Microbiologa y Parasitologa Medico Cirujano y Partero 2013B TAXONOMA Familia: Pasteurellaceae Genero: Haemophilus Especie: influenzae BACTERIAS DEL GNERO HAEMOPHILUS Este es un pequeo grupo de bacterias polimorfas gramnegativas que necesitan medios enriquecidos, por lo general contienen sangre o sus derivados para su aislamiento. HAEMOPHILUS INFLUENZAE Se detecta en las mucosas de las vas respiratorias altas en el ser humano. Es una causa importante de meningitis en los nios y puede causar infecciones respiratorias en nios y adultos. MORFOLOGA E IDENTIFICACIN En las muestras de infecciones agudas, los microorganismos son bacilos cocoides cortos (1.5m), que a veces se encuentran en pares o cadenas cortas. En los cultivos, la morfologa depende de la edad y del medio. Microorganismos Tpicos MORFOLOGA E IDENTIFICACIN A las 6 a 8 horas en un medio enriquecido, predominan las formas cocobacilares pequeas. Ms tarde hay bacilos mas largos, bacterias que experimentan lisis y muchas variantes polimorfas. MORFOLOGA E IDENTIFICACIN Los microorganismos en cultivos jvenes (6-18 hrs) en un medio enriquecido tienen una capsula definida. La cpsula es el antgeno que se utiliza para la tipificacin de H. influenzae. CULTIVO En Agar Chocolate se presentan colonias planas de color pardo grisceo con dimetros de 1 a 2 nm despus de 24 horas de incubacin. IsoVitaleX en los medios de cultivo favorece la multiplicacin. IsoVitaleX o Vitox es un concentrado estril de factores esenciales para el crecimiento. CULTIVO H. influenzae no se multiplica en Agar Sangre de Cordero, excepto alrededor de colonias de estafilococos (Fenmeno Satlite) CARACTERSTICAS DEL CRECIMIENTO La identificacin de los microorganismos del gnero Haemophilus depende en parte de demostrar la necesidad de determinados factores de crecimiento denominados Factores de Crecimiento X y V. FACTOR X El factor X acta fisiolgicamente como hemina; el factor V puede ser sustituido por Dinucletido de Nicotinamida y Adenina. Las colonias de estafilococos en agar sangre de carnero producen la liberacin de NAD y generan el fenmeno de crecimiento satlite. CARACTERSTICAS Y NECESIDADES DE CULTIVO DE BACTERIAS DEL GENERO HAEMOPHILUS IMPORTANTES PARA EL SER HUMANO Especie Necesita X V Hemlisis Haemophilus Influenzae (H. Aegyptius) + + - Haemophilus Parainfluenzae - + - Haemophilus Ducreyi + - - Haemophilus Haemolyticus + + + Aggregatibacter Aphrophilus - - - Haemophilus Paraphrophaemolyticus - + + Haemophilus Segnis - + - VARIACIN Adems de la variacin morfolgica, H. influenzae muestra una noble tendencia a perder su cpsula y la especificidad de tipo asociada. Las colonias de variantes no encapsuladas carecen de iridiscencia. TRANSFORMACIN En circunstancias experimentales adecuadas, el DNA extrado de un determinado tipo de H. Influenzae puede transferir la especificidad de tipo a otras clulas (Transformacin). La resistencia a la Ampicilina y al Cloranfenicol es controlada por los genes en plsmidos transmisibles. ESTRUCTURA ANTIGNICA H. influenzae encapsulado contiene Polisacridos Capsulares (PM > 150 000) de uno de seis tipos (a - f). El antgeno capsular de tipo b es un fosfato de polirribosa-ribitol (PRP). H. influenzae se puede tipificar mediante: Aglutinacin en portaobjetos Coagulacin con estafilococos, o Aglutinacin de partculas de ltex recubiertas con anticuerpos de tipo especifico. Tambin se puede llevar a cabo la tipificacin mediante inmunofluorescencia. La mayor parte de los microorganismos de H. influenzae en la flora normal del aparato respiratorio superior no son encapsulados PATOGNESIS H. influenzae no produce endotoxina. El microorganismo no encapsulado es parte de la flora normal respiratoria general en los humanos.
La tasa de portador en el aparato respiratorio superior para el H. influenzae tipo b es del 2 a 4%. La tasa de portador para el H. influenzae no tipificable es del 50 al 80% o mayor. La capsula es antifagocitica en ausencia de anticuerpos anticapsulares especficos. La capsula de Polirribosa- Fosfato del H. influenzae de tipo b es el principal factor de virulencia. El H. influenzae causa: Meningitis Neumona y Empiema Epiglotitis Celulitis Artritis Sptica y en ocasiones otras variantes de infeccin invasiva.
El H. influenzae no tipificable tiende a causar: Bronquitis Crnica Otitis Media Sinusitis y Conjuntivitis La sangre de nios mayores de 3 a 5 aos es bactericida para el H. influenzae.
*Los anticuerpos frente al Fosfato de Polirribosa- Ribitol activan la accin bactericida y opsonizante mediada por complemento in vitro. No obstante no se conoce de forma adecuada cuales son los mecanismos que determinan la adquisicin natural del anticuerpo Anti PRP relacionada con la edad, que ocurre hacia los 3 a 4 aos
*P. Bachiler Luque. 1998. Respuesta inmunitaria y estrategia de inmunizacin frente a Haemophilus influenzae Serotipo B. Biol Pediatr. 38. pp 112- 120. DATOS CLNICOS Entra por Ap. Respiratorio Diseminacin local Afeccin de Senos Paranasales y odo medio Torrente Sanguneo Meningitis Lactantes Laringotraqueitis Obstructiva Inflamacin Epiglotis
Bronquitis Neumona PRUEBAS DE LABORATORIO Las muestras consisten en: Exudado Nasofarngeo Pus Sangre y LCR para frotis y cultos
Muestras IDENTIFICACIN DIRECTA Se dispone de estuches (Kits) comerciales para la deteccin inmunitaria de antgeno de H. influenzae en LCR. Una prueba positiva indica la presencia de concentraciones altas de polisacrido especifico de H. influenzae tipo b. CULTIVO Las muestras se incuban en Agar Chocolate con IsoVitaleX hasta que aparecen las colonias tpicas. Se diferencia de otras bacilos G- semejantes por su requerimiento de Factores X y V y ausencia de hemolisis sobre Agar Sangre. INMUNIDAD Los lactantes menores a 3 meses pueden presentar anticuerpos sricos transmitidos por su madre. Durante este tiempo la infeccin es poco comn, pero despus se pierden los anticuerpos. H. influenzae ha sido la causa mas frecuente de meningitis bacteriana en nios de 5 meses a 5 aos. Alrededor de los 5 aos de edad los nios han adquirido de manera natural anticuerpos antiPRP que promueven la accin bactericida dependiente del complemento y la fagocitosis. TRATAMIENTO La tasa de mortalidad por meningitis sin tratamiento producida por el H. influenzae puede ser de hasta el 90%. Muchas cepas son susceptibles a Ampicilina.
Hasta 25% producen -Lactamasa bajo control de plsmido transmisible, y por tanto son resistentes. Practicamente todas las cepas son susceptibles a las nuevas Cefalosporinas.
Cefotaxima por via I.V da muy buenos resultados
El diagnstico oportuno y la terapeutica antimicrobiana son indispensables para reducir al minimo secuelas neurolgicas y dao intelectual. SECUELAS Entre las complicaciones tardas de la meningitis por H. influenzae la ms importante es el desarrollo de una acumulacin localizada de liquido subdural que requiere drenaje quirrgico. EPIDEMIOLOGA, PREVENCIN Y CONTROL H. influenzae tipo b encapsulado se transmite de persona a persona por va respiratoria. La enfermedad por el serotipo b se puede prevenir con la administracin a nios de Vacuna Conjugada Hemfilus b. Existen 4 vacunas disponibles para su uso: PRP-HbOC (el conjugado es CRM197) PRP-OMP (Complejo membrana de N. meningitidis) PRP-T (Toxoide Tetnico) PRP-D (Toxoide Diftrico)