Gnero CAMPYLOBACTER HORACIO RAL TERZOLO & MARA CATENA 1. INTRODUCCION Las campylobacteriosis, en erme!a!es anteriormente !

escriptas como "ibriosis, son conoci!as !es!e #ace m$c#os a%os en el #ombre y en los animales& El '(nero Campylobacter ca$sa en erme!a!es en animales !e pro!$cci)n *$e ocasionan importantes p(r!i!as econ)micas y +, especies bacterianas tienen car-cter .oon)tico& La mayor/a !e estas especies coloni.an el intestino y por ese moti"o la transmisi)n m-s rec$ente es por "/a oral por me!io !e alimentos o a'$a contamina!os, a$n*$e al'$nas especies *$e #abitan el tracto 'enital se transmiten por "/a "en(rea& Con la !escripci)n !e n$e"as t(cnicas bacteriol)'icas $e posible obtener con!iciones )ptimas para el !esarrollo !e estas bacterias y se lo'r) aislarlas con acili!a! !e !i"ersos materiales cl/nicos y !el me!io ambiente& El $so !e t(cnicas !e #ibri!i.aci)n A0N1rARN, A2L3 in'erpritin', permitieron $na n$e"a posici)n ta4on)mica !el '(nero Campylobacter y !e s$s especies& La rec$ente rec$peraci)n !e or'anismos pertenecientes a este '(nero mo!i ic) s$stancialmente los conceptos !e !i"ersas en erme1 !a!es& En al'$nos casos se con irm) y !emostr) la importancia !e estos microor'anismos como a'entes etiol)'icos !e en erme!a!, pero en otros s$ rec$ente aislamiento !e in!i"i!$os aparentemente sanos #i.o *$e sean consi!era!os parte !e los microor'anismos inte'rantes !e la lora normal& As/, !ebe se%alarse *$e "arias !e las en erme!a!es en las *$e anteriormente se !escribieron a las campylobacterias como s$s a'entes ca$sales, #an !ebi!o ser re"isa!as, especialmente por*$e el aislamiento !el pres$nto a'ente se reali.) en n$merosas oport$ni!a!es tanto !e animales sanos como en ermos& El #ec#o !e *$e al'$nas bacterias *$e inte'ran el '(nero Campylobacter #ayan si!o 5!esc$biertas5 como .oonosis por*$e ca$san !iarrea en #ombre #i.o pres$poner *$e las mismas po!r/an tambi(n ca$sar enteritis en los animales, lo c$al $e $n error ya *$e la s$sceptibili!a! !e los mismos es !istinta a la !el #ombre& La amplia !istrib$ci)n !e estas bacterias en los animales #ace *$e (stos y s$s pro!$ctos alimenticios sean consi!era!os $na importante $ente !e conta'io para el #ombre, por ello en la microbiolo'/a !e los alimentos se #a incrementa!o la b6s*$e!a !e estas bacterias incenti1 "an!o la creaci)n !e t(cnicas bacteriol)'icas !e a"an.a!a para s$ aislamiento y !etecci)n& 2. EPIDEMIOLOGIA Las bacterias !el '(nero Campylobacter tienen $na !istrib$ci)n m$n!ial& Casi to!as las especies se enc$entran en el tracto ent(rico !e los animales7 mam/ eros, a"es, reptiles e incl$si"e insectos, act$an!o estos 6ltimos como "ectores mec-nicos& Las campylobacterias son consi!era!as inte'rantes !e los microor'anismos intestinales normales !e los animales& 3or ello, la !iarrea por Campylobacter es $na .oonosis !e !istrib$ci)n m$n!ial& La enteritis en el #ombre se pro!$ce por las !enomina!as campylobacterias termo /licas 8C.jejuni, C.coli y menos rec$entemente C.lari9 y #a si!o asocia!a al contacto !irecto #ombre1animal 8a"es, perros, 'atos y otras especies9 o in!irecto por el cons$mo !e alimentos contamina!os como a'$a, lec#e, y carnes& Otra orma !e presentaci)n !e la en erme!a! en el #ombre, menos com6n y !e mani estaci)n espor-!ica, se pro!$ce c$an!o pacientes !ebilita!os o m$y en ermos se in ectan con cepas !e C.fetus s$bsp& fetus capaces !e pro!$cir septicemia e incl$si"e abortos& En los animales, si bien e4iste $n "aria!o n6mero !e especies !el '(nero Campylobacter *$e #abitan los aparatos !i'esti"o y 'enital, tambi(n se conocen en erme!a!es espec/ icas !e importancia para la pro!$cci)n animal& En al'$nas oport$ni!a!es las mismas son espor-!icas y se pro!$cen ante la aparici)n !e cepas bacterianas con aptit$! para ca$sar in"asi)n y septicemia, como es el caso !e los abortos espor-!icos en bo"inos, o"inos, "isones y en otras especies animales 8 C.jejuni y C.fetus s$bsp& fetus9& En otros casos la en erme!a! se pro!$ce por bacterias a!apta!as para pro!$cir in ecciones espec/ icas como la in ertili!a! bo"ina 8C.fetus s$bsp& venerealis y fetus9& Como se mencion) anteriormente, la "/a !i'esti"a es la orma m-s com6n !e transmisi)n !e estas bacterias& Como caso partic$lar !ebe mencionarse la "/a "en(rea en la campylobacteriosis 'enital bo"ina& En 'eneral la mortali!a! es ba:a y la capaci!a! pat)'ena !e estas bacterias es limita!a, ya *$e no s$elen ser in"asi"as sino *$e en 'eneral coloni.an las m$cosas !i'esti"as o 'enitales& Al'$nas cepas p$e!en ser in"asi"as en orma transitoria y por esa ca$sa p$e!en ca$sar in ecciones

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embrionarias y abortos en #embras 'estantes& ;)lo el ser #$mano y los primates son s$sceptibles a la to4ina *$e pro!$ce esta bacteria& ;in embar'o, la !iarrea en seres #$manos inm$nocompetentes es $na en erme!a! a$tolimita!a y !e c$raci)n espont-nea, a menos *$e e4istan en erme!a!es concomitantes o $n #$(spe! m$y s$sceptible como ni%os o ancianos& En 'eneral to!as las en erme!a!es !e inter(s "eterinario no ca$san mortali!a! sino serias p(r!i!as en la pro!$cci)n por in ertili!a!, abortos o merma !e peso& ;e conocen "arias especies !el '(nero Campylobacter *$e no #an !emostra!o ser pat)'enas #asta el momento o *$e s)lo ocasionalmente ca$san al'$na patolo'/a como a'entes sec$n!arios& As/ p$e!en citarse C.concisus, C.rectus, C.curvus, C.showae y C.sputorum bio"ar& sputorum aisla!os !e placas !entales, tratamientos !e con!$ctos y sali"a en el #ombre< C hyointestinalis !e los )r'anos 'enitales y !i'esti"os !e los bo"inos y porcinos< C.sputorum bio"ares bubulus y fecalis !e los tractos !i'esti"o y 'enital !e bo"inos y o"inos< C.cinaedii y C.fennelliae !el tracto 'enital #$mano y C.upsaliensis !el tracto !i'esti"o !e caninos& 3. MORFOLOGIA Y CARACTERISTICAS GENERALES Campylobacter !eri"a !e $na palabra 'rie'a *$e si'ni ica bacilo c$r"o& ;$ nombre $e prop$esto para !i erenciarlos !el '(nero Vibrio& ;on bacterias on!$la!as, espirala!as o con orma !e 5;5, =ram 819 y !e >,? a @ Am !e lar'o y >,B a >,? Am !e anc#o& =eneralmente tienen $n solo la'elo 8monotrico9 o $no en ca!a polo 8an itrico9, siempre sin "aina !e cobert$ra& La motili!a! !e la bacteria es caracter/stica y en orma !e tirab$.)n, r-pi!a para las pe*$e%as campylobacterias termo /licas y al'o m-s lenta para las 'ran!es ormas espirala!as !el C.fetus spp& ;$ conteni!o !e '$aninaCcitocina "ar/a entre el B@ al D@ E& La estr$ct$ra anti'(nica !el '(nero es m$y !i"ersa& Las !istintas especies !e Campylobacter no est-n relaciona!as entre s/& En cambio las !os s$bespecies !e C.fetus 8venerealis y fetus9 tienen ant/'enos com$nes, por lo *$e no son !i erenciables por inm$no l$orescencia& 3or otro la!o, si bien las cepas pertenecientes a las mismas especies tienen ant/'enos com$nes, !entro ca!a $na !e las especies es posible !i erenciar serotipos& Las especies m-s est$!ia!as son C.jejuni y C.coli e4istien!o #asta el momento FB antis$eros para serotipi icar la primera especie y +@ para la se'$n!a& 0i erencian G> serotipos por s$s ant/'enos termoestables por $na pr$eba !e #emoa'l$tinaci)n pasi"a o es*$ema !e 3enner y Hennessy& Tambi(n e4iste otro sistema !e serotipi icaci)n para estas !os especies basa!o en la !etecci)n !e ant/'enos termol-biles a'l$tinantes o es*$ema !e Lior, pr$eba *$e !i erencia $nos +>> serotipos& En cambio, la especie C.fetus es anti'(nicamente m-s #omo'(nea #abi(n!ose !escripto ? 'r$pos serol)'icos $san!o ant/'enos cel$lares enteros 8es*$ema !e Mars# y 2ire#ammer9 y !os 'r$pos A y H basa!os en ant/'enos termoestables 5O5 8es*$ema !e Mor'an9& Esta 6ltima es la clasi icaci)n *$e act$almente se $tili.a en el es*$ema !e Her' y *$e se basa en $na combinaci)n !e propie!a!es bio*$/micas y serol)'icas& Hasa!o en $n es*$ema !e serotipi icaci)n para la !etecci)n !e ant/'enos termol-biles s$per iciales, LaIson !etect) tres serotipos 8A, H y C9 para cepas !e C.mucosalis aisla!as asocia!as a casos !e a!enomatosis intestinal porcina& 3ara el resto !e las especies !e Campylobacter no se #an e ect$a!o est$!ios anti'(nicos !etalla!os para serotipi icar a las cepas aisla!as& 4.-RESPUESTA INMUNE Los est$!ios m-s !etalla!os #an si!o lle"a!os a cabo en pacientes in ecta!os con C.jejuni& Estos in!i"i!$os !esarrollan antic$erpos s(ricos *$e #an si!o in"esti'a!os por $na "arie!a! !e t(cnicas *$e incl$yen a'l$tinaci)n, i:aci)n !el complemento, ensayo bacterici!a, inm$no l$orescencia in!irecta, en.imoinm$noensayo 8ELI;A9 y ELI;A en 'el !i $si)n 80I=1ELI;A9& A pesar !e *$e la #emoa'l$tinaci)n pasi"a es $na t(cnica 6til para serotipi icar, no #a si!o a!ec$a!a para !etectar antic$erpos en in!i"i!$os con"alecientes& 0ebe tenerse en c$enta *$e estos ant/'enos 'eneralmente a$toa'l$tinan si se $san !irectamente en las pr$ebas serol)'icas, por lo c$al se recomien!a la $tili.aci)n !e ant/'enos sonica!os, ormola!os o e4tractos 'licoprot(icos& Las !i erentes t(cnicas !etectan !istintos antic$erpos y

Terzolo H. R & Catena M.

por ello, !e ac$er!o con la t(cnica *$e se $tilice, la !etecci)n !e la resp$esta inm$ne p$e!e "ariar& Los s/ntomas aparecen los !/as FJ, ?J o GJ post1in ecci)n 83I9 y los antic$erpos entre los !/as ?J y +>J 3I& En 'eneral la resp$esta inm$ne se presenta reci(n a partir !el GJ !/a 3I, !eclina abr$ptamente a partir !el !/a F>J 3I y !esaparece alre!e!or !el !/a @>J 3I& Inicialmente la resp$esta serol)'ica oc$rre e4cl$si"amente por I'M y l$e'o !os tipos !e inm$no'lob$linas 8I'M e I'=9 se pro!$cen al mismo tiempo& 3or ello la !etecci)n !e la resp$esta inm$ne !epen!e !el tipo !e pr$eba serol)'ica *$e se $tilice7 la pr$eba !e a'l$tinaci)n en t$bo !etecta pre!ominantemente la racci)n I'=, la a'l$tinaci)n en placa s)lo la racci)n I'M, la i:aci)n !el complemento reacciona con ambas, los con:$'a!os para inm$no l$orescencia con I'M& I'= e I'A, el ant/'eno bacterici!a e4cl$si"amente con I'M y las pr$ebas !e ELI;A p$e!en prepararse para !etectar to!as las racciones& Estas t(cnicas #an si!o $sa!as para est$!ios epi!emiol)'icos como, por e:emplo, para est$!iar brotes !e enteritis por cons$mo !e lec#e contamina!a o bien comparar el ni"el !e antic$erpos entre emplea!os !e mata!eros !e pollos y "eterinarios con in!i"i!$os !e otras pro esiones& Las t(cnicas !e a'l$tinaci)n se #an $tili.a!o para est$!iar la resp$esta inm$ne !e !i erentes especies !e Campylobacter en e4periencias !e repro!$cci)n !e "arias en erme!a!es en bo"inos, o"inos, porcinos y a"es& En 'eneral s)lo las especies !e campylobacterias termo /licas presentan a$toa'l$tinaci)n y re*$ieren tratamientos !e los ant/'enos& En el resto !e las especies !e Campylobacter los ant/'enos prepara!os con t(cnicas con"encionales son a!ec$a!os& Cabe se%alar *$e en nin'6n caso estas pr$ebas son $tili.a!as r$tinariamente en los laboratorios !e !ia'n)stico "eterinario sino con prop)sitos !e in"esti'aci)n o e"al$aci)n !e la inm$ni!a! con eri!a por las "ac$nas, partic$larmente en bo"inos& Con re erencia a los antic$erpos s(ricos para el !ia'n)stico !e la campylobacteriosis 'enital bo"ina, (stos #an si!o e"i!encia!os me!iante pr$ebas !e #emoa'l$tinaci)n pasi"a, a'l$tinaci)n, precipitaci)n y, en las 6ltimas !(ca!as, se #an !esarrolla!o en.imo1inm$noensayos 8ELI;A9, !iri'i!os para !etectar tanto a los ant/'enos !e c(l$la entera como para los !e las prote/nas !e la capa s$per icial de C. fetus, !enomina!a K;1Layer8C9L& Me!iante estas pr$ebas se #a comproba!o la presencia !e antic$erpos a'l$tinantes contra ant/'enos som-ticos, los c$ales presentan reacci)n cr$.a!a entre al'$nos ant/'enos !el '(nero Campylobacter y otros similares !e bacterias =ram ne'ati"as, orman!o parte !e los !enomina!os Klos antic$erpos nat$ralesL !e los r$miantes& En el caso !e animales in ecta!os, tanto en orma nat$ral como e4perimental, los antic$erpos #$morales in!$ci!os tienen comportamiento !i erente !$rante la in ecci)n y se presentan en orma in!epen!iente a la tasa !e antic$erpos locales *$e est-n presentes en la m$cosa !el tracto repro!$ctor emenino& Tambi(n, tiene relaci)n la p$erta !e entra!a !el inm$n)'eno 8ant/'eno9, !etect-n!ose mayor t/t$lo !e antic$erpos en s$ero, en los animales "ac$na!os por "/a s$bc$t-nea *$e por "/a intra1$terina& 6.PATOG NESIS Como lo anticip-ramos en la intro!$cci)n se #a atrib$i!o a las campylobacterias la ca$sa !e "arias en erme!a!es *$e act$almente se asi'nan a otros a'entes& La amplia !istrib$ci)n !e estas bacterias, s$ !i /cil !etecci)n y s$ !i erente pato'enici!a!, a6n entre !i erentes cepas !e $na misma especie !e Campylobacter, #an !etermina!o esta con $si)n& Comen.aremos por !escribir con m-s !etalle los mecanismos !e pato'enici!a! *$e inter"ienen en la enteritis y l$e'o se tratar-n los correspon!ientes al resto !e las en erme!a!es& 6.1.ENTERITIS Est- pro!$ci!a en el #ombre por C.jejuni y en menor 'ra!o por C.coli& ;e #an !escripto y tambi(n repro!$ci!o e4perimentalmente enteritis similares, con respecto a s$s s/ntomas y lesiones, en o"inos, bo"inos, porcinos y caninos& ;in embar'o en to!as estas especies animales la in ecci)n es m$y rec$ente y p$e!e in"ol$crar a to!os los in!i"i!$os !e $na poblaci)n, los *$e 'eneralmente no !em$estran si'nos cl/nicos !e la en erme!a!& En caninos se a/sla Campylobacter tanto en animales sanos como en animales con enteritis en

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!i erentes pa/ses, en Ar'entina la pre"alencia a partir !e materia ecal !e perros !e $na .ona $rbana $e !etermina!a en $n +FE, con pre!ominio !e Campylobacter jejuni& 0e initi"amente las campylobacterias no son los a'entes etiol)'icos !e la !iarrea in"ernal ni !e la !iarrea neonatal !e los bo"inos, en erme!a!es *$e respon!en a $na etiolo'/a "/rica, bacteriana, parasitaria o m6ltiple& Tampoco son ca$santes !e la !isenter/a porcina c$yo a'ente reconoci!o es Serpulina 8e41Treponema9 hyodisenteriae, ni !e la a!enomatosis intestinal porcina c$yo a'ente es $na bacteria !e !esarrollo intracel$lar estricto y !enomina!a Lawsonia intracelularis& A contin$aci)n trataremos los mecanismos !e pato'enici!a!7 a!#erencia, coloni.aci)n, in"asi)n, pro!$cci)n !e to4inas y pl-smi!os& 6.1.1.A!"eren#$% ;e #a !emostra!o la a!#esi)n !e C.jejuni, C.fetus s$bsp& fetus y C.hyointestinalis a los bor!es en cepillo !e los enterocitos bo"inos y la !e C.jejuni al /leo li'a!o !e cone:o, pero la a!#erencia es m$c#o m-s l-bil *$e la !e Escherichia coli& ;e #a relaciona!o s$ a!#erencia a la capaci!a! #emoa'l$tinante !e C.jejuni rente a eritrocitos !e "arias especies animales& 3or otro la!o se #a encontra!o por microscop/a electr)nica estr$ct$ras similares a pilis per/tricos 8!etecta!os en C. jejuni y C. fetus9, c$an!o las bacterias son c$lti"a!as en me!ios con presencia !e sales biliares, !emostr-n!ose *$e las cepas m$tantes no pilia!as tienen re!$ci!a s$ posibili!a! !e coloni.aci)n en los #$rones $tili.a!os como mo!elo animal& Otro in"esti'a!or est$!i) cepas !e C. fetus K;1Layer8C9L y ;1Layer819 y s$ interacci)n con c(l$las HEp1B, encontran!o *$e la K;1LayerL no es esencial como me!ia!or inicial en la interacci)n !e C. fetus con !ic#as c(l$las& 6.1.2.Co&on$'%#$(n Las campylobacterias son m$cosa1asocia!as, es !ecir *$e est-n a!apta!as a coloni.ar el ambiente m$coso !e las s$per icies intestinales< estas bacterias espirala!as se m$e"en me:or y m-s r-pi!o en sol$ciones con "iscosi!a! similar a la !el m$c$s& ;$ in ecci)n pro!$ce $na notable !epleci)n !e las c(l$las calici ormes y consec$entemente s$ presencia se acompa%a !e ab$n!ante m$c$s en la l$. intestinal& ;e consi!era *$e la coloni.aci)n !el m$c$s es $n paso esencial en la pato'(nesis !e las in ecciones por Campylobacter spp& Como en la salmonelosis es posible ca$sar inter erencia a la coloni.aci)n por me!io !e lora normal, este en)meno se !enomina in#ibici)n competiti"a y #a si!o prop$esto como $n me!io para e"itar la coloni.aci)n !e los pollos por campylobacterias termo /licas& ;e #a !emostra!o *$e en terneros, lec#ones y cac#orros 'notobi)ticos y en la$c#as neonatas *$e la coloni.aci)n por campylobacterias es !istinta a la !e los animales con"encionales< en los primeros las campylobacterias pre erentemente coloni.an el cie'o e intestino 'r$eso mientras *$e en los animales con"encionales, *$e tienen microor'anismos normales, es m$c#o m-s com6n la coloni.aci)n !el intestino !el'a!o& 6.1.3.In)%*$(n Al'$nos traba:os e4perimentales !em$estran *$e la in"asi)n p$e!e ser $no !e los mecanismos !e la !iarrea por campylobacterias mientras *$e en otros, a pesar !e lo'rarse $na m$y b$ena coloni.a1 ci)n !el tracto ent(rico, no p$!o !emostrarse el pasa:e !e nin'$na campylobacteria a los te:i!os s$byacentes& La !ispari!a! !e los res$lta!os e4perimentales se !ebe a *$e las !istintas cepas est$!ia!as tienen !i erente capaci!a! !e in"asi)n& 3or e:emplo, e4isten cepas !e C.jejuni *$e +B #oras !esp$(s !e ser inoc$la!as a pollitos !e D !/as !e e!a! penetran en el epitelio !el intestino !el'a!o y a las BF #oras ya p$e!en ser !etecta!as !entro !e los a'ocitos !e la l-mina propia& En estas bacterias se #a !emostra!o la presencia !e $na citoto4ina, la c$al po!r/a contrib$ir al proceso in"asi"o !e la m$cosa& El !i erente 'ra!o !e penetraci)n !e la membrana corioalantoi!ea !e embriones !e pollo !e ++ !/as !e inc$baci)n por las cepas #$manas !e C.jejuni #a si!o $tili.a!o como $n mo!elo e4perimental para e"al$ar la !i erente capaci!a! in"asi"a !e estas cepas& 0el mismo mo!o otros a$tores #an $sa!o la in"asi)n $terina o el aislamiento a partir #emoc$lti"os toma!os +> min$tos !esp$(s !e la in ecci)n oral en la$c#as para e"al$ar la pato'enici!a! !e cepas #$manas !e C.jejuni En "arias especies animales la bacteriemia es $n #ec#o bastante rec$ente As/ en terneros con"encionales inoc$la!os con C.jejuni por "/a oral se #a !emostra!o el pasa:e !e esta bacteria a "arios )r'anos internos a las BF #oras 3I, para

Terzolo H. R & Catena M.

l$e'o circ$nscribirse al ba.o y 'an'lios lin -ticos mesent(ricos a las F@ #oras y e4cl$si"amente en intestino a las MG #oras 3I& En cambio, c$an!o se $saron cepas !e C.jejuni y C.coli, ori'inalmente aisla!as !e abortos, para inoc$lar por "/a oral a terneros, se las p$!o reaislar !e #emoc$lti"os #asta FB !/as !esp$(s !e la in ecci)n& Esta !i erente capaci!a! in"asi"a !em$estra la "ariabili!a! *$e presentan !istintas cepas pertenecientes a $na misma especie !e Campylobacter& 6.1.4.Pro!+##$(n !e ,o-$n%* To!as las especies !el '(nero Campylobacter poseen enteroto4inas 8en!oto4inas9 p$esto *$e son microor'anismos 'ram ne'ati"os& La acti"i!a! en!ot)4ica #a si!o !etermina!a por la pr$eba !(rmica !e ;c#Iart.man reali.a!a en cone:os con bacterias m$ertas por el calor !e las especies C.jejuni, C.coli y C.sputorum bio"ar bubulus& Tambi(n se #a !emostra!o *$e la trombosis e in lamaci)n *$e se pro!$cen en las in ecciones por C.fetus son el res$lta!o !e $na acti"i!a! en!ot)4ica local& A!em-s las campylobacterias pro!$cen enteroto4inas y citoto4inas& ;e #a !escripto $na enteroto4ina l-bil al calor 8LT9 *$e pro!$ce re!on!eamiento 8e ecto citot)4ico9 !e c(l$las t$morales !e la 'l-n!$la a!renal !el rat)n 8N+9 tanto en C.fetus s$bsp& fetus como en C.jejuni& Ona to4ina !i erente !e C.jejuni, pro!$ce elon'aci)n 8e ecto citot)nico9 e incremento !e los ni"eles !e a!enos/n mono os ato 8AM39 c/clico intracel$lar en c$lti"os cel$lares !e o"ario !e #-mster c#ino, c(l$las HeLa, "ero y Hep1B& El pareci!o entre esta to4ina y la !el "ibri)n col(rico es m$y marca!o7 ambas act6an por los mismos mecanismos y est-n anti'(nicamente relaciona!as 1los antic$erpos contra la to4ina col(rica blo*$ean la acti"i!a! !e la to4ina !e C.jejuni& ;in embar'o no son i!(nticas, p$esto *$e est$!ios !e #ibri!i.aci)n !el 0NA #an !emostra!o *$e los 'enes *$e co!i ican para la enteroto4ina !e C.jejuni no est-n completamente relaciona!os a los 'enes *$e lo #acen co!i ican para la to4ina LT !e E. coli o Vibrio cholerae& 6.1...P&/*0$!o* ;e #a !emostra!o *$e la resistencia a la tetraciclina !e al'$nas cepas !e C.jejuni y C.coli estme!ia!a por pl-smi!os& El mecanismo !e trans erencia !e estos pl-smi!os probablemente in"ol$cra a la con:$'aci)n implican!o $n contacto !e c(l$la1c(l$la, ya *$e ni la trans ormaci)n !el 0NA o la trans!$cci)n por bacteri) a'os #an po!i!o ser e"i!encia!as& 6.2.CAMPYLOBACTERIOSIS GENITAL BO1INA Campylobacter fetus s$bsp fetus y Campylobacter fetus s$bsp venerealis ca$san en el bo"ino $na en erme!a! repro!$cti"a, !enomina!a Campylobacteriosis =enital Ho"ina8C=H9, *$e se caracteri.a por in ertili!a! y abortos espor-!icos& La pre"alencia en los ro!eos !e n$estro pa/s $e estima!a por laboratorios pri"a!os y en el -mbito o icial me!iante el K3lan TorosL !$rante +M@,1+M@@ con ci ras *$e oscilan entre $n @,?E y $n B>E& En la act$ali!a! se carece !e re'istros o iciales& Anteriormente se cre/a *$e estas !os s$bespecies pro!$c/an !os en erme!a!es !i erentes7 la s$bsp fetus el aborto espor-!ico y la s$bsp& venerealis la in ertili!a! en.)otica& Act$almente se sabe *$e estas !os s$bespecies, m$y similares y 'en(ticamente in!istin'$ibles, son ambas capaces !e pro!$cir en orma in!istinta c$al*$iera !e estas !os presentaciones cl/nicas !e $na misma en erme!a!& En el mac#o Campylobacter fetus se locali.a en las criptas prep$ciales y el 'lan!e !el pene mientras *$e en la #embra coloni.a principalmente en el -rea cer"ico1"a'inal& El toro es $n porta!or asintom-tico *$e transmite y !i $n!e la en erme!a! !$rante la monta nat$ral o bien in!irectamente me!iante inseminaci)n arti icial& La c$raci)n espont-nea !e $n toro in ecta!o rara "e. oc$rre !a!o *$e estos microor'anismos no son in"asi"os y "ar/an la presentaci)n !e s$s ant/'enos !e s$per icie, lo c$al #ace *$e la resp$esta inm$ne local sea m/nima y *$e las campylobacterias permane.can !$rante lar'o tiempo en las m$cosas 'enitales& Campylobacter fetus subsp fetus y Campylobacter fetus subsp venerealis son transmiti!os en orma "en(rea, locali.-n!ose en la #embra en el on!o !e "a'ina, !$rante la a. pro'estacional los

TEMAS

DE

MICROBIOLOGA VETERINARIA

microor'anismos penetran en el 6tero, !on!e se i:an a la m$cosa, pro!$cien!o en!ometritis, y en al'$nos casos salpin'itis, lo c$al p$e!e pro"ocar la m$erte preco. !el embri)n< en este caso la #embra p$e!e retornar al ser"icio B@ a D? !/as !esp$(s !e inicia!o el celo& 3ara la m$erte embrionaria se post$la $na !ismin$ci)n !e la tensi)n !e o4/'eno y n$trientes escenciales para el embri)n en el per/o!o !e preni!aci)n y la presencia !e m$cinasas, lle"an!o esto a $n retar!o en la ni!aci)n y posterior m$erte !el embri)n& 3or otro la!o, traba:os !e ertili.aci)n in "itro !e )"$los bo"inos en presencia !e C. fetus venerealis in!ican *$e aparentemente no se a ectar/a la ertili.aci)n, ni el !esarrollo embrionario temprano& Otros a$tores in!ican *$e el proceso in lamatorio en el en!ometrio, con presencia !e c(l$las monon$cleares y polimor on$cleares no permitir/a la ni!aci)n !el embri)n, pero en ensayos reali.a!os en n$estro pa/s se p$!o comprobar la presencia !e c(l$las tro obl-sticas en "a*$illonas in ecta!as y con en!ometritis& 0$rante "arios a%os se recomen!) el !escanso se4$al !e la #embra entre $n ser"icio y el si'$iente& Hoy se conoce por !i erentes ensayos *$e el tiempo re*$eri!o para *$e el 6tero se recobre !e los e ectos !e la in ecci)n es m$y "ariable, p$!ien!o transc$rrir !es!e + mes #asta @ meses& En al'$nos casos, la #embra no lo'rar/a eliminar totalmente la in ecci)n !el C. fetus permitien!o *$e esta bacteria sobre"i"a en la m$cosa !el -rea cer"ico1"a'inal, !$rante lar'os per/o!os, incl$si"e #asta !$rante BF meses& En otros casos se #an !escripto #embras in ecta!as *$e son capaces !e lle"ar $na pre%e. a t(rmino7 estas #embras son consi!era!as porta!oras asintom-ticas& A contin$aci)n !etallaremos las ca$sas !e esta in ecci)n persistente& Ce2%* S-L%3er4567 e)%*$(n !e &% re*2+e*,% $n0+ne 3 2er*$*,en#$% !e &% $n8e##$(n Otro actor !e "ir$lencia, relaciona!o con la capaci!a! !e al'$nas cepas !e C. fetus para pro!$cir la en erme!a! "en(rea en el tracto 'enital !e los bo"inos, parecer/a estar asocia!o con la presencia !e $na estr$ct$ra cristalina !e prote/nas !e ele"a!o peso molec$lar& Los microor'anismos *$e la poseen son positi"os a esta capa s$per icial ; P;1Layer8C9Q& 0ic#as prote/nas poseen tanto sec$encias conser"a!as como "ariables& 0e ac$er!o con lo obser"a!o por microscop/a electr)nica, estas prote/nas presentan !i erente estr$ct$ra y tama%o 8tetra'onal o #e4a'onal9& Esta #etero'enei!a! se relacionar/a con la "ariaci)n anti'(nica, sien!o (ste $n actor !eterminante para la persistencia !e las campylobacterias el tracto repro!$ctor& 0ic#a "ariaci)n es $s$almente obser"a!a en $n pe*$e%o n6mero !e prote/nas inm$no!ominantes s$per iciales *$e constit$yen $n importante atrib$to !e "ir$lencia en pat)'enos *$e resi!en en las s$per icies m$cosas& Este actor !e "ir$lencia estar/a !irectamente relaciona!o con la capaci!a! !el microor'anismo para permanecer en el tracto repro!$ctor el$!ien!o la resp$esta inm$ne, ya *$e C. fetus cambia s$ estr$ct$ra anti'(nica s$per icial a mayor "eloci!a! *$e la capaci!a! !el sistema inm$ne para pro!$cir n$e"os antic$erpos *$e recono.can a las n$e"as "ariables anti'(nicas s$per iciales& El sistema inm$ne tiene $na 'ran in l$encia sobre la persistencia !e esta bacteria en el tracto repro!$ctor& Las cepas K; Layer819L p$e!en ser -cilmente a'ocita!as por los macr) a'os, pero sin embar'o las cepas K; Layer8+9L son resistentes a la a'ocitosis y a la acti"i!a! bacterici!a !el s$ero, !os !e los mecanismos !e !e ensa m-s importantes contra las bacterias e4tracel$lares =ram ne'ati"as& Ello se !ebe a la incapaci!a! !el componente CDb !el complemento !e a!#erirse a la s$per icie !e las c(l$las K; Layer8C9L en presencia !e s$ero inm$ne, impi!ien!o !e este mo!o la acti"aci)n !el componente C?1M& ;e !esconoce la ca$sa !e la incapaci!a! !el componente CDb !e i:arse a la s$per icie !e las c(l$las !e la m$cosa, pero po!r/a estar relaciona!a a la ine iciencia !e !ic#as c(l$las !e acti"ar la "/a alternati"a !el complemento& La a$sencia !e i:aci)n !el complemento po!r/a e4plicar la marca!a resistencia a la a'ocitosis *$e presentan las c(l$las !e C. fetus K; Layer8C9L& ;in embar'o las cepas ; Layer8+9 *$e no i:an complemento, en presencia !e s$eros inm$nes, p$e!en ser opsoni.a!as por "/a !e receptores 2c !e las c(l$las a'oc/ticas& Las c(l$las a'oc/ticas in"ol$cra!as en la resp$esta inm$ne local en #embras con C=H, est-n relaciona!as con lo obser"a!o en la #istopatolo'/a !el aparato repro!$ctor& Los polimor on$cleares 83MN9 y macr) a'os !el bo"ino eliminan al C. fetus subsp fetus en presencia !e I'= pero no en presencia !e I'A, *$e solamente inmo"ili.a a !ic#a s$bespecie !e Campylobacter& La e4istencia !e n$merosos 3MN e I'=+ en el 6tero !esp$(s !el estro, pre"ienen la a!#esi)n y la coloni.aci)n, pero

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posteriormente, al !ismin$ir el n6mero !e a'ocitos !$rante las otras ases !el ciclo estral, los Campylobacter alo:a!os en el -rea cer"ico1"a'inal son capaces !e in"a!ir el 6tero& En el cer"i4 y "a'ina, la inm$ni!a! local !el tracto 'enital !estr$ye $na proporci)n importante !e la poblaci)n bacteriana& 3or otro la!o la "ariaci)n anti'(nica !e C. fetus y el enmascaramiento !e ant/'enos similares a otras bacterias =ram ne'ati"as, entre otras ca$sas, permiten la e"asi)n !e $na s$b1 poblaci)n y s$ posterior m$ltiplicaci)n, *$e con ba:a in"asi"i!a! y resp$esta inm$ne ca$sa $na in ecci)n persistente& En la in iltraci)n cel$lar !e la en!ometritis, los lin ocitos as/ como los a'ocitos probablemente ten!r/an $na $nci)n importante en la resp$esta inm$ne& 6.3.INFECCIONES EN GANADO LEC9ERO. MASTITIS ;i bien estas bacterias p$e!en ser -cilmente !estr$i!as por la paste$ri.aci)n, el #ec#o !e *$e la lec#e cr$!a p$e!a contener campylobacterias #a incenti"a!o la reali.aci)n !e n$merosos est$!ios para conocer la epi!emiolo'/a !e este 'r$po bacteriano& ;e !etermin) *$e la e4creci)n ecal !e C.jejuni es "ariable, sien!o alta en "erano 8!e $n +>E #asta $n GFE9 y ba:a o n$la en in"ierno& Los animales *$e e4cretan C.jejuni p$e!en eliminar sim$lt-neamente "arios serotipos y no presentan nin'6n s/ntoma, por lo tanto estos '(rmenes !eben ser consi!era!os como comensales en las "acas& C$an!o se e ect6an aislamientos seria!os en $n mismo animal, la e4creci)n !e las campylobacterias es intermitente& Consi!eran!o *$e en los animales *$e eliminan estos '(rmenes el n6mero !e C.jejuni en materia ecal es m$y alto !e +>G a +>+> $ni!a!es orma!oras !e colonias 8O2CR'9 y *$e s)lo se necesitan relati"a1 mente pocas campylobacterias 8?>> O2C en B>> ml !e lec#e9 para in ectar a $n ser #$mano, p$e!e !e!$cirse *$e la contaminaci)n acci!ental !e la lec#e por #eces en el tambo es probablemente $n #ec#o rec$ente& As/, $tili.an!o m(to!os !e !etecci)n m$y sensibles se #a !etermina!o *$e $n + a BE !e la lec#e !e tambos mo!elo !el Reino Oni!o estaba contamina!a& A!em-s !e la contaminaci)n ecal, po!r/a consi!erarse *$e e4iste la posibili!a! !e eliminaci)n !irecta !e C.jejuni por lec#e en casos !e mastitis< esta con!ici)n se #a repro!$ci!o e4perimentalmente pero sin embar'o no se #a !emostra!o *$e la in ecci)n oc$rra com6nmente en casos nat$rales !e mastitis& 6.4.ABORTOS ESPORADICOS EN O1INOS Y CAPRINOS El mecanismo !el aborto o"ino siempre consiste en septicemia a partir !e $na in ecci)n ent(rica pre1e4istente y se presentan !$rante la etapa tar!/a !e la pre%e.& Apro4ima!amente la mita! !e los abortos por Campylobacter son pro!$ci!os en o"inos por la especie C.jejuni y la otra mita! por C.fetus s$bsp& fetus 8serotipo H9& Las #embras p$e!en presentar !escar'as $terinas, constit$yen!o $na orma !e !iseminaci)n !e los a'entes ca$sales& Los etos aborta!os presentan lesiones #ep-ticas necr)ticas pato'nom)nicas !e esta en erme!a!& En caprinos se #an !escripto tambi(n abortos similares y ca$sa!os por C.jejuni& 6.. DISENTER:A PORCINA ;i bien err)neamente se #ab/a !escripto a C. coli 8Vibrio coli9 como el a'ente ca$sal !e la !isenter/a porcina en reali!a! esta en erme!a! n$nca p$!o repro!$cirse e4perimentalmente inoc$lan!o C. coli, C. hyointestinalis o C. fetus s$sp& fetus& ;)lo en $n traba:o se p$!o pro!$cir $na enteritis m$y le"e con !osis m$y altas !e C. coli, pero n$nca las lesiones caracter/sticas !e la en erme!a!& 3osteriormente se !emostr) *$e la !isenter/a porcina era en reali!a! ca$sa!a por $na espiro*$eta anaerobia7 Treponema hyodysenteriae& Act$almente se sabe *$e las camylobacterias son parte !e la lora normal !e los porcinos, estan!o los animales nat$ralmente coloni.a!os entre $n F@ a $n +>>E y con +>B a +>? bacterias por 'ramo !e materia ecal& 6.6 .ADENOMATOSIS INTESTINAL PORCINA Lo m-s interesante !e esta en erme!a! son las lesiones *$e presenta el /leo terminal, el cie'o y la porci)n pro4imal !el colon& El intestino se presenta m$y en'rosa!o, la m$cosa tiene n$merosos plie'$es *$e le !an $n aspecto similar a los casos cl-sicos !e parat$berc$losis bo"ina& Microsc)picamente se pier!e la ar*$itect$ra normal !el epitelio y las 'l-n!$las normales son

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MICROBIOLOGA VETERINARIA

reempla.a!as por c(l$las in!i erencia!as en r-pi!a m$ltiplicaci)n& Estas c(l$las 'lan!$lares altera!as contienen n$merosas bacterias intracitoplam-ticas, *$e se locali.an e4cl$si"amente en el citoplasma apical& Estos microor'anismos p$e!en "is$ali.arse con tinciones ar'(nticas o por la coloraci)n !i erencial para !etectar al '(nero Brucella. Al microscopio electr)nico se obser"a *$e las bacterias est-n libres en el citoplasma y no se ro!ean !e nin'$na membrana< a!em-s no se enc$entran bacterias a!#eri!as a la s$per icie cel$lar& Las c(l$las in ecta!as tienen ab$n!antes i'$ras !e mitosis y las bacterias tambi(n se m$ltiplican !entro !el citoplasma& C$an!o se $tili.an t(cnicas !e inm$no l$orescencia se p$e!en i!enti icar ant/'enos !e C.mucosalis 8catalasa ne'ati"o9, a$n*$e por t(cnicas !e inm$nopero4i!asas tambi(n se !etectaron ant/'enos com$nes con C.hyointestinalis 8catalasa positi"o9& ;in embar'o las !istintas e4periencias para repro!$cir esta en erme!a! en lec#ones con"encionales o 'notobi)ticos con estas !os especies #an teni!o poco (4ito& In"esti'a!ores a$stralianos lo'raron repro!$cir en lec#ones $na en erme!a! similar, pero no i!(ntica a la nat$ral, con inoc$laciones !e C. hyoiley, pero la bacteria no se p$!o !etectar en el citoplasma !e los enterocitos sino s)lo !entro !e los macr) a'os& Las !i ic$lta!es para encontrar a este el$si"o a'ente etiol)'ico se !eben a *$e es $na bacteria !e crecimiento intracel$lar obli'atorio, p$es res$lta imposible lo'rar s$ !esarrollo en me!ios !e c$lti"o arti iciales& ;e #a lo'ra!o s$ !esarrollo en c$lti"os !e te:i!os y la bacteria ca$sal se #a !enomina!o LaIsonia intracel$laris, n$e"o '(nero y especie molec$larmente relaciona!a, por an-lisis !e 0NA ribosomal, a la bacteria sapro ita 0es$l o"ibio !es$l oricans& Ona en erme!a! similar !el #amster est- ca$sa!a por otra n$e"a especie molec$larmente relaciona!a a las anteriores& 0e mo!o *$e inalmente nin'$na !e las campylobacterias !escriptas y est$!ia!as !$rante tantos a%os $e s$ a'ente ca$sal& 6.;.9EPATITIS 1IBRIONICA A1IAR Esta en erme!a! $e !escripta en EOA a me!ia!os !e la !(ca!a !e +M?> y los microor'anismos aisla!os !e #/'a!os y "es/c$las biliares !e las a"es en ermas, conoci!os como 5"ibrios relaciona!os a los !e Sin'5 !ieron l$'ar a $na serie !e in"esti'aciones *$e los correlacionaron con los aisla!os !e casos !e !iarrea en seres #$manos y abortos en o"inos, lo *$e !etermin) *$e $eran retrospecti"amente clasi ica!os como C.jejuni& La en erme!a! se presentaba en 'allinas pone!oras y se caracteri.aba por ba:a morbili!a! y mortan!a! sien!o pato'nom)nica la presencia !e ocos necr)ticos en el #/'a!o& 3or ca$sas !esconoci!as este mal !esapareci) !e los cria!eros in!$striales a ines !e la !(ca!a !el G>& Recientes est$!ios !e repro!$cci)n e4perimental !e la en erme!a! en pollos !emostraron *$e el esta!o inm$ne !el #$(spe! p$e!e in l$enciar la oc$rrencia !e las lesiones, p$esto *$e las caracter/sticos ocos necr)ticos !el #/'a!o s)lo p$!ieron pro!$cirse en $n G>E !e los animales inoc$la!os con C.jejuni s)lo c$an!o los mismos $eron inm$no!eprimi!os con ciclo os ami!a& Es posible *$e esta en erme!a! e4ista s)lo ocasionalmente c$an!o se asocia la presencia !e $na cepa in"asora !e C.jejuni con al'6n actor t)4ico o inm$nos$presor& ;.ASPECTOS CLINICOS En los seres #$manos la in ecci)n oral pro!$ce iebre pro!r)mica y, l$e'o !e $n per/o!o !e inc$baci)n !e D !/as, los si'$ientes s/ntomas7 !ecaimiento, anore4ia, !olor !e cabe.a, mareos, !olor !e espal!a, mial'ia, !olor ab!ominal y a "eces contract$ras& La temperat$ra corporal es !e F>JC& E"ent$almente se presentan c)licos y se !esarrolla !iarrea, con materia ecal m$coi!e y con estr/as !e san're& La na$sea es com6n pero s)lo al'$nos pacientes "omitan& La !iarrea a'$!a !$ra B o D !/as, el paciente est- al'o !es#i!rata!o y se siente !(bil& La en erme!a! c$ra espont-neamente y los s/ntomas remiten& ;)lo e4isten complicaciones cl/nicas en pacientes !ebilita!os, en los e4tremos !e e!a! o c$an!o pa!ecen en erme!a!es concomitantes& ;e #an !escripto si'nos !e !iarrea en caninos !e corta e!a! cria!os E4cepcionalmente !escripto la m$erte !e caninos por !iarrea pro!$ci!a por C.jejuni& La a!enomatosis intestinal porcina es $na en erme!a! !e reciente !escripci)n, p$esto *$e no pro!$ce si'nos cl/nicos e"i!enciables, y por ello #a pasa!o !esapercibi!a !$rante a%os& Con la implementaci)n !e sistemas !e pro!$cci)n animal m-s competiti"os se !etectan lec#ones *$e no

Terzolo H. R & Catena M.

maman y por lo tanto no 'anan el peso correspon!iente a s$ e!a!& Ocasionalmente al'$no !e esos animales p$e!e tener episo!ios !iarreicos, pero estos s/ntomas no son $na caracter/stica !e la en erme!a!& Estos si'nos cl/nicos p$e!en persistir !$rante $nas G semanas y l$e'o los animales rec$peran s$ apetito y c$ran espont-neamente& ;i se e4aminan los animales *$e #an c$ra!o se p$e!e obser"ar $na remisi)n total !e las lesiones& 0e #ec#o la en erme!a! no s$ele !ia'nosticarse y s)lo se la !etecta como $n #alla.'o cas$al c$an!o los animales son necropsia!os para otros est$!ios& En el resto !e las en erme!a!es !e los animales los s/ntomas cl/nicos son poco e"i!entes& La campylobacteriosis 'enital bo"ina a ecta 6nicamente a las #embras !el ro!eo& ;on m-s s$sceptibles las "a*$illonas o las "acas *$e no #an teni!o contacto con el a'ente ca$sal& Los principales si'nos cl/nicos son7 repeticiones !e celo, alar'amiento !el ciclo estral, !ismin$ci)n !e los porcenta:es !e pre%e. !ebi!o a la m$erte embrionaria y abortos< en 'eneral no se a ecta el ser"icio ni la concepci)n& Los abortos 'eneralmente se pro!$cen entre el ? to y ,mo& mes !e 'estaci)n, a$n*$e p$e!en oc$rrir en c$al*$ier per/o!o !e la 'estaci)n. <.DIAGNOSTICO DE LABORATORIO El '(nero Campylobacter est- en constante cambio& Hasta la ec#a se #an !escripto +? especies7 C.fetus s$bspp& fetus y venerealis, Chyointestinalis, C.jejuni, C.coli, C.lari, C.upsaliensis, C.cinaedi, C.fennelliae, C.nitrofi ilis, C.sputorum bio"ares sputorum, bubulus y fecalis, C.mucosalis, C.concisus, C.rectus, C.curvus y C.showae& La remisi)n !e #eces para c$lti"o bacteriol)'ico p$e!e #acerse !irectamente en rascos con tapa a rosca !e:an!o $na pe*$e%a c-mara !e aire& En ese ambiente, !ebi!o al #ermetismo y a la acci)n los microor'anismos ecales, se !esarrolla $na atm)s era microaero /lica *$e permite la conser"aci)n !e las campylobacterias !$rante #asta G !/as sin *$e !ismin$ya si'ni icati"amente el n6mero !e los aislamientos& 3ara el transporte !e campylobacterias ecales se emplean me!ios !e c$lti"o pobres en n$trientes, como el me!io semis)li!o !e Cary Hlair mo!i ica!o por Hlaser, con re!$ci!a canti!a! !e a'ar 8+,G 'Rl9& La toma !e m$estras para el control !e la campylobacteriosis 'enital bo"ina se reali.a r$tinariamente en los repro!$ctores mac#os a partir !el esme'ma prep$cial, el c$al es transporta!o en sol$ci)n isiol)'ica ormola!a o enola!a para reali.ar l$e'o el !ia'n)stico !e las campylobacterias inacti"a!as por inm$no l$rescencia !irecta& En los ro!eos problema tambi(n se p$e!e e ect$ar el m$estreo !el m$c$s c(r"ico1"a'inal !e las #embras *$e presenten mortali!a! embrionaria, sien!o lo m-s recomen!able solicitar el c$lti"o bacteriol)'ico& En el caso !e !etectarse abortos, las m$estras etales !e elecci)n para en"iar al laboratorio para reali.ar el c$lti"o bacteriol)'ico son el conteni!o !e abomaso y c$al*$ier otro )r'ano interno, sien!o !e elecci)n el p$lm)n& ;i se enc$entra la placenta, la misma tambi(n p$e!e ser en"ia!a al laboratorio& 0ebi!o a s$ p$re.a y al alto n6mero !e campylobacterias, si las m$estras etales #an si!o e4tra/!as as(pticamente, las mismas p$e!en ser !irectamente c$lti"a!as sobre placas !e a'ar san're sin in#ibi!ores& 3ara m$estras contamina!as como la placenta, los c$lti"os siempre !eben ser reali.a!os en me!ios selecti"os, p$es sino los contaminantes sobrecrecen con acili!a! a las campylobacterias *$e tienen $n !esarrollo m$c#o m-s lento& 3ara el aislamiento a partir !e esme'ma prep$cial !e toro, !ebi!o al alto 'ra!o !e contaminaci)n !e estas m$estras, el me!io !e transporte y enri*$ecimiento selecti"o TEM es el m-s a!ec$a!o& En el caso !el m$c$s c(r"ico1"a'inal, !ebi!o a la presencia !e bacterias !e la lora "a'inal y al ba:o n6mero !e campylobacterias presentes, es recomen!able e ect$ar $n pre1enri*$ecimiento selecti"o antes !e s$ c$lti"o en placas !e a'ar selecti"o, sien!o !e elecci)n el me!io !e enri*$ecimiento Hr$cella semis)li!o con el a're'a!o !e antibi)ticos& En to!os estos me!ios tambi(n p$e!en incl$irse pe*$e%os tro.os !e )r'anos& En #embras el !ia'n)stico p$e!e tambi(n ser reali.a!o por inm$no l$orescencia !irecta a partir !e c$lti"os pre"iamente enri*$eci!os en cal!o Hr$cella& El aislamiento !e las especies !e inter(s "eterinario se p$e!e e ect$ar con acili!a! $tili.an!o

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me!ios !e c$lti"o selecti"os, atm)s eras microaero /licas y $na temperat$ra !e inc$baci)n a!ec$a!a& El me!io ;TirroI ori'inal 8sin a're'a!o !e ce alosporinas9 es el m-s recomen!able para aislar C. fetus !e material pro"eniente !el tracto 'enital o etos7 a'ar base san're a!iciona!a con ? al , E !e san're e*$ina lisa!a, "ancomicina 8+> A'Rml9, s$l ato !e polimi4ina H 8B,? OIRml9 y lactato !e trimetoprima 8? A'Rml9& La san're lisa!a se prepara calent-n!ola a ?GJC, en ba%o mar/a con a'itaci)n, !$rante F?1?> min$tos& Este me!io tiene la "enta:a !e permitir el aislamiento sim$lt-neo !e bacterias !e los '(neros Campylobacter y Brucella& 3ara la b6s*$e!a !e !istintas especies !el =(nero Campylobacter 8C. fetus, C. hyointestinales, C. jejuni y C. coli9 en la materia ecal !e los bo"inos es recomen!able el $so me!ios m$c#o m-s in#ibi!ores, como el me!io 3reston *$e tiene ri ampicina, a!em-s !e otros antibi)ticos, y a!em-s se p$e!e tornar m-s selecti"o me!iante el a're'a!o !e antimic)ticos como la nistatina& Esta preca$ci)n !ebe tomarse !ebi!o a la ab$n!ancia !e Bacillus spp& y #on'os en la lora intestinal !e los r$miantes& Cabe se%alar *$e la a!ici)n !e ce alosporinas a estos me!ios !e c$lti"o permite 6nicamente el aislamiento !e campylobacterias termo /licas 8C. jejuni, C. coli o C. lari9, por lo c$al s$ $so no es recomen!able para est$!ios en los *$e se b$scan a!em-s otras especies !e inter(s "eterinario& Las atm)s eras microaero /licas m-s a!ec$a!as son las *$e contienen entre $n D a $n G E !e o4/'eno, $n +>E !e an#/!ri!o carb)nico y el resto nitr)'eno o #i!r)'eno& Es importante !estacar *$e $n DE !e o4/'eno es i!eal para C.hyointestinalis, C.sputorum, C.mucosalis y C.lari mientras *$e $n GE es a!ec$a!o para C.jejuni, C.coli y C.fetus& On proce!imiento m$y a!ec$a!o para to!as las especies es pro"eer primero $n DE !e o4/'eno !$rante el primer !/a !e inc$baci)n y l$e'o $n GE en los !/as restantes& ;)lo !os especies, C.mucosalis y C.concisus, son !epen!ientes !el #i!r)'eno< el resto p$e!e aislarse me!iante atm)s eras ricas en nitr)'eno& La orma !e preparaci)n !e las atm)s eras p$e!e ser e ect$a!a me!iante me.cla !e 'ases o el $so !e sobres 'enera!ores comerciales& 2inalmente !ebe consi!erarse la temperat$ra !e inc$baci)n7 to!as las especies !esarrollan bien a D,JC, sien!o (sta la temperat$ra recomen!able para el aislamiento& El $so !e temperat$ras !e FBJC s)lo permite el crecimiento !e campylobacterias termo /licas< si lo *$e se preten!e es 6nicamente s$ aislamiento entonces !ic#a temperat$ra es recomen!able por*$e se acelera el proceso a s)lo +@ #oras !e inc$baci)n& En el resto !e los est$!ios las placas !eben e4aminarse al D ro& y ?to& !/a !e inc$baci)n a D,JC& Ona "e. inc$ba!as las placas el aislamiento se lo'ra me!iante la obser"aci)n macrosc)pica !e colonias caracter/sticas y microsc)pica con tinci)n !e $csina enica!a !il$i!a +R+> en a'$a !estila!a o !irecta por contraste !e ase, clasi ican!o a las mismas en D 'r$pos *$e compren!en las especies m-s com$nes7 +9 =r$po jejuni!C.coli7 colonias *$e !i $n!en y tienen brillo met-lico, c(l$las bacterianas pe*$e%as y inas con pe*$e%a amplit$! !e on!a y trans ormaci)n cocoi!e r-pi!a B9 =r$po fetus!hyointestinalis7 crecimiento *$e !i $n!e poco o na!a y !e aspecto mate, c(l$las 'ran!es con 'ran amplit$! !e on!a y trans ormaci)n cocoi!e ne'ati"a< y D9 =r$po sputorum7 colonias *$e no !i $n!en y se pe'an al a'ar, c(l$las con orma !e coma cortas y trans ormaci)n cocoi!e "ariable& La trans ormaci)n cocoi!e consiste en !e:ar e4p$estas al aire las placas !e 3etri con los c$lti"os !$rante G !/as para l$e'o e4aminar los rotis con $csina enica!a& Las pr$ebas m-s com$nes para biotipi icar a estas bacterias son la resistencia a !iscos !e -ci!o nali!/4ico 8NAL9 y ce alotina 8CE29 !e D> A', pro!$cci)n !e #ip$rato !e so!io y -ci!o s$l #/!rico 8;HB9 en me!ios Sli'ler o triple a.6car1#ierro 8T;I9 y me!io #ierro1bis$l ito1pir$"ato 82H39& C. jejuni y C.coli son sensibles al NAL y resistentes a la CE2, C.hyointestinalis y C.fetus son resistentes al NAL y sensibles a la CE2 y C.sputorum es sensible al NAL y a la CE2& C.jejuni es la 6nica especie #ip$rato positi"a y por esta propie!a! se !i erencia !e C.coli& La pro!$cci)n !e ;HB permite !i erenciar al resto !e las especies7 C.sputorum lo pro!$ce en T;I y 2H3, C.hyointestinalis s)lo en T;I y C.fetus es ne'ati"o para ambas pr$ebas& A s$ "e. p$e!en separarse las s$bespecies !e C.fetus me!iante la pr$eba !e pro!$cci)n !e ;HB en me!io sensible con ciste/na y tiras !e s$bacetato !e plomo paras captar la pro!$cci)n !el -ci!o y la pr$eba !e tolerancia y

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re!$cci)n !el selenito !e so!io& La s$bespecie fetus es la 6nica *$e crece con selenito !e so!io y siempre pro!$ce ;HB en la pr$eba sensible& La s$bespecie venerealis n$nca crece con selenito !e so!io y "ar/a la pro!$cci)n !e ;HB en el me!io sensible& 0istintos porcenta:es !e 'licina 8!el >,GE al +,ME9 se #an $sa!o para s$b!i"i!ir a ambas s$bespecies en biotipos& Ona "e. clasi ica!as las cepas p$e!en ser '$ar!a!as in!e ini!amente con'ela!as a 1,>JC o en nitr)'eno l/*$i!o 81+MGJC9& 3ara ello se coloca $na ansa!a !e c$lti"o sin !il$ir en c$al*$ier tipo !e cal!o n$triti"o contenien!o +,E 8pR"9 !e 'licerina tin!ali.a!a y ?E !e s$ero e*$ino est(ril !escomplementa!o a ?GJC D> min$tos& 0ic#o me!io se en"asa en "iales pl-sticos a ra.)n !e >,B a >,? ml& 3ara re"i"ir la cepa se toma con $na ansa el plastr)n !e bacterias y, !e:an!o el e4ceso !e cal!o en el "ial se proce!e a sembrar el material bacteriano estri-n!olo !irectamente en la placa& 0es!e el p$nto !e "ista !el !ia'n)stico bacteriol)'ico !ebe tenerse en c$enta *$e en el tracto 'enital !e los bo"inos #abitan tambi(n otras bacterias !el '(nero Campylobacter *$e, en 'eneral, no pro!$cen en erme!a!es repro!$cti"as& Entre ellas la m-s rec$ente es el C.sputorum bio"ar bubulus 8catalasa ne'ati"o9& Otras especies *$e p$e!en ocasionalmente aislarse !el tracto 'enital son7 C.sputorum bio"ar& fecalis, C.jejuni, C.coli, C.hyointestinalis y "rcobacter #e$!Campylobacter% cryaerophylus 8to!os catalasa positi"os9& Esta 6ltima especie se !enomina as/ por s$ capaci!a! !e crecer aer)bicamente y a s)lo D>JC, anteriormente $e llama!a 5campylobacteria aerotolerante5, y #a si!o tambi(n aisla!a !e etos& En el tracto !i'esti"o !e los animales "arias especies !e Campylobacter #an si!o aisla!as sim$lt-neamente& En los bo"inos son m-s rec$entes en or!en !ecreciente C. jejuni, C.hyointestinalis, C.coli y C. fetus, en los o"inos C. &ejuni, C. coli y C. sputorum bio"ar fecalis, y en los porcinos C. coli, C. jejuni. C hyointestinalis, C. fetus y C. mucosalis& En las a"es !e corral pre!omina C. jejuni y en las marinas C. lari& En otras especies animales *$e incl$yen a perros, 'atos y roe!ores no se #an #ec#o est$!ios completos !e lora bacteriana sino est$!ios !iri'i!os a la b6s*$e!a selecti"a !e C. jejuni, especie !escripta en to!os & =.TRATAMIENTO 0a!o *$e el c$a!ro !iarreico es a$tolimita!o es innecesario el $so !e antimicrobianos para s$ tratamiento< en caso !e e ect$arse el mismo la !ro'a !e elecci)n es la eritromicina& En los toros !e caba%a !e m$c#o "alor econ)mico se p$e!en intentar tratamientos sist(micos y locales con antibi)ticos y *$imioter-picos 8estreptomicina, o4itetraciclina, !imetri!a.ole, etc9 y asociarlos con inm$ni.aciones c$rati"as& 1>.PROFILA?IS Los m(to!os !e control en los animales son similares a los *$e se $tili.an para el control !e las salmonelosis& 3$e!e re!$cirse el 'ra!o !e contaminaci)n me!iante la inoc$laci)n !e pollitos HH reci(n eclosiona!os con microor'anismos normales pro"eniente !e pollos libres !e pat)'enos espec/ icos, siempre *$e esta operaci)n se realice en la misma planta !e inc$baci)n& ;in embar'o estos m(to!os no son s$ icientes y act$almente se proponen m(to!os !e control combina!os *$e compren!en me:orar las t(cnicas !e la"a!o !e las carcasas y la aplicaci)n !e !esin ectantes *$/micos e irra!iaci)n 'amma, to!as me!i!as ten!ientes a re!$cir el 'ra!o !e contaminaci)n !e las carnes& El a!ec$a!o en"asamiento en con!iciones est(riles y la ca!ena !e r/o en to!o el proceso !e comerciali.aci)n !e los pro!$ctos alimenticios son cla"es para !ismin$ir la inci!encia !e estos a'entes& El 6nico mo!o !e controlar a la campilobacteriosis 'enital bo"ina en los ro!eos !e cr/a e4tensi"a !e n$estro pa/s es el empleo !e bacterinas con alta capaci!a! inm$ni.ante, especialmente en "acas y "a*$illonas, y el estricto control !e los toros para la eliminaci)n !el ro!eo !e to!os los animales in ecta!os& Los toros tambi(n p$e!en "ac$narse pero siempre !ebe constatarse la c$raci)n !e los

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DE

MICROBIOLOGA VETERINARIA

mismos me!iante e4-menes !e laboratorio seria!os para e"itar la intro!$cci)n !e animales in ecta!os en el ro!eo& Como m(to!o !e !ia'n)stico e4tensi"o en n$estro pa/s se $tili.a la t(cnica !e inm$no l$orescencia !irecta para la !etecci)n !e C.fetus en la"a:es prep$ciales& Es importante recomen!ar la eliminaci)n !e los toros in ecta!os si s$ "alor econ)mico no es m$y alto, !a!o *$e la c$raci)n m$c#as "eces no p$e!e e ect$arse y los m(to!os !ia'n)sticos no son in alibles& Es in!$!able *$e esta en erme!a! po!r- ser controla!a me!iante la elaboraci)n !e inm$n)'enos *$e conten'an cepas re'ionales !e !emostra!a capaci!a! coloni.ante en "a*$illonas "/r'enes, con m/nimos s$bc$lti"os y con a!ec$a!o !esarrollo !e prote/nas caps$lares& Ona bacterina con esas caracter/sticas tiene alto po!er inm$ni.ante y no s)lo pre"iene la en erme!a! sino *$e tambi(n p$e!e eliminar la in ecci)n !e los animales en ermos& 3ara pre"enir a!ec$a!amente la transmisi)n "en(rea !e esta en erme!a! to!os los animales !el ro!eo !eben ser "ac$na!os con !os !osis s$bc$t-neas !e F> m' !e peso seco bacteriano, separa!as entre s/ por F? !/as !e inter"alo, tenien!o la preca$ci)n !e *$e la 6ltima !osis sea aplica!a +? !/as antes !el ser"icio& 3ara la pre"enci)n !e los abortos espor-!icos en las ma:a!as !e o"e:as es aconse:able el $so !e bacterinas m$lti"alentes oleosas contra C.jejuni y C fetus s$bsp& fetus& Es in!ispensable *$e !ic#as "ac$nas sean prepara!as con los serotipos pre"alentes en las -reas 'eo'r- icas a !on!e est-n !estina!as& BIBLIOGRAFIA HALLAHENE N&C&, TERZOLO H&R&, E"al$aci)n !e antimicrobianos y atm)s eras para el aislamiento !e Campylobacter fetus s$bspp& !el tracto 'enital bo"ino& 'ev. "r . (icrobiol. 247 ++D1+B?, +MMB& HOTZLER U&3&, Campylobacter in ection in man an! animals& CRC 3ress, Inc& Hoca Raton, 2lori!a, O;A& pp& BFG, +M@F& CAM3ERO C&M&, CI3OLLA A&L&, O0RIOZOLA E&, ME0INA 0&, MOR;ELLA C&=&, ;AOHI0ET M&, Tratamientos sist(micos en toros con in ecci)n 'enital a Campylobacter fetus s$bsp& fetus& Vet."r . 1>7 D>D1D>M, +MMD& CATENA, M, Campilobacteriosis 'enital bo"ina7 inm$nopato'enia !e la mortali!a! embrionaria& Tesis 0octoral para obtener el t/t$lo !e 0r en Ciencia Animal !e la ONC3HA +1+DF, B>>B CATENA, M&, CALLEUA;, ;&, ;OTO, 3&, AHA, M&, ECHEVARRA, H&, MONTEAVARO, C&, MAZZOLLI, A& E ectos !e la in ecci)n e4perimental con Campylobacter fetus venerealis sobre la pre%e. temprana en "a*$illonas& )n Vet, 1, D,1FF 8B>>D9 COO3ER, 0&M&, =EHHART, C&U& Comparati"e aspects o proli erati"e enteritis& UAVMA7 2127 +FFG1+F?+, +MM@& ETOH N&, 0EWHIR;T 2&E&, 3A;TER H&U&, NAMAMOTO A&, NOHOICHI =&, Campylobacter showae sp& no"&, isolate! rom t#e #$man oral ca"ity& )nt. &our. of Syst. Bacteriol. 437 GD+1GDM, +MMD& 2ERNAN0EZ, & H& 2ERNAN0EZ , M T#ermotolerant Campylobacter species associate! Iit# #$man !iarr#ea Latin "merica Ciencia Cult&44, + DMXFD, +MMB& =ARCA M&M&, EA=LE;OME M&0&, RI=HN C&, Campylobacters important in "eterinary me!icine& Vet. Bulletin .37 ,MD1@+@, +M@D& LAW;ON =&H&S&, MCORI;T ;&, T#e eni'ma o proli erati"e enteropat#ies7 a re"ieI& &our.of Comp.*athol.1><7 F+1FG, +MMD& 3ENNER U&L&, T#e 'en$s Campylobacter7 a !eca!e o pro'ress& Clin. (icrobiol. 'ev. 17 +?,1+,B, +M@@& ;HANE ;&M&, T#e si'ni icance o Campylobacter jejuni in ection in po$ltry7 a re"ieI& "vian *athol. 217 +@M1B+D, +MMB TERZOLO H&R&, In ecciones ent(ricas por Campylobacter spp& en r$miantes& Memoria !e la 3rimera Re$ni)n !e la Asociaci)n Ar'entina !e Veterinarios !e Laboratorios !e 0ia'n)stico, pp& B+1B,, +M@G& TERZOLO H&R&, 0escripci)n !e $n m(to!o para la obtenci)n !e atm)s eras microaero /licas& "cintacnia 67 ?>1?B, +M@,& TERZOLO H&R&, I!enti ication o Campylobacters rom bo"ine an! o"ine aeces& 'ev. "r . (icrobiol 2>7 ?D1G@, +M@@&

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