UNIVERSIDAD GALILEO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

LICENCIATURA EN QUMICA BIOLGICA
CURSO DE BIOQUMICA
PRACTICA NO. 2
USO DEL POTENCIMETRO PARA MEDICIN DEL PH
Introduccin
Las mediciones de pH en algunos fluidos corporales son de gran ayuda en
el diagnstico de enfermedades. En algunos fluidos es normal y deseable poseer un
pH cido mientras que en otros, pH neutro o hasta bsico. Un mdico debe
comprender a cabalidad el significado del valor del pH no solamente como
herramienta de diagnstico, sino para comprender el proceso metablico que
puede estar provocando la alteracin de este valor, as como la forma correcta
tratarlo y corregirlo. En esta prctica se pretende reforzar el concepto de pH y
de mostrar al alumno la forma como se determina el pH de una solucin y las
causas de su desviacin, usando un ejemplo similar al utilizado en el control del
pH en sangre a travs del proceso de respiracin.
Objetivos
Que el estudiante
1. Conozca el concepto de pH de una solucin.
2. Se inicie en el manejo de soluciones buffer
3. Conozca la utilidad del pH como parmetro de anlisis de varios
fluidos corporales.
4. Determine el pH de una muestra desconocida.
Alcance
Que el estudiante
1. Conozca el manejo general de un potencimetro.
2. Conozca las precauciones que deben tomarse al manejar un potencimetro
3. Indique los factores que pueden influenciar en la medicin del pH de
una solucin
Antecedentes
Debido a que el agua es el medio de los sistemas biolgicos, es
indispensable considerar el rol de esta molcula en disociacin de iones de las
molculas biolgicas. Aunque el agua es en esencia una molcula neutra, se
ioniza en una pequea proporcin. Esta disociacin puede describirse con una
ecuacin de equilibrio simple:
+

H2O H + OH
Expresar la concentracin de hidrgenos en una solucin puede ser tediosa, ya
que las concentraciones posibles cubren un amplio rango. Una forma sencilla de
hacerlo es expresando en forma de pH, el cual se define como sigue:
+

pH = -log[H ]
Los cidos pueden defnirse como donadores de protones, mientras que las
bases pueden considerarse aceptores de protones. En trminos de pH, los cidos
poseen valores de pH por debajo de 7.0, mientras que las bases lo poseen por
encima del mismo valor. Los cidos y bases fuertes se disocian por completo en
medio acuoso, formando un grupo de tomos con carga positiva (cationes) y otro

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con carga negativa (aniones); por el contrario, los cidos y bases dbiles se ionizan
levemente produciendo un equilibrio entre la especie molecular neutra y los
iones producidos. Debe notarse que, al estar en este equilibrio, el pH de la
solucin que contiene la especie no cambia ni aunque se agreguen volmenes
relativamente grandes de cido o base. Este fenmeno se conoce como
amortiguacin y es de suma importancia en los sistemas bioqumicos del cuerpo
humano. En la mayora de estudios bioqumicos, es importante realizar los
+
experimentos que requieren el consumo de iones H u OH en una solucin de un
agente amortiguador que posee un pH de equilibrio (tambin conocido como pK)
muy cercano al pH ptimo para el experimento.
Un ejemplo: amortiguacin en la sangre
El valor del pH en la sangre se mantiene dentro de un rango muy
limitado alrededor de 7.4. An cambios relativamente pequeos desde este
valor pueden causar graves consecuencias metablicas. Por lo tanto, el
organismo recurre a amortiguacin para mantener la homeostasis. Aunque la
sangre contiene muchos tipos
+
+
2+
2+
32de cationes (Na , K , Ca y Mg ) y aniones (Cl , PO4 y SO )4 que pueden actuar
en la amortiguacin, los principales amortiguadores de la sangre son la
hemoglobina en los eritrocitos y el ion bicarbonato en el plasma. En el caso de la
hemoglobina, la amortiguacin se logra por la ionizacin de los anillos imidazol de
las histidinas dentro de la protena.
La formacin del ion bicarbonato a partir de CO2 y H2O permite la transferencia
del CO2 relativamente insoluble de los tejidos a los pulmones, donde se expulsa.
La principal fuente de CO2 en los tejidos es la oxidacin de los compuestos de
carbono ingeridos. La relacin entre el cido carbnico y el ion bicarbonato
formado se muestra en las siguientes ecuaciones.
CO2 +
H2CO3
H2CO3
HCO

H2O

Estas reacciones ocurren principalmente dentro de los eritrocitos, ya que casi

todo el CO2 que deja los tejidos por medio del endotelio capilar es atrapado por
estas clulas. La primera reaccin est catalizada por la enzima anhidrasa
carbnica. La ionizacin del cido carbnico luego ocurre de forma espontnea,
produciendo el ion bicarbonato.
Potenciomet
ra
Se conoce como potenciometra a la medicin de una diferencia de
potencial elctrico entre dos electrodos. Estas mediciones se hacen a travs de un
electrodo, el cual forma parte de un aparato mayor llamado potencimetro.
Existen varias clases de electrodos, segn el parmetro que desea medirse.
Usando un potencimetro puede medirse, por ejemplo, la concentracin de
iones, tales como calcio, sodio, potasio e hidrgeno. En el caso de las mediciones
de pH, el electrodo que se utiliza es especial, ya que detecta nicamente
+
concentracin de iones hidrgeno (H ).
Los electrodos sensibles a concentraciones de iones hidrgeno estn fabricados

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de un tipo especial de vidrio, con un grosor generalmente de 10 a 100 m.
La sensibilidad de este vidrio vara con la temperatura, por lo cual es importante
realizar las mediciones de pH a una temperatura constante. Usualmente, el vidrio
se fabrica en forma de bulbo para medir pH en soluciones y en forma plana para
medir pH en

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superficies. El caso especial de realizar mediciones de pH en sangre
requiere electrodos especiales conocidos como electrodos de capilar.
Pre Laboratorio
En su trabajo de Pre-Laboratorio, conteste claramente las siguientes
preguntas:
1. Cul es el pH normal en una muestra de orina? De una muestra de
sangre?
2. De qu depende el valor del pH de una solucin?
3. Cmo ayuda la anhidrasa carbnica a mantener constante el pH de la
sangre?
4. Qu precauciones debe tenerse con un electrodo de vidrio?
Materiales
a. Reactivos
Solucin bufer de fosfatos (fosfato cido de potasio,
fosfato dicido de potasio)
Solucin de NaOH al 0.25%
Agua destilada

b. Cristalera
Beackers de 50 o 100 mL
c.

Instrumentacin
Potencimetro
Pajilla plstica (brindada por el estudiante)
Agitador magntico
Estufa agitador

Procedimiento
I.

Medicin de pH.
a) En un beacker de 50 mL tome alrededor de 30 mL de agua destilada.
b) Mida el pH segn la explicacin del instructor.
c) Repita con una solucin de NaOH 0.25% y una solucin de fosfatos.

II. Efecto del CO2 en el pH

a) Tome el beacker con agua destilada y vulvale a medir el pH.
b)Tendiendo el electrodo dentro de la solucin y con agitacin,
sople hacia la solucin usando una pajilla durante alrededor de
diez segundos, observando los cambios en pH. Si su potencimetro
no tiene lectura continua, tome una lectura inicial antes de soplar, y
una final despus de haber soplado los diez segundos.
c) Anote sus resultados.
d) Repita con la solucin de NaOH 0.25% y la solucin buffer de fosfatos.
Observaciones importantes
En su informe, explique a qu se deben las diferencias y similitudes de
efectos del CO2 en cada resultado. Cules de las soluciones son capaces
de amortiguar el CO 2 expelido en el soplo?
Anexo

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1. Investigue cul es la importancia del control de pH tanto en orina
como en sangre.
Bibliografa de referencia
1. Burtis, C. A. y E. R. Ashwood.
2001. Fundamentals of Clinical
Chemistry. 5. Edicin.
W. B. Saunders Company. pg. 108-110
2. Kaplan, L. A. y A. J. Pesce, S. C. Kazmierczak. 2003 Clinical Chemistry.
Theory, Analysis, Correlation.
4. Edicin. Mosby, Inc. pg. 110-112