Professional Documents
Culture Documents
RESUMEN
Se pueden usar distintos tejidos para obtener preparaciones de
cromosomas; por ejemplo, sangre perifrica, medula sea, fluido amnitico y
productos de la concepcin. Aunque las tcnicas especficas difieren segn el
tejido usado, el mtodo bsico para obtener preparaciones de cromosomas es
as:
* Recoleccin de la muestra y preparacin inicial.
* Cultivo celular.
* Adicin de un inhibidor de la mitosis para detener las clulas en metafase.
* Recogida de las clulas. Este paso es muy importante para obtener
preparaciones de alta calidad. Implica exponer las clulas a una disolucin
hipotnica, seguida de una serie de disoluciones fijadoras. Esto hace que las
clulas se expandan, de modo que los cromosomas se extiendan y puedan
examinarse individualmente.
* Tincin de las preparaciones cromosmicas para detectar los posibles
cambios numricos y estructurales.
INTRODUCCIN
El ADN es el material que controla la determinacin de las
caractersticas hereditarias y est constituido por largas cadenas de
nucletidos, que asociados a protenas, se organizan en los cromosomas.
Los cromosomas contienen la informacin gentica del organismo. Cada
tipo de organismo tiene un nmero de cromosomas determinado; en la especie
humana, por ejemplo, hay 23 pares de cromosomas organizados en 8 grupos
segn el tamao y la forma. La mitad de los cromosomas proceden del padre y
la otra mitad de la madre.
Cromosomas de la mosca de la fruta
Los cromosomas de la mosca de la fruta o del vinagre, Drosophila
melanogaster, se prestan a la experimentacin gentica. Son slo 4 pares
(frente a los 23 pares de la dotacin gentica humana), uno de ellos, marcado
aqu con las letras X e Y, determina el sexo de la mosca; adems, son muy
grandes. Thomas Hunt Morgan y sus colaboradores basaron su teora de la
herencia en estudios realizados con Drosophila. Observaron que los
cromosomas pasaban de los progenitores a los descendientes segn el
mecanismo atribuido por Gregor Mendel a los caracteres heredados.
METODOLOGIA
Lo primero a realizar fue hacer un raspado suave de mejilla para
distribuir las clulas epidrmicas sobre un portaobjetos bien limpio. Lo que
hicimos, fue con un hisopo raspar la mejilla de un compaero y frotar el hisopo
sobre el portaobjetos.
Procedimos a teir la preparacin con orcena actica sobre el frotis, le
colocamos el cubreobjetos y se llevo al microscopio para observar los
corpsculos de bar.
El siguiente paso a realizar es observar cromosomas politnicos. Lo que
hicimos fue extraer una larva del tercer estadio de un cultivo maduro, se
selecciono la ms grande y ms madura. Con la ayuda de unas agujas de
disectar, colocamos una punta de la aguja sobre un extremo de la larva y la
otra aguja sobre el otro extremo y con un movimiento rpido separamos la
parte ceflica del resto del cuerpo. Luego nos deshicimos de lo que no se
utilizara. Luego transferimos las glndulas a un porta objetos limpio, y le
adicionamos una gota de acetorcena y sin dejar secar lo dejamos por 15
minutos aproximadamente para teir. Luego de esto le colocamos un
cubreobjetos y hacemos un squash sobre el tejido con cuidado de no romper el
cubreobjetos.
RESULTADOS
Clulas epidrmicas del raspado de la mejilla
Fig. 4 Bandas
Hembra
DISCUSIN
Se sabe que los cromosomas son los que transportan la informacin
hereditaria. Entonces en el primer experimento pudimos observar con claridad
las clulas epidrmicas y los corpsculos de Barr. Esto se logro ver gracias al
raspado que le hicimos a una mejilla. Luego con la larva en su tercer estadio se
observaron los cromosomas politnicos y gracias a una placa de un
compaero, observamos las bandas de los cromosomas politnicos, esto
porque se logro teir con acetorcena.
CUESTIONARIO
1. Cuntos pares de cromosomas tiene la Drosophila melanogaster,
descrbalos y dibuje como se observan en metafase?
R: La Drosophila melanogaster tiene 4 pares de cromosomas.
BIBLIOGRAFA
Batista O. David, Agosto de 2006. Manual de laboratorio de Gentica.
Universidad Autnoma de Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Departamento de Gentica. Panam, p.p. 29, 30, 31, 32, 33.
http://www.analisisclinico.es/general/analisis-cromosomico
Mitosis
Juan Avils 4-734-911
Jos Gonzles 4-750-2003
RESUMEN
La mitosis es el tipo de divisin celular de las clulas somticas a partir
de una clula madre diploide se originan dos clulas con la misma cantidad de
cromosomas y material gentico. Utilizando tejidos vegetales o animales
respectivamente se pueden observar las distintas fases de la divisin mittica,
las diferencias en cada una de estas y se puede saber el porqu de estas
diferencias entre un tejido y otro.
INTRODUCCIN
La mitosis es el tipo de divisin celular por el cual se conservan los
orgnulos y la informacin gentica contenida en sus cromosomas, que pasa
de esta manera a las clulas hijas resultantes de la mitosis. La mitosis es
igualmente un verdadero proceso de multiplicacin celular que participa en el
desarrollo, el crecimiento y la regeneracin del organismo. Este proceso tiene
lugar por medio de una serie de operaciones sucesivas que se desarrollan de
una manera continua, y que para facilitar su estudio han sido separadas en
varias etapas.
El resultado esencial de la mitosis es la continuidad de la informacin
hereditaria de la clula madre en cada una de las dos clulas hijas. El genoma
se compone de una determinada cantidad de genes organizados en
cromosomas, hebras de ADN muy enrolladas que contienen la informacin
gentica vital para la clula y el organismo. Dado que cada clula debe
contener completa la informacin gentica propia de su especie, la clula
madre debe hacer una copia de cada cromosoma antes de la mitosis, de forma
que las dos clulas hijas reciban completa la informacin. Esto ocurre durante
la fase S de la interface, el perodo que alterna con la mitosis en el ciclo celular
y en el que la clula entre otras cosas se prepara para dividirse.
Tras la duplicacin del ADN, cada cromosoma consistir en dos copias
idnticas de la misma hebra de ADN, llamadas cromtidas hermanas, unidas
entre s por una regin del cromosoma llamada centrmero. Cada cromtida
hermana no se considera en esa situacin un cromosoma en s mismo, sino
parte de un cromosoma que provisionalmente consta de dos cromtidas.
En animales y plantas, pero no siempre en hongos o protistas, la
envoltura nuclear que separa el ADN del citoplasma se desintegra,
desapareciendo la frontera que separaba el contenido nuclear del citoplasma.
Los cromosomas se ordenan en el plano ecuatorial de la clula, perpendicular
a un eje definido por un huso acromtico. ste es una estructura
citoesqueltica compleja, de forma ahusada, constituido por fibras que son
filamentos de microtbulos. Las fibras del huso dirigen el reparto de las
cromtidas hermanas, una vez producida su separacin, hacia los extremos del
huso. Por convenio cientfico, a partir de este momento cada cromtida
hermana s se considera un cromosoma completo, y empezamos a hablar de
cromosomas hermanos para referirnos a las estructuras idnticas que hasta
ese momento llambamos cromtidas. Como la clula se alarga, las fibras del
huso tiran por el centrmero a los cromosomas hermanos dirigindolos cada
uno a uno de los polos de la clula. En las mitosis ms comunes, llamadas
abiertas, la envoltura nuclear se deshace al principio de la mitosis y se forman
dos envolturas nuevas sobre los dos grupos cromosmicos al acabar. En las
mitosis cerradas, que ocurren por ejemplo en levaduras, todo el reparto ocurre
dentro del ncleo, que finalmente se estrangula para formar dos ncleos
separados.
La mitosis se completa casi siempre con la llamada citocinesis o divisin
del citoplasma. En las clulas animales la citocinesis se realiza por
estrangulacin: la clula se va estrechando por el centro hasta que al final se
separa en dos. En las clulas de las plantas se realiza por tabicacin, es decir,
las clulas hijas construyen una nueva regin de pared celular que dividir la
una de la otra dejando puentes de citoplasma (plasmodesmos). Al final, la
clula madre se parte por la mitad, dando lugar a dos clulas hijas, cada una
con una copia equivalente y completa del genoma original.
METODOLOGIA
Se coloc con anticipacin una cebolla y porotos en algodn con agua
para que emergieran las races con cuidado que el algodn no se secara. Esto
durante ocho das aproximadamente. A los ocho das de esto, se recortaron las
races ms nuevas y blancas, con bistur. Luego la fijamos en tres partes de
alcohol y una en cido actico. Esto se recomienda hacer entre 11 y 12 del da.
Una vez esto, en el laboratorio procedimos a tomar un meristemo y lo
colocamos en un portaobjetos limpio. Una vez colocado en el portaobjetos,
medimos 3 mm del extremo y cortamos. Se elimina el resto de la raz que
quedo. Adicionamos una gota de acido clorhdrico (HCl) y lo dejamos por 3
minutos, luego procedimos a lavar el meristemo 3 veces con agua. Se debe
lavar muy bien y que no quede nada de acido clorhdrico en el meristemo.
Una vez listo esto, se le adiciona una gota de colorante orcena actica.
Cuando se le adiciono la gota del colorante, con una varilla de vidrio,
presionamos firmemente y con cuidado sobre el meristemo, de tal manera que
este quede aplastado y que el material quede bien distribuido y se le coloca el
cubreobjetos en forma de squash. Realizado esto, se lleva la preparacin al
microscopio para observar las diferentes fases.
RESULTADOS
Fig. 1 Se observan las fases del ciclo celular: profase, metafase, anafase,
telofase
Profase
Metafase
Anafase
Telofase
BIBLIOGRAFA
Batista O. David, Agosto de 2006. Manual de laboratorio de Gentica.
Universidad Autnoma de Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas.
Departamento de Gentica. Panam, p.p. 29, 30, 31, 32, 33.
http://es.wikipedia.org/wiki/Mitosis
http://www.biologia.arizona.edu/cell/tutor/mitosis/cells3.html
Meiosis
Juan Avils 4-734-911
Jos Gonzles 4-750-2003
RESUMEN
Es el proceso mediante el cual se obtienen clulas especializadas para
intervenir en la reproduccin sexual. Reduce a la mitad el nmero de
cromosomas, y as al unirse las dos clulas sexuales, vuelve a restablecerse el
nmero cromosmico de la especie. Se produce una recombinacin de la
informacin gentica. La meiosis origina una gran variacin de gametos, debido
al entrecruzamiento de segmentos de los cromosomas homlogos. Con la
experiencia a realizar pudimos diferenciar las fases y etapas de cada una de
estas. Debe destacarse que si bien en la espermatognesis las cuatro clulas
derivadas de la meiosis se diferencian en espermatozoide.
INTRODUCCIN
En biologa, meiosis (del griego , disminucin) es una de las
formas de reproduccin celular. Es un proceso divisional celular, en el cual una
clula diploide (2n) experimentar dos divisiones celulares sucesivas, con la
capacidad de generar cuatro clulas haploides (n).
Este proceso se lleva a cabo en dos divisiones nucleares y
citoplasmticas, llamadas primera y segunda divisin meitica o simplemente
Meiosis I y Meiosis II. Ambas comprenden Profase, Metafase, Anafase y
Telofase.
Durante la meiosis I, los miembros de cada par homlogo de
cromosomas se unen primero y luego se separan y se distribuyen en diferentes
ncleos. En la Meiosis II, las cromtidas hermanas que forman cada
cromosoma se separan y se distribuyen en los ncleos de las clulas hijas.
Entre estas dos etapas sucesivas no existe la etapa S (duplicacin del ADN).
La meiosis no siempre es un proceso preciso; a veces los errores en la
meiosis son responsables de las principales anomalas cromosmicas. La
meiosis consigue mantener constante el nmero de cromosomas de las clulas
de la especie para mantener la informacin gentica.
Meiosis I
Profase I
La profase I de la primera divisin meitica es la etapa ms compleja del
proceso y a su vez se divide en 5 subetapas, que son:
Leptoteno:
Zigoteno:
Paquiteno:
Diploteno:
Diacinesis:
Telofase I
Cada clula hija ahora tiene la mitad del nmero de cromosomas pero
cada cromosoma consiste en un par de cromtidas. Los microtbulos que
componen la red del huso mittico desaparece, y una membrana nuclear nueva
rodea cada sistema haploide. Los cromosomas se desenrollan nuevamente
dentro de la cromatina. Ocurre la citocinesis (proceso paralelo en el que se
separa la membrana celular en las clulas animales o la formacin de esta en
las clulas vegetales, finalizando con la creacin de dos clulas hijas). Despus
suele ocurrir la intersinesis, parecido a una segunda interface, pero no es una
interface verdadera, ya que no ocurre ninguna rplica del ADN. Este proceso es
breve en todos los organismos, pero en algunos generalmente no ocurre.
Meiosis II
Profase II
Profase Temprana II
Profase Tarda II
Anafase II
Las cromtidas se separan en sus centrmeros, y un juego de
cromosomas se desplaza hacia cada polo. Durante la Anafase II las
cromtidas, unidas a fibras del huso en sus cinetocoros, se separan y se
desplazan a polos opuestos, como lo hacen en la anafase mittica. Como en la
mitosis, cada cromtida se denomina ahora cromosoma.
Telofase II
En la telofase II hay un miembro de cada par homologo en cada polo.
Cada uno es un cromosoma no duplicado. Se re ensamblan las envolturas
nucleares, desaparece el huso acromtico, los cromosomas se alargan en
forma gradual para formar hilos de cromatina, y ocurre la citocinesis. Los
acontecimientos de la profase se invierten al formarse de nuevo los nucleolos,
y la divisin celular se completa cuando la citocinesis ha producidos dos clulas
hijas. Las dos divisiones sucesivas producen cuatro ncleos haploide, cada uno
con un cromosoma de cada tipo. Cada clula resultante haploide tiene una
combinacin de genes distinta. Esta variacin gentica tiene dos fuentes: 1
Durante la meiosis, los cromosomas maternos y paternos se barajan, de modo
que cada uno de cada par se distribuye al azar en los polos de la anafase I. 2 se intercambian segmentos de ADN entre los homlogos paternos y maternos
durante el entrecruzamiento.
METODOLOGIA
Para este laboratorio procedimos a observar placas fijadas. La cuales
contenan folculo primario, folculo secundario, folculo terciario,
espermatognesis de perro, espermatozoides, tbulos seminferos y ovario.
RESULTADOS
Fig. 1 Meiosis
Fig. 2 Meiosis II
DISCUSIN
La meiosis es aquella que se caracteriza por 2 divisiones nucleares y 2
divisiones citoplasmticas. En la placa del folculo secundario se observan las
zonas pelusidas, el ovulo y unas clulas foliculares de segundo orden. En la
placa de espermatozoides, se observan los espermatozoides teidos. Se
observan claramente la cola y la cabeza del mismo. El la placa de tbulos
seminferos se observa en la parte central. La cabeza de los espermatozoides y
as dentro la cola de los espermatozoides. En la placa de folculo secundario
maduro se observan el ovulo, el liquido folicular y el estroma ovrico. Una de
las diferencias entre el folculo primario, secundario y terciario es la cantidad de
clulas que rodean al folculo.
BIBLIOGRAFA
Batista O. 2006. Manual de laboratorio de Gentica. Universidad Autnoma de
Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Departamento de Gentica.
Panam, p.p. 38, 39, 40.
http://www.altillo.com/examenes/uba/cbc/biologia/biologresumenmeiosis.asp
http://www.efn.uncor.edu/dep/biologia/intrbiol/meiosis.htm
RESUMEN
El proceso de extraccin del ADN geonmico sigue ciertas pautas para su
correcta purificacin que son muy diferentes a los empleados en la purificacin
de protenas, lo que refleja las diferencias bsicas en la estructura de estos dos
tipos de macromolculas. El primer paso en la purificacin del ADN por lo
general consiste en homogeneizar las clulas y asla los ncleos de los cuales
se extrae el ADN. El medio de extraccin ordinario contiene un detergente
(SDS); a continuaciones le agrega solucin de te para resuspender el ADN,
luego los cidos nucleicos se precipitan aadiendo etanol .Para concluir el
anlisis de la extraccin del ADN hay que resaltar que e n este proceso ocurre
una lisis celular lo cual significa que el ADN queda libre por consiguiente hay
que protegerlo de las enzimas porque estas podran degradarlo.
La electroforesis es el movimiento de partculas elctricamente cargadas a
travs de un gel de agarosa como resultado de un campo elctrico formado
entre unos electrodos sumergidos en el medio, este procedimiento permite la
separacin de molculas como consecuencia de su diferente movilidad en un
campo elctrico.
INTRODUCCIN
La molcula de ADN (que es la que se va a extraer en este laboratorio)
est constituida por dos largas cadenas de nucletidos unidas entre s
formando una doble hlice. Las dos cadenas de nucletidos que constituyen
una molcula de ADN, se mantienen unidas entre s porque se forman enlaces
entre las bases nitrogenadas de ambas cadenas que quedan enfrentadas.
La unin de las bases se realiza mediante puentes de hidrgeno, y
este apareamiento est condicionado qumicamente de forma que la adenina
(A) slo se puede unir con la Timina (T) y la Guanina (G) con la Citosina (C).
La estructura de un determinado ADN est definida por la "secuencia"
de las bases nitrogenadas en la cadena de nucletidos, residiendo
precisamente en esta secuencia de bases la informacin gentica del ADN. El
orden en el que aparecen las cuatro bases a lo largo de una cadena en el ADN
es, por tanto, crtico para la clula, ya que este orden es el que constituye las
instrucciones del programa gentico de los organismos.
Fig. 5 Microcentrifuga, dentro de ella estan los pocillos. Aqu se obtiene el pelet
de celulas blancas, centrifugando por 25 segundos.
Sobrenadante
Precipitado
TBE 1x
Fig. 8 AGAROSA
especie de una gelatina para luego hacer la extraccin, hay que recordar que la
corriente elctrica se da del nodo al Ctodo. Para poder introducir el ADN al
gel, se necesitan unos pocillos, para esto se coloca un peine. Entonces, si hay
ms ADN se coloca la peinilla en la parte ms gruesa y si hay menos ADN se
coloca en la parte ms delgada. Lo colocamos en la parte ms gruesa para que
el pocillo fuera visible. La agarosa es un polvillo y para esto se debe utilizar
guantes porque utilizamos Bromuro de etidio ya que este es txico y cancerino,
por eso cuando estamos cerca del gel o de la cmara, no colocar nuestra piel
desnuda. Se prepara un gel de agarosa al 2 %, le aadimos TBE 1x que es un
buffer, con el cual se disuelve la agarosa. Luego se llev a la microonda porque
tiene que quedar traslucida. Se dej por 70 segundos. Luego de esto se
adiciona 3 l de Bromuro de etidio a la agarosa, el Bromuro de etidio es el que
permite que se observen las bandas de ADN por exposicin a la luz ultravioleta.
Luego de esto se extrajo la muestra de sangre para extraer el ADN
genmico a partir de la sangre. Lo primero que se procede a hacer, es rotular
los tubos de sangre. Y se utilizarn tubos de micro centrfugo. Tomamos una
muestra. Mezclamos la sangre. Se vortecea para mezclar la sangre con el
buffer de lisis. Estamos lisando los glbulos blancos. Porque en los glbulos
rojos no hay ncleo y por eso no hay ADN, en cambio en los glbulos blancos
si hay. Se obtiene un pelet que es un agregado de glbulos blancos. Una vez
se es extrado esto, se procede a colocar en el gel de agarosa para luego ser
observados. Se observaran bandas de ADN, bandas que se vern claramente
por la exposicin a la luz ultravioleta
BIBLIOGRAFA
Batista O. 2006. Manual de laboratorio de Gentica. Universidad Autnoma de
Chiriqu. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Departamento de Gentica.
Panam, p.p.
http://learn.genetics.utah.edu/es/units/activities/extraction/
http://www.microbial-systems.com/web/docs/Newsletter_Microbial_03.pdf