E J E R C I C I O 1: TAMAO D E M U E S T R A R E Q U E R I D O PARA C O N O C E R SI UNA E N F E R M E D A D E X I S T E O NO E N UNA POBLACION, POR ENCIMA D E UNOS N I V E L E S D E PREVALENCIA DETERMINADOS.

En ocasiones se requiere conocer si una enfermedad especfica est presente en una poblacin. Para poder realizar esto el investigador debe definir cuatro conceptos fundamentales; el primero de ellos es identificar la unidad de muestreo (animal, finca, comarca, etc.), adicionalmente est la determinacin del nivel de confianza que se requiere para el estudio (generalmente se acepta un 95%) y por otra parte se debe predefinir el nivel de prevalencia (frecuencia) por encima del cual el investigador quiere conocer si la enfermedad existe (prevalencia crtica). Finalmente se requiere conocer el tamao de la poblacin bajo estudio (dado en total de unidades de muestreo que conforman la poblacin, ej. 6000 animales 450 fincas). Determinadas estos aspectos se utilizan, bien la frmula de Cannon y Roe (ver texto de Otte, 1991) o tablas prediseadas con esta informacin (incluidas en el anexo). Determinado el tamao muestral se debe seguir un procedimiento adecuado para la seleccin de unidades a muestrear (ver texto de Astudillo), generalmente utilizando muestreo estratificado o por conglomerados, dividiendo el rea a muestrar acorde a municipios o comarcas.

EJERCICIO PRACTICO EN GRUPOS. Se requiere realizar un estudio para evaluar s en la regin de Ro San Juan en Nicaragua, existe la infeccin por el virus del Clera Porcino (VCP). Con anterioridad se levant un censo en la regin y se determin existan 3000 porcinos aglutinados en 1550 explotaciones familiares de traspatio, conteniendo entre 1 y 7 animales con im promedio de dos animales por finca. El modo de determinar la infeccin de los animales ser mediante una prueba de inmunofluorescencia, cualquier animal reaccionante en la prueba ser considerado como infectado con VCP. A continuacin se detalla la poblacin por comarca:

Municipio - Comarca San Carlos El Castillo San Miguelito Morrito La Azucena Los Chiles San Juan del Norte Morrillo

Nmero de fincas 226 207 204 246 197 185 107 178

Nmero de animales 500 450 380 430 370 340 150 380

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Contando al animal mdividuai como unidad de muestreo, determine el tamao de muestra para conocer con un 95% de confianza, si el VCP existe a niveles superiores de la prevalencia crtica del 0.5%. Con esta informacin usted decide realizar im muestreo sistemtico por conglomerados seleccionando al azar ncas (numeradas consecutivamente de 1-1550) del listado confeccionado en el censo. En cada predio se muestrearn todos los animales presentes. Intente crear una tabla hipottica con los datos por comarca y ruta. Repita el ejercicio anterior asumiendo una prevalencia crtica del 1% y un nivel de confianza del 99%. Asuma que en cada comarca hay 8 rutas posibles con similar nmero de fincas por ruta. Utilice un muestreo por conglomerados, donde en cada comarca selecciona al azar el nmero de rutas definidas por la fi^ccin de muestreo para esa comarca y en cada ruta muestrea el total de animales en las fmcas presentes. Discutan que posibles diferencias e implicaciones puede tener esta diferentes estrategia de muestreo. Repita de nuevo el ejercicio, pero utilizando en esta ocasin a la finca como unidad bsica de muestreo. Del listado hipottico de 1550 fincas seleccione (ordenadas de 1-1550) seleccione las fincas a muestrear utilizando un esquema aleatorio sistemtico. Indique qu diferencias en asumpciones bsicas tiene esta estrategia.

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E J E R C I C I O 2: TAMAO D E M U E S T R A R E Q U E R I D O PARA D E T E R M I N A R L A F R E C U E N C U D E UN E V E N T O (PREVALENCIA D E E N F E R M E D A D E S ) E N ESTUDIOS POBLACIONALES.

La determmacin del tamao de muestra requerido para conocer la prevalencia de una enfermedad en una poblacin, parte del concepto del modelo binomial, donde cada individuo slo tiene dos posibilidades de respuesta: o es positivo, o por el contrario es negativo al factor estudiado; as el investigador determina la frecuencia (prevalencia) de este evento en la poblacin objeto de estudio. Para poder realizar el clculo del tamao de muestra, el investigador debe definir previamente: a) b) c) d) e) f) La poblacin objeto de estudio y su tamao (si su tamao es muy grande, por ej. superior a 10.000, se asume como infinito). La unidad bsica de muestreo (fmcas o animales). Si existe estratificacin de la muestra. El nivel anticipado de reactores (prevalencia crtica). El grado deseado de precisin del estimativo (expresado, bien como el error estndar o la precisin absoluta o porcentual del estimativo). El nivel de confianza deseado (expresado como una constante Z, la cual corresponde a 1.96 para 95% de confianza, 2.58 para 99% de confianza).

Una vez el investigador ha definido estos aspectos, entonces aplica la frmula recomendada para poblaciones grandes (ver texto de Otte, 1991) o utiliza tablas especficamente diseadas para ello (anexo). Si la poblacin es pequea o si la muestra constituye ms del 10% de la poblacin, entonces se utiliza la siguiente frmula ms exacta: n' = PXQ EE^ + (PxQ/N) donde: N es el tamao total de la poblacin. P = prevalencia crtica Q = 100 - P EE = Error estndar

Determinado el tamao de la muestra requerido se procede a establecer el procedimiento de muestreo para asegurar la aleatoriedad de la muestra (ver texto de Astudillo).

EJERCICIO PRACTICO EN GRUPOS. Se pretende realizar un estudio sero-epidemiolgico en la regin de Muymuy-Matiguas, para determinar la prevalencia de la infeccin por los virus de Leucosis Bovina (BLV), Rinotraqueitis Infecciosa Bovina (IBR) y Diarrea Viral Bovina (VDVB) en bovinos de la zona. La poblacin bovina, acorde a la encuesta del proyecto piloto corresponde a 17.640 animales agrupados en 252 fincas. La regin se ha dividido en seis rutas de seguimiento con el siguiente nmero defincaspor ruta: Rl=40 fincas, R2=32 fincas, R3=45 fincas, R4=60 fincas, R5=45 fincas y R6-30 fincas. El nmero de animales por finca es variable pero su promedio es de 70 cabezas por finca.

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Determine el tamao de muestra requerido para conocer la prevalencia de las citadas enfermedades en la regin (asumiendo que las tres poseen la misma frecuencia); usted define una prevalencia critica del 20%, un nivel de confianza del 95% y un error estndar de 1. Organice el esquema de muestreo en la regin, utilizando un muestreo en dos niveles, siendo este aleatorio simple sobre las fincas (seleccionadas a partir de un listado consecutivo de 1-252) y a partir de la fraccin muestral, estratificado por edades (adultos; > 2 aos y jvenes: < 2 aos) para los animales de cada explotacin, asumiendo que en promedio esta se compone de 60% adultos y 40% jvenes. Calcule de nuevo el tamao de muestra requerido, asumiendo una prevalencia crtica del 5% asumiendo una precisin absoluta del estimativo de 2 puntos (2%) y un nivel de confianza del 99% (Z = 2.58). Determinado el tamao de la muestra organice un esquema de muestreo multivariante, donde el primer nivel lo constituyen las rutas y el segundo lasfincas,constituyndose este nivel en el conglomerado a muestrear. Con base en los objetivos del estudio, usted define arbitrariamente que en cada finca seleccionar para muestreo 5 animales mayores de 7 aos de edad (1 macho, 4 hembras), 10 entre 2-7 aos (1 macho, 9 hembras) y 5 temeros menores de 2 aos de edad (2 machos, 3 hembras). Escoja lasfincasa seleccionar en cada ruta basado en un listado consecutivo de fincas (1-252), corrigiendo la fraccin muestral de acuerdo al nmero de fincas existente por ruta. Discuta las ventajas y desventajas de los diferentes mtodos de seleccin de la muestra. Ahora utilizando el mismo ejemplo, determine el tamao de muestra requerido para conocer la prevalencia de las enfermedades citadas, asumiendo una prevalencia critica del 10% , un nivel de confianza del 95% y una precisin del estimativo correspondiente a im 5% de la fi*ecucncia obtenida. Una vez definido el tamao de la muestra, organice un esquema de muestreo de tres niveles: cuadrculas, finca y animal; basado en el mapa 1:50.000 del proyecto piloto y en las fincas contenidas en cada cuadricula. Cuente las cuadrculas de 1 km^ presentes en el mapa y numrelas consecutivamente; luego utilizando una tabla de nmeros al azar, seleccione mediante un esquema totalmente aleatorio cada cuadrcula a ser muestreada. En toda finca presente en ese kilmetro cuadrado, se debe muestrear el 50% de los animales presentes en la finca, buscando representar las edades de animales presentes en la finca (se busca hacer pares de animales similares y uno se muestrea y el potro no). Contine con el esquema seleccionando cuadrculas mediante nmeros aleatorios, hasta completar el total de animales requerido en la muestra. Discuta que posibles implicaciones o ventajas podra tener este estilo de muestreo.

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