CAPITULO 11 Acido desoxirribonucleico: Portador de la informacién genética cpu del easbrnieo eos pnp de Mendel lett et epost tn hecos los genes? Si bi rencia no resolveron tales cuestiones, contbuyeran a establecer un conjunto de prediceione acerca de la aturalea quimica de los genes, yla manera en que és po Bra elaro que la sustancia de Ia que estaban hechos los genes debfa tener lacapacidad de almaoenar informacién en una forma que Pudiera ser ecuperada yutlizada por la célula. Pero los genes tenfan ‘otras propiedades que ban tomarse en cuenta, Incontables experi mentos genetioas con una amplia variedad de organismos han de- mostrado que los genes suelen ser muy establesen su paso de una seteracin aotra. Sin embargo, en ocasones se observaba que un g se convertiaen una forma distnt; tales cambios gnetcos,llamados rmutaciones, se transmitian después sn cambio a generaciones ps Amtida que la cienci dela genética se desarollaba a ciencia de la bloguimicaflorecfa tambign. No es somprendente que se haya realizado un esfuerzo crecients por corelacionar las propiedad co nocidas de los genes con la naturaleza de las diversas molculas bol de molécula podria almacenar informacion? ¢C6mo podria recuperaseyaprovecharse esa informacin paa drgi ls a lvidades celulares? Qué tipo de molécula podria ser relativamente estable, yal mismo tlempo tener la capacidad de camblaren deter rads circunstancias? Algunos cientificosconsiderahan que el probe solver. Penscban que a informacién requerida por la cul era tan ‘complja que ningtin ipo de moléeula pda funcionar como el ma terial geetico, Sin embargo, cuando se supo més acerca del cometido central de las proteinas en vstalmente cada aspeto de laestrucr el metabolismo celulares, otros cientficos consideraron que &tas terial genético. an los principales candatos para constituir el n el presente capitulo se expla cémo se demosts que es el feldo desoxiribonucleico (deosribo-nucletc acid, DNA, vées la fig 2), yno una preteina, a moléeula encargada de transmit Ia heren adem de examinarse ls caracterstca tnicas del DNA que le ermltenrealiza sa func, 207OBJETIVOS DE APRENDIZAJE [DesPES DE ESTUDIAR EL CAPITULO, EL LECTOR DEBERA SER CAPA DE: 2, Resumirlanformacién acumulade durant dace de 1940 princ- ios dl de 1950, a cual demuestra qo el DNA sl material genic, 2 Relaconatlascaracertcas quimieas ses del DNAooa Iaestrutara propuesa por Watson y Crick, 5. Indiar obo we ela las subuniades nuceniesparafomar una ‘solace de eo desoxbonucleio (DN, 4 lstrar cémo se erientan entre sf las dos cadenas de écido @[o) OIE elol>|a Perpetuacién de una mutacion. £1 proosae de cuptcacin dol DNA, ‘ede stanza una ruta, modo que cea pasaraageneraco= CAPITULO 11. is decxinoueke Porta a ifomacin ein 257a ices ym mata do DNA tu i corte pot Satan px ‘rotons SoU Lar surioue so ON cinestapesibilidad rebel nombrede duplication persia. Para “scriminarente el mecans de uplicacn semtconservatva ls cara posblldads, ra nesarodsnguir entre laeaenas ginal laren sntizada del cdo desoximibonuceieo (DSN. Una delogrartxo econ el empleo de un isnpo pesado det nitgeno el nitaeno 15 con sinbolo "N (lite oinsio «es ilrgeno 14, "N), para marcar cadenas de DNA hacindolas mas densa. as mkéculas grandes, como lade DNA pueden separase por derencies en su densidad mediante una téeniea conocida como centrifugacién en gradiente de densidad. Cuan el DNAse mezla com una solucin que contienecloruo de cso (Cs ye centiuga 2 alta velocidad, I soluién forma un gradente de densidad en el tubo dela entfuga, que va de una regi de baja densidad en la part superior una rgn eon la maxima densidad en el fro, Du- 258 PARTE 3. Comtnaldade i Gentes Fig. 11-10. Experimentos de Moselson y Stahl bactena Eason ease ets en un meas ‘cn niragono pea (°N) aan muchas gonora- Genes. Algunaa de os celles so ranafiieron as pugs ore medio con ntiSpenoigero("N). Seat IDNA do las celles una y dos gonotaciones des ude dota vanatorenea alec oon "N-La dons acide las meleculas en cada gre (abs) cance ‘onelpavan de marcado esperado sl DNA seas ca do manora comconceratva (ar), "ante a entrifugacion, as moléculas de DNA emigran a laren del sgradiente que tiene valor de densidad déntioo al suyo. En 1957, Matthew Meseson y Franklin Sta culvaron célulss de la bacteria Bscherichia coli er un medio que contenfa °N en la ona de clorurodeamonio (NH CD. Las ofllasulizaban el "N para sinfetizar bass, que a su vez eran incorporadas en DNA (lig. 11-10). {Las moéculas de DNA resultantes, que contenfannitgeno pesado, se catrajeron de algunas eulas; cuando se sometieon a centifugacion en gradiente de densidad se acumularon en la regin de alta densidad del gradiente. El resto de as bacterias (que también contenfan DNA ‘mareado con "N) se transfirieron aun medi de cultivodisitoen el cual el NH Clcontenfa el sStopo 'N, ms abundante en a naturaleza ‘yam ligero; ah sees permits expecimentar varias divisions clula-Lapren de oat — ee % fy Fig. 11-11. Duplicacién del DNA. Las enzimas polmerssas que catlzan ins reacciones de pom: Tizaclonagrogon un nvlaaiss ala veal extreme Sela cadona.on crecimiento, Se esperaba que las calenas de DNA recién sinttizadas fueran ‘menos dense, por haber incorporado bases que contenian el sétopo lige, "N Enefeco, ls moléculasde DNA de lus aisladas despues de una generacién tenfan densidad intermedi, lo cual indicaba que ‘contnfan la mitad de tomas de SN que el DNA “progenitor hecho apoyabael modelo semoonservativo,el cual predecia que cada doble elie debe contener una cadena peviamentesintetizada (pesa- daenestecaso) yuna reign sintetzada ligera en est caso). Refuta- ‘bae! modele conservativ, que predeefa que habra dos clases de mo -Keulas de doble cadena (una can dos cadenas pesadas ¥ otra con dos cadena ligers) Después de oto ciclo de divin celular en el medio can el ito poligero (*N), aparecieon dos tipos de DNA ene gradiente de densi- dad. Uno consist en hice “hbridas” de DNA (con “Nen unacale- nay 'N en la otra), en tanto que [a otra contenfa slo DNA eon et Isétopo ligero natural. sta cbservaién refutaa et mavdelodsgersiv, ef cual predecfa que toa las cadens dea ener densidad inteme= dia. En cambio, cala cadena e a doble hice original se conservaba, pero en una molécula hija erent, tal como To preci el modelo de duplicacion semiconservativa, La duplicacién del DNA es compleja ‘y posee diversas caracteristicas que le son propias ‘Aungue ls prinipiosgenerales dela dupliacidn del DNA son prec cones senillsy direetas a parti del modelo de Watson y Crick, en realidad el proceso requiere una “maquina de duplicacéin” compa «que conten una gran cantidad de proteins yenzimas. Muchas eas ‘caracteriticas eenciales dela duplcacin del DNA son universes, bien exsten algunas dfeencias entre procarotes ecariotes, debido a que su DNA se organiza de maners diferente. En las eélulas ‘acterianas, como F. col, todo 0 casi todo el DNA se encuentra en la fomade nasoladoble cadena circular. Cada eromesoma cucaeética ‘no duplicado eontiene una sola doble cadena fined, asocada una tran canta de proveinas. Las cadenas de DNA deben desenrollarse durante la duplicacion ‘Watson y Crick reconocieran que en su modelo de la dale helice las dos cadenas de DNA estnarvlladzs una en la otra, como las hilos de una cuenda. Si tratamos de separar lo hilos, la cuerda debe rotar 0 spretarse mds en las elas restates, Se espera que ceursera algo similar cuando las eadenas conalementaria de DNAse separan para Ja duplicacién, £1 desenrollamiento es efeetuado por enimas hhelicasas de DNA, las cuales ecoren a lice, desenrollando las ca- ddenas a medida que avanzan, Una vez que las cadenas estin separa- as, proteinas desestabilizadoras de la hélice se unen porseparado -2cata.cadena, impidiendo que wuelva.aformarse [adobe lice mien- tras se opian las cadens. Enzimas especiales llamada topotsomera~ sas prodicen roturasen Ia moléculs de DNA y después vueiven anit cada cadena, liberando la tensin e impidiendo de manera eficaz lx formacién de nudes durante la dupieacéi, CAPITULO 11, As dscxntonukion Poa ie a informaci ein 259Lasinacc ce ONA comin rune ecuencin abeons sapoction, donomnadaorton de zs cadanas se sparan onal organ ‘eserves por an hoeaua do DNA, aol “Sama alae ae lame co ‘freon alas envmae artetndera hi Sore qu ners do xn ‘dieu prance cocestablizedore dota Fes, be cai so urn of OMA. ‘Ronccatnato Lavosin dpe acta de ise asoes sla “horgae do cupiescan”, {made rel purto aus carci a ‘Sedan sonata avon de obi a. ‘rts coda casein on avec ‘Ghoraaa amber on elsarido >) ‘Amada quoi nuvas cadens coninan Cuero ia cupioain esta completa se han formade doe motcas Mou cadena con una ‘Soins ovarecan sada Case SEE eee lan ramet dun eromocars ‘Seesotco pleat, Fig. 11-12. Cusdro general de la duplicacién del DNA. Este proceso require La sintesis de DNA siempre procede en el sentido 5’ > 3° Las ena que catalizan La uni6n de las subunidades nucleotdicas se denominan polimerasas de DNA. Tienen varias limitaciones que contrbuyen ala complejidad del proosso de duplicacién. Pueden agre- ‘gar nuclides slo en el extremo 3” de una cadena polinuclotiica en crecimiento, y esta cadena debe estar pareada a la cadena que se std copiando (fig. 11-11). Como sustratos para la reaccién de polimerizcin se utilizan nucleétidos con tes grupasfesfto.Amedi- dda que se enlazan los muclstids van separindose dos fsftos a a vez. Como la hidGlisis del ATR, estas eacciones son fuertemente exergfinicas (cap. 6)ynorequieren ener adicional, Como la nuera ceulena polinucleotidca e alarga con la unin del grupo fosfsto 5 de Januevasubunidad nucleotidicaal grupo hidroxilo 3 del azicarenel extrem o dela cadena preexistent, la nueva cadena de DNA sempre cxece ene sentido’ > 3, 260 PARTE 9. Conta dela vil: Geni paooe, en oo que partipandatinas onaimae y RNA cobadoroe. Para la sintesis del DNA se requiere un RNA cebador ‘Una segunda limitacin dels polimerasas de DNAes queso pueden agregar nucketidos al extremo 3” de una cadena polinucleotdies ja ‘existe. Entonces,ge6mo puede iniciarse la sintesis de DNA una vez ‘que se han separado las dos cadens? La respuesta esque primero se sintetiza un pequefio fragmento (por lo comin de unos cinco rnuclestides) deun RNA cebador oiniciador (V4 primer) enel pun- tode inicio de la dupicacin (fig. 11-12). ELRNA 0 eidoribonuceico (caps 312), sunpolimero de cido ‘ucleco consisente en subunidades nuclotdicas que se asocian por pareaiento de bases complerentariascon laplantla de DNAde canst ‘sncila(monocatenaro). El RNAoebador es sintetizad por un complejo protenico al qu we denonnina primosoma, que ince una enzina ca pazde oomenzar una noea cadena de RNA opuesa ta cade de DNA. [Lego de que sean agegado unos pooos nuclides, la polimerasa deoi lin mvacoboccr, ceo 2a DNA. ‘Stonuse ergienmedeaa main nee do cada rage de tare min con ase dun PNA cebedor Unaver ques poxmeaca ‘de DNA sargace al rsganto, ot PAR coon ae copra a tncon se Banan'con DNA, ye atmanioe ‘igen son none eons Fig. 1-13. Cadenas drsctoray seguiders de DNA. Como elongacién aslo puede proceder ‘cada una por efecto de una masoula de petimaraes de DNA distr DNA desplazaelprimamay pute entonos sgegasuniaks al ex- treo 3 del orto RNA cebaos Ese s degrada esp por enaimas cepceics, yl espacio es ona por did desoxieibonuceic (DNA, ‘Ta duplicacion del DNA es discontinua en una cadena y continua en la otra Un obstculo importante para comprender la dupleaciGn del DNAera el hecho de que ascacenas de DNA complernentariasson antiparalelas (stn dspuestas en sentidos opuestos). Como lasintesis de tal cdo procede slo ene sentido 5’ » 3 (lo cual significa que la cadena que ‘4 siendo copiada se lee ene sentido 3’ 5°), al parece seria nece- sario copiar uma de las cadens comenzando en un extremo de la do bile elie y la otra cadena comenzando en el extremo opuesto. Sin embargo, se sabe que esto no ocurr. a duplicaion del DNA comienza en sitios espectins de la m0- lecula de DNA, denominados orfgenes de duplicacién, y amas ca- Vn ean pn de lan vero cain tna Als inven een, Insonaser un gro de pcan as auesbaceis ap. 23)TON Fig 11-15. Nucleosomas. a) Mode ce Cada "cuenta det nacioosoma contone te.en 148 pares de nieces; ore segment de DNA con unos 60 pe ‘es de nuclashos Je argo une In cums dl museosoma (a) TEN de Rudeebomae del nucleo do un glébul rojo do polo. Pr lo goneral oe Iuelaosomas stan empacados ma esrechamentn para procesimen {ove praparacion ie ta soparado rowinins ONA de enlaes. (coro: ‘SageDE Olney AL Cine) arrollada alrededor de un centro en forma de disco constituido por ‘cho moléulas de histona (dos decada uno de cuatro tpas stints) ig. 1-15) Si bien en un inicio el nucleesoma se definis como una cuenta ‘mds un segmento de DNA que la une a una cuenta adyacente, en Ia actualidad ese término se fire slo Ia cuenta misma (est es, ks ‘ocho histonas y el DNA arollado a su alrededor, ‘os nucleosomas son parte dela cromatina, el complejo de et dos nucelcs y protein que contituye ls cromosomuas. Las sieve ras de orden superior de la cromatin se iustran en fa figura 11-16, Por ejemplo, un quinto tipo de histona, conocido como histona 1, se asocia al DNA de enlace y se encarga de empacar nucleosomas aya cemtes (cada uno de 11 nm de didmetr) entre s para formar una RESUMEN CON TERMINOS CLAVE 1. Muchos dees primers nett crea que los genes estan echos de proteins. esata que es son comple vanes, ySepensaka ‘Ut los deldosnuclelcos eran moéculs snc oro tanto conc pcdad limitada para almacenarinfomnacén, {El tbajo de Gard sob errors innatos del metabolism, yl de Healey Tatum con matantes de Neuraspor,sugeron que cada proeinacs espeeficada por un seo gen. 8B Diversos datos povaban laidea de queel DNAesel material enc 1 Enesperimenten de tranformacién cDNA ena cpa debe tera puede conferr a una bacteria afin nueras carats sees. 2 Onando tna oflla bacteria es infect por un vis, so [DNA de virus entraen nell ete DNAs siicente para queel virus preeay fore neas parca ies. cadena de 3 nm de didmeto, Estas cadenas se organizanen grandes Tazadas, mantenidasjuntaspor una aie deprotefnas de andamiaje distinta de as hstonas. Las lazadas interactianentonees de maneras complejas para formar la cromatina que se observa en un comesoma condensado durant la metafase. ‘Losnucleosomasfuncionan como diminutos cartes, con lo cual evitan que las cadenas de DNA se enmaraien, La importancia de esta funcidn se pone de manifesto en a figura 11-17, donde se lutea el empaque denso de las fibrs de DNA en un eromosomia de rain luego de quese han eliminado las histonas. Sin embargo, sus funciones son mds queestructurales, ya que tu configuracin también afeta la act vidad del DNA con que estinasociadas (cap. 13). Lesestio de Watson y Ck sobre aestrtua del DNA demostra- ro amaners en quel informacion pntica de almacenareen Jnestrctra dela moléeul, yen que las moléculas de DNA pueden setuar como pats o plants par propia dupicni, 1, BLDNAes un poe de nuelestdos con esuctura muy equa: A. Cada subunidad ncleattcacontiene una base itopenada, que puede sr una de las purinas (adenina o guanina) o un dees pirmidina (mina citosin), Cals bse stead de mane xcoralere sun aia de cinco carbons, desoxiebosa, qe 2s ‘ezestéunida pr un enlace covalent aun grupo fit, El exqleto de cada cena individual de DNA ext formado por rps ac Tf leas nies ens porentaoes foto- aster, covaentes Cala grupo fosfato et Unio al ean 5 de una desoximbosa yal earbono 3 dela dessteibosa etna CAPITULO 11 ed decrboneo: Pate del ifrmacn ten 263,Fig. 11-17. Cromosoma privado de histonas. Cbssrvese ol denso ‘rmpaqua delas fiiss Go DNA sn seta TEM de un crorsssoma de en, Spesar do que ee han prvado ela rottpas ston que aso tn estructura exroch tra oscure que va oo dercha on apart intro“ emir roaraia Por protlnas de aviaiajs(Coresia do U. Ler tornado Ge Cal "12017 1008. Conroy Col Prose) 268 PARTE 9 Conta dela vie: Geni,Telomerasa, envejecimiento celular y cancer lnm dedvisiones quelas dul somaicas humans normals puelenexperineatar cuando seculvanslimitado por la longitud HIPOTESIS: desu DNMtelomenco METODO: —_Paraprobarlapredccidn de que as olla sein capaces de experimentar ms dvsionessse lags DNA omic, ks investigadnes ‘utillzaron un vis pazainteducirel gen qu coca la suburidadeataltica de elomerasa en esulas humanas pomales culvades, as ‘uals nommalmente caren de actividad loners, RESULTADOS: Lasodlulasproujeron elomerat activa, que alarga ls el6meos 128 fulascontinaron su proliferacin activa durante muchos cilos calles mill del punto en quenormalment abrian cesdo as done celular, CONCLUSION: EI ags de vida dees dls puede prlangarses se alargael DNA loméric de sus cromusomas.