Cintica de las reacciones biolgicas

Tasa de utilizacin de substrato (coeficientes de produccin) El crecimiento celular engloba la conversin metablica de un substrato en sus productos, lo que hace que se libere energa en forma de ATP (ruta catablica), que ser utilizada para la sntesis celular (ruta anablica).
Catabolismo : Substrato Pr oductos + Energa Anabolismo : Substrato + Energa + Nutrientes Masa Celular Resultado Global : Substrato + Nutrientes Masa Celular + Productos

La cantidad de masa celular, o biomasa formada, es proporcional a la cantidad de substrato y de producto. Se puede definir un coeficiente para cada tipo de bacterias, llamado coeficiente de produccin, Y, que puede ser determinado experimentalmente:
Produccin de biomasa : Y X ,S = Produccin de producto : Y P ,S X S , P = S

(2.1)

donde S: Substrato, X: Biomasa y P: Producto. Como ejemplo, el proceso metanognico a partir de actico se puede expresar como el resultado general de la reaccin de respiracin y la sntesis celular, expresado por las siguientes reacciones (Mosey, 1983):
Re spiracin : CH 3 COOH CH 4 + CO 2 Sntesis Celular : CH 3 COOH + 0 ,4 NH 3 0 ,4C 5 H 9 O3 N + 0 ,8 H 2 O General : CH 3 COOH + 0 ,0183 NH 3 0 ,4C 5 H 9 O3 N + 0.954CH 4 + 0.954CO 2 + 0 ,0366 H 2 O

(2.2)

El crecimiento de la poblacin de microorganismos se puede asociar al consumo de substrato mediante el uso del coeficiente de produccin:
dX dS = Y X ,S bX dt dt

(2.3)

donde bX es un trmino que refleja la lisis bacteriana, habindose asociado, tambin, con el concepto de energa de mantenimiento, o energa utilizada no para el crecimiento sino para el mantenimiento de los microorganismos (respiracin). Tasa de crecimiento En condiciones ideales, el crecimiento de las poblaciones bacterianas sigue un crecimiento exponencial en el tiempo. Puesto que el crecimiento de la poblacin bacteriana ocurre por divisin

Al integrar la ecuacin 2.5, considerando y b constantes, se obtiene la funcin de la concentracin de la poblacin bacteriana en el tiempo,
X = X ( t = 0 )e ( b )t .

(2.6)

En la prctica existen limitaciones al crecimiento, dadas por ejemplo, por la limitacin del substrato disponible o por la presencia de txicos. La concentracin de substrato disponible limita la velocidad de crecimiento de las poblaciones bacterianas. La forma de simular esta influencia ha sido objeto de controversia, siendo diferente en funcin de las condiciones y del grupo de microorganismos. En general se acepta que se cumple la cintica de Monod (1950), quin propuso una expresin similar a la ecuacin de Michaelis-Menten de velocidad de reaccin enzimtica:
= m
S , KS + S

(2.7)

donde : tasa de crecimiento especfica; m: tasa mxima de crecimiento especfica; S: concentracin de substrato; KS: constante de saturacin. La dependencia del substrato de la velocidad de crecimiento especfica () es de forma que si la cantidad de substrato es muy grande la tasa especfica se aproxima al valor mximo y si la concentracin del substrato tiende a cero, se aproxima a cero (Figura 1). Otras funciones del substrato se han considerado para simular la cintica de crecimiento de microorganismos anaerobios, tal y como se muestra en la Tabla 1.
max

100%

50%

Ks

0%

Figura 1. Ilustracin de la cintica de crecimiento de Monod.

Tabla 1. Diferentes cinticas de crecimiento de microorganismos usadas en la bibliografa (Pavlostathis y Giraldo-Gmez, 1991) Tipo de cintica Primer orden Grau et al. (1975) Monod (1950) Contois (1959) Chen y Hashimoto (1978) dS dt

kS S0 S ) S S0 ) S KS + S (2.8) (2.9) (2.10) (2.11) (2.12)

K S ) S X Y S0

) S X Y KS + S m S X Y BX + S
)

S X K X + Y S

S BX + S S ) K S 0 + ( 1 K )S

Sobre la base de la cintica de Monod se pueden introducir nuevas modificaciones, por ejemplo para el caso de la existencia de varios substratos limitantes, mediante trminos tipo Monod multiplicativos (Angelidaki et al., 1999). As si se consideran dos substratos limitantes, S1 y S2,
= max
S1 S2 . S1 + K S1 S 2 + K S 2

(2.13)

Tasa especfica de utilizacin de substrato A partir de las expresiones 2.3 y 2.5 se puede definir la tasa especfica de utilizacin de substrato (U), es decir la variacin de substrato en el tiempo por unidad de biomasa:

dX dS 1 dS dS = X bX = Y X ,S bX X = Y X ,S U = = . (2.14) dt dt dt X dt Y

Cinticas de inhibicin La presencia de un compuesto txico para los microorganismos se refleja en una menor tasa de crecimiento de los mismos. No todos los microorganismos se ven afectados de la misma forma por los mismos compuestos. Se dice que hay tres tipos bsicos de inhibicin, en funcin de la reversibilidad y del parmetro cintico al que afecta. A travs de las constantes biocinticas de la ecuacin de Monod (2.7) para la tasa de crecimiento especfico y de utilizacin de substrato, se puede ajustar el modelo para tener en cuenta los factores inhibidores. Lo ms comn en los modelos consultados en la bibliografa es que sea la velocidad de crecimiento especfica la variable afectada, aunque algunas substancias pueden afectar al coeficiente de produccin o a la tasa de lisis (Pavlostathis y Giraldo-Gmez, 1991). En la Tabla 2 se muestran las ecuaciones de los diferentes tipos de inhibicin que afectan a la velocidad de crecimiento especfica.

Tabla 2. Tipos de inhibicin y expresin matemtica de la cintica Parmetro afectado Expresin de la cintica Inhibicin no Tasa mxima de KI S (2.15) * = max competitiva crecimiento Ks + S KI + I Inhibicin Constante de max S (2.16) = Competitiva saturacin I Ks S 1 + + KI Inhibicin Tasa mxima y max (2.17) = Acompetitiva constante de Ks I 1 + + saturacin. S KI En todos los casos, KI es la constante de inhibicin y I la concentracin de compuesto inhibidor.

La expresin de la inhibicin acompetitva se denomina, tambin, cintica de Haldane, y ha sido utilizada para expresar la inhibicin por el propio substrato (S) o por el producto (P) (Andrews y Graef, 1971):
= max
1 ; KS S 1+ + S Ki

= max

1 . KS P + 1+ S KI

(2.18)

Tambin se utiliza la llamada ecuacin de Haldane generalizada ,

= max
S K 1+ s + S Ki
n

(2.19)

dnde n es el orden de inhibicin. Con estos tipos de expresiones, hay un valor de concentracin de substrato para el que la tasa de crecimiento es mxima (Figura 2). Este valor se puede determinar analticamente en funcin de los valores de las constantes de saturacin e inhibicin,
S max = n +1 KS KI n ; n

[ ]max =

max
n 1 K S n +1 1 + 1 + n n n KI

. (2.20)

Relacin tasa especfica de crecimiento/tasa mxima (/max) 1 0,8 0,6 0,4 0,2

Sin inhibicin

n=0 n=1 n=10 n=2 n=3

6 8 10

0 0 2 4

S/Ks

Figura 2. Efecto de la concentracin de substrato sobre la relacin tasa especfica de crecimiento/tasa mxima, para diferentes valores de n, considerando que la constante de inhibicin es KI=3 KS

Los procesos biolgicos estn afectados por la temperatura. De forma general, al aumentar la

temperatura aumenta la tasa especfica de crecimiento, hasta llegar al ptimo. A partir del ptimo, diferente para cada grupo de microorganismos, la velocidad disminuye. La expresin ms ampliamente utilizada en la modelizacin de los procesos anaerobios es la ecuacin de Arrhenius (Pavlostathis y Giraldo-Gmez, 1991), = k1 exp a1 (T Tref ) k 2 exp a 2 (T Tref ) . (2.21)

El pH influye en la velocidad de crecimiento de los microorganismos anaerobios. Generalmente se considera que afecta a la tasa mxima de crecimiento, mediante expresiones descritas por la funcin de Michaelis normalizada (Angelidaki et al., 1993), pH = F ( pH ) . (2.22)