Introduccin

Las enzimas son un grupo de protenas que se caracteriza por actuar como catalizadores
naturales en los seres vivos. Poseen un alto grado de especificidad y eficiencia, estas
caractersticas tan importantes vienen dadas por un cierto nmero de grupos qumicos
ubicados en una determinada regin del rea total de la protena al cual se le conoce
como sitio activo. El sitio activo cumple dos funciones distintas, unin al sustrato y
catlisis, ambas estrechamente relacionadas al tipo de aminocidos que lo constituyen.
En cuanto a la cintica de las reacciones catalizadas por enzimas, esta se ve afectada por la
concentracin de la enzima y de su sustrato, el pH, la temperatura, los cofactores, los
inhibidores y los activadores de dicha enzima. El anlisis de estas interacciones ah
contribuido a un mejor entendimiento de la catlisis enzimtica, al mecanismo de
especificidad enzimtica y a su regulacin en diversas situaciones fisiolgicas. (1)
Para un mejor entendimiento de la cintica de las enzimas se utilizan modelos
enzimticos como es el caso de la fosfatasa acida.
Las fosfatasas acidas son enzimas que catalizan la reaccin de hidrolisis de monosteres
de fosfato obteniendo como resultado un alcohol y un fosfato como se muestra en la
figura 1. (2)
Estas enzimas presentan una amplia
especificidad y estn presentes en muchos
organismos como en el ser humano donde
se utilizan por ejemplo para analizar casos
mdicos o en plantas, como el caso de la
fosfatasa acida de germen de trigo que es
la que se utilizara en este prctico.
La actividad de esta enzima se mide a
travs de mtodos colorimtricos
utlizando distintos sustratos como el p-
nitrofenilfosfato o el monofosfato de timolftaleina. La cantidad de p-nitrofenol o
timolftaleina liberada por la hidrolisis se estima mediante anlisis espectrofotomtrico en
medio alcalino gracias a la actividad cromfora de los productos obtenidos. (3)
En este laboratorio se analizaran las variables cinticas de la fosfatasa acida de germen de
trigo utilizando como sustrato el p-nitrofenolfosfato a travs de anlisis colorimtrico.

Fig. 1 Revelado de la
fosfatasa acida segn
mtodo de Gomori.
(Ricardo Martinez P.
Raquel R. (2008).
Fundamentos
tericos y prcticos
de histoqumica.
(Espaa) Ed.CSIC.
Pag (596)













Bibliografia

1. Jos Mara Teijon R. Bioqumica estructural : conceptos y test. Ed. Teibar. Pag. (267-
270).
2. Ricardo Martnez P. Raquel R. (2008). Fundamentos tericos y prcticos de
histoqumica. (Espaa). Ed.CSIC. Pag. (596).
3. Lippincott Williams y Wilkins. (2003). Remington Farmacia. (Filadelfia, E.E.U.U.).
(20va Edicin). Ed. Medica Panamericana. Pag. (662).