主要内 容

 肠道病原 菌的分离鉴定 （ 2 ）
 肥达氏反 应结果观察
 细菌的生 长状态及菌落 观察
 细菌的药 敏试验
 实验动物 感染试验
肥达氏 反应 结果观 察
 试验管 自第 1 管看 起，如有凝 集 ( 阳性反 应 ) 时则于管 底呈圆片状
、边缘 不整齐的凝集 物，轻轻摇 动，可见凝块 或颗粒浮 起，上清
透明或 有不同程度的 混浊。其凝 集的强弱可用 “ +~++++” 号表 示
如下：
“++++” 细菌 全部凝集， 液体澄清 ，有大片状 ，边缘不整 齐的凝
集块。
“+++” 细菌绝 大部分凝集 ，液体有轻 度混浊，凝集 块较小些。
“++” 细菌部 分沉淀于管 底，液体半澄 清，凝集块 呈颗粒状。

“+” 细菌仅少量凝 集，液体混 浊。

“-” 不凝 集，液体混 浊与对照 管相似。
 记录结 果并判定凝集 效价。通常 以能产生明显 凝集 (++) 的血清最
大稀释 倍数做为该血 清的凝集效 价。
结果分 析
 首先应 了解当地正常 人效价，一 般凝集价超过 正常凝集 价才有
诊断意 义。
 真正的 伤寒病人 O 凝集素 出现常较 H 凝集素为早， 存在于血清
内时间 较短； H 凝集素 产生较慢但效 价较高，存 在时间较长 ，
可达数 年。
 过去曾 接种过伤寒菌 苗或患过伤 寒病，近期又 感染流感 或布鲁
氏菌病 时，可产生高 效价的 H 凝集素 及较低的 O 凝集素，此种
反应称 为非特异回忆 反应，其他 如结核病、败 血症、斑 疹伤寒
、肝炎 等也可出现类 似反应。
 确诊为 伤寒的患者中 ，约有 10 ％肥达 氏反应始 终为阴性， 故阴
性结果 不能完全排除 伤寒的诊断 。
 采血时 间不同，肥达 氏反应的阳 性率也不同， 发病第一 周 50 ％
，第二 周 80 ％，第四周 90 ％以上。恢复期 凝集价最 高，以后 逐
渐下降 。一般以双份 血清 ( 急性期 和恢复期 ) 对比，凝集 价有明
显上升 者作为新近感 染的指征。
菌落观 察
 大小
大菌落 ( 直径在 5mm 以上 )
中等大菌落 ( 直径在 3mm 左右 )
小菌落 ( 直径在 1mm 左右 )
 形状：点状、圆形、卵圆形、叶状等
。
 边缘：整齐、锯齿状、毛发状等。
 表面：光滑、皱纹、湿润、干燥等。
 隆起度：凸起、扁平、中心凹陷等。
 结构：均质性、颗粒状等。
 色调：无色、白色、黄色、褐色等。
 透明度：透明、半透明、不透明等。
细菌的药物敏感性试验
 原理：将干燥的浸有一定浓度抗菌药物的滤纸片放在
已接种一定量某种细菌的琼脂平板上。经培养后，可
在纸片周围出现无细菌生长区，称抑菌环。测量抑菌
环的大小，即可判定该细菌对某种药物的敏感程度。
目的是使学生学会此实验方法并了解其在临床治疗上
的意义。
 材料
① 普通琼脂平板培养基
② 金黄色葡萄球菌分离培养物
③ 大肠杆菌分离培养物
④ 药物纸片
⑤ 酒精
⑥ 镊子
 方法
1 ．按 无菌操 作法 用接种 环从 分离培 养平 板上已 选好
的菌落沾 取细 菌，反 复交 叉密涂 于平 板培养 基上 ，以
便生长出 均匀 的菌苔 ( 注意不要 划破 培养基 ) 。
2 ．用 沾酒精 点燃 灭菌的 小镊 子取药 物纸 片按下 图贴
于平板培 养基 上，并 轻轻 按压贴 紧。
3 ．做 好标记 ，放 37℃ 温箱培养 过夜 ( 不超过
17h) 。
结果观 察
 观察纸片 周围 有无抑 菌环 ，并测 其直 径大小 。
最终判断 细菌 对每种 抗菌 药物的 敏感 程度， 记
录和报告 结果 。
 判定标准 ：实 验条件 不同 判定标 准可 有所不
同。一般 抑菌 环直径 在 15mm 以上 者为高 度敏
感， 10 ～ 15mm 为中 度敏感 ， 10mm 以下为
低度敏感 ，无 抑菌环 者为 耐药。
肺炎球 菌对 小白鼠 的传染 试验
 实验动物 的接 种
1 ．首 先将两 种菌 悬液做 涂片 ，革兰 色染 色和镜 检， 以便
与后述死 亡动 物尸体 的细 菌学检 查结 果对比 。
2 ．用 消毒好 的注 射器， 按无 菌操作 法抽 取菌悬 液后 ，再
用无菌镊 子夹 一灭菌 棉花 纸包， 将针 头刺入 棉花 纸包内 ，
排出注射 器内 的气体 ，然 后将注 射器 平置于 试管 架上。
3 ．固 定小白 鼠： 用右手 轻拖 鼠尾， 使其 爬行于 金属 网盖
上，再突 然用 左手拇 食两 指抓紧 小白 鼠颈项 部及 两耳， 将
鼠体搜入 手掌 中，再 用左 手无名 指和 手掌夹 住小 白鼠尾 根
，以无名 指和 小指夹 住其 左腿。
4 ．以 无菌镊 子取 碘酒棉 球， 消毒小 白鼠 左下腹 部，
用镊子取 下注 射器针 头上 的棉花 纸包 ，放入 消毒 罐
中。左手 倾斜 ，使小 白鼠 头部向 下， 然后将 注射 器
针头自小 白鼠 左侧腹 股沟 部刺入 皮下 ，使针 头在 皮
下组织内 前进 约 l cm 左右，再 直立 注射器 ，轻 轻向
F 刺入腹腔 内， 注入菌 液 0 ． 2ml 后再 将针头 拔出 。
将小白鼠 用染 料涂抹 做好 标记， 放入 动物罐 中。