblacin A (que se puede obtener de los surcos macho del Lote-II), y se poliniza la segunda mazorca de las plantas de la poblacin A usadas como hembra en el Lote I. Tambin se colecta una muestra de polen de la poblacin B (en los surcos macho del Lote-I), para polinizar la segunda mazorca de las plantas de los surcos hembra en el Lote-II. De modo que en el Lote-I se obtienen familias de MH (AxB) de la cruza entre las poblaciones A y B (mazorcas polinizadas libremente), y familias de MH (AxA) dentro de la poblacin A (segundas mazorcas que fueron polinizadas manualmente). Lo inverso ocurre en el Lote-II. Las familias de MH de las cruzas (AxB) y (BxA) son evaluadas en ensayos de rendimiento (unidad de evaluacin). Posteriormente, la semilla (AxA) y (BxB) de los progenitores de las mejores familias de MH de acuerdo a las evaluaciones es usada para la recombinacin. Ceballos (2000). Este mtodo es relativamente simple de implementar y cada ciclo se completa en dos aos.

205

40. Leccin 40. Seleccin por hibridacin.

Un hbrido es el descendiente de dos padres que difieren en uno o ms rasgos heredables. Sus padres pueden pertenecer a clones, variedades de polinizacin abierta, lneas puras o de especies distintas, por lo tanto la hibridacin es la accin de fecundar dos individuos de distinta constitucin gentica, es decir, cruzar dos variedades o especies diferentes para conseguir reproducir en la descendencia, alguno de los caracteres parentales. Cuando el cruzamiento es factible, los hbridos suelen mostrar mayor vigor que los parentales, es decir que la hibridacin se utiliza para aprovechar la heterosis mejor que cualquiera de los mtodos de mejora utilizados hasta ahora, lo que da lugar a un mayor rendimiento. Este fenmeno ha sido aprovechado en la produccin a gran escala de determinados cultivos de cereales de gran importancia econmica, tales como el maz, aunque tambin es apreciable la contribucin que las semillas hbridas han supuesto en numerosas variedades de hortalizas y plantas ornamentales. De la combinacin de los caracteres genticos parentales se derivan tambin otros rasgos indeseados, es por ello que tras la hibridacin suele ser necesario realizar un proceso de seleccin artificial durante varias generaciones, eliminando as aquellas plantas que sostengan rasgos desfavorables, para que predominen slo los deseados. Cuando se logra obtener hbridos cuyos caracteres deseados ya estn suficientemente desarrollados, se suelen reproducir por mtodos asexuales, de esta forma se consigue sostener los rasgos idnticos entre individuos. Con mtodos sexuales se interferiran los rasgos y probablemente se perderan a las pocas generaciones. La hibridacin aumenta la variabilidad gentica de determinados caracteres que son deseados y que el fitomejorador ha juntado a travs de la seleccin y cruza de los mejores progenitores que presentan las recombinaciones deseadas y en las cuales continuara con la seleccin hasta lograr lo deseado. Para lograr la hibridacin es muy importante identificar los progenitores masculinos y femeninos o si son hermafroditas la morfologa de la flor, para poder orientar los cruzamientos, bien sea evitando la llegada de polen extrao a cada planta mediante aislamiento espacial o protegiendo los rganos florales con bolsas de papel o tela espesa o densa; para lo cual se debe: Hacer un cuidadoso estudio de la estructura floral. 206

 Determinar cules son las flores que producen semillas de mayor tamao. Determinar el momento normal y las caractersticas de la dehiscencia de las anteras, as como el espacio de tiempo que el estigma permanece receptivo y el polen funcional. Tener cuidado en los procesos de emasculacin y polinizacin para no daar los rganos florales, utilizando los instrumentos necesarios. No eliminar los verticilos florales, ptalos, glumas, etc. a menos que sea indispensable.

40.1. Hbridos entre lneas consanguneas

La utilizacin de la heterosis a escala comercial se hace patente en las variedades hbridas o sencillamente hbridos. Variedades hbridas son aquellas en las que las poblaciones F1, se usan para producir semilla comercial. El trabajo pionero sobre hbridos comerciales se hizo en maz y su repercusin en la agricultura y economa mundiales fue muy grande. Se pueden distinguir distintos tipos de hbridos: simples, dobles y triples.

40.1.1Hbridos simples Un hbrido simple es el que se obtiene cruzando dos lneas puras, para tener xito con los hbridos es necesario: Elegir cuidadosamente las lneas consanguneas, de manera que tengan buena aptitud combinatoria entre ellas, es decir, que la combinacin hbrida presente superioridad.
Figura 68. Esquema del diseo para la siembra de un hibrido simple

207

40.1.2 Hbridos dobles Un hbrido doble se obtiene del cruzamiento entre 2 hbridos simples. Por tanto en su composicin intervienen cuatro lneas puras diferentes. La semilla del hbrido doble es ms barata que la del hbrido simple, ya que se obtiene sobre las plantas de hbridos simples con alto rendimiento y muy vigorosas. Presentan mayor plasticidad adaptacin a variaciones ambientales anuales. Su variabilidad al ser un cruzamiento entre dos F1, puede ser un inconveniente. Si se hace una seleccin adecuada de las lneas parentales es posible obtener hbridos dobles que sean casi iguales a los simples en rendimiento. Los hbridos dobles son ms variables que los simples pero presentan una mayor adaptacin. Figura 69. Esquema del diseo de siembra de un hbrido doble.

40.1.3 Hbridos triples Un hbrido tres vas, es el resultado del cruzamiento de un hbrido simple, como parental femenino y una lnea consangunea como macho. Tiene la ventaja del menor costo de la semilla. Sus caractersticas son intermedias entre hbridos simples y dobles. Como el hbrido doble, tiene mayor plasticidad que el hbrido simple y menor variabilidad que el doble. Se siembran menos.

208

40.2. Utilizacin de la androesterilidad para la produccin de semilla hbrida

Se utiliza el trmino general de androesterilidad, para referirse a todo fenmeno en el cual el gameto masculino no es funcional. Las causas genticas que determinan la androesterilidad pueden estar controladas por genes nucleares (androesterilidad gnica), por genes citoplsmicos (androesterilidad citoplsmica) o por la interaccin de ambos (androesterilidad gnico-citoplsmica o ncleo-citoplsmica). La androesterilidad se utiliza en mejora de plantas para la produccin de cruzamientos controlados sin la necesidad de emascular (castrar o extirpar las anteras) del genitor que acta como hembra. 40.2.1. Androesterilidad gentica.

Generalmente la regulacin gentica de la androesterilidad gnica suele ser muy sencilla. En muchos casos es monognica recesiva. Se suele representar por ms ("male sterile") y un subndice cuando hay varios loci. Pero tambin puede estar controlada por genes dominantes o por la interaccin de dominantes y recesivos. Supongamos que la androesterilidad est determinada por un gen ms recesivo. Los genotipos y fenotipos posibles sern: MsMs frtil Msms frtil msms androestril El proceso a seguir para obtener semilla hbrida sera: Primera generacin, cruzar un lnea androestril msms con una lnea frtil MsMs, de este cruce, se obtiene una descendencia heterocigoto frtil Msms, la cual se autofecunda. Para la siguiente generacin parte de la semilla obtenida se reserva y la otra parte se siembra, obtenindose la siguiente proporcin fenotpica 1/4MsMs, homocigota frtil, Msms, heterocigoto frtil y 1/4 msms homocigota estril. Toda esta semilla obtenida se siembra en lneas alternas de MsMs con la que se haba reservado del tipo Msms, como se indica en la figura #: y de aqu se obtiene plantas Msms y msms. Antes de la antesis se eliminan de los surcos Msms o genotipos frtiles, quedando slo los individuos msms. Estos al ser polinizados con B (Msms) producirn Msms, y msms. Esta mezcla genotpica de semilla puede ser ya multiplicada indefinidamente, bastando para ello recoger exclusivamente la semilla producida sobre las plantas msms, que habrn sido marcadas convenientemente. (ver documento anexo Seleccin Recurrente utilizando Androesterilidad Gentica CIAT, CIRAD). 209

MsMs x msms Msms x msms

Msms 100% frtil Msms + msms

La forma heterocigtica Msms se guarda. 40.2.2 Androesterilidad citoplasmtica. La androesterilidad citoplsmica ha sido observada en ms de 150 especies vegetales. Este fenmeno y su restauracin a travs de genes nucleares son dos componentes esenciales en la produccin comercial de la mayora de los cultivos hbridos. La caracterstica esencial de la androesterilidad determinada por factores citoplsmicos es que se transmite de forma continua de generacin en generacin, siempre que se disponga de un individuo que acte como polinizador. Como el citoplasma de la descendencia es casi exclusivamente materno (cabra considerar la posibilidad de que el gameto masculino aportara algo de citoplasma en el momento de la fecundacin), la descendencia de las planta androestril ser siempre androestril. La androesterilidad citoplasmtica fue descubierta en el caso del maz por Rhoades en 1931. Este tipo de esterilidad evita que las espigas produzcan polen funcional. Se transmite a travs del citoplasma de las clulas germinales y no a travs de los cromosomas, como en la mayora de los caracteres. La androesterilidad citoplasmtica no sucede normalmente en las lneas normales, por lo tanto el citoplasma estril debe introducirse cruzando regresivamente la progenie comercial de tres a cuatro veces y solo se seleccionan las plantas estriles con las caractersticas de la variedad comercial escogida en cada generacin.
Figura 70 .Representacin esquemtica del proceso de produccion de una lnea mejorada (L203) con androesterilidad

210

Las sublneas deben probarse en cruzas simples, para eliminarles los genes restauradores del polen. La variedad seleccionada por androesterilidad se mantiene y se incrementa para ser usada en la poblacin de semilla, cruzndola con el progenitor comercial original normal y utilizando la variedad masculina como progenitor femenino. (Ver esquema de proceso de de una lnea mejorada con androesterilidad citoplasmtica). 40.2.3 Androesterilidad gentica-citoplasmtica . La diferencia entre este tipo de androesterilidad y la citoplasmtica estriba en que la descendencia obtenida por el cruzamiento de una planta androestril, como hembra naturalmente y una frtil no tiene que ser necesariamente androestril, sino que depende del genotipo de la planta que acta como padre. Algunos autores emplean el trmino "citoplsmica" como abreviado del "gentico-citoplsmatica", aunque no resulta del todo correcto. La androesterilidad gentica-citoplasmtica ocurre por una doble mutacin

Tipos de androesterilidad gentica-citoplasmtica que se pueden generar

Citoplasma

Ncleo

Condicin

N N N S S S

MsMs Msms msms MsMs Msms msms

Frtil Frtil Estril Frtil Frtil Estril

La androesterilidad en cebolla es de origen citoplasmtico y gentico. Se han detectado dos sistemas de androesterilidad gentico-citoplasmtica en cebolla, la llamada S y la T. Este tipo de esterilidad se debera a la incompatibilidad entre el genoma mitocondrial y el nuclear. La androesterilidad S se hall por primera vez en el cultivar Italian Red y est condicionada por la interaccin del citoplasma con un gen nuclear. Por ello para producir semillas hbridas se necesitan tres lneas; la lnea androestril o lnea A, la lnea mantenedora o lnea B, empleada para la perpetuacin de la lnea androestril; y una tercera lnea no relacionada con las anteriores o 211

lnea C que tenga buena aptitud combinatoria con la lnea A y sea frtil. El cruzamiento de A x C origina las semillas hbridas o FI, mientras que el cruzamiento de A x B sirve para mantener la lnea A. Las lneas C y B al ser frtiles se mantienen por s mismas. Las lneas padres del hbrido se mantienen por el mtodo bulbo-semilla, sin embargo para el cruzamiento A x C se puede utilizar el mtodo semilla-semilla en uno o ambos padres. La eficiencia del cruzamiento de las lneas A y C es de fundamental importancia en el xito de la produccin de semillas hbridas. Para ello, entre los distintos cuidados que se deben tener en cuenta, se destacan el uso correcto de los polinizadores, la sincronizacin de la floracin y el empleo de relaciones adecuadas entre las lneas androestriles y androfrtiles. Formacin comercial de hbridos de cebolla de bulbo. Lnea A macho estril Smsms Lnea B Mantenedora Nmsms Linea C Lnea R Restauradora NMsMs Lnea comercial LA x LC frtil
Figura 71. Esquematizacin proceso de produccion de un hibrido de cebolla utilizando androesterilidad gentica-citoplasmtica

212

41.

Leccin 41. Seleccin en variedades sintticas

Se denomina variedad sinttica a la generacin avanzada que procede de semilla obtenida por polinizacin libre entre varios genotipos de una especie vegetal y en la que sus progenitores han sido seleccionados por su aptitud combinatoria general. Estos genotipos pueden ser lneas consanguneas, clones poblaciones seleccionadas por diferentes procesos de mejora, (hbridos)etc. En muchos casos, esta variedad sinttica acumular genes para distintos caracteres favorables, tales como productividad, precocidad, resistencia a una enfermedad o una plaga, calidad, etc. La variedad sinttica puede ser entonces utilizada para su multiplicacin y entrega a los agricultores o bien, como almacn de reserva de genes en Centros de Mejoramiento. Generalmente, se usa o se intenta usar comercialmente. Las variedades sintticas se pueden obtener, por ejemplo, a partir del cruzamiento intervarietal entre plantas algamas, sobre todo si ambas variedades se han mejorado en su aptitud combinatoria, por seleccin recurrente recproca. Las lneas consanguneas son buenos candidatos para la obtencin de una variedad sinttica porque no son difciles de mantener. Slo los genotipos que se combinan bien entre si en todas las combinaciones entran en la variedad sinttica. Este ensayo previo del comportamiento de los hbridos distingue una variedad sinttica de una variedad obtenida por simple seleccin masal . Se ha visto que los hbridos simples, los triples y los dobles pueden servir como variedad sinttica aunque el costo de produccin de semilla de esta ltima es mucho menor que el de una variedad hbrida, ya que la variedad sinttica puede usarse en un gran nmero de generaciones. Esto sugiere que la variedad sinttica puede sustituir a los hbridos en aquellas situaciones en las que la produccin de semilla hbrida no es de fiar o los costes son muy altos. La productividad de una variedad sinttica depende del nmero de genotipos que entran en su formacin, del rendimiento medio de cada uno de ellos en cruzamiento con los dems, de su aptitud combinatoria, y del sistema de reproduccin de la planta, es decir, de su proporcin relativa de auto y alogamia. Para calcular el rendimiento esperado en F2 de una sinttica formada por un nmero cualquiera de lneas consanguneas, Wright en 1922 desarroll una frmula, la cual dice que: la produccin de la descendencia de los hbridos de n lneas consanguneas vendr disminuida sobre el valor medio de los hbridos en una n-sima parte de la diferencia de produccin entre el valor medio de los hbridos y el valor medio de las lneas consanguneas. Es decir: 213

F2 = F1 (F1 P) / n en donde F2= rendimiento esperado en la F2 F1= rendimiento promedio de todos los hbridos F1 en todas las combinaciones de las lneas consanguneas P = rendimiento promedio de las lneas consanguneas n = nmero de lneas consanguneas Admitiendo que una vez establecida una variedad sinttica se comporta como una poblacin panmctica, entonces no habr prdida de vigor en las sucesivas generaciones, ya que no cambian las frecuencias gnicas ni genotpicas. Es decir, el vigor de la F2se mantiene en la F3, F4, etc. (No es del todo correcto llamar a estas generaciones F2, F3, F4). Por consiguiente, la productividad de una variedad sinttica depende del nmero de lneas que la componen, la produccin media de las lneas y la produccin media de las n (n - 1)/2 -hbridos posibles.

41.1. Prueba de policruzamiento o poly-cross

Cuando se parte de una coleccin de lneas homocigticas, de clones o de descendencias obtenidas por autofecundacin en una poblacin, se puede elegir los genotipos que van a formar la variedad sinttica mediante la tcnica del policruzamiento. En la obtencin de una variedad sinttica, en cuanto se disponga de gran nmero de genotipos, es materialmente imposible la realizacin de los cruzamientos por parejas de todos ellos. La tcnica del policruzamiento o polycross permite estimar, en una coleccin de genotipos, la aptitud combinatoria media de cada uno de ellos con el conjunto de todas los dems. Esta prueba requiere que el material se cultive todo junto bajo condiciones de polinizacin abierta. El material de partida suele ser: Una coleccin de lneas homocigticas, puras consanguneas. Una coleccin de clones. Una coleccin de descendencias procedentes de la autofecundacin de cierto nmero de plantas de una poblacin. 41.1.1 Variedades sintticas de lneas homocigticas. Para ejemplarizar la produccin de variedades sintticas de lneas homocigotos, nos puede servir el centeno. Supongamos que disponemos de 50 lneas. Situaremos el campo de policruzamiento aislado y en l se 214

siembran fajas paralelas de cinco o ms surcos de cada lnea pura. Luego se siembra otra faja de lneas paralelas semejante con las lneas de cinco o ms surcos distribuidas al azar y as sucesivamente hasta un total, por ejemplo, de veinte fajas. Es preciso reservar semilla de todas las lneas que entran en el policruzamiento. Llegado el momento de la cosecha, se recoge junta la semilla obtenida de todas las repeticiones de cada lnea, semilla que proceder del cruzamiento de la lnea correspondiente con todas las sembradas. Esta semilla sirve para realizar al ao siguiente ensayos comparativos de produccin y averiguar cules son las lneas de mejor aptitud combinatoria con las restantes. La semilla de reserva de las que resulten en este ensayo, las mejores combinaciones, se mezclan en partes iguales y se multiplica en polinizacin libre para producir la nueva variedad sinttica. 41.1.2 Variedades sintticas obtenidas de clones. Si se parte de una coleccin de clones y se dispone, por ejemplo de unas cien plantas de cada clon, stas se plantan en puntos diferentes de la parcela de policruzamiento, poniendo, por ejemplo, cinco plantas en cada punto. A partir de aqu el procedimiento es como si se tratara de lneas. Por este mtodo se han obtenido excelentes resultados en plantas del gnero Festuca, ray-gras, trboles, alfalfa y tambin col de Bruselas. Partiendo de lneas o clones, la variedad sinttica se puede reproducir indefinidamente con la misma composicin gentica si se mantienen las lneas o clones y todos los aos se procede a la plantacin de nuevas parcelas de fundacin. 41.1.3 Variedades sintticas obtenidas de autofecundaciones. Como ejemplo de combinacin de descendencias de autofecundacin nos sirve el maz, en que supondremos que partimos de una poblacin heterognea. El primer ao se autofecundan un nmero elevado de plantas, doscientas o ms. Seguidamente en la parcela de policruzamiento se plantan cincuenta repeticiones de tres plantas cada una, con semilla de las plantas autofecundadas del ao anterior. La siembra, como en los casos anteriores, se realiza sorteando la posicin de las repeticiones. La semilla obtenida al mezclar la de todas las mazorcas procedentes de la autofecundada originaria, procede prcticamente del cruzamiento de cada descendencia con todas las dems. Cada mezcla de grano entra en los 215

ensayos comparativos del ao siguiente, cuyos resultados dan la informacin necesaria para separar, por ejemplo, las veinte mejores descendencias de las que se mezcla semilla en partes iguales, mezcla que, una vez multiplicada, constituye la nueva variedad sinttica. Ver figura #
Figura 72. Esquematizacin de la produccin de una variedad sinttica de maz.

41.2. Variedades sintticas de cultivos forrajeros

El inters por mejorar plantas forrajeras surgi despus de conocerse bien las tcnicas de mejora de plantas autgamas y algamas, inicialmente se aplicaron tcnicas de seleccin masal, posteriormente con la mejora continuada de estas plantas y los avances logrados en maz, se aplican mtodos ms refinados. Se puede obtener una variedad sinttica de una especie forrajera a travs de la combinacin de plantas individuales. En 216

primer lugar se selecciona un gran nmero de plantas con caractersticas sobresalientes, las cuales se cruzan entre ellas y su progenie se somete a una serie de pruebas para determinar su actitud combinatoria, estos ensayos son los siguientes: Ensayo de descendencia de variedades de polinizacin abierta; el cual se realiza con la descendencia derivada de semilla producida en plantas seleccionadas por cruzamiento con otras plantas presentes en las parcelas de ensayo. Ensayo de retro cruza; la semilla con que se realiza el ensayo ha sido obtenida de individuos seleccionados (clones) que han sido sembrados alternadamente con una sola variedad probadora. Ensayo de policruzamiento; la semilla es obtenida a cruzamientos con lneas seleccionadas cultivadas en la misma parcela de ensayo, en la cual todos los clones tienen la misma probabilidad de ser polinizados por los dems este procedimiento se repite varias veces en parcelas aisladas. Ensayo de hbrido simple; en este mtodo cada clon seleccionado se cruza con un cierto nmero de otros clones, cultivando cada clon que se van a cruzar juntos y aislados Los tres primeros tipos de ensayo miden la aptitud combinatoria general y el ensayo del hbrido simple mide la aptitud combinatoria especfica de cada par de clones. Sobre la base del comportamiento de las progenies se efecta la seleccin final de plantas que formaran la variedad sinttica, la semilla de las plantas seleccionadas se mezcla para producir el sinttico, el cual se multiplica despus, a travs de un nmero limitado de generaciones de polinizacin libre. Las plantas originales que forman el sinttico se mantienen como clones, de tal manera que se puede construir la variedad a determinados intervalos. (Figura 73 ).

41.3. Diferencias entre variedades sintticas e hbridos.

Las principales diferencias entre las variedades sintticas y los hbridos se pueden resumir de la siguiente manera. Las variedades sintticas presentan mayor variabilidad que los hbridos Su rango de adaptabilidad es mayor a la de los hbridos La semilla obtenida de estas se puede utilizar por varios aos sucesivas, mientras que la de los hbridos se usa solo en una siembra. Su rendimiento es bueno a regular, siendo el rendimiento de los hbridos superior. 217

Est formada por cruzamientos de lneas u otros materiales; el hbrido se forma de lneas altamente endogmicas. La semilla puede ser producida por el mismo agricultor, contrario a la semilla de los hbridos que la producen las compaas semilleras y resultan ms caras.

Figura 73. Esquematizacin del procedimiento simplificado para la produccin de una variedad sinttica de especies forrajeras

218

CAPITULO 9.
Mtodos de fitomejoramiento no convencional
INTRODUCCIN.
La mejora gentica clsica tiene grandes limitaciones en muchas especies vegetales para las que por diversos factores no es posible el desarrollo embrionario o presentan esterilidad parcial o total. Estas especies en su gran mayora son poliembrinicas, sus ciclos reproductivos y juveniles son muy largos lo que requiere muchos aos para iniciar programas de evaluacin y seleccin. Adicional a esto, est el desconocimiento de los mecanismos genticos que controlan los principales caracteres agronmicos y la forma de heredabilidad de los mismos.
Esta es la causa de que en especies vegetales de reproduccin asexual los programas de mejora sean muy escasos en el mundo, limitndose a algunas especies de alto valor comercial. El procedimiento de mejora que mayores resultados ha proporcionado es la seleccin clonal en campo, aprovechando las

mutaciones espontneas, no obstante, este procedimiento tiene el inconveniente de que las mutaciones se producen al azar y en consecuencia no pueden dirigirse. Los desarrollos espectaculares de diversas tcnicas de biotecnologa que se han producido en los ltimos aos estn permitiendo resolver una parte importante de los problemas de mejora clsica y abordar nuevos objetivos de fitomejoramiento impensables hasta ahora, como es el cruzamientos entre parentales, tetraploides y diploides; la recuperacin de triploides espontneos y obtencin de hbridos somticos entre patrones conocidos entre otros. El uso de modernas biotecnologas ha desvirtuado las barreras entre la clula animal y la vegetal, creando organismos genticamente modificados OGM que escandalizan a los religiosos y ponen en aprietos principios ticos y ecolgicos, pero que a la vez, abren nuevas esperanzas a la agricultura, al bienestar socioeconmico de las comunidades, al medio ambiente y a los sistemas de produccin imperantes.

219

42.

Leccion 42. reproduccin

Mejoramiento de especies de asexual

La reproduccin asexual conduce a la perpetuacin del mismo genotipo con gran ventaja en la mejora de plantas puesto que puede producirse un nmero infinitamente grande de individuos genticamente idnticos independiente del grado de heterocigosis del genotipo, por lo tanto el fitomejorador puede aprovechar los individuos sobresalientes en cualquier momento del programa de mejoramiento, por lo que se puede decir que el proceso de mejoramiento de estas plantas puede resultar ms sencillo que en otras especies. Cuando las plantas se reproducen en forma sexual, el nmero de cromosomas de sus clulas reproductivas o gametos se reduce a la mitad (se designan, entonces, clulas n). La unin de dos gametos en la fecundacin determina que la clula resultante contenga un juego de cromosomas proveniente del padre y otro de la madre, lo que restituye el nmero original (2n) de juegos de cromosomas. Por lo tanto, en el ciclo de vida de una planta se alternan las fases n y 2n Las plantas que normalmente se reproducen de manera asexual presentan problemas de diferentes niveles que impiden que pueda reproducirse efectivamente de manera sexual; un factor es la alta esterilidad del polen, granos de polen aberrantes, incompatibilidad, presencia de ploidias, problemas en la viabilidad y germinacin de la semilla, etc. Para superar estos problemas reproductivos de las especies y poder aprovechar los caracteres favorables que se presentan en las poblaciones de reproduccin asexual, se han desarrollado mtodos como la seleccin clonal, la hibridacin y la mejora en especies apomticas que a continuacin se describen.

42.1. La seleccin clonal.

Este tipo de seleccin se inicia con un estudio intensivo de muchos ejemplares de la especie, de caractersticas muy diferentes para, posteriormente, seleccionar entre ellos slo unos cuantos que destaquen por sus caracteres favorables agronmicamente o por algn inters en especial, de tal manera que se pueda tener identificada toda la variabilidad gentica existente en una misma variedad. Slo despus de haber realizado este tipo de investigacin se puede disponer de una informacin exacta sobre la variabilidad gentica y se est en disposicin de elegir las mejores plantas, cuyos caracteres conviene conservar. Las evaluaciones de las mejores plantas seleccionadas se realizan por largos aos, (mas de tres) y se analizan parmetros fenolgicos como la germinacin, la floracin, la maduracin, etc. Adems, se analiza la calidad y la produccin. Todas las medidas realizadas se introducen en una base de datos. Un programa 220

informtico se encarga de identificar los ejemplares que destacan por sus caractersticas. De acuerdo con los datos se establecen las cabezas de clon (las plantas seleccionadas por poseer alguna caracterstica interesante), para que el agricultor pueda implantar con garantas unas plantas que rendirn de acuerdo al producto que quiera obtener. Luego,durante mas de tres aos se realiza una nueva seleccin de los mejores clones reduciendo el nmero. Posteriormente se injertan entre doce y veinte plantas con estas cepas, convirtindose en copias genticas del clon seleccionado. Estas plantas, los clones, se evaluaran posteriormente en una finca experimental sometidas a un ambiente uniforme. Esta fase permitir la valoracin definitiva de las cabezas de clon. Al ser uniformes las condiciones ambientales, la caracterizacin gentica es ms exacta. En condiciones normales, esta fase suele concluir con la eliminacin de algunos de los clones deficitarios y se mantienen aquellos que realmente destacan por sus propiedades.
Figura 74. Esquematizacin de un programa de seleccin clonal en papa Solanum sp

Fuente: http://www.cipotato.org/training/materials/Tuberculos-Semilla/semilla5-2.pdf

221

Inmediatamente despus de este proceso se realiza la multiplicacin de los clones, seleccionados, libres de virus, los cuales son sembrados en los cultivos comerciales y/o a los viveros, quienes sern los que suministren los clones a los agricultores. Las consecuencias de una seleccin clonal son diversas como las que se mencionan en seguida: Se consigue poner a salvo la variabilidad gentica dentro de cada variedad. Pensemos que la reproduccin tradicional asexual, por yemas, estacas, acodos etc. puede haber reducido la variabilidad en muchos casos y por consiguiente, se ha perdido toda la variabilidad. Se puede poner a disposicin del productor una gama de variantes de la variedad, con caractersticas muy definidas que le permitirn seleccionar aquellas sobre criterios bien establecidos y en funcin de los gustos del consumidor. Se certifica la garanta sanitaria, aspecto de gran importancia que debe cumplirse en toda seleccin clonal, en especial para la presencia de virus, con lo cual se puede garantizar la reduccin de las prdidas en los parmetros de calidad y de produccin aumentando considerablemente la vida media de las plantas

A manera de resumen, la metodologa que se lleva a cabo en la seleccin clonal en es : Preseleccin (prospeccin) clonal: - identidad varietal - caractersticas agronmicas - cualificacin sanitaria Seleccin sanitaria: - diagnstico frente a las virosis:

Seleccin clonal (en sentido estricto): - evaluacin agronmica. La seleccin de la variedad sana y que corresponda a las caractersticas deseadas es el primer paso del proceso de seleccin clonal, esta seleccin es llevada a cabo por varios aos, lo que convierte a estas plantas en el mejor campo plantado con la mejor semilla disponible. Seguido, cada planta seleccionada es evaluada para descartar la presencia de enfermedades. Slo aqullas que resulten negativas continan en el sistema clonal. Es muy importante tambin que las plantas seleccionadas correspondan a la variedad y sean plantas vigorosas y bien formadas. A la 222

cosecha se contina la seleccin y slo se seleccionan las plantas de buen rendimiento. La multiplicacin de cada clon se mantiene ao tras ao por varias generaciones. Los clones seleccionados de una planta seleccionada se siembran juntos al ao siguiente y se va sembrando descendencia de manera exponencial en los aos siguientes al lavez que se eliminan todas las plantas que no renan las caractersticas deseables y las plantas enfermas, aun cuando solo sea una en toda la poblacin. Despus del sexto ao o ciclo de multiplicacin se detiene la multiplicacin de cada clon identificado y ms bien se hacen multiplicaciones en conjunto. En cada multiplicacin, al igual que en todas las multiplicaciones de clones previas, se debern tomar todas las precauciones necesarias para la produccin de semilla y tambin seguir las normas para la produccin de semillas certificadas.

42.2.

Hibridacin y seleccin clonal

La hibridacin se realiza para crear nuevos genotipos, pero est condicionada por el heterocigtico que causa una variabilidad fuerte de los caracteres en la progenie, de donde es necesario seleccionar los mejores. Para entender el proceso de hibridacin y seleccin clonal citaremos el ejemplo del proceso de mejoramiento de la papa solanum tuberosum, especie de reproduccin asexual, tomado de la Revista Latinoamericana de la Papa . 1988. 1(1):35-43 La papa comn tiene cuatro juegos de doce cromosomas cada uno (48 cromosomas en total) en sus clulas somticas, y dos juegos (24 cromosomas en total) en sus gametos. En la mayora de las papas silvestres la situacin es distinta: la clula somtica tiene dos juegos de cromosomas (24 cromosomas) y los gametos uno (siempre de doce cromosomas). La alternancia corriente de fases n y 2n puede modificarse espontneamente o por accin de factores externos. Para entender esto es conveniente definir como haploide a la planta que, por haberse originado a partir de una clula reproductiva que no ha sido fecundada, tiene el mismo nmero de cromosomas que un gameto, es decir n en lugar de 2n. Se pueden obtener haploides de la papa comn. El desarrollo de un nuevo individuo a partir de gametos femeninos o masculinos, sin intervencin de la fecundacin, se denomina partenognesis (de -parthnos-, virgen); segn el sexo de la clula reproductiva que se desarrolle, esta puede ser femenina (ginognesis) o masculina (andrognesis). La capacidad de producir haploides se ha aprovechado para facilitar la incorporacin a la papa comn de ciertas caractersticas deseables 223

de las especies silvestres, pero evitar las dificultades que habitualmente se presentan cuando se pretende obtener hbridos de progenitores con distinto nmero de cromosomas. Hace alrededor de cuarenta aos, un grupo de investigadores de la universidad de Wisconsin, liderados por Stanley J. Peloquin, dise un proceso muy eficiente para obtener gran cantidad de haploides de papa con adecuada diversidad para las necesidades del mejoramiento gentico. Utiliza como madres plantas de papa comn con tallos verdes y como padres, una especie cultivada en los Andes (Solanum tuberosum subespecie phureja) que posee tallos prpura. En ambas, el color del tallo est controlado por un gen que adopta dos formas (o alelos): la p, que controla la formacin de tallos verdes, y la P, que controla la formacin de los prpuras. Como P es dominante, basta que una planta tenga uno de tales genes por clula para que su tallo sea prpura, pero slo se tendrn tallos verdes cuando todos los alelos de la planta que controlan esa propiedad sean de la forma p. Los cruzamientos directos entre papa comn (tetraploide) y la citada especie andina (diploide) no dan progenie debido a que, en las semillas que se forman, se produce un desequilibrio en el endosperma. Por eso, se espera que, de esos cruces, slo resulten plantas con tallo verde, originadas por ginognesis, la nica forma de que todos sus genes sean p. La partenognesis ocurre porque los dos gametos masculinos fecundan la clula central en lugar de fecundar esa clula y el gameto femenino, lo que originara un endosperma equilibrado que estimulara el desarrollo del gameto aunque este no hubiese sido fecundado. Las plantas con tallo prpura que ocasionalmente aparecen entre la descendencia son el resultado de hibridaciones excepcionales. Como el color del tallo se manifiesta en plntulas de pocos das, es muy fcil realizar la seleccin en los almcgos (Figura 75. a). Las plantas haploides son generalmente ms dbiles que las que le dieron origen y su polen es estril. Sin embargo, pueden cruzarse directamente con especies silvestres si se utilizan como madres, lo cual permite incorporar germoplasma silvestre potencialmente til para el mejoramiento gentico, pues los hbridos resultantes, adems de poseer las caractersticas deseables de las especies silvestres, son generalmente muy frtiles y pueden usarse en etapas ulteriores del mejoramiento. Los hbridos obtenidos por cruzamiento de las especies silvestres y los haploides tienen dos juegos de cromosomas (son diploides). El mximo potencial para la produccin de tubrculos se logra con plantas tetraploides (con cuatro juegos de cromosomas). Por lo tanto, luego de haberse obtenido las caractersticas deseadas en plantas con clulas diploides, hay que volverlas tetraploides. Desde el punto de vista gentico, uno de los caminos ms ventajosos para hacerlo es emplear gametos con el mismo nmero de 224

cromosomas que la planta que les dio origen (gametos 2n), en lugar de la situacin habitual, en la que el nmero de cromosomas est reducido a la mitad. Tal tipo especial de gametos puede generarse mediante procedimientos controlados genticamente. Pero as se afecta nuevamente la alternancia de generaciones n y 2n. El esquema de mejoramiento gentico que se ha descrito se denomina analtico-sinttico, debido a que transcurre en dos etapas: en la primera (analtica) se busca mejorar juegos de cromosomas y, en la segunda (sinttica), se ensamblan los juegos de cromosomas mejorados para producir plantas con vigor hibrido que puedan eventualmente constituir una variedad til (Figura 75.b ).
Figura 75. Esquema de los sistemas de mejoramiento genetico utilizado en Papa

Los ciclos de seleccin pueden ser del tipo "semilla-semilla" o "semillatubrculo-semilla". Los ciclos "semilla-semilla" son ms fciles de llevar a cabo, pero presentan la desventaja de que en ello slo se controla el progenitor femenino, sobre el que se cosechan bayas de polinizacin libre. En los ciclos "semilla-tubrculo-semilla" se realizan cruzamientos controlados entre progenitores seleccionados para obtener la semilla con la que se iniciar el ciclo siguiente. Ello hace que la realizacin de este tipo de ciclo sea ms laboriosa pero, si se dispone de facilidades para realizar los cruzamientos en el mismo ao en el que se practica la seleccin, el progreso que se logra por ao es mayor. A partir del cuarto ciclo de seleccin recurrente se puede comenzar a realizar cruzamientos controlados entre clones destacados de las diferentes 225

poblaciones, para explorar las posibilidades de obtener respuestas heterticas dentro y entre niveles de ploida. En sntesis, un plan de mejoramiento gentico de la papa implica: El manejo de poblaciones de ploidas distintas (x y 4x), lo cual permitira comparar eventualmente el progreso gentico del mejoramiento de caracteres anlogos en condiciones de herencia tetrasmica y herencia dismica. Manipulaciones de ploida: obtencin de haploides (2n=2x=:24) a partir de tetrapoides (2n = 4x = 48) identificacin y uso de gametos 2n y produccin de tetraploides mediante cruzamientos 4x2x y 2x2x. Deteccin y uso de la heterosis que se produce en la progenie de cruzamientos entre individuos (clones) adaptados a las condiciones del medio local, aunque considerablemente distantes desde el punto de vista gentico, por haber sido seleccionados en poblaciones independientes.

En los programas convencionales de mejoramiento gentico de papa, particularmente en aquellos pases que tienen sistemas adecuados de produccin de tubrculo-semilla, se utiliza el mtodo de pedigr, que consiste en la realizacin de cruzamientos controlados entre progenitores tetroploides seleccionados por rendimiento, resistencia a agentes biticos y abiticos perjudiciales y otras caractersticas agronmicas favorables, seguida de la seleccin clonal durante varios ciclos. En este proceso de hibridacin se tiene en cuenta los siguientes procedimientos: Herencia tetrasmica

La herencia tetrasmica presenta ventajas y desventajas para el mejoramiento gentico sobre la herencia dismica. De acuerdo con la teora actualmente aceptada de heterosis en papa las interacciones dentro y entre locus son muy importantes para la determinacin del rendimiento. Con un nmero mximo posible de cuatro alelos diferentes por locus, pueden existir 11 interacciones en un locus tetrasmico. En diploides, por otro lado, el nmero mximo de alelos diferentes por locus es dos y, consecuentemente, slo es posible una interaccin interallica. 'Por ende, el nivel tetrasmico es de mayor potencialidad productiva que el dismico, ya que puede albergar mayor diversidad gentica por locus; ello genera la posibilidad de promover respuestas heterticas no alcanzables en el nivel de ploida inferior (22). Datos experimentales obtenidos en papa y en otros tetraploides tetrasmicos naturales (alfalfa) e inducidos (maz y centeno autotetraploides), sustentan esta teora. 226

La herencia tetrasmica, sin embargo, es ms compleja que la herencia dismica. Por ello, para realizar cualquier estudio gentico se requieren progenies numerosas. Por ejemplo, si se considera un locus con dos alelos, A y a, en un diploide son posibles tres genotipos: AA, Aa y aa. En contraste, en un tetraploide son posibles cinco genotipos: AAAA (cuadruplexo), AAAa (triplexo), AAaa (duplexo), Aaaa (simplexo) y aaaa (nuliplexo). En consecuencia, la segregacin en diploides puede ocurrir como resultado del apareamiento de un solo genotipo, Aa, mientras que en tetraploides puede ocurrir por el apareamiento de tres genotipos, AAAa, AAaa, Aaaa. Cuando se autofecunda un individuo heterocigota para un locus, la probabilidad de obtener descendientes homocigotas recesivos es de 1/4 en diploides y de 1/36 en tetraploides duplexos. En adicin, fenmenos como la dominancia incompleta y la doble reduccin pueden aumentar la complejidad de la herencia tetrasmica en comparacin con la dismica. Esta complejidad puede ser un verdadero obstculo cuando se desea recuperar en la descendencia determinados genotipos recombinantes, especialmente para caracteres controlados por poligenes, como rendimiento o resistencia a algunas enfermedades. Las dificultades expuestas, en conjuncin con las limitaciones impuestas por la cantidad de material que un fitomejorador puede manejar por el mtodo de pedigr y la estrecha base gentica de la papa cultivada, Solanum tuberosum spp- tuberosum hacen que los avances en el mejoramiento gentico en el nivel tetraploide sean lentos y posiblemente, algunos de ellos vayan acompaados del deterioro en otros. Ello explicara, en parte, por qu algunas variedades europeas sigan siendo cultivadas, a ms de 70 aos de haber sido creadas. Haploidizacin

Esta es una tcnica propuesta por Hougas y colaboradores, de cruzamientos 4x X 2x, para producir haploides ginogenticos de papa en grandes nmeros. Recientemente se han afinado tcnicas para producir haploides androgenticos por cultivo in vi tro de anteras. En general, el proceso de haploidizacin permite al investigador beneficiarse con la herencia dismica, ya que los haploides (2n=2x24) derivan de clones tetraploides (2n=4x=48) con herencia tetrasmica. La haploida provee una forma de explorar la variabilidad gentica existente en individuos poliploides y permite obtener genotipos gamticos lite, que pueden usarse en el fitomejoramiento mediante los procedimientos habituales (cruzamientos, retrocruzamientos, seleccin). Este proceso va acompaado de una marcada prdida de vigor, fertilidad, los haploides de papa son en su mayora androestriles y de menor productividad en comparacin con el 227

progenitor tetraploide y un incremento en el coeficiente de endocra como resultado de la doble reduccin. Muchos caracteres de inters econmico, por ejemplo la resistencia a agentes biticos (Phytophthora, Alternara. Streptomyces), virus X, virus Y, virus del enrollado de la hoja de papa, nematodos, etc) y abiticos (heladas, calor, sequa) han sido descritos en especies silvestres de papa. La mayora de las especies silvestres son diploides y no es posible obtener descendencia directamente en cruzamientos con tetraploides debido a problemas en el desarrollo del endospermo a menos que las especies diploides produzcan gametos 2n. Ese problema puede resolverse mediante la duplicacin del nmero cromosmico de las especies diploides con colquicina previamente a la realizacin del cruzamiento 4x2x, pero este mtodo presenta la desventaja de producir hbridos con herencia tetrasmica. Sin embargo, es posible ampliar la base gentica de la papa cultivada mediante cruzamientos entre haploides seleccionados y otros Solanum diploides silvestres y cultivados. Los hbridos entre haploides de Tuberosum y especies silvestres son, en general vigorosos y frtiles, ya que las especies aportan no slo diversidad gentica sino tambin fertilidad masculina. Dado que los haploides contribuyen con caractersticas agronmicas favorables en el hbrido, es posible recuperar progenies agronmicamente aceptables en pocos ciclos de seleccin. Las manipulaciones adicionales que se realizan con posterioridad a la sntesis del hbrido haploide-especie se hacen a expensas de una porcin de la heterocigosis inicial del mismo y por ello, no son convenientes. Sin embargo, en muchas situaciones prcticas no es posible profundizar la fase analtica de mejoramiento de genomios antes de la sntesis del hbrido diploide, lo que trae como consecuencia la necesidad de afrontar esa prdida de heterocigosis. Aparentemente, este es un precio que debe ser pagado ya que, con los mtodos corrientes, es casi nulo el progreso que se puede lograr al realizar ciclos de seleccin por tuberizacin en poblaciones de especies puras, previamente a la sntesis del hbrido. Poliploidizacin

El producto final del mejoramiento gentico debe ser tetraploide ya que ese es, aparentemente, el nivel ptimo de ploida de la papa cultivada. La restauracin del nivel tetraploide puede hacerse en forma asexual, mediante la aplicacin de colquicina en tejidos somticos o por regeneracin de plantas a partir de callos derivados de tejido foliar en cultivos in vitro; en 228

forma sexual, mediante cruzamientos en los que funcionan gametos 2n o en forma parasexual, mediante la fusin de protoplastos. Las consecuencias genticas de cada uno de los procesos de poliploidizacin son diferentes, ya que el nivel de variabilidad gentica manifestado por la progenie es una funcin de aqul presente en los padres y del modo de poliploidizacin. Por ejemplo, si se consideran dos individuos heterocigotas para un locus, AiA2 y A3A4, con un coeficiente de endocra (F2x) igual a O, capaces de producir gametos 2n y de hibridarse en forma sexual y parasexual, la duplicacin somtica de los cromosomas originar tetraploides diallicos balanceados, A1A1A2A2 y A3A3A4A4 considerablemente endocriados (F4x1/3). Estos tetraploides mantienen inmodificado el contenido gentico de sus contrapartes diploides correspondientes. La poliploidizacin sexual es el mtodo ms eficiente y de fcil aplicacin para restaurar el nivel tetraploide. Mediante el uso de mutantes meiticos que afectan a los procesos de microsporognesis, megasporognesis, o a ambos, es posible transmitir genotipos seleccionados en el nivel diploide al nivel tetraploide en forma casi intacta.

42.3. Mtodos de mejoramiento en especies apomticas

La apomixis consiste en la formacin de semillas que contienen embriones genticamente idnticos a la planta madre, generados sin que intervengan los procesos de meiosis y fecundacin y da como resultado plantas que son clones exactos de la planta madre. Esta caracterstica ocurre en forma natural en ms de 400 especies de plantas, incluyendo ctricos, trigo, mijo y algunas variedades de Tripsacum, un pariente silvestre del maz. En una forma apomctica de reproduccin, se transfieren copias exactas de los cromosomas de la planta progenitora a la progenie, con lo cual cada descendiente es un clon de su antepasado. Esta transferencia directa de cromosomas (y por lo tanto de caractersticas) contina generacin tras generacin. Las plantas apomcticas facultativas pueden ser mejoradas por metodologas de cruzamiento convencionales. En las apomcticas obligadas la hibridacin y el anlisis de segregacin son impracticables, por lo cual el mejoramiento se realiza por: seleccin y multiplicacin de los mejores genotipos naturales partiendo de una amplia coleccin de germoplasma. Las progenies de tales plantas exhiben siempre el fenotipo materno o pueden ocasionalmente aparecer variantes que probablemente surjan de mutaciones ms que de segregacin sexual. Por ello, la disponibilidad de individuos sexuales o con algn grado de sexualidad (apomcticos facultativos) es un requisito fundamental para el mejoramiento de estas especies. Estos 229

individuos presentan un cierto grado de variabilidad como para aumentar las posibilidades de supervivencia de la especie frente a cambios ambientales y aportan asimismo germoplasma til para el mejoramiento. Uno de los principales requisitos para llevar adelante un programa de mejoramiento de una especie apomctica es la coleccin de germoplasma diverso desde las fuentes de origen para ampliar la base gentica disponible e identificar introducciones sexuales o altamente sexuales (apomcticas facultativas con alta expresin de sexualidad). La evaluacin de especies relacionadas es tambin una alternativa importante cuando no se dispone de plantas sexuales de la especie de inters. El adecuado conocimiento de la biologa, citologa y modo de reproduccin de los materiales disponibles es un requisito fundamental para cualquier estrategia de mejoramiento. Los estudios realizados para determinar la base gentica de la apomixis en varias especies de gramneas indican que el carcter presenta un tipo de herencia simple, haciendo posible entonces su manipulacin en programas de mejoramiento una vez que son detectados individuos sexuales o apomcticos facultativos. En estos casos los genotipos apomcticos obligados con caractersticas deseables pueden ser usados como dadores de polen. Debido a que los gametos masculinos son completamente normales (reducidos) y que la mayora de las especies apomcticas son altamente heterocigotas, los cruzamientos entre individuos sexuales (utilizados como progenitores femeninos) y apomcticos (empleados como dadores de polen) pueden conducir a la generacin de progenies F1 variables donde es posible seleccionar.
Figura 76. Esquema de un programa de mejoramiento de una especie apomctica

Fuente: http://www.sagpya.mecon.gov.ar/new/0-0/programas/biotecnologia

230

Hay que tener en cuenta que si bien son necesarios individuos sexuales o con adecuada expresin de sexualidad para realizar las cruzas, en el momento de la seleccin habr que usar el criterio contrario, es decir, seleccionar por un alto grado de expresin de la apomixis. Esto conducir a la obtencin de variedades estables. El objetivo final de un programa de mejoramiento de una especie apomctica en el cual ha sido posible obtener recombinacin gentica es la identificacin en la poblacin segregante de los genotipos superiores, con reproduccin completamente (o casi completamente) apomctica que puedan ser transformados en cultivares mediante su multiplicacin por semillas. El camino no es sencillo porque en cada generacin es necesario distinguir en la progenie, cules son los individuos generados por sexualidad y cuales por apomixis. Dentro de los generados por sexualidad, habr que seleccionar los que al mismo tiempo posean las mejores caractersticas agronmicas y presenten un alto grado de expresin de la apomixis. Otro aspecto a tener en cuenta es el nivel de ploida de los progenitores que sern empleados en los cruzamientos. Los primeros estudios de hibridacin indicaron la necesidad de realizar cruzas entre especies sexuales y apomcticas con el mismo nivel de ploida ya que varios intentos realizados entre diploides sexuales y poliploides (en general tetraploides) apomcticos condujeron a la generacin de progenies estriles. Usos potenciales de la apomixis en el mejoramiento de plantas naturalmente sexuales.

La ausencia de recombinacin durante la megagametognesis y de fecundacin de la ovoclula por un gameto masculino posibilita la generacin de embriones que presentan una constitucin gentica idntica a la de la planta madre. La apomixis es un carcter utilizable en el mejoramiento de plantas y la produccin de alimentos, ya que puede ser percibida como una herramienta ventajosa para la estabilizacin de genotipos superiores y la fijacin combinaciones hbridas. La perspectiva de clonar genotipos superiores hbridos podra representar una ayuda importante para los productores agropecuarios, en especial de aquellos de bajos recursos econmicos, permitindoles sostener altos rendimientos ao tras ao usando parte de las semillas cosechadas sin prdidas en la produccin debidas a la segregacin. Entre otras ventajas, la expresin de la apomixis reducira al mnimo el aislamiento fsico requerido para preservar lneas genticas homocigotas.

231

43. Leccin 43 Mejoramiento gentico mediante induccin de mutaciones.

Las mutaciones son cambios o alteraciones en uno o ms caracteres en el material gentico de la clula en la duplicacin del ADN, circunstancia que ocurre siempre en el proceso de meiosis o mitosis, son espontneas en uno o en un corto nmero de individuos, que transmiten stos a su descendencia. Las mutaciones tambin puede ser inducidas por compuestos o sustancias qumicas, rayos X, radiacin ultravioleta, radios gamma, temperaturas elevadas, antibiticos y otros agentes mutagnicos. Los estudios de las mutaciones inducidas iniciaron tempranamente con el uso de rayos X por parte de Muller en 1927, produciendo variantes genticas en Drosophila, seguidamente Stadler utilizo los mismos rayos X para producir mutaciones en plantas de cebada y maz, despertando el inters de los fitomejoradores, por inducir mutaciones artificiales en la mejora de las plantas, sin embargo los resultados fueron desconsoladores por lo que esta prctica de utilizar la mutacin inducida en el mejoramiento de las plantas fue disminuyendo gradualmente, en especial por que los fitomejoradores se dieron cuenta que muchas de estas mutaciones inducidas eran casi perjudiciales sobre el fenotipo de las plantas y entendieron tambin que muchas de los caracteres que deseaban mejorar estaban presentes en la variabilidad existente. Aun hoy en da existen muchos problemas por resolver con la mutaciones inducidas, que permitan considrala como una de las principales mtodos de fitomejoramiento y mas bien, se tiene como un proceso complementario de los otros mtodos de mejora vegetal, sumado a esto tenemos que los cambios producidos por las mutaciones son cientos de veces ms los perjudiciales que los favorables y la mayora de los mutantes son recesivos, por lo tanto para detectar un mutante con las mejoras deseadas, es necesario cultivar poblaciones en segunda generacin de manera muy numerosas, y estos cambios no son fciles de detectar, por lo que quiz las alteraciones que normalmente se obtienen, tienen que ver con aquellas alteraciones fonolgicas fcilmente diferenciables, como la altura, tamao y forma de las flores, tipos tardos o tempranos, es decir caracteres de alta heredabilidad. Las mutaciones logradas en plantas autgamas se utilizan como variedades, para realizar cruzamientos de un mutante con el parental, o de diferentes mutantes del mismo parental o con de diferentes parentales y cruce de un mutante con una variedad o lnea diferente. En plantas algamas se induce mutaciones para incrementar la variabilidad, mejoramiento de la heterosis e induccin de esterilidad masculina. 232

Se usa mutaciones cromosmicas para transferir caracteres de otras especies y gneros. Tambin se utiliza agentes mutagnicos para problemas especficos de mejoramiento como: Uso de radiacin para producir haploides. Uso de radiacin para la produccin de sexualidad transitoria en apomcticos Uso de radiacin para reducir incompatibilidad en cruces alejados. Uso de mutaciones inducidas para estudios especficos de los procesos genticos, fisiolgicos, morfolgicos y bioqumicos en las plantas.

Objetivos de la induccin de mutaciones. Los principales objetivos que se buscan con el uso de agentes mutagnicos en la mejora gentica de plantas puede resumirse en los siguientes puntos. Mejorar una o pocas caractersticas de una variedad o lnea. Inducir un marcador morfolgico (color, aristas, etc) para establecer la identidad de una lnea promisoria para su registro como variedad. Inducir esterilidad masculina o restaurar la fertilidad en lneas para la produccin de hbridos. Obtener dentro de genotipos bien adaptados mutantes para caractersticas de herencia simple tiles para el mejoramiento o para inducir mutaciones posteriormente. Incrementar rendimiento y resistencia a enfermedades y plagas. Conferir mejoras especificas a variedades sin alterar significativamente su comportamiento general, en un corto periodo, logrndose caractersticas no encontradas en la variabilidad natural

A manera de ejemplo de mejoramiento gentico utilizando induccin por mutacin, presentamos el caso del proceso para la obtencin del arroz en Cuba por Suarez. E. (1998). Semillas de la variedad de arroz seleccionada son irradiadas y sembradas en el campo para desarrollar la generacin M1 en la cual es cosechada una pancula por planta para conformar la generacin M2. Esta es sembrada en semilleros y trasplantada al campo a los 20 25 das de germinada. En esta generacin se realiza la seleccin por planta en dependencia de los objetivos 233

de trabajo. En la generacin M3, la semilla de cada planta M2 seleccionada es sembrada en surcos de 5 m de longitud y separados 30 cm entre si. A partir de esta generacin el programa contina con las evaluaciones en los diferentes estudios hasta la liberacin de una nueva variedad. Variedades empleadas:

La seleccin de la variedad para la irradiacin depende del carcter que se pretende mejorar. En todos los casos se debe seleccionar una variedad con un comportamiento general satisfactorio y donde slo sea necesario mejorar uno o dos caracteres. En el desarrollo del programa han sido empleadas siete variedades cuyas principales caractersticas, as como los objetivos perseguidos con la irradiacin, aparecen descritas en la tabla 1.
Tabla 12. Variedades empleadas en el mejoramiento por induccin de mutaciones

Variedad
J104 ECIA 91 (6104) Basmati 370 Gloria Caribe 7 Incuba 19 LC 88-66 Jorge Valladares InCuba 28

Tipo
Indica Semienana Indica Semienana Indica alta Indica alta Indica alta Indica Semienana Indica intermedia Indica alta Indica Semienana

Rendimiento Maduraci potencial n

Alto Alto Bajo Bajo Alto Alto Alto Bajo Alto Media Media Media Media Sensible al fotoperiodo Media Media MediaLarga Media

Objetivo
Calidad del grano Maduracin temprana Calidad del grano Maduracin temprana Reduccin de altura Reduccin de altura Insensibilidad fotoperiodo Calidad del grano Calidad del grano Reduccin de la altura Resistencia a Glifosato

al

Fuentes y dosis de irradiacin Se usaron dos fuentes de radiacin diferentes: Rayos gamma de Co60 y neutrones rpidos de 14 Mev. La radiosensibilidad de las variedades fue determinada midiendo la altura a los 21 das despus de la germinacin en plntulas procedentes de semillas irradiadas y no irradiadas (control) y se calcul la reduccin del crecimiento. Las dosis de irradiacin determinadas se encuentran entre 200 - 350 Gy para rayos gamma y de 20 30 Gy para neutrones rpidos. Estas dosis se corresponden con una reduccin del crecimiento del 10 30 %.

234

Variabilidad gentica creada

En el cultivar J 104 los objetivos de trabajo estaban encaminados a la obtencin de mutantes con buena calidad del grano y con maduracin ms temprana. Los resultados mostraron una mayor variabilidad que la esperada. En la generacin M2 se seleccionaron 449 plantas, de ellas 439 presentaban granos estrechos y cristalinos, as como maduracin ms temprana que la variedad parental, mientras que las 10 restantes posean tipo de planta compacto. ( tabla 2). A partir de la generacin M3 y hasta M6 fueron seleccionadas 458 lneas mutantes para los estudios observacionales y 41 de ellas han sido estudiadas en los ensayos regionales en diferentes localidades del pas
Variedad parental
J 1004 Gloria Basmati 370 Total

Cruces simples
439 129 42 610

Cruces mltiples
269 65 9 343

Total
708 194 51 953

Variedades obtenidas a travs de mutaciones en el cultivar J104

El mejoramiento gentico a travs de la induccin de mutaciones no slo persigue la liberacin directa de mutantes como variedades comerciales, ya que la seleccin de progenitores para ser empleados en los Programas de Cruzamiento. Otros de los resultados importantes del programa de mejoramiento mediante la induccin de mutaciones, iniciado en 1989 ha sido la obtencin de nuevas variedades para su liberacin como variedades comerciales para la produccin nacional.
Tabla 13. Variedades obtenidas a travs de la induccin de mutaciones en el

Nombre Ciclo a Principales caractersticas maduracin

Resistencia a Pyricularia grisea Buena calidad Medio Alto potencial de rendimiento agrcola Tolerancia a bajas temperaturas Medio Alto potencial de rendimiento en condiciones de bajos insumos Medio Buena calidad del grano Tolerancia al sndrome de vaneado del grano Medio Buena Calidad del grano Tolerancia al sndrome de vaneado del grano Resistencia a Pyricularia grisea Enrique Surez http://agr.unne.edu.ar/fao/Cubapt/5MEJORAMIENTO%20%20MUTACIONES%20-Crestelo.pdf Incuba 21 Incuba 22 Incuba 23 Incuba 27 Incuba 28 Medio

235

44. Leccin 44. Seleccin asistida con marcadores moleculares

La seleccin asistida con marcadores genticos (SAM) es una esperanzadora tecnologa que permite acelerar el desarrollo de nuevas variedades con rasgos determinados sin necesidad de intervenir en el genoma de las variedades actualmente existentes. Esta tcnica se basa en identificar una secuencia singular o nica del ADN (marcador molecular) cercana a un carcter de inters agronmico (por ejemplo un gen de resistencia). Un vez logrado esto las plantas portadoras de este carcter agronmico son marcadas, y rpidamente seleccionadas en poblaciones segregantes segn presenten o no el marcador desarrollando nuevas variedades con los genes deseados Existen tres tipos de marcadores que se pueden emplear en la seleccin e identificacin varietal: los marcadores morfolgicos, los bioqumicos, y los moleculares.

44.1 Los Marcadores morfolgicos.

Son fciles de ver, corresponde a aquellos atributos fsicos del germoplasma como forma de la raz, del tallo, de la hoja, de las flores, semillas, que describen e identifican la especie y son comunes a todos los individuos de la especie; estos caracteres son altamente heredables y presentan poca variabilidad, pero tienen como principal inconveniente que hay un bajo nmero de ellos, la mayora son dominantes, puede haber problemas de epistasia (epistasia = interaccin gnica en la cual un par de alelos inhibe la manifestacin de otros pares) y su expresin no siempre es temprana en el desarrollo.

44.2 Los marcadores morfoagronmicos.

Son aquellos caracteres que son relevantes en la utilizacin de especies cultivadas; pueden ser de tipo cualitativo y/o cuantitativos, como la forma de hojas, la pigmentacin en tallos, raz, flores, y frutos, arquitectura de la planta, habito de crecimiento, ramificacin, macollas. Estos marcadores tienen aceptable heredabilidad, pero son afectados por el ambiente, tambin se utiliza como descriptores de evaluacin.

236

44.1. Los marcadores bioqumicos

Basados en la generacin de patrones electroforticos isoenzimticos, se caracterizan por su simplicidad, mnima cantidad del material en estudio, bajo costo y una cobertura del genoma de 10-20 loci por especie, ausencia de epstasis e influencias ambientales. La expresin allica es de tipo codominante, lo que permite establecer comparaciones entre especies, poblaciones de una misma especie y detectar la presencia de hbridos e introgresin de genes. Entre sus desventajas se incluye un nivel bajo de polimorfismo al presentar pocos alelos por locus, especialmente cuando la base gentica es estrecha. Otro aspecto a considerar es que las protenas, siendo un producto de la expresin gnica, pueden ser afectadas cualitativa y cuantitativamente en su nivel de expresin por factores ambientales. Para aumentar la eficiencia de la tcnica ante este factor, deben identificarse los estados de desarrollo de la planta durante los cuales la protena es estable. Adems, al igual que con las protenas de reserva, las isoenzimas pueden o no reflejar los cambios genticos que ocurren en el ADN, adems slo un set de genes estructurales est representados en estas protenas, vale decir, slo parte del genoma se puede evaluar.

44.3 Los marcadores moleculares

Se basan en la amplificacin del ADN o parte del mismo, que pueden ser regiones codificantes o no codificantes o secuencias conocidas que permite comparar los genomas dentro y entre especies. La amplificacin de los segmentos de ADN se realiza con la tcnica del PCR, (Polimerasa Chain Reaction, en ingles; Reaccin de cadenas de la polimerasa), como en el caso de los ADN polimrficos amplificados al azar o RAPDs (Random Amplified Polymorphism DNA), o en la generacin de sitios de corte en la secuencia del ADN, como en el caso de los polimorfismos de longitud de fragmentos de restriccin o RFLPs (Restriction Fragment Length Polymorphisms) y dentro de ellos se pueden diferenciar varios tipos como veremos mas adelante. Los marcadores moleculares se caracterizan porque su deteccin es fcil y rpida, muchos son codominantes, hay ausencia de pleiotropismo y epistasia, la expresin es temprana, su distribucin es homognea en muchos casos y presentan un alto polimorfismo (pleiotropia = un nico par de genes acta en la manifestacin de varios caracteres). Con la ayuda de marcadores moleculares, es posible identificar caracteres tiles de tolerancia o resistencia a los principales tipos de estrs bitico y 237

abitico en el germoplasma de una especie, hacer cruzamientos interespecficos y seleccionar germoplasma respecto a estos caracteres tiles. Con ellos se realiza un estudio directo de la molcula de ADN, por lo tanto los resultados obtenidos son totalmente independientes de las condiciones ambientales, pudiendo ser utilizados para identificar correctamente un individuo, para establecer grados de similitud entre individuos o entre accesiones en una coleccin o para detectar la presencia de un gen o alelo en particular. Su uso ha revolucionado el mejoramiento tradicional aportando herramientas genmicas, tiles para la incorporacin de genes que estn altamente influidos por el ambiente y otros de difcil estudio como los que confieren resistencia a enfermedades y para acumular mltiples genes para resistencia a patgenos especficos y plagas dentro del mismo cultivar (piramidizacin gnica). Tambin ha permitido al fitomejorador el avance generacional ms rpido, ya que a travs del uso de PCR se puede detectar si el gen est presente en las lneas evaluadas en generaciones ms tempranas durante el proceso de mejoramiento. A continuacin se describen brevemente los marcadores moleculares mencionados de cada tcnica.

44.3.1 RFLP (Polimorfismo en el tamao de los fragmentos de restriccin). Se basa en la deteccin de fragmentos de ADN de distinto peso molecular (por digestin con la misma enzima de restriccin que cortan en millones de fragmentos el ADN) en diferentes organismos, que puede ser debido a mutaciones puntuales, inserciones, delecciones o rearreglos en el genoma, producidas por las traslocaciones o inversiones, generando prdidas o ganancias de sitios de reconocimientos de las enzimas de restriccin. Es de gran utilidad para estudios filogenticos, diversidad gentica e identificacin de cultivares con propsito de proteccin varietal; se puede evaluar en cualquier estadio de desarrollo de la planta; permite observar dominancia. Las desventajas, son el uso de radioactividad y la necesidad de usar grandes cantidades de DNA.

44.3.2 Los Minisatlites Se basa en la existencia de secuencias repetitivas organizadas en bloques que se encuentran dispersas a lo largo del genoma nuclear formando bloques altamente variables llamadas VNTR (Variable Number of Tandem 238

Repeats). El polimorfismo se origina en la variacin en el nmero de unidades repetitivas dentro de cada bloque originando los VNTRS, por el intercambio desigual de unidades en el proceso de recombinacin, produciendo una expansin o contraccin del bloque repetitivo. Su ventaja reside que en una sola electrofresis permite encontrar el polimorfismo; su desventaja reside en la utilizacin de radioactividad para la deteccin y a que no es muy prctico para estudios genticos, solo para discriminar. 44.3.3 Los RAPD, fragmentos polimrficos de ADN amplificados al azar Los marcadores RAPD son una de las tcnicas ms verstiles desde que se desarrollaron en los aos 90. Consiste en una reaccin compuesta bsicamente por ADN molde, cloruro de magnesio, nucletidos, ADN, TAQ polimerasa, tampn o buffer TAQ, e iniciadores o primers decmeros, para amplificar mediante PCR reas especificas distribuidas al azar por el genoma. Su pequeez y la baja temperatura de unin (36C) aseguran que se unan a infinidad de secuencias en el genoma, para conseguir amplificar muchos fragmentos de ADN. Estos fragmentos de ADN se separan en geles de agarosa para obtener perfiles electroforticos, que variaran segn el polimorfismo presente en el genoma de los distintos genotipos o individuos, proporcionando as una huella dactilar caracterstica (figura 77.) las ventajas de esta tcnica son: Figura 77a.Amplificacin de DNA

La mezcla de reaccin contiene la secuencia de DNA que se quiere amplificar, dos oligonucletidos sintticos (P1 y P2) que servirn como cebadores, una DNA polimerasa termoestable (Taq) y los cuatro desoxirribonucletidos trifosfato dATP, dGTP, dCTP y dTTP.

239

la rapidez en la obtencin de los resultados, no es necesario conocer la secuencia gentica del ADN que se va a amplificar, no requiere de sondas especficas para especies ni el uso de material radiactivo, requiere poca cantidad de ADN , el cual no necesita ser de alta pureza relativamente bajo costo en comparacin con otros tipos de marcadores.

Figura 77.b. Amplificacin DNA

a) Durante la desnaturalizacin, que se realiza por calentamiento de la mezcla a 95C, se

separan las dos cadenas del ADN molde. b y c) Durante la hibridacin, la temperatura de incubacin se reduce para permitir el apareamiento de las bases de ambos cebadores en el sitio donde encuentran una secuencia complementaria. d)Durante la fase de elongacin, la mezcla se calienta a 72C y la enzima Taq ADN polimerasa se usa para replicar las hebras de DNA. La Taq polimerasa comienza el proceso de extensin de la cadena complementaria a partir del extremo 3 de los cebadores. Al finalizar cada ciclo, la cantidad de ADN molde disponible para el ciclo siguiente aumenta al doble . Figura 78. Electroforesis.

240

44.3.4 AFLP (Polimorfismo de la longitud de los fragmentos amplificados) Combina el uso de enzimas de restriccin y oligonucletidos para PCR, de manera que se obtienen marcadores moleculares muy especficos sin necesidad de conocer la secuencia con anterioridad. Esta metodologa permite exploracin rpida del polimorfismo del genoma entero, son altamente reproducibles y permite crear mapas genticos de forma rpida. Las desventajas es que son marcadores dominantes, la tcnica posee muchos pasos, la lectura en los geles es laboriosa y se requiere buenas bases estadsticas para el anlisis de los datos

44.3.5 Microsatelites o SSR (Repeticin de secuencias discretas) Son regiones presentes en las largas cadenas de DNA formadas por secuencias pequeas repetitivas (2 a 4 pb), por efecto de recombinacin estas regiones pueden expandirse o contraerse generando un polimorfismo til que permite evaluar similitudes entre especies o variedades muy relacionadas. Mediante la tcnica de PCR es posible amplificar las regiones repetitivas se clonan para usarlas en el anlisis de poblaciones, presenta gran ventaja en el mapeo de caractersticas cuantitativas (QTLs) Varios cientos de marcadores son ya conocidos y utilizables. Gracias a potentes mtodos estadsticos, se pueden elegir entre los marcadores a aquellos prximos a las regiones cromosmicas que permitan la manifestacin de caracteres agronmicos de inters dentro de las especies de inters. Con la incorporacin de la seleccin asistida por marcadores dentro del mejoramiento tradicional es posible dar solucin a las demandas especficas de calidad industrial o a los problemas de susceptibilidad a ciertos patgenos en lneas avanzadas de mejoramiento que de otro modo seran eliminadas del programa. En Colombia varias instituciones de investigacin trabajan con marcadores moleculares en el mejoramiento de plantas, como es el caso de Unidad de Biotecnologa y el Programa de Frjol del Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT), que desde 1987 han trabajado conjuntamente en la aplicacin de tcnicas de la biotecnologa como apoyo al mejoramiento gentico del cultivo, y desde 1994 se trabaja en el rea de la diversidad gentica y clasificacin a travs de marcadores moleculares para evaluar las colecciones centrales del CIAT y para conocer la verdadera extensin de su diversidad a nivel de genoma y en trminos de caracterstica deseables. 241

Estos trabajos se apoyan en los marcadores moleculares como herramientas de laboratorio, utilizadas para acelerar y facilitar la seleccin de genotipos superiores en un programa de mejoramiento gentico varietal. Si un marcador molecular cumple con las condiciones de ser heredable, polimorfico y estable, se convierte en un instrumento muy valioso para los fitomejoradores. A continuacin se presenta un ejemplo de procedimiento de mejoramiento asistido con marcadores moleculares desarrollados por el CIAT para incorporar resistencia al virus BGYMV en frjoles rojos pequeos
Figura 79. Seleccin Asistida por Marcadores Moleculares para Resistencia al BGYMV en Frjoles Rojos Pequeos

Fuente. Quintero, C. Et al
http://www.redbio.org/rdominicana/redbio2004rd/Memoria_REDBIO_2004/Talleres-PDF/t04-PDF/t0406.pdf

242

Figura 80. Generacin de nuevas cruzas

La siguiente figura es una electroforesis en la que se confirmacin de la presencia del gen en progenies y avance de generacin.
Figura 81. Electroforesis de confirmacin de la presencia del gen de resistencia al BGYMV

Con la realizacin de este trabajo los investigadores del CIAT llegaron a las siguientes conclusiones La seleccin asistida con marcadores es un sistema eficiente de seleccin de resistencia al BGYMV mediante SCARs, integrado al programa de mejoramiento de frjol mesoamericano del CIAT. Se logra reduccin en esfuerzo de cruzamiento y rea sembrada aproximadamente de 57%. De 1999 a 2003 aproximadamente 40 mil plantas (35 mil F1 y 5 mil progenies) Es posible realizar seleccin simultnea por dos loci para resistencia al BGYMV (multiplex). Se ha logrado distribuir a programas nacionales familias de frjol rojas y negras de tipo comercial, combinando resistencia mltiple 243

45 Leccin 45. Construccin de plantas transgnicas

La ingeniera gentica o biotecnologa es la ciencia que ha permitido modificar la informacin gentica de una variedad de cultivo o de una especie. Las plantas as obtenidas, se denominan transgnicas u organismos genticamente modificados OGM.. La planta transgnica as creada contiene uno o ms genes que han sido insertados en forma artificial en lugar de que la planta los adquiera mediante la polinizacin. La secuencia gnica insertada (llamada el transgen) puede provenir de otra planta no emparentada o de una especie completamente diferente: por ejemplo, el maz Bt, que produce su propio insecticida, contiene un gen de una bacteria. Esta tecnologa de los OMG que naci en la dcada de 1970 ha permitido a los fitomejoradores avances notorios al generar variedades de cultivos ms tiles y productivas que contienen combinaciones nuevas de genes, y adems ampliar las posibilidades ms all de las limitaciones impuestas por la polinizacin cruzada y las tcnicas de seleccin tradicionales. Desde entonces hasta la fecha, muchos millones de hectreas han sido sembradas anualmente con cultivos transgnicos comerciales, como soya, algodn, tabaco, papa (patata) y maz, en varios pases entre los que figuran Estados Unidos, Canad, China y Argentina. Sin embargo, se ha debatido intensamente en torno a los beneficios y riesgos potenciales que podran derivarse del uso de tales cultivos. Como hemos visto a lo largo de todo este modulo, el trabajo del fitomejorador se fundamenta en tratar de reunir a travs de procedimientos de campo, en la mayora de los casos largos y costosos, una combinacin de genes en una planta de cultivo que la hagan mas productiva y de mejor calidad como sea posible, todo esto dentro de especies cercanas o estrechamente emparentadas. La tecnologa transgnica permite a los fitomejoradores reunir en una sola planta genes tiles de una amplia gama de fuentes, no slo de la misma especie de cultivo o de plantas muy emparentadas, sino que permite copiar genes de otros organismos muy diferentes, en otras palabras de cualquier ser vivo. La forma como se logra estas plantas lo trataremos en seguida.

45.1. Cmo se crea una Planta Transgnica?

El ADN (cido desoxirribonuclico) de diferentes organismos es esencialmente el mismo, un simple grupo de instrucciones que hacen que las clulas produzcan las protenas que son la base de la vida. Tanto si el ADN se encuentra en un microorganismo, una planta, un animal o un ser humano, siempre est formado por los mismos elementos. A travs de los 244

aos, investigadores cientficos han descubierto cmo transferir una porcin especfica de ADN de un organismo a otro. El primer paso para transferir ADN es "cortar" o tomar un segmento de un gen de una cadena de ADN utilizando "cortadores moleculares" (unas enzimas especiales) para cortar en un lugar especfico de la cadena de ADN. Paso seguido, estas mismas enzimas se utilizan para abrir un espacio en el plsmido ( fragmento de ADN circular y extracromosmico que suele contener informacin no vital para la bacteria) que se va a utilizar como vector para introducir el gen de inters en la clula vegetal. Debido a que los extremos cortados, tanto en el plsmido como en el segmento de gen, son qumicamente compatibles, se adhieren el uno al otro formando un nuevo plsmido que contiene el nuevo gen. Para completar el proceso, los investigadores utilizan otra enzima para "pegar" o asegurar que el nuevo gen quede fijado en su lugar. Las plantas pueden ser modificadas genticamente utilizando tres mtodos: El primero y ms antiguo es la utilizacin de Agrobacterium tumefaciens, esta bacteria fitopatgena presente en el suelo, tiene la capacidad de transferir ADN de sus plsmidos a las clulas vegetales. El gen o genes transferidos se integra en el genoma de la planta provocndole un tumor o agalla; el proceso culmina con la regeneracin de tejidos creando plantas completas. Se aplic con xito por primera vez en 1984 en el tabaco y el girasol. Las gramneas y en general todas las monocotiledneas presentan gran resistencia a Agrobacterium por lo cual este mtodo es bastante inviable en un extenso grupo de plantas de gran importancia econmica. El segundo mtodo es la utilizacin de protoplastos, que son clulas vegetales a las que se les ha liberado de la pared celular. De esta manera queda eliminada la barrera principal para la introduccin de genes forneos. Mediante esta tcnica se consigui por primera vez cereales transgnicos en 1988. El tercer0, es el mtodo del microcan o can de partculas inventado en el ao 1987, que consiste en bombardear tejidos de la planta con micropartculas metlicas cubiertas del fragmento de ADN que interesa se integre en el ADN de la planta. Es el procedimiento que ms xitos ha conseguido y el que promete ms avances, nace por la incapacidad de Agrobacteruim para infectar a las plantas monocotiledoneas. Para ello se utilizan microproyectiles de oro o tungsteno (inertes qumicamente) disparados a velocidad supersnica, que atraviesan la membrana sin causar daos. a

la clula.

El descubrimiento de un plsmido en cepas de Agrobacterium tumefasciens fue anunciado por primera vez por Schell (1973) quien lo denomino el 245

plsmido llamado Ti (del ingls Tumour inducing) y el cual es portador del carcter patgeno. Ms adelante se observ que todas las clulas de las agallas eran portadoras de un fragmento del plsmido Ti que se denomin ADN-T (ADN transferido). Se demostr despus que el plsmido tena varias funciones: la funcin de virulencia (Vir), responsable de la transferencia del ADN-T, la oncgena (Onc), responsable del tumor (consecuencia de la sntesis de auxina y citoquinina), la funcin que especifica la sntesis de opinas (Ops), molculas que sirven de alimento a la propia bacteria, y la funcin catablica (Opc, opina catabolismo). En realidad se encontraron varios segmentos Opc1, Opc2, que permiten la degradacin de las opinas producidas por el tumor. Se distinguen dos tipos de funciones: las funciones situadas fuera del segmento ADN-T (Vir, Opc1,Opc2) que se expresan en la bacteria y las funciones controladas por el segmento ADN-T (Onc, Ops) que se expresan en la clula vegetal despus de la transferencia de este segmento (ver figura # )
Figura 82. Plsmido Ti de Agrobacterium tumefaciens

Fuente. J. F. Carrasco http://www2.udec.cl/~jhuenuma/udec/plantas.htm

En resumen la bacteria no es patgena per se porque no segrega ninguna toxina que disuelva las paredes celulares como hacen otras bacterias patgenas. Sus efectos se deben a la transferencia de un segmento de ADN, el ADN-T, cuya expresin en las clulas vegetales es la causa de la enfermedad. La supresin en el plsmido del segmento transferido hace que la bacteria sea inofensiva sin que ello se la prive de la capacidad de transferir ADN a una clula vegetal. Por tanto se puede plantear su sustitucin por un fragmento de ADN extrao. El sueo de obtener plantas resistentes a los insectos fitfagos se hizo realidad gracias a M.D. Chilton que en 1983, quien obtuvo las primeras plantas transgnicas de tabaco utilizando Agrobacterium tumefaciens las cuales eran portadoras de un gen que codifica para una protena bioinsecticida que denomin cry (del ingls crystal). El gen haba sido aislado 246

por primera vez por E. Schnepf y H. Whiteley en 1981, de Bacillus thruringiensis una bacteria grampositiva del suelo que produce unos cristales de protenas con propiedades insecticidas al provocar la lisis de las clulas intestinales de las larvas de insectos. A estos experimentos le siguieron otros en diversos laboratorios de Europa y Amrica con el tomate y la patata que sirvieron para demostrar que la expresin de protenas insecticidas en plantas era posible y proporcionaba un mtodo eficaz de lucha contra los insectos (ver figura #).
Figura 83.Obtencin de plantas transgnicas resistentes a los insectos mediante Agrobacterium tumefaciens.

Todas estas investigaciones culminaron en 1996 con la entrada en el mercado de plantas transgnicas (algodn, patata y maz) resistentes a insectos. A todas estas plantas transformadas se las denomina Plantas Bt (de Bacillus thuringiensis). En 1997 el 25% de los cultivos transgnicos comercializados portaban genes cry. El problema de la aparicin de insectos resistentes a estas plantas se prev solucionarlo con la implantacin de distintas protenas insecticidas en una misma planta transgnica o en plantas transgnicas plantadas en aos alternativos. Para el ao 2000, se report el primer esfuerzo de secuenciacin del genoma del arroz (Oryza sativa). La compaa Monsanto produjo un primer borrador del genoma usando el cultivar Nipponbare, una variedad japnica usada ampliamente por el Instituto Internacional de Investigaciones en Arroz (IRRI, Filipinas), como apoyo a sus programas de investigacin en materia genmica y mejoramiento de plantas. Adems de ser uno de los cultivos alimenticios ms importantes del mundo, el arroz es el modelo gentico para los cereales. Existe una relacin de sintenia entre el arroz y otras especies 247

gramneas, incluyendo maz, trigo, cebada, sorgo, y otros (sintenia = conservacin del orden gnico, o sea, la posicin de los genes en el genoma). Por tanto, al acumular informacin detallada acerca del genoma del arroz, se avanza simultneamente en los esfuerzos globales para mejorar otros cultivos. En la actualidad a travs de una iniciativa internacional se han construido mapas moleculares detallados que incluyen miles de marcadores moleculares, bases de ESTs y libreras genmicas de arroz. El trabajo conjunto del IRRI y la Universidad de Cornell, produjo un mapa de cromosomas de esta gramnea donde se ubican marcadores moleculares que determinan las caractersticas tiles de la planta con respecto a la tolerancia de la sequa, resistencia a plagas y enfermedades, entre los cuales resalta la marcacin de genes que controlan la resistencia al virus de la hoja blanca y al hongo Pyricularia. Otro ejemplo de la aplicacin de la biotecnologa al mejoramiento de los cultivos son las investigaciones que se han realizado para incorporar la provitamina A al arroz dorado o golden rice (Potrykus, 2001; Hoa et al., 2003). En teora, la alimentacin con estas variedades de arroz permite reducir el riesgo de ceguera en grandes grupos de poblacin del mundo que se alimentan a base de este cereal. Recientemente, se obtuvieron en Tailandia dos variedades de arroz enriquecidas en hierro que pueden desarrollarse y utilizarse en la lucha contra la anemia en la poblacin de bajos recursos. http://www.eufic.org/de/tech/database/rice.htm . Tambin estn siendo cultivadas plantas modificadas genticamente de soya, maz y algodn con resistencia al herbicida glifosato que contiene un nuevo gen que determina la enzima EPSPS (relacionada con el metabolismo de los aminocidos aromticos). Los grandes progresos alcanzados por la biotecnologa, esta polarizando el mundo, hay quienes solo hablan de los beneficios reales y potenciales de los Organismos Genticamente Modificados OMG, omitiendo sus limitaciones y eventuales riesgos. En el otro extremo se enfatizan stos, omitiendo las contribuciones que pueden hacer los OMG al desarrollo cientfico, tcnico y econmico. La FAO insiste en que la biotecnologa debera complementar y no reemplazar, a las tecnologas agrcolas tradicionales. La biotecnologa puede acelerar los programas convencionales de mejoramiento y dar soluciones cuando los mtodos convencionales fallan. A continuacin presentamos lo que se consideran los beneficios y los perjuicios de las plantas transgnicas.

248

45.2 Beneficios de las plantas transgnicas.

Entre sus potenciales beneficios de las plantas transgnicas estn; la obtencin de materiales de siembra libres de enfermedades, el desarrollo de cultivos resistentes a las plagas y enfermedades, y la reduccin del empleo de substancias qumicas nocivas para la salud y el medio ambiente. La segunda generacin de plantas transgnicas que ya est llegando, trae consigo beneficios para el consumidor como: alimentos ms sanos y nutritivos, plantas que producen en gran cantidad enzimas de uso tcnico, cidos grasos inusuales (para alimentacin, lubricantes, etc.), edulcorantes naturales, fibras vegetales con nuevas propiedades, productos farmacuticos, etc. En el campo farmacutico en particular, pueden producirse tanto productos de tipo proteico (antgenos para ser aislados o utilizados in planta como vacunas orales, citoquinas) como sustancias orgnicas ms simples de alta actividad biolgica (hormonas, vitaminas, etc.). Las sustancias pueden ser producidas en diferentes compartimentos celulares, el espacio intercelular, o secretadas a un medio hidropnico (rhizosecrecin). Adems, puede facilitar herramientas de diagnstico y vacunas para controlar enfermedades animales devastadoras.

45.3 Desventajas de las plantas transgnicas.

Desde el punto de vista ecolgico Se considera que las plantas transgnicas resistentes a herbicidas, incrementarn notablemente el uso de stos con los posibles efectos secundarios negativos de contaminacin del suelo y del agua. Por otro lado, en especies algamas (de fecundacin cruzada) existe la posibilidad de que una parcela sembrada con plantas transgnicas contamine con su polen a otras parcelas vecinas no transgnicas del mismo cultivo. Por ejemplo, si el polen de un campo de maz transgnico poliniza plantas normales de una parcela prxima, la semilla que se produzca en esta parcela puede haber incorporado el gen Bt transmitido por el polen; es decir, sera transgnica. Tambin podra ocurrir que la resistencia al herbicida de una variedad transgnica se transfiriera por fecundacin interespecfica espontnea a una especie silvestre afn. De hecho, es importante sealar que ya se ha descrito un primer caso de transferencia de un gen que da resistencia a un insecticida en plantas transgnicas de colza a plantas de rbano que se haban cultivado en su proximidad, poniendo de manifiesto que se ha hecho realidad una posibilidad terica. Reduccin de la diversidad gentica natural como consecuencia de altos niveles de uniformidad, debido a la multiplicacin en masa o al flujo y 249

reproduccin de rasgos genticos que confieran ventajas agronmicas a algunas plantas, creacin de nuevas malezas, dao a especies no objetivo, rompimiento del equilibrio poblacional en comunidades biticas y ecosistemas. El uso extendido de plantas tolerantes al estrs traera en consecuencia un aumento considerable en la utilizacin de la tierra en lugares donde previamente la agricultura era imposible, de tal manera que quizs se destruyan ecosistemas naturales valiosos. Riesgos para la salud humana y/o animal Riesgos de toxicidad y de generacin de reacciones alrgicas Otros dos aspectos de las plantas transgnicas que han generado inquietudes son el empleo de genes de resistencia a antibiticos como marcadores de la transformacin gentica durante el desarrollo de este tipo de plantas, y la transferencia horizontal de genes. los genes de resistencia a antibiticos son ADN que se degrada durante el procesamiento de los alimentos y la digestin y no son antibiticos en s mismos. Cabe, sin embargo, la posibilidad de que las protenas producidas por estos genes (que hacen que el antibitico no sea efectivo) se expresen en el rgano que se consume de la planta transgnica. Para que esto constituya un problema, dichas protenas deberan absorberse en forma intacta a travs del intestino, interactuar con el antibitico suministrado para controlar una enfermedad dada, e inactivarlo.

Desde el punto de vista socioeconmico Los campesinos pobres son excluidos de estas tecnologas, primero porque son costosas y segundo, porque las especies mejoradas no contemplan las especies cultivadas por ellos. Bajo desarrollo tecnolgico e investigativa de los pases subdesarrollados que impiden adoptar y adaptar las innovaciones biotecnolgicas, lo que asegura el monopolio de las grandes compaas multinacionales productoras de semillas las cuales especulan con los precios que les da la proteccin de las patentes. La venta de semillas preparadas genticamente para que su descendencia no sea frtil y as obligar al agricultor a comprar de nuevo semillas. (plantas termination)

250

45.4 Descubiertas plantas transgnicas naturales

Segn un estudio realizado por Universidad de Lund (Suecia) sobre los genes de diferentes plantas de festuca (Festuca ovina) se ha visto que el gen que codifica la enzima denominada PGIC se encuentra en diferente lugar en diferentes plantas, y algunas tienen genes extra, sugiriendo la existencia de "genes fugitivos". Existen diferencias insignificantes entre las enzimas PGIC de una planta de festuca a otra cuando solo tienen un gen PGIC, pero sorprendentemente la diferencia es muy alta (6%) cuando una de las plantas es de las que tiene el gen PGIC duplicado, lo que no tiene explicacin si se tratara por una duplicacin y traslocacin dentro del mismo genoma, debiendo pensarse en una procedencia exterior del mismo. Se ha buscado e identificado el origen del gen extra como procedente del genero Poa, lo que equivale a poder denominar a estas plantas de festuca como transgnicas al tener insertado un gen de otra, con la que adems no est especialmente emparentada. No se sabe como se ha podido producir esta insercin gentica, aunque se supone que se habra realizado a travs de un virus que habra infectado a ambas especies y que esta caracterstica se habra extendido a travs de generaciones por representar una mayor competitividad biolgica. La poa y la festuca no se pueden cruzar entre s de forma natural. El porcentaje que se ha detectado de plantas con esta caracterstica es de un 10% en las poblaciones estudiadas. No es este el primer estudio que siguiere la existencia de de plantas transgnicas naturales. Hay trabajos publicados de la Universidad de Michigan que muestran que se puede producir transferencia de ADN mitocondrial a travs de plantas parsitas, entre la planta husped y parasitada y viceversa. Este hecho tiene su importancia ya que una de las causas ms frecuentes de rechazo a los OMG es precisamente la alegacin de un carcter "no natural". Curiosamente las variedades obtenidas por mtodos totalmente artificiales distintos de la ingeniera gentica, como por ejemplo la induccin artificial de mutaciones o de poliploida (fresn, triticale, sandias sin pepitas) son admitidas normalmente, incluso por la agricultura biolgica (ecolgica, orgnica) debido a que, a pesar de que su mtodo de obtencin gentica es totalmente artificial, el mecanismo (mutacin, poliploidia) existe en la naturaleza y se podra haber dado tericamente de forma natural, aunque la probabilidad sea remota. A los OMG se les daba otro grado "ms artificial" argumentando que el mecanismo de transgenia no existe en la naturaleza, algo que es desmentido por estos hallazgos. (Agrodigital) http://axxon.com.ar/not/158/c-1580199.htm 251

BIBLIOGRAFIA

ALLAR, R.W. 1967. Principios de la mejora gentica de las plantas. Traduccin de la primera edicin por Jos L. Montoya. Ediciones Omega S.A. Barcelona. CLAR V. R.; D' CROZ-MASON INSTSORMILCENTA. N. E. Androesterilidad.

CEBALLOS, H. 2007 Gentica cuantitativa. Curso para estudiantes de Postgrado. Escuela de Postgrados. Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira. Material sin publicar. Palmira Valle del Cauca. CIAT (Centro Internacional de Agricultura Tropical)IPGRI (InstitutoInternacional de Recursos Fitogenticos)- Universidad Nacional de Colombia REDCAPA. 2004. Curso sobre Conservacin Ex Situ de RecursosFitogenticos. Cali. Col.

CHAVEZ, A. J. 1995. Mejora de plantas 2. mtodos especificos de plantas alogamas. Editorial Trillas S.A. UAAAN. Mxico 142 pp. DALLAGNOL M.; SCHIFINO-WITTMANN M. T. 2004.APOMIXIA, GENTICA E MELHORAMENTO DE PLANTAS. R. bras. Agrocincia, Pelotas, v.11, n. 2, p. 127-133, abr-jun, 2005. ELLIOT, F. C. Citogentica y mejoramiento de plantas. Ed. Continental S. A., Mxico. FALCONER, D.S., 1981. Introduccin a la Gentica Cuantitativa. 2nd Ed. Longman Inc. New York., 430 pp. FRANCO, T. L. E HIDALGO, R. (eds.). 2003. Anlisis Estadstico de Datos de Caracterizacin Morfolgica de Recursos Fitogenticos. Boletn tcnico no. 8, Instituto Internacional de Recursos Fitogenticos (IPGRI), Cali, Colombia. 89 p. HALLAUER, A.R., J.B. MIRANDA, F.O., 1988 Quantitative Genetics in Maize Breeding. 2nd ed., Iowa State University Press, Ames, IA, USA HERRERA, S. GLORIA. Curso Acadmico Trabajo Acadmico a Distancia. Universidad Nacional Abierta y a Distancia. UNAD. Material en medio magntico. Formato Acrobat Reader. 308 p.

252

HOKCHE D. O.; RAMIREZ N. 2006. Asignacin de Biomasa Floral en Solanum gardeneri sendth.(Solanaceae): Una Especie Adromonica. Acta Bot. Venez. v.29 n.1 Caracas jun. 2006. HOEGENMEYER T.C., HALLAUER A.R. (1976) Selection among and within full-sib families to develop single crosses of maize. Crop Sci. 16(1): 76.80. LOPEZ, T. M. 1995. Fitomejoramiento. Edit. Trillas S.A. Mxico. 172 pp. MADRIZ R.; RAMIREZ N. Biologa reproductiva de Coccoloba uvifera ( Polygonaceae) una especie poligamo-dioica. Centro de Botnica Tropical. Universidad Central de Venezuela, Facultad de Ciencias, Los Chaguaramos, Caracas , Venezuela. MARTINEZ E.J.; ACUA C.; COENES D.; FORTES N.B.; QUARIN C.L. 2003. Transmisin de marcadores moleculares ligados a la aposporia en Paspalum notatum. Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas 2003. Resumen: A-006. UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE. Ctedra de Gentica y Fitotecnia - Facultad de Cs. Agrarias - UNNE. IBONE-CONICET Sargento Cabral . Corrientes - Argentina PREZ de P. J. 2004. ROSACEAE-SANGUISORBEAE DE MACARONESIA: GNEROS MARCETELLA, BENCOMIA Y DENDRIOPOTERIUM. PALINOLOGA, BIOGEOGRAFA, SISTEMAS SEXUALES Y FILOGENIA. Bot. Macaronesica 25: 95-126 (2004) Jardn Botnico Canario Viera y Clavijo Las Palmas de Gran Canaria. PEALOZA P. 2001. Semillas de hortalizas. Manual de produccin. Ediciones Universitarias de Valparaso. 38p. Universidad Catlica de Valparaso. Chile. RAMREZ. L. 2006 Mejora de plantas algamas. Departamento de Produccin Agraria. Pamplona. Espaa SABORIO M.; COSTA P.1992. Autoincompatibilidad en Caspicum pubescens. Agronoma Costarricense 16(2): 279-286. SNCHEZ D.J.J. ;AVITIA G. E. ;CASTILLO G. A. ;VILLEGAS M. A. ;CORONA T. T. 2006. Estudio Anatmico de la poliembriona en tres Portainjertos de Ctricos. Revista Chapingo, Serie Horticultura, julio diciembre, ao/vol .12, nmero 002. Universidad Autnoma de Chapingo. Chapingo, Mxico. Pp.145-152. TRAVESET A. Ecologa reproductiva de plantas en condiciones de insularidad: consecuencias ecolgicas y evolutivas del aislamiento 253

geogrfico. Ecosistemas Mediterrneos. Anlisis Funcional. Zamora R. y Pugnaire, F.J. (editores). CSIC-AEET,Espaa. pp. 269-289. VALLEJO, F.A. y E.I. ESTRADA. 2002. Mejoramiento gentico de plantas. Palmira. Universidad Nacional de Colombia. 401 p. VALOIS, A.C.C. 1996 Conservacin del germoplasma vegetal ex situ. En: Dialogo XLV: Conservacin de germoplasma vegetal. Memorias del curso realizado en Brasilia por el Instituto Interamericano de Cooperacin para la Agricultura, septiembre de 1994. Instituto de Cooperacin para la Agricultura, Uruguay. P. 7-11.

CIBERGRAFIA. BESPALHOK J. C. Sistemas reprodutivos das plantas cultivadas Filhohttp://www.bespa.agrarias.ufpr.br/paginas/apresentacoes/1reprodutivos. pdf Biotecnologa. http://www.fazendeiro.com.br/Cietec/artigos/ArtigosTexto.asp?Codigo=227 El Cuaderno de Porqu Biotecnologa. http://www.porquebiotecnologia.com.ar Edicin N56/2004.

El Origen de las Especies. http://omega.ilce.edu.mx/biblioteca/sites/ciencia/volumen2/ciencia3/070/htm/sec_78. F. Gimnez,1.; J. Lquez2 & J.C. Surez3. Estabilidad y adaptabilidad de cultivares de soja para rendimiento en el sudeste de la provincia de Buenos Aires. 1Estacin Experimental del INTA en Bordenave, cc 55, (8187) Bordenave, Buenos Aires, Argentina. http://www.inta.gov.ar/balcarce/info/documentos/agric/oleag/soja/cultivaresdesoja.ht m consultado. septiembre/2007.

GONZALEZ A. M., ARBO M. M. Morfologa de plantas Vasculares Facultad de Ciencias Agrarias, Sgto. Cabral . Corrientes, Argentina. http://www.biologia.edu.ar/botanica/tema23/poliniza-abierta.htm GONZALEZ F. A. Sexo y seleccin natural. http://espacial.org/planetarias/astrobiologia/sexo_seleccion_natural.htm Hechos histricos de la biologa relacionados con el fitomejoramiento. Fuente: 254

http://es.wikipedia.org/wiki/Gen%C3%A9tica#Cronolog.C3.ADa_de_descubri mientos_notables consultado Julio 2007 La Semilla. Incompatibilidad de la Fecundacin. Facultad de Agronoma, Universidad Catlica de Valparaso- Fundacin Isabel Caces de Brown. http://www.lasemilla.ucv.cl/htm/gen09.html Mecanismos de Evolucin. http://docencia.udea.edu.co/cen/mecanismosevolucion/pdf_files/especiacion/2.barreras%20al%20flujo%20genico.pdf Obtencin de variedades transgnicas, esquema http://croptechnology.unl.edu/animationOut.cgi?anim_name=fitomejoramiento_spani sh.swf Consultado Agosto 2007

ORTIZ J.P.; PESSINO S. C.;QUARIN C. L. Manipulacin de la Apomixis y su Aplicacin en la Agricultura. http://www.argenbio.org/h/biblioteca/libro/27_VIII_3.pdf

PERISS P.. 2002. SEMILLAS. Un punto de vista Agronmico. Universidad de Crdoba. Cordoba, Argentina. http://www.semilla.cyta.com.ar/poliembronia/poliembrionia.htm PISABARRO A.G.; RAMREZ L. Gametognesis en Plantas. Universidad de Navarra. http://www.unavarra.es/genmic/research%20group/research%20grou p.html Proyecto Apomixis. IRD-CIMMYT. http://www.cimmyt.org/ABC/map/about/Apomixis/Apomixisbroch/htm/Apomixisbro ch-spa.htm RAMREZ L. Modos de Reproduccin. Sistemas de Recombinacin. Ctedra de Produccin Vegetal. Universidad de Navarra. Espaa. http://www.unavarra.es/genmic/genetica%20y%20mejora/apomixis.htm RAMREZ L. Mejoramiento de plantas algamas. Universidad de Navarra. http://www.unavarra.es/genmic/research%20group/research%20grou p.html RODRIGUEZ F. Coevolucin polinizadores.www.sindioses.org. de las flores y sus

255

TAVARES de C. V.; RIBEIRO A.E. Pesquisadores da Desenvolvimento da pesquisa em apomixia Recursos Genticos e

Embrapa

Teoras Evolutivas. Universidad Nacional de la Patagonia. Fundamentos de biologa. http://three.fsphost.com/fcninfo/archivos/archivos/main/apoyos/COMPLEVOLUCpar teI.pdf

256