PRCTICA DE LABORATORIO DE QUMICA ANLISIS POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN 1. OBJETIVOS.

Conocer y aplicar la ley de Lambert - Beer Determinar la concentracin de una solucin por espectrofotometra. Establecer los factores que ocasionan desviaciones a la ley de Lambert -Beer. Establecer la relacin entre la transmitancia y absorbancia con la concentracin de una solucin. 2 . TEORIA. Espectro electromagntico. Es el conjunto de ondas electromagnticas que comprenden desde las de mayor energa y menor longitud de onda como son los rayos gamma y rayos X, pasando por la luz ultravioleta, visible (que en realidad ocupa una estrecha franja del espectro electromagntico), infrarroja, hasta las ondas electromagnticas de mayor longitud de onda y menor energa como son las ondas de radio. Las ondas electromagnticas se desplazan a la velocidad de la luz. La regin visible del espectro comprendida en los rangos de 380 a 750 nm. Espectrofotometra. Es un mtodo de anlisis que hace uso de la interaccin y transportan sin transferencia de materia. Absorcin electromagntica. Es la interaccin de los fotones con los electrones de una sustancia; en este proceso se transfiere energa a la molcula que provoca una disminucin en la intensidad de la radiacin electromagntica incidente entre la materia y la est

energa radiante la cual se refiere a como las ondas electromagnticas se propagan

Ley de Lambert Beer. Cuantifica la radiacin absorbida en funcin de la concentracin de las moleculas del analito y depende de la longitud que recorre el rayo en el medio absorbente. A = Log ( P0 / P) = a b c Donde: A [= ] Es la absorbancia; definida como la cantidad de radiacin que absorbe una solucin y es una magnitud adimensional. Po [= ] Es la intensidad de la radiacin del haz en fotones que incide sobre la celda. P [= ] Es la intensidad de la radiacin del haz que abandona la celda (P P0 ) a[= ] Constante de proporcionalidad (absortividad) b[= ] Longitud interna de la celda 1cm. c [= ] Concentracin de las especies absorbentes. Transmitancia. Es la fraccin de la radiacin que se trasmite la cual se mide en unidades de transmitancia o porcentaje de transmitancia. T = P / P0 A = - Log T = Log P0 / P Ya que el % T = T x 100 % entonces; A = -Log T= 2 Log %T donde 2 = Log 100, luego la escala de absorbancia se encuentra en un intervalo entre 0 y 2.

Espectrofotmetros y colormetros. Un espectrofotmetro es un instrumento en que puede medirse la cantidad de radiacin visible, ultravioleta o infrarrojo que absorbe una solucin a una longitud de onda dada. Un colormetro es un instrumento en el cual se mide esencialmente luz visible. Los cuatro componentes fundamentales de un espectrofotmetro son; la fuente, el monocromador la celda y el detector.

3. PROCEDIMIENTO. a. b. c. d. e. f. Encender el equipo 15 minutos antes de iniciar la prctica. Lavar y secar cuidadosamente la celda con agua destilada y papel de arroz, preferiblemente si se dispone de ste, evitando dejar huellas digitales. Seleccionar la longitud de onda con el dial de control del monocromador. Con el porta celda vaco ajuste 0.0 % de transmitancia, para bloquear el haz y evitar que llegue radiacin al detector. Con la celda a tres cuartas partes de agua destilada ajuste el 100.0% de transmitancia, para eliminar interferencias debido al blanco (solvente). Fijar la celda en el porta celdas, haciendo coincidir la lnea de la celda con la lnea del portacelda. Este procedimiento debe realizarse siempre en forma reproducible. g. h. i. Realizar las mediciones de menor a mayor concentracin, en porcentaje de transmitancia, de varias soluciones estndar. Realizar la medicin de la muestra problema en porcentaje de transmitancia. Elabore una grafica de absorbancia vs concentracin.

4. PREGUNTAS a) Elabore una grafica de absorbancia vs concentracin sin linealizar y determine si se presentan desviaciones positivas o negativas de la ley de Beer. b) Mediante regresin lineal halle la ecuacin correspondiente a la grafica elaborada y establezca la concentracin de la muestra problema. c) Emplee el valor de la pendiente y el promedio de las absortividades de los patrones, para determinar la absortividad molar de la sustancia analizada. Compare y discuta. d) Calcule la absortividad molar de la muestra problema y consulte acerca de su naturaleza. e) Considere las ecuaciones : Ad = ad bd cd y Ap = ap bp cp donde; los subndices d y p corresponden a muestra desconocida y patrn respectivamente. Seleccione uno de los patrones para determinar la concentracin de la muestra desconocida y compare ste valor con las concentraciones que se obtendran empleando las absortividades del literal c). f) Que tipo de soluciones no cumplen la ley de Lambert- Beer. g) De acuerdo al color de la sustancia analizada, cul sera la longitud de onda ms apropiada para realizar la lectura espectrofotomtrica? h) Consulte aplicaciones industriales de espectrofometria de absorcin.

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