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1º DEFINICIONES
Una población microbiana es definida por dos parámetros que suelen referirse a
unidad de volumen de medio, la Densidad Microbiana o masa celular y la
Concentración Celular o número de células. El aumento de estos dos
parámetros constituye el fenómeno del crecimiento.
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Donde:
Io: Intensidad del rayo luminoso incidente.
I : Rayo luminoso transmitido.
d: Distancia recorrida por la luz a través de la suspensión.
c: Densidad microbiana.
k: Constante
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Recuento de colonias.
Método del Número Más Probable.
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Recuentos Directos.
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Factor
Tipo de cuadro Área² (cm) Volumen (ml)
(1/ Volumen)
-2 -5 4
Cuadrado Total 1.00 x 10 2.00 x 10 5.00 x 10
Cuadrado -4 -7 6
Grande 4.00 x 10 8.00 x 10 1.25 x 10
Cuadrado -5 -8 7
Pequeño 2.50 x 10 5.00 x 10 2.00 x 10
-8
Por ejemplo, cada pequeño tiene un volumen de 5 x 10 ml
4 3 -8
(50 μm x 50 μm x 20 μm = 5 x 10 μm = 5 x 10 ml).
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Recuento Electrónico:
MEDIDA DE LA BIOMASA.
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PESO HÚMEDO
PESO SECO
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DETERMINACIÓN DE NITRÓGENO
DISPERSIÓN DE LA LUZ
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TURBIDIMETRIA.
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Tiempo de generación (G) es el tiempo requerido para que una célula se divida
o una población se duplique.
G= t
n
1
1 generación → 2 células = 2
2
2 generación→ 4 células = 2
3
3 generación → 8 células = 2
4
4 generación → 16 células = 2
5
5 generación → 32 células = 2
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Ta→ Na
1
1 generación → 2 Na = 2 Na
2
2 generación → 4 Na = 2 Na
3
3 generación → 8 Na = 2 Na
4
4 generación → 16 Na = 2 Na
5
5 generación → 32 Na = 2 Na
ⁿ
n generaciones (Tb) → Nb = 2 Na
ⁿ
Nb = 2 Na
Lg Nb= n lg 2 + lg Na
n = lg Nb – lg Na
lg2
n= lg Nb/ Na
lg2
n= 3.3 lg Nb
Na
G= _____ t____
3.3 lg Nb/ Na
Esta misma bacteria al cabo de dos días se habría multiplicado hasta 2.2 x 1043
células. Una bacteria pesa aproximadamente 10-15 – 10-11 gramos, por lo que el
peso de todas esta células es de aproximadamente 2.2 x 1030 gramos que
equivalen a 8 veces el peso de la tierra.
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Por otra parte, un inóculo (xt) procedente de un cultivo viejo contiene a veces
una cantidad muy grande de células no viables de tal forma que aún cuando las
células visibles (Xr) empiecen inmediatamente ha desarrollarse
exponencialmente (fig.82), su proliferación pasaría inadvertida y no se reflejaría
en la curva experimental hasta después de varias divisiones.
b) Adaptación enzimática.
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Fig. 83 Adaptación enzimática y Fase de latencia. (Según J. Monod. Am. Rev. Microbiol.
3, 371, 1949).
Crecimiento de Escheriachia coli en medios sintéticos sembrados con un precultivo en
crecimiento exponencial sobre arabinosa. El subcultivo sobre glucosa empieza inmediatamente,
mientras que sobre xilosa presenta un tiempo de latencia (T1) de unas dos horas y media.
3. FASE EXPONENCIAL
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5. FASE ESTACIONARIA
Rendimiento ponderal y molecular del crecimiento. Cuando el factor
limitante se ha agotado, el crecimiento se retiene (r = 0) y la población
permanece estacionaria durante varias horas, hasta que se inicia la fase de
declive. La diferencia entre población inicial del medio recién sembrado y la
población final (X-X0) es el crecimiento total (G).
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6. FASE DE DECLIVE
Después de un cierto tiempo, que varía según los microorganismos y las
condiciones de cultivo, comienza la fase de declive, durante la población decreta
(r<0). Esta fase se caracteriza por dos fenómenos:
1) La mortalidad, que era nula durante el crecimiento exponencial, se manifiesta,
con que disminuye el número de organismos viables;
2) La densidad microbiana decrece por autólisis de las células provocadas por
enzimas proteolíticas endógenas. De estos dos fenómenos, el primero
comienza antes y es mucho más rápido.
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CRECIMIENTO CONTINUO
1. FUNDAMENTOS:
Fig. 92. Efecto de la adición de fosfato sobre la actividad catabólica de un cultivo bacteriano
(Zymomonas mobilis) limitado por el fosfato. (J.C Senez y J.P Belaich, les mecanismes de
régulation des activiés cellulaires chez les microorganismes, pág. 357, CNRS, 1965.)
Experiencia realizada en un microcalorímetro diferencial de Tian-Calvet. Ordenadas: velocidad de
producción de calor (dQ/dt) a partir del sustrato energético (glucosa). Abscisa: tiempo. La curva
muestra que el desarrollo exponencial del cultivo se detiene al agotarse el fosfato. La adición de
un exceso de fosfato (0.5 mg/ml) provoca la reanudación inmediata de la actividad catabólica, a
una tasa superior, y esta diferencia permite calcular el control ejercido por la carencia de fosfato
(21 por 100). El crecimiento continua entonces hasta el agotamiento de la glucosa.
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G= KC
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Crecimiento Total (G): Peso seco de las células producidas en un cultivo. Esta
masa que se suele expresar en g/ml, población final alcanzada al agotarse el
medio.
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