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1 INTRODUCCIN:
En la naturaleza, los microorganismos se encuentran formando poblaciones mixtas
constituidas por una gran variedad de stos. Sin embargo, el desarrollo de la
Microbiologa se ha conseguido mediante el estudio de cepas aisladas, mantenidas en
medios de cultivo preparados en el laboratorio, es decir cultivos puros, desprovistos de
cualquier otra forma de vida contaminante.
El primer problema que se plantea en el laboratorio cuando se quiere estudiar una
determinada bacteria es su aislamiento del resto de los microorganismos presentes en
una determinada muestra (frotis farngeo, exudado, esputo, orina, sangre, LCR, lquido
sinovial, etc.). Una vez que se ha logrado el aislamiento es posible realizar el cultivo puro,
cuyo estudio permitir la identificacin bacteriana, as como otras posibles
investigaciones que se deseen realizar.
Identificacin bacteriana
Otros estudios.
2 TERMINOLOGA RELACIONADA:
-Colonia: Conjunto generalmente discreto (1-3 mm) de individuos originados a
partir de una sola clula (unidad formadora de colonias) sobre un medio slido o
semislido.
-Cepa: Lnea particular de bacterias que presumiblemente derivan de una clula
nica o un pequeo n de stas (unidad formadora de colonias).
-Cultivo: Poblacin bacteriana que se encuentra en un sitio determinado (tubos de
ensayo, matraces, etc.) en un momento determinado.
-Subcultivo: Cultivo derivado de otro anterior preexistente.
-Siembra bacteriolgica: Es el hecho de depositar en un medio de cultivo una
muestra que contiene, o se sospecha que contiene, microorganismos para obtener un
crecimiento bacteriano.
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A
Directo
Medio slido o
muestras biolgicas
muy viscosas o
slidas.
Medio slido
Preparacin de
inculos
Medio lquido
Medio slido
Medio lquido o
muestras biolgicas
lquidas.
Medio lquido
APLICACIONES
-Estudios de sensibilidad.
-Resiembras y
mantenimiento de cepas.
-Recuentos.
-Aislamiento.
-Identificacin.
-Enriquecimiento.
-Identificacin.
-Aislamiento.
-Identificacin.
-Enriquecimiento.
-Identificacin.
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En medio lquido
Mtodos de
siembrainoculacin
En medio
slido
Por
dilucin
Mtodos de
siembraaislamiento
Tcnica de Barry
Tcnica de Kirby-Bauer
Tcnica de inundacin
En medio horizontal
En medio inclinado
5. CULTIVO
Tras la siembra de un medio de cultivo, ste debe colocarse en un ambiente
adecuado para el desarrollo de los microorganismos.
5.1. Factores que afectan al cultivo de microorganismos
Temperatura: generalmente se incubarn a 35-37, pero hay microorganismos
que requieren otras temperaturas.
Atmsfera: presencia o no de O2 y CO2; depender del tipo de
microorganismo: aerobio estricto, anaerobio facultativo, etc.
Proteccin ambiental: los microorganismos durante su incubacin deben estar
protegidos de agresiones externas y posibles contaminaciones, para ello se
deben cultivar en recipientes cerrados pero con la seguridad de que la
atmsfera sea la adecuada y en estufas de cultivo.
5.2. Estufas de cultivo
Las hay de varios tipos, segn el microorganismo a cultivar:
Estufas convencionales: en estas se controla la temperatura y la proteccin
ambiental. En ellas se incuban los microorganismos aerobios y anaerobios
facultativos.
Estufas de CO2: stas adems de proteger, controlan la temperatura y el
contenido de CO2. En ellas se incuban microorganismos cuyo crecimiento
se ve favorecido por la presencia de 5-10% de CO2, p.e. la Brucella y
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