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FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE BIOLOGÍA
CATEDRA DE ANÁLISIS BIOLÓGICOS I
SISTEMA URINARIO
PRUEBAS ALTERNATIVAS EN EXAMEN GENERAL DE ORINA
1. Introducción
El examen completo de orina (ECO) es una prueba de gran importancia para el clínico y para el
paciente mismo, sin embargo esta área, al igual que la del coprológico, son vistas con cierto recelo, esto se
debe al tipo de muestra que en ellas se analizan. Para algunos químicos, no pasa de ser una simple rutina
engorrosa, donde lo único que se puede realizar es la lectura de tiras y la vista al microscopio, pero el
urianálisis es algo más que la simple impregnación de la tira y la observación del sedimento, es la aplicación
de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestros recursos dentro del laboratorio para
proporcionar al médico y al paciente resultados de y con calidad.
2. Fisiología renal
Los riñones son órganos tubulares que miden aproximadamente 12 cm. de longitud, se continúa con
los uréteres, vejiga y uretra. La vejiga es un músculo hueco que conforme llega la orina se distienden los
pliegues internos; existe una válvula que evita el regreso de la orina de la vejiga hacia los uréteres y el
aumento de bacterias. Cuando la vejiga se llena de orina se produce un estímulo nervioso local que a su vez
estimula a los nervios centrales del cerebro, los que permiten que la micción se realice desde la vejiga a la
uretra y de la uretra al exterior.
La unidad anatómica y funcional del riñón es el nefrón, el conjunto de nefrones constituye el riñón;
cada nefrón mide entre 4 y 5 mm. de longitud y consta de dos partes: túbulo renal y glomérulo o
corpúsculo renal.
• Formación de la orina
• Regulación del equilibrio hídrico o hidroelectrolítico
• Regulación del equilibrio ácido-base (pH)
• Excreción de los productos de desecho del metabolismo proteico (urea, creatinina) y de sustancias
extrañas del organismo (metabolitos de drogas y medicamentos)
• Función hormonal
• Regula el equilibrio osmótico o iónico del plasma sanguíneo
3. Formación de la orina
4. Pruebas Funcionales
Existen pruebas funcionales que se aplican para determinar:
a) Existencia de enfermedad renal: pruebas de concentración, determinación de proteínas,
urea, creatinina, etc.
b) Grado de trastorno o deterioro renal: prueba de excreción de colorantes, depuración de
inulina, etc.
URIANALISIS
El urianálisis comprende el examen físico, químico y microscópico de una muestra de orina. Antes
de realizar un análisis de orina, es necesario tomar la muestra en forma adecuada; para esto se debe
tener en cuenta algunas normas elementales:
a) Para exámenes de rutina: Se colectará orina durante la noche desde las 10:00 p.m. hasta las 7:00
a.m. del día siguiente. Esta orina estará en condiciones óptimas en lo que se refiere a concentración y
elementos formes.
b) Para exámenes bacteriológicos: Es indispensable realizar una higiene rigurosa de las zonas
próximas al meato urinario (de preferencia todos los genitales externos) y luego colectar la muestra de
la siguiente forma:
• Desechar la primera porción de orina
• Colectar el resto de la orina en un recipiente estéril
La utilización de catéter o sonda vesical no es recomendable por el posible riesgo de infección o
contaminación con microorganismos
c) Para pruebas de función renal: En este caso se siguen las indicaciones del médico o las que
especifica cada técnica.
d) Para examen microscópico de sedimento: Se colectará la orina de la primera micción de la
mañana; no debe agregarse conservadores o preservantes. El desarrollo de bacterias durante la
noche en la vejiga urinaria es importante para el diagnóstico de infección de las vías urinarias. Se
recomienda que el paciente indique si está siendo sometido a algún tratamiento medicamentoso.
Como se había mencionado al principio, el análisis de orina comprende examen físico, microscópico y
químico.
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En las muestras de orina neutra o alcalinas los fosfatos precipitan provocando turbiedad y un
sedimento blanco que desaparece por acción de los ácidos. El pus se asemeja a los fosfatos, pero
éste se distingue por su naturaleza microscópica, porque no es soluble en ácidos y porque con
NaOH forma una masa gelatinosa.
1.2 La CANTIDAD de orina que se elimina, depende de algunos factores como la edad, volumen
de líquido ingerido, tipo de dieta, ingesta de fármacos, etc. En una persona normal adulta oscila
alrededor de los 18,5 ml/Kg. Es necesario definir algunos términos relacionados con la cantidad de
orina excretada por un paciente:
• DIURESIS.- Se refiere a la eliminación normal de orina
• ANURIA.- Ausencia de excreción urinaria; se presenta en síndrome de isquemia renal y en
obstrucción mecánica de las vías urinarias. Existe dos tipos de anuria: Post-renal: ocasionada por
obstrucción de las vías urinarias y Pre-renal: que se produce como consecuencia de disminución
de la presión sanguínea necesaria para mantener una adecuada filtración glomerular.
• ENURESIS.- Es la emisión involuntaria de la orina. La enuresis nocturna casi siempre es de
origen neurótico.
• OLIGURIA.- Secreción deficiente de orina en relación con la ingestión de líquidos; también se le
llama hipouresis. Se presenta en casos de: ingestión insuficiente de líquidos; después de ejercicios
violentos con transpiración profusa; intoxicaciones; enfermedad renal crónica y glomérulonefritis
aguda. En estados de insuficiencia cardiaca se observa oliguria ortostática, caracterizada por la
escasa eliminación de orina mientras el paciente está levantado y por su aumento al doble o al
triple al acostarse.
• POLIURIA.- Eliminación de grandes cantidades de orina normal. Se presenta en los siguientes
casos: excesiva ingestión de líquidos; por frío (disminuye la evaporación cutánea); en trastornos
psíquicos; alcoholismo; diabetes mellitus y enfermedades febriles.
• OPSIURIA.- Eliminación más abundante de orina durante el ayuno que durante la digestión. Se
observa opsiuria en la hipertensión portal.
• POLAQUIURIA.- Micciones muy frecuentes aunque no necesariamente abundantes. Se
presenta en cistitis y prostatitis.
1.3 El COLOR de la orina normal va del amarillo al ámbar; se debe a la presencia de pigmentos
como el urocromo, urobilina, uroeritrina, coproporfirina, etc. La coloración de la orina varía según
su concentración y volumen; así por ejemplo, la orina diluida es de color amarillo pálido y la orina
concentrada es de color amarillo ámbar intenso. Las orinas ácidas son más concentradas que las
alcalinas.
1.4 El OLOR de la orina normal es característico, varía según la densidad y el régimen alimenticio.
Cuando la muestra se deja en reposo sin refrigeración, la urea se descompone y se desprende un
olor amoniacal. En algunos casos patológicos como la diabetes mellitus, la orina tiene un olor
característico a frutas; esto se debe a la formación de cuerpos cetónicos. Cuando la muestra
tomada recientemente tiene un olor pútrido o amoniacal puede deberse a uropatías obstructivas,
cistitis crónica o infección del tracto urinario causada por microorganismos del grupo de las
enterobacterias.
1.5 El pH de la orina normal es ligeramente ácido, alrededor de 6,0 pero puede variar de 4,5 a 8,2
de acuerdo a la dieta alimenticia; así, cuando es a base de carne, el pH disminuye y la orina es
ácida, pero si la dieta es principalmente vegetariana, el pH aumenta y la orina se vuelve alcalina.
Para determinar el pH de la orina se utiliza papel indicador universal, el que después de
humedecerlo con la muestra va a tomar un determinado color que se compara con el de la escala
patrón de colores. También se utilizan tiras reactivas impregnadas con rojo de metilo y azul de
bromotimol, que dan un margen de pH de 5 a 9, con una serie de colores que van del anaranjado
al amarillo y del verde al azul.
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1.7 El SEDIMENTO es escaso o nulo en orinas normales recién emitidas, pero no en orinas
patológicas. Se reporta como muy escaso, regular, abundante o muy abundante.
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observan en sedimentos de orina de pacientes con insuficiencia renal crónica grave, hipertensión,
nefropatía diabética.
• Cilindros granulares: son cilindros hialinos con granulaciones finas o gruesas, son más cortos,
gruesos y opacos que los hialinos. Se observan en nefritis aguda, crónica e intersticial.
• Cilindros epiteliales o de célula epitelial: se forman como consecuencia de la estasis urinaria y de
la descamación de células del epitelio tubular. Se presentan en nefritis degenerativa o tubular.
• Cilindros hemáticos: constituyen un signo de pérdida de sangre intrarrenal. Se observan en
glomérulonefritis aguda y nefritis lúpica. Pueden tener color castaño o ser casi incoloros.
• Cilindroides: son estructuras que se asemejan a los cilindros, pero uno de sus extremos remata en
punta como una hebra.
d) Leucocitos: normalmente se observan escasos, de 4 a 5/campo. Cuando está aumentado el número
de leucocitos se sospecha de un proceso patológico del sistema urinario. Dentro de éstos se
encuentran los piocitos (leucocitos degenerados) que cuando se agrupan forman glóbulos de pus:
PIURIA. Los leucocitos se observan en uretritis y cistitis.
e) Eritrocitos: normalmente no deben encontrarse y cuando se presentan, se sospecha de una
patología renal.
f) Levaduras y bacterias: normalmente no existen bacterias, pero la orina puede contaminarse con
bacterias presentes en la uretra, vagina o de fuentes externas. Es posible encontrar hongos en
infecciones del tracto urinario y también por contaminación cutánea o vaginal.
g) Cuerpos extraños: una variedad de objetos extraños pueden entrar en la muestra de orina durante la
recolección, al transportarla, mientras se realiza el estudio o estando sobre el porta-objetos.
Dentro de las pruebas que se emplean para determinar proteínas en orina se encuentran las siguientes:
a) Prueba del calor y del ácido acético:
Fundamento: formación de un precipitado nebuloso por acidificación de la orina con ácido acético al
30% y posterior calentamiento.
b) Prueba del ácido sulfosalicílico:
Fundamento: formación de un precipitado nebuloso en la interfase. Se utiliza una solución de ácido
sulfosalicílico al 10% en alcohol metílico al 50%.
c) Método colorimétrico: Es una prueba cuantitativa.
Fundamento: Las proteínas son precipitadas por el ácido sulfosalicílico y el grado de turbidez
producido se mide en el fotocolorímetro. Esta turbidez es directamente proporcional a la cantidad de
proteína.
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grandes cantidades de galactosa en la galactosuria hereditaria familiar. La glucosa puede reconocerse por
análisis enzimático, químico o cromatográfico. La glucosuria eleva la densidad de la orina.
a) Análisis enzimático:
Fundamento: La glucosa oxidasa cataliza la oxidación de la glucosa, formándose ácido glucónico y
peróxido de hidrógeno. Una peroxidasa transfiere el O2 del H2O2 a un receptor de O2 como la orto-
toluidina apareciendo un color azul. Se emplean tiras reactivas impregnadas de enzimas e
indicadores.
b) Análisis cuantitativo:
Fundamento: En solución alcalina caliente la glucosa reduce al ácido dinitrosalicílico a ácido 3–
amino–nitrosalicílico de color anaranjado a rojo. La D.O. es directamente proporcional a la cantidad del
compuesto reducido y a la cantidad de glucosa presente en la muestra.
c) Prueba de la Osazona: La osazona es un compuesto obtenido por calentamiento de un azúcar con
fenilhidrazina y ácido acético.
Fundamento: Las sustancias que poseen un grupo carbonilo, como las aldosas y las cetosas,
reaccionan con la fenilhidrazina para formar fenilhidrazona, formándose cristales de osazona
característicos.
a) Método de la Bencidina:
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Fundamento: La actividad de las peroxidasas de la sangre descompone el peróxido de hidrógeno y
el oxígeno liberado oxida a la bencidina apareciendo una coloración azul.
b) Método de las tiras reactivas:
Fundamento: Esta prueba se basa en la actividad de la hemoglobina similar a la de la peroxidasa. El
color resultante varía del anaranjado al verde y azul oscuro.
c) Prueba de precipitación por sales: (de Blondheim y Col.)
Fundamento: Si existe hemoglobina se forma un precipitado por acción del sulfato de amonio, el cual
es retenido en una tira de papel de filtro, formándose un color pardo rojizo.
7. ACIDO URICO.- La excreción normal de ácido úrico depende mucho del régimen
alimenticio. Disminuye antes de un ataque de gota y luego aumenta; también se encuentra elevado en
ciertas enfermedades renales crónicas, anemia, leucemia, reumatismo, cuadros febriles agudos, etc.
La gonadotropina coriónica humana (HCG ó GCH) es una hormona producida en gran cantidad
por el trofoblasto placentario, durante el embarazo; consta de dos subunidades; es una glucoproteína que
contiene muchos carbohidratos. Esta hormona alcanza su máxima concentración (hasta 20,000 UI/L)
alrededor de la 8va. semana del embarazo, después desciende rápidamente (hasta 5,000 UI/L), por lo que su
determinación constituye la base de los diferentes tests de embarazo. Aumenta también, aparte del
embarazo, la eliminación de esta hormona en la mola hidatiforme y en el corioepitelioma (con cifras enormes).
Los quistes luteínicos dan aumentos menores. En el varón, en ciertos teratomas y en tumores malignos
testiculares. Disminuye en casos de peligro de aborto o el aumento es muy lento. En el embarazo ectópico,
después de un ascenso, la HCG permanece en valores meseta, o curva plana. Actualmente se tiende a
preferir los métodos inmunológicos, en lugar de los biológicos.
PRUEBAS BIOLÓGICAS.-
a) Prueba de Galli Mainini:
Fundamento: La inyección de orina o suero que contenga HCG, en el saco linfático de un sapo (macho)
produce la emisión de espermatozoides en 2 – 4 horas.
c) Prueba de Hogben.
Fundamento: La inyección en el saco linfático de un sapo hembra, de un extracto de orina que contenga
HCG produce ovulación en un plazo de 24 horas.
d) Prueba de Kupperman:
Fundamento: La inyección intraperitoneal de orina que contenga HCG produce hiperemia ovárica en la
rata hembra de 3 a 6 semanas de edad, en un periodo de 2 – 24 horas.
e) Prueba de Friedman:
Fundamento: La inyección intravenosa de orina que contenga HCG produce ovulación en una coneja
virgen en 12 – 24 horas.
PRUEBAS INMUNOLOGICAS.-
a) FECUNTEST: (Prueba de inhibición de aglutinación en placa)
Fundamento: La muestra de orina se pone en contacto con suero de conejo anti HCG y partículas de
látex que tienen adsorbidas moléculas de HCG en su superficie. La presencia de HCG en orina de
mujeres embarazadas reacciona con el antisuero e inhibe la aglutinación de las partículas de látex,
observándose una suspensión homogénea.
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Fundamento: Emplea el mismo sistema de ag – ac. como en la prueba anterior; es decir:
(+) No aglutina
(–) Si aglutina
c) El BLUETEST: es una prueba de embarazo, capaz de detectar la presencia de HCG con una
sensibilidad del orden de 50 UI/L. La respuesta se obtiene en un tiempo de 20 – 30 min., el análisis se
efectúa en suero u orina. Pueden obtenerse diagnósticos positivos hasta 3 días antes de la presunta
aparición de la regla.
La bacteriuria puede ser por simple eliminación renal de gérmenes en las septicemias, o corresponde
una infección local del riñón o de las vías urinarias. Hay que evitar el error de contaminación externa de la
orina, por lo que debe ser examinada poco después de ser emitida; asimismo, en las infecciones urinarias se
pueden detectar levaduras que pueden ser confundidas con hematíes, aunque su caracterización es fácil
debido al fenómeno de gemación. También pueden observarse algunos parásitos en el sedimento urinario
que por lo general se debe a contaminación fecal o vaginal; sin embargo, cuando se identifica algún
microorganismo se debe efectuar el urocultivo y antibiograma correspondiente.
El análisis microbiológico de orina se realiza mediante el examen de sedimento aplicando las siguientes
pruebas:
a) Tinción Gram.- Se emplea 1 gota de orina sin centrifugar, se fija al calor y se procede a la coloración.
El hallazgo de 2 bacterias/campo indica bacteriuria significativa; menos de 2 bacterias/campo constituye
un hallazgo límite y ninguna bacteria/campo es negativo. Los microorganismos más frecuentes son los
bacilos, generalmente enterobacterias.
c) Tinción ácido resistente.- Se emplea sedimento urinario para demostrar bacilos tuberculosos; éstos
se confirman por cultivo en medio Löwenstein – Jensen (coloración Ziehl – Nielsen).
PRUEBAS QUÍMICAS PARA DETECTAR BACTERIURUA.- El hallazgo de una bacteriuria, no significa que
se trate de una infección urinaria; en la actualidad se tiende a enjuiciar su valor clínico mediante el cultivo
cuantitativo de la orina sospechosa.
Se ha llegado a la conclusión de que, si el cultivo arroja una cifra de bacterias inferior a 10,000/ml., la
infección urinaria no es probable; entre 10,000 y 100,000/ml. es probable, y por encima de 100,000 la
infección es prácticamente segura si estas cifras se repiten en dos cultivos consecutivos. El hallazgo de más
de dos especies bacterianas es sospechoso de contaminación artificial.
a) Reacción del nitrito.- Consiste en la detección de nitritos en la orina por una prueba cualitativa
colorimétrica. Los nitritos indican que existen bacterias que los liberan, por reducción de los nitratos,
principalmente E. coli y en menor grado Proteus, Salmonelas o B. lactis aerogenes. El
inconveniente de este método es que el Streptococcus viridans y el enterococo no reducen los nitratos
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a nitritos. La positividad de este prueba favorece el diagnóstico de infección urinaria, pero su negatividad
no lo excluye.
b) Prueba del cloruro de trifeniltetrazolio (TTZ).- Es también un test colorimétrico; la presencia de
bacterias aerobias en la orina añadida al reactivo lo reducen a trifenilformazán, pasando de incoloro a un
precipitado rojo. Algunos gérmenes como estreptococos, estafilococos, neumococos y algunas cepas de
Proteus y Pseudomonas no reducen el TTZ.
c) Prueba asociada.- Consiste en realizar sucesivamente y en la misma muestra de orina y tubo de
ensayo las dos pruebas: reducción del TTZ y de los nitritos. Los gérmenes no detectados por una los
son por la otra; así, la prueba asociada sería un medio muy exacto de diagnóstico de una bacteriuria.
d) Detección del ATP bacteriano.- Mediante una técnica de bioluminiscencia se puede cuantificar
indirectamente la bacteriuria. Es significativa de infección una lectura en el contador de fotones ≥ 500
unidades luz relativas (ulr). Es un método rápido.
e) Determinación de catalasa en orina o de deshidrogenasa.- Su positividad indica infección urinaria,
por reducción del tetrazol.
Frecuentemente se observa Trichomona vaginalis tanto en mujeres como en hombres; raras veces se
pueden ver trofozoitos de Entamoeba hystolitica como consecuencia de úlceras amebianas en los
genitales.
No es muy común observar parásitos en un examen directo de orina; cuando éstos son detectados se
recomienda repetir el estudio utilizando una nueva muestra de orina recogida con mucho cuidado para evitar
la contaminación.
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