Eficacia bactericida en la microflora mixta de

aguas residuales y en la escherichie coli

1. Titulo:
Eficacia bactericida en la microflora mixta de aguas
residuales y en la escherichie coli.
2. Antecedentes:

 Aceite de copaiba:
El Aceite de Copaiba es usado tradicionalmente como antimicrobiano en
infecciones de vías aéreas altas y del aparato urinario, habiendo sido
documentado dicho efecto en los 1960’s y 1970’s. Investigaciones má s
recientes demostraron que la oleorresina completa y sobre todo dos de
sus componentes (los á cidos copá lico y kaurénico) tenían una actividad
antimicrobiana significativa in vitro contra bacterias gram-positivas. El
á cido kaurenoico también demostró actividad antibacteriana selectiva
contra bacterias gram-positivas y E. coli en otros estudios. Otro
componente de la componente de la Copaiba, el beta-bisaboleno, posee
actividad antiviral específica contra el rinovirus.
Otra investigació n sobre el aceite de copaiba en la escherichia coli fue el
añ o 2007 en la UNIVERSIDAD NACIONAL “SAN LUIS GONZAGA” DE ICA.
Donde realizaron la prueba con diferentes plantas y dando como
resultado que el aceite de copaiba daba un resultado positivo

 Kion:
Los investigadores han encontrado que el kion es efectivo contra el
crecimiento de bacterias Gram-positiva y Gram-negativa incluyendo
Escherichia coli, Protus vulgaris, Salmonella typhimurium,
Staphylococcus aureus y Streptococcus viridans. Un estudio japonés de
1990 demostró que el aceite de kion y los componentes del kion podrían
matar la larva Anisakis, pará sito que encuentra hospedaje en millones
de personas alrededor del mundo, como vemos el kion también ayuda a
eliminar muchas bacterias presentes en el organismo.

Es su capacidad antibacteriana y su tolerancia de los microorganismos

necesarios en la flora intestinal (Lactobacillus) la que le permite
aumentar la riqueza de esta, eliminando microorganismos perjudiciales,
como la Escherichia coli, responsable de la mayor parte de las diarreas,
especialmente en los niñ os, y muchos casos de gastroenteritis. Al
eliminar esta bacteria y otros microorganismos pará sitos perjudiciales,
consigue evitar la aparició n de putrefacciones intestinales responsables
de hinchazones abdominales y meteorismo. También hay que
mencionar la capacidad de los gingeroles contenidos en esta planta para
 aumentar el peristaltismo intestinal favoreciendo la expulsió n de los
excrementos.

 Manzana:

Segú n el estudio publicado la revista Journal of Food Cience, la adició n

de agentes antimicrobianos en las películas comestibles podría servir
como una barrera adicional para la superficie de microorganismos
contaminantes. Las pruebas que se realizaron mostraron que las
películas comestibles de manzana inactivarían las bacterias pató genas
como la Escherichia coli O157: H7 de la superficie de pechuga de pollo
crudo.
3. Justificación:

Ante la falta de informació n, recursos y principalmente de saneamiento y

dañ os causados por enterobacterias, generalmente por las escherichie coli, y
en vista de que podemos dar algú n aporte estamos buscando algú n tratamiento
natural de mayor efectividad que pueda eliminar o reducir las colonias en la
microflora mixta y en la escherichie coli.
4. Planteamiento del problema:
¿Qué producto natural tiene mayor eficacia bactericida en la microflora mixta
de aguas residuales y en la escherichie coli?
5. Marco teórico:

 Microflora bacteriana:

 “UNITRAR” (planta de tratamiento de aguas residuales):

Es una planta piloto cuyo principio de funcionamiento es

desarrollar los procesos físicos bioló gicos que se dan en una
planta convencional, pero en nuestro caso en un ambiente má s
pequeñ o y controlado. Esto se debe a la combinació n de un
sistema de tratamiento anaerobio con un sistema aerobio, que
viene a ser una combinació n de dos sistemas convencionales que
enfocan el problema en forma diferente individualmente. Pero el
tratamiento anaerobio y bioló gico se utiliza un reactor anaerobio
de flujo ascendente (RAFA) cuya mayor ventaja es el
requerimiento de una menor á rea de terreno que otro sistema de
tratamiento para el mismo caudal y eficiencia en la remoció n de
la materia orgá nica. El efluente del RAFA pasa a otros procesos
compuestos por lagunas de estabilizació n, facultativas,
dispuestas en serie que nos permiten lograr un agua residual de
buena calidad bacterioló gica.

 Escherichia Coli

Es uno de los muchos grupos de bacterias que viven en los

intestinos de los humanos sanos y en la mayoría de los animales
de sangre caliente. Esta bacteria ayuda a mantener el equilibrio
de la flora intestinal normal (flora bacteriana) contra las
bacterias nocivas y sintetiza o produce algunas vitaminas.
No obstante, existen cientos de tipos o cepas de bacterias E-coli.
Las distintas cepas de E. coli tienen diferentes características
distintivas.
Una cepa de E-coli en particular, conocida como E. coli O157:H7,
causa una grave infecció n intestinal en los humanos. Es la cepa
má s comú n que causa enfermedades en las personas. Se puede
diferenciar de otras E. coli por la producció n de una potente
toxina que dañ a el revestimiento de la pared intestinal y causa
diarrea con sangre.
 Medios de cultivo: Son sustancias nutritivas que tienen un pH
adecuado necesario para el aislamiento, mantenimiento, la
reproducció n y la identificació n de los microorganismos.

 Agar Tripticasa Soja (TSA):

Este medio por el contenido de peptona de soja y peptona de

caseína resulta una aportació n nutritiva que permite el
desarrollo optimo de un gran nú mero de microorganismos,
tanto exigentes como no exigentes, también se utiliza coma
base para preparar medios especiales.

 Eosina azul de Metileno (EMB):

Medio adecuado (selectivo y diferencial) para la bú squeda y

diferenciació n enterobacterias.
La combinació n utilizada de Eosina y Azul de Metileno, no
permite el desarrollo de microorganismos gram positivos y de
bacterias gram negativas fastidiosas, también, permite
diferenciar bacterias fermentadoras y no fermentadoras de
lactosa

Los microorganismos fermentadores de lactosa, originan

colonias de color azulado-negro, con brillo metá lico como las
Escherichia coli y las colonias producidas por microorganismos
no fermentadores de lactosa son incoloras.

 Tipos de siembra:

 Diseminació n con hisopo:

Se sumerge en el caldo de cultivo, se escurre el exceso de líquido
sobre la pared interior del tubo y se estrían ambas mitades de la
placa de Petri, partiendo de los bordes hacia el centro, luego se
gira 90º y se estrían nuevamente ambas mitades, finalmente se
gira 45º y se estrían ambas mitades.
 Agotamiento

ESTRÍA Ú NICA: Depositamos la muestra lo má s alejado de

nosotros y realizamos la siembra en forma de zig-zag. De esta
forma vamos descargando la muestra del asa. Es importante no
volver a repasar el trozo de medio de cultivo que ya hemos
sembrado. Para conseguir que al final de la estría tengamos
colonias aisladas es importante que al principio hagamos la estría
má s junta y que la cantidad de muestra tomada en el asa sea la
adecuada.

ESTRÍA MÚ LTIPLE: En esta técnica de aislamiento por

agotamiento se realizan varias estrías. Esto se puede llevar a cabo
flameando el asa de paso en paso, es decir, de estría en estría, o
sin flamear el asa. Ademá s, dependiendo de la forma en la que
hagamos las estrías, existen varios tipos de estriados: Estriado
sobre cuatro cuadrantes, Esterilizando asa entre siembra y
siembra, Sin esterilizar el asa entre siembra y siembra.
 Antibiograma: El antibiograma es la prueba microbioló gica que se
realiza para determinar la sensibilidad de una colonia bacteriana a un
antibió tico o grupo de antibió ticos.

El antibiograma, una vez realizado, da la siguiente informació n:

Grado de sensibilidad de la colonia bacteriana a un determinado

antibió tico.

Diferencia de sensibilidad por parte

de la colonia a diferentes
antibió ticos.

Con esta informació n, se clasifica el

efecto del antibió tico sobre esa
determinada colonia en: Resistente
(R), Intermedio (I) y Sensible (S).

Su principal objetivo es medir la

sensibilidad de la bacteria a
diferentes antibió ticos impregnados en papel filtro o discos difusores
que en caso de pastillas que son llevadas especialmente por los
laboratorios con sus respectivas tablas para evaluar su sensibilidad.

Procedimiento:

Preparar el medio solido, sembrar con la técnica de diseminació n por

toda la placa que va ser estudiadas, preparar las muestras a estudiar en
 papel filtro si es liquido y es só lido hacer un hueco con el aza de Khole
para agregar la muestra, colocarlos en la muestra ya plantada y dejar en
la incubadora.

 Productos antibacterianos :

 Aceite de copaiba: Originaria de América del Sur, la Copaifera es

un á rbol que se distribuye principalmente en el Perú , Brasil,
Colombia, Bolivia, Venezuela y Guyana. Este á rbol llega a
alcanzar los 30 metros de altura y ha sido utilizado durante largo
tiempo por los nativos de las
regiones Amazó nicas. Se introdujo en
Europa a principios del siglo XVII
pues gracias al aceite o resina que se
obtenía de él era utilizado en el
tratamiento natural de diferentes
enfermedades. .

Nuestros hermanos ashá ninkas supieron aprovechar los

innumerables recursos naturales de la selva amazó nica y han
utilizado el aceite de Copaiba por generaciones para hacerle
frente a sus problemas de salud.
El aceite de Copaiba es un gran cicatrizante, desintoxicante y
desinflamante natural que las etnias de la selva utilizan en casos
de estreñ imiento, soriasis y gastritis con asombrosos resultados.
El aceite de Copaiba es reconocido como un extraordinario
protector del sistema digestivo que favorece y estimula su mejor
funcionamiento. Ademá s, nuestros antepasados descubrieron su
gran poder desinflamante y resultaba ideal para mantener las
articulaciones y vías respiratorias en excelente estado, libres de
problemas de salud.
El aceite de Copaiba es el mejor aliado para un organismo
saludable y para una piel sin afecciones, por lo que su aplicació n
resulta ideal en problemas de soriasis, herpes, dermatitis y
hongos, donde sobresale como un excepcional antimicó tico
natural.

Se ha demostrado que el Aceite de Copaiba posee actividad

antiinflamatoria, analgésica, cicatrizante, gastroprotectora,
 antibacteriana, antimicó tica, antioxidante, anticancérigena,
hipotensora y diurética.

 Ajos:

La infinidad de atributos medicinales

del ajo se deben principalmente a la
importante cantidad de azufre que
contiene cada diente, debido en primer
lugar a la alicina (derivado del azufre,
de color amarillento y olor
nauseabundo que se obtiene al triturar
los dientes de ajo) y se complementa
con la actividad de otras sustancias como el ester alquil-
tiosulfinico. Esta combinació n de elementos hace del ajo un
poderoso antimicrobiano que elimina virus, bacterias en incluso
micosis producidas por hongos. La aplicació n interna o externa
del ajo acelera notablemente la acció n de los tratamientos
tradicionales, siendo incluso mucho má s efectivo que la
penicilina y la tetraciclina. Y obviamente sin los efectos
colaterales o secundarios de los antibió ticos tradicionales.

 Cebolla: La cebolla junto al ajo es uno de los mejores antibió ticos

naturales. Por su contenido en compuestos ricos en azufre, es
uno de los mejores remedios naturales
para combatir procesos infecciosos del
aparato respiratorio y digestivo
(putrefacciones intestinales, diarrea,
etc.).
Su uso puede ayudar a disminuir el
riesgo de enfermedades de
transmisió n sexual como la gonorrea, o puede servir de
complemento a los tratamientos con antibió ticos.

 Kion:
Originario de Asia Tropical. Se ha utilizado
como planta medicinal en oriente desde
hace mas de 2000 añ os. Actualmente
cultivado en Jamaica, Nigeria, India y
Japó n.
 El kion se ha utilizado para el tratamiento de los problemas
gastrointestinales debido, en gran parte, a que al estimular el
pá ncreas, aumenta la producció n de encimas que favorecen la
digestió n.
Su poder antibacteriano es eficaz para prevenir problemas
cuando hay un cambio en la flora intestinal.
Al eliminar bacterias y otros microorganismos pará sitos
perjudiciales, consigue evitar la aparició n de putrefacciones
intestinales responsables de hinchazones abdominales
Es importante mencionar la capacidad de los gingeroles
contenidos en esta planta para aumentar el peristaltismo
intestinal favoreciendo la expulsió n de las heces.

 Manzana: Las manzanas son los frutos

de los manzanos, unos á rboles de la
familia de las rosáceas, en la que se
encuentran arbustos silvestres o
cultivados como el endrino, las rosas; u
otros árboles como el almendro, o el
cerezo.

A continuación, beneficios que produce en el organismo el

consumo de manzanas:

» Anticolesterol. Te ayudara a controlar tu colesterol gracias a su alto

contenido de fibra soluble y fósforo.

» Dolores musculares. Masajear la zona afectada con vinagre de

manzana te ayudara a aliviar el malestar.

» Mal olor de las axilas. Aplicar en tus axilas vinagre de sidra te

permitirá eliminar el olor a transpiración.

» Inflamación estomacal. Cocínala en agua durante 20 minutos,

déjala enfriar y cómela 2 veces por día, te ayudara a reducir la
inflamación.

» Acidez estomacal. Si la incorporas a tus comidas evitaras padecer

de este malestar.
 » Diurético. Sus componentes permitirán que tu cuerpo elimine más
líquidos y toxinas.

» Hongos en los pies. Los baños de vinagre de sidra te aliviaran el

ardor.

 Noni:
El noni es el nombre como s e le conoce a la
fruta Morinda citrifolia. La fruta madura es
de aproximadamente el mismo tamañ o que
una papa, y tiene un color amarillo que se
transforma en blanco al madurar. Tiene un
sabor amargo, no huele muy bien, mas sin embargo es utilizado
generalmente como Suplemento Dietético alimenticio por sus
bondades nutricionales. Al Noni se le atribuyen muchos
beneficios para la salud que pueden ser atribuidos a la sinergia
de sus componentes.
El Noni es un estabilizador del pH, neutraliza la acidez, lo que
hace posible la estabilidad de la funció n del pá ncreas, hígado,
riñ ones, vejiga, sistema reproductor femenino, etc. Por lo tanto
puede ayudar a mejorar condiciones como la diabetes o
hipoglucemia, colesterol calambres menstruales, presió n
sanguínea alta o baja, gota, artritis, etc.

En aná lisis bromatoló gicos del Noni se ha detectado que es rico

en elementos importantes para la alimentació n humana:
· Fibra
· Proteínas
· Hierro
· Vitamina C
· Calcio
· Zinc

 Sangre de grado:
Se le conoce como Sangre de Drago o Sangre de Grado (por la
resina o lá tex que brota la corteza del á rbol,
luego de realizarse una incisió n) de donde se
extrae un raro alcaloide llamado "tapsina"
que acelera la curació n de heridas,
laceraciones y abrasiones.
 Entre sus  efectos mas importantes debemos destacar su
actividad como astringente, cicatrizante y hemostá tica, lo que
permite tratar con eficacia diferentes tipos de heridas en piel y
mucosas, incluso las que presentan dificultad con otros
tratamientos como ulceras por decú bito ó varicosas.
También se ha podido demostrar que presentan acció n
antibacteriana, antimicó tica  y antivírica, lo que mejoraría su
eficacia en los tratamientos antes mencionados.
Por estas características, la Sangre de grado está indicada en el
tratamiento de ciertos tipos de gastritis, especialmente las G.
erosivas.

Se han hecho infinidad de estudios con el sangre de grado dando

por resultados que es cicatrizante de ú lceras gá stricas.
Aumentan las defensas del organismo. Acció n antiviral,
Analgésico, antibacteriano principalmente para los gran
positivos, algunos gran negativos, es buen anticancerígeno
(estudio hecho por la universidad peruana Cayetano Heredia)

 Propoleo:
Actualmente el propó leo en cualquiera
de sus formas (só lo o combinado) posee
propiedades eminentemente
antibió ticas, analgésicas, antioxidantes,
bacteriostá ticas, bactericidas,
antivirales, fungicidas, foto inhibitorias,
anestésicas, antiinflamatorias,
regeneradoras o cicatrizantes, y su
utilizació n en un organismo sano aumenta la inmunidad natural
contra diversas enfermedades; así mismo actú a como agente
terapéutico ante un sinnú mero de afecciones. Estudios científicos
de altísimo nivel donde, avalan la importancia del propó leo
demostrada cientos de veces en el laboratorio gracias a las
propiedades que posee.

Las bacterias han demostrado la misma sensibilidad al propó leo

que a los principales antibió ticos, pero con la marcada diferencia
de no provocar efectos secundarios y con una eliminació n
absolutamente natural, sin alterar la flora intestinal  ni el
funcionamiento hepá tico. “Al propó leo se le asigna una doble
funció n: terapéutica, debido a sus propiedades asépticas e
incorruptible, y la de asepsia.”
  Uña de gato (Uncaria Tomentosa)
Hoy en día se aprecia en todo el mundo debido a sus cualidades
anti-inflamatorias, curativas y
preventivas por la complejidad de los
componentes de esta planta
silvestre.
Se han escrito muchos artículos
sobre la uñ a de gato, en los cuales,
algunos se refieren a ella “abridor
del camino” por su habilidad de
limpiar todo el tracto intestinal y su
efectividad de tratar desordenes
estomacales e intestinales (como la enfermedad de Crohn,
síndrome del intestino agujereado, ulceras, gastritis,
diverticulitis, y otras enfermedades inflamatorias del intestino y
estomago).

6. Hipótesis:
 De los tratamientos naturales que ya mencionamos el ajo será má s
eficaz con un gran poder bactericida para eliminar o disminuir las
colonias en la microflora mixta y en la escherichie coli.

7. Variables:
 Variable dependiente:
microorganismos en la microflora mixta y en la escherichie coli

 Variable independiente:
Ajos, manzana, noni, kion, aceite de copaiba, sangre de grado, cebolla,
uñ a de gato, propoleo.

 Variable interviniente:
La temperatura del ambiente de laboratorio, los microorganismos del
ambiente, el tiempo de incubació n

8. Objetivos:

 Objetivo general:
 Comprobar el efecto que tienen los posibles
antibacterianos, pero usados de dos formas, en
estado natural y tratado por laboratorio.

 Objetivos específicos:

 Aprender a utilizar adecuadamente el

método del antibiograma y poder distinguir
halos donde hayan muerto colonias de
bacterias y donde hayan disminuido.

 Comprobar que los productos usados que fueron comprados en

el mercado en una casa naturista sean reales, ya que
utilizaremos productos extraídos de la planta , productos
comprados en casas naturista en mercados y productos
elaborados en laboratorios en este caso en kaita

 Trabajar lo mejor posible para poder darle exactitud a nuestros

resultados.

9. Materiales y métodos:

 MATERIALES
 Aza de kolle
 Placas Petri
 Matraz de Erlenmeyer
 Tubos de ensayo
 Isopos
 Mechero
 Estufa
 Horno
 Autoclave
 Medio TSA
 Medio EMB
 Kion
 Ajo
 Cebolla
  Manzana
 Uñ a de gato
 Aceite de copaiba
 Propó leo
 Sangre de grado
 Noni

 Metodos Utilizados

 Siembra por Agotamiento o Estría cruzada:

Con el aza de khole se traza estrías cruzadas por todo el medio,
esto es para obtener colonias aisladas.

 Siembra por Diseminacion:

Se cubre toda el medio de cultivo con la muestra a estudiar.

Antibiograma

Las bacterias habrá n crecido, salvo en el á rea alrededor de los

disco, se mide los halos dejado por cada disco.
 21/11/09
19/11/09
06/11/09
05/11/09
04/11/09 √
Preparación de agar

√
Compra de productos

10.Cronograma:

√
UNITRARRecogo de muestra en

√
Prueba piloto

√
resultadoObservaciones de primer

√
Preparación de agar

√
prueba en microflora mixtaCompra de productos para

UNITRARRecogo de muestra en

Prueba con micloflora mixta

Siembra de Escherichia coli

Observacion de resultados

Preparacion de Productos

Prueba con escherichia Coli

Observación de resultado
24/11/09 √ √ √
26/11/09 √ √ √
27/11/09 √

11.Fuentes de información:

Microbiología medica- Brooks

Biología de los microorganismos de Brooks – madigan

http://www.euroresidentes.com/Alimentos/manzana.htm
http://www.geosalud.com/enfermedades_infecciosas/ecoli.html
http://www.alimentacion-sana.com.ar/Informaciones/novedades/coli.htm
http://www.nutridieta.com/las-manzanas-y-sus-propiedades/
http://fiauni.pe/unitrar/index.php?option=com_content&task=view&id=1

http://www.monografias.com/trabajos58/clasificacion-variables/clasificacion-
variables.shtml
http://www.rena.edu.ve/cuartaEtapa/metodologia/Tema6c.html
http://www.botanical-online.com/medicinalsantibioticosnaturales.htm
http://www.perunaturalproducts.com/sangre_de_grado.htm

http://www.inkanatural.com/es/resinas_amazonicas/copaiba_sangredegrado.html

http://www.gratisblog.com/productosperuanos/i9775-copaiba.htm

http://www.junglemedicines.com/product_info.php?
products_id=137&language=es&osCsid=6cdc16fe139303bd65b0bb59da358401

http://www.eclac.cl/caf/noticias/paginas/7/21327/estudio.pdf

http://www.unica.edu.pe/investigacion/pdf/proyectos_ejecucion2007.pdf

http://www.dsalud.com/alimentacion_numero75.htm

http://www.5aldia.org/v_5aldia/alimentos/frutasver.asp?te=73&ali=13

http://www.medicinasnaturistas.com/
http://www.viviendonatural.com/kion-eficaz-digestivo-que-ya-conocian-los-incas/
http://www.prama.com.ar/sugerencias_saludables/propoleo.htm