La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y bioqumicas.

El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiacin de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas. La espectrofotometra ultravioleta-visible utiliza haces de radiacin del espectro electromagntico, en el rango UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 700 nm , por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce tambin como rango de uv cercano , la espectrofotometra visible solamente usa el rango del campo electromagntico de la luz visible , de 400 a 700 nm. Adems, no est de ms mencionar el hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la concentracin como de la distancia recorrida.

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o Aprender a ajustar matemticamente curcas de calibracin con dispersin, como consecuencias de errores. o Determinar el factor de calibracin para clculo de concentraciones.

Espectrofotmetro Soluciones a ensayar: Sulfato de cobre, direcrometro de potasio, rojo de mitio. Tubos de ensayo. Pipetas de 1 a 10 ml.

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la excitacin de los electrones de valencia puede provocada por un choque electrnico, por absorcin de radiacin de la frecuencia a propiedad o por temperaturas elevadas. Es evidente que la longitud de onda de la radiacin al inversamente proporcional a la energa de excitacin. Los grupos fcilmente activados absorben a longitud de onda mayor. Las configuraciones moleculares que poseen la propiedad de absorber radiacin son coloreadas en la luz visible o apareceran coloreadas en la luz ultravioleta si el ojo humano fuera visible a esta radiacin.

Cuando las especies absorbentes participan de una reaccin de equilibrio, la ley de Beer puede sufrir desviaciones qumicas, como por ejemplo, el anlisis de un cido dbil, HA. Para construir la curva de calibracin de la ley de Beer, se preparan varios patrones con concentraciones totales desconocidas de HA y se mide l absorbancia de cada una de ellas mismas en la misma longitud de onda.

La segunda contribucin a las desviaciones instrumentales de la ley de Beer es la radiacin difusa, debida a las s imperfecciones del selector de longitud de onda, que permiten a las luces extraas se cuelen en el instrumento.

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1.- Qu Consideraciones debern tomarse en cuenta para obtener una buena curva de calibracin? - La curva estndar inicial debe incluir un blanco reactivo y, por los menos, ocho estndares que cubran toda la escala de concentraciones que se usaran en los anlisis rutinarios del laboratorio y que permite medir el mtodo analtico.

2.- Cul de los mtodos: factor de calibracin o curva de calibracin es ms exacta?

Factor de calibracin

3.- Existe otro mtodo de ajuste de curva?

Tambin se pueden usar en ciertos casos otros tipos de curvas, como secciones cnicas (arcos circulares, elpticos, parablicos e hiperblicos) o funciones trigonomtricas (como el seno y el coseno). Por ejemplo, las trayectorias de objetos bajo la influencia de la gravedad siguen una curva parablica, si se ignora la resistencia del aire. Por tanto, ajustar los puntos de una trayectoria a una curva parablica tendra sentido. Las mareas siguen patrones sinusoides, por tanto se podran ajustar datos provenientes de mareas a una onda sinusoidal; o la suma de dos sinusoides de periodo diferente, si se considera el efecto conjunto de la Luna y el Sol.

4.- Qu desventaja tiene el mtodo de los mnimos cuadrados?

Es necesario contar con un importante grupo de datos para obtener resultados confiables. Los resultados de la regresin son sensibles a la forma funcional si no se interpreta correctamente el trmino de error, lo que puede generar conclusiones
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muy variadas, dependiendo de la forma en que se haya organizado inicialmente la regresin.

5.- Aplicaciones de prctica en el campo de su especialidad?

Podemos aplicarlo para fertilizantes, materias vegetales, alimentos tambin para anlisis de suelos para determinar Na, K, Al, Fe y Ca para anlisis de aguas residuales, cementos, productos de petrleo y productos metalrgicos.

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