Técnicas de biología molecular

aplicadas a medicina

Alumnas:
Mosquera Villanueva, Carolina

Nolazco Córdova, Sadith

 Fue diseñada por el Dr. Kary
Mullis en 1987.

 Ganó el premio Nóbel de

Química en 1993 por su
invento.

 Utilizo el PCR para

amplificación del gen de -
hemoglobina humana, y el
diagnostico prenatal de
anemia falciforme.
 Reactivos necesarios para PCR:

 Cebadores “primers”: Son secuencias cortas de

nucleótidos 20-24 nucleótidos de longitud,
complementarias a una región del DNA que se quiere
amplificar.

 DNA molde: El DNA a amplificar puede tener desde 50

a 2,000 nucleótidos de longitud.

 Polimerasa: Generalmente se usa 2 unidades por

reacción.
 Polimerasa

•En un principio, la polimerasa de DNA que

se utilizaba era de la bacteria E. coli, pero
esta es sensitiva a alta temperatura, por lo
que había que añadir enzima fresca al
comenzar el tercer ciclo.

•Se reemplazo la enzima por la de la

bacteria “Thermus aquaticus” conocida
como Taq pol
 El proceso de “PCR” incluye 3 pasos
básicos que se repiten 25 veces o más:

1. Desnaturalización
2. Apareamiento
3. Polimerización o Extensión.
En el PCR hay una amplificación
exponencial
Utilidad del PCR
 Utilidad del PCR
 Detección de mutaciones.
 Diagnóstico prenatal.
 Secuenciación de ADNs fósiles.
 Identificación de especies y control de
cruzas entre animales.
 Proyecto Genoma Humano.
 Ventajas del “PCR”
 A partir de una muestra pequeña de ADN se puede
obtener una cantidad considerable para el estudio que
se vaya a realizar.
 El producto se puede utilizar para clonar, secuenciar y
análisis.
 Se puede amplificar ADN de cualquier organismo vivo o
muerto.
 Sus aplicaciones son múltiples: medicina forense,
diagnósticos, análisis prenatales, etc.
 Desventajas del “PCR”

 Se puede reproducir solamente partes del genoma en donde se

conoce por lo menos una mínima secuencia de 20 – 40 pb.
 Se necesitan “primers” específicos que sean complementarios
al fragmento que se desea sintetizar.
 La polimerización puede tener errores al sintetizar el ADN
 Puede contaminarse con otro ADN (puede ser del mismo
investigador o de cualquier otro)