UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA

INFORME N 1

ANLISIS DE ALIMENTOS
Cromatografa de gases aplicada a una mezcla de
alcoholes de cadena corta

ALUMNO:

NUEZ CAMPOS, BENJAMIN AUGUSTO

CDIGO:

20090286

2012

I.

INTRODUCCIN

Como parte de las actividades desarrolladas en el curso de anlisis

de alimentos se ha visto por conveniente realizar una visita al
laboratorio, que cuenta con un moderno equipo de cromatografa
de gases totalmente equipado, para afianzar
terico brindado en horas de clase
mediante

la

utilizacin

directa

el conocimiento

e integrar el conocimiento
de

estos

equipos

en

las

determinaciones correspondientes.
Es por ello que estas actividades desarrolladas en el campo de la
ingeniera aplicada, requieren de un conocimiento cabal del uso
de equipos y herramientas

modernas disponibles para la

realizacin de investigaciones con una especificidad y precisin de

alta calidad.
La presente prctica tiene como objetivo:
-Impartir

en

el

estudiante

de

industrias

alimentarias

familiarizacin con los equipos tecnolgicos disponibles en

la
los

laboratorios de la universidad, pero siempre acorde con los

conocimientos

tericos,

los

cuales

fundamentan

las

determinaciones y nos proporcionan la explicacin vigente del

mtodo.
En la prctica efectuada se estudiar el comportamiento de una
muestra, mezcla de tres alcoholes de igual concentracin, solo
para

evaluar

los

tiempos

de

retencin

en

funcin

las

caractersticas de las molculas, como son tamao, carga afinidad

con la columna especifica para la determinacin.

II.

METODOLOGA
a. Descripcin del equipo.
-Cromatgrafo gases Agilent technologies
Modelo 7890A GC
fig. 01: cromatgrafo de gases.
Un cromatgrafo de gases consiste en

varios mdulos bsicos ensamblados para:

1) proporcionar un gasto o flujo constante del gas transportador (fase mvil).
2) permitir la introduccin de vapores de la muestra en la corriente de gas que fluye.
3) contener la longitud apropiada de fase estacionaria.
4) mantener la columna a la temperatura apropiada (o la secuencia del programa de
temperatura).
5) detectar los componentes de la muestra conforme eluyen de la columna.
6) proveer una seal legible proporcional en magnitud a la cantidad de cada
componente.
Columna:
Tiene 50 metros de largo, 200 m de ancho y dimetro interno 0.3 m. La fase
estacionaria es de alta polaridad, compuesta de polietilenglicol se encuentra en la capa
mas interna del filamento y se encuentra recubierta por poliamida para que el vidrio de
las capas intermedias sea flexible.

fig. 02: columna flexible.

b.

Programacin del
equipo en el
laboratorio.
Muestra: mezcla de tres alcoholes metanol, etanol y 3-pentanol
cada uno al 1%.
a. Inyeccin de la muestra:
La muestra tomada es de 1 L con una jeringa hipodrmica.
Para inyectar el vial es necesario realizar el lavado programado
de la aguja con solventes determinados, solvente A metanol y B
hexano, con cantidades de 5 L de cada uno para realizar los
lavados programados, que en este caso son 5 lavados antes y
despus de la inyeccin.
La temperatura interna a la que llega la muestra es de 230 C, a
esa temperatura la muestra se volatiliza, luego es forzada a
atravesar la columna.
El gas que empuja la muestra esta compuesto por Helio.
fig. 03: Inyeccin automatizada.

b. Programacin del LINER

Condiciones programadas del LINER

Temperatura: 230 C
Presin: 20 psi
Flujo del gas: 95.455 mL /min
Purga: 3 mL /min
Fraccionamiento o divisin de la muestra para el ingreso a la
columna: 200:1 solo ingresan 0.477 mL /min
c. Acondicionamiento de la columna instalada
Programado a 60 C, que es la ms baja temperatura para el
tipo de columna que se tiene, lo ideal seria trabajar con
temperaturas menores ya que se trata de alcoholes voltiles
pero por el tipo de columna que se tiene es necesario trabajar a
dicha temperatura.
Este paso consta de tres fases:
1. La muestra ingresa a 60 C y se mantiene por 30 minutos.
2. Luego comienza a elevar la temperatura razn de 2 C por
minuto hasta llegar a 150 C.
3. Se mantiene a 150 C por dos minutos.
fig. 05: fases del proceso.

d.

Condiciones del
detector
Detector de ionizacin de llama FID.
Temperatura: 300 C.
Flujo de aire: 400 mL por minuto.
Helio: 25 mL por minuto.
Nitrgeno: 30 mL por minuto.
Ajustes de la resolucin segn la sensibilidad del anlisis a 5 Hz.

Detector de ionizacin de llama (FID)

En cromatografa de gases, el detector de ionizacin de llama (FID) es
uno de
los detectores ms extensamente utilizado y, por lo general, uno de los
ms aplicables.
En un quemador, el efluente de la columna se mezcla con hidrgeno y
con aire para

luego encenderse elctricamente.

La mayora de los compuestos orgnicos, cuando se pirolizan a la
temperatura
de una llama de hidrgeno/aire, producen iones y electrones que
pueden conducir la
electricidad a travs de la llama. Entre el extremo del quemador y un
electrodo colector
situado por encima de la llama, se aplica una diferencia de potencial
de unos pocos
cientos de voltios, y para la medicin de la corriente que resulta (de
unos 10-12A) se
utiliza un amplificador operacional de alta impedancia.
La ionizacin en la llama de los compuestos que contienen carbono no
es un
proceso bien establecido, aunque se observa que el nmero de iones
que se produce es
aproximadamente igual al de tomos de carbono transformados en la
llama. El detector
de ionizacin de llama debido a que es un detector que responde al
nmero de tomos
de carbono que entra en el detector por unidad de tiempo, es un
detector sensible a la
masa, ms que un sistema sensible a la concentracin.

III.

RESULTADOS
Cuadro 01: Registro del anlisis realizado en el equipo cromatogrfico
de gases.

cuadro 02:

IV.

Cromatograma (CG-FID) representativo de La muestra de tres alcoholes.

DISCUSIONES

Los resultados obtenidos en el cuadro 2, nos muestran claramente el

orden de salida en funcin al tiempo de retencin, primero el alcohol de
cadena menor metanol, segundo el etanol de cadena un poco ms
grande que el primero y finalmente el 3-pentanol.
Las identificaciones para cada tipo de alcohol ya se han realizado en
base a estndares que permiten calcular con gran precisin el tiempo
de retencin.
Segn wiley (1967) la cromatografa de gases, mediante comparacin
de los
espectros permite
la identificacin de determinados
compuestos ya definidos.
El ndice de retencin fue propuesto por primera vez por Kovats en
1958 como un parmetro para identificar solutos a partir de los
cromatogramas. El ndice de retencin para un soluto dado puede
deducirse del cromatograma de una mezcla del soluto y de al menos
dos alcanos normales (de cadena lineal) que tengan unos tiempos de
retencin tales, que el del soluto considerado quede entre los mismos.
Esto es, los alcanos normales son los patrones en los que se basa la
escala de ndices de retencin. Por definicin, el ndice de retencin
para un alcano normal es igual a 100 veces el nmero de carbonos del
compuesto sin considerar el relleno de la columna, la temperatura u
otras condiciones cromatogrficas.
Actualmente la cromatografa de gases es aplicada a la identificacin
de cidos grasos esenciales en la caracterizacin de aceites extrados
de nuevas fuentes, tal es as que los cidos grasos undeclico,
pentadeclico, undecenoico, palmitoleico, ecosatrienoico y araquidnico
pueden ser identificados a pesar de encontrarse en pequeas
cantidades.
A diferencia de los alcoholes como el metanol que son altamente
voltiles a determinada temperatura los cidos grasos se tienen que
convertir previamente en sus esteres metlicos a travs de una reaccin
de esterificacin con diazometano (Beschart, 1975).
Los fenoles pueden analizarse sin derivatizar con FID aunque la
sensibilidad del mtodo no es adecuada para todos los casos. Para
confirmar la presencia de los diversos compuestos, estos se derivatizan
mediante metilacin para obtener lo correspondientes anisoles o bien
mediante bromuro de pentafluorobencilo (PFBBr), analizndose en este
caso mediante GC-ECD, aunque los lmites de deteccin de mtodo con
FID son superiores al GC-ECD. Existen tres fenoles que no se
derivatizan con PFBBr como el 2,4-dinitrofenol, 2-metil-4,6-dinitrofenol
y Dinoseb. Como patrones internos se aconsejan el 2,5-dibromotueno y
el 2,2, 5,5-tetrabromobifenilo. Como patrones de sustitucin
(surrogates) se recomienda el uso de 2-fluorofenol y 2,4-dibromofenol
(Blatt, 1967).

En cuanto detector de ionizacin de llama (FID), es un quemador, el

efluente de la columna se mezcla con hidrgeno y con aire para luego
encenderse elctricamente. La mayora de los compuestos orgnicos,
cuando se pirolizan a la temperatura de una llama de hidrgeno/aire,
producen iones y electrones que pueden conducir la electricidad a
travs de la llama. Entre el extremo del quemador y un electrodo
colector situado por encima de la llama, se aplica una diferencia de
potencial de unos pocos cientos de voltios, y para la medicin de la
corriente que resulta se utiliza un amplificador operacional de alta
impedancia (Novk , 1988).
La llama ioniza los compuestos y dependiendo del tamao de la
molcula se generan iones los compuestos de cadena ms larga
producen ms, a partir de estos iones y la diferencia de potencial en la
salida, puerto de deteccin con picos, son transformadas en una seal
anloga que nos permite tener un espectro definido y en los picos
respectivos los cuales se dan a determinado tiempo y estn
relacionados con la mayor cantidad de analito que sale justamente en
ese tiempo.
La formacin de iones depende del tamao y la concentracin, se
retienen poco los compuestos de cadena corta.
El orden del pico de los analitios: primero salen los ms voltiles, en
cuanto al tamao salen primero los de menor tamao como se
corrobora en el cromatograma.

V.

CONCLUSIONES

El mtodo analtico utilizado CG-FID se podra considerar como una

herramienta til para el anlisis de alcoholes.

De forma satisfactoria el mtodo de cromatografa de gases, esta

siendo utilizada previa derivatizacin, en la identificacin de lpidos
esenciales en nuevos alimentos.

El mtodo tambin se utiliza para fenoles que son muy voltiles.

Los detectores FID, utilizan seales elctricas, y son precisos en este

tipo de determinaciones cromatograficas.

VI.

BIBLIOGRAFA

BESCHART, A.A., SAUNDERS, R M., MON, T.R. Y KOHLER, G.O.

1975.Variations in the fatty acid composition of stored wheat protein
concentrates prepared by wet and dry milling. Cereal Chemistry.Vol. 52 (4):
439-450.

Blatt, A.H. 1957. Synthesis Organic. Vol. II. Editorial John Wiley & SONS,
INC, New-York. USA. P. 165-654.

NOVK J. 1988. Quantitative Analysis by Gas Chromatography, Second

Edition, Cazes J. (ed.) New York, Marcel Dekker,79-135

MANUAL DE AGILENT.2010. Agilent Technologies, Inc. Cromatgrafo de

gases 7890A Referencia rpida. Disponible en www.agilent.com