UNIVERSIDAD MANUELA BELTRN MACROPROCESO DE RECURSOS E INFRAESTRUCTURA ACADMICA FORMATO PARA PRCTICAS DE LABORATORIO

Fecha: Abril 2011 Cdigo: GRL-006 Versin: 4.0

INFORMACIN BSICA

NOMBRE DE LA PRCTICA: CLULA PROCARIOTA Y EUCARIOTA

PRCTICA No. 13

ASIGNATURA: Biologa

TEMA DE LA PRCTICA: Descripcin general de clulas Procariotas y Eucariotas.

LABORATORIO A UTILIZAR: Biologa

CONTENIDO DE LA GUA

OBJETIVOS.

Diferenciar con ayuda y empleo del microscopio clulas procariotas y eucariotas Realizar diferenciacin de estrategias de tincin bsicas como la gram. Reconocer algunos organelos celulares visibles con el microscopio compuesto. Generar habilidad en la manipulacin de instrumentos de laboratorio sobre tcnicas bsicas adems de analizar las medidas de bioseguridad a considerar en laboratorio.

INTRODUCCIN. La clula se puede definir como "la unidad viva ms pequea capaz de producir crecimiento autnomo y reproduccin, as como de utilizar sustancias alimenticias qumicamente diferentes de s misma". Basndonos en la organizacin de las estructuras celulares, todas las clulas pueden ser divididas en dos grandes grupos: Procariotas y Eucariotas, a continuacin se enlistan algunas diferencias.

MARCO TEORICO Clula Procariota Clula Eucariota ADN disperso en una regin: Nucleoide, este Ncleo rodeado por una membrana. Material no est diferenciado por una membrana. gentico fragmentado en cromosomas formados por ADN y protenas. Generalmente son pequeas de 1-10 m Por lo general clulas grandes, (10-100 m). Reproduccin celular directa Reproduccin celular por Mitosis y Meiosis En especies fotosintticas, las enzimas Las enzimas para la fotosntesis se necesarias estn ligadas a las membranas. empaquetan en los cloroplastos.

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Algunas clulas del cuerpo de los animales tienen la funcin de proteccin estas son las epiteliales o epitelios. Los Epitelios se clasifican segn el nmero de capas celulares en simples o monoestratificados, estratificados, seudoestratificados y estos a su vez se clasifican segn la forma de sus clulas. Las clulas epiteliales simples o monoestratificado; escamoso o planas (Figura 1), se encuentran en el revestimiento de la mejilla, ayudan a mantener una pelcula hmeda en la cavidad oral, son fcilmente removibles.
Figura 1. Representacin del tejido epitelial Plano o Escamoso, tomado de: http://1.bp.blogspot.com/_3Ci9w7423QQ/Rk4lizKp6EI/ Imagen11.png

En la boca tambin se encuentran clulas procariotas, pertenecientes al grupo de de las bacterias; hay varias formas de clasificarlas, un ejemplo es segn sus diferentes formas, en la boca las ms comunes son los cocos (esfricas) y bacilos (bastones rectos).

Las bacterias tambin se clasifican en dos grandes grupos: Gram positivas (+) y Gram negativas (-). Esta clasificacin se basa en la coloracin que toman las bacterias frente al mtodo de tincin, desarrollado por Christian Gram en 1884, por lo que a esta tcnica se le llama Tincin de Gram. CONSULTA PREVIA Ver los siguientes videos y realizar un mapa conceptual o diagrama causa efecto usando mnimo 25 conceptos en Cmaptools http://www.youtube.com/watch?v=hBTImxRZrDM http://www.youtube.com/watch?v=8ewSP5GVJos&feature=related . Recuerde que el mapa es individual ( No se genera ni extrae de internet debe ser construido a partir de la gua y videos expuestos, adems del manejo de conceptos propios)

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METODOLOGIA Se desarrollara en grupos de cinco personas como mximo, en los espacios de los laboratorios de Biologa, siguiendo el procedimiento indicado en la gua de trabajo. Esta prctica se realizara para estudiantes del rea de salud e ingenieras incluyendo psicologa El primer procedimiento en la identificacin es conocer las diferencias entre clulas eucariotas y procariotas. Mediante la socializacin inicial de all y a partir del procedimiento a desarrollar se pretende desarrollar la capacidad de comprensin sobre las diferencias estructurales entre celular eucariotas y procariotas (pared celular) como principal caracterstica y que es evidenciada en el uso del procedimiento de tincin denominado Tincin de Gram. MATERIALES Y REACTIVOS A UTILIZAR Materiales Y Equipos Clulas epiteliales (exudado bucal) Reactivos Lugol (5ml) Material Estudiante* Marcador para vidrio y colores (anaranjado, azul, morado, rojo, negro, blanco) entre otros (INDISPENSABLE) Cinta de enmascarar - toallas de papel Guantes (2 pares por estudiante) Gafas de proteccin, Gorro y Bata Manga larga de material no inflamable. Porta objetos - laminillas (1 caja)

(8) Microscopio

Cristal violeta, (5ml)

Pipetas Pasteur plsticas (8)

Azul de Metileno (5ml)

Aceite de inmersin (2)

fucsina (5ml) alcohol acetona (5ml)

Hisopos o escobillones (varios) Medios de Cultivo Bacteriano _ preparados con anterioridad

Cubre objetos - laminas (1 caja)

Los estudiantes que no porten sus implementos de Bioseguridad individuales y materiales por equipo no sern admitidos a la sesin de trabajo prctico. Recuerden traer las cantidades solicitadas en recipientes aislados para no contaminar un contenido mayor al solicitado en el laboratorio.

PRECAUCIONES Y MANEJO DE MATERIALES Y EQUIPOS. Por precaucin se debe utilizar guantes dado el trabajo con microorganismos. Cuidado en el manejo del microscopio que es un equipo delicado y costoso. Realizar la limpieza de lentes (oculares y Objetivos) con Isopropanol con papel de arroz.

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La platina y placa, tornillos macro y micromtrico con algodn y alcohol. Utilizar los cubreobjetos en las observaciones necesarias para no ensuciar las lentes. Recuerde que el uso de los elementos de Bioseguridad es indispensable y obligatorio ( Bata blanca de manga larga, Guantes, Gorro y gafas de seguridad) BIBLIOGRAFIA MADER, S. 2008. Biologa. 9na Edicin. McGraw Hill. Mxico, D.F. MATTA, N; GARCIA, M. 1997. Curso libre juvenil en Biologa. Facultad de Ciencias. Departamento de Biologa. Universidad Nacional de Colombia. PERSON, 2010.Biologia. Mxico, D.F.

ELABOR
Firma: Biologa Nombre: Biologa

REVIS

APROB
de laboratorio de

Docentes Laboratorio de Firma: Equipo Docente Laboratorio Firma: Equipo de Biologa Biologa Equipo Laboratorio

de Nombre: Equipo Docente Laboratorio Nombre: Equipo de Laboratorio de de Biologa Biologa y Gerencia de Laboratorios

Fecha:

Enero 2003 - Rediseo

Fecha:

Enero 2013

Fecha: Enero 2013

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INFORME DE LABORATORIO GRUPO: ESTUDIANTES:

NOTA:

CARRERA:

Formule tres objetivos que desee cumplir con la Prctica de Laboratorio

Elabore un mapa conceptual del tema a tratar en la prctica de laboratorio. Ver los siguientes videos y realizar un mapa conceptual o diagrama causa efecto usando mnimo 25 conceptos en Cmaptools http://www.youtube.com/watch?v=hBTImxRZrDM http://www.youtube.com/watch?v=8ewSP5GVJos&feature=related . Recuerde que el mapa es individual ( No se genera ni extrae de internet debe ser construido a partir de la gua y videos expuestos, adems del manejo de conceptos propios)

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PROCEDIMIENTO PARA MUESTREO Y TINCION DE CELULAS EUCARIOTAS

Colocar una pequea gota de solucin salina en el centro de una lmina o porta objetos. Con el extremo de un palillo o hisopo de algodn raspe suavemente el interior de su mejilla de arriba hacia abajo yabajo hacia arriba. Luego esta muestra colquela en la gota de solucin salina y proceda a esparcirlo suavemente hastaque cambie la coloracin (frotis). Fije la preparacin pasndola suavemente por la llama del mechero, cuando est seco el frotis, agregue una gota de azul de metileno al 1%. Elimine el exceso de colorante y lave con cuidado. Djela secar colocndola en posicin vertical.

RESULTADOS:
Enfoque en reconozca. 100 X y realice un dibujo de las clulas escamosas epiteliales. Seale los orgnulos que

PROCEDIMIENTO PARA MUESTREO Y TINCION DE CLULAS PROCARIOTAS NOTA: LOS MICROORGANISMOS DEBEN MANEJARSE SIEMPRE ALREDEDOR DE LA LLAMA. I. TINCIN DE GRAM 1. Introduzca un escobilln en la cavidad bucal de un compaero llegando hasta su garganta 2. Rpidamente haga movimientos de arriba hacia abajo con cuidado de no lastimar a la persona que se est tomando la muestra. 3. Extienda en una lmina limpia y desengrasada la muestra del escobilln 4. Djela secar 5. Fije la muestra a la lmina flameando (pasar tres veces por el mechero) 6. Deje enfriar 7. Aplique cristal violeta por un minuto (mida el tiempo ya que debe ser exacto) 8. Lave el exceso de colorante 9. Aplique lugol por un minuto 10. Lave el exceso de colorante 11. Aplique alcohol acetona por 30 segundos (el tiempo debe ser exacto ya que la coloracin se puede alterar en este paso)

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12. Lave el exceso de colorante 13. Aplique fucsina por un minuto 14. Lave el exceso de colorante 15. Deje secar la lmina al pie del mechero sin flamear 16. Monte la muestra en el microscopio y observe en 100 X

RESULTADOS Tanto para el exudado bucal como para el medio cultivado realice la tincin de Gram completa. La toma de muestras en caja o medio se hace con el uso de un asa curva En la muestra realizada anteriormente identifique las siguientes formas Procariotas encontrados normalmente en la boca, especifique si son Gram + o Gram Cocos: Bacilos:

Muestra: ______________________________

II.

Pregunta generadora:

Por qu se usan diferentes lavados entre cada uso de colorantes? Crees que al no lavar puede afectarse la identificacin bacteriana? Cules son los riesgos que se pueden generar al no usar las medidas de Bioseguridad? -

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FINALIZADA LA PRCTICA / Entregue el material completo y limpio al docente para deshacerse de material contaminado se utilizarn los recipientes adecuados, que sern esterilizados posteriormente. CAUSAS DE ERROR Y ACCIONES PARA OBTENER MEJORES RESULTADOS:

CONCLUSIONES

APLICACIN PROFESIONAL DE LA PRCTICA REALIZADA

BIBLIOGRAFIA UTILIZADA