TRANSPLANTE EMBRIONARIO 1

Transferencia
Embrionaria
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Introduccin
En el ovario de una novilla de 3 meses existen de
75.000 a 247.000 oocitos primarios

Anualmente podemos obtener una cra por vaca.

Con la Transferencia de Embriones es posible
obtener de 12 a 15 cras por ao de una sola vaca.

A travs de la inseminacin artificial se pueden
obtener miles de cras de un toro.

Con la transferencia de embriones se han llegado
a tener ms de cien cras de una vaca durante su
vida productiva.
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Objetivos
1) Demostrar y evaluar esta biotecnologa a fin de
aprovechar la capacidad reproductiva de las vaca elites.

2) Obtener el mayor nmero de cras por vaca por ao,
y con ello acelerar el proceso de mejoramiento gentico

3) Incrementar la tasa reproductiva de una hembra
excelentes, fecundada con un toro de alta calidad
gentica.
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Antecedentes
Heape 1890. Conejos

Warwick, et. al. 1934. Ovejas

Warwick y Berry. 1949. Cabras

Laez, A., Riera, O., Betteridge, K.
1979.Por fin 1er. becerro bovinos nacido
por T.E. en Venezuela. I.R.A.I.A., U.C.V.
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Proceso de la Transferencia de Embriones
1.- Seleccin de donadoras, sementales y
receptoras.
2.- Superovulacin e inseminacin de las
donadoras.
3.- Sincronizacin estral donadora-receptoras.
4.- Recoleccin y evaluacin embrionaria.
5.- Transferencia a la receptora.
6.- Congelacin, refrigeracin y microciruga
embrionaria

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Seleccin de la donadora
Animal de buena produccin, as como sus hijos
Buenos antecedentes reproductivos
Libre de enfermedades, en especial las
reproductivas
En perfectas condiciones fsicas

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Vaca Elite
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Semental Elite
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Semental Elite
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Seleccin de las receptoras
Animales de cualquier raza o cruce
Jvenes, sanas, con buen desarrollo corporal y
adaptadas al medio
Reproductivamente sanas, buen C.L. y nivel de
progesterona
Buen desarrollo plvico
Perfecto estado nutricional
Dciles y fciles de manejar
Buena produccin de leche, suficiente como para
criar un becerro hasta el destete
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Vacas receptoras
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Superovulacin de las donadoras
La primera superovulacin fue realizada por
Casida et. al., 1943

La superovulacin tiene como principio bsico, el
estmulo intensivo para el desarrollo folicular,
mediante la administracin I.M. o S.C., de una
hormona gonadotrfica aumentando el nivel
endgeno normal.

Las hormonas comnmente usadas son: FSH
PMSG
HCG
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Tcnicas de superovulacin
La administracin hormonal se sucede en el
diestro entre los das 8 y 14 das del ciclo.

Superovulacin con FSH
1er da a.m. y p.m. Folltropin 3 ml
2do da a.m. y p.m. Folltropin 2.5 ml
3to da a.m. y p.m. Folltropin 2.5 ml y
4er da a.m. y p.m. Folltropin 2.0 ml PGF
2


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Tcnicas de superovulacin
Superovulacin con PMSG

Inyectar una sola vez, el da 9 del ciclo,
diestro, 1.666 U.I. va I.M. Equinex
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Ultrasonografa
Folculos ovricos
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Ovarios superovulados
Folculos ovricos
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Evaluacin de la respuesta superovulatoria
Ultrasonografa
de animales 12,0
folculos ( 0.8 cm) en el da del estro 17,20 5,40
Ovulaciones (C.L. en ovario) 9,20 3,80
Tasa de ovulacin % 53,0 %
Total de embriones 3,20 2,50
Tasa de recuperacin de embriones C.L./% 35,0 %
embriones transferidos 2,90 2,50
Tasa de embriones transferibles % 91,40 %
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Sincronizacin de las superovulaciones
Uno de los factores que influye en el nmero de
ovocitos adicionales que son ovulados, es el intervalo
de tiempo que transcurre entre la administracin de
gonadotropina y el momento de la ovulacin

La PGF, sincroniza el celo, induce lutolisis y
controla el intervalo despus de la inyeccin de PMSG

La PGF debe ser administrada 40-48 h. despus de
la PMSG
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Sincronizacin estral donadora- receptora

La supervivencia de los embriones
transferidos a animales receptores dependen
de que su estado de desarrollo est en
exacta correspondencia con el tero de la
hembra donadora

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Sincronizacin estral donadora- receptora
Los requerimientos de sincronizacin para el xito
de la transferencia en las vacas es mayor que en
las ovejas y est no debe variar de ms o menos un
da ( 1)
Se considera que es ms probable obtener mejores
resultados transfiriendo a receptoras con
asincronismo positivo
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Formula: D+cloprostenol 75 mcg (anlogo sinttico de
la prostaglandina F2 alfa), vehculo c.s.p. 1 ml.

PROSTAGLANDINAS F2 ALFA
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Inseminacin de la donadora
Las ovulaciones tienen lugar en momentos diferentes
en un amplio intervalo de tiempo

Es necesario inseminar tres veces consecutivas cada
12 horas

Se I.A. a las 48, 60 y 72 horas despus de la ultima
inyeccin de PGF, con doble dosis de semen
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Inseminacin de la donadora
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Recoleccin embrionaria

Tcnicas Quirrgicas

Tcnicas no Quirrgicas
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Tcnicas Quirrgicas
Sacrificio del animal o histerectoma.

Recuperacin quirrgica.

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Tcnica de recuperacin quirrgica
Incisin de la pared abdominal para abordar los
rganos genitales.

Se incide la pared uterina para el paso de la sonda
de Foley

Se canaliza el oviducto a travs del cual se
suministra 20 ml del medio PBS.

Se recuperan los embriones en cpsulas de Petri y
se analizan en la lupa estereoscpica
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Recoleccin de embriones
Inyeccin de 20 ml PBS
Tcnica de recuperacin quirrgica
Sonda de Foley
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Tcnica de recuperacin quirrgica
Embriones
Solucin PBS
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Ovario superovulado
Folculos ovricos
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Lavado del oviducto
Oviducto
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Tcnicas no quirrgicas
Lavado del tero, con solucin salina adicionada de
suero sanguneo y antibiticos.

Anestesia epidural en la base de la cola.

Se introduce sonda de Foley, por donde se dejan
pasar 20 ml de la solucin. Masaje de los cuernos.

Se filtra la solucin reteniendo solo los embriones.

Recoleccin de los embriones en estado de morula
o blstula.
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Equipo de recoleccin no quirrgico
Filtro
PBS
RECOLECCION NO QUIRURGICA
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Sondas de Foley para recoleccin embrionaria
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Cpsulas de Petri
Platina calentante
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Pipetas de recoleccin de embriones
Recoleccin de embriones con lupa estereoscpica
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Tipos de embriones
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Calidad embrionaria

Una minuciosa evaluacin de la calidad
embrionaria es fundamental para el xito de la
transferencia

La sociedad internacional de transferencia de
embriones los clasifica segn su calidad en 4
grados: Excelentes
Buenos
Regulares
Malos o degenerados

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Clase 1: Calidad excelente. Embrin esfrico, Zona
pellucida intacta, cmulo celular perfectamente
estructurado con clulas del mismo tamao color y textura
Clase 2: Calidad buena. Embrin esfrico o ligeramente
elipsoidal, Zona pellucida intacta, algn blastmero suelto
pero, por lo dems, cmulo celular perfecto.
Clase 3: Calidad regular. Zona pellucida intacta o daada,
blastmeros de diferentes tamaos, cmulo celular con un
30 hasta un 60% de blastmeros intactos, ligero retraso del
desarrollo (estadio de 32 clulas).
Clase 4: Calida mala. Zona pellucida intacta o daada,
blastmeros degenerados y sueltos en nmero
considerable, cmulo celular suelto y con menos del 30%
de blastmeros intactos, desarrollo retardado con estadios
embrionarios de blastmeros grandes ( 32, 16 clulas).

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Estadio de desarrollo
Los resultados de preez son variables cuando se
transfieren morulas, blastocistos y blastocistos
expandidos

La edad embrionaria sera lo determinante del
xito de la transferencia y no el estadio de
desarrollo

Existe una interaccin, estadio de desarrollo con la
calidad del embrin

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Edad embrionaria
La mayora de los embriones bovinos son recolectados y
transferidos con una edad de 6 a 8 das

Se ha determinado que no existe diferencia significativa
en los porcentajes de preez con estas edades

Los embriones de 9 das o ms prcticamente no se
realizan

El porcentaje de preez esta influenciado por diferentes
factores embrionarios
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Transplante embrionario
Transplante quirrgico


Transplante no quirrgico


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Transplante quirrgico
UTERO
INYECTADORA CON EMBRION
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Transplante no quirrgico
Factores relacionados con la transferencia no
quirrgica:

1. Ubicacin del embrin en el tero

2. Experiencia del operador

3. Proteccin del instrumental de transferencia

4. Utilizacin de sedantes, relajantes uterinos y/o
anestesia epidural
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Ubicacin del embrin en el tero y
experiencia del operador
El tiempo de colocacin del embrin se
correlaciona negativamente con el porcentaje de
preez

El embrin debe ser transferido al cuerno
uterino ipsilateral al ovario con cuerpo lteo

El embrin debe ser colocado en el tercio
anterior del cuerno uterino
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Proteccin del instrumental de transferencia y
utilizacin de sedantes, anestesia o reljenles uterinos
La transferencia se efecta en fase luteal, cuando
el tero es ms susceptible a las infecciones

La utilizacin de sedantes y anestesia epidural,
resulta conveniente para que el animal este
tranquilo, pero no resulta en mejoras en el
porcentaje de preez




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Transplante no quirrgico
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PGF PGF
Da 0
Da 11
Da 9
PMSG PGF
Da 11
40-48 h
Da 13-14-15
I.A
Da 7
Rec. y T.E
Preez
Da 0- 11: Sincronizacin = 0
Da 9: Superovulacin
Da 11: Sinc.de las ovulaciones (40-48 h.)
Da 13-14-15: Insem. Artif. (48-60-72 h.)
Da 7: Recoleccin y Transferencia Embrionaria Preez
Cronograma de la Transferencia Embrionaria
Sinc. D-R
D-R
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Resultados normales de esta tcnica
De 4 5 embriones transferibles por
donadora superovulada.
Un 33 % de las donadoras superovuladas no
producen embriones.
De 50 a 60 % de gestacin con embriones
frescos o refrigerados calidad 1 y 2.
De 30 a 35 % de preez con embriones
frescos o refrigerados calidad 3.
De 35 a 40 % de gestacin con embriones
congelados.
Un 50 % de gestacin con embriones
bipartidos.

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Vaca donadora con becerros nacidos por T.E.
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Conclusiones
La calidad embrionaria es el nico factor relacionado
directamente con el embrin que influye en el resultado
de la transferencia.

En la seleccin de receptoras son ms importantes las
condiciones de crianza, el manejo sanitario y el estado
nutricional de las mismas que su raza o categora.

En la seleccin de las receptoras es importante haber
observado el celo y comprobado la presencia del cuerpo
lteo , independientemente de su calidad y del nivel de
progesterona
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Cont.......Conclusiones
El asincronismo donante-receptora no debe superar las
24 horas y se debe relacionar el estadio de desarrollo
embrionario con el da del ciclo de la receptora al
momento de la transferencia.

Es importante la experiencia del operador as como la
utilizacin de anestesia epidural y sedantes
dependiendo del temperamento de la receptora
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Cont.. Conclusiones
La transferencia de embriones, es una
tcnica reproductiva para acelerar el
mejoramiento gentico de los hatos
aprovechando los vientres de animales de
menor calidad para llevar a trmino
gestaciones de becerros con alto potencial
gentico.
Es una tcnica que bien aplicada puede
significar un gran avance en el progreso
gentico de los hatos ganaderos y que
actualmente tiene la ventaja de poder
realizarce completamente a nivel de campo,
sin necesidad de operar a los animales.

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Bibliografa
1) Prez y Prez, Flix. 1985. Concepto y
proceso histrico del transplante de
embriones y Transplante de embriones.
En: Reproduccin Animal Inseminacin
Artificial y Transplante de Embriones.
Ed. Cientfico mdica. Mxico
2) Hafez, E. S. E. 2002. Induccin de
ovulacin, produccin y transplante de
embriones. En: Reproduccin e
inseminacin artificial en animales. Ed.
Interamericana; 7ta edicin.