Hematoxilina

de Harris
 HEMATOXILINA DE HARRIS
Es la Hematoxilina mas utilizada en la coloración
rutinaria de los núcleos celulares, debido a:
a) Su estabilidad (se conserva entre 6 y
12 meses) b) Su facilidad de manejo.

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NUCLEO

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. Hemateina .
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 HEMATOXILINA DE HARRIS
Es una “Coloración Regresiva”:
Regresiva Primero se
sobrecolorea.
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 HEMATOXILINA DE HARRIS
Luego se retira el exceso de colorante por
“Diferenciación”
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 HEMATOXILINA DE HARRIS
PROCEDIMIENTO TECNICO
Hematoxilina ( cristalizada ) 1 gr
Etanol absoluto 10 mL

Disolver calentando suavemente

Alumbre Potasico o Amonico 20 gr
Agua destilada 200 mL

Disolver en caliente. Añadir la solución de

Hematoxilina y llevar a ebullición. Cuando
comienza a hervir se añade:
Oxido Rojo de Mercurio 0,5 gr
 OXIDACIÓN DE LA HEMATOXILINA DE
HARRIS
Hay que tener en cuenta el tipo de “Disolvente” en
que se encuentra la solución de Hematina.
Las soluciones de Hematina acuosas y de
carácter Básico
H2O se sobreoxidan
H2O y aceleran la H2O
AGUA

oxidación.
Hemateina Hemateina Hemateina
ALCOHOL

OH
Las soluciones de Hematina OH
alcohólicas y de OH
carácter Ácido poseen mayor duración y retardan la
oxidación.
Hemateina Hemateina Hemateina
 HEMATOXILINA DE HARRIS
PROCEDIMIENTO TECNICO
Hematoxilina ( cristalizada ) 1 gr
Etanol absoluto 10 mL

Disolver calentando suavemente

Alumbre Potasico o Amonico 20 gr
Agua destilada 200 mL

Disolver en caliente. Añadir la solución de

Hematoxilina y llevar a ebullición. Cuando
comienza a hervir se añade:
Oxido Rojo de Mercurio 0,5 gr
 HEMATOXILINA DE HARRIS
Tras la oxidación de la Hematoxilina se debe
incrementar su capacidad tintorial agregándole
determinados Grupos Auxocromos que, además
le confieren un carácter fuertemente Básico y son
los responsables de su especificidad por los
núcleos celulares. El más utilizado: Alumbre de
Potasio
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NUCLEO

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. ⊕ .Hemateina Hemateina

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 HEMATOXILINA DE HARRIS
PROCEDIMIENTO TECNICO
Hematoxilina ( cristalizada ) 1 gr
Etanol absoluto 10 mL

Disolver calentando suavemente

Alumbre Potasico o Amonico 20 gr
Agua destilada 200 mL

Disolver en caliente. Añadir la solución de

Hematoxilina y llevar a ebullición. Cuando
comienza a hervir se añade:
Oxido Rojo de Mercurio 0,5 gr
 OXIDACIÓN DE LA HEMATOXILINA DE
HARRIS
Este proceso oxidativa que puede ocurrir
naturalmente en contacto con el Oxígeno
Atmosférico a lo largo de 4 a 6 semanas, o ser
inducido de forma artificial a través del empleo de
agentes químicos de carácter oxidante. El más
utilizado: Oxido Rojo de Mercurio

-OH
+ =
O2 O

Hematoxilina Hemateina
 HEMATOXILINA DE HARRIS
PROCEDIMIENTO TECNICO
Dejar disolver el oxido removiendo lentamente
hasta que la solución adquiera color púrpura.
Sumergir inmediatamente en agua fría. Cuando la
solución se haya enfriado, filtrar y añadir.
Ácido Acético Glacial 10 mL

Observaciones
Filtrar de nuevo antes de usarla. Almacenar en frasco opaco
bien cerrado. Tiempo medio de tinción entre 1 y 2 minutos.
 OXIDACIÓN DE LA HEMATOXILINA DE
HARRIS
Hay que tener en cuenta el tipo de “Disolvente” en
que se encuentra la solución de Hematina.
Las soluciones de Hematina acuosas y de
carácter Básico
H2O se sobreoxidan
H2O y aceleran la H2O
AGUA

oxidación.
Hemateina Hemateina Hemateina
ALCOHOL

OH
Las soluciones de Hematina OH
alcohólicas y de OH
carácter Ácido poseen mayor duración y retardan la
oxidación.
Hemateina Hemateina Hemateina