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GUIA DE PRCTICA DE
BIOLOGIA MOLECULAR
I CICLO
PROFESOR COORDINADOR:
Mg. EDITH RODRIGUEZ QUISPE
I. OBJETIVOS:
Dar a conocer los lineamientos bsicos del mtodo cientfico y su aplicacin
Adiestrar al estudiante en el uso del mtodo cientfico para usarlos en el campo de la medicina.
II. MATERIALES:
Lectura (s )seleccionada (s) a partir de revista especializada.
III PROCEDIMIENTO.
- Hacer una descripcin de las diferentes etapas que comprende en mtodo cientfico.
- Leer el artculo seleccionado rpidamente para tener una idea general del mismo.
- Proceda a leer el artculo cuidadosamente y analizarlo con el propsito de establecer lo siguiente:
1. Reconocimiento del problema planteado
2. Formulacin de la hiptesis
3. Formulacin de objetivos y mtodos
4. Prueba de hiptesis mediante la experimentacin
5. Anlisis de resultados y conclusiones.
IV.RESULTADO
-Entregar el reporte del artculo evaluado considerando todos los pasos del mtodo cientfico.
PRACTICA N 2
I.
OBJETIVO
Reconocer las unidades monomricas y macromoleculares como componentes fundamentales de todos los seres
vivos.
II.
III. PROCEDIMIENTO
Colocar 1 ml. de cada solucin del glcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa y Almidn) en un tubo de
13x100 y roturarlo.
Adicionar a cada tubo con glcido una (1) gota del Reactivo de Molish, agitar suavemente.
Agregar lentamente por la pared del tubo sin agitar 1 ml. de cido sulfrico concentrado.
4.
Preparacin:
1.
2.
3.
4.
Colocar 2 ml. de cada solucin de glcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa, Maltosa y Almidn) en
un tubo de 16x150 mm y roturarlo.
Adicionar 1 ml. de Reactivo de Benedict a cada tubo.
Someter los tubos a ebullicin en agua hirviendo en un beaker por 5 minutos. Retirarlos con ayuda de una
pinza.
Observar la formacin del oxido cuproso que es color anaranjado hasta rojo ladrillo .
Preparacin:
1.
2.
3.
4.
III.
IV.
CUESTIONARIO:
1. Diga cules son las principales fuentes de carbohidratos en nuestra dieta y cul es el requerimiento diario?
2. Definir azcares reductor y no reductor, de 2 ejemplos.
1. Explique el significado de deficiencia de disacaridasa, de un ejemplo.
2. Establezca las diferencias estructurales y funcionales entre el almidn y el glucgeno.
INFORME: Debe contener lo siguiente
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Resultados y fundamentos.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver)
I.OBJETIVO
Reconocer que compuestos orgnicos como los lpidos y protenas son constituyentes importantes en todos los
seres vivos.
V.
PROCEDIMIENTO
1.DETERMINACIN DE LPIDOS
3.
4.
Preparacin:
1.
2.
3.
C. Saponificacin.
Las grasas reaccionan en caliente con hidrxido sdico o potsico descomponindose en glicerina y cidos
grasos. stos se combinan con iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son por ende las sales
sdicas o potsicas de los cidos grasos.
1. Colocar en un tubo 16x150mm 2ml de aceite y 2ml de NaOH 20%.
2. Agitar enrgicamente y colocar el tubo en bao mara de 20 a 25 minutos.
3. Observe en el tubo las 3 fases: inferior que contiene la solucin de soda sobrante junto con glicerina
formada,
Otra intermedia semislida que es el jabn formado y la superior lipdica de aceite inalterado.
VI.
CUESTIONARIO:
1.
2.
3.
V. INFORME:
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Resultados y fundamentos.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
I. OBJETIVOS:
Utilizar mtodo sencillo de extraccin de ADN a partir de clulas eucariotas poniendo de manifiesto su
estructura fibrilar.
Reconocer algunos componentes estructurales del ADN
II. MATERIALES:
-Muestras de origen vegetal y animal.
-NaCl 0,9% mantener a 4C
-Solucin de Lisis ( EDTA, SDS, NACl) mantenerla en frio.
-Acetato Na 3M
-Etanol 96 frio (mantener a C)
-Solucin salino citratada.
- ADN
-Reactivo de Bial
-Azul de metileno
-Tubos de ensayo 16x150mm.
-Beakers 20ml
-Beaker de 500ml
-Baguetas
-Mortero y piln
-Embudos
-Mechero.
-Pinzas de madera
-Pipetas 5ml
-Propipetas
-Gasas 10x15cm (3)
-Gradilla para tubos
-Tijera
-Pinza de madera.
III PROCEDIMIENTO.
A.Extraccin de ADN:
El ADN en las clulas eucariotas se encuentra en el ncleo disperso y muy replegado unido a protenas para formar
la cromatina. Para extraerlo se requiere homogenizar la muestra para proceder al lisado de membranas , la liberacin
de ADN el retiro de protenas asociadas a dicha macromolcula y su posterior obtencin bajo la forma de fibras .
1. Colocar en el mortero la muestra ( 3 fresas sin hojas y/o pltano 3 cm/ ) e incorporar 2 ml de NaCl
0.9% triturar por 1 minuto.
2. Aadir 10ml de la solucin de lisis y seguir triturando hasta obtener una masa homognea y semilquida
(aprox. 5minutos).
3. Incluir a la preparacin 2ml de acetato de sodio, mezclar, para luego dejar reposar por 5
minutos.
4..Filtrar la preparacin en untubo de 16x150 con la ayuda de un embudo cubierto con gasa.
5. Transvasar 5-8ml d el filtrado a un beaker pequeo e incorporar 2 volmenes de etanol frio
por las paredes e introducir rpidamente una bagueta delgada y girar sobre su mismo eje a fin
para recuperar el ADN bajo la forma de fibras y colocarla en un tubo 16x150mm
conteniendo 1 ml de solucin salido citratada para su resuspencin y uso en la parte
experimental B.
6. Obtener ms fibra de ADN para reconocer el carcter cido, para ello dejar caer en las hebras
el colorante bsico como el azul de metileno,
IV.CUESTIONARIO
1.Cul es la composicin bsica del ADN?
2.Qu protena est asociada al ADN, cules son sus caractersticas?
3. Por qu el ADN absorbe luz UV a 260nm?
V. INFORME:
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Resultados y fundamentos.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
I.
OBJETIVO
1. Conocer e identificar correctamente las partes pticas y mecnicas del microscopio compuesto.
2. Familiarizar al alumno con el uso correcto, cuidado y conservacin del microscopio.
II.
MATERIALES
Microscopios
Lminas o portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Lminas artrpodo (Pulex irritans pulga Pediculus humanus piojo )
Suero fisiolgico
Pipeta Pasteur
1 Plumn indeleble
Papel lente
Hebra de algodn
Letra e
PARTE MECNICA
Tubo portalentes y cremallera
Tornillos macro y micromtrico
Revolver
Platina
Condensador
Brazo y Pie
PARTE PTICA
Ocular
Objetivos
Espejo
Lentes de condensador
Diafragma
10
VII.
PROCEDIMIENTO.
1. Preparar lminas hmedas (gota de suero fisiolgico mas la muestra) con hebra de algodn y letra e en
posicin de lectura .
2. Realizar las observaciones de dichas muestras con los objetivos 4x, 10x y 40x
3. Verificar con la lmina de la letra e, que los movimientos en estos sistemas son invertidos.
4. Observar con los objetivos de 4x y 10x la lmina de artrpodo fijadas.
VIII.
1.
2.
3.
4.
IX.
11
CUESTIONARIO
Definir que es una imagen real y que una imagen virtual
Cules son las unidades de medida de longitud empleadas en microscopia?
Defina aumento y, resolucin del microscopio.
Cmo se define un microscopio electrnico y cules son sus aplicaciones mdicas.
INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
I.
OBJETIVO
Existen dos tipos de clulas, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente, en la organizacin de su
material gentico.
Las procariotas no poseen envoltura nuclear, su DNA circular ocupa dentro de la clula un lugar llamado nucleoide
y se halla en contacto directo con el protoplasma. , por ello nuestro objetivo es identificar distintos tipos de
bacterias .
II. MATERIALES POR MESA
Laminas con tincin de Gram de Escherichia coli (bacilos) y Streptococcus (cocos)
Lminas con Tincin de Ziehl Neesel de Mycobacterium
Yogurt natural
Palitos mondadientes
Solucin fisiolgica al 0.85%
Solucin Mercurio cromo
Solucin de Violeta de genciana
Colorante azul de metileno
Alcohol yodado
Lamina portaobjetos
Lamina cubreobjeto
Varilla de coloracin
Aceite de inmersin
Alcohol isoproplico
Papel lente
Depsito para eliminar lminas y laminillas.
Microscopios
Guantes
III.PROCEDIMIENTO
A.Observacin de Microflora bacteriana en cavidad bucal (Tincin de Vag)
1.
2.
3.
4.
5.
6.
12
V.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
BACTERIAS (Procarionte)
13
II.
OBJETIVO
Existen dos tipos de clulas, las procariotas y las eucariotas, que difieren principalmente, en la organizacin de su
material gentico.
En las eucariotas el DNA se asocia a protenas formando unas estructuras complejas denominadas cromosomas, los
cuales se encuentran dentro de un ncleo verdadero rodeado por una complicada envoltura nuclear, a travs de la
cual tiene lugar los procesos de intercambios ncleo-citoplasmticos,
- Poder visualizar clulas eucariotas unicelulares y pluricelulares.
- Poder diferenciar al microscopio las caractersticas que presentan la membrana celular de la clula animal y la pared
celular de la clula vegetal.
III. PROCEDIMIENTO
A) OBSERVACION DE CELULA ANIMAL (RASPADO DE MUCOSA BUCAL)
1.Con la ayuda de un hisopo hacer un raspado de la mucosa bucal y colocar la muestra obtenida sobre
dos lminas .
2. Agregar a una lmina una gota de suero fisiolgico y a la otra aplicar una gota del colorante azul de
metileno.
3. Cubrir las preparaciones con una laminilla cubreobjeto.
4.Observar las preparaciones con objetivo de 10x y 40x.
14
1- Membrana plasmtica,
3- Retculo endoplsmico rugoso,
5- Nucleolo,
7- Citosol (=hialoplasma),
9- Retculo endoplsmico liso,
2- Mitocondria,
4- Ribosomas,
6- Cromatina,
8- Diplosoma (=centriolos),
10- Aparato de Golgi
15
HONGOS PLURICELULARES
Aspergillius
Penicillium :
1. Conidiforo
16
2. Mtula
3. Filide
4. Esporas
CUESTIONARIO.
1. Cmo se define a una clula epitelial, qu funcin tienen y cuantos tipos tejido epiteliales se reconocen.
2. Cules son los componentes y como est estructurado las paredes celulares de las bacterias, hongos y vegetales
3. Defina tincin vital y supravital
4. Qu es el lugol, cual es formula y cules son sus aplicaciones..
V.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
17
I.OBJETIVO
Observar los fenmenos de difusin y smosis y su importancia para la clula.
II.MATERIALES
Lminas portaobjeto
Laminillas cubreobjetos
Tubos de prueba
Microscopios
Lancetas hematolgicas
Solucin de NaCl al 0.4%
Solucin de NaCl al 0.9%
Solucin de NaCl al 2.0%
Agua destilada
Alcohol 96C
Algodn estril
Pipetas Pasteur para cada
Gradillas
Microscopios
Papel lente
Conteiner de descarte
(medio HIPOTONICO)
(medio ISOTONICO)
(medio HIPERTONICO)
solucin
III. PROCEDIMIENTO
A) Experimento con eritrocitos (clula animal):
1.Recepcionar tubos de prueba perfectamente rotulados conteniendo:
En el 1er. tubo: 3 ml. de Sol. NaCl al 0.4 %
En el 2do. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 0.9 %
En el 3er. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 2.0 %
1.
2.
IV. RESULTADO:
18
MUESTRA
MEDIO
Hipotnica
Isotnica
Hipertnica
Hipotnica
Isotnica
Hipertnica
VI. CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
V.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
19
FENMENO
I.
OBJETIVO:
Mediante el empleo de la tcnica de coloracin vital se observarn las mitocondrias presentes slo en el
citoplasma de las clulas Eucariotas, que vienen a constituir las centrales de energa porque producen
y almacenan energa bajo la forma de ATP.
Las clulas tienen vesculas membranosas que contienen enzimas hidrolticas que permiten la digestin
intracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales pueden pueden ser identificados en
protozoarios con una tincin vital.
Con el uso de suero fisiolgico observar plastidos en las clulas vegetales eucariticas, los que
contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias, como los Leucoplastos que son
plastidos incoloros, los Amiloplastos que acumulan almidn, los Proteinoplastos que acumulan
protenas, los Elaioplastos que acumulan grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plastidos
coloreados como el Caroteno que presenta un pigmento de color naranja, el Licopeno de color rojo, la
Xantofila de color amarillo y los Cloroplastos que presentan un pigmento de color verde y cuya
funcin principal es realizar la fotosntesis.
II.
III.
PROCEDIMIENTO:
A) OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL:
1.Con una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa bucal,
2.Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lmina,
3.Dejar secar la lmina con la muestra al medio ambiente,
4.Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos,
20
Seleccionar una hoja joven de Elodea, colocarla sobre una gota de agua en una lamina portaobjeto.
Cubrir la muestra con una laminilla.
Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento.
CROMOPLASTOS: Son organelas coloreados y presentan formas variadas (redondas, elpticas, o
aciculares).
1.
2.
3.
4.
Realizar cortes finos de zanahoria, aj amarillo, betarraga sobre una lmina portaobjetos
Colocar una gota de agua sobre el corte.
Cubrir con una laminilla.
Observar al microscopio con objetivos de menor y mayor aumento.
AMILOPLASTO: Son organelas que contienen almidn como sustancia de reserva.
1.
2.
3.
4.
IV.
PROTOCOLO:
MUESTRAS
EPITELIO BUCAL
CULTIVO
PROTOZOARIO
HOJA DE ELODEA
AJI AMARILLO
ZANAHORIA
BETARRAGA
PAPA
21
40 X
TIPO DE ORGANELA
PLASTIDIO
V. CUESTIONARIO
1.
2.
3.
4.
VI.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
22
I. OBJETIVO:
Conocer el mecanismo de accin de las enzimas durante una reaccin qumica.
Conocer cmo acta un catalizador.
II. MATERIALES:
Gradilla
Mortero con piln
Tubos de prueba de 16 x150 /13x100
Agua oxigenada
Dixido de Manganeso
Azul de metileno
Aceite
Succinato
sodio 0,1M
Buffer Fosfato pH7.4
NaCl 0,9%
Bistur
Mechero de alcohol
Hgado de pollo
Hisopos
Fsforos
Pipetas pasteurss
Pipetas1ml
Cloruro de sodio
Gradilla
Placas Petri
III. FUNDAMENTACION:
Las Enzimas tienen como funcin acelerar la velocidad de una reaccin qumica. El mecanismo de accin se
realiza de la siguiente manera:
Unin de un Sustrato a la Enzima para formar un Complejo Enzima- Sustrato y desdoblamiento del complejo
formado para liberar los Productos.
E+S E-SE+P
IV. PROCEDIMIENTO:
a. Actividad de la Enzima Catalasa
MnO2 + 2 H2O2
Catalasa + 2 H2O2
2 H2O + O2 + MnO2
2 H2O + O2 + Catalasa
3) Agregar al:
Tubo 1: cucharita de Hgado de pollo entero
Tubo 2: cucharadita de Hgado de pollo triturado
Tubo 3: 2 g. Dixido de Manganeso
4) Colocar a cada tubo el palito de Ignicin encendido en la boca del tubo
23
V. CUESTIONARIO:
1)
2)
3)
4)
VI.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
24
PRACTICA N 11
I.
OBJETIVOS
Determinar la presencia de elementos figurados presentes en una muestra de sangre perifrica humana,
mediante el uso de una coloracin diferencial.
Observar la presencia de ncleos en su interior.
II.
MATERIALES
Microscopios
Colorante Wright o Giemsa
Alcohol yodado
Agua destilada
Lminas portaobjetos limpias y desengrasadas
Lancetas hematolgicas
Algodn estril
Varillas de coloracin
Lminas coloreadas de sangre con Wright
Papel lente.
Aceite de cedro
Guantes
Conteiner de descarte
III. PROCEDIMIENTO
A.
B.
Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodn y con una lanceta estril punzar el dedo y
dejar caer una gota de sangre sobre un extremo de la lmina portaobjetos.
Con ayuda de otra lmina portaobjeto formar un ngulo de 45 y realizar un frotis, tratando de
esparcir homogneamente la gota de sangre sobre la superficie de la lmina.
Dejar secar la preparacin y proceder luego a la coloracin con Wright o Giemsa.
Coloracin
1.
Cubrir el frotis con colorante Wright o Leishman por 1 minuto.
2.Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 minutos.
3.Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de cao.
4.Dejar secar la lmina coloreada.
5.Una vez que la lmina coloreada a secado, observar al microscopio con el objetivo de 100 X y aceite
de inmersin.
IV. PROTOCOLO
25
1.
LEUCOCITOS GRANULARES:
a)
Neutrfilos segmentados: presenta un ncleo con varios lbulos (2-5) unidas por bandas de
cromatinas.
2.
LEUCOCITOS AGRANULARES:
a)
Linfocitos: De forma redonda o irregular, su ncleo es morado, voluminoso y ocupa la mayor parte
de la clula, el citoplasma es azul y sin granulaciones. Su nmero aumenta con las infecciones.
b)Monocitos: De forma redonda u ovalada, ncleo variable generalmente en forma de rin, citoplasma
sin grnulos. Presenta una gran actividad fagocitaria.
3.
PLAQUETAS:
Las ms pequeas de las clulas de la sangre, de forma redonda y no contienen hemoglobina. Son
esenciales en la coagulacin de la sangre.
4.
HEMATIES O ERITROCITOS:
De forma generalmente redonda, sin ncleo, de color rosa intenso, contiene hemoglobina. La protena que
se encarga del transporte de oxgeno y anhdrido carbnico.
Neutrofilos
26
Eosinfilos
Basfilo
Monocitos
Linfocitos
X.
CUESTIONARIO
1. Cul es la diferencia entre plasma y suero?.
2. Diga que es la frmula leucocitaria, cules son los valores normales en el adulto y qu significado tiene los
27
valores anormales.
3. Qu es la histamina y cul es su importancia?.
4. Qu es la anemia, y cul es su origen?
V.INFORME
Cartula;
Introduccin,
Marco terico.
Observaciones (esquemas) con su descripcin.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
28
PRCTICA N 12
I.
OBJETIVO:
Se estudiar la mitosis y el ciclo de divisin celular en las clulas meristemticas de la raz de Allium cepa
(cebolla).
En este sistema la poblacin celular esta en equilibrio dinmico y los cromosomas son relativamente grandes, con
un nmero diploide ( 2n =16 ).
II.
MATERIALES:
Races de cebolla
Lminas fijadas de mitosis
Placas Petri
Estiletes y pinzas
Papel de Filtro
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
Mechero de Alcohol
Orcena actica- clorhdrica
Aceite de inmersin
Papel lente
Microscopios
III.
PROCEDIMIENTO:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
29
Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeos conteniendo agua corriente, la que deber cambiarse cada 24
horas, mantener los bulbos en oscuridad a 25C y sometidos a aireacin constante.
Despus de 48 a 72 horas, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3 races del bulbo, cortar 2 cm. de la parte
apical y colocarla sobre una placa Petri que contenga Orcena.
Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta aproximadamente 60C y se observe la emisin
de vapores blancos, evitar la ebullicin del colorante.
Dejar enfriar y repetir esta operacin cuatro veces.
Enfriar y dejar reposar durante 15 minutos.
Colocar la raicilla en la lmina portaobjeto, cortar 2 mm de la punta, aadir una agota de Orcena fra, cubrir la
preparacin con laminilla.
Con la punta de un lpiz golpear suavemente la preparacin describiendo crculos concntricos para permitir la
extensin del tejido meristemtico.
Eliminar el exceso de colorante usando una tira de papel filtro.
Observar la preparacin a mayor aumento y lente de inmersin.
IV.
PROTOCOLO:
Esquematizar las diferentes fases que se observan:
Interfase:Los cromosomas no se observan al microscopio debido a que son demasiados delgados y no puede
absorber suficiente colorante para ser visible.
Profase:Fase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromtidas.
Metafase:Se observa el huso acromtico, los cromosomas estn mas condensados y cortos.
Anafase:Los cromosomas se dirigen a los polos
Telofase:Los cromosomas estn en los polos, empieza la formacin de la membrana nuclear
V.
CUESTIONARIO:
1.
2.
3.
REALIZAR ESQUEMAS:
FASE DE LA MITOSIS
30
ESQUEMAS
31
PRACTICA N 13
GRUPO SANGUINEO Y FACTOR Rh
I.
OBJETIVO:
Al finalizar la prctica el alumno debe saber qu es el grupo sanguneo, sus aplicaciones en el campo de la
medicina y el grupo sanguneo al que pertenece.
II.
GENERALIDADES:
El serlogo Karl Landsteiner, en 1900-1901 fue el primero en demostrar la existencia de grupos sanguneos y en
1938 el Comit de Higiene de la Liga de la ONU, el Congreso de Microbiologa de 1930 en Londres y la
Internacional de Transfusin Sangunea de Pars, se adopt definitivamente la clasificacin de los grupos
sanguneos humanos heredables, designados como A, B, AB, O.
III.
GRUPO SANGUINEO
ANTIGENO EN GLOBULOS
ROJOS
(AGLUTINOGENOS)
ANTICUERPOS EN PLASMA O
SUERO SANGUINEO
(AGLUTININAS)
Anti-B
Anti-A
AB
AB
Ninguno
(Receptor universal)
Ninguno
Anti-A + Anti-B
(Dador universal)
MATERIAL Y METODOS:
Lmina preparadas de frotis sanguneo
Placas excavadas de porcelana
Lancetas hematolgicas
Sueros Anti-A, Anti-B, Anti-D o Rh.
Mondadientes
Algodn
Alcohol yodado
Guantes
Conteiner de descarte
32
PROCEDIMIENTO :
1.
Limpie con algodn embebido en alcohol la yema del dedo anular.
2.Realizar la puncin utilizando una lanceta hematologa estril.
3.Coloque dos gotas de sangre por separado sobre la lmina portaobjetos, de la persona a la cual se va a realizar
la prueba y en otra lmina otra gota de sangre.
4.Agregar a cada gota de sangre una gota de suero Anti-A y Anti-B y Anti-D o Anti-Rh por separado.
5.Observar la reaccin e identificar a que grupo pertenece y que factor Eh, si es positivo o negativo
METODO DE RECONOCIMIENTO PRACTICO:
GRUPO A
Anti-A Anti-B
GRUPO B
Anti-A Anti-B
GRUPO AB GRUPO O
Anti- D o Rh (-)
V: CUESTIONARIO :
1.
2.
3.
4.
VI . INFORME ; Cartula,
Introduccin,
Marco terico.
Conclusiones.
Cuestionario.
Referencias Bibliogrficas (estilo Vancouver).
33
CDIGO GENTICO
III. OBJETIVOS:
Comprender las bases moleculares del dogma de la biologa molecular.
Usar el cdigo gentico y comprender el efecto de mutaciones y sus posibles causas.
IV. MATERIALES:
Secuencias problemas entregadas por el docente.
Lapiz, borrador.
Tabla de cdigo gentico.
34
III PROCEDIMIENTO.
Analice y complete las siguientes secuencias (en clase)
Ejemplo:
Pro
Reconocer:
Sitio de N glicosilacin: Asparragina-X-Serina o Asparragina-X-Serina-Treonina.
Sitio de O Glicosilaicon: Serina o treonina
SECUENCIA I
Segmento A:
ADN 5
35
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento B
ADN 5
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento C
ADN 5
ADN3
Mensajero
Aminocido
Analice y responda:
1.Numero de codones:
2.Numero de aminocidos empleados:
3.Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4.Sitios de Glicosilacion.
SECUENCIA II
Segmento A:
ADN 5
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento B
ADN 5
ADN3
Mensajero
Aminocido
Segmento C
ADN 5
ADN3
Mensajero
Aminocido
36
Analice y responda:
1.Numero de codones:
2.Numero de aminocidos empleados:
3.Secuencia usada por la ARN polimerasa:
4.Sitios de glicosilacin:
Secuencia C (para el informe: preste atencin a las indicaciones que dar el profesor)
*A continuacin se le entrega una secuencia de aminocidos, halle la posible secuencia nucleotdica y responda lo
siguiente:
IV.CUESTIONARIO
1.Por qu el cdigo gentico es degenerado?
2.Qu mutaciones son cruciales en el gen de hemoglobina y como atae esto la salud?
3.Explique, por qu en el cdigo gentico se utilizan tres nucletidos por codn?
4.Por qu son importantes las mutaciones?
37
38