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INTRODUCCIN
Internacionales (UI) en las prcticas
La curva de calibrado es un mtodo
de cintica enzimtica.
de qumica analtica empleado para
medir la concentracin de una
RESULTADOS
sustancia en una muestra por
Absorbancias
Tubos
Absorbancia
comparacin con una serie de
Testigo
0
elementos
de
concentracin
Tubos 1
0.023
conocida. Se basa en la existencia
Tubos
2
0.139
de una relacin en principio lineal
Tubos 3
0.311
entre un carcter medible (por
Tubos 4
1.130
ejemplo la absorbancia en los
Tabla No. 1. Absorbancias obtenidas
enfoques de espectrofotometra) y
de los azucares reductores
la
variable
a
determinar(concentracin).
Para
Clculos
ello, se efectan diluciones de unas
[Glucosa-Fructosa]= 0.010M
muestras de contenido conocido y
Tubo 1= 1x10-6M = 1M
se produce su lectura y el
Tubo 2= 2x10-6M = 2M
consiguiente establecimiento de
Tubo 3= 4x10-6M = 4M
una
funcin
matemtica
que
Tubo 4= 8x10-6M = 8M
relacione ambas; despus, se lee el
1.2
mismo carcter en la muestra
1
problema y, mediante la sustitucin
0.8
de la variable independiente de esa
funcin, se obtiene la concentracin
Absorbancia 0.6
0.4
de esta. Se dice pues que la
Linear ()
respuesta de la muestra puede
0.2
cuantificarse y, empleando la curva
0
0123456789
de calibracin, se puede interpolar
el dato de la muestra problema
[Glucosa-Fructosa M]
hasta encontrar la concentracin del
analito. Las curvas de calibracin
suelen poseer al menos una fase de
respuesta lineal sobre la que se
realiza un test estadstico de
regresin para evaluar su fiabilidad.
OBJETIVOS
Obtener una curva de calibracin,
mediante la cual se puedan
transformar
las
lecturas
de
absorbancia
obtenidas
en
los
experimentos
de
cintica
enzimtica, en micromoles de
azcar reductor, para de esta
manera calcular la actividad de la
enzima invertasa en Unidades