CUANTIFICACIN DE ACETAMINOFN Y CAFENA EN UN PRODUCTO

FARMACUTICO POR ESPECTROFOTOMETRA UV-VIS

Acetaminophen and caffeine quantification in a pharmaceutical product by uv-vis
spectrophotometry
Autores: Daz Rodrguez J. W. Gutirrez Jimnez L. F. Torres Castro A. M.
Corporacin Tecnolgica de Bogot- Tecnologa en Regencia de Farmacia
Anlisis Instrumental / Bogot- Colombia/ Fecha 29/03/2016
Jdiaz27@ctb.edu.co - atorres19@ctb.edu.co lgutierrez25@ctb.edu.co
RESUMEN: El procedimiento experimental desarrollado tuvo como objetivo determinar
de forma cuantitativa, la cantidad de principios activos presentes en un producto comercial
y determinar si cumple o no con las especificaciones del mismo. En este caso, se realiz la
cuantificacin de acetaminofn y cafena en una tableta. El procedimiento se desarroll
segn parmetros descritos y que cumplen con la reglamentacin de la FDA. De acuerdo al
desarrollo obtenido, se encontr que la seal obtenida de la muestra problema es mayor a la
seal terica calculada; por lo cual se dira que el medicamento no cumple con
especificacin puesto que su concentracin va a ser mayor que la reportada. Sin embargo,
es recomendable realizar una valoracin y anlisis por HPLC, para confirmar y verificar
los datos obtenidos.
Palabras Clave: Espectrofotometra uv-vis, espectro visible, muestra problema,
transmitancia y absorbancia, acetaminofn, cafena
ABSTRACT: The experimental procedure developed was to determine quantitatively the
amount of active ingredients in a commercial product and determine whether or not it meets
the specifications. In this case, the quantification of acetaminophen and caffeine was
performed on a tablet. The procedure was developed as described parameters and complies
with FDA regulations. According to the obtained development, it was found that the signal
obtained from the test sample is greater than the theoretical calculated signal; so it seems
that the drug does not meet specification since its concentration will be higher than
reported. However, it is advisable to make an assessment and analysis by HPLC, to confirm
and verify the data.
Key Words: Uv-vis spectrophotometry, , visible spectrum, sample, transmittance and
absorbance, acetaminophen, caffeine
INTRODUCCIN:
La espectroscopia visible es una de las
tcnicas ms ampliamente y ms
frecuentemente empleadas en el anlisis
qumico. Para que una sustancia sea
activa en el visible debe ser colorida: la
presencia de color en una sustancia se
debe a que esta absorbe ciertas
frecuencias o longitudes de onda del
espectro visible y trasmite otras.

El espectrofotmetro es un instrumento
que
permite
comparar
la radiacin absorbida o transmitida por
una solucin que contiene una cantidad
desconocida de soluto y una que contiene
una cantidad conocida de la misma
sustancia. Este instrumento maneja

longitudes de onda de entre 80 nm y 800

nm.
Para tener esta relacin se emplea la Ley
de Beer, que establece que para una
misma especie absorbente en una celda de
espesor constante, la absorbancia es
directamente
proporcional
a
la
concentracin. (WALTON Y REYES,
2005).
Uno de los medicamentos ms utilizados
es el acetaminofn. Este medicamento se
puede encontrar de manera conjugada, es
decir, con otro principio activo que
mejore o ayude con su funcin
farmacolgica. Ese es el caso del
medicamento analizado en este informe.
El acetaminofn ms cafena es un
medicamento de uso comercial, el cual
gracias a la cafena, se potencializa la
accin del acetaminofn, inhibiendo la
sntesis de prostaglandinas en un menor
tiempo que el normal.

espectro visible. El equipo tiene la

capacidad de manejar un haz de radiacin
electromagntica que atraviesa una
sustancia y parte de la energa es
adsorbida. Y su funcionamiento esta basa
en la ley de Lambert Beer
Transmitancia y absorbancia
En el momento en el que un rayo de luz
con una intensidad y una longitud de onda
determinada, incide sobre una sustancia
dicha sustancian adsorbe la luz. La
sustancia absorbe parte la luz que incide y
deja pasar el resto de tal manera que se
cumple siempre esta ecuacin.
Intensidad inicial = la intensidad
absorbida + intensidad trasmitida.
La transmitancia es la relacin entre la
cantidad de luz trasmitida que atraves la
sustancia llego al transductor, y la
cantidad de luz inicial.

La FDA (Food and Drug Administration)

establece la espectrofotometra UV como
mtodo
de
referencia
para
la
cuantificacin de acetaminofn. Esta
tcnica es el mtodo de anlisis
ptico ms usado en las investigaciones
qumicas y biolgicas.

La absorbancia es un concento ms
relacionado con la sustancia. Puesto que
nos muestra la cantidad de luz absorbida
por la sustancia y se define como:

Espectrofotometra.

Ley de Lambert Beer

La espectrofotometra es un mtodo
ptico de anlisis, el espectrofotmetro es
un equipo que permite comparar la
radiacin absorbida o trasmitida por una
solucin que contiene un patrn de
concentracin conocida, con una muestra
con una cantidad de analito desconocida.
Todas las sustancias pueden absorber
energa radiante aun el vidrio que parece
ser completamente trasparente absorber
la longitud de onda que pertenece al

La ley de Lambert- Beer o ley de Beer

dice que existe una relacin entre la
cantidad de luz adsorbida y el camino
recorrido por el mismo. Establece
tambin una relacin entre la absorbancia
de la sustancia problema y su
concentracin.

Log (1 / T).

Esta ley es aplicable solo en soluciones

diluidas; para concentraciones altas la
absorbancia varia debido a fenmenos

como la dispersin de la luz, agregacin

de la molcula o cambios del medio.
(SKOOG, 2001)

Cafena:

El paracetamol o acetaminofen (N-acetilpara-aminofenol

para-acetilaminofenol) es un medicamento con

propiedades analgsicas, sin capacidad
antiinflamatoria.
Acta inhibiendo la sntesis de
prostaglandinas, mediadores celulares
responsables de la aparicin del dolor

La cafena un tipo de droga de la familia

de los alcaloides. Hay numerosos
compuestos dentro de este grupo, pero
distinguiremos a la cafena, a la teofilina
y a la teobromina Se encuentran, entre
otros lugares nueces de cola, granos de
caf, t, habas de cacao, mate y otras
plantas.
Estos compuestos tienen acciones
bioqumicas diferentes y estn presentes
en diferentes cantidades en sus
respectivas fuentes. (VELAZQUES,
2004).
En el espectrofotmetro uv-vis, la
longitud de onda con la cual se mide la
absorbancia de la cafena es de 272 nm.
Paracetamol:

Adems, tiene efectos antipirticos. Se

presenta habitualmente en forma de
cpsulas, comprimidos o gotas de
administracin oral. En la actualidad es
uno de los analgsicos ms utilizados.
(VELAZQUES, 2004)
En el espectrofotmetro uv-vis, la
longitud de onda con la cual se mide la
absorbancia del acetaminofn es de 254
nm.
RESULTADOS Y DISCUSION:
Se realizaron dos curvas de calibracin
para los activos acetaminofn y cafena
presentes en una tableta (muestra
problema).
Se
establecieron
las
concentraciones de 2, 4, 6, 8 y 10 ppm,
con el propsito de cumplir con la ley de
Lambert Beer que es aplicable solo en
soluciones diluidas; puesto que para
concentraciones altas la absorbancia vara
debido a fenmenos como la dispersin
de la luz, agregacin de la molcula o
cambios del medio.
La absorbancia y psilon correspondiente
a cada punto de la curva de calibracin se

observa en la Tabla 1. Curva de

calibracin de Acetaminofn y la Tabla
2. Curva de calibracin de Cafena.
Estndar de Acetaminofn 254 nm
[](ppm)
Absorbancia Epsilon
2
0,163
N.A
4
0,238
N.A
6
0,375
N.A
8
0,464
0,058
10
0,697
N.A
Tabla 1. Curva de calibracin de
Acetaminofn.
Estndar de Cafena 272 nm
[] (ppm)
Absorbancia Epsilon
2
0,135
N.A
4
0,209
N.A
6
0,302
N.A
8
0,394
0,049
10
0,600
N.A
Tabla 2. Curva de calibracin de Cafena.
Segn los datos obtenidos anteriormente
se generaron las grficas correspondientes
a la curva de calibracin de cada activo.
Grafica 1 y 2: curvas de calibracin.
Se evidencia que para las grficas el R
cuadrado es menor a 0,99 esto indica que
la relacin entre concentracin y
absorbancia no fue constante y por lo
tanto la curva de calibracin no es lo
suficientemente confiable para determinar
la
concentracin
de
cafena
y
acetaminofn en la muestra problema.
Los
factores
que
posiblemente
perjudicaron la linealidad de las grficas
pudieron ser la preparacin de cada
punto de la curva con diferente analista, el
error generado por la fluctuacin de luz al
momento de leer la muestra en el equipo,
problemas con la celda (ubicacin,
limpieza y manipulacin).

Curva de calibracin Acetaminofn

0.8
0.6

f(x) = 0.06x - 0
R = 0.96

Absorbancia 0.4
0.2
0

0 2 4 6 8 10 12

Concentracin de Acetaminofn (ppm)

Grafica 1. Curva de calibracin de

Acetaminofn.
Curva de c alibrac in
Cafena
1
absorbancia 0.5
0

f(x) = 0.06x - 0.01

R = 0.95
2 4 6 8 10 12

concentracion de cafena (ppm)

Grafica 2. Curva de calibracin de

Cafena.
Se realiz un barrido espectral con los
estndares de 8 ppm de acetaminofn y de
cafena. Donde se obtuvieron los
siguientes datos. Tabla 3. Barrido
espectral acetaminofn.
Y Tabla 4.
Barrido espectral cafena.
Acetaminofn 8 ppm
Longitud de onda
(nm)
280
276
272
270
266
262
258
254
250

Absorbancia
0,293
0,335
0,378
0,399
0,436
0,464
0,475
0,474
0,451

Tabla 3. Barrido espectral Acetaminofn.

Cafena estndar 8 ppm
Longitud de onda Absorbancia
(nm)
250
0,132
254
0,173
258
0,226
262
0,290
266
0,350
270
0,391
272
0,404
276
0,401
280
0,381
Tabla 4. Barrido espectral Cafena.
El objetivo del barrido espectral es
observar posibles interferencias entre la
lectura de cada activo.
Con los datos obtenidos se generaron 2
grficas, una para cada activo. Grfica 3:
barrido espectral estndar Acetaminofn 8
ppm. Grfica 4: barrido espectral
estndar Cafena 8 ppm.
Se evidenci gracias a las grficas de
barrido espectral que la longitud de onda
analtica para Cafena es de 272 nm y
para Acetaminofn la longitud de onda
analtica obtenida en la prctica fue 258
nm, mientras que la literatura reporta una
longitud analtica de 254 nm, por este
motivo se trabaj bajo la longitud de onda
terica.

Barrido espectral STD Cafena 8 ppm

0.500
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
240 250 260 270 280 290

Grafica 4. Curva de calibracin de

Cafena.
Para poder tener un referente y comparar
los resultados obtenidos se buscaron los
barridos espectrales de ambos compuesto
y se observ amplia similitud. Grfica 5.
Barrido espectral terico de cafena. Y
Grfica 6. Barrido espectral terico de
acetaminofn.

Grfica 5. Barrido espectral terico de

cafena.

Barrido espectral STD 8 ppm Acetaminofn

0.500
0.400
0.300
0.200

Grfica 6. Barrido espectral terico de

Acetaminofn.

0.100
0.000
240 250 260 270 280 290

Grafica 3. Curva de calibracin de

Acetaminofn.

El barrido espectral del estndar de

acetaminofn presenta su absorbancia
mxima a una longitud de onda de 258
nm pero a 272 nm tambin. Esto genera

conflictos en la lectura de la (tableta)

muestra problema puesto que contiene
concentraciones
de
cafena
y
acetaminofn. Esto se observ en el
barrido espectral realizado para la
muestra. Tabla 5. Barrido espectral
muestra.

Unino de barridos
Barrido Acetaminofen
Barrido muestra
Barrido Cafeina

1.500
1.000

En la grfica del barrido espectral de la

muestra no se observa una longitud de
onda mxima bien definida puesto que
contiene dos activos que sus espectros se
superponen. Como se observa en la
Grfica 7.
Barrido espectral de la
muestra.
Barrido espectral muestra (tabletas)
1.200
1.000
0.800
0.600
0.400
0.200
0.000
245 250 255 260 265 270 275 280 285

Grfica 7.
muestra.

Barrido espectral de la

Las concentraciones de acetaminofn y

cafenas en la muestra no se pueden
calcular puesto que como se observa en la
Grfica 8. Barrido espectral de la
muestra estndar de cafena y estndar de
acetaminofn. Los picos de cada activo
no estn bien definidos.

0.500
0.000
245 250 255 260 265 270 275 280 285

Por este motivo se calcularon las

concentraciones tericas de la muestra
(tabletas), partiendo de la composicin
que reporta el fabricante de dolex forte la
tableta contiene 500mg de acetaminofn
+65mg cafena por tableta. Y segn el
peso promedio que determino en
laboratorio
Para de esta manera
conociendo las concentracin poder
establecer la absorbancia que el equipo
deba reportar. Segn la Ecuacin 1.
Calculo de concertacin terica y
absorbancia terica para la muestra.
(500 mg acetaminofen)
(693 mgtableta promedio) * 50 mg de
muestra =
36,08 mg de acetaminofn por cada 50
mg de tableta.
(65 mgcafeina)
(693 mgtableta promedio) * 50 mg de
muestra =
4,69 mg de acetaminofn por cada 50
mg de tableta.
La muestra de tableta se macero esto para
asegurar la uniformidad de la muestra, y
se tomaron 50 mg se diluyeron en 100
mL y de esta solucin se tomaron 2 mL y
se llevaron a un baln de 50 mL.

(36,08mg Acetaminofen.)
(2 mL)
(100 ml)
=
(50 ml)

14,43 ppm de acetaminofn.

(4,69 mg cafeina)
(2 mL)
(100 ml)
=
(50 ml)

1,88 ppm de cafena.

Estas concentraciones de acetaminofn, y

de cafena de la tableta segn la curva de
calibracin deberan genera las siguientes
lecturas.

Acetaminofn
y=0,0647 (14,43 ppm)0,0008

Seal: 0,933 Abs para acetaminofn

Cafena

BIBLIOGRAFA:

WALTON F. REYES. J. (2005)

anlisis qumico e instrumental
moderno, nueva york: Estados
Unidos. Marcel Decker

VELZQUEZ
L.
(2004)
farmacologa bsica y clnica,
Estados Unidos, Ed Panamericana

SKOOG
D,
HOLLER
F,
NIERMAN T. (2001) principios
de analisis instrumental. Espaa:
MacGraw-Hill.

y=0,0558 (1,88 ppm)0,0065

Seal: 0,098 Abs para cafena.
La seal obtenida para la muestra fue de
1,053 para la longitud de onda analtica
de acetaminofn. Y de 0,901 para la
longitud de onda analtica de cafena. La
concentracin de ambos activos segn
estas respuestas es ms mucho ms alta
que la que reportada por el fabricante.
Adems la concertacin de la preparacin
de la muestra 14,43 ppm de acetaminofn
y 1,88 ppm de cafena no estn dentro de
la curva de calibracin puesto que la
curva inicia en 2 ppm y finaliza en 10
ppm. Este es otro motivo que impide la
cuantificacin de la concertacin en la
muestra.

CONCLUSIONES

El mtodo que se us para la

cuantificacin es poco eficaz
Se recomienda usar un mtodo
de separacin como el HPLC
para poder separar los activos y
de esta manera evitar la
superposicin de picos.
Se debe preparar la muestra de
manera que la concentracin
quede dentro de la curva del
estndar.
La cantidad de mg encontrados
en la muestra correspondientes a
acetaminofn es de 4.69 mg y de
cafena es de 36.08 mg.
La concentracin de la muestra
problema fue de 14.43 ppm de
acetaminofn y 1.88 ppm de
cafena.