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Imunofenotipagem por citometria de fluxo

A Imunofenotipagem por Citometria de fluxo uma tcnica que permite identificar e avaliar os antgenos
celulares (protenas da membrana celular e intracelulares envolvidas na comunicao, adeso ou
metabolismo celular) atravs da utilizao de anticorpos monoclonais. Os citmetros de fluxo so capazes
de identificar 4 ou mais antgenos diferentes simultaneamente e gerar informaes detalhadas sobre o
tamanho, complexidade e imunofentipo das clulas analisadas.
Assim, a Imunofenotipagem por Citometria de Fluxo utilizada para os mais variados fins, sendo mais
comum o diagnstico das Doenas Onco-hematolgicas, avaliao de recuperao imunolgica,
quantificao de clulas-tronco CD34 positivas e de clulas-tronco mesenquimais, alm de doenas
hereditrias de plaquetas, doenas reumatolgicas e imunolgicas, etc.
A citometria de fluxo uma boa ferramenta na investigao de Doena Residual Mnima em pacientes
com Leucemia ou Linfoma, pois mais de 500.000 clulas so analisadas a cada combinao de
anticorpos, o que permite identificar populaes muito pequenas de clulas anormais, que podem
representar at 0,001% da amostra.
Para cada caso clnico a ser investigado so utilizados diferentes combinaes de anticorpos. A escolha
deles feita pelo hematologista ou bioqumico responsvel pelos exames e depende da histria clnica
detalhada, da hiptese diagnstica e da anlise morfolgica das clulas presentes na amostra. Os painis
para leucemias agudas, por exemplo, so diferentes quando se investiga Leucemia linfoblstica ou
mieloblstica. O painel para Leucemias agudas diferente do painel das Sndromes linfoproliferativas
crnicas, e assim por diante.
A tabela abaixo mostra os exames realizados pelo laboratrio de Imunofenotipagem por Citometria de
Fluxo do Mantis Diagnsticos Avanados, sua aplicao clnica e o matrial a ser utilizado para anlise.
http://www.mantisdiagnosticos.com.br/imunofenotipagem-por-citometria-de-fluxo/ 18/05/14

Imunofenotipagem: O exame realizado com material da medula ssea (colhido no
mielograma) ou com o sangue perifrico. uma anlise que utiliza soros com
anticorpos especficos para caracterizar melhor as clulas doentes. Nas leucemias, a
imunofenotipagem muito importante para classificao do subgrupo exato de clulas,
permitindo adequar o tratamento aos achados biolgicos.
Imunofenotipagem das neoplasias hematolgicas
A caracterizao imunofenotpica tem sido o mtodo preferencial para a determinao da
linhagem celular e anlise da maturao das clulas nas neoplasias hematolgicas. O
desenvolvimento de ampla gama de anticorpos monoclonais e das potencialidades do
citmetro de fluxo tm impulsionado esta rea nos ltimos 20 anos.
A anlise multiparamtrica atravs da citometria de fluxo um mtodo rpido, objetivo e
quantitativo para:
Determinao de linhagem celular. Alm de determinar a linhagem nos grandes grupos,
mielide, clulas B, T e NK, a caracterizao imunolgica contribui sobremaneira para a
classificao em subgrupos mais especficos como a Leucemia Mielide Aguda (LMA) com
diferenciao mielide mnima (M0 da FAB), LMA sem maturao, leucemia eritroblstica
aguda, leucemia megacarioblstica aguda e leucemias bifenotpicas;
Caracterizao do estadio de maturao das clulas malignas contribuindo na definio
diagnstica como no caso das doenas linfoproliferativas crnicas;
Definio da linhagem celular na crise blstica de sndromes mieloproliferativas crnicas;
No diagnstico diferencial entre linfocitose reacional e proliferao neoplsica de clulas
B, identificao da clonalidade atravs da restrio de cadeia leve de imunoglobulina;
Caracterizao da heterogeneidade e dos aspectos aberrantes das populaes de clulas
malignas, permitindo aplicar estas observaes no monitoramento da terapia e deteco de
doena residual mnima.
A contribuio da imunofenotipagem no diagnstico das leucemias agudas est bem
estabelecida, permitindo a definio correta da linhagem celular em cerca de 98% dos
casos, dado fundamental na definio da abordagem teraputica. Tambm ocupa um
importante papel no diagnstico das doenas linfoproliferativas crnicas e no
monitoramento de doena residual mnima. O grande desenvolvimento do conhecimento
em relao s novas molculas da superfcie da clula com um papel funcional definido,
como o de enzimas de superfcie, molculas de adeso, receptores de citocinas, poder
representar uma nova abordagem permitindo classificao das leucemias em subgrupos
funcionais contribuindo para um conhecimento crescente da biologia destas neoplasias.
http://www.fleury.com.br/medicos/medicina-e-saude/manuais/manual-
hematologia/Pages/imunofenotipagem-das-neoplasias-hematologicas.aspx