UROCULTIVO

I. OBJETIVOS
Realizar un urocultivo para la determinacin de los dierentes
tipos de microor!anismos presentes en la muestra de orina en el
la"oratorio de micro"iolo!#a !estin $%&'
Eectuar las dierentes prue"as (tincin de )ram * o"servacin
microscpica en resco de sedimento de orina+ para el
dia!nostico de las posi"les enermedades o inecciones
urinarias.
Realizar prue"as "io,u#micas de las posi"les inecciones se!-n
el resultado o"tenido del urocultivo.
II. ./RCO TEORICO
Introduccin
Varios miem"ros de las entero"acterias pueden aislarse de la orina
en el curso de inecciones del aparato urinario o uro!enital0 como
tam"i1n en otros tipos de aecciones.
La orina vesical normalmente no contiene microor!anismos. Sin
em"ar!o0 los primeros &% a &2 ml. de orina emitidos por personas
normales de cual,uier edad o se3o0 siempre presentan "acterias0
las ,ue proceden de la lora corriente de la uretra anterior0
prepucio0 re!in vulvova!inal o de contaminacin ecal. La lora
de estas localizaciones es variada * est4 constituida por
estailococos coa!ulasa5positivo * ne!ativos0 estreptococos
diversos0 "acilos diteromoros0 entero"acterias0 lacto"acilos0
micoplasmas0 "acterias anaero"ias0 levaduras * muc6os
microor!anismos. En la presencia de esta lora inlu*en
localizacin anatmica0 se3o0 edad0 64"itos de 6i!iene * actores
patol!icos propios del 6u1sped.
En la etiolo!#a de las inecciones urinarias predominan los
"acilos !ramne!ativos. Los procesos a!udos * crnicos son
provocados por E. coli * por especies de los !1neros Entero"acter0
7roteus0 Citro"acter0 7seudomonas0 Serratia0 etc. 8e estos
a!entes0 E. coli se a#sla en 9%: de los casos. 7s.aeru!inosa *
S.marcescens se identiican en pacientes 6ospitalizados0 mu*
de"ilitados o sometidos a instrumentacin repetida. Con "astante
menor recuencia desempe;a un papel causal Streptococcus aecalis
(enterococo+ * e3cepcionalmente los estailococos.
El e3amen micro"iol!ico de una muestra de orina se denomina
Urocultivo. <ste se 6a de 6acer desde un punto cuantitativo *
cualitativo. (5+ =le"siella pneumoniae
8einicin de urocultivo
Es el procedimiento de la"oratorio ,ue se realiza con m4s
recuencia para el dia!nstico micro"iol!ico de ineccin del
tracto urinario> la ineccin del tracto urinario se deine como
la entrada * multiplicacin de microor!anismos en uretra0 ve?i!a0
ur1teres o ri;ones. se realiza mediante la siem"ra de una pe,ue;a
cantidad de orina 6omo!eneizada0 lo ,ue permite la cuantiicacin
de las eventuales "acterias presentes. Las "acterias se
conta"ilizan utilizando el criterio de @UACBmlC por,ue de acuerdo
a esta t1cnica se considera ,ue cada "acteria en la muestra
diluida dar4 ori!en a una colonia. El conteo de las mismas se
eect-a lue!o de un per#odo de incu"acin de $D 6oras a 'EF C0
para permitir la multiplicacin "acteriana.
Aundamento
El urocultivo se "asa en la identiicacin del n-mero * de los
tipos de "acterias presentes en la orina. Es necesario ,ue el
m1todo de reco!ida sea el adecuado si!uiendo unos protocolos de
6i!iene evitando as# posi"les contaminaciones de la muestra.
7ara la identiicacin del n-mero de "acterias0 realizaremos un
recuento "acteriano (G*!icult T7C+ * para la identiicacin de los
tipos de "acterias presentes en la orina * sus patolo!ias0 se
realizara una siem"ra en medios de cultivo dierentes con la
t1cnica de siem"ra com-nmente utilizado en el urocultivo0 se!-n el
tipo de microor!anismo com-nmente encontrado en la muestra.
.edios de cultivo utilizados en un urocultivo
.ueller5GintonH Es un medio de cultivo rico0 dise;ado
especialmente para 6acer ensa*os de sensi"ilidad para determinar
la suscepti"ilidad de los microor!anismos rente a los
antimicro"ianos0 El a!ar .ueller5Ginton se utiliza para la
realizacin del ensa*o de diusin en placa0 en tanto ,ue el
caldo
.aIonIe* a!arH .acConIe* o /!ar .acConIe* es un medio de
cultivo espec#ico para "acterias !ram ne!ativas * cepas ,ue
ermenten la lactosa (como Esc6eric6ia coli0 Entero"acter *
=le"siella+
Cled a!arH El /!ar cistina5lactosa deiciente en electrlitos o
CLE8 (C*steine lactose electrol*te deicient+ es un medio de
cultivo no in6i"itorio usado en el aislamiento * dierenciacin
de or!anismos urinarios. /l ser deiciente en electrlitos0
previene del crecimiento e3a!erado de las especies de 7roteus.
La cistina promueve la ormacin de colonias enanas dependientes
de cistina. Los ermentadores de lactosa producen colonias
amarillas en el a!ar de CLE8> las JO ermantadoras de lactosa
dan colonias azules. Tiene un pG apro3imado de E.'.
E3amen cuantitativo en un urocultivo
.1todo de conteo en placa o recuento de colonias
.1todo del asa cali"rada
E3amen cualitativo en un urocultivo
El estudio cualitativo0 ,ue conduce a la identiicacin del
a!ente0 se realiza mediante la siem"ra de la muestra
6omo!eneizada0 en placas con a!ar5san!re0 a!ar5CLE80 a!ar de
Levine o .acConIe*. Es recomenda"le el medio CLE80 por,ue avorece
el desarrollo de "acterias pat!enas urinarias * permite la
identiicacin de los microor!anismos contaminados.
Reco?o de la muestra
Se utilizar4 un recipiente de muestra desec6a"le. La orina ,ue se
reco!er4 ser4 la primera orina de la ma;ana0 por ser una orina m4s
concentrada.
7ara su reco!ida se lavara cuidadosamente la zona !enital0 con
a!ua * ?a"n * se secara con una !asa est1ril o una toalla limpia.
Ga* ,ue reco!er la porcin de orina ,ue corresponda a la mitad de
la miccin0 desec6ando la porcin inicial * inal de la miccin *
reco!iendo el resto en el rasco est1ril. 7or -ltimo se tapa "ien
el rasco * se proceder4 a su an4lisis.
III. .ETO8OLO)K/
a+ .ateriales * e,uipos
Ca?as petri
/sa de platino
.ec6ero de "unsen
.icroscopio
/utoclave
Gorno
Estua
"+ Reactivos
/!ua destilada
.edios de cultivo (CLE8 * .a=onIe* a!ar+
c+ 7rocedimiento
Lo primero ,ue se de"e 6acer es preparar los medios de cultivo
con c4lculos previos de la cantidad necesitada0 en tu"os de
ensa*o0 tanto para el CLE8 * .a=onIe* a!ar0 de?ar !eliicar los
medios.
Con un asa de platino 6umedecer en la muestra de orina0 *
cultivar
Llevar al 6orno a 'ELC de $D5D9 6oras
En un urocultivo tam"i1n se realiza la tincin de )ram del
sedimento de la muestra
Realizar una o"servacin microscpica en resco del sedimento
Una vez o"tenido la placa cultivada realizar prue"as "io,u#micas
* si es necesario realizar un anti"io!rama
IV. Resultados
/"undantes c1lulas epiteliales
D5M leucocitos por campo
7resencia de Gon!os
Bacterias !ramne!ativas

V. COJCLUSIOJES
/l termino de la practica se lo!ro realizar un urocultivo
determinando asi la presencia de microor!anismos pat!enos en la
muestra de orina realizando tam"i1n una tincin de !ram * la
o"servacin microscpica en resco de sedimento de orina0 donde se
lo!ro o"servar la precensia de a"undante cantidad de c1lulas
epiteliales0 "acterias !ramne!ativas0 6on!os0 * de D5M leucocitos
por campo lle!ando a la conclusin de una posi"le ineccin
urinaria0 todo esto ser4 corro"orado con prue"as "io,uimicas
VI. /JENOS
VII. BIBLIO)R/AK/
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"acterias
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