Professional Documents
Culture Documents
2. Tabung berisi sampel DNA tersebut disentrifugasi dengan kecepatan 13.200 rpm selama
5 menit. Pasca sentrifugasi akan terpisah antara medium cair (supernatant) dengan
endapan sel.
3. Tambahkan 200 L reagent A ke dalam sampel DNA, campurkan dengan bantuan vortex.
4. Dingikan sampel DNA pada suhu kamar, kemudian tambahkan 200 L reagent B.
Campurkan dengan bantuan vortex.
5. Tambahkan 400 L reagent C. Campurkan dengan membolak-balik tabung sentrifugasi,
kemudian diamkan selama 1 menit.
6. Lakukan sentrifugasi dengan kecepatan 13.200 rpm selama 5 menit. Buang medium cair
(supernatant) dengan menggunakan pipet.
7. Diamkan selama 15 menit atau hingga tidak terdapat sisa percikan cairan pada tabung
sampel DNA.
8. Tambahkan 30 akua destilata. Sampel DNA siap digunakan pada proses selanjutnya atau
disimpan dalam suhu 20C sebelum digunakan.
PCR mix
22,25 L
DNA polymerase
0,25 L
Sampel DNA
2,5 L
3. Masukkan tabung ke dalam mesin amplifikasi PCR dengan siklus sebagai berikut :
Temperatur (C)
95
94
55
72
72
16
Durasi
Jumlah Siklus
15 menit
1
15 detik
40
30 detik
40
1 menit
40
5 menit
1
Inkubasi sebelum tahap selanjutnya