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Junio 2009
ISBN 978-987-1366-37-8
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la concentracin de bacterias
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Lavado
Seleccin
Pasteurizacin
Fig.1.1. Proceso bsico de elaboracin de encurtidos
En la etapa de la fermentacin se colocan las hortalizas en solucin de sal (NaCl) al
7%, y la microbiota asociada naturalmente a la materia prima realiza la fermentacin. En el
presente trabajo se inocula L. casei aislado previamente de fuentes vegetales, en una
concentracin de 1x108 UFC/g de producto. Los encurtidos se conservan a temperatura
ambiente, en frascos de vidrio esterilizados durante diferentes periodos de tiempo.
2. Recoleccin de datos
2.1. Cuantificacin de sodio en encurtidos.
La determinacin se llevo a cabo en la Seccin Qumica de la Estacin
Experimental Obispo Colombres. Los encurtidos elaborados con sal al 7% + L. casei,
encurtidos al 10% de sal y un encurtido del mercado fueron sometidos a los mismos
procedimientos experimentales que se describen a continuacin.
De cada una de las muestras se pes 1 gramo en balanza analtica, se le
adicionaron 10 ml de cido ntrico y se llev a microondas (MW3000 Anton Paar).
Terminado el programa se llev a volumen final de 200 ml. Luego se prepararon diluciones
de las mismas, las que fueron sometidas a espectrometra de absorcin atmica con llama
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aire -acetileno, a una longitud de onda de 589.0 nm en espectrmetro (Perkin Elmer modelo
AAnalyst 100.marca). La curva de calibracin se realiz con estandares de hasta 0.5 mg/L.
2.2. Cuantificacin de microbiota autctona.
La evaluacin de la microbiota natural se realiz en la Ctedra de Bacteriologa de
la Facultad de Bioqumica, Qumica y Farmacia de la UNT. En los encurtidos elaborados
con sal al 7% e inoculados con L. casei y a los respectivos controles (vegetales en agua,
vegetales en agua inoculados con L. casei y vegetales en sal al 7%) se determin el
nmero
de
mesfilos
aerobios
totales,
enterobacterias
(como
indicadores
de
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Encurtido del
mercado
Concentracin de sal
7%
10%
N.D
mg de Na/100 g.
490 mg
720 mg
1490 mg.
mg de Na/15 g.
73.5 mg
108 mg
223.5 mg.
Estos datos indican que hay una reduccin del 31,9% del contenido de sodio de los
encurtidos elaborado con sal al 7% con respecto al encurtido con sal al 10% y una
reduccin del 67,1% de sodio con respecto al encurtido del mercado.
2. Evaluacin de la microbiota normal o indgena de encurtidos.
Al evaluar la calidad microbiolgica de los encurtidos inoculados con L. casei y
con sal al 7%, se observa en la Tabla 2.1. que en el tiempo inicial de elaboracin se asla
un elevado numero de aerobios totales y coliformes totales. En el da siete se evidencia una
marcada disminucin de aerobios totales, hongos y levaduras, y tambin de coliformes, no
aislndose E. coli. Durante el periodo de conservacin, no se aislaron bacterias mesfilas
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aerobias, ni coliformes, hongos y levaduras hasta los seis meses. Con respecto a las
bacterias lcticas, el nmero de UFC/g se increment desde su inoculacin hasta el inicio
del periodo de conservacin a valores de 109 UFC/g producto; durante el mismo
disminuyeron 5 log y se mantuvieron en esos valores hasta los 120 das. A los seis meses
no se aslan lactobacilos.
Tabla.2.1. Encurtidos con sal al 7% + L. casei
Nmero de microorganismos (UFC/g)
(PCA)*
(SSA)*
(BP)*
1x10
Agar
violeta
rojo
bilis
9
1x10
Tiempo
Elaboracin
Agregado de
vinagre
1x10
7 das
1x10
30 das
60 das
(H y L)*
(AgarMRS)*
6x10
1x10
1x10
3x10
1x10
1x10
3x10
2x10
90 das
2x10
120 das
2x10
180 das
T0
Conservacin
T0
(McC)*
9
6
6
4
4
4
*PCA: Plate Count Agar, SSA: Salmonella-Shigella abar, BP:Bair ParkerAgar, McC:Mc Conkey, H y
L:Hongos y Levaduras, Agar MRS:D e Man, Rogosa y Sharpe.
Con respecto a la calidad microbiolgica de los vegetales procesados en agua se
observa en la Tabla 2.2. que en el tiempo inicial de elaboracin se aslan un alto numero de
bacterias mesfilas aerobias, coliformes totales y hongos y levaduras. El nmero de BAL
detectado es muy bajo (1x102 UFC/g producto).Todas las determinaciones mostraron un
incremento en el nmero de bacterias en el da siete de elaboracin. En este perodo los
vegetales mostraban alterada su estructura y con olor desagradable, por lo cual fueron
descartados en esta etapa, y no se continu con las determinaciones microbiolgicas.
Tabla 2.2. Vegetales sin sal y sin L. casei (procesados en agua)
Nmero de microorganismos UFC/g
(PCA)*
Tiempo
(SSA)*
(BP)*
Agar
(McC)*
(H y L)*
violeta
(AgarMRS)*
rojo bilis
Elaboracin
1x10
10
1x10
T0
1x10
7 das
1x10
1x10
1x10
10
1x10
1x10
10
1x10
1x10
10
1x10
1x10
10
1x10
10
*PCA: Plate Count Agar, SSA: Salmonella-Shigella abar, BP:Bair ParkerAgar, McC:Mc Conkey,
H y L:Hongos y Levaduras, Agar MRS:D e Man, Rogosa y Sharpe.
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(SSA)*
(BP)*
Agar
(McC)*
(H y L)*
violeta
(AgarMRS)*
rojo bilis
Elaboracin
1x10
10
1x10
T0
1x10
7 das
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
1x10
10
1x10
*PCA: Plate Count Agar, SSA: Salmonella-Shigella abar, BP:Bair ParkerAgar, McC:Mc Conkey, H y
L:Hongos y Levaduras, Agar MRS:D e Man, Rogosa y Sharpe.
Los resultados obtenidos de la evaluacin de calidad microbiolgica de vegetales
con 7% de sal sin agregado de L. casei volcados en la Tabla 2.4. muestran que la gran
cantidad de mesfilos, hongos y levaduras, y coliformes aislados en el tiempo inicial no se
reducen en el da siete; se destaca un incremento de 2 log en el numero de lactobacilos.
Tabla 2.4. Vegetales con 7% de sal sin agregado de L. casei
Nmero de microorganismos UFC/g
(PCA)*
Tiempo
(SSA)*
(BP)*
Agar
(McC)*
(H y L)*
violeta
(AgarMRS)*
rojo bilis
Elaboracin
1x10
1x10
T0
1x10
7 das
1x10
1x10
1x10
1x10
8x10
1x10
1x10
1x10
4x10
1x10
8x10
*PCA: Plate Count Agar, SSA: Salmonella-Shigella abar, BP:Bair ParkerAgar, McC:Mc Conkey, H y
L:Hongos y Levaduras, Agar MRS:D e Man, Rogosa y Sharpe.
La identificacin taxonmica de las colonias aisladas, determinada por sus
propiedades y caractersticas fenotpicas, demostr la existencia de una gran variedad de
gneros y especies. Entre los cocos Gram positivos se identificaron Staphylococcus
coagulasa negativa, y entre los bacilos Gram negativos, Enterobacter spp., Citrobacter spp.
y E. coli. Tambin se aislaron Bacilos Gram negativos no fermentadores de Glucosa. A
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pesar de obtener crecimiento de colonias en los medios selectivos de SSA y Baird Parker
agar, sus identificaciones fenotpicas no mostraron que pertenezcan a los gneros
Salmonella o S. aureus respectivamente. En el medio H y L (Hongos y Levaduras) se
aislaron slo levaduras.
3. Sobrevida y crecimiento de E. coli en encurtidos.
Al evaluar la presencia y sobrevida de E. coli inoculado en niveles de 1x102 UFC
totales (bajo nivel) y 3x105 UFC totales (alto nivel), se obtuvieron los resultados
consignados en la Tabla 3.1.
Tabla 3.1. Sobrevida de E. coli en concentraciones bajas y altas durante la
elaboracin de encurtidos.
Tiempo
1x10
1x10
48 hs.
1x10
5 das
1x10
8 das
1x10
T0
1x10
24 hs.
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Elaboracin
Vegetales sin
sal y sin L.
casei
(procesados
en agua)
6.41
T0
7 das
Conservacin
Vegetales
elaborados
con L. casei,
sin sal, en
agua
6.25
Vegetales con
7% de sal sin
agregado de
L. casei
Encurtido con
7% de sal + L.
casei
5.89
5.63
4.02
8.50
7.60
5.50
T0
3.04
30 das
3.12
60 das
3.10
90 das
3.04
120 das
3.02
180 das
3.12
Muestra
Verduras frescas
Encurtidos
elaborados con
salmuera al 7% +
L. casei
Protena (mg/g)
Azcares
reductores
totales (glucosa +
fructosa)
(mg/g)
32,00
39,00
Azcares Totales
(mg/g)
Compuestos
fenlicos
totales (mg/g)
38,00
58,80
37,90
40,00
60,00
39,00
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Cada 100g de
vegetales frescos
Cada 15 g de
vegetales frescos
Cada 100 g de
encurtido con 7% de
sal + L. casei
Cada 15 g de encurtido
con 7% de sal + L.
casei
Caloras aportadas
por hidratos de
carbono
Caloras aportadas
por protenas
VALOR CALORICO
TOTAL
23.55 kcal.
12.8 kcal.
36.35 kcal.
3.52 kcal.
1.92 kcal.
5.44 kcal.
24 kcal.
15.6 kcal.
39.6 kcal.
3.6 kcal.
2.34 kcal.
5.94 kcal.
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90%
No me gusta ni me
disgusta
Me disgusta
2%8%
86%
Si comprara
No comprara
14%
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.2007.