LEVADURAS DE INTERS

LEVADURAS DE INTERS
MDICO
MDICO
PRUEBAS DE IDENTIFICACIN
PRUEBAS DE IDENTIFICACIN
Levaduras de Importa!"a M#d"!a
Levaduras de Importa!"a M#d"!a

Levaduras del gnero Candida

Levaduras del gnero Cryptococcus

Levaduras del gnero Malassezia

Levaduras del gnero Trychosporon

Levaduras del gnero Rhodotorula

Levaduras del gnero Saccharomyces

Idet"$"!a!"% de &evaduras de&
Idet"$"!a!"% de &evaduras de&
'#ero
'#ero
Candida
Candida
Levaduras del gnero
Levaduras del gnero
Candida
Candida

A'etes de !ad"d"as"s super$"!"a&es (

A'etes de !ad"d"as"s super$"!"a&es (
pro$udas)
pro$udas)

M*s de +,- espe!"es des!r"tas.

M*s de +,- espe!"es des!r"tas.
C.albicans, C.tropicalis, C. famata,
C.albicans, C.tropicalis, C. famata,
C.parasilopsis C.lipolytica, C.glabrata,
C.parasilopsis C.lipolytica, C.glabrata,
C.rusei,C.lusitaniae, C.dubliniensis,
C.rusei,C.lusitaniae, C.dubliniensis,
et!)
et!)
Qu importancia tiene identificar las
Qu importancia tiene identificar las
especies?
especies?

Aumeto de &a "!"de!"a de &as

Aumeto de &a "!"de!"a de &as
!ad"d"as"s s"st#m"!as)
!ad"d"as"s s"st#m"!as)

Aumeto e &a $re!ue!"a e &a apar"!"%

Aumeto e &a $re!ue!"a e &a apar"!"%
de espe!"es de
de espe!"es de
Candida
Candida
/o a&0"!as1
/o a&0"!as1

Res"ste!"a a at"$2'"!os
Res"ste!"a a at"$2'"!os
Levaduras del gnero
Levaduras del gnero
Candida
Candida
Idet"$"!a!"% de Levaduras de&
Idet"$"!a!"% de Levaduras de&
'#ero
'#ero
Candida
Candida

Estud"o ma!ro ( m"!romor$o&%'"!o de &as

Estud"o ma!ro ( m"!romor$o&%'"!o de &as
!o&o"as)
!o&o"as)

Termoto&era!"a
Termoto&era!"a

Ses"0"&"dad a &a !"!&o3e4"m"da 5M"!o0"ot"!6

Ses"0"&"dad a &a !"!&o3e4"m"da 5M"!o0"ot"!6

Prue0as 0"o&%'"!as
Prue0as 0"o&%'"!as

Prue0as 0"o7u8m"!as
Prue0as 0"o7u8m"!as

M#todos e9"m*t"!os
M#todos e9"m*t"!os

Idet"$"!a!"% de& 'eot"po

Idet"$"!a!"% de& 'eot"po
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida
Candida

Estudio macroscpico de la colonia:

Estudio macroscpico de la colonia:


Colonias blanquecinas, opacas, cremosas,
Colonias blanquecinas, opacas, cremosas,


lisas, rugosas, cerebroides.
lisas, rugosas, cerebroides.
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida
Candida

Estudio microscpico de la colonia
Estudio microscpico de la colonia


(ex. fresco, Gram):
(ex. fresco, Gram):


Levaduras ovaladas, 3-5
Levaduras ovaladas, 3-5

, con pseudofilamentos,
, con pseudofilamentos,


produccin de pseudomicelio o micelio
produccin de pseudomicelio o micelio


verdadero, Gram (!
verdadero, Gram (!
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida
Candida
Candida albicans
S"em0ra e A'ar :ar"a de Ma89
5!&am"dosporos ;6
S"em0ra e Suero :umao Norma&
5tu0os 'erm"a&es ;6
!u"anograma
5Prue0a de as"m"&a!"% de :"dratos de Car0oo6
#imograma
Prue0a de $ermeta!"% de :"dratos de Car0oo
Candida no albicans
S"em0ra e A'ar :ar"a de Ma89
5!&am"dosporos <6
S"em0ra e Suero :umao Norma&
5tu0os 'erm"a&es <6
A"s&am"eto de ua &evadura o !apsu&ada ( s" p"'meto
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida:
Candida:
Pruebas biolgicas
Pruebas biolgicas
Tubos germinales:
Tubos germinales:
=
Se ut"&"9a u rep"7ue de >? 3s) Se ut"&"9a u rep"7ue de >? 3s)
=
Suspes"% e suero 3umao@ !oeAo@ oveAa@ !a0a&&o) Suspes"% e suero 3umao@ !oeAo@ oveAa@ !a0a&&o)
=
I!u0a!"% a B,<BC DC por ><? 3s) I!u0a!"% a B,<BC DC por ><? 3s)
=
VetaAas. VetaAas. 0aAo !osto@ $*!"& rea&"9a!"%@ resu&tado r*p"do) 0aAo !osto@ $*!"& rea&"9a!"%@ resu&tado r*p"do)
=
DesvetaAas. DesvetaAas. Apro4) , E de &as !epas de Apro4) , E de &as !epas de C. albicans C. albicans o o
&os produ!e) &os produ!e)
=
Re7u"ere para su o0serva!"%@ persoa& e4per"metado Re7u"ere para su o0serva!"%@ persoa& e4per"metado


TUBOS GER!"#$ES
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida:
Candida:
Pruebas biolgicas
Pruebas biolgicas
Produccin de clamidosporos:
Produccin de clamidosporos:
=
Se ut"&"9a med"os po0res A:M<TFee G-
Se ut"&"9a med"os po0res A:M<TFee G-
=
Estru!turas de res"ste!"a
Estru!turas de res"ste!"a
=
Se ut"&"9a rep"7ues de >? 3s)
Se ut"&"9a rep"7ues de >? 3s)
=
Se o0serva a &as C> 3s) 3asta &os C d8as)
Se o0serva a &as C> 3s) 3asta &os C d8as)
=
Persoa& e4per"metado
Persoa& e4per"metado
=
,<CE de &as !epas de
,<CE de &as !epas de
C. albicans
C. albicans
o &os
o &os
produ!e
produ!e
=
So de 0aAo !osto
So de 0aAo !osto
%$#!&OS'OROS
A'ar mor$o&o'8a e p&a!a
A'ar mor$o&o'8a e p&a!a
A'ar &e!3e
A'ar &e!3e
Idet"$"!a!"% de Levaduras de& '#ero
Idet"$"!a!"% de Levaduras de& '#ero
Candida
Candida
. Prue0as 0"o7u8m"!as
. Prue0as 0"o7u8m"!as

Asimilacin de hidratos de carbono

Asimilacin de hidratos de carbono

Au4ao'rama !ove!"oa&
Au4ao'rama !ove!"oa&
H"mo'rama !ove!"oa&
H"mo'rama !ove!"oa&


S"stemas !omer!"a&es de "det"$"!a!"%
S"stemas !omer!"a&es de "det"$"!a!"%

todos en!im"ticos
todos en!im"ticos


F&uoro'#"!os
F&uoro'#"!os


Cromo'#"!os
Cromo'#"!os
Au4ao'rama
Au4ao'rama

M#todo de estud"o 0"o7u8m"!o para

M#todo de estud"o 0"o7u8m"!o para
"det"$"!a!"% de &evaduras de& '#ero
"det"$"!a!"% de &evaduras de& '#ero
Candida.
Candida.

As"m"&a!"% de !ar0o3"dratos e aero0"os"s)

As"m"&a!"% de !ar0o3"dratos e aero0"os"s)

Rep"7ues de >? 3s de &a !epa a estud"ar)

Rep"7ues de >? 3s de &a !epa a estud"ar)

Le!tura &ue'o de >? 3s a ?G 3s prev"o pasaAe

Le!tura &ue'o de >? 3s a ?G 3s prev"o pasaAe
por estu$a a BC C)
por estu$a a BC C)

:a&o de !re!"m"eto a&rededor de& d"s!o@

:a&o de !re!"m"eto a&rededor de& d"s!o@
ev"de!"a as"m"&a!"% de& !ar0o3"drato)
ev"de!"a as"m"&a!"% de& !ar0o3"drato)
Au4ao'rama !ove!"oa&
Au4ao'rama !ove!"oa&
H"mo'rama !ove!"oa&
H"mo'rama !ove!"oa&

M#todo de estud"o 0"o7u8m"!o para "det"$"!a!"% de M#todo de estud"o 0"o7u8m"!o para "det"$"!a!"% de
&evaduras de& '#ero &evaduras de& '#ero Candida Candida) )

As"m"&a!"% de !ar0o3"dratos e aaero0"os"s) As"m"&a!"% de !ar0o3"dratos e aaero0"os"s)

Med"o &87u"do a&!a&"o !o "d"!ador de P3) Med"o &87u"do a&!a&"o !o "d"!ador de P3)

Rep"7ues de >? 3s) Rep"7ues de >? 3s)

Le!tura a &as >? a ?G 3s@ prev"o pasaAe por estu$a a Le!tura a &as >? a ?G 3s@ prev"o pasaAe por estu$a a
BC C) BC C)
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida:
Candida:
API
API
ETO&OS B!O(U!!%OS
Iterpreta!"%.
Idet"$"!a!"% de &evaduras de&
Idet"$"!a!"% de &evaduras de&
'#ero
'#ero
Candida
Candida

todos en!im"ticos
todos en!im"ticos
Se dete!ta > e9"mas. L<pro&"a
Se dete!ta > e9"mas. L<pro&"a
am"opept"dasa (
am"opept"dasa (

'a&a!tosam""dasa med"ate
'a&a!tosam""dasa med"ate
m#todos $&uoro'#"!os ( !romo'#"!os)
m#todos $&uoro'#"!os ( !romo'#"!os)


I T"ee 0uea ses"0"&"dad ( espe!"$"!"dad
I T"ee 0uea ses"0"&"dad ( espe!"$"!"dad


I Le!tura etre , m"utos J ?G 3s) de "!u0a!"%
I Le!tura etre , m"utos J ?G 3s) de "!u0a!"%


I Ade!uados para &a "det"$"!a!"% de
I Ade!uados para &a "det"$"!a!"% de
C.albicans
C.albicans

M#todos E9"m*t"!os
M#todos E9"m*t"!os

VetaAas.
VetaAas.


<
<
No re7u"ere persoa& espe!"a&"9ado
No re7u"ere persoa& espe!"a&"9ado
para su &e!tura)
para su &e!tura)
<
<
Perm"te &a "det"$"!a!"% r*p"da de
Perm"te &a "det"$"!a!"% r*p"da de
C.albicans.
C.albicans.

DesvetaAas
DesvetaAas



<
<
Re7u"ere de 'ra pres"!"%
Re7u"ere de 'ra pres"!"%
5$&uro'#"!os6
5$&uro'#"!os6
Med"os Crom%'eos
Med"os Crom%'eos
Med"os Crom%'eos
Med"os Crom%'eos

C:ROMa'ar Cad"da
C:ROMa'ar Cad"da

Cad"da IDKID>
Cad"da IDKID>

A'ar B"''(
A'ar B"''(

C:ROMa&0"!as
C:ROMa&0"!as

A&0"!as ID
A&0"!as ID
C:ROMa'ar Cad"da
C:ROMa'ar Cad"da

Med"o amp&"amete d"$ud"do e uestro

Med"o amp&"amete d"$ud"do e uestro
med"o
med"o

Idet"$"!a!"% de &evaduras de& '#ero

Idet"$"!a!"% de &evaduras de& '#ero
Candida
Candida

D"a'%st"!o de espe!"e med"ate e&

D"a'%st"!o de espe!"e med"ate e&
desarro&&o de !o&o"as p"'metadas de
desarro&&o de !o&o"as p"'metadas de
d"$eretes !o&ores
d"$eretes !o&ores
#$%&agar #andida
#$%&agar #andida
Evaluacin del medio cromgeno CHROMagar
Evaluacin del medio cromgeno CHROMagar
Candida
Candida
TM TM
para la indentificacin de levaduras de
para la indentificacin de levaduras de
inters mdico
inters mdico
O0Aet"vo 5I6 O0Aet"vo 5I6
Determ"ar &a ses"0"&"dad ( espe!"$"!"dad d"a'%st"!a de& Determ"ar &a ses"0"&"dad ( espe!"$"!"dad d"a'%st"!a de&
C:ROMa'ar Cad"da@ !o respe!to a &a metodo&o'8a C:ROMa'ar Cad"da@ !o respe!to a &a metodo&o'8a
!ove!"oa& para &a "det"$"!a!"% de &evaduras de& !ove!"oa& para &a "det"$"!a!"% de &evaduras de&
'#ero '#ero Candida Candida
O0Aet"vo 5II6 O0Aet"vo 5II6
Eva&uar e& !omportam"eto de& m#todo C:ROMa'ar Eva&uar e& !omportam"eto de& m#todo C:ROMa'ar
Cad"da !uado se "!&u(e &evaduras de otros '#eros Cad"da !uado se "!&u(e &evaduras de otros '#eros
!omo !omo Cryptococcus, Trichosporon Cryptococcus, Trichosporon ( ( Rhodotorula Rhodotorula e e
d"!3o med"o d"!3o med"o
#&'#L()I&'*) #&'#L()I&'*)

E& med"o es !o$"a0&e so0re todo para &a "det"$"!a!"% de E& med"o es !o$"a0&e so0re todo para &a "det"$"!a!"% de C. albicans C. albicans) )

Re!omedamos ut"&"9ar d"!3o med"o para "det"$"!ar espe!"es de Re!omedamos ut"&"9ar d"!3o med"o para "det"$"!ar espe!"es de
Candida Candida &ue'o de teer !erte9a de 7ue &a !epa pertee!e a #ste &ue'o de teer !erte9a de 7ue &a !epa pertee!e a #ste
'#ero 5!omo &o espe!"$"!a e& $a0r"!ate6) Por tato o es pos"0&e '#ero 5!omo &o espe!"$"!a e& $a0r"!ate6) Por tato o es pos"0&e
pres!"d"r de& estud"o mor$o&%'"!o) pres!"d"r de& estud"o mor$o&%'"!o)

Es e!esar"o ut"&"9ar otra metodo&o'8a para &a "det"$"!a!"% pre!"sa de Es e!esar"o ut"&"9ar otra metodo&o'8a para &a "det"$"!a!"% pre!"sa de
&as espe!"es de &as espe!"es de Candida Candida /o a&0"!as1 "det"$"!adas por este med"o) /o a&0"!as1 "det"$"!adas por este med"o)

No es !ove"ete ut"&"9ar e& med"o para e& a"s&am"eto pr"mar"o a No es !ove"ete ut"&"9ar e& med"o para e& a"s&am"eto pr"mar"o a
part"r de espe!8mees 0"o&%'"!os@ por7ue "du!e a resu&tados $a&sos part"r de espe!8mees 0"o&%'"!os@ por7ue "du!e a resu&tados $a&sos
pos"t"vos@ $udameta&mete !uado "det"$"!a a &as espe!"es !omo pos"t"vos@ $udameta&mete !uado "det"$"!a a &as espe!"es !omo
/o a&0"!as1) /o a&0"!as1)

Es de desta!ar 7ue e& med"o $a!"&"ta e& re!oo!"m"eto de d"st"tas Es de desta!ar 7ue e& med"o $a!"&"ta e& re!oo!"m"eto de d"st"tas
espe!"es 7ue puede !oe4"st"r e &a m"sma muestra) espe!"es 7ue puede !oe4"st"r e &a m"sma muestra)
Cad"da IDKCad"da ID>
Cad"da IDKCad"da ID>

edio cromgeno
edio cromgeno
. A"s&am"eto se&e!t"vo de
. A"s&am"eto se&e!t"vo de
&evaduras e "det"$"!a!"% de
&evaduras e "det"$"!a!"% de
C. albicans
C. albicans

Co&o"as de
Co&o"as de
C. albicans
C. albicans
. a9u& 3"dr%&"s"s
. a9u& 3"dr%&"s"s
espe!8$"!a de &a 3e4osam""dasa 5sustrato
espe!8$"!a de &a 3e4osam""dasa 5sustrato
!romo'#"!o6
!romo'#"!o6
.
.

Co&o"as rosadas. 3"dr%&"s"s de otro sustrato

Co&o"as rosadas. 3"dr%&"s"s de otro sustrato
7ue s"rve para d"$ere!"ar /otras &evaduras1
7ue s"rve para d"$ere!"ar /otras &evaduras1

Le!tura. >?<?G 3s)

Le!tura. >?<?G 3s)

Aprop"ado para separar !u&t"vos m"4tos

Aprop"ado para separar !u&t"vos m"4tos

ID> L 5<6 0a!ter"as

ID> L 5<6 0a!ter"as
Cad"da ID
Cad"da ID
A&0"!as ID
A&0"!as ID
C.albicans
A'ar B"''(
A'ar B"''(
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gnero
gnero
Candida
Candida

Aglutinacin de part+culas de l"te,

Aglutinacin de part+culas de l"te,
=
Las part8!u&as est* re!u0"ertas de A!
Las part8!u&as est* re!u0"ertas de A!


moo!&oa&es 7ue se ue
moo!&oa&es 7ue se ue


espe!8$"!amete !o A' de
espe!8$"!amete !o A' de
C. albicans
C. albicans
(
(
C.
C.
rusei
rusei
=
So m#todos r*p"dos
So m#todos r*p"dos
=
Ses"0&es ( espe!8$"!os
Ses"0&es ( espe!8$"!os
=
No re7u"ere persoa& etreado
No re7u"ere persoa& etreado
=
(- #&)T&)&)
(- #&)T&)&)
Identificacin de levaduras del
Identificacin de levaduras del
gen.
gen.
Candida
Candida

Tcnicas de biolog+a molecular

Tcnicas de biolog+a molecular
<
Se 0asa e PCR Se 0asa e PCR
<
M*s r*p"dos para &a "det"$"!a!"% de M*s r*p"dos para &a "det"$"!a!"% de
Candida spp. Candida spp. 7ue &os m#todos $eot8p"!os) 7ue &os m#todos $eot8p"!os)
<
Perm"te "det"$"!ar a7ue&&as espe!"es 7ue o 3a pod"do Perm"te "det"$"!ar a7ue&&as espe!"es 7ue o 3a pod"do
ser determ"adas por m#todos $eot8p"!os ser determ"adas por m#todos $eot8p"!os
<
Mu( !ostosos Mu( !ostosos
<
No so ap&"!a0&es a &a0orator"os !&8"!os No so ap&"!a0&es a &a0orator"os !&8"!os
< La0orator"os de re$ere!"a < La0orator"os de re$ere!"a
< Re7u"ere persoa& espe!"a&"9ado < Re7u"ere persoa& espe!"a&"9ado
Mra!"as