DETERMINACION DE ACIDO ASCORBICO EN JUGO COMERCIAL POR ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA Oscar A. Acosta 1238385 oskitar0123@hotmail.

com Vernica Meja 1137396 yito_meg@hotmail.com Facultad de Salud. Escuela de Bacteriologa y Laboratorio Clnico. Laboratorio de Qumica Analtica. Universidad del Valle, Cali, Colombia.

RESUMEN: Para esta prctica se determin la concentracin de cido ascrbico en una muestra de jugo comercial (Tampico) utilizando la espectroscopia ultravioleta visible, una longitud de onda de 405 nm y la mxima absorbancia reportada en dicha muestra. Utilizando soluciones estndar y adiciones estndar a distintas concentraciones; realiz una curva de calibracin y se obtuvo que la concentracin de cido ascrbico en la muestra es de 14,1 mg/L Palabras Clave: cido Ascrbico, espectroscopia ultravioleta, curva de calibracin, efecto matriz ____________________________________________________________________________ DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS
Construccin de la curva de calibracin El cido ascrbico es un cido de azcar con propiedades antioxidantes. Su aspecto es de polvo o cristales de color blanco-amarillento. Es soluble en agua. El enantimero L- del cido ascrbico se conoce popularmente como vitamina C. El nombre "ascrbico" procede del prefijo a- (que significa "no") y de la palabra latina scorbuticus (escorbuto), una enfermedad causada por la deficiencia de vitamina C.1 Peso real obtenido para la preparacin del cido ascrbico=0,0052g. 10 1 25 10% 100 1 100 1 37,2 1,190 = 5,64 Se prepararon 250 ml de solucin estndar de cido ascrbico 100ppm. Se tomaron 5 alcuotas, las cuales se llevaron a matraces de 25 ml, donde se enras con agua, se obtuvo concentraciones de 5-10-15-20-25 ppm. Ilustracin 1 Estructura del cido ascrbico

Se determin la longitud de onda de mxima absorbancia a concentracin de 20 ppm, examinando de 200-300 nm (rayos ultravioleta cercanos). Con una longitud de onda de 245 nm, se midi la absorbancia de las soluciones a diferente concentracin.

Tabla 1. Absorbancia del cido ascrbico segn la longitud de onda. Longitud de onda (nm) 204 245 306 333 337 Absorbancia -0.37 1.09 -0.026 -0.023 -0.024

Grafica 1. Longitud de onda vs Absorbancia de la solucin de cido ascrbico

Tabla 2. Absorbancia (245 nm) de soluciones de cido ascrbico a diferente concentracin. Concentracin (ppm) Absorbancia 5 0.098 10 0.203 15 0.406 20 0.635 No se anex el clculo a concentracin a 25 ppm, debido a que se encuentra muy desfasado (no entra en el rango de error aceptable). .

Grfica 2: Curva de calibracin. Concentracin Solucin estndar vs Absorbancia

0.7 0.6 0.5 Absorbancia 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 5 10 15 20 25 Concentracion (ppm) y = 0.0363x - 0.118 R = 0.9757

El blanco utilizado para la curva de calibracin fue agua destilada, y para la muestra se prepar con 1 ml del jugo + 3 ml de NaOH, se dej reposar la preparacin por 10m 3 ml de HCl 10% Con base en los datos obtenidos, podemos calcular la concentracin de cido ascrbico en la muestra problema y usando el mtodo de mnimos cuadrados, se calcula la ecuacin de la recta que mejor representa la dispersin de puntos:

421.31501.342 4750502

= 0,03628

= 0,118

Tabla 3. Calculo de Mnimos Cuadrados de las soluciones estndar. ( ) -7,5 -2,5 2,5 7,5

X 5 10 15 20 Promedio Sumatoria 12,5

0,098 0,203 0,406 0,635 0,3355

( ) 56,25 6,25 6,25 56,25

( ) -0,2375 -0,1325 0,406 0,635

( )

0,05640625 0,01755625 0,164836 0,403225

125

0,6420235

Donde X=Concentracin de la solucin estndar, Y= concentracin de Vitamina C a esa longitud de onda

Con esto la recta que mejor describe la dispersion de puntos es : Y = mX + b Y= 0.0363x + 0.118 Donde Y es la absorbancia, X la concentracin y m la pendiente (mostrado en la grfica 2); el intersecto en Y (b) se calcul tambin con Excel. Y = 0.0363X 0,118 Despejando en X Y + 0.118 X= = 14,1 mg/L 0.0363 Calculando 14.1 mg 1L 1L 1000 mL ascrbico = 0,705 mg cido Tampico mL 50 mL Se obtiene as la concentracin de cido ascrbico en una muestra de 50 mL de jugo comercial Tampico de 1000 ppm.

Primero, el cido ascrbico es un componente orgnico y son estos componentes principalmente (junto con algunos inorgnicos) lo que absorben radiacin directamente en la regin UV y visible. Segundo, el cido ascrbico tiene grupos funcionales orgnicos insaturados en su estructura (llamados cromforos) como el carbonilo (adems que su misma estructura es aromtica) y ste tipo de grupos absorben en la regin UV. La razn, es porque los electrones que participan en enlaces dobles y triples se sujetan con menos fuerza, y por eso es ms fcil excitarlos.2 2. Explique la razn por la cual el blanco debe prepararse a partir de la muestra. Porque aparte del analito, la muestra contiene todas las sustancias que pueden producir una interferencia al medir la absorbancia, es decir, el efecto matriz producido (en este caso) por la interferencia de excipientes, aditivos, colorantes, conservantes que es necesario tener en cuenta al momento de efectuar los procedimientos. 3. Explique por qu en la preparacin del blanco se aade NaOH Porque al ser una base fuerte, el NaOH neutralizar al cido ascrbico y subir el pH de manera que la absorbancia del compuesto resultante estar por fuera del rango que se est evaluando, y ser posible entonces establecer la longitud de onda con los componentes de la matriz. 4. Determine si las sensibilidades de los dos mtodos difieren significativamente. Se presentan efectos de matriz en la determinacin por curva regular de calibracin? Un mtodo analtico ser ms sensible

ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS Una muestra de Tampico comercial posee 60 mg de cido ascrbico en 0.4 L, estos son 150 mg/L, lo cual implica que nuestra medicin tuvo un alto margen de error, por quiz un error en la preparacin de las muestras, soluciones estndar o un blanco mal aplicado; pero se pudo observar como a medida que aumenta la concentracin del cido ascrbico en las muestras estndar, aumenta la absorbancia, y se pudo contrastar con la muestra problema. PREGUNTAS: 1. Explique, teniendo en cuenta la estructura del cido ascrbico, Por qu esta sustancia absorbe el ultravioleta?

cuanto mayor sea la variacin de la seal analtica y para una variacin de la concentracin del analito x dada. La sensibilidad (S) de un mtodo viene dada por la pendiente de la curva de calibrado. y = mx + b . La sensibilidad de un mtodo analtico se relaciona con la cantidad mnima de analito requerida para dar un resultado significativo, cualitativo o cuantitativo. Debe distinguirse entre sensibilidad de calibrado y sensibilidad analtica. - Sensibilidad de calibrado: corresponde a la pendiente de la recta de calibracin, es decir, la seal o respuesta por unidad de concentracin. - Sensibilidad analtica: corresponde a la sensibilidad de calibrado dividida por la desviacin estndar de la respuesta. Los parmetros a definir para poder evaluar la sensibilidad de un mtodo analtico son los lmites de deteccin y de cuantificacin. No se presentan efectos de matriz porque la curva de calibracin solo tiene vitamina C y agua las interferencias pueden ser de otro tipo (instrumental, por partculas de polvo) pero no hay efecto matriz porque no hay excipientes de tampico.

absorcin a una sola longitud de onda, mientras que los de doble haz so ms adecuados para el registro continuo del espectro de absorcin.2

CONCLUSIONES El blanco para las soluciones estndar deba ser agua destilada porque las soluciones estndar slo contienen cido Ascrbico en dilucin con agua destilada, mientras que el blanco para las adiciones estndar deba ser preparado con el jugo comercial para que contuviera los excipientes de sta. La recta de calibrado es un mtodo sencillo para determinar concentraciones a partir de las seales proporcionadas por el instrumento analtico. La absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la concentracin del sustrato en ella. El anlisis realizado debe tener un blanco adecuado para contrastar, lo necesario y no tener errores en la cuantificacin del analito en l amuestra. BIBLIOGRAFIA
1

5. El equipo que usted utiliz en la prctica es de doble haz. Qu ventajas tiene ese respecto a un equipo de un solo haz? Que los instrumentos de doble haz compensan todo menos la mayora de las fluctuaciones cortas en la radiacin de salida de la fuente, y tambin las variaciones amplias en la intensidad de la fuente con la longitud de onda. Los instrumentos de haz sencillo son ms adecuados para mediciones cuantitativas de

http://www.acidoascorbico.com/

Skoog and West, Qumica Analtica.7ma Edicin. McGraw Hill. Capitulo 23 p 615616, Cap 22 p 608 Harris D. Anlisis QumicoCuantitativo. Quinta Edicin. GrupoEditorial Americano Kenneth A. Rubinson, Judith F. Robinson, Anlisis instrumental, Prentice Hall, Cap 8 p293-306