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实验内 容

 肠道病 原菌的 分离 鉴定( 3 )


 细菌的 药敏实 验结 果观察
 厌氧菌 培养法 及厌 氧菌生 长状 态
 小白鼠 感染肺 炎球 菌实验 结果 观察
 细菌致 病性试 验
双糖铁 培养 基的制 备
 成分: 脲 胨 、乳 糖、 蛋白 胨、葡 萄糖 、
硫酸亚 铁、 氯化钠 、硫 代硫 酸钠、 琼脂 、蒸
馏水、 酚红 水溶液
 制法: 加热 溶解校 正 pH 为 7.2 ,然 后加 入
0.4 %酚 红水 溶液, 分装 试管, 高压 灭菌, 使
成为底 层较 深的斜 面。
 用途: 初步 鉴别肠 道致 病菌 用,可 以观 察葡
萄糖、 乳糖 的发酵 ,并 可观 察有无 H2S 产生
及细菌 有无 动力。
原理
 该培 养基中 只加 少量 的葡萄 糖与较 多量 的乳糖 。细 菌
分解 糖类产 酸可 使培 养基局 部指示 剂改 变颜色 。当 分
解葡 萄糖的 细菌 在斜 面上生 长时, 产生 的酸少 ,又 在
有 O2 的情 况下 氧化, 生成 CO2 和 H2O ,失去改 变局
部酸 碱度的 作用 ,所 以培养 基斜面 部分 不变色 。但 当
细菌 分解乳 糖时 产生 酸量较 多,故 培养 基斜面 部分 可
变色 。细菌 在高 层中 生长时 ,因处 于无 O2 状态, 产
生的 酸不分 解, 故使 高层部 分培养 基指 示剂变 色。 硫
酸亚 铁可与 产生 的 H2S 作用, 生成 FeS 使培养基 变黑。
硫代 硫酸钠 是一 种还 原剂, 防止培 养基 中氧化 物与
H2S 作用而 影响 FeS 的生 成。
生化反 应结 果观察

葡 麦 甘 靛 硫 拉 鼠 木
乳 蔗 尿 蕈 肌 动
菌 名 萄 芽 露 基 化 伯 李 胶
糖 糖 素 糖 醇 力
糖 糖 醇 质 氢 胶 糖 糖

甲型付伤寒杆
⊕ - ⊕ ⊕ - - - +/- ⊕ ⊕ ⊕ - - +

乙型付伤寒杆
⊕ - ⊕ ⊕ - - - +++ ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ +/- +

⊕ ⊕ ⊕
鼠伤寒杆菌 ⊕ - ⊕ ⊕ - - - +++ ⊕ +/- +
/- /- /-
丙型付伤寒杆
⊕ - ⊕ ⊕ - - - + ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - +

猪霍乱杆菌 ⊕ - ⊕ ⊕ - - - +/- - ⊕ - ⊕ - +

伤寒杆菌 + - + + - - - +/- +/- - + +/- - +

肠炎杆菌 ⊕ - ⊕ ⊕ - - - +++ ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - +
血清学 鉴定
( 1 )沙 门氏菌 属
取一 载玻 片与沙 门氏 菌属、 群、 型血清 做
玻片凝集 试验 。
① 取可疑 培养物 ,先 与 A--E 群沙门 氏菌多
价 O 血清 做凝集 试验 ,阳性 者认 为该菌 属于 沙门
氏菌属。
② 用沙门 氏菌属 各群 特有的 单价 O 因子 血
清做凝集 反应 ,可判 定其 属于沙 门氏 菌属何 群。
③ 用该群 内各菌 所特 有的 H 因子血 清作 玻
片凝集反 应, 可最后 判定 为何种 菌。
主要沙 门氏 菌抗原 结构表
H 抗原
群 菌 名 O 抗原
第一相 第二相

A 甲型副伤寒菌 1. 2 12. a 1.2

乙型副伤寒菌 1. 4. 5. 12. b 1.2


B
鼠伤寒杆菌 1. 4. 5. 12. i 1.2

丙型副伤寒菌 6. 7. Vi c 1.5
C
猪霍乱杆菌 6. 7 c 1.5

伤寒杆菌 9. 12. Vi d --
D
肠炎杆菌 1. 9. 12 g.m --

E 鸭沙门氏菌 3. 10. e.h 1.6


厌氧培 养法
 材料:厌 氧罐 、厌氧 气袋 、钢丝 绒、 厌氧手 套箱 、干燥 皿
、焦性没 食子 酸等。
 方法:厌 氧菌 的培养 方法 种类较 多, 总体上 可以 分为三 大
类:物理 法、 化学法 和生 物耗氧 法。
1 、物 理法: 厌氧 罐培养 法、 厌氧气 袋法 、钢丝绒 法 、
厌氧手套 箱法
2 、化 学法: 平皿 焦性没 食子 酸法
3 、生 物耗氧 法