ANLISE DE ACARES REDUTORES PELO MTODO DO DNS

PREPARO DE 250 ML DE NaOH 2N 1. Pesar 20g de NaOH PA, em Becker de 250 mL 2. Dissolver com 100 mL de gua destilada em banho com gua fria 3. Aferir em balo volumtrico de 250 mL com gua destilada PREPARO DE 250 ML DE DNS 1. Pesar 2,5g de DNS (cido 3,5 dinitro-saliclico) e adicionar 50 mL de NaOH 2N, em becker de 500 mL 2. Pesar 75g de tartarato duplo de sdio e potssio e dissolver em 125 mL de gua destilada. Agitar sob aquecimento at dissolver total 3. Adicionar soluo A na soluo B sob aquecimento at dissolver completamente 4. Deixar esfriar 5. Aferir em balo de 250 mL com gua destilada 6. Armazenar a soluo em frasco escuro sob condies mnimas de luz. CURVA PADRO 1. Pesar 100 mg (0,1 g) de glicose ou frutose 2. Dissolver em 100 ml de gua destilada em balo volumtrico 3. Homogeneizar vigorosamente 4. Transferir 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ml da soluo-me para tubos de ensaio 5. Completar o volume a 10 ml com gua destilada

6. Homogeneizar 7. Transferir 1ml para tubos com 1 ml de DNS (em duplicata) 8. Homogeneizar 9. Aquecer os tubos a 100C por cinco minutos, no colocar os tubos antes de aquecimento vigoroso do banho 10. Esfriar em banho com gua a temperatura ambiente por 5 minutos 11. Completar com 8 ml de gua destilada 12. Homogeneizar 13. Ler a 540 nm

ANLISE DAS AMOSTRAS 1. Determinar a quantidade inicial de amostra que resulte em leitura dentro da faixa padro, as diluies necessrias devem ser usadas no clculo para determinar o teor de acares da amostra. 2. (Sugesto: Dissolva 0,5 g do resduo em 50ml, 100ml e 200ml e siga a anlise. Colete os dados da melhor leitura dentro da curva. Caso as leituras de absorbncia no caiam na curva, ajuste a diluio para mais ou para menos da melhor leitura entre as trs inicialmente testadas) 3. Agitar at perfeita homogeneizao, 10 minutos em agitador magntico 4. Filtrar com gaze 5. Seguir procedimento para curva padro a partir do ponto 7 6. Usar curva padro para transformar a leitura de absorbncia em miligramas de acares redutores por mililitros de soluo. 7. Efetuar os clculos para expressar em miligramas por grama de amostra inicial (mg acares / g de amostra.

INVERSO DA SACAROSE (ART) Em um tubo de ensaio, colocar 1ml da amostra diluda + 1ml de HCl 2N. Aquecer a 100C por 5 minutos. Resfriar. Neutralizar a amostra com 3ml de NaOH 1N. Seguir a metodologia a partir do ponto 7.