Incubare con tripsina Trasferire in un tubo falcon Centrifugare per 5 minuti a 2000 rpm Durante la centrifugazione preparare il terreno di congelamento: - 7 ml di terreno completo - 2 ml di FBS - 1 ml di DMSO Filtrare il terreno in un nuovo tubo con siringa e filtro blu Eliminare il surnatante e isolare il pellet di cellule Risospendere il pellet in 1 ml di terreno di congelamento Trasferire il tutto in una eppendorf di congelamento e mettere in isopropanolo a -80C