Professional Documents
Culture Documents
Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
1.2 Reactivos a utilizar Reactivo Ureasa Urea Cloruro de mercurio cido clorhdrico Buffer fosfato Indicador de Tashiro 1.3 Procedimiento Frmula CO(NH2)2 HgCl2 HCl 0,1N Conc. 0.1% 0,25M 1% pH 7.0
1.3.1 Toma de muestra (cuando se requiere) Se requiere cuando se quiere saber cul es la calidad de la materia prima con la que estamos trabajando, o cuando se quiere analizar el contenido de urea que contienen los alimentos, la sangre, orina, o tejidos vegetales. 1.3.2 En laboratorio
Peso muestras: Wm; Extraccin con NaCl 1%; Centrifugacin; Filtracin; medida sobrenadante: Vs; Titulacin con HCl; Registro de mL gastados: VHCl; Tabla de datos 1.3.3. Diagrama de Flujo
1. MATERIALES Y MTODOS
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
3. RESULTADOS ESPERADOS Al aparecer un color rosado-violceo, en la muestra que contiene el color blanco indica que los equivalentesgramo del hidrxido de amonio fueron neutralizados por los equivalentes-gramo del cido clorhdrico. Realizar el procedimiento con los dems tubos y registrar el HCl que fue empleado para cada tubo. 4. GLOSARIO Ureasa: es una enzima amidohidrolasa de peso molecular: 480.kD, punto isoelctrico: 5.0 y pH ptimo entre 6 y 7, cataliza la hidrlisis de la urea produciendo gas carbnico, hidrxido de amonio, segn la reaccin Sustrato: El trmino sustrato se refiere al material que utilizamos para llenar el recipiente de cultivo y que, en cierto modo, es el sustituto de la tierra Hidrlisis: es una reaccin qumica entre una molcula de agua y otra molcula, en la cual la molcula de agua se divide y sus tomos pasan a formar parte de otra especie qumica. Esta reaccin es importante por el gran nmero de contextos en los que el agua acta como disolvente. 5. BIBLIOGRAFA Jairo Enrique Granados Moreno. MSc. Protocolo de prctica. Bioqumica Metablica. Universidad Nacional Abierta y a Distancia. UNAD. 2011. es.wikipedia.org/wiki/Urea es.wikipedia.org/wiki/cido clorhdrico www.juntadeandalucia.es/averroes/.../06/.../apuntes _formulacion.pdf www.horturba.com/castellano/cultivar/ficha_manejo. php?ID=19 quimicacotidiana.blogspot.es/1243907160/ es.wikipedia.org/wiki/Hidrlisis
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
Agitador De vidrio Probeta graduada 100ml Balanza digital 1.2 Reactivos a utilizar
REACTIVO (NOMBRE) FRMULA MOLECULAR CONC.
cido Clorhdrico Fenolftalena Rojo de metileno Hidrxido de sodio Buffer fosfato pH=6,8-7,0
0.1 N
0.1 N
HPO4/H3PO4
1.3 Procedimiento 1.3.1Tecnicas analticas Variable(indicador) evaluada(o) pH Capacidad Amortiguadora Tcnica analtica utilizada
Mtodo potenciomtrico Mtodo titulacin volumtrica 1.3.2 En laboratorio: Protocolos de muestras analizadas (Elaborar una ficha formato que muestre la informacin fundamental sobre el origen de cada una. Por ej.: especie, nombre cientfico, lugar de muestreo, datos agros climatolgicos, animales, etapa productiva, alimentacin etc.) 1.3.3. Diagrama de Flujo
Adicionar 100ml de agua destilada Agitar y filtrar
1. MATERIALES Y MTODOS
Agregar 5 ml de HCL
Medir PH PH
2. TABLA DE DATOS: TABLA 1: Datos volumtricos para amortiguadora de muestras biolgicas. Muestras Agua destilada Buffer fosfato Leche Vm (ML) capacidad
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
TABLA 2: Datos potenciomtrico para capacidad amortiguadora de muestras biolgicas Muestras Wm (g) Concentrado Harina Forraje Sangre Orina Valores Evaluados Vm (ml) pH 1
del pKa (la constante de disociacin del cido) y de las concentraciones de equilibrio del cido o base, del cido o la base conjugada. 5. BIBLIOGRAFA Mdulo de bioqumica metablica, AUTOR: JAIRO ENRIQUE GRANADOS MORENO., MSc. DOCENTE ECAPMA es.wikipedia.org/wiki/Bicarbonato es.wikipedia.org/wiki/Respiracin_celular www.ehu.es/biomoleculas/1b/pdf/5_buffers.pdf aguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/.../amortiguador es%20celulares.h... Artculo cientfico Evaluacin in vitro de dos amortiguadores y un ionforo sobre variables fermentativas y microbiolgicas.
pH 2
TABLA 3. Valores de capacidad y amortiguador para las muestras analizadas. Muestras (mEq HCl /pH) (mEqNaOH /pH) P () HCl
potencial
P () NaOH
Concentrado Harina Forraje Sangre Orina 3. RESULTADOS ESPERADOS Al realizar el procedimiento de la capacidad amortiguadora por el mtodo de titulacin y con la ayuda del potencimetro llegar a siguientes concluir: Si los procesos biolgicos son dependientes del pH; Si un pequeo cambio en el pH lleva a un gran cambio en la velocidad de un proceso. 4. GLOSARIO Capacidad Amortiguadora: La capacidad amortiguadora de un tampn es la cantidad de cido o de base que se puede agregar, antes de que el pH comience a cambiar de modo apreciable, y est determinada por el valor real de las concentraciones de los componentes del par cido/base conjugado. Solucin Buffer: Es una o varias sustancias qumicas que afectan a la concentracin de los iones de hidrgeno (o hidronios) en el agua. Siendo que pH no significa otra cosa que potencial de hidrogeniones (o peso de hidrgeno), un "buffer" (o "amortiguador") lo que hace es regular el pH. Cuando un "buffer" es aadido al agua, el primer cambio que se produce es que el pH del agua se vuelve constante. De esta manera, cidos o bases (lcalis = bases) adicionales no podrn tener efecto alguno sobre el agua, ya que esta siempre se estabilizar de inmediato. La ecuacin de Henderson-Hasselbalch es una frmula qumica que se utiliza para calcular el pH, de una solucin buffer, o tampn, a partir
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
PRACTICA N3: DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS NO ESTRUCTURALES (CNE), POR EL MTODO DE FENOL-ACIDO SULFURICO.
INTRODUCCION INTRODUCCIN El proceso de determinacin de carbohidratos no estructurales (CNE), por el mtodo de fenol-cido sulfrico es un procedimiento que nos ayuda a conocer dichas proporcionas en alimentos lquidos, extractos lquidos, materiales de celulosa, entre otros, esto se logra gracias a las reacciones llevadas en laboratorio, ya que los azucares simples, oligosacridos, polisacridos, y sus derivados dan una coloracin al entrar en contacto con fenol cido sulfrico.
Pesar +/- 1.0g de muestra de forraje, en balanza analtica y registrar como: (Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL de solucin de HCl 0,6N. Agitar constantemente con la varilla de vidrio durante 3 minutos. Llevar el breaker con la solucin al bao termostatado y calentar a 90C, durante 10 min. Dejar enfriar por 5 min y filtrar sobre papel filtro. Medir el volumen del filtrado (Vf) y pasar 5mL a un tubo de ensayo, adicionar a ste 5mL de NaOH 0,6N, agitar por 15 segundos, tapar y rotular as: FCNE: Filtrado para carbohidratos no estructurales.
1. MATERIALES Y MTODOS
1.2 Reactivos a utilizar Reactivo Fenol cido sulfrico Hidrxido de sodio Agua destilada Frmula C6H5OH H2SO4 NaOH H2O Concentracin 5% 1N O,6N 20 mL
Indicadores Wm Vf Ast Am
Descripcin Peso de la muestra Volumen del filtrado Absorbancia del estndar Absorbancia del tubo que contena el FCNE
Valor
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
3. RESULTADOS ESPERADOS
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
PRACTICA N5: CUANTIFICACIN DE NITRGENO NO PROTEICO (NNP) (Fraccin A de Van Soest) INTRODUCCION El
Corresponde a los compuestos que poseen nitrgeno en su molcula en formas diferentes a la que es propia de las protenas (cadenas peptdicas). (Aminocidos libres, Purinas, Amidas, Alcaloides, Sales de amonio, Compuestos ntricos y Urea). Su utilizacin queda limitada a nivel del ciego y colon principalmente. La urea en el intestino delgado es absorbida como tal y solamente es desdoblada en los sacos fermentadores. ANALISIS DE VAN SOEST Mediante este mtodo se diferencian los componentes estructurales presentes en las paredes celulares, de aquellos que constituyen los contenidos celulares.
1.2 Reactivos a utilizar Reactivo cido Tricloroactico (ATA) Frmula CI3- CCOOH) H2O Concent. 10 %. 20 mL
nitrgeno
no
proteico
Pesar +/- 1,0 g de muestra (forraje) y colocar en vaso de precipitado. Adicionar 30 mL de agua destilada, agitar por un minuto. Dejar reposar la mescla por un minuto. Adicionar 20 mL de solucin de ATA, agitar por un minuto. Reposar a temperatura ambiente 15 minutos. Filtrar con papel filtro sobre probeta. Medir el volumen de filtrado (VF). Recolectar 5 Ml del filtrado, colocarlos en un tubo de ensayo y rotularlo: FNNP- filtrado para nitrgeno no proteico. Tuvo con la muestra de forraje y Proceso de filtrado nitrgeno no proteico (NNP) 1.3.2 EN LABORATORIO 1.3.3. Diagrama de Flujo
1. MATERIALES Y MTODOS 1.1 Materiales y Equipos requeridos Materiales Equipos Vidriera Tubos de ensayo gradilla pinzas para bureta Erlenmeyer de 125mL Filtrado pipetas de 5 y 10mL para carbohidratos no matraz aforado de 100mL estructurales bao termostatado Beaker de 400mL bureta de 25mL soporte universal
Vf (mL)
UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA Programa: Agronoma PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM Nombre y Apellido: Leonardo Fabio Moreno Romero Cdigo: 11444092 Fecha: 28 Octubre de 2013
BIBLIOGRAFA http://quimicosfarmacobiologos.bligoo.com.mx/m edia/users/10/523320/files/51871/ManualBioqu_mica_II.pdf http://es.scribd.com/doc/20270275/InformeN%C2%BA1-laboratorio-de-bioquimica-II http://www.elergonomista.com/quimica/q9.html http://es.wikipedia.org/wiki/Hidr%C3%B3lisis MODULO BIOQUIMICA METABOLICA, UNAD http://www.a14.san.gva.es/laboratorio/web/poten ciometricas.htm http://espanol.answers.yahoo.com/question/inde x?qid=20101014210010AADGjg6 http://www.slideshare.net/ekathy80/mentefactoconceptual
Con este laboratorio se lograra mostrar definiciones de algunos conceptos, procedimientos, datos y soluciones que debemos tener y manejar como la base fundamental del conocimiento de la bioqumica metablica. Debido a que cerca del 90 % del nitrgeno total (NT) se encuentra en forma insoluble con el desarrollo del laboratorio se busca conocer el contenido de este en una muestra de forraje y concentrados. Se busca comprender la manera en la que en nitrgeno a travs de muchos procesos internos del animal se convierte en amoniaco o gas carbnico. Se espera que los resultados obtenidos sean similares a los encontrados en la literatura. Cuantificar el Nitrgeno en el filtrado, por mtodo espectrofotomtrico de BiuretLowry. Se busca desarrollar los clculos siguiendo las formulas propuestas en la gua de laboratorio. 4. GLOSARIO Nitrgeno no proteico: Se denomina Nitrgeno no proteico a los compuestos de nitrgeno que pueden ser convertidos en protenas por algunos organismos vivos. Muchos organismos superiores no pueden obtener aminocidos de otras formas, ms que absorbindolos de la dieta. Los cuales pueden ser convertir algunos aminocidos en otros diferentes. Los compuestos que forman el NNP son los que contienen amonaco, nitritos y nitratos y otros como la urea, el biuret o el cido rico. Los organismos que puede utilizar el NNP son los hongos, las plantas y algas, bacterias y organismos que viven en simbiosis con ellos. Espectrofotomtricas: Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Anlisis Kjeldahl: Las determinaciones de nitrgeno de Kjeldahl se realizan sobre una variedad de sustancias alimentarias. El mtodo Kjeldahl se puede desglosar en tres pasos principales: digestin, destilacin y valoracin. Forraje: Pasto puede ser el verde plantado o el seco. El forraje es cualquier hierba seca que sirva de alimento a los animales.