Alcaloid

Alcaloizii (fr. alcali; gr. eidos- aspect) sunt substane organice heterociclice cu azot, de origine vegetal, cu caracter bazic, rezultate n urma metabolismului secundar al plantelor, care dau reacii caracteristice i au aciune asupra organismelor animale, de cele mai multe ori de natur toxic. n funcie de proveniena atomului de azot i de calea biosintetic se pot clasifica n:

alcaloizi propriu-zii pseudoalcaloizi protoalcaloizi N-oxizi ai alcaloizilor

Noiunea de alcaloid s-a stabilit la nceputul secolului al XIX-lea, (Meissner, 1818). Prin alcaloizi se nelegea n trecut toate substanele azotate cu caracter bazic, care aveau aciune fiziologic asupra organismelor animale. n grupa alcaloizilor se gseau astfel unele amine, amide, aminoalcooli, aminoacizi, purine etc. Cuprins

1 Istoric o 1.1 Tabel cu principalii alcaloizi i datele descoperirilor acestora: 2 Rspndire 3 Localizare 4 Structura 5 Clasificare 6 Proprieti fizice 7 Proprieti chimice 8 Extracie, identificare, dozare o 8.1 Purificarea alcaloizilor o 8.2 Identificare o 8.3 Dozare 9 Aciune farmacotoxicologic

9.1 Toxicitatea alcaloizilor

Istoric Aciunea toxic sau curativ a plantelor medicinale a fost cunoscut din cele mai vechi timpuri, nc din vremurile preistorice, dupa cum consider arheologii Arlette Leroi Gourhan i Ralph Salecki. Acetia au descoperit ntr-o zon situat la nord de Bagdad, alturi de rmaie umane, de tipul celor din Neanderthal, urme de plante cunoscute pentru proprietile lor medicinale. Or, dup cum se tie omul din Neanderthal a trit acum cel putin 60000 ani. Omul primitiv a separat produsele toxice, de cele folositoare pentru alimentaie, el ntlnindu-se la fiecare pas cu diferite aciuni i a cutat n jurul lor tot ceea ce i putea alina durerile cnd era bolnav. Cucuta se cunotea din vremea lui Socrate i grecii administrau o butur cu extract de cucut condamnailor la moarte. Efectul stimulant al frunzelor de coca (Erytroxylon coca) era cunoscut de poporul inca, care folosete aceste frunze pentru mrirea rezistenei fizice. Amerindienii cunoteau de mult vreme rolul excitant i defatigant al frunzelor mestecate de coca, dar i efectele dezastruoase asupra organismului n momentul cnd era introdus n organism n doze prea mari. Din acest motiv ei mestecau aceste frunze , n maniera indicat de practicile tradiionale, spre a infrnge foamea i n special oboseala dat de distanele imense. Poetul Abraham Cowley compune la vremea sa chiar un poem, dedicat virtuilor acestei plante, care se ncheie cu urmtoarele trei versuri: Trei frunze ajung pentru 6 zile de mars Omul din Quito nzestrat cu aceast provizie Poate strbate ntinii Anzi, scldai n nori. Tot ei cunoteau proprietile antimalarice ale scoarei de Cinchona succirubra, dup cum semnaleaz un clugar augustin, Calaugha, care n 1639 public ntr-o carte religioas aprut n Spania urmtorul fragment: In regiunea Loxa crete un arbore pe care locuitorii l numesc arborele de friguri, i a crui coaj, de culoarea scorioarei, transformat in pulbere i administrat ntr-o cantitate echivalent cu greutatea a dou monede

mici de argint i dizolvat ntr-o butur, vindec febra i accesele ei ; ea a dat rezultate miraculoase n Lima . Opiul, un produs rinos obinut din capsulele macului, era folosit din cele mai vechi timpuri.n antichitate Teofrast, i Nicandros fac referine la otrvirea cu opiu, Nicandros fiind primul care ne las o descriere sumar a intoxicaiei: cel care bea o butur n care intr i suc de mac, cade ntrun somn profund; membrele i se rcesc, ochii devin fici, o sudoare abundent apare pe corp, faa devine palid, buzele i se umfl, ligamentele maxilarului inferior se relaxeaz , unghiile devin livide, ochii i cad in orbite. Cu toate acestea, nu trebuie s te sperii de acest aspect, ns trebuie s i admistrezi repede bolnavului o butur cald, preparat din vin amestecat cu miere i s i se scuture corpul cu energie, astfel ca bolnavul s vomite. Dioscorides, n secolul I e.n., cunotea perfect metoda de colectare i preparare a opiului, iar recomandrile sale pentru prepararea siropului de mac, numit diacodion, snt n esent nemodificate n farmacopeile moderne. Celebra butur a zeilor din Olimp, cunoscut i sub denumirea de ambrozie, este mai mult ca sigur c nu a fost altceva dect un obinuit decoct de hai. Aceeai butur investit cu aceleai virtui de imortalitate o gsim i n mitologia hindus sub denumirea de amrita. O alt butur celebr a mitologiei elene nephentes- i care mult timp a fost considerat ca fiind un produs al imaginaiei prodigioase a lui Homer, exist ca atare. Aceast butur dnd uitare durerii i necazurilor, dup cum se precizeaz n Odiseea, nu este dect un produs pe baz de opiu. Tot in Odiseea se precizeaz c aceast butur intr n Grecia prin Elena, celebra soie a regelui spartan Menelaos, care la rndul ei o primete de la egipteanca Polydamna, sotia lui Thomis, cci n Egipt n special pmintul roditor produce un mare numr de plante, unele salutare altele mortale. Graie papirusului descoperit in 1873 de Georg Moritz Ebers i care dateaz din anul 1550 .e.n., respectiv din cea de a XVIII-a dinastie gsim dovezi incontestabile despre cunoaterea de ctre urmaii lui Amenophis I a virtuilor halucinogene i sedative ale opiului. Acest papirus care pe bun

dreptate poate fi considerat cel mai vechi tratat de medicin al omenirii, menioneaz existena a circa 700 de remedii, ntre care intr cele pe baza de opiu, toate consemnate in papirusul Ebers. Vechii cretani adorau pe o aa numit zei a macilor, care era Mnemosyne i care n acelai timp era i mama Muzelor, iar macul, respectiv Papaver somniferum, este dup cum tim depozitarul a numeroase principii halucinogene. Plinius cel Btrn descrie n celebra sa carte Istoria natural efectele seminelor de mac, planta pe care o aeaz n categoria ierburilor care aduc naintea ochilor fantome i iluzii distractive i agreabile.

Fruct de Atropa belladona Otrvitorii de profesie din Evul Mediu ntrebuinau adesea plante otrvitoare ca belladona, pentru a produce un tip de intoxicaie adeseori cu aciune prelungit. Acest fapt l-a determinat pe Linn s numeasc planta Atropa belladona, dup Atropos, una dintre cele 3 ursitoare, cea care taie firul vieii. n anul 1817 farmacistul Sertrner, din Hanovra, atrage atenia asupra pricipului extras din opiu, pe care l denumete morphium dupa Morfeu, zeul nopii i al somnului, care subliniaz efectul de baz al morfinei. Odat cu aceast descoperire, putem spune c ncepe cu adevrat studiul alcaloizilor, iar de aceti compui azotai i leag numele numeroi oameni de tiin: chimitii i farmacitii Pelletier i Caventou, Woskressenski, Dumas, Robiquet, Laurent, Gerhardt, Lassaigne, Roussin, Tanret. n 1818 Caventou i Pelletier descoper stricnina, pe care o izoleaz din nuca vomic (Nux vomica). n 1820 Runge gsete chinina n scoara de quinquina (Cinchona succirubra) i cafeina n cafea (Coffea

arabica). n 1827 Gieseke reuete s extrag coniina din cucut (Conium maculatum), Passell i Reinmann separ nicotina (1828) din frunzele de tutun (Nicotiana tabacum), iar n 1831 Mein obine atropina prin tratarea beladonei. [modificare] Tabel cu principalii alcaloizi i datele descoperirilor acestora: Alcaloidul Morfin Narcotin Stricnin Chinin Brucin Cafein Coniin Nicotin Atropin Narcein Codein Teobromin Papaverin Cocain Apomorfin Pilocarpin Arecolin Teofilin Anul descoperirii 1803 1817 1818 1818 1818 1820 1827 1827 1831 1832 1832 1842 1848 1862 1870 1875 1881 1888 Descoperitorii Sguin i Courtois (simultan), Derosne; Izolat n 1804 de Sertrner Robiquet Pelletier, Caventou; formula de Sir Robert Robinson n 1946 Pelletier, Caventou Pelletier, Caventou Runge, Robiquet Gieseke Passelt, Reinmann Mein, Geiger, Hessh Pelletier Robiquet Woskressenski Merck Whler Matthiesen, Wright Gerard, Hardy Jahns Kassel

Scopolamin Yohimbin Lobelin Alcaloizii din ergot Platifilin Reserpin Rspndire

1892 Shmidt 1896-1897 Spiegel i Thomas 1921 Wieland 1918-1950 Jacobs, Stoll 1935 1954 Konovalova i Orehov Schlihler i colab.

n majoritatea cazurilor, alcaloizii au fost izolai din Angiospermae, 1015% din aceste plante putnd sintetiza alcaloizii, unele familii avnd chiar o tendin pronunat de biosintez: Annonaceae, Apocynaceae, Asteraceae (subfamilia Senecioneae), Berberidaceae, Boraginaceae, Convolvulaceae, Erytroxylaceae, Loganiaceae, Magnoliaceae, Papaveraceae, Solanaceae, (Dicotiledonate), Amarylidaceae i Liliaceae (Monocotiledonate). Cantitile n care se gsesc alcaloizii variaz n limite foarte largi, de obicei n plante se gsesc amestecuri de alcaloizi n care un alcaloid este majoritar. Alcaloizii au o rspndire inegal n organele plantelor: atropina - 0,30% n frunze, 0,45% n rdcini; chinina - prezent numai n scoar, lipsete n frunze. Dei majoritatea alcaloizilor sunt izolai din regnul vegetal, s-a confirmat existena lor i n regnul animal: ordinul Urodales (salamandre), sau Anourales (broate) genurile Buffo, Phyllobates ( potenial neurotoxic), Arthropode, Coleoptere, Neuroptere, Myriapode, Spongieri. Localizare Alcaloizii se gsesc n vacuolele plantelor, sub forma de sruri cu diferii acizi (acid benzoic, citric, meconic, tartric. etc), sau n combinaii tanice, ns se mai pot gsi i sub form de baze cuaternare sau teriare . Acizii organici care formeaz cel mai frecvent sruri cu alcaloizii sunt:

Acid aconitic

Acid cafeic

Acid chelidonic

Acid chinic

Acid citric

Acid fumaric

Acid malic

Acid meconic

Acid tartric

Acid veratric Structura Alcaloizii au cel puin un atom de azot heterociclic, acesta fiind de cele mai multe ori teriar, mai rar cuaternar. Heterociclurile se pot condensa ntre ele sau cu alte cicluri astfel nct moleculele alcaloizilor pot deveni de tip policiclic sau macrociclic. Datorit grefrii pe nucleu a numeroase grupri funcionale, unii alcaloizi pot prezenta caracter fenolic (morfina), alii de tipul atropinei , reserpinei pot forma esteri, eteri (codeina) sau alcaloizi glicozidati (solanina din cartof). De obicei au activitate optic, fiind levogiri (cei mai des ntlnii i cu cea mai mare activitate

farmacologic) sau dextrogiri, activitate imprimat de atomii de carbon ai acizilor cu care se esterific: (acidul tropic, n cazul hiosciaminei i scopolaminei). i orientarea substituenilor n poziiile S sau R confer modificarea aciunii farmacologice (chinina - 8S, 9R este antimalaric, n timp ce chinidina - 8R 9S este antiaritmic clasa 1A, conform clasificrii lui Vaughan Williams). Clasificare n mod curent alcaloizii se clasific att pe criteriul structurii chimice, ct i pe cel al originii lor. Astfel, alcaloizii cunoscui se mpart n urmtoarele categorii: Reprezentani piperin, coniin, trigonelin, arecaidin, guvacin, Derivai de piridin pilocarpin, citizin, nicotin, spartein, peletierin Derivai de higrin, cuscohigrin, nicotin pirolidin Derivai de tropan atropin, cocain, ecgonin, scopolamin chinin, chinidin, dihidrochinin, dihidrochinidin, Derivai de chinolin stricnin, brucin, veratrin, cevadin Alcaloizii din opiu: morfin, codein, tebain, Derivai de papaverin, narcotin, sanguinarin, narcein, izochinolin hidrastin, berberin Derivai de mescalin, efedrin fenetilamin Derivate de triptamin: dimetiltriptamin (DMT), NMT, psilocibin, serotonin, melatonin Ergoline: alcaloizii din ergot: ergin, Derivai de indol ergotamin, acid lisergic, etc.; derivai ai acidului lisergic (LSD) Beta-carboline: harmin, yohimbin, Grup

reserpin, emetin Derivai de purin Terpene Derivai de betain (cu azot cuaternar) Derivai de xantin: cofein, teobromin, theofilin Din aconit: aconitin Steroli: solanin, samandarin muscarin, colin, neurin

Dup precursorul biosintetic, alcaloizii pot fi grupai n : Reprezentani - tipul de alcaloid alcaloizii pirolidinic, pirolizidinici si Ornitin tropanic alcaloizii piperidinici, piridinici, Lisin chinolizidinici alcaloizii izochinolinici, galantaminici; tot din aceti precursori provin i unii Fenilalanin i Tirosin protoalcaloizi (efedrina, catinona, capasaicina) i betalaine (indicaxantina) alcaloizii indolici de diferite tipuri : eserinic, beta carbolinic, yohimbanic, Triptofan stricninic, lisergic, dar i protoalcaloizii psilocina i psilocibina alcaloizii acridinici i chinazolonici Acid antranilic alcaloizii imidazolici Histidin Acid mevalonic sau AcetilCoA alcaloizii terpenici i sterolici alcaloizi purinici Baze purinice Precursor Proprieti fizice

Proprietile difer n funcie de prezena sau absena oxigenului n structura lor , dar i de forma n care se gsesc. Alcaloizii oxigenai sunt cristalizai, incolori, cu excepia berberinei (colorat in galben) sanguinarinei (culoare roie). Au gust puternic amar i sunt optic active. Sunt solubili n solveni apolari (eter, benzen, cloroform), sunt insolubili sau parial solubili in ap. Alcaloizii cuaternari i pseudoalcaloizii snt solubili n ap i n alcool, insolubili n solveni organici apolari. Alcaloizii sub form de sruri snt substane solide, cristalizate, fr miros, cu gust foarte amar si puncte de topire nete, solubile n ap i n alcool. Proprieti chimice nsui denumirea lor de alcaloizi, care deriv din arabul al-kaly (sod), arat principala lor proprietate, bazicitatea. Aceasta variaz n limite foarte largi i este imprimat de perechea de electroni ai atomului de azot, de sistemul heterociclic, de prezena unor duble legturi i de grupele electrofile adiacente azotului. Dac n jurul atomului sunt grupe alchil (grupe respingtoare de electroni) bazicitatea crete. Gruprile atrgtoare de electroni (carboxil) reduc disponibiltatea electronilor de la atomul de azot, implicit reducnd bazicitatea sau chiar anulnd-o. Datorit bazicitii, soluiile apoase de alcaloizi sunt instabile, fapt de care trebuie inut cont la extracia lor. Pentru extracia, purificarea i conservarea lor, se utilizeaz acizi minerali (azotic, clorhidric, sulfuric), iar din aceste soluii sunt deplasai prin intermediul unor baze (amoniac, sau hidroxizi alcalini). Extracie, identificare, dozare Trebuie inut cont de natura i structura lor; astfel:

Antrenarea cu vapori de ap (alcaloizi volatili) se aplic pentru coniin, nicotin, spartein Extracia cu solveni apolari (benzen, cloroform, eter) se aplic alcaloizilor teriari. Aceast operaie cuprinde dou etape: 1.deplasarea alcaloizilor sub form de baze 2.extracia propriu-zis i purificarea (se efectueaz la rece, prin agitare i extracie repetat, n aparat Soxhlet, iar la alegerea

solventului trebuie inut cont de toxicitatea acestuia, inflamabilitate, usurina recuperrii acestuia pentru o refolosire ulterioar.

Extracia cu solveni polari (alcool concentrat sau 40-70%) se efectueaz la rece (macerare, percolare) sau la cald (refluxare)

Purificarea alcaloizilor Are loc prin mai multe procedee

Uurina de deplasare a alcaloizilor baz n alcaloizi sare (cu ajutorul acizilor anorganici sau organici), sau din alcaloid-sare n alcaloid baz (prin alcalinizare la pH 8-9) i extracie cu solvent apolar Reinerea pe rini schimbtoare de ioni, urmat de eluia de pe acestea cu acizi tari Precipitarea sub form de iodomercurai, reineckai, picrai.

Identificare Se face prin reacii de precipitare cu reactivii generali (care conin metale sau metaloizi: mercur, bismut, tungsten, iod) reactivii generali de precipitare sint alctuii din

ioduri complexe acizi anorganici compleci sruri ale metalelor grele combinaii organice sau anorganice

Toi alcaloizii dau cu aceti reactivi precipitate albe, galbene sau portocalii brune. Denumirea reactivului BOUCHARDAT DRAGENDORFF Compoziie chimic Sol. apoas de iod iodurat Sol. apoas de tetraiodobismutat de potasiu Culoarea precipitatului brun-rocat rou-portocaliu sau galben-portocaliu, solubil in alcool,

MAYERVELTZER

BERTRAND

MARME

SCHULTZE

REINECKE (SARE) HAGER KNORR IONESCUMATIU

eter si ali solveni alb, devine glbui, Sol. apoas de tetraiodomercurat cristalin sau bipotasic cu adaos de cloralhidrat microcristalin, solubil n alcool alb, alcaloidul este eliberat din Sol. apoas de acid silicotungstic complex cu hidroxizi alcalini galben-rou n Sol. apoas de iodur dubl de prezena acidului potasiu i cadmiu sulfuric diluat Acid fosfoantimonic in prezen de acid fosforic sau acid sulfuric alb concentrat Sarea de amoniu a acidului cromdiaminotetracianic n acid clorhidric diluat Cr(NH3)2(SCN)4NH4H2O galben, solubil la acid picric 1% cald galben sau rou, acid picrolonic 2% precipitat care se descompune la cald Sol. saturat de acid picric n cristale galbene, alcool 5% cu glicerin caracteristice

Aceste reacii sunt specifice tuturor substanelor azotate, dar i substanelor neazotate care dau ioduri duble (cumarine, furanocromone, lignani), dup cum exist i alcaloizi care nu precipit cu aceti reactivi (alcaloizii purinici). Exist i reaciile caracteristice (n general de culoare) care se folosesc pentru identificare:

reacia Vitali-Morin folosit pentru alcaloizii tropanici: n prezena HNO3 fumans i a KOH alcoolic, se formeaz esteri nitrici sau nitroderivai, violei (n prezen de aceton crete stabilitatea - reacie utilizat n fotocolorimetrie) reacia murexidului - pentru alcaloizii purinici: clorat de potasiu n mediu de HCl (formare de acid purpuric), n prezen de amoniac se transform n sarea de amoniu a acidului purpuric, de culoare roieviolet soluia de vanilal 1% n acid fosforic - identificarea glicoalcaloizilor. reacia Oberlin Zeisel: sol. de clorur feric 1-5% n mediu de acid percloric - alcaloizii din Rauwolfia. radiaiile UV -alcaloizi din Chinae cortex dup tratare cu acid formic.

Dozare

Metode n mediu apos (acidimetrice): se folosesc acizii sulfuric sau clorhidric, ca indicatori cei ce vireaz la pH neutru Metode n mediu neapos (protometrice): se aplic alcaloizilor baze slabe, n mediu de acid acetic glacial (are putere mare de dizolvare i constant dielectric mare), sau cloroform (grad mare de solubilizare). Ca titrant se folosesc soluia de acid percloric sau acid p-toluen sulfonic, ca indicatori: cristal violet, violet de metil, Sudan III. Metode gravimetrice: n cazul existenei unei cantiti suficiente de alcaloizi. Se precipit alcaloidul cu soluii de: acid picric (reacia Hager), picrolonic (reacia Knorr), reacia Bertrand Complexonometrice: se precipit alcaloidul cu un exces de reactiv, exces care este titrat cu complexon Reacia Ionescu-Matiu: are la baz precipitarea alcaloizilor cu reactiv Mayer-Veltzer, izolarea i mineralizarea precipitatului cu amestec sulfonitric, precipitarea cu nitroprusiat a sulfatului de mercur rezultat din mineralizare, izolarea i dizolvarea precipitatului in clorur de sodiu. Cantitatea de alcaloid se calculeaz in functie de cantitatea de mercur intrat n reacie Colorimetrice: utilizeaz diferii reactivi, care dau coloraii intense cu alcaloizii, coloraii care pot fi citite:

-PABA (acid p-dietil aminobenzoic) cu alcaloizii lisergici - coloraie violet, sau gri-verzui -Vitali-Morin (vezi mai sus) -Fericianura de potasiu este redus de morfin la ferocianur, iar aceasta n prezena clorurii ferice formeaz ferocianura feric (albastru de Prusia)

Spectrofotometrice: se folosesc radiaiile electromagnetice din regiunea UV (185-400 nm), vizibil (400-800 nm) sau IR (peste 800 nm)

Aciune farmacotoxicologic Unii cercetatori consider c alcaloizii, datorit toxicitii lor sunt substane de aprare ale plantelor mpotriva dunatorilor, ei fiind toxici pentru majoritatea animalelor (exceptie iepurii care pot consuma frunze de Atropa belladonna, fr a suferi intoxicaii datorita prezentei unei enzime numita tropanon esteraza). Alii consider alcaloizii ca depozitare a azotului organic, exist i ipoteza c ar avea un anumit rol n transformarile biosintetice ale unor substane, sau mai nou c asigur protecia plantelor mpotriva aciunii nocive a oxigenului singlet 1O2. Datorit faptului c structura alcaloizilor este extrem de variat, i aciunea lor este complex:

SNC : alcaloizii stimulani (cafein, stricnin), depresoare (morfin) SNV : alcaloizi simpatomimetici (cocain efedrin), simpatolitici (yohimbin), anticolinergici (atropin), ganglioplegici (nicotin, spartein) receptori adrenergici, dopaminergici sau serotoninergici (alcaloizii din Secale cornutum) Celulele maligne unde pot prezenta aciune citostatic : vinblastina, vincristina) Parazii ( chinin)

Toxicitatea alcaloizilor Sunt substane foarte toxice, n doze relativ mici. Ei pot aciona asupra diferitelor sisteme:

Vincristina are efecte neurotoxice centrale. Vinblastina (alcaloid antimitotic) este un puternic leucopeniant i determin tulburri gastrointestinale i neurologice Aconitina este toxic al centrilor bulbari Chinina i morfina determin depresie respiratorie. Cocaina i morfina determin farmacodependen