Informe de Laboratorio Nº 4

BIOQUÍMICA 1 – Semestre 2009-I

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO Nº 4

BIOQUÍMICA 1

TEMA:

Proteínas

INTEGRANTES:

CÓDIGO APELLIDOS Y NOMBRES CORREO ELECTRÓNICO

2008236305 Portillo Ávila, Marcia Lore_06_45@hotmail.com
2008014178 Quispe Inga, Marlene Tatykiss5@hotmail.com
2008030743 Rios Gomez, Harry Jean Harry0106@hotmail.com
2007007562 Munive Salas, David Mxdavidricardoperu@hotmail.com
2008012754 Vives Torres, Marcela Marcela_132@hotmail.co

DOCENTE:

Ing. Guillermo Chumbe Gutiérrez

Semestre 2009 – I

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I. INTRODUCCIÓN

Las proteínas son principios inmediatos orgánicos constituidos por largas

cadenas de aminoácidos, los cuales se unen entre sí mediante enlaces
peptídico. La existencia del enlace peptídico, de aminoácidos azufrados, puede
ponerse de manifiesto en el laboratorio mediante una serie de reacciones
coloreadas específicas, que sirve para la identificación de proteínas.

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II. MARCO TEÓRICO

Las proteínas son macromoléculas compuestas por unidades de alfa –aminoácidos

que se unen entre sí mediante enlaces petídicos y que alcanzan un peso molecular
igual o superior a 5000 D.
El enlace peptídico, característico de estos compuestos, resulta de la reacción del
grupo carboxilo de un aminoácido con el grupo amino del otro aminoácido, lo cual da
lugar a un enlace covalente de tipo carbamida .

REACION XANTOPROTEICA:

La reacción xantoproteica es un método que se puede utilizar para determinar la

cantidad de proteína soluble en una solución, empleando nítrico concentrado pero en
nuestro caso en el laboratorio utilizamos H2SO4 . La prueba da resultado positivo en
aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente
en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se
torna color amarillo oscuro.

El REACCION DE BIURET:

Es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos

con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida.

Está hecho de KOH y sulfato cúprico (CuSO4).El reactivo, de color azul, cambia a
violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de
cadena corta.

Objetivos:

 Reconocer la presencia de algunos aminoácidos en las proteínas.

 Conocer algunas propiedades de las proteínas.

 Conocer reacción xantoproteica y de biuret.

 Aprender cómo reacciona la albumina ante las sustancias respectivas.

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III. MATERIALES Y MÉTODOS

III.1. Materiales

 Muestra

• Clara de huevo

 Materiales de vidrio

• Tubos de ensayo

• Gradilla

• Varillas de vidrio

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• Mechero

• Vasos de precipitados

• Pipetas

 Reactivos

• Acido nítrico concentrado

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• Hidróxido de sodio

III.2. Métodos

Usamos el método experimental en el cual implica la observación, manipulación,

registro de las variables (dependiente, independiente e intervinientes) que afectan un
objeto de estudio. A continuación con este método es indispensable usar el método
analítico en el cual se fundamenta en la aplicación del método científico, sus
características son la exactitud, precisión, sensibilidad, limite de detección, intervalo
dinámico, selectividad, seguridad

IV. DESCRIPCIÓN DE LA PRÁCTICA

REACCIÓN XANTOPROTEICA

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1. Colocar en el tubo de ensayo de 2 a 3 ml de solución problema en este

caso clara de huevo
2. Añadir 1 ml de HNO3 concentrado.
3. Calentar al baño maría a 100 ºc
4. Enfriarlo
5. Añadir gota a gota una disolución de sosa al 40%.
6. se torna color amarillo oscuro esto debido a la presencia de una
sustancia alcalina ( existe grupos aromáticos)

Según las guías químicas es una reacción cualitativa, más no cuantitativa. Por ende
determina la presencia o no de proteínas. Para cuantificar se usa otra reacción, como
la de Biuret, y se hace un análisis espectro fotométrico.

REACCIÓN DE BIURET

1. Coger un tubo de ensayo y poner unos 3 ml de albúmina de huevo.

2. Añadir 2ml de solución de hidróxido sódico al 20%.
3. A continuación 4 ó 5 gotas de solución de sulfato cúprico diluida al 1%.
4. Aparecerá una coloración violeta-rosácea característica esto debido a la
presencia de enlaces peptídico (- CO- NH -) que se destruye al liberarse
los aminoácidos.

El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa

cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El Hidróxido de Potasio no
participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga
lugar.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite

determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopía
ultravioleta-visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el ión Cu2+).

REACCIÓN DE LOS AMINOÁCIDOS AZUFRADOS (CISTEÍNA Y METIONINA)

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1. Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3 ml de albúmina de huevo (clara de

huevo).
2. se añade 2 ml de solución de hidróxido sódico al 20%.
3. luego se añade 10 gotas de solución de acetato de plomo al 5%.
4. Calentar el tubo hasta ebullición.
5. se forma un precipitado de color negruzco lo cual nos indica que se ha
formado sulfuro de plomo, utilizándose el azufre de los aminoácidos, lo
que nos sirve para identificar proteínas que tienen en su composición.

Cálculos:
Para todas las reacciones se ha preparado Hidróxido de sodio a 20 % esto a
partir de Hidróxido de sodio a 40 %, en una disolución:
• Numero de moles (inicio) = numero de moles ( final )
• Por lo tanto molaridad x volumen ( inicio) = molaridad x volumen ( final)

La preparación de sulfato cúprico al 1 % fue de la siguiente manera;

 Se toma 9.9 g de sulfato cúprico con 0.1g de agua destilada
 Se combina y agita ambas sustancias y luego se forma la disolución
deseada
La preparación del acetato de plomo al 5 % fue:
 Se toma 0.5 ml de acetato concentrado con 9.5 ml de agua destilada
 Se agita las sustancias y se obtiene la disolución

V. RESULTADOS Y DISCUSIONES

Resultados y Discusiones

1. ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización de la clara de huevo?

En forma rápida ya que cambia sus propiedades por efecto de un agente

externo, se coagula como una ácido, una base o una sal como en este caso el
acido HNO₃.

2. ¿Cuál de los 3 agentes utilizados tiene mayor poder de

desnaturalización?

Con el acido sulfúrico se tiene mayor poder de desnaturalización ya que tiene

mayor pérdida de estructura nativa por ser éste un acido fuerte.

3. ¿Cómo podríamos saber si una sustancia desconocida es una proteína?

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Si es un líquido, primero se agregan ácidos (como el ácido acético) para

desnaturalizar la proteína (de ser así, se formarán grumos que pueden o no
precipitarse al fondo). Después, a ese precipitado se le agrega el reactivo de
biuret, que cambia a violeta en presencia de proteínas, y a rosa cuando se
combina con poli péptidos de cadena corta.

4. ¿Qué coloración da la reacción del biuret?

Provoca una coloración rosa - violácea.

5. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción del biuret?

Claro que si, el reactivo reacciona con cualquier proteína liquida o solida. Por
ejemplo cuando haces una cuantificación de proteínas en suero o cuando
haces una prueba cualitativa en huevos, carnes, papas, etc.

El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos

cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de
composición desconocida.

6. ¿Si se realiza la reacción del biuret sobre un aminoácido como la

glicina?¿ Es positiva o negativa?

Si analizamos sólo UN AMINOÁCIDO, la reacción debería dar negativa, ya que

no hay ningún enlace peptídico (es sólo 1 aminoácido! El enlace peptídico se
da entre 2 aminoácidos).

VI. CONCLUSIONES

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 Las proteínas están constituidas por aminoácidos, por los cuales los
métodos se basan en el reconocimiento de aminoácidos.

 Este proceso nos sirve para reconocer si existe proteínas o no en

ciertos tipos de sustancias en una solución.

 Según los resultados, ninguna sustancia muestra la misma

composición que la solución original.

 Las proteínas son sensibles con las sales metálicas pesadas,

formando precipitados.

VII. BIBLIOGRAFÍA

http://html.rincondelvago.com/biologia_41.html
http://www.joseacortes.com/practicas/protidos.htm
http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna
- Química General – Oswaldo Jauregui Machicao

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