Microbiologa parcial 1.

Historia de la microbiologa.

Diversidad microbiana.
1. Eucariontes Algas. Pluricelulares y unicelulares, fotosintticas y auttrofas. Hongos. Filamentosos (pluricelulares) y levaduriformes (unicelulares), y hetertrofos. Protozoarios. Unicelulares, hetertrofos y carecen de pared celular. 2. Procariotes Bacterias. Unicelulares con amplia diversidad metablica. Arqueobacterias. Unicelulares y algunas crecen en ambientes extremos. 3. Virus Contienen material gentico (ADN o ARN) pero no tienen metabolismo propio. No pueden ser considerados como microorganismos.

Membrana citoplasmtica.
Estructura.
1. Los fosfolpidos estn formados por cidos grasos (hidrofbicos) y glicerol (relativamente hidroflico) unidos por un enlace ster y un grupo PO4- que se encuentra unido al glicerol. En las arqueobacterias la unin del glicerol es por un enlace ter. Los lpidos estn formados por unidades repetidas de isopreno con enlaces glicerol di-ter y glicerol tetra-ter, son las estructuras ms comunes. La estructura tetra-ter permite la formacin de una monocapa lipdica que es ms resistente a descomponerse en fragmentos, se ha encontrado en arqueobacterias hipertermfilas. 2. Estabilizada por puentes de hidrgeno e interacciones hidrofbicas. Tambin los cationes Mg2+y Ca2+ al combinarse inicamente con las cargas negativas de los fosfolpidos estabilizan la membrana. 3. Esteroles en eucariontes dan rigidez y estabilizan la membrana. Micoplasmas (bacterias sin pared celular) tambin contienen esteroles en su membrana para dar estabilidad.

 En bacterias anaerobias se encuentran hopanoides (similares a esteroles) que no requieren de oxidacin durante sus biosntesis y tienen la misma funcin que los esteroles. 4. Las protenas periplsmicas o integrales se encuentran embebidas en la membrana y las protenas perifricas se mantienen en la superficie de la membrana. Tienen gran importancia y confieren propiedades funcionales.

Funciones.
1. Separa al citoplasma del medio ambiente. Alta selectividad, facilita la concentracin de metabolitos especficos y la excrecin de material de desecho. 2. Transporte pasivo. Difusin simple o facilitada. Transporte de soluto especfico es difusin facilitada mediante cambio conformacional en la estructura de la protena (canal o permeasa; en permeasa es ms especfico). Por ejemplo, glicerol en algunos procariontes y glucosa en Zymmomonas. 3. Transporte activo tambin es para solutos especficos. Protenas transportadoras tienen 12 a-hlices. Requiere gradiente de H+ o hidrlisis de ATP. Uniporte: Klisina Simporte de protones: b-galactsido, glutamato, fosfato y sulfato cidos. Simporte de sodio: glutamato Antiporte de sodio/protones: Reciclaje de sodio. Sistema de fosfotransferasa: fosforila las molculas de azcar en cuanto entran a la clula. Transportadores ABC o ATPasas de trfico: (en G-) protenas periplsmicas muy afines al sustrato, lo captan y lo llevan a una de las protenas de la membrana interna, los cuales acoplan el paso del sustrato al citoplasma (lo meten) sin alterarlo qumicamente con hidrlisis de ATP. Sus componentes son: Porinas: OmpF OmpC (BtuB) difunden al sustrato hacia el periplasma. (OMP outer membrane proteins o sea protenas de membrana externa en Gram-) Chaperonas: protenas en el espacio periplsmico. Gran afinidad por sustrato. Heterodmero: 2 protenas integrales de membrana interna. Se abren con el gasto de ATP. (BtuC). ATPasas: protenas perifricas en el lado citoplasmtico que hidrolizan al ATP (BtuD) obviamente estn acopladas al Heterodmero para que este se abra y pase el sustrato. 4. Translocacin (transporte o movimiento) de protenas intra o a travs de la membrana. Sec: para protenas no plegadas (puede se translocacin o secrecin). Componentes de este sistema: Chaperona SecB; lleva a la protena transportada al complejo SecYEG, donde SecYE forma un CCP (canal conductor de protenas o translocn) ATPasa citoplasmtica (Sec A): Hidroliza ATP para que se pueda translocar la protena. SecYEG+SecA =translocasa. SecG estimula transporte, Sec D, F y yajC (complejo de 3 protenas que son regulatorias de este transporte). Peptidasa que quita el pptido seal con el que naci la protena y que fue reconocido por SecB o sea la chaperona. Tat: (twin arginine translocation) para protenas plegadas. Se caracteriza por que hay 2 argininas en el extremo amino terminal del pptido seal de la protena que ser transportada. Sus componentes son TatA, TatB y TatC. Y puede ser TatA sola o acoplada a TatBTatC. Translocasa YidC: translocacin de protenas en la membrana interna (intramembranal). Por ejemplo para acoplar una protena integral que acaba de ser sintetizada.

5. 6. 7. 8.

Exportacin: translocacin de protena al periplasma. Secrecin: protena es transportada (translocada) al espacio extracelular (puede ser otra clula o superficie celular). Las protenas excretadas pueden ser: enzimas hidrolticas (asas), no hidrolticas (toxinas), o protenas estructurales (flagelo, virulencia, pilina). Tipo 1: OMP Tipo 2, 5: dependientes de sec YEG o tat Tipo3,4,6: inyectisomas (3 tiene ATPasa flagelo, 4 es para factores de virulencia, 6 Translocation unit) Tipo7: Micobacterias Excrecin. cuando la molcula no es proteica. Segregacin de cromosomas. Produccin de ATP. Por ejemplo con ATPasas unidas a la membrana interna de mitocondrias, cloroplastos o Gram-. Quimiotaxis. Estmulos pueden ser: pH, osmolaridad, T, repelentes o atrayentes, disponibilidad e N y P ,etc.

Pared celular.
Pared de pptidoglucano o murena.

Tincin de Gram:
Safranina + cristal violeta. Primero se tie con cristal violeta ambas, luego fijar con lugol y deshidratar con alcohol; el cristal yodo-yodurado que se forma por el lugol y la deshidratacin de la pared de G+, hace que el violeta no sale de la pared de G+, aunque si sean solubles con el alcohol lo que facilita que salgan de G-; luego se tien con safranina.

Compuesta por:
1. Glicopolmeros de paredn celular (CWG) Mantenimiento de las envolturas. Interacciones MicroorganismoHospedero. Existe una gran variedad. 2. Lipopolisacridos (LPS). En G+ hay Ac. Teicoicos (Polmeros de ribitol fosfato o glicerol fosfato) y lipoteicoicos (LTA). cidos teicurnicos. (Polisacridos cidos con cido urnico: N-acetilgalactosamina y cido Dglucornico) Micobacterias tienen Ac. Miclicos. 3. N-acetilglucosamina y N-acetil murmico. Arqueas tienen N-acetilglicosamina y N-acetiltalusaminurnico y Capa cristalina S. En el aa. 3 del pptidoglucano que es donde se une a la siguiente capa de peptidoglucano, hay en G+= L-lisina + puente de pentaglicina + alanina en G-= meso-diaminopimelico + alanina 4. Enzimas Transglicosilasa (une ac. muramico y glucosamina) y Transpeptidasa (une a los pptidos mencionados en el punto 3). 5. Polisacridos neutros. Son particularmente importantes en la clasificacin de estreptococos y estafilococos (ejemplo en grupos A, B y C de estreptococos). Son altamente antignicos. Son usados como marcadores.

Pared celular en Micobacterias.

1. Tienen manofosfoinositido (PIM). 2. 2 capas de Peptidoglicano.

3. 3 capas de Arabinogalactana que pega los cidos miclicos y las porinas a la pared celular. Los cidos miclicos tienen lpidos aclicos que contienen protenas superficiales. 4. Lipoarabinomanana, pega todo a la membrana citoplasmtica.

Pared celular en Arqueas.

1. 2. 3. 4. 5. 6. Sulfolobales: tiene capa S Pueden tener membrana externa con porinas. Pseudomureina. Pseudomureina y capa S. Cubierta (Sheath) y capa S. Metanocondroitina y capa S.

Capa S (esto lo investigue por mi cuenta no creo que venga en el examen)(espero)

Consiste en una capa superficial de estructura cristalina bidimensional y monomolecular integrada por protenas o glicoprotenas, que se autoensambla rodeando toda la superficie de la clula. Las protenas de la capa S pueden diferir marcadamente incluso entre especies relacionadas y pueden representar hasta el 10-15% del contenido protenico total de una clula. 1. En las bacterias Gram-negativas, la capa S se fija a los lipopolisacridos mediante interaciones inicas, carbohidrato-carbohidrato, protena-carbohidrato y/o protena-protena. 2. En las bacterias Gram-positivas, domina el enlace entre el peptidoglicano y el polmero secundario de la pared celular (por ejemplo, cido teicurnico). 3. En las arqueas Gram-negativas, las protenas de la capa S poseen una fijacin hidrofbica que se asocia con la membrana lpida subyacente. 4. En las arqueas Gram-positivas, las protenas de la capa S enlazan con el pseudopeptidoglicano.

Funciones biolgicas de la capa S

En las arqueas Gram-negativas, la capa S es el nico componente de la pared celular y por lo tanto es importante para la estabilizacin mecnica. 2. Proteccin contra los bacterifagos y la fagocitosis.
1. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Resistencia a pH bajos. Barrera para las sustancias de alto peso molecular (por ejemnplo, enzimas lticas). Adherencia (en la capa S de glicosilato). Estabilizacin de la membrana. Proporciona zonas de adherencia para las exoprotenas. Proporciona un compartimento periplasmtico en los procariontes Gram-positivos, junto con el peptidoglicano y la membrana citoplasmtica.

Clulas sin pared celular:

Micoplasmas (micobacterias sin pared celular). Protozoarios. Protoplastos las clulas bacterianas (G+) a las que se ha desprovisto totalmente de pared celular Esferoplastos son aquellas clulas bacterianas que poseen restos de pared (G-). Protoplastos y esferoplastos pueden revertir a la forma normal eliminando el tratamiento. La pared celular se puede eliminar: 1. 2. 3. 4.

1.

Por destruccin del entramado del PG mediante enzimas lticas (lisozima, peptidasas). En el caso de bacterias Gram-negativas, previamente hay que desorganizar la membrana externa para hacerla permeable a estas enzimas. Ello se logra usando el quelante EDTA y/o sometiendo las clulas a bajas temperaturas.
Quelantes: (tambin lo investigue por mi cuenta) Los quelantes se disean para competir con los metales por los grupos reactivos fisiolgicos. Forman compuestos de coordinacin con los metales. La investigacin toxicolgica de algunos quelantes propuestos como aditivos alimentarios llev a la observacin de hay fuerte afinidad de los iones de calcio por el EDTA .

2. Por inhibicin de la formacin de nuevo PG en las clulas en crecimiento, tratndolas p. ej., con penicilina. Si se parte de un mutante auxtrofo para un componente del PG basta hacer crecer a la bacteria en un medio carente de dicho componente.
Auxtrofos: (tambin lo investigue por mi cuenta) En fisiologa microbiana, se dice que un microorganismo es auxtrofo cuando slo es capaz de proliferar en un medio de cultivo si a ste se ha aadido alguna sustancia especfica; que el tipo silvestre, llamado prottrofo, no requiere, porque es capaz de sintetizarla. Tpicamente, la gentica subyacente a una auxotrofia es la carencia de una ruta metablica funcional que genere la sustancia de la que depende el auxtrofo. Esta carencia suele deberse a una mutacin que genera un alelo nulo carente de capacidad biolgica. Por ejemplo, existen cepas de levaduras empleadas en el laboratorio que, debido a una carencia en una enzima requerida para la sntesis de uracilo, precisan de ste en el medio de cultivo para poder crecer.

Espacio periplsmico (periplasma). Gram negativas.

1. Tiene embebida a la pared celular: mureina (peptidoglucano) 2. Tiene solucin densa de protenas que facilitan la nutricin e inhibicin de sustancias toxicas. Protenas de unin. Pueden estar compuestas de: -Aminocidos (arginina, leucina) -Azcares (galactosa, glucosa, arabinosa) -Vitaminas (tiamina, Vitamina B12) -Iones (fosfato, sulfato) Enzimas degradativas: -Varias fosfatasas -Proteasas -Endonucleasa -Macromolculas Enzimas detoxificantes: -b-lactamasas -Enzimas fosforilantes de aminoglucsidos

Funciones.
1. Osmorregulacin:

El periplasma tiene una osmolaridad igual que el interior, lo cual es regulado por que existe un gradiente osmtico con el exterior, por medio de la formacin de altas concentraciones de oligosacridos derivados de membrana (8-10 unidades de glucosa enlazados y sustituidos con glicerol-fosfato). 2. Transporte de molculas.

Forma de las bacterias.

1. Cocos. Monococos Diplococos (1)(pneumococo es diplococo encapsulado). Streptococos (cadenas). Diferente de Estreptococcus que es una familia de bacterias. Estafilococos (racimos). Sarcinas (pegados como cubo). Tetrada (4 como cuadrado). 2. Bacilos. Aislados, pares (diplobacilo), cadenas (estreptobacilo o empalizada). Cobacilos (cocobacilos). Parecen huevito. 3. Vibrios (bacilos alargados) 4. Espiroquetas (espirales) y espirilos (espirales mas alargados) 5. Pleomorficas (forma variable generalmente forma bacilar) 6. Actinomicetos (olor a tierra mojada) 7. Bacterias filamentosas (como espaghetti)

Membrana externa (gram negativas).

Estructura.
Lipopolisacridos (LPS). 1. Regin I. Antgeno O. Contiene 40 unidades de hexosas como galactosa, glucosa, rhamnosa y manosa y otros desoxiazcares poco usuales como la abecuosa, colitosa, paratosa o tivelosa. La unin de cuatro o cinco azcares forman una unidad. (Es importante porque es reconocido por el organismo infectado y desencadena cascadas metabolicas que pueden desarrollar una enfermedad en el organismo infectado) 2. Regin II. Core. Consiste de cido 2-ceto-3-desoxioctulosonico (KDO), heptosas, glucosa, galactosa y Nacetilglucosamina. (Es el mismo en bacterias del mismo gnero; entre ms externo sea, cambia ms su composicin entre bacterias) 3. Regin III. Lpido A. (fosfolipido de la membrana) Compuesto por un disacrido de Dglucosamina fosfato y cidos grasos de 12 o 14 carbonos. Es txico (endotoxina) OMPs (protenas de membrana externa). 1. Porinas. Estructura de barril (o sea compuesto por estructuras secundarias de lmina plegada ), la mayora con de tres subunidades idnticas formando canales. Protenas que facilitan la entrada de metabolitos especficos como Vitamina B12, hierro o maltosa y otras son generales para molculas hidroflicas.

2. Receptores de fagos y colicinas. 3. Lipoprotenas (Lpp). Ancla la membrana externa a la pared celular.

Funciones.
1. Estructural 2. Endotoxina (Lpido A) 3. Secrecin y transporte 4. Proteccin 5. Antigenicidad (Antgeno O)

Flagelos bacterianos.
1. 2. 3. 4. Requieren 40 genes (Fla, Fli y Flg) que codifican las protenas de los componentes flagelares y su secrecin(secrecin tipo 3) Pueden ser: Montrico (un pelito de un lado) Anftricos (varios pelitos en cada lado) Loftricos (varios pelitos en un lado) Pertricos (muchos pelitos en toda la superficie)

Partes.
1. Filamento (verde). Compuesto de flagelina que es el antgeno H 2. Gancho o codo (azul). Compuesto de protenas diferentes a la flagelina. 3. Cuerpo basal (todo lo que est anclado a la membrana y pared) (primero se ensambla ste y permite la secrecin y ensamblaje del resto del flagelo) Anillo L (el ms exterior en G-) Anillo P (en la pared) Anillo MS (unido a membrana citoplasmtica) Protenas MotA y MotB que al pasar H+ (o Na+) por ellas, sufren cambio conformacional y van haciendo que gire el flagelo. Eje que conecta todo.

Movimiento.
1. Mot A y B, hacen que gire el flagelo en sentido contrario a las manecillas del reloj (CCW). 2. Cuando cambian a sentido a favor de las manecillas del reloj (CW) causa volteretas o tumbos. 3. FliG, FliM, FliN son componentes del interruptor flagelar para la rotacin y determinan la direccin (CCW y CW). La protena CheY cuando es fosforilada se une al interruptor del movimiento y provoca que el flagelo rote en sentido de las manecillas del reloj. 4. Clulas con flagelos polares cambian de direccin por rotacin flagelar reversible (jalando o empujando la clula) o por flagelos unidireccionales que se detienen peridicamente para cambiar de direccin ya que solo presentan un solo sentido de rotacin. 5. Swarming: desplazamiento flagelar en medios slidos con flagelo lateral. 6. Flagelos periplsmicos (endoflagelos o filamentos axiales). Tipo de flagelos que presenta exclusivamente el grupo de las espiroquetas.

Movimiento de espiroquetas.
En medios lquidos se mueven por avance muy rpido a modo de torniquete (el cuerpo bacteriano se comporta como un sacacorchos) se pueden ver tambin contorsiones, latigazos, etc. Sobre la superficie de medios slidos, rodamiento de la hlice. Esto se debe a que el filamento axial confiere movimiento de rotacin a la membrana externa, lo que se traduce en que la bacteria pueda rodar. Flexiones. Se provocan ondas propagables del cilindro. http://www.youtube.com/watch?v=O0y7X5acK8M

Taxis o taxias.
1. Aerotaxia. Migracin ante un gradiente de O2 Bacterias anaerobias: aerotaxia negativa

Bacterias microaerfilas: atradas hacia tensiones de O2 menores que la atmosfrica Bacterias aerobias y facultativas: aerotaxia positiva 2. Fototaxia: migracin en funcin de la luz. 3. Quimiotaxia: migracin ante un gradiente de una sustancia qumica. Para lo cual la bacteria requiere quimioreceptores que son protenas de membrana que censan el medio ambiente. La cascada de sealizacin se realiza a travs de fosforilaciones para que gire el flagelo.

Efector: seal qumica externa que pone en marcha el mecanismo celular de la taxia. Receptor de membrana: recibe al efector y pone en marcha un sistema de transduccin intracelular de la seal, que llegar hasta el conmutador en la base del flagelo.

Deslizamiento.
En Mixobacterias (viven en el suelo agrupadas, son G-) Movimiento no flagelar que ocurre en superficies slidas. Aparentemente, el polisacrido establece contacto entre a superficie celular y la superficie slida, contra a cual la clula desliza. A medida que el polisacrido limoso excretado se adhiere la superficie, la clula es gradualmente expulsada.

S jala y A empuja.

Flagelo en Eucariontes.
Microtbulos.

Fimbrias.
Estructuras filamentosas fuera de superficie celular, hechas de pilina y su funcin es de adhesin a superficies biticas (como tejidos animales) o abiticas y formar biofilms.
Quorum sensing: mecanismo de control de expresiones genticas que depende de la densidad celular. Tipo de comunicacin celular, hace que haya conductas sociales en las colonias, como formar el biofilm.

En G- Sistema de chaperonas portero, tipo de secrecin tipo II. En G+ Sortasas.

Twitching motility.
Fimbrias tipo IV. Ocurre en superficies slidas a travs de una rpida y reversible extensin y retraccin de la fimbria. Neisseria gonorrhoeae.

Pili sexual (Pili F).

Estructura formada por la protena pilina. Procesos de transferencia de material gentico entre bacterias (conjugacin). La conjugacin es un mecanismo de transferencia clula-clula y la funcin est codificada en un plsmido. Generalmente se presenta un solo pili o muy pocos por bacteria. Solo reconoce bacterias que no tienen el plsmido F. Plsmido F contiene regin Tra que hace que las dems bacterias desarrollen el pili sexual. 25 genes son los que codifican para el pili sexual.

Cpsula y capa mucoide (exopolisacrido).

1. Glucocalix: polmero viscoso, pegajoso, gelatinoso. Se encuentra rodeando a la clula y est compuesto por polisacridos, polipptidos o ambos (composicin variable). 2. Cpsula: sustancia organizada, grande y firmemente anclada. 3. Capa mucoide: sustancia desorganizada y dbilmente anclada. 4. Exopolisacrdo (EPS): glucocalix hecho con azcares (homopolimrico o heteropolimrico). 5. Las cpsulas y capas mucilaginosas bacterianas constituyen el llamado antgeno K (capsular). Una misma especie puede constar de distintas razas, cada una de ellas con un Ag K distintivo, distinguible del de las dems por su composicin qumica y su inmunorreactividad. 6. Las cpsulas polisacardicas estn unidas a la superficie subyacente, sobre todo a la pared celular en G+ y membrana externa en G-. 7. Cepas lisas (capsuladas). Cepa rugosa no tiene cpsula. Experimento de Griffith con streptococcus pneumoniae. 8. Funciones: Adhesin y formacin de biopelculas. Inmunognicas (antgeno K y serotipos de estreptococos). Inhibicin de la fagocitosis. Virulencia. Atrapar Nutrientes.

Conservar H2O. 9. No se tien ms bien se contrasta el fondo con tinta.

Endospora.
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Formas de reposo; supervivencia en ausencia de nutrientes. Criptobisis: metabolismo prcticamente detenido. Resisten condiciones fsicas y qumicas muy agresivas (radiaciones UV, calor, sequedad, disolventes, etc.). Son producidas por ciertas bacterias Gram positivas. Principalmente: Bacillus, Clostridium, Sporosarcina y Thermoactinomyces. Se producen cuando la bacteria detecta bajos niveles de nutrientes (C, N, P). La espora se forma dentro de la clula vegetativa (endospora). Al final de la esporulacin, la clula madre se autolisa, y la espora queda libre. La endospora resiste periodos largos en ausencia de nutrientes y estrs ambientales. Cuando las condiciones son apropiadas, la espora germina y se surge una clula vegetativa.

Criterios taxonmicos.
1. Dimetro relativo al de la clula madre. Deformantes No deformantes 2. Localizacin Subterminales Centrales Terminales

Partes de la endospora.

1. Protoplasto (ncleo de la endospora). Componentes inmovilizados en una matriz de quelatos de cido dipicolnico (DPA) con iones Ca2+ (dipicolinato de calcio, DPC), que llega a representar el 15% del peso.
El citoplasma de la espora es deshidratado y contiene dipicolinato de calcio; el cual est relacionado con la resistencia de la espora al calor extremo; el cido protege contra la resistencia acutica. El calcio ayuda a la resistencia a la sal y a agentes oxidantes. Las esporas se encuentran comnmente en los gneros Bacillus y Clostridium.

Citoplasma muy deshidratado (10 - 30%) Contiene: Cromosoma Pocos ribosomas. ARNt, ARN polimerasa.

2. 3.

4.

5. 6.

Mono y di nucletidos pero NO tri nucletidos (no ATP). Muchas protenas especiales: pequeas, cidas, solubles (SASP) que mantienen el pH ms bajo que en la clula vegetativa. Durante la germinacin se usarn como fuente de amino cidos. Acomplejan el ADN. Protegen de las radiaciones UV. Fuente de energa: 3-fosfogliceratoPEP (fosfoenolpiruvato) Carece de componentes inestables: No ARNm No enzimas biosintticas No aminocidos ni bases nitrogenadas No cofactores reducidos (NADH, CoA, etc.) Membrana interna. Rodea al protoplasto, membrana citoplsmica que carece de fluidez (estructura policristalina). Pared de la endospora. Estructura muy delgada a base de un Peptidoglucano similar al de la clula vegetativa. Pared de la futura clula vegetativa. Se sintetiza a partir de la preespora (preespora es cuando el protoplasto ya se form y est rodeado por la membrana interna, una vez que esto sucedi ya no se puede revertir el proceso de esporulacin). Corteza (Crtex). Al microscopio electrnico: gruesa, transparente a electrones, Lminas concntricas, formado de un Peptidoglucano especial: 30% del NAM con tetrapptidos, pero con bajo grado de entrecruzamiento ; 15% del NAM (nacetilmuramico) tiene solo L-ala; 55% lactama del cido murmico (lactama es una amida cclica). Se origina a partir de la clula madre. Poco entrecruzamiento: Estructura ms laxa, floja y flexible que el PG normal es capaz de expandirse o contraerse. Rpida autolsis durante la germinacin. La lactama del murmico presenta gran resistencia a la lisozima. Cubiertas (coats). Aspecto muy voluminoso, distinto segn especies. Partes densas a los electrones. Formada de una o ms protenas de tipo queratina, ricas en cistena y amino cidos hidrfobos. Insoluble e impermeable; impide la entrada de numerosos agentes qumicos agresivos, incluyendo txicos. Cota de mallas (protenas CotA, CotB, CotC) es como una armadura de la edad media hecha de cadenas entrecruzadas. Exosporio. Estructura membranosa transparente. Saco delgado y flojo a base de protenas, polisacridos complejos y lpidos. Muy resistente a enzimas proteolticas.

Propiedades biolgicas de las endosporas.

1. Hipometabolia. La ms baja tasa metablica. 2. Dormancia. Gran inercia a los sustratos exgenos, la espora slo perder la dormancia cuando se haya activado para la germinacin.

(Dormancia es periodo de ciclo biolgico, en el cual el desarrollo y actividad se suspenden temporalmente; origina que se reduzca drsticamente la actividad metablica, est relacionada con condiciones ambientales)

3. Resistencia al calor. Producto de la deshidratacin como medio de lograr la hipometabolia y la dormancia. Algunas resisten 120C durante 15 minutos lo que condiciona los parmetros para esterilizar materiales. 4. Deshidratacin. Refrigencia (capacidad de difractar la luz) al microscopio ptico; la corteza se queda sin cationes, se expande, se topa con las cubiertas y hay extraccin de agua del protoplasto que queda muy deshidratado, con componentes inmovilizados. 5. Resistencia a los rayos UV: Absorcin de UV por cubiertas. Presencia del DPC. Las protenas SASP forman complejos con el ADN. 6. Resistencia a los agentes qumicos. Debida principalmente a la gran impermeabilidad de las cubiertas (grosor, composicin a base de protenas ricas en aminocidos hidrfobos y con abundantes puentes disulfuro).

Esporognesis (esporulacin).
1. Estmulo desencadenante de la esporulacin: estado de inanicin (carencia de nutrientes) 2. Dura 7-8 horas en Bacillus subtilis o en B. megaterium. 3. Fases: se nombran con un nmero romano (I, II,....VII).

Fase 1 (to (0horas)- t1 (1hora):

Los dos cromosomas se condensan formando un filamento. Se inician dos tabiques, en los polos. Se degradan protenas viejas y los aminocios se emplean en fabricar protenas especficas de la esporulacin. Se sintetizan y liberan al medio antibiticos y exoenzimas (proteasas, amilasas, ribonucleasas, etc.).

Fase II (t1-t2):
Se formaron 2 huevitos (septo acntrico), pero solo se termina 1 el otro se aborta. (Septo es una pared que divide de un modo completo o incompleto una cavidad). Cada nucleoide queda en un compartimiento pequeo, la preespora; Compartimiento grande: la clula madre. Sigue la sntesis de antibiticos y exoenzimas.

Fase III (t2-t3)

Formacin del protoplasto de la espora: Degradacin selectiva del PG del septo. La membrana citoplsmica de la clula madre va avanzando hacia el polo, envolviendo a la preespora, que posee dos membranas, con polaridad opuesta. (Ya se se hace irreversible) La sntesis de protenas sigue en la clula madre, pero se detiene en la preespora.

Fase IV (t3-t4)
Formacin de la corteza: deposicin de PG de la clula madre entre las dos membranas de la preespora. Deposicin del PG de la pared, procedente de la preespora. La espora puede verse ya refrctil en fresco. Comienza sntesis de DPA (acido dipicolinico) y acumulacin de Ca2+ Comienza la sntesis del exosporio. Fase V (t4-t5.5) Deposicin de materiales de las cubiertas por fuera de la membrana externa de la espora. Contina la acumulacin de DPA, que secuestra iones Ca2+para formar el DPC en el protoplasto. Fase VI (t5.5-t7)

Maduracin de prespora a endospora. Maduracin de la corteza (PG especial, ms laxo, con pocos entrecruzamientos). Maduracin de las cubiertas. Citoplasma se hace ms homogneo y denso a los electrones. Resistencia al calor, cloroformo, radiaciones UV y lisozima. Fase VII (t7-t8) Autolisis de la clula madre y liberacin de la espora. El exosporio pierde agua y se pega a las cubiertas.

Germinacin.
1. Preactivacin. Las cubiertas deben erosionarse, de modo natural por envejecimiento progresivo y de modo artificial se puede lograr: 100C durante unos minutos Radiaciones ionizantes pH bajo Tratamiento con sustancias que posean grupos SH libres como Mercaptoetanol 2. Activacin. Etapa an reversible. Metabolismo an latente. Desencadenada por un agente germinante (iones inorgnicos [Mg2+, Mn2+], L-ala, glucosa u otros azcares, adenina u otras bases nitrogenadas). o El germinante es detectado por un receptor alostrico en la MI de la espora que adquiere capacidad proteoltica y rompe la proenzima unida covalentemente al PG de la corteza. La enzima reconoce al anillo del NAM e hidroliza el PG de la corteza. Empieza a entrar agua al protoplasto espora pierde la refringencia y comienza a perder resistencia al calor. 3. Germinacin. El proceso se hace ya irreversible. Se rompe la dormancia, hay metabolismo endgeno (o sea solo utiliza las cosas que estn dentro del protoplasto). Se pierde DPA y Ca2+ que pasa a corteza y neutraliza cargas negativas del PG hay rehidratacin e hinchamiento del protoplasto y ms contraccin de la corteza. El 3-fosfoglicerato 2-fosfoglicerato PEP ATP ASPs (que estaban acomplejando al DNA), se hidrolizan por una proteasa activa y los aminocidos se reutilizan en fabricar nuevas protenas. Comienza la transcripcin de genes vegetativos. 4. Terminacin. El metabolismo ya se hace exgeno. Se sintetiza ADN. Protoplasto crece. La pared de la espora sirve como germen para la pared de la clula vegetativa. La clula vegetativa sale rompiendo las cubiertas.

Cuerpos parasporales.
1. Producidos en algunas especies: Bacillus thuringiensis y B. popiliae. 2. Cristales proteicos octadricos (bipiramidales) formados en el esporangio durante la esporulacin. 3. Agregacin de subunidades de una glucoprotena en fase IV (protenas Cry o toxinas Cry).

4. Son insecticidas ecolgicos, especficos frente a larvas de: colepteros y dpteros. Acta como insecticida. Oruga ingiere materia vegetal con bacterias esporuladas que producen Cry. La protena Cry se disuelve en el tracto digestivo. El pH alcalino provoca la proteolsis que activa a la toxina. La toxina altera la permeabilidad del epitelio intestinal, pasa a la hemolinfa lo que provoca la parlisis y muerte de la larva.

Bacillus anthracis.
1. 2. 3. 4. 5. 6. Bacilo Gram positivo. Esporulado. 1 a 6 das de incubacin. Causa el carbunco (vacas) o ntrax en animales herbvoros. Es de origen geoflico (vive en el suelo). Infectar: Cutaneo (menos agresivo, se identifica rpidamente causa una ulcera) Gastrico (Diarrea) Pulmonar (se confunde con gripa normal, es el ms grave. Germina en pulmn)

Clostriduim tetani.
1. 2. 3. 4. Causante de ttanos Toxina: Tetanospamina (neurotoxina). Bloquea neurotransmisores. Provoca espasmo muscular.

Clostriduim botulinum.
1. Intoxicacin alimentaria. (Puede venir en latas golpeadas ya que es bacteria anaerobia que incha latas por fermentacin) 2. Botulismo. 3. Alimentos enlatados pH cidos (vegetales). 4. Toxina resistente al calor. 5. Parlisis flcida (botox). 6. Inhibe a la acetilcolina ( impide movimientos faciales).

Clostriduim perfringes.
1. Intoxicacin alimentaria. (Diarrea, enterotoxina) 2. Enzimas hidrolticas que provocan muerte celular (Gangrena gaseosa).

Geobacillus stearothermophilus
1. Bioindicadores de esterilizacin en autocalve (resiste hasta 120C)

Esporas bacterianas.
1. 2. 3. 4. Diferentes a endosporas. Algunos microorganismos se engrosan. Streptomyces produce la GEOSMINA (olor a tierra mojada). Espora germina en medio de cultivo. Crece continuamente (Micelio vegetativo). Madura (Fragmentos se endurecen). Forma cadenas de esporas.

Esporas fngicas.
1. Reproduccin sexual en hongos filamentosos y levaduriformes (interaccin entre dos micelios diferentes). Micelio es un conjunto de hongos.

2. Zigosporas (pluricelulares), ascosporas, basidiosporas.

Quistes o Cistos bacterianos.

1. Se producen en algunas especies por engrosamiento de la pared celular de la clula vegetativa, por deposicin de nuevos materiales sobre la membrana citoplsmica (alginatos), al mismo tiempo que se acumulan materiales de reserva en el citoplasma (PHA). 2. Poseen metabolismo endgeno y resisten el calor, la desecacin y los agentes qumicos ms que la clula vegetativa (pero menos que las endosporas). 3. No es una endospora, mas bien la bacteria se autoprotege.

Mixobacterias.
1. 2. 3. 4. Microquistes de Mixobacterias (Parecen hongos pero son bacteria.), llamados mixosporas. Sus envolturas constan de una corteza, rodeada de cubiertas (interna y externa). Estas cubiertas se componen de una glucoprotena muy rica en polisacridos. Bacterias deslizantes tienden a recorrer su crecimientos y forman estelas de crecimiento.

Quistes en Eucariotes.
1. 2. 3. 4. 5. Entamoeaba hystolitica (protozoarios). Forman huevos que cuando se secan las heces, vuelan por el aire y son respirados o ingeridos. Cuando estn en el intestino, crecen en forma vegetativa y luego toman forma de quiste. Son resistentes como las endosporas. Son la forma infectiva.