Professional Documents
Culture Documents
PRACTICA N 3
MEDIOS DE CULTIVO
RESUMEN:
Durante la prctica se realiz la preparacin de medios de cultivo teniendo
en cuenta la teora encontrada en el manual de laboratorio y las
especificaciones dadas por el docente. Esta consisti primeramente en
realizar los clculos para determinar las cantidades (agar y caldo nutritivo)
que se deban mezclar respecto al volumen que se iba a trabajar. Para el
caso del agar se pesaron 4.1 g para una solucin de 145 ml. Posteriormente
se llev el agar a calentamiento hasta punto de ebullicin, se dej enfriar y se
sirvi en 2 tubos de ensayo de a 10 ml de la solucin, se llev a esterilizacin
en autoclave durante 20 min y por ltimo se sirvi el cultivo en 5 cajas de
Petri y se llev a refrigeracin. Para el caldo nutritivo se pesaron 0.09 g para
una solucin de 7 ml, y la mezcla obtenida se verti directamente en un tubo
de ensayo; posteriormente se llev a esterilizacin en autoclave durante 20
min y luego a refrigeracin.
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
INTRODUCCION:
Un medio de cultivo es un sustrato
o una solucin de nutrientes que
permite
el
desarrollo
de
microorganismos.
En
las
condiciones de laboratorio para
realizar un cultivo, se debe
sembrar sobre el medio de cultivo
elegido las muestras en las que los
microorganismos van a crecer y
multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos son los seres
ms abundantes de la tierra,
pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y
tensin de oxgeno, colonizando
una amplia diversidad de nichos
ecolgicos.
Entre
los
requerimientos ms importantes
para su desarrollo estn el
carbono, el oxgeno, nitrgeno,
dixido de carbono e hidrgeno.
Muchas bacterias sin embargo
necesitan del aporte extra de
factores de crecimiento especficos
en forma de suero, sangre y
extracto de levadura entre otros.(1)
Podemos
decir
que
la
microbiologa
empieza
su
verdadero desarrollo como ciencia
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
incorporando indicadores de pH a
la composicin de ciertos medios
con lo cual se poda observar la
produccin de cidos en la
fermentacin
en
ciertos
microorganismos.(2)
Agar nutritivo:
El Agar nutritivo es un medio de
cultivo usado normalmente como
rutina para todo tipo de bacteria.
Es muy util porque permanece
solido incluso a relativas altas
temperaturas.
Adems,
el
crecimiento bacteriano en este
agar lo hace en la superficie, por lo
que se distinguen mejor las
colonias pequeas.
En un caldo de nutrientes, la
bacteria crece en el lquido, y
aparece como una sustancia
espesa, con colonias difcilmente
observables. El agar nutritivo
contiene normalmente (w/v).(3)
0.5 % Peptona
0.3
%
extracto
de
carne/extracto de levadura
1.5 % agar
0.5% NaCl
Agua destilada
pH casi neutro (6.8) a 25 C.
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
MATERIALES:
METODOS:
MEDIOS DE CULTIVO
En un Erlenmeyer Disolver
agar en el agua destilada
posteriormente
llevar
calentamiento hasta punto
ebullicin; dejar enfriar.
el
y
a
de
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
Despus de la esterilizacin se
coloca un tubo en forma y otro
inclinado.
Se
realiza
el
mismo
procedimiento para el caldo a
excepcin de que este no se lleva
a calentamiento sino que se vierte
directamente en el tubo de
ensayo y se lleva a esterilizacin.
Al finalizar marcar debidamente
con el nombre del material y
cantidad.
Tanto las cajas de Petri como los
tubos de ensayo se llevan a
refrigeracin.
RESULTADOS:
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
Solucin de
esterilizacin.
agar
despus
de
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
DISCUSIN:
Para la realizacin correcta de los
medios de cultivo se necesita
contar con las condiciones ptimas
de incubacin como temperatura,
presin y condiciones atmosfricas
(concentracin de O2) para que
as el cultivo no se contamine por
diversos factores.
Durante el servido en las cajas de
Petri es importante esterilizar la
boquilla del Erlenmeyer a la llama
del mechero con el fin de eliminar
todos
los
microorganismos
presentes en este por aires de
corriente que puedan contaminar el
cultivo.
El agar-agar es un extracto
obtenido con agua caliente a pH
ligeramente cido a partir de un
heteropolisacrido formado por
molculas de -D-galactosa, 3,6anhidro--L-galactosa, con un 5 a
10% de steres de sulfato y algo
de cido D-galacturnico. Sus
geles
son
muy
resistentes
mecnicamente y estables al calor
(FENEMA, 2000). Por lo tanto son
tiles en los laboratorios de
microbiologa para la observacin
de
cultivos
debido
a
la
transparencia a la que luego se
tornan.
CONCLUSIONES:
Esta prctica se realiz con la
finalidad
de
conocer
los
componentes de los medios de
cultivo as mismo como la cantidad
que se requiere de cada uno de las
sustancias
utilizadas
en
la
preparacin de estos.
De acuerdo con lo realizado en la
presente prctica se concluye que
es de gran importancia preparar
Universidad de Pamplona
Pamplona - Norte de Santander - Colombia
Tels: (7) 5685303 - 5685304 - 5685305 - Fax: 5682750 - www.unipamplona.edu.co
ANEXOS:
Clculos:
Para el agar:
5 cajas de Petri x 25 ml = 125 ml + 20 ml Tubos de ensayo = 145 ml
1000 ml
145 ml
X= 4,1 g
28g
x
13 g
x