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Las colonias individuales de Staphylococcus crecidas sobre agar nutritivo son opacas,
con bordes definidos, circulares, convexas y de 1 a 4 mm en diámetro. El clásico color
amarillo oro de las colonias de S. aureus es debido a la presencia de carotenoides
(aureus en latín significa oro).
Sin embargo, miembros de los otros tres géneros podrían ser eventualmente
encontrados contaminando muestras clínicas mal tomadas o procesadas, o bien, en otro
tipos de muestras no clínicas (alimentos, plantas). Las principales características de los
géneros de la familia Micrococcaceae y de otros géneros de cocos Gram-positivos se
muestran en el cuadro 3.
La morfología colonial es una ayuda muy útil que puede guiar a una identificación
presuntiva de Staphylococcus.
En medio no selectivos, como agar sangre, agar tripticasa soya y otros, la mayoría
de los Staphylococcus producen colonias de 1-3 mm de diámetro en las primeras 18- 24
horas de incubación, alcanzando a veces hasta 8 mm de diámetro en incubaciones por 5
días a 37oC.
3. Cronograma de actividades
Día 1.
1• Entrega de cultivos.
2• Inocular en una placa de agar sangre e incubar a 35-37oC en jarra con candela por 18-
24 horas.
3• Inocular una placa de agar manitol-sal e incubar 35-370C por 18-24 horas.
4• Realizar frotis y tinción de Gram
Día 2.
1• Describir la morfología colonial en cada uno de los medios utilizados.
2• Realizar frotis y tinción de Gram.
3• Describir la morfología microscópica.
4• Realizar la prueba de catalasa. Utilizar cepas de S. aureus y Enterococcus sp. como
controles positivo y negativo, respectivamente.
5• Realizar la prueba de coagulasa utilizando plasma humano en un tubo 12 mm x 75 mm
e inocular densamente con la bacteria. Incubar en baño maría a 35-370C por 18-24 horas
y observar por aparición de un coágulo. Utilizar cepas de S. aureus y S epidermidis como
controles positivo y negativo, respectivamente.
6• Inocular por estría un tubo de agar P conteniendo novobiocina (1.6 μg/ml) e incube a
35-370C por 18-24 horas.
7• Calentar en baño maría hasta ebullición un tubo de tioglicolato. Dejarlo enfriar a
temperatura ambiente e inocular la bacteria hasta el fondo de los tubos. Incubar a 35-37 0C
por 48 horas.
Día 3.
1• Realizar la lectura de las pruebas a las 24 horas, según lo indicado, para las siguientes
pruebas:
Coagulasa.
Crecimiento en anaerobiosis en caldo tioglicolato.
Crecimiento en agar P conteniendo 1.6 μg/ml de novobiocina.
5. Discusión de resultados.
1. ¿Para que se utiliza la prueba de resistencia a la bacitracina en la identificación de
Staphylococcus?
2. ¿Cuál es la utilidad práctica de la prueba de la resistencia a novobiocina?
2. ¿Por que para las pruebas de utilización de carbohidratos para Staphylococcus se
utilizan medios sólidos y no medios líquidos?
Rojas, Norma, Bacteriología DIAGNOSTICA, Universidad de costa rica, Facultad de microbiología