01 Neuro

Miguel Allende.
Desarrollo Neural
El SN se origina a partir de la capa embrionaria del ectodermo. El ectodermo se divide en dos
grandes reas: el neuroectodermo y la epidermis, que va a formar el tegumento. La clulas
neuroectodrmicas estn comprometidas al linaje de ectodrmico y neural hasta que legan a ser
neuronas. En este transcurso temporal de eventos est el fenmeno d ella neurognesis, generacin de
neuronas.
Cajal y lo que vi en la retina de un gato. Cajal encontr tinciones
que tean algunas clulas y no toras. Esto es una forma de marcar
clulas y diferenciarlas una de otras.
Es importante identificar las clulas unas de toras y en el tiempo,
para hacer estudios de linaje.
Inicialmente el ectodermo es una monocapa de clulas, tiene la
especificacin de sus ejes en algn momento dado por molculas de
sealizacin o morfgenos, que definen los ejes antero-posterior y
dorso-ventral. Esta especificacin de ejes determina la especialidad de
las distintas neuronas.
El SN no es simtrico en ninguno de sus ejes.
Luego de los eventos iniciales se debe amplificar el SN. Para esto se
debe proliferar y esto debe ocurrir antes de la diferenciacin.
Las neuronas nacen y no estn en el lugar donde finalmente van a ejecutar su funcin, por lo tanto,
deben moverse. Migracin, diferenciacin estructural.
Despus de la migracin viene la diferenciacin neural, que conlleva varios pasos. Uno de los mas
importantes es el crecimiento axonal.
La muerte celular lleva consigo una depuracin de conecciones no funcionales. Esto es una MCP y
activa, inducida por el propio proceso de desarrollo.
La contribucin externa al desarrollo no es controlada
intrnsecamente y es impredecible. Esto es una cosa que
pude variar de individuo a individuo.
El desarrollo del SN por factores intrnseco es mas robusto.
Los factores internos estn relacionados con genes,
interacciones inductivas en embriognesis, movimientos de
clulas o crecimientos de axones por seales externas,
factores de sobrevivencia y las neuronas una vez
diferenciadas empiezan a tener actividad, independiente del
medio ambiente. Es decir, un individuo aislado del medio
ambiente puede hacer todas estas cosas.

El desarrollo del SN, es decir, la generacin de una mnima red puede ocurrir en ausencia de
interaccin con le medio.

Para ver de donde vienen las clulas se debe hacer linaje. Para esto se
deben marcar las clulas. Todas las clulas hijas que provienen de la
clula marcada tendrn la marca. Entonces a partir de esto se puede hacer
un mapa de linaje.
La drosphila es el modelo que mas ha aportado a entender la
neurognesis, porque es un modelo genticamente dsil, con posibilidad
de hacer mutantes, transgnicos y adems la mantencin es barata y
sencilla. Los embriones son simples e observar.
El embrin de drosphila forma su SN a partir del neuroectodermo del
embrin de drosphila que est en la parte ventral.
En el neuroectodermo ocurre un proceso progresivo de definicin de
clulas que van a ser precursoras de las neuronas.
El proceso de neurognesis consiste en pasar de una clula indefinida,
blstica a una neurona.
El desarrollo del SN y el establecimiento de una mnima red puede
ocurrir en ausencia de interaccin con le medio ambiente. Pero lo que
ocurre despus de que esa mnima red se establece y que influye en como
se sigue desarrollando el SN viene despus.
Si se tiene un animal en la oscuridad se forman los nervios pticos y se
establecen conecciones, pero el refinamiento de esas conecciones y la
formacin de un mapa retino-tectal depende de que llegue luz al ojo. Por
ejemplo si a un gato recin nacido le tapan un ojo. Los dos ojos se
desarrollan, amos nervios pticos se desarrollan, pero el nervio ptico del
ojo que est viendo luz empieza a formar su mapa y empieza a
expandirse, y adems empieza a ocupar territorio que debera estar

ocupando el mapa del otro ojo. El otro ojo empieza a degenerar y a ocupar cada vez menos espacio.
Entonces el desarrollo programado cumple su funcin, pero necesita de un estmulo externo para
obtener un desarrollo ntegro.
En el embrin de drosphila el SN se forma a partir de las clulas del neuroectodermo ventral. En el
neuroectodermo ocurre un proceso progresivo de definicin de clulas que van a ser precursoras de
neuronas. En este proceso, el de neurognesis hay diferenciacin, donde se pasan de clulas
indefinidas, blsticas a una neurona.
En neurognesis hay dos grandes grupos de genes. Uno de ellos son los genes proneurales y el otro
grupo son los neurognicos.
Los genes proneurales son FT que van a inducir la diferenciacin neuronal. Cuando aparecen los genes
proneurales, las clulas donde se expresan detienen su ciclo celular y empiezan el proceso de
diferenciacin. Los genes proneurales, que codifican para FT, se unen a genes blancos relacionados con
la diferenciacin.
Una neurona diferenciada se caracteriza por sus canales inicos, neurotransmisores y protenas de
membrana que forman axones. Los genes proneurales regulan la expresin de los canales inicos. Los
genes proneurales son llamados los reguladores maestros de la diferenciacin neural.
Para ver los genes en el desarrollo se ven con hibridacin in situ, para ver el RNA del gen o
inmunohistoqumica para ver la protena.
Se hace una hibridacin in situ para ver un gen proneural.
No hay expresin en todo el territorio, porque no hay neuronas en todo el
territorio, ya que existe una distribucin.
Lo que empieza como parche proneural, en el desarrollo se cierra y e va
restringiendo en el espacio. Los parches se hacen cada vez mas pequeos y
quedan muy concentrados en una sola clula. Esa nica clula que mantiene a
estos niveles de expresin del gen proneural es precisamente la que se interna
y entra en proceso de diferenciacin.

si se sigue el destino de la nica clula que expresa los

genes proneurales es la que se inserta en el centro. Esta
clula es la que se va a dividir. Todas estas clulas se
acumulan adentro y forman ganglios (congregacin de
neuronas).
Entonces primero se tiene el parche proneural , luego se
tiene la restriccin a una clula. Con una buena
microscopa se puede detectar la clula que se internaliza
y se podra tambin hacer una ablacin de esa clula. Al
hacer esto no ocurre una prdida del ganglio de este
sector, sino que otra de las clulas del neuroectodermo
adquiere las propiedades de la clula ablada y se
internaliza, lo que en el fondo es rescatar esa prdida. Esto significa que aqu existe un sistema plstico
o modificable que selecciona una clula para transformarse en una neurona, pero las otras clulas no
pierden la capacidad de hacer lo mismo si son requeridas para hacerlo.
Entonces cual es el mecanismo en
que se elige a una clula y si esa clula est
ausente otro proceso se inicia para elegir una
segunda clula.
Los genes neurognicos, Notch y
Delta, se descubrieron en mutantes, estn
relacionados en un proceso de inhibicin
lateral.
Los genes de Notch y Delta codifican para
protenas de membrana que tienen parte de
la protena en el medio extracelular. Una de
las protenas es un ligando y el otro es un
receptor. Cuando clulas vecinas estn
cerca, el ligando y el receptor pueden
interactuar. Todas las clulas expresan
iguales niveles de ligando y receptor.

Delta al actuar como ligando y unirse al receptor Notch genera que Notch sufra un clivaje en un pedazo
de la protena, que va al ncleo y tiene dos consecuencias es trozo de protena que va al ncleo, a nivel
del ncleo hace una regulacin de la expresin donde primero reprime genes relacionados a la
diferenciacin y segundo reprime la produccin del ligando Delta en esa clula. Este es un estado
proliferativo y no diferenciado.
Hay una competencia, los genes proneurales estn tratando de que la
clula se diferencia y la va Notch est reprimiendo ese proceso.
Si el balance notch delta se ve perjudicado o alterado y una tiene un poco
mas de delta que la otra, se tiene un desbalance que se precipita en una
diferencia muy grande en sealizacin notch entre las dos clulas.
Entonces una clula con un poco mas de delta sealiza a la clula vecina,
hay activa sealizacin notch con represin de la especializacin y
represin de delta.
Como en una clula hay un poco mas de delta est incidiendo en hacer un
poco mas de sealizacin notch en la clula vecina. Si eso ocurre hay
cada vez menos delta, porque est siendo cada vez mas reprimida por la
sealizacin notch. Entonces como tiene menos delta es menos capaz de
estimular a notch en la clula contraria. Por lo tanto esta represin
empieza a bajar hasta que ya no ocurre y empieza la diferenciacin o
especializacin celular. El mecanismo de desequilibrio de sealizacin notch es poco claro.

La clula central acumula mas delta y las vecinas acumulan menos delta. El desequilibrio hace que la

clula central aumente sus niveles de delta y las otras lo bajen a cero y se genera esta transformacin de
un parche a una nica clula. La consecuencia de eso es que en la clula central se acumulan genes
proneurales y por eso se ve una gran mancha proneural que se concentra en un parche mas chico, que
pasa a un parche de clula nica por el proceso de inhibicin lateral.
Cuando notch es activado genera la sntesis de represor transcripcional que reprime los genes
proneurales. Los genes proneurales estimulan delta. Notch inhibe la diferenciacin a travs de la
inhibicin de los genes proneurales. Esto tiene una consecuencia sobre la expresin de delta, que es el
ligando. Por lo tanto si se desequilibra esto y se produce mas delta en esta clula, la otra tiene cada vez
menos delta y mas sealizacin notch (flecha mas chica).
Si uno desea saber cual es la neurona, es la que da positivo al gen
proneural en una hibridacin in situ. La clula indiferenciada es positiva
para Notch y para el inhibidor transcripcional.
Las clulas vecinas que acumulan menos delta tiene tres destinos
posibles, pueden formar otros tipos celulares como gla o pueden formar
precursores indiferenciados. La tercera opcin es que quede como stem
cell.
Las clulas troncales del cerebro adulto existen debido a que en desarrollo
estas clulas fueron apartadas en un proceso de inhibicin lateral, para
producir neuronas en un proceso de dao.
Todos los genes identificados en drosphila tienen el nombre del fenotipo
mutante.
Mutante eyes en drosphila. Eyes es un gen que tiene que ver con la formacin de los ojos, entonces
mutante eyes no tiene ojos.
Un mutante neurognico tiene mas neurognesis del
silvestre, debido a que si no hay notch o delta no hay
interaccin con las clulas vecinas. Entonces todas
las clulas serian neuronas y no quedara reserva de
stem cells. Entonces el mutante neurognico tiene
mas neuronas de las que debera tener, comparado
con WT.
El mutante neurognico hace su parche y no puede
restringir el parche a una sola clula, fabrica muchos
neuroblastos y por lo tanto muchas neuronas. El
mutante proneural no tiene ni parches porque eno
tiene la expresin del gen que va a definir la
formacin de neuronas en este vaso da lo mismo que
tenga inhibicin lateral. No va a tener ninguna
neurona.
Entonces mutacin de genes proneurales el fenotipo
es ausencia de neuronas y mutantes neurognicos, el

fenotipo es exceso de neuronas.

En el
contexto
del
adulto,
la

inhibicin lateral opera de manera distinta. Una clula sensorial madre, una especie de neuroblasto,
sufre una serie de divisiones para producir una clula glial, la neurona, shaft cell. La inhibicin lateral
funciona en este contexto en este tipo de clulas para hacer la distincin entre los distintos tipos de
clulas que van a surgir, llegando finalmente a que se produzca una sola neurona y el resto de las
clulas adopten caractersticas de clulas de soporte o de apoyo. Aqu hay un proceso que est actuando
por encima del proceso de inhibicin lateral, que es lo que se llama divisiones asimtricas. Se tiene una
clula aislada, cuyas clulas hijas tienen destinos diferentes.

cuando hay divisiones celulares donde la va notch-delta acta por inhibicin lateral, lo que hay
es una protena, entre otras, que se llama numb, que se distribuye asimtricamente en la divisin
celular. Entonces si la divisin ocurre en cierto plano y el numb se distribuye en la corteza cerebral,
cerca de la membrana, regulado por el citoesqueleto. Cuando ocurre la divisin, numb queda
concentrado en una clula y muy disperso o casi nada en la otra clula. D esa manera una clula
blstica puede generar 4 clulas distintas.
Numb es un inhibidor del dominio intracelular de notch. Entonces si numb est presente en una
sola de las clulas hijas, significa que esta clula tiene menos actividad notch y genera mas delta.
Entonces este es el mecanismo que genera el desequilibrio.
Entonces la clula que hereda la protena numb, como inhibe la va notch y produce mas delta,
tambin producen mas genes proneural y adoptan el fenotipo neural.
No notch function significa que se tienen las divisiones asimtricas, pero da igual, solo se pueden hacer
dos cosas distintas, no cuatro, no hay regulacin fina.
Ausencia de numb, hay actividad notch en todos lados, pero no genera neuronas.
Hay dos tipos de inhibicin lateral, uno en un campo de clulas, donde se hace un cluster a clula nica
y otro donde el sistema de inhibicin lateral viene controlado por divisiones asimtricas donde se

distribuye asimtricamente una protena que influye sobre la actividad notch.

Las neuronas motoras quedan en ventral y las sensoriales en dorsal.
Un mutante delta, mutante neurognico. En vez de ver neuronas espaciadas se ve un gran aumento en
la marca del gen.
La neurognesis en los vertebrados ocurre gracias a la accin de los genes neurognicos que actan por
inhibicin lateral tanto en campos de clulas como en divisiones asimtricas. Tambin estn los genes
proneurales.
Si uno agrega un gen proneural, llamado NeuroD. Se inyecta el mRNA de este gen proneural en un
embrin de Xenopus. En Xenopus, en estado de dos clulas si se inyecta algo en un lado se expresa en
ese lado y en el otro no, entonces se tiene un lado control y el otro lado con lo que se inyect.

la neurogenina es un gen proneural que se

expresa antes que NeuroD.

Las neural stem cells se dividen asimtricamente. La primera

divisin asimtrica es la ms importante, ya que es la que recupera
la stem cells, una de las hijas es igual a la madre y tiene la misma multipotencialidad o
pluripotencialidad. Si esta divisin no rescata la stem cell, sta se pierde. Esta divisin asimtrica es
generada por la via notch-delta.
El progenitor glial genera dos clulas distintas, astrocitos y oligodendrocitos, por divisin asimtrica.
Un precursor neuronal, genera dos neuronas. En este caso no est operando el mecanismo de inhibicin
lateral, sino que se est dejando que se manifiesta en las dos clulas hijas el compromiso que adquiri
esa clula.

Pez cebra, tiene un SN. Hair cells, clulas mecanotransductoras. En humanos el anlogo son clulas
ciliadas del odo, para escuchar y otro para el equilibrio. Cuando entran ondas mecnicas propagadas
en el aire se amplifican y las clulas son deflactadas dependiendo la frecuencia de sonido en que
vienen.
En peces las hair cells estn afuera. Como estn en un medio acutico pueden sentir ondas propagadas
a cortas distancias, son parte del SN perifrico. Este sistema surge por clulas precursoras, que son
migratorias, que es un fenmeno clave en la neurognesis. Estas clulas nacen al lado de las clulas del
odo. Cuando van migrando el primordio migratorio dejan una especie de estela en el camino. Esta
estela en algunos lugares tiene clusters de clula que se van diferenciando. Hay un sistema de
neurognesis que vienen de clulas precursoras que tienen la propiedad de migrar, forman
morfognesis y segregacin de grupos clulas, y adems cada uno de los rganos tienen inervacin
nerviosa. Las clulas ciliadas tienen inervaciones por axones del SN, y esto genera un circuito
mecanosensor.
Expresin de ath1. Gen proneural de clulas mecanosensoriales. Se observan parches y en un mutante
mindbomb se observan parches mas grandes.
Junto con la migracin del primordio est el crecimiento axonal. El axn pionero viene desde un
ganglio que se conecta con el SN y lo va siguiendo. Luego vienen otros axones y van inervando el
rgano sensorial.
Si se estimula al pez por la cabeza o por la cola, el pez arranca siempre del estmulo. El pez sabe lo que
es cabeza y lo que es cola porque el ganglio que inerva a los rganos sensoriales se conecta con el SN
respetando un mapa sensorial o un mapa llamado somatotpico.